CN107413397A - 十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，属于分析测试领域。PDMS即聚二甲基硅氧烷如用来制作普适型十余种肿瘤标志物联合检测用微流控芯片的基片，具有明显优势，但也存在若干需要克服的难题。本案要点是，基片选定具有原生态表面的PDMS，并将其夹持臂上附设有微型超声波换能器的弹力夹以弹力咬合定位在该芯片其终端位置，以超声波诱导试样液流由该芯片其进样端沿该芯片其管道向该终端方向流动，该芯片其管道内填满微米级二氧化硅颗粒填充物，该填充物其功能包括支撑管道内壁，以及，用亲水性微流道的集合来代偿原本疏水的管道，以及，挤压、遮盖管道内壁面藉此减少生物大分子与该内壁面接触的机会。

Description

十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置

技术领域

本发明涉及一种十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，属于分析测试领域。

背景技术

肿瘤标志物(tumor marker，TM)是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶(同工酶)及癌基因产物等。化验患者血液或体液中的肿瘤标志物，可在肿瘤普查中早期发现肿瘤，并观察肿瘤治疗的疗效以及判断患者预后。目前临床上常用的肿瘤标志物有：(1)甲胎蛋白(AFP)为原发性肝癌、睾丸癌、卵巢癌等肿瘤的标志物；(2)癌胚抗原(CEA)为消化系统肿瘤、肺癌、乳腺癌等肿瘤的标志物；(3)糖类抗原125(CA125)为卵巢癌等肿瘤的标志物；(4)糖类抗原153(CA153)为乳腺癌等肿瘤的标志物；(5)糖类抗原19-9(CA19-9)为消化系统肿瘤的标志物；(6)糖类抗原724(CA724)为胃癌、卵巢癌等肿瘤的标志物；(7)糖类抗原242(CA242)为消化系统肿瘤的标志物；(8)糖类抗原50(CA50)为消化系统肿瘤、乳癌、肺癌等肿瘤的标志物；(9)CYFRA21-1(Cy211)为非小细胞肺癌等肿瘤的标志物；(10)神经元特异性烯醇化酶(NSE)为小细胞肺癌、神经内分泌肿瘤等肿瘤的标志物；(11)前列腺特异性抗原(PSA)为前列腺癌的肿瘤标志物；(12)人绒毛膜促性腺激素(HCG)为胚胎细胞癌、滋养层肿瘤(绒癌、葡萄胎)等肿瘤的标志物；(13)甲状腺球蛋白(TG)为甲状腺癌的标志物；(14)铁蛋白(SF)为消化系统肿瘤、肝癌、乳腺癌、肺癌等肿瘤的标志物；(15)β2-微球蛋白(β2-MG)在慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、肺癌、甲状腺癌、鼻咽癌等患者体液中升高；(16)鳞状细胞抗原(SCC)为宫颈癌、肺鳞癌、食管癌等肿瘤标志物。目前临床上检测的肿瘤标志物绝大多数不仅存在于恶性肿瘤中，也存在于良性肿瘤、胚胎组织、甚至正常组织中。因此，肿瘤标志物有动态检查和多项联合检查更有价值。那么对于众多的肿瘤标志物，临床上如何选择呢？不同的肿瘤会一些相对特异的肿瘤标志物，如CA153常出现在乳腺癌；CEA常出现在肠癌、胃癌；CA19-9常出现在肠癌、胰腺癌；CA125常出现在卵巢癌等等。临床医生会根据不同的肿瘤检查不同的标志物。同一种肿瘤或不同类型的肿瘤可有一种或几种肿瘤标志物异常；同一种肿瘤标志物可在不同的肿瘤中出现。为提高肿瘤标志物的辅助诊断价值和确定何种标志物可作为治疗后的随访监测指标，可进行肿瘤标志物联合检测，合理选择几项灵敏度、特异性能互补的肿瘤标志物组成最佳组合，进行联合检测。一般来说肿瘤标志物的联合检测可提高对肿瘤诊断的正确率。

仅就多种肿瘤标志物其联合检测的相关技术背景其本身的概貌或总览而言，可以参见以下中国发明专利申请案：CN200410041175.3、CN200510026780.8、CN200610040051.2、CN200910064647.X。

仅就微流控芯片技术其本身的整体概貌而言，可以参见著名微流控专家林炳承先生不久前出的专著“图解微流控芯片实验室”，该专著已经由科学出版社出版，该专著对于微流控技术的过去、现在，以及，未来展望等等方面，都有着详尽的、深入到具体细节的长篇论述。

那么，下面要谈谈本案特别关注的焦点问题。

微流控芯片的基本架构，包括刻蚀有槽道的基片以及与之贴合在一起的盖片，所述基片上的液流通道，在装配上盖片之前，表观上看就是一些槽道，要等到在其上覆盖了盖片之后，才真正闭合形成所述液流通道，该槽道的槽道内表面连同包绕着该槽道的那部分盖片一起构成所述的液流通道；那么，显然，装配完成了之后的该液流通道，它的内表面面积的主要部分是那个槽道的内表面面积，换句话说，该槽道内表面的状态或性质基本上决定了该液流通道的整体状态或性质；因此说，这个构建在基片上的槽道的内表面状态或内表面性质是关键因素；原则上讲，任何的能够保持或基本保持其固体形态的材料，都能够用来制作基片及盖片，比如，能够用作基片及盖片的材料可以是单晶硅片、石英片、玻璃片、高聚物如聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯等等；当然，基片的选材和盖片的选材可以相同，也可以不相同；从材料耗费、制作难度以及应用普及前景等等方面来看，这些材料之间存在不小差异，尤其是那个基片的选材，影响较大。

在各种基片制作材料中，聚二甲基硅氧烷，即PDMS，相对而言十分容易成型，在这样的基片上制作槽道极其简单，并且该材料成本低廉，以该聚二甲基硅氧烷材料制作基片，在其上压制或刻蚀槽道，并与玻璃或聚丙烯或其它塑料片等廉价材料制作的盖片相配合，貌似是一种比较理想的选择；当然，盖片材料也可以选择使用廉价的聚二甲基硅氧烷材料：那么，这种基片选材为聚二甲基硅氧烷材料的方案，材料极便宜，制作极简易，看似也应当极易于普及、推广。

但是，事情并非如此简单。

其一，这个聚二甲基硅氧烷材料，即缩写字母PDMS所指代的材料，其本身是一种强烈疏水的材料，在这一材料上构建槽道，如果不进行针对该槽道表面的改性操作，那么，整体装配完成之后，即盖上盖片后，因结构中的所述槽道其内表面占据了大部分的液流通道的内表面，那么，该PDMS槽道内表面其强烈的疏水特性，是决定性因素，它会使得类似于水溶液的极性液体微细液流的通过变得十分困难，其流动阻力之大，甚至一般的微泵都难以推动，当然，如果盖片也选择使用该PDMS材料，那么，问题基本上一样，大同小异；因此，在现有技术之中，特别针对该PDMS材料上的槽道内表面进行改性修饰，是必须的操作；那么，这个针对PDMS槽道内表面的改性操作很麻烦吗？那倒也不是这个问题，构成严重技术困扰的，是另一个问题：这个PDMS材料基片其体相内部的PDMS聚合物分子具有自动向表面扩散、迁移的特性，这种基片体相内部PDMS聚合物分子自动向表面扩散、迁移的特性，将使得经过表面改性修饰的那个槽道其内表面的改性之后的状态并不能维持足够长的时间，那个经表面改性之后的槽道其内表面状态的维持时间大致仅够完成实验室内部测试实验的时间需要；换句话说，经过表面改性或表面修饰的该PDMS槽道内表面，其改性之后或曰修饰之后所形成的表面状态并不能持久，而是很快地自动趋于或曰变回表面改性之前的表面状态，在较短的时间里就回到那种原本的强烈疏水的表面状态，那么，试想，这样的微流控芯片能够大量制作、大量储存、广泛推广吗，答案很明显，那就是，不可能。这个PDMS材料上的槽道，不做表面修饰的话，类似于水溶液的极性溶液微细液流无法泵送通过，芯片也就没法使用；而如果做了表面修饰，又无法持久保持其修饰之后的状态，还是同样无法推广应用。

据文献报道，有一种权宜的解决方案，是在待测试样溶液中加入少量的表面活性剂，以便在测试的过程中，在该PDMS槽道内表面临时构建动态的、暂时有效的表面亲水层；然而，由于表面活性剂的两亲性质，该方案所引入的表面活性剂必然同时也会与试样溶液中的被测成分发生结合作用，使得被测成分不能够被正常检出或其被检出比率可疑地降低；该表面活性剂甚至可能以胶束形式将被测成分完全包裹，使得被测成分无法被检出或识别；因此，该种向试样溶液中添加表面活性剂的方案，远不是一个理想的解决方案。

那么，如何做到既能够利用廉价的PDMS材料来制作基片，而又能够解除所述槽道内表面修饰状态无法持久、芯片无法大量制作、大量储备进而广泛推广这样一个令本领域众多专业人员长期纠结的困扰，就是一个明摆着的其技术障碍不可小觑的高难度问题。

该高难度问题已经存在很多个年头了，迄今为止，尚未得到妥善解决。

其二，未经表面修饰的PDMS材料，上文已经述及，其表面强烈疏水，这种强烈疏水的材料表面并且还有另一个问题，那就是，这种强烈疏水的PDMS表面会吸附生物大分子，并且，这些被吸附的生物大分子还会进一步地在PDMS表面上更深一步的沉陷，渐陷渐深，直至沉陷入到PDMS基片的体相之内，其实，这种过程，部分地也是由于PDMS材料体相内部聚合物分子具有向表面扩散、迁移运动所导致；这种情况，也可以从另一个角度来解释，即，持续不断地由PDMS体相内部向其表面扩散、迁移的那些聚合物分子，其运动的结果，是逐渐地将那些已经被表面吸附的生物大分子卷入PDMS基片的体相之内，简单地说，这些被吸附的生物大分子就是被PDMS基片体相吞没了；那么，这种PDMS基片体相吞没生物大分子的现象，其所造成的影响，必然是导致涉及生物大分子的各类实验测试数据的严重偏差。

如上所述，PDMS基片的问题是，它不但表面吸附生物大分子，而且吞没生物大分子，这样一来，作为实验测试对象的生物大分子其消失不会因为表面饱和吸附而停止，而是，不断被吸附，还不断地被吞没。

关于PDMS基片在相关实验测试过程中其体相不断吞没测试相关生物大分子的现象，另一种解释是说，PDMS体相内存在大量的微小气孔，相关生物大分子被表面吸附之后，沉陷进入这些微小气孔，进而被吞没；然而，本案发明人认为，那些能够容许微小尺度的空气分子挤入其间的所述微小气孔，不等于说它们也能直接容许相对大尺度的生物大分子进入，两者在尺度上差别巨大，不可一概而论。撇开解释，无论怎样，作为相关测试分析对象的生物大分子被PDMS基片槽道内表面吸附，进而不断被PDMS基片体相所吞没，这是已知客观存在的现象。

为了阻止这种PDMS基片体相对于生物大分子的吞没作用，可以从遏制PDMS表面对生物大分子的吸附来着手解决，办法就是针对该PDMS材料表面进行化学修饰改性，对于以PDMS为基片材料的情况来讲，就是对所述的槽道部分的表面进行化学修饰改性，经过化学修饰改性的所述槽道内表面，能够遏制其对生物大分子的吸附，进而避免生物大分子被PDMS基片体相所吞没；但是，还是那个老问题，那就是，PDMS材料表面上的化学修饰改性之后的表面状态无法持久保持，该PDMS基片体相内部的聚合物分子其自动向表面扩散、迁移的过程，会很快地将那个经过表面化学修饰改性的槽道内表面状态变回原本的强烈疏水并且强烈吸附生物大分子的状态，换句话说，无论该领域专业人员们怎样折腾，该PDMS基片其槽道内表面总是快速地向强烈疏水表面状态演变。

那么，如何既能够获得PDMS材料价格极其低廉、基片制作极其简易的好处，又能够达成长期遏制该PDMS基片槽道内表面对生物大分子的吸附进程，进而阻止PDMS基片体相对生物大分子的吞没作用，使得相关芯片制成品能够维持一个足够长时间的、合理的保质期，就是一个十分棘手的难题。该难题如同上文述及的另一个难题一样，同样令本领域众多专业人员长期纠结、困扰，该难题同样是一个明摆着的其技术障碍不可小觑的高难度问题。该难题也已经存在很多个年头了，迄今为止，也尚未得到妥善解决。

其三，该聚二甲基硅氧烷材料，也即PDMS材料，其中聚合物分子间的作用力很小，其体相内部的低聚合度的聚合物分子处于不断向表面迁移的动态过程中，因此，包含PDMS基片材料的芯片在其成型后，芯片其管道内壁面的表面形貌会因所述的低聚合度聚合物分子不断地迁移、涌向该表面而改变，其形貌的改变有点类似于流变变形、流淌变形或蠕变变形所可能造成的形貌改变；在某些低聚合度成分比例比较高的PDMS材料中，该种有点类似于流变变形、流淌变形或蠕变变形的现象会表现得比较显著；该种包含PDMS基片的芯片其成型后的管道内壁表面形貌的动态改变性质，也即所述的有点类似于流变变形的性质或流淌变形的性质或蠕变变形的性质，本案套用流变一词，统合地，也称之为流变性质或流变变形性质，相应的所述管道内壁面形貌的动态改变，本案也称其为流变；如上所述，因该种材料其自身具有的一定的如上所述的流变变形性质，其制成品实际上会慢慢地流变变形而致该制成品整个结构形态发生改变；其流变变形性质所造成的影响，从宏观角度看是不易觉察的，但是，对于其内部结构十分精细的微流控芯片来说，该流变性质却会造成比较大的影响，因此，预先制作时所形成的所述液流通道也即所述管道，因所述管道其管腔的壁面主要是PDMS材质的壁面，所以，该管道的横截面面积实际上会随着时间的推移因流变而逐渐变小，换句话说，由于所述流变的原因，用于试样液体流动通过的本来就比较微细的所述管道其管腔会越变越窄，在流变时间足够长的情况下，甚至该管道的管腔会部分地闭合或全部地闭合，进而使得试样液流通道被彻底阻断，即便是还没有达到所述管道其管腔部分地闭合或全部地闭合的程度，那个管道其所能提供的流体通道已经因流变而变窄，那么，在管道其内表面原本就是强烈疏水的情况下，含水试样液体就更加难以通过这样因流变而变得更窄的微细通道了，那么，如何抵制基片流变影响，长期维持该管道的基本架构不发生严重变形，并且，保持所述管道的长期通畅，就是一个亟需解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一个一揽子的解决方案，一揽子地解决上文述及的一系列难题，并且，将该解决方案应用于构建一种新型的人群体检普遍适用的能够针对十种比较典型的主要肿瘤标志物进行同时筛查、同时检测的微流控芯片装置。

本发明通过如下方案解决所述技术问题，该方案提供的装置是一种十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，该方案要点是，该装置的结构包括多通道微流控芯片，该微流控芯片的结构包括相互贴合装设在一起的基片和盖片，所述基片和盖片均为板状物或片状物，该基片的面向该盖片的那个面含有经由模压工艺或刻蚀工艺形成的槽道结构，该基片还含有与该槽道结构相连并且洞穿该基片的经由模压工艺、刻蚀工艺或简单打孔工艺形成的窗口结构，相互贴合安装在一起的该基片与该盖片共同构建成了含有管道结构以及与之相连的液池结构的微流控芯片，该管道的结构位置位于该基片与该盖片相互贴合的界面区域，该窗口其一侧被该盖片封堵而另一侧开放，该窗口的结构位置就是所述液池的结构位置，所述液池有两种，该两种液池分别是位于不同结构位置的进样端液池以及终端液池，该微流控芯片的进样端位置有一个或一个以上的所述进样端液池，所述进样端指的是该微流控芯片实际进样时被测溶液的注入端位置，在该微流控芯片的终端位置则有一个所述终端液池，所述终端指的是该微流控芯片实际进样测试时其芯片内液体流动的终端位置，该终端与该进样端相互远离，该管道的一端与位于进样端的所述进样端液池联通，该管道的另一端与位于该微流控芯片的所述终端的所述终端液池联通，以及，顺序地或逆序地分别装设在该管道内不同位置上的工作电极以及对电极以及参比电极，所述顺序指的是所述参比电极其结构位置更靠近所述终端位置，所述逆序指的是所述参比电极结构位置更靠近所述进样端位置，所述工作电极由导电性电极以及贴附在该导电性电极上的包埋了肿瘤标志物抗体的金胶敏感膜构成，该管道的构造呈现并联构造，所述呈并联构造的管道由十五条分支管道并联构成，所述呈现并联构造的所述管道其外形轮廓近似于并联电路的轮廓，所述工作电极的数量是十五个，该十五个工作电极的装设位置分别位于所述十五条分支管道内，以及，该十五个工作电极其表层金胶敏感膜结构中的肿瘤标志物抗体分别是对肿瘤标志物抗原能特异性结合的十五种肿瘤标志物抗体物质，该十五种抗体物质分别是肿瘤标志物抗体AFP、CEA、CA242、CA125、CA199、CA153、CA724、CA50、NSE、CYFRA21-1、FPSA、TPSA、β-hCG、SCCA以及β2-MG，所述抗原是广义的抗原，所述抗体是广义的抗体，所述工作电极其材质是金属银材质、黄金材质、碳素材质或热分解导电高分子材质，所述工作电极其形貌呈现柱状、片状或丝状，该基片其材质是聚二甲基硅氧烷材质，该基片其表面是原生形态的表面，该原生形态的表面其意思指的是没有经过任何表面化学修饰或任何表面化学改性的该材质的原生形态的表面，该装置的结构还包括弹力夹，该弹力夹的两个相向的夹持臂咬合定位在该微流控芯片的邻近所述终端的位置，至少在其中的一个所述夹持臂上贴附固定装设有微型超声波换能器，以及，高频振荡电讯号传输电缆，该高频振荡电讯号传输电缆的一端与该微型超声波换能器连接在一起；该弹力夹提供了一个方便该装置拆解的功能；该微型超声波换能器其主要功能是在微流控芯片实际进样测试时，利用所述进样端以及所述终端与该微型超声波换能器装设位置之间的距离差异以及其所感受到的超声波强度上的差异，诱导形成所述进样端其界面张力与所述终端其界面张力之间的差异，该微流控芯片该两端之间的界面张力差异会在该微流控芯片的该两端之间形成压力差异，该压力差异会驱动试样溶液向所述终端流动；柔软并具弹性的该聚二甲基硅氧烷材质的基片其功能还包括以其对超声波强烈吸收的性质，对超声波进行强烈吸收，并藉此在该微流控芯片该终端到该进样端之间的有限的短距离之内实现超声波强度的快速递减；以及，许多的二氧化硅颗粒，该许多的二氧化硅颗粒填充在所述管道内，所述管道其管腔被该许多的二氧化硅颗粒所填满，该二氧化硅颗粒其粒径范围介于10微米与200微米之间，该二氧化硅颗粒是二氧化硅晶态颗粒、二氧化硅玻璃颗粒或二氧化硅成分其所占重量百分比在80％以上的无机玻璃颗粒。

该二氧化硅颗粒其粒径可以是介于10微米与200微米之间的根据实际需要而任意指定的粒径，所述粒径例如10微米、30微米、70微米、100微米、150微米或200微米，等等。

进一步优选的该二氧化硅颗粒其粒径的范围是介于100微米与200微米之间。

该二氧化硅颗粒其形貌不限，该二氧化硅颗粒例如可以是球形颗粒、棒形颗粒、长方体形颗粒或任意无定形颗粒。

各种二氧化硅颗粒其本身的制造技术是公知技术。

各种形态、各种规格的二氧化硅颗粒市场均有售。

该二氧化硅颗粒也可以向专业厂家定制。

所述管道其内径的优选范围是介于500微米与1000微米之间；但是，相较于上述优选的管道内径范围，更细小的管道内径或更粗大的管道内径也是本案所允许的。

所述肿瘤标志物抗体是广义的抗体，该广义的抗体指的是具备抗体功能或功能上类似于抗体的能够与各种相对应的临床所涉肿瘤标志物发生结合并形成免疫复合物或免疫复合物的类似物的物质；所述肿瘤标志物抗原是广义的抗原，该广义的抗原指的是能够利用相应抗体或功能上类似于抗体的物质进行酶标检测的各种临床所涉的需要鉴别、检测的肿瘤标志物。

当然也可以在两个夹持臂上都装设所述的微型超声波换能器；但是，仅装设一个微型超声波换能器已经足够应付使用了。

弹力夹一词其本身的技术含义是公知的。

所述金胶敏感膜是将壳聚糖金胶溶液与肿瘤标志物抗体溶液充分混合均匀，用点样仪点样或涂布于指定结构位置，并使其干燥成膜而成。所述金胶敏感膜中的肿瘤标志物抗体均为辣根过氧化物酶或者葡糖糖氧化酶标记的肿瘤标志物抗体，所述金胶敏感膜已包含为固定上述各肿瘤标志物抗体而引入其中的辅助性介质，所述辅助性介质例如壳聚糖、醋酸纤维素、明胶其中的一种或它们的混合物。

所述微流控芯片结构中的所述管道包括所述分支管道，其内径尺寸均可以是任意选定的尺寸，但是，出于尽量少用待测液样以及降低试剂损耗等方面的考虑，所述管道包括所述分支管道优选毛细管级的通道，所述毛细管级的通道意即其内径与通常意义上的毛细管的内径相当的通道。所述毛细管其内部通道的横截面形状可以是任意的形状，所述横截面形状例如圆形、椭圆形、方形、矩形、条形，当然也可以是任意的存在弯曲的线形，并且，所述毛细管的内部形状随着管道的延伸，不同部位的横截面形状也可以允许是不同的形状。仅就毛细管一词而言，其技术含义是公知的。

结构中涉及的对电极以及参比电极均为微小尺寸的电极，其电极形状均可以是任意选定的形状，所述任意选定的形状例如柱状、片状、条状或丝状等等。所述对电极以及所述参比电极其本身的词汇的技术含义是公知的。

本案微流控芯片结构中涉及若干个液池，所述液池是用于过渡性储液的池形或囊形构造，其中的每一个液池的内腔其形状均可以是任意选定的形状，所述内腔形状例如圆柱形空腔状、方柱形空腔状、椭圆形空腔状或球形空腔状等等。

仅就超声波换能器一词其本身的技术含义对于超声波技术领域的专业人员来说，是公知的。

各种尺寸、各种形状的超声波换能器均有市售；市售的微型超声波换能器其尺寸可以小到仅以毫米计算的量级。

仅就微型超声波换能器其在一般工业应用对象固态物体表面上的固定技术其本身而言，对于超声波技术领域的专业人员来说，是已知的一般技术。本案不对此展开赘言。

仅就裸的PDMS基片其本身的槽道模压或刻蚀技术来说，是极简单的已知的技术；同样地，在裸的PDMS基片上开孔洞的技术更是已知的简单技术。本案亦不对此展开赘言。

所涉高频振荡电讯号传输电缆其各种规格的工业产品市场均有售。

该装置的结构还可以包括高频振荡电讯号发生器；所述高频振荡电讯号传输电缆其另一端可以与该高频振荡电讯号发生器连接。

所涉高频振荡电讯号发生器其本身的技术，对于超声波技术领域的专业人员来说，是简单的和公知的；所述高频振荡电讯号发生器可以向超声波仪器专业厂家定制。

该微型超声波换能器其额定超声波发射功率的优选范围是介于5毫瓦与5000毫瓦之间；该微型超声波换能器其在运行时所发射的超声波的频率的优选范围是介于100KHz与12MHz之间。

本案装置当然还可以进一步包括一些附件，所述附件例如多道电化学工作站等等，所述多道电化学工作站的技术含义是公知的。本案微流控芯片结构中涉及的各个工作电极以及对电极以及参比电极等，可以分别经由相应的专用串线与所述多道电化学工作站的相应接口进行联接。所述专用串线是用来将各所述电极与所述多道电化学工作站的各相应接口进行相互联接的专用电缆。本案装置中的所述微流控芯片，其结构也可以包括微阀，所述微阀的数量不限，根据实际需要，所述微阀可以装设在该微流控芯片结构中的任何需要安装的部位；该微阀一词对于微流控芯片技术领域的专业人员来说，其本身的技术含义是公知的；该微阀其本身的制作技术及使用技术亦是公知的；该微阀不是必需的构件。

所述工作电极的直径可以允许是任意设定的便于安装使用的适宜的直径，但是，推荐的或曰优选的所述直径其范围介于0.1微米至2000微米之间；所述工作电极的长度可以允许是任意设定的便于安装使用的长度，但是，推荐的或曰优选的所述长度其范围是在1微米至15000微米个之间。

通过喷涂或点样仪点样或其它合适工艺涂布装设于所述工作电极表面层的所述金胶敏感膜，其膜层厚度可以允许是任意设定的可对待测样液发生电性信号响应的厚度，但是，推荐的厚度或者说是优选的厚度是介于10纳米与200纳米之间。

芯片结构中的所述盖片，其材质可以允许是任何的电绝缘性材质，例如：聚丙烯、玻璃、聚甲基丙烯酸甲酯、聚二甲基硅氧烷，等等，为了做出更小尺寸的微流控芯片，比如做成长度仅2.0厘米到3.0厘米的超小尺寸的微流控芯片，并在该极短的距离内实现对超声波的极快速衰减，可以优选聚二甲基硅氧烷来作为盖片。当然，在大尺寸的微流控芯片上选择使用聚二甲基硅氧烷来作为所述盖片，也是本案技术方案所允许的。

所述终端与所述进样端之间的距离的优选范围是介于3厘米与10厘米之间。

所述盖片及基片其厚度可以允许是任意设定的便于装配的厚度，推荐的厚度或曰优选的厚度是介于1.0毫米与5.0毫米之间。较小的厚度有利于节省材料。

本案微流控芯片的使用方法：

基于本案首次提出并首次公开的该新型液流驱动原理，本案微流控芯片其应用运作之中，该新型液流驱动方法决定了完全不需要牵扯到任何外加的微泵。

本案以所述超声波所造成的该微流控芯片该两端之间所形成的该界面张力差异，驱动液流在该十五通道微流控芯片的毛细管通道中流动，利用多通道电化学分析仪器分别对十五种肿瘤标志物进行联合检测。

本案微流控芯片的具体检测使用步骤如下：

1、在微管路中加入血清样品液，在所述超声波驱动下，各种肿瘤标志物抗原分子被各通道中电极表面上金胶敏感膜包埋的相应的辣根过氧化物酶标记的肿瘤标志物特异性抗体捕获。

2、辣根过氧化物酶标记的肿瘤标志物特异性抗体与血清样品中的肿瘤标志物抗原形成免疫复合物。

3、采用多通道电化学分析仪，加入邻苯二酚等电子媒介体，采用安培法检测上述反应引起的电流变化，由此获得各种分析物的种类和含量。

4、将结果进行综合分析，对肿瘤标志物抗原进行综合诊断。

本发明的优点是，在所述微流控芯片的所述终端其邻近位置咬合定位所述弹力夹，并且在该弹力夹的夹持臂上贴附安装微型超声波换能器，以该微型超声波换能器发射低功率、高频频段的超声波，同时，利用聚二甲基硅氧烷基片其对超声波的强烈吸收能力，在比较短的距离内，也就是，从所述终端到所述进样端之间的仅数厘米尺度的很短的距离内，达成超声波强度的快速递减，藉此在该微流控芯片的所述两端造成所述界面张力的差异，进而，利用该两端之间的界面张力的差异其所形成的该两端之间的压力差异，驱动试样液流在所述管道内向所述终端方向流动。藉由本案液流驱动方案，完全免除了传统意义上的微泵之类的设备；免除了微泵的微流控芯片，其结构更简洁，其制作工序更少，其制作成本更低，该种简洁结构更有利于达成微流控芯片的低成本应用。

本案其方案并且将所述管道内除了电极安装所占空间之外的所有空余空间全部用所述二氧化硅颗粒填满。那些填充在管道内的二氧化硅颗粒，本案对其整体简称二氧化硅颗粒填充物，其功能包括支撑、顶住所述管道的管腔其内壁，使得该管道的管腔免于因所述流变而变窄，防止所述管道的管腔其横截面积缩小甚至闭合，从而长期维持该管道的基本架构不发生严重的变形。

在该管道内众多二氧化硅颗粒实体相互随机堆置在一起的本案架构下，该二氧化硅颗粒填充物的功能，当然还包括以其二氧化硅颗粒的亲水性的表面，利用各相邻二氧化硅颗粒相互之间的由亲水表面相互靠在一起所形成的曲折绵延的并且其内表面具有亲水性质的空隙，在所述管道内部构成网络形态的亲水的微流道，这个虽然曲折但却能够绵延始终的具有亲水性质的微流道，那么，在所述管道的管腔内部同时并存的多条的所述微流道其综合的、集成的、累加的或者说是叠加的效果，相当于是管径比较细小的亲水的毛细管通道；该曲折绵延的亲水的微流道其存在，在相当大的程度上抵消了所述原生形态的PDMS基片其表面强烈疏水性质所造成的对于试样液体的流动阻力；换句话说，因试样液体其占最大比例的成分是水，试样液体实质上就是水溶液，因此，该二氧化硅颗粒填充物的存在，能够大幅度地克服具有疏水性质并且表面未修饰的PDMS基片其对水溶液的不相容、排斥和阻挡作用，进而大幅度地降低了属于水溶液性质的试样液流其行进通过管道的阻力。

在本案架构下，在所述管道的管腔内部，原管道其管腔内壁壁面的面积，因所述二氧化硅颗粒填充物的硬性的挤占，管腔内壁壁面上依旧还能够裸露的那部分疏水性质的表面其面积已然大幅度地减小，其仍然裸露着的属于疏水性质的那部分表面的面积已经远远小于没有二氧化硅颗粒填充物存在的情况下的所述管腔内壁壁面的疏水性质的壁面面积；那么，在本案该架构下，该管道其腔管内，其剩余疏水表面与亲水的那部分新增表面，其叠加的、综合的、总和的、累加的技术效果，整体上是形成了趋于亲水的表面；换句话说，在所述管道的管腔内部，剩余的疏水性质的那部分表面其与试样溶液之间的界面张力，加上亲水性质的那部分新增表面其与试样溶液之间的界面张力，其叠加的、综合的、总和的、累加的技术效果，是使得所述管道的管腔内部其固液界面张力的整合效果趋近于玻璃毛细管其管腔内表面与试样溶液之间的界面张力。

因此，在所述管道内存在有所述二氧化硅颗粒填充物的本案架构下，同时依托本案试样液流驱动方案，就能够以较低的超声波功率来达成对试样液流的驱动，以本案机制驱动该试样液流向所述终端流动。

另一方面，由于作为基片材质的PDMS其所具有的所述流变性质，填充在所述管道内的所述二氧化硅颗粒填充物，会逐渐被不断地流变变形并向最近邻空闲空间推进的PDMS材质的管道壁面更严实地包裹，这过程最终会使得那些贴近所述管腔内壁壁面的那部分二氧化硅颗粒被卡在原处或嵌在原处，该部分的被卡在原处或嵌在原处的二氧化硅颗粒与其余的相互紧靠在一起地堆置着的二氧化硅颗粒彼此相互嵌顿在一起，由于这一原因，所述二氧化硅颗粒填充物便不会轻易地在所述管道内移动，其中的二氧化硅颗粒也基本上都被锁定在原处了，所述微流控芯片的流路架构因此能够得以长期保持。

本案二氧化硅颗粒填充物其颗粒的粒径范围介于10微米与200微米之间，相较于一般有机物分子、一般生物大分子而言，本案该二氧化硅颗粒填充物其颗粒的粒径堪称巨大，由于其巨大的粒径，并且其极性的表面与强疏水的PDMS材质的所述管道的内表面不能相容或曰相融，那么，该种粒径巨大的所述二氧化硅颗粒无法被PDMS材质的所述管道的内表面所吸附，更无法被PDMS材质的所述管道的内表面所吞没，该种粒径巨大的所述二氧化硅颗粒当然不会轻易地完全陷入或完全沉入PDMS材质其所固有的诸多微小气孔之中，并且因上文已经述及的所述流变的原因，所述二氧化硅颗粒填充物能够被卡在原处或者说是嵌在原处而不会轻易移动。

在所述管道的管腔内部，原管道其管腔内壁壁面原本全部是疏水性质的表面，如上所述，在本案架构下，因所述二氧化硅颗粒填充物的硬性的挤占，管腔内壁壁面上依旧还能够裸露的那部分疏水性质的表面其面积已然大幅度地减小，其仍然裸露着的属于疏水性质的那部分表面的面积已经远远小于没有二氧化硅颗粒填充物存在的情况下的所述管腔内壁壁面的疏水性质的壁面面积；因着所述流变的原因，紧贴着管腔内壁壁面的那些二氧化硅颗粒，逐渐地部分地嵌入或部分地陷入该管腔内壁壁面之中，处于该状态之中的二氧化硅颗粒其朝向管腔内壁壁面的那部分表面与已经发生匹配性变形的该管腔内壁壁面紧密贴合，那么，管腔内壁壁面中的已经发生所述匹配性变形并与二氧化硅颗粒表面紧密贴合的那部分壁面实际上已经无法与流经管道的试样溶液接触，也就是说，这部分的壁面已经不能够对流经管道的试样溶液其中的生物大分子及有机分子产生吸附作用了。基于上述机制，那么，因为填满所述管道的所述二氧化硅颗粒填充物其存在，所述管道其管腔内壁壁面的绝大部分已经被严密遮盖，这些已经被严密遮盖的所述壁面已经无法与流经所述管道的试样溶液接触，仅仅是余下的小部分的未被二氧化硅颗粒其表面所紧密贴合、严密遮盖的疏水表面可能与试样溶液接触，换句话说，在本案架构下，试样溶液中的生物大分子及有机分子其与疏水PDMS壁面的直接接触机会大幅度地减少，由此，PDMS材质的管腔内壁面其对生物大分子及有机分子的吸附干扰以及吞没干扰被大幅度地降低；如上所述，本案方案有利于排除或减弱所述吸附干扰及吞没干扰，有利于提升相关分析测试数据的可靠性。

如上所述，本案该二氧化硅颗粒填充物，其功能实际上包括类似于针对PDMS材质的管道内表面进行化学改性的作用，本案其这方面的作用相当于是将该PDMS材质的管道内表面由疏水性质的表面改变成亲水性质的表面，但是，与一般的、惯常的PDMS表面化学修饰其亲水化学修饰层保持时间短、亲水效果无法保持足够长时间的情况不同，本案所述颗粒巨大的二氧化硅颗粒填充物，其因流变而被卡住的颗粒既无法被轻易移动，其巨大粒径的颗粒更无法被PDMS材质的管道内壁所轻易吞没，因此，从这方面的其类似于表面化学改性的技术效果上看，本案其技术效果，是形成了恒久的、不可抹除、不可消耗、不被腐蚀、不被吞没的、不被溶解的亲水的表面改性层，它在效果上就是相当于一种在PDMS基材其相关表面上构建的恒久的亲水改性表面层。

本案的技术方案一揽子地化解了上文述及的与聚二甲基硅氧烷基片其应用相关的一系列技术难题。基于本案方案，该种十分廉价的聚二甲基硅氧烷材料便有可能在该微流控芯片制备、生产、应用等等领域发挥更大的作用。

本案结构中的该弹力夹其夹持臂上固定装设了所述微型超声波换能器，该结构提供了一个方便该装置拆解的功能，如此，该弹力夹连同其上所附的微型超声波换能器便能够方便地与该微流控芯片相互脱离，那么，该部分可自由脱离的构件便能够良性循环地重复使用许多次；该结构特征有利于节约该装置的使用成本。

本案该微流控芯片其大规模集成的架构，决定了其在实际测试应用之中，对血清试样的需要量较小，这有助于降低相关受检人员的身心损伤。

附图说明

图1是本案该装置其大略的外观侧视图。

图中，1是弹力夹，2、7分别是弹力夹的两个夹持臂，3是该微流控芯片的所述终端，4是该微流控芯片的所述进样端，5是聚二甲基硅氧烷材质的基片，6是盖片，8是微型超声波换能器，9是高频振荡电讯号传输电缆，10是拉力弹簧；图例中的该弹力夹结构仅是示意的图例结构，实际弹力夹结构不限于该图例弹力夹结构；图例中的箭头符号标示该微流控芯片其在实际运行时，受两端压力差驱动，其试样液流的流动方向。

具体实施方式

在图1所展示的本案该实施例中，该例其要点是，该装置的结构包括多通道微流控芯片，该微流控芯片的结构包括相互贴合装设在一起的基片5和盖片6，所述基片5和盖片6均为板状物或片状物，该基片5的面向该盖片6的那个面含有经由模压工艺或刻蚀工艺形成的槽道结构，该基片5还含有与该槽道结构相连并且洞穿该基片5的经由模压工艺、刻蚀工艺或简单打孔工艺形成的窗口结构，相互贴合安装在一起的该基片5与该盖片6共同构建成了含有管道结构以及与之相连的液池结构的微流控芯片，该管道的结构位置位于该基片5与该盖片6相互贴合的界面区域，该窗口其一侧被该盖片6封堵而另一侧开放，该窗口的结构位置就是所述液池的结构位置，所述液池有两种，该两种液池分别是位于不同结构位置的进样端液池以及终端液池，该微流控芯片的进样端4位置有一个或一个以上的所述进样端液池，所述进样端4指的是该微流控芯片实际进样时被测溶液的注入端位置，在该微流控芯片的终端3位置则有一个所述终端液池，所述终端3指的是该微流控芯片实际进样测试时其芯片内液体流动的终端位置，该终端3与该进样端4相互远离，该管道的一端与位于进样端4的所述进样端液池联通，该管道的另一端与位于该微流控芯片的所述终端3的所述终端液池联通，以及，顺序地或逆序地分别装设在该管道内不同位置上的工作电极以及对电极以及参比电极，所述顺序指的是所述参比电极其结构位置更靠近所述终端3位置，所述逆序指的是所述参比电极结构位置更靠近所述进样端4位置，所述工作电极由导电性电极以及贴附在该导电性电极上的包埋了肿瘤标志物抗体的金胶敏感膜构成，该管道的构造呈现并联构造，所述呈并联构造的管道由十五条分支管道并联构成，所述呈现并联构造的所述管道其外形轮廓近似于并联电路的轮廓，所述工作电极的数量是十五个，该十五个工作电极的装设位置分别位于所述十五条分支管道内，以及，该十五个工作电极其表层金胶敏感膜结构中的肿瘤标志物抗体分别是对肿瘤标志物抗原能特异性结合的十五种肿瘤标志物抗体物质，该十五种抗体物质分别是肿瘤标志物抗体AFP、CEA、CA242、CA125、CA199、CA153、CA724、CA50、NSE、CYFRA21-1、FPSA、TPSA、β-hCG、SCCA以及β2-MG，所述抗原是广义的抗原，所述抗体是广义的抗体，所述工作电极其材质是金属银材质、黄金材质、碳素材质或热分解导电高分子材质，所述工作电极其形貌呈现柱状、片状或丝状，该基片5其材质是聚二甲基硅氧烷材质，该基片5其表面是原生形态的表面，该原生形态的表面其意思指的是没有经过任何表面化学修饰或任何表面化学改性的该材质的原生形态的表面，该装置的结构还包括弹力夹1，该弹力夹1的两个相向的夹持臂2、7咬合定位在该微流控芯片的邻近所述终端3的位置，至少在其中的一个所述夹持臂譬如夹持臂7上贴附固定装设有微型超声波换能器8，以及，高频振荡电讯号传输电缆9，该高频振荡电讯号传输电缆9的一端与该微型超声波换能器8连接在一起；该弹力夹1提供了一个方便该装置拆解的功能；该微型超声波换能器8其主要功能是在微流控芯片实际进样测试时，利用所述进样端4以及所述终端3与该微型超声波换能器8装设位置之间的距离差异以及其所感受到的超声波强度上的差异，诱导形成所述进样端4其界面张力与所述终端3其界面张力之间的差异，该微流控芯片该两端3、4之间的界面张力差异会在该微流控芯片的该两端3、4之间形成压力差异，该压力差异会驱动试样溶液向所述终端3流动；柔软并具弹性的该聚二甲基硅氧烷材质的基片5其功能还包括以其对超声波强烈吸收的性质，对超声波进行强烈吸收，并藉此在该微流控芯片该终端3到该进样端4之间的有限的短距离之内实现超声波强度的快速递减；以及，许多的二氧化硅颗粒，该许多的二氧化硅颗粒填充在所述管道内，所述管道其管腔被该许多的二氧化硅颗粒所填满，该二氧化硅颗粒其粒径范围介于10微米与200微米之间，该二氧化硅颗粒是二氧化硅晶态颗粒、二氧化硅玻璃颗粒或二氧化硅成分其所占重量百分比在80％以上的无机玻璃颗粒。

图例中的箭头符号标示该微流控芯片其在实际运行时，受两端压力差驱动，其试样液流的流动方向。

图1中没有绘出所述高频振荡电讯号发生器及多道电化学工作站等附属件。

所涉弹力夹其本身市场有售。可供本案结构使用的市售的可供选用的弹力夹结构及造型及尺寸等等，品质繁多，具体弹力夹型式可以根据需要选定。

所涉微型超声波换能器8市场有售；也可以向超声波换能器厂家定制。

所涉高频振荡电讯号传输电缆9市场有售；也可以向超声波换能器厂家或电缆专业厂家定制。

所涉高频振荡电讯号发生器市场有接近需要的产品可购；也可以向相关厂家定制。

本例结构中的各工作电极以及对电极以及参比电极可以分别经由各自专用的电缆或曰串线分别与作为附件的多道电化学工作站的对应电缆接口或曰串线接口联接。

所述多道电化学工作站市场有售；该多道电化学工作站也可以根据具体需要向相关专业厂家定制。

鉴于本案上文相关文字表达其所描绘的所述呈现并联构造的管道其形态已经足够清晰，本案实施例中不再具体图示本案该种微流控芯片内所述管道的具体形态。

本案所述抗体指的是广义的抗体；本案所述抗原指的是广义的抗原；本案所述免疫复合物指的是广义的免疫复合物。

Claims (10)

1.十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，该装置的结构包括多通道微流控芯片，该微流控芯片的结构包括相互贴合装设在一起的基片和盖片，所述基片和盖片均为板状物或片状物，该基片的面向该盖片的那个面含有经由模压工艺或刻蚀工艺形成的槽道结构，该基片还含有与该槽道结构相连并且洞穿该基片的经由模压工艺、刻蚀工艺或简单打孔工艺形成的窗口结构，相互贴合安装在一起的该基片与该盖片共同构建成了含有管道结构以及与之相连的液池结构的微流控芯片，该管道的结构位置位于该基片与该盖片相互贴合的界面区域，该窗口其一侧被该盖片封堵而另一侧开放，该窗口的结构位置就是所述液池的结构位置，所述液池有两种，该两种液池分别是位于不同结构位置的进样端液池以及终端液池，该微流控芯片的进样端位置有一个或一个以上的所述进样端液池，所述进样端指的是该微流控芯片实际进样时被测溶液的注入端位置，在该微流控芯片的终端位置则有一个所述终端液池，所述终端指的是该微流控芯片实际进样测试时其芯片内液体流动的终端位置，该终端与该进样端相互远离，该管道的一端与位于进样端的所述进样端液池联通，该管道的另一端与位于该微流控芯片的所述终端的所述终端液池联通，以及，顺序地或逆序地分别装设在该管道内不同位置上的工作电极以及对电极以及参比电极，所述顺序指的是所述参比电极其结构位置更靠近所述终端位置，所述逆序指的是所述参比电极结构位置更靠近所述进样端位置，所述工作电极由导电性电极以及贴附在该导电性电极上的包埋了肿瘤标志物抗体的金胶敏感膜构成，该管道的构造呈现并联构造，所述呈并联构造的管道由十五条分支管道并联构成，所述呈现并联构造的所述管道其外形轮廓近似于并联电路的轮廓，所述工作电极的数量是十五个，该十五个工作电极的装设位置分别位于所述十五条分支管道内，以及，该十五个工作电极其表层金胶敏感膜结构中的肿瘤标志物抗体分别是对肿瘤标志物抗原能特异性结合的十五种肿瘤标志物抗体物质，该十五种抗体物质分别是肿瘤标志物抗体AFP、CEA、CA242、CA125、CA199、CA153、CA724、CA50、NSE、CYFRA21-1、FPSA、TPSA、β-hCG、SCCA以及β2-MG，所述抗原是广义的抗原，所述抗体是广义的抗体，所述工作电极其材质是金属银材质、黄金材质、碳素材质或热分解导电高分子材质，所述工作电极其形貌呈现柱状、片状或丝状，该基片其材质是聚二甲基硅氧烷材质，该基片其表面是原生形态的表面，该原生形态的表面其意思指的是没有经过任何表面化学修饰或任何表面化学改性的该材质的原生形态的表面，该装置的结构还包括弹力夹，该弹力夹的两个相向的夹持臂咬合定位在该微流控芯片的邻近所述终端的位置，至少在其中的一个所述夹持臂上贴附固定装设有微型超声波换能器，以及，高频振荡电讯号传输电缆，该高频振荡电讯号传输电缆的一端与该微型超声波换能器连接在一起；该弹力夹提供了一个方便该装置拆解的功能；该微型超声波换能器其主要功能是在微流控芯片实际进样测试时，利用所述进样端以及所述终端与该微型超声波换能器装设位置之间的距离差异以及其所感受到的超声波强度上的差异，诱导形成所述进样端其界面张力与所述终端其界面张力之间的差异，该微流控芯片该两端之间的界面张力差异会在该微流控芯片的该两端之间形成压力差异，该压力差异会驱动试样溶液向所述终端流动；柔软并具弹性的该聚二甲基硅氧烷材质的基片其功能还包括以其对超声波强烈吸收的性质，对超声波进行强烈吸收，并藉此在该微流控芯片该终端到该进样端之间的有限的短距离之内实现超声波强度的快速递减；以及，许多的二氧化硅颗粒，该许多的二氧化硅颗粒填充在所述管道内，所述管道其管腔被该许多的二氧化硅颗粒所填满，该二氧化硅颗粒其粒径范围介于10微米与200微米之间，该二氧化硅颗粒是二氧化硅晶态颗粒、二氧化硅玻璃颗粒或二氧化硅成分其所占重量百分比在80％以上的无机玻璃颗粒。

2.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，所述管道包括所述分支管道是毛细管通道。

3.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，所述热分解导电高分子是由聚酰亚胺或聚丙烯腈经绝氧热处理后形成的导电性材料。

4.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，所述工作电极的宽度或直径介于0.1微米至2000微米之间，以及，所述工作电极的长度在1微米至15000微米个之间。

5.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，所述金胶敏感膜的厚度介于10纳米与200纳米之间。

6.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，结构中的所述盖片其材质为聚二甲基硅氧烷材质。

7.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，所述终端与所述进样端之间的距离介于3厘米与10厘米之间，所述盖片及基片其厚度均介于1.0毫米与5.0毫米之间。

8.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，该二氧化硅颗粒其粒径范围介于100微米与200微米之间，所述管道其内径范围介于500微米与1000微米之间。

9.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，该微流控装置的结构还包括高频振荡电讯号发生器，所述高频振荡电讯号传输电缆其另一端与该高频振荡电讯号发生器连接。

10.根据权利要求1所述的十五通道联合检测多种肿瘤标志物的微流控芯片装置，其特征在于，该微型超声波换能器其额定超声波发射功率介于5毫瓦与5000毫瓦之间，该微型超声波换能器其在运行时所发射的超声波的频率是介于100KHz与12MHz之间。