CN106902099A - 3,5‑二羟基‑4‑异丙基‑二苯乙烯(dhis)作为杀螨剂及其治疗性应用 - Google Patents

3,5‑二羟基‑4‑异丙基‑二苯乙烯(dhis)作为杀螨剂及其治疗性应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了通过施用治疗有效剂量的3,5‑二羟基‑4‑异丙基‑二苯乙烯(DHIS)来治疗与皮肤寄生虫(包括螨)相关的皮肤病症的方法。

Description

3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)作为杀螨剂及其治疗 性应用
本申请要求于2016年2月16号递交的美国专利申请序列号US15/045,063的优先权
技术领域
本申请涉及3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯的治疗性应用。
背景技术
3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)是一个很多年前发现的天然存在的化合物。其是存在于土壤中的共生微生物的代谢产物；其结构式如下：
已知的是，DHIS具有抗菌、抗炎、免疫调节和抗肿瘤活性。但是DHIS的精确和完全的生物学活性是未知的，DHIS作为局部制剂已进行临床测试以治疗炎症皮肤疾病，例如牛皮癣和特应性皮炎，并且DHIS取得了明显的疗效和极小的副作用(Bissonnette etal.Arch Dermatol,146(4):446-449(2010)；Bissonnette et al.Br J Dermatol,166(4):853-860(2012).)。
由于DHIS在化学合成中的非甾体特性和立即可用性，DHIS的治疗性应用将是显著的。因此有必要探索DHIS的生物学活性和有效的治疗性应用。
发明内容
针对3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)作为杀螨剂的治疗性应用，本发明提供了多种实施方案。
一个实施方案提供了一种用于治疗被宿主皮肤寄生虫群体过剩影响的皮肤的方法，所述方法包含对受影响的皮肤施用有效治疗剂量的DHIS。
进一步地实施方案提供了在有此需要的受试者上治疗玫瑰痤疮和痤疮的方法，所述方法包含对所述受试者施用有效治疗剂量的DHIS。
再一个实施方案提供用于在宿主上消除螨虫或降低螨虫数量的方法，所述方法用3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)接触螨虫。
附图说明
图1显示了患有酒渣鼻(有名玫瑰痤疮)丘疹脓疱个体(N＝10)的治疗结果。
图2显示了患有痤疮个体(N＝10)的治疗结果。
图3A和3B分别显示了酒渣鼻患者治疗前和施用DHIS治疗4周后的照片。
图4A和4B分别显示了痤疮(脸颊部)患者治疗前和施用DHIS治疗4周后的照片。
图5A和5B分别显示了痤疮(前额部)患者治疗前和施用DHIS治疗4周后的照片
具体实施方式
以下描述了DHIS作为抗寄生虫药剂的治疗性应用，以及用于治疗皮肤病症(例如玫瑰痤疮和寻常痤疮)的方法。特别地，本发明在此揭示了DHIS是强效的杀螨剂，以用于减少或根除蠕形螨。
I.皮肤寄生虫和相关皮肤情况
蠕形螨是人类皮肤的共生皮外寄生虫。其有两种主要类型，包括D.folliculorum和D.bravis。它们通常以低密度(0.7个/cm2)存在于皮肤上并且寄住在发囊中(Jarmuda etal,J Med Microbiol,61(Pt 11):1504-1510(2012))。它们通常喜欢具有丰富皮脂腺的皮肤区域，例如面部，前额，鼻子和外耳。在这些部位，螨虫可以交配和繁殖。蠕形螨的寿命范围为14-18天。繁殖率取决于成虫螨的成功交配，这通常发生在位于皮肤表面的皮脂腺的卵泡开口处。交配后，雌性螨退回到位于表皮表面正下方的皮脂腺中，在那里它们产卵并开始下一代的生命周期。
研究表明，这些生物体以低数量存在于人类皮肤上，特别是面部。对于幼儿来说蠕形螨的密度更是非常之低。蠕形螨的密度在人青春期开始增加，并且到成年期继续增加。
在一些皮肤病症中，例如玫瑰痤疮、寻常痤疮、睑缘炎、口周皮炎和脱发，与没有皮肤病症的那些相比，螨密度可以显着增加。在一个对860个人的调查中，具有正常面部皮肤的个体仅有5％的机会具有大于5个/cm2的螨虫密度，相比之下，玫瑰痤疮的机率为38.5％，痤疮性玫瑰痤疮的机率为9.3％(Zhao et al.J Zhejiang Univ Sci B,12(12):1008-1015(2011).)。非专利文献Forton et al.Br J Dermatol,128(6):650-659(1993)还公开了正常面部皮肤的螨虫密度为0.7个/cm2，而玫瑰痤疮的密度为10.8个/cm2。在其他研究中，除了玫瑰痤疮之外，已经显示一些其它皮肤病症与增加的蠕形螨侵袭存在关联，包括睑缘炎和脱发(Garcia-Vargas et al.J Am Acad Dermatol 57(2Suppl):S19-21(2007).)。
一般认为，虽然皮肤中低密度的螨虫对皮肤无害，但螨虫密度的增加可能对皮肤的健康有害。已经得出结论的是，当蠕形螨破坏上皮屏障时，它们的抗原影响宿主的免疫系统并诱导IV型超敏反应(Jarmuda et al,同上)。
下面进一步详细描述玫瑰痤疮和寻常痤疮。
1、玫瑰痤疮
玫瑰痤疮(又名酒糟鼻)是常见的面部疾病，其影响约6％的一般人群。受影响的个体表现为皮肤发红、扩张的表面血管、丘疹、以及颊、鼻子和前额上的脓疱。有些人眼睛也可能受到影响，特别是睑缘炎。而在其他患者中，特别是男性，可以发展为鼻子肥大，导致肥大性酒渣鼻。
玫瑰痤疮的确切病因和发病机制尚未清楚了解。现有理论推测其与血管超敏反应导致的免疫激活增加的作用相关。
高密度的蠕形螨与玫瑰痤疮病原性相关。研究表明，在玫瑰痤疮皮肤中，蠕形螨数量大大增加，密度为10.7个/cm2，至少是正常面部皮肤的蠕形螨密度(0.7个/cm2)的13倍(Jarmuda et al,同上)。玫瑰痤疮没有既有效又无副作用的理想疗法。目前的选择包括口服抗炎药物(例如多西环素)和全身用异维甲酸。然而，这些药物的作用是暂时的，并且通常导致一定的副作用，例如致畸性、过敏反应、GI不耐受以及光敏性等。因此，这些疗法在其长期临床应用性和安全性方面受到限制。局部疗法也是存在，其包括甲硝唑(杀螨剂)，伊维菌素(杀螨剂)和沉淀硫(杀螨剂和抗炎剂)。然而，这些药物对皮肤高度刺激，它们的治疗作用仅是轻度至中度的。
2、寻常痤疮
寻常痤疮是另一种基于小囊的皮肤病，其以脸部、胸部和上背部为中心。在发生丘疹和脓疱方面，表现与玫瑰痤疮相似。然而，痤疮患者的年龄更加年轻，并且他们通常不会发生面部潮红或血管扩张。虽然有报道表明寻常痤疮与皮脂产生增加和毛囊开口阻塞相关，但其发病机理仍不清楚。最近的多项研究表明，寻常痤疮发病部位的蠕形螨密度显著增加。特别地，与没有痤疮的个体相比，更高百分比的痤疮患者具有显著的蠕形螨密度(Zhaoet al.同上)。
痤疮的治疗涉及全身治疗或局部治疗。痤疮的系统治疗类似于玫瑰痤疮。然而，局部治疗是不同的，其包括视黄酸、过氧化苯甲酰和抗生素。这些治疗是适度有效的，或与显着的副作用相关。因此需要有效和安全的新疗法。
II.DHIS的杀螨活性
不同的实施方案均涉及DHIS的杀螨活性，其被证明可有效治疗皮肤病症，例如玫瑰痤疮和寻常痤疮。
DHIS具有强效的杀螨活性。如本发明所述，按照非专利文献胡烨等.秀山海泥浸液对人体蠕形螨的杀灭作用[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2011,29(4):258-263.公开的方法，通过使用压力刮擦法制备的蠕形螨进行体外杀螨试验来测定DHIS的杀螨活性，随后在显微镜下观察蠕形螨的存活时间。实施例1进一步证明DHIS显示剂量依赖性的杀螨活性。
如本文所用，螨包括所有蠕形螨种属，例如毛囊蠕形螨(Demodex folliculorum)、皮脂蠕形螨(D.brevis)和嗜动物性蠕形螨(Zoophilic demodex)，例如犬蠕形螨(D.canis)、牛蠕形螨(D.bovis)、马蠕形螨(D.equi)、绵羊蠕形螨(D.ovis)、猫蠕形螨(D.cati)、猪蠕形螨(D.phyloides)和山羊蠕形螨(D.caprae)。蠕形螨种属包括但不限于毛囊蠕形螨(D.folliculorum)和皮脂蠕形螨(D.brevis)。
因此，一个实施方案提供了用于消除螨虫或减少螨虫数量的方法，其包含使螨与DHIS接触。
在具体实施方案中，螨虫存在于宿主(例如，人)的皮肤上，包括面部、胸部或上背部。在更具体的实施方案中，螨虫以大于0.7个/cm2，或大于1.0个/cm2，或大于2.0个/cm2，或大于5.0个/cm2，或大于8.0个/cm2，或大于10个/cm2，或大于15个/cm2的密度存在于皮肤上。
III.皮肤病症的治疗
蠕形螨与一些皮肤病症的发病机理有密切关系，包括玫瑰痤疮和寻常痤疮。与在体外观察到的DHIS杀螨活性一致，DHIS的局部施用进一步证明其在治疗与蠕形螨增加有关的皮肤病症(例如，玫瑰痤疮和寻常痤疮)中是有效的(参见实施例2-5)。
因此，不同的实施方案提供了用于治疗受皮肤寄生虫过度影响的宿主皮肤的方法，其中所述方法包括使所述受影响的皮肤与有效治疗剂量的DHIS接触。
如本文所用，宿主是指人或动物。
在优选的实施方案中，皮肤寄生虫是螨。在其它实施方案中，皮肤寄生虫是虱病(虱子)。
如本文所用，皮肤寄生虫(例如螨)的种群或密度是指每单位面积皮肤表面的寄生虫数量。通常，在0.7个/cm2或更小的密度下，螨对宿主是无害的或无致病性的。从这种正常水平的螨密度增加(即，大于0.7个/cm2)可导致螨过度繁殖或过度侵染。
除了玫瑰痤疮和寻常痤疮，受螨密度过高或过度感染影响的皮肤与病症相关，例如眼部蠕形螨感染、睑缘炎、睑板腺异常、慢性结膜炎、过敏性结膜炎、疥疮、动物疥疮和动物螨病等。
在不同实施方案中，DHIS可以通过各种方式施用，包括静脉注射、口服、腹膜给药、舌下给药、局部和眼内给药。
如果用作口服制剂，可以将DHIS配制成片剂或胶囊，其可以使用辅料如淀粉、半乳糖，润滑剂、湿润剂等制备。口服施用还可以采取液体或悬浮液的形式，其还可以包括本领域已知的添加剂。
在优选的实施方案中，DHIS直接施用于皮肤，例如直接施用于受影响的皮肤。DHIS可以配制成霜剂、洗剂、软膏剂、混悬剂、粘合剂、泡沫剂、喷雾剂、清洁剂或凝胶剂。
在更具体的实施方案中，经皮或局部制剂可以包括一种或多种皮肤病学可接受的赋形剂或添加剂，以促进经皮递送(即通过皮肤吸收)。DHIS通常以约0.2％至20％的浓度以及其间的任何百分比或范围存在于局部制剂中。复方制剂或局部制剂可以以0.5mg至1g的量进行施用。应当理解，DHIS的确切剂量或浓度可以根据个体的皮肤病症严重程度而改变。
当用于治疗玫瑰痤疮、寻常痤疮以及睑缘炎时，可以将DHIS制备为0.1％至20％(w/w)的复合制剂，施用于受影响的皮肤区域，每天一次至两次，实现临床症状的改善或解决。
DHIS还可以配制为速释、延迟释放或持续释放制剂。
DHIS可以以相同的方式用于治疗动物的蠕形螨感染。
实施例1DHIS的体外杀螨活性
按照非专利文献《胡烨等.秀山海泥浸液对人体蠕形螨的杀灭作用[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2011,29(4):258-263.》描述的方法，用压力刮擦法制备的人蠕形螨进行体外杀螨测定，随后在显微镜下检查蠕形螨的存活时间。
在分离螨虫后，将30只螨虫放置在含有200μl生理盐水或含有各种浓度的DHIS(10μM，100μM和1mM)的生理盐水的载玻片上。将载玻片在室温(20℃)和70％湿度下孵育。随后每60分钟在显微镜下检查载玻片一次，共计8小时。在每个时间点，记录每种处理浓度的死螨百分比(1分钟没有移动)。每个浓度测试一式三份，记录三个实验的平均值，结果如表1所示。毛囊蠕形螨(Demodex folliculorum)、皮脂蠕形螨(D.brevis)
表1DHIS体外杀螨活性
实施例2DHIS减轻了丘疹脓疱性玫瑰痤疮患者的蠕形螨数量和皮肤病症
鉴于DHIS在体外的已证实的杀螨效果，进行以下观察，(1)检查DHIS在玫瑰痤疮皮肤(已证明所述皮肤上蠕形螨数量增加)上的局部应用是否可以导致蠕形螨的减少或根除，和(2)是否伴随着玫瑰痤疮临床症状的改善或缓解。
招募总共20名志愿者(其中，10名志愿者具有丘疹脓疱性玫瑰痤疮，10名志愿者具有丘疹脓疱性寻常痤疮)用于本观察。
针对每个志愿者，记录其病症的持续时间、基线体征、面部症状以及病症的严重程度。对于症状状况，对每个个体的丘疹和脓疱总数进行计数。红斑评分分为严重(3，深红色至紫色)，中度(2，红色)，轻度(1，粉红色)或无(0，正常颜色)。对于烧伤和瘙痒，使用视觉模拟标度(10cm线)，记录从0(无症状)至10cm(最严重)的评分。此外，使用改进的压力刮擦技术测量了鼻窦皮肤的基线蠕形螨密度。
为了本研究的目的，对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨一起进行计数。然后对每个志愿者使用0.75％浓度的DHIS局部乳膏，每天对脸部受影响的区域给药两次。4周后对志愿者进行检查，记录当时的临床体征和症状。此外，使用改进的压力/刮擦技术再次评估蠕形螨密度。
具有丘疹脓疱性玫瑰痤疮(图1，N＝10)和痤疮(图2，N＝10)的个体每天给予DHIS0.75％霜剂二次，持续4周。在基线和给药4周后，分别评估个体的蠕形螨密度(个/cm2)和临床体征/症状。对每个个体的丘疹和脓疱进行计数，或计算整个面部感染面积。红斑分为轻度(1，粉红色)，中度(2，红色)或重度(3，紫红色)，而瘙痒和灼烧感觉根据10厘米视觉模拟评分分级(*表示p<0.05(t检验))。
如图1所示，与基线相比，第4周时蠕形螨密度显著降低。同样，图2显示了与痤疮患者的基线相比，第4周时的蠕形螨密度显著降低。蠕形螨密度的降低与玫瑰痤疮和痤疮患者的丘疹和脓疱的损伤计数显著减少相关。减少的红斑也具有统计学意义。其他症状例如瘙痒和烧灼感减少。
实施例3玫瑰痤疮患者病例研究
病例1:男76岁,患玫瑰痤疮11年。临床表现：面部红斑,丘疹和脓疱，伴有轻度毛细血管扩张；皮肤感觉偶有灼热感(这与轻度的肥大性酒糟鼻有关)；眼睛有异物感。用四环素口服,外用硫磺软膏等无效。皮检发现螨虫明显增加。临床诊断:玫瑰痤疮二期(丘疹脓疱期).经含量0.75％(w/w)的DHIS药膏一天两次应用,持续4周,治疗结束时，其蠕形螨密度显著降低。更重要的是，玫瑰痤疮的体征和症状显著改善。参见治疗前(图3A)和治疗4周后玫瑰痤疮患者的照片(图3B)。
实施例4痤疮患者病历研究
病例2:女,21岁，病程3年5个月。临床病征:黑头粉刺、红丘疹、小脓疱、但只有轻微的红斑。症状:皮肤油脂分泌旺盛,局部有肿胀感,疼痛感。经过外用维甲酸，硫磺软膏等治疗,口服四环素,避孕药,中药等,无显效。皮肤胶贴显微镜检查,发现螨虫增生明显。经含量0.75％(w/w)的DHIS药膏一天两次治疗4周后,疗效显著。脓疱丘疹消失，黑头粉刺减少。皮检发现螨虫密度显着降低。参见治疗前(图4A和5A)和治疗4周后(图4B和5B)的痤疮患者(脸颊和前额)的照片。
本发明内容仅仅举例说明了要求保护的一些具体实施方案，其中一个或更多个技术方案中所记载的技术特征可以与任意的一个或多个技术方案相组合，这些经组合而得到的技术方案也在本申请保护范围内，就像这些经组合而得到的技术方案已经在本发明公开内容中具体记载一样。

Claims (14)

1.一种用于治疗受宿主中皮肤寄生虫群体过剩影响的皮肤的方法，所述方法包含采用有效治疗剂量的3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)接触受影响的皮肤。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述皮肤寄生虫为蠕形螨。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述蠕形螨密度大于0.7个/cm2。
4.根据权利要求2所述的方法，其中所述蠕形螨密度大于5.0个/cm2。
5.根据权利要求2所述的方法，其中所述蠕形螨密度大于10个/cm2。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述宿主为人或动物。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述宿主在受影响的皮肤上患有玫瑰痤疮。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述宿主在受影响的皮肤上患有痤疮。
9.一种用于治疗有需要的受试者的玫瑰痤疮或痤疮的方法，所述方法包括使所述受试者接触有效治疗剂量的3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)。
10.一种用于消除或减少宿主中螨虫的方法，所述方法包括使螨虫与3,5-二羟基-4-异丙基-二苯乙烯(DHIS)接触。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述螨虫存在于宿主皮肤上。
12.根据权利要求10所述的方法，其中所述螨虫以大于0.7个/cm2的密度存在于宿主皮肤上。
13.根据权利要求10所述的方法，其中所述螨虫以大于5.0个/cm2的密度存在于宿主皮肤上。
14.根据权利要求10所述的方法，其中所述螨虫以大于10个/cm2的密度存在于宿主皮肤上。
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