CN106822900A - Rna聚合酶i的抑制剂在抑制血管损伤后再狭窄的应用 - Google Patents
Rna聚合酶i的抑制剂在抑制血管损伤后再狭窄的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106822900A CN106822900A CN201710155932.7A CN201710155932A CN106822900A CN 106822900 A CN106822900 A CN 106822900A CN 201710155932 A CN201710155932 A CN 201710155932A CN 106822900 A CN106822900 A CN 106822900A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rna plymerase
- blood vessel
- inhibitor
- injury
- medicine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
- A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L29/00—Materials for catheters, medical tubing, cannulae, or endoscopes or for coating catheters
- A61L29/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. lubricating compositions
- A61L29/16—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L31/16—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/416—Anti-neoplastic or anti-proliferative or anti-restenosis or anti-angiogenic agents, e.g. paclitaxel, sirolimus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/136—Screening for pharmacological compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/91—Transferases (2.)
- G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
- G01N2333/91205—Phosphotransferases in general
- G01N2333/91245—Nucleotidyltransferases (2.7.7)
- G01N2333/9125—Nucleotidyltransferases (2.7.7) with a definite EC number (2.7.7.-)
- G01N2333/91255—DNA-directed RNA polymerase (2.7.7.6)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/20—Screening for compounds of potential therapeutic value cell-free systems
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
- G01N2800/323—Arteriosclerosis, Stenosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于特异性抑制RNA聚合酶I表达以预防或治疗介入治疗后血管再狭窄的发生的物质。所述物质可选自RNA聚合酶I抑制剂。所述RNA聚合酶I抑制剂可选自小干扰RNA、硫代核苷或者硫代核苷的类似物或衍生物、放线菌素D或者放线菌素D的类似物或衍生物、CX‑5461或者CX‑5461的类似物或衍生物、BMH‑21或者BMH‑21的类似物或衍生物。针对临床上出现的应用药物洗脱支架后发生支架内再狭窄的病人,这些血管病变组织很可能对所用药物已产生耐受性或抵抗性。与传统的治疗血管再狭窄的药物相比,我们发明的新方法作用于新的生物学靶点,因此在开发新型药物洗脱支架的领域中可能具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体为利用RNA聚合酶I的抑制剂抑制血管损伤后再狭窄的发生。
背景技术
冠状动脉硬化性心脏病(即冠心病)是严重危害人类健康的重要杀手。据世界卫生组织统计,全世界每年约有1700万人死于冠心病,占疾病死亡总人数的50%以上。目前在我国冠心病的发病率呈现不断上升趋势。随着人口不断老化,40岁以后每增加10岁,冠心病的发病风险就要增加1倍左右。如何有效预防治疗冠心病已经成为目前社会的重大需求。
冠心病是冠状动脉血管内发生动脉粥样硬化病变而导致血血管狭窄或阻塞,造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病。对于狭窄成度严重(病人症状明显,影响正常生活)和危险性高(容易造成心肌梗塞的发生)的病变,目前临床上广泛采用的治疗方法之一是介入治疗。介入治疗是通过穿刺浅表血管,将特定的心脏导管送入冠状动脉后进行诊断与治疗。介入治疗依靠的主要技术包括:
(1)冠状动脉球囊血管成形术:即将相应大小的球囊沿导管送到狭窄的节段,根据病变的特点用适当的压力和时间进行扩张,达到解除狭窄的目的。单纯球囊血管成形术后容易发生冠状动脉急性闭塞和再狭窄。急性闭塞多见于术后24小时内,发生率在3%-5%,可导致患者急性心肌梗死,甚至死亡。再狭窄一般发生于术后6个月内,发生率在25%-50%,患者会再次出现心绞痛症状,需再次治疗。由于以上的局限性,目前已很少单独使用。
(2)冠状动脉金属支架植入术:为克服球囊成形术的局限性,人们将用不锈钢或合金材料制成的网状金属支架置入冠状动脉内狭窄的阶段支撑血管壁,维持血流通常。即便如此,术后6个月内仍有20%-30%的血管发生再狭窄,这个过程被称为“支架内再狭窄”。
(3)药物洗脱支架(drug-eluting stent)植入术:为进一步防止支架内再狭窄的发生,人们发明了药物洗脱支架,即用药物包裹金属支架,让药物在局部缓慢释放。药物洗脱支架的使用使支架内再狭窄发生率进一步降低。
其中,临床中用于支架涂层的药物,最主要的药理学作用是通过抑制血管平滑肌细胞的增殖,达到抑制血管再狭窄的目的。目前市场上主要包括以下两类:
(I)蛋白激酶mTOR的抑制剂:代表药物是依维莫斯(Everolimus)和西罗莫司(sirolimus);
(II)微管蛋白稳定剂:代表药物是紫杉醇(Paclitaxel)。
上述这些药物在细胞内作用的生物学靶点不同,但都能够有效抑制血管平滑肌细胞的增殖功能。然而,虽然药物洗脱支架植的使用大大降低了支架内再狭窄的发生,但并没有完全根除相关病变的发生。临床研究的数据显示仍然有不到10%的血管管腔在应用药物洗脱支架后会发生支架内再狭窄。而且,由于这种病变是在使用了增殖抑制剂的情况下发生的,其病理特征与非药物洗脱支架造成的支架内再狭窄并不完全相同。因此,发现新的干预治疗靶点及新的药物类型对进一步提高药物洗脱支架预防再狭窄的效能具有广泛的应用前景。同时,对于那些现有药物不能有效抑制其生长的病变,找到新的药物类型能够为临床医生提供更多的治疗选择。
发明内容
针对上述现有技术,本申请人通过实验研究意外发现,抑制细胞内的核糖核酸(RNA)聚合酶I可以有效抑制平滑肌细胞增殖,并且能有效抑制球囊损伤后血管再狭窄的发生。这些结果提示,RNA聚合酶I作为预防血管再狭窄发生的新的生物学靶点,可以使用能够特异性抑制RNA聚合酶I的药物来预防或治疗介入治疗后血管再狭窄的发生。
因此,本发明的第一个方面,涉及RNA聚合酶I的抑制剂在制备预防或治疗血管损伤后血管再狭窄的药物或产品中的应用;在制备治疗血管损伤的药物或产品中的应用;在制备预防或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用;在用于制备抑制血管平滑肌细胞增殖的药物或产品中的应用,或者用于抑制血管内膜增生的药物或产品中的应用。
进一步的,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的第二个方面,涉及一种组合物,所述组合物含有RNA聚合酶I的抑制剂,所述组合物用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
进一步的,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的第三个方面,涉及药物洗脱支架,所述药物洗脱支架包被有RNA聚合酶I的抑制剂。所述药物洗脱支架用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
进一步的,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的第四个方面,涉及药物释放球囊,所述药物释放球囊包被有RNA聚合酶I的抑制剂。所述药物释放球囊用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
进一步的,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的第四个方面,涉及一种检测RNA聚合酶I表达水平或功能活性,或者检测其抑制剂抑制效率的试剂在制备试剂盒中的应用,所述试剂盒用于诊断血管损伤后的再狭窄和血管平滑肌细胞增生性的血管疾病。
本发明的第五个方面,涉及一种试剂盒,所述试剂盒包括检测RNA聚合酶I表达水平或功能活性,或者检测其抑制剂抑制效率的试剂,所述试剂盒用于诊断血管损伤后的再狭窄和血管平滑肌细胞增生性的血管疾病。
本发明的第六个方面,涉及一种筛选预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的药物的方法,所述方法包括:
(1)将待测物质加入含有RNA聚合酶I的体系中;
(2)测定所述待测物质是否特异性抑制RNA聚合酶I的表达,其中,与未加入待测物质的实验相比,能够特异性抑制RNA聚合酶I表达的物质作为预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的候选药物。
根据本发明上述任一方面的应用、组合物、药物洗脱支架、药物释放球囊、试剂盒、方法,其中所述的RNA聚合酶I的抑制剂可以是能够特异抑制RNA聚合酶I表达的任何物质;包括是在细胞中特异抑制RNA聚合酶I表达的物质,也可以是与RNA聚合酶I具有特异性相互作用。
优选的,所述RNA聚合酶I抑制剂可选自RNA聚合酶I的小干扰RNA、硫代核苷或者硫代核苷的类似物或衍生物、放线菌素D或者放线菌素D的类似物或衍生物、CX-5461或者CX-5461的类似物或衍生物、BMH-21或者BMH-21的类似物或衍生物;
进一步优选的,所述RNA聚合酶I抑制剂为CX-5461。CX-5461是美国CylenePharmaceuticals公司近期开发出来的新药,是RNA聚合酶I的特异性抑制剂。目前CX-5461的主要用途是抗肿瘤,正在进行临床研究阶段。而申请人在实验大鼠的球囊损伤后血管再狭窄模型上证实血管外局部应用CX-5461干预后显著抑制了血管再狭窄的程度,而对正常血管壁细胞没有明显毒性作用。
需要说明的是,在本发明中,所述的血管再狭窄是指在局部血管发生损伤时,所作出的导致血管管腔再狭窄的普遍性生物学反应。这里主要指医源性损伤引起的血管再狭窄,损伤过程主要由动脉重塑和内膜增生组成。
本发明的有益效果:针对临床上出现的应用药物洗脱支架后发生支架内再狭窄的病人,这些血管病变组织很可能对所用药物已产生耐受性或抵抗性。RNA聚合酶I的抑制剂其所作用的生物靶点与当前使用的两类涂层药物不同,因此为临床医生提供了一个全新的治疗选择。与传统的治疗血管再狭窄的药物相比,我们发明的新方法作用于新的生物学靶点,因此在开发新型药物洗脱支架的领域中可能具有广泛的应用前景。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是例示性的,旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件或它们的组合。
需要说明的是,本发明中,所述的血管再狭窄是指在局部血管发生损伤时,所作出的导致血管管腔再狭窄的普遍性生物学反应。这里主要指医源性损伤引起的血管再狭窄,损伤过程主要由动脉重塑和内膜增生组成。
正如背景技术所介绍的,临床中用于支架涂层的药物,最主要的药理学作用是通过抑制血管平滑肌细胞的增殖,达到抑制血管再狭窄的目的。然而,虽然药物洗脱支架植的使用大大降低了支架内再狭窄的发生,但并没有完全根除相关病变的发生。临床研究的数据显示仍然有不到10%的血管管腔在应用药物洗脱支架后会发生支架内再狭窄。而且,由于这种病变是在使用了增殖抑制剂的情况下发生的,其病理特征与非药物洗脱支架造成的支架内再狭窄并不完全相同。因此,发现新的干预治疗靶点及新的药物类型对进一步提高药物洗脱支架预防再狭窄的效能具有广泛的应用前景。同时,对于那些现有药物不能有效抑制其生长的病变,找到新的药物类型能够为临床医生提供更多的治疗选择。
有鉴于此,本申请的一种典型的实施方式中,提供一种RNA聚合酶I的抑制剂在制备预防或治疗血管损伤后血管再狭窄的药物或产品中的应用;在制备治疗血管损伤的药物或产品中的应用;在制备预防或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用;在用于制备抑制血管平滑肌细胞增殖的药物或产品中的应用,或者用于抑制血管内膜增生的药物或产品中的应用。
其中,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的又一典型实施方式中,涉及一种组合物,所述组合物含有RNA聚合酶I的抑制剂,所述组合物用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
其中,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的又一典型实施方式中,涉及药物洗脱支架,所述药物洗脱支架包被有RNA聚合酶I的抑制剂。所述药物洗脱支架用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
其中,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的又一典型实施方式中,涉及药物释放球囊,所述药物释放球囊包被有RNA聚合酶I的抑制剂。所述药物释放球囊用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
其中,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤,例如通过球囊扩张或放入支架引起的血管损伤,或者移植后动脉病或肺动脉高压引起的血管损伤。
本发明的又一典型实施方式中,涉及一种检测RNA聚合酶I表达水平或功能活性,或者检测其抑制剂抑制效率的试剂在制备试剂盒中的应用,所述试剂盒用于诊断血管损伤后的再狭窄和血管平滑肌细胞增生性的血管疾病。
本发明的又一典型实施方式中,涉及一种试剂盒,所述试剂盒包括检测RNA聚合酶I表达水平或功能活性,或者检测其抑制剂抑制效率的试剂,所述试剂盒用于诊断血管损伤后的再狭窄和血管平滑肌细胞增生性的血管疾病。
本发明的又一典型实施方式中,涉及一种筛选预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的药物的方法,所述方法包括:
(1)将待测物质加入含有RNA聚合酶I的体系中;
(2)测定所述待测物质是否特异性抑制RNA聚合酶I的表达,其中,与未加入待测物质的实验相比,能够特异性抑制RNA聚合酶I表达的物质作为预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的候选药物。
根据本发明上述任一方面的应用、组合物、药物洗脱支架、药物释放球囊、试剂盒、方法,其中所述的RNA聚合酶I的抑制剂可以是能够特异抑制RNA聚合酶I表达的任何物质;包括是在细胞中特异抑制RNA聚合酶I表达的物质,也可以是与RNA聚合酶I具有特异性相互作用的物质。
本发明的又一典型实施方式中,所述RNA聚合酶I抑制剂可选自RNA聚合酶I的小干扰RNA、硫代核苷或者硫代核苷的类似物或衍生物、放线菌素D或者放线菌素D的类似物或衍生物、CX-5461或者CX-5461的类似物或衍生物、BMH-21或者BMH-21的类似物或衍生物。
本发明的又一典型实施方式中,所述RNA聚合酶I抑制剂为CX-5461。CX-5461是美国Cylene Pharmaceuticals公司近期开发出来的新药,是RNA聚合酶I的特异性抑制剂。目前CX-5461的主要用途是抗肿瘤,正在进行临床研究阶段。而申请人在实验大鼠的球囊损伤后血管再狭窄模型上证实血管外局部应用CX-5461干预后显著抑制了血管再狭窄的程度,而对正常血管壁细胞没有明显毒性作用。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案,以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。
实施例1大鼠颈总动脉球囊损伤术
1.动物实验过程
(1)材料与设备:健康雄性Wistar大鼠,眼科剪,眼科镊,手术剪,辅料镊,手术缝合线,缝合针,止血钳,持针器,1.25mm球囊(Medtronic公司),大鼠手术台,棉球,纱布块,注射器,碘酒棉球,酒精棉球。
(2)术前准备1):手术器械和敷料:均经过121℃,30min高压灭菌,球囊采取75%酒精浸泡消毒。2)麻醉用药:麻醉选择10%水合氯醛,剂量为0.35ml/100g体重,给药途径为腹腔注射。3)自制拉钩:将订书钉一端和橡皮筋钩在一起并固定,订书钉另一端做45度弯曲,用于钩挂组织,将橡皮筋另一端以图钉固定在手术台上,可以任意调节图钉位置而改变牵拉的力度。
(3).手术过程1)把大鼠麻醉后固定在手术台上,根据颈动脉皮下走行剃毛,纵向切开皮肤。2)用弯止血钳钝性分离组织,并以止血钳拉开皮层和基层,使颈总动脉以及颈内外动脉分叉处充分暴露,改用显微镊分离,分离长度大约1.5-2cm,分离时动作要轻柔,不得用刀剪等锐利器械,以防损伤血管和神经,特别在分离神经时动作不仅要轻,而且不能大幅度牵拉,以避免对大鼠产生较大的刺激。3)结扎颈外动脉:选择4-0号手术缝合线做结扎。先在颈外动脉近心端穿一根手术线备用。结扎颈外动脉的远心端。活结结扎颈内动脉。4)提起颈总动脉近心端的备线,向心方向轻轻牵拉,以阻断动脉血流为止,然后用止血钳夹住备线两端,以止血钳的重力固定备线位置,使股动脉血流保持被阻断状态。5)球囊选择直径为1.25mm,长度为10mm。6)提起颈外动脉远心端打结的缝合线,用眼科剪在两根结扎线之间,向心方向剪一“V”型口,注意不要把颈外动脉剪断,剪开部分不要超过颈外动脉直径的1/2。7)“V”型口剪好后,迅速将球囊尖端插入颈外动脉,将提前穿好的近心端备线以活结固定球囊和颈外动脉,然后将颈总动脉结扎线略放开,稍稍恢复血流。再以左手提起颈外动脉远心端的结扎线,右手稍稍用力向前推进球囊进入颈总动脉,遇阻力则稍稍反向牵拉,重新向心插入,直至球囊进入约3cm。8)向注入气体,压力为8kpa,使球囊膨大,然后向后牵拉球囊末端,大约拉出1cm左右,减小压力放出气体,再重新向心插入球囊,再次注入气体,重复上述步骤,如此反复2-3次。9)最后把球囊中的气体放出,然后缓慢拉出球囊,并及时拉紧近心端的备线,结扎颈外动脉近心端。解开颈总动脉、颈内动脉结扎线,恢复血流。10)剪断结扎点多余的缝合线,用敷料镊轻轻使血管,肌肉恢复原位,缝合皮层。
2.血管周围局部缓释治疗:
(1)Pluronic F127凝胶制备:称取5克Pluronic F127加入20毫升无菌的生理盐水中,4℃搅拌过夜,配置成25%溶液。
(2)配置cx-5461(分子量513.6)储存液:秤取5毫克药物加入到3.5毫升二甲基黄砜(DMSO)中,37℃超声水浴振荡过夜,得2.8毫摩尔(mM)浓度的CX-5461储存溶液。储存溶液分装后可于零下80℃冷冻保存6个月。
(3)配置药物缓释凝胶:将0.25微升和5微升CX-5461储存液加入到1毫升冷的Pluronic F127凝胶中混匀,分别得到含0.7微摩尔(mM)和14微摩尔(mM)药物浓度的凝胶溶液。Pluronic F127凝胶在4℃是呈粘稠溶液状态,体温条件下凝固成固体凝胶。
(4)手术后局部施用凝胶:球囊损伤手术后,将200微升含有不同药物浓度的凝胶均匀地滴注到暴露的血管表面和周围,待凝胶凝固后进行皮肤缝合。用含有5微升/毫升DMSO的凝胶作为对照试验组。
3.血管内膜病变的测量
手术后14天将实验动物注射过量麻药安乐死,分离并取出颈动脉,在生理盐水中冲洗干净后,用4%多聚甲醛浸泡固定,经脱水后包埋于石蜡块中进行组织病理切片。切片用苏木素-伊红染色。形态学测量使用普通光学显微镜观察,随机选择不同部位照相,图像文件用Image-Pro Plus 5.0软件(Media Cybernetics公司)进行分析。管腔狭窄病变程度用两个指标来衡量:内膜总面积和内膜面积与中膜面积的比值。数据统计:计算平均值加减标准差,然后用单因素方差分析比较各组间的差异。统计软件使用Graphpad Prism。
4.实验结果及讨论
实验结果见表1。由结果可见,局部应用RNA聚合酶I抑制剂CX-5461治疗后,球囊损伤造成的血管内膜增生程度明显受到抑制,而且这种作用呈药物剂量依赖性。损伤后血管内膜增生,占据管腔位置,是导致血管再狭窄发生的直接原因。目前临床使用的药物涂层支架都是利用药物抑制内膜增生达到防止再狭窄发生的目的。我们的实验证明CX-5461能够有效抑制内膜增生及血管平滑肌细胞增生,表明CX-5461有预防血管再狭窄发生的药理作用。
表1:局部应用CX-5461治疗对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生程度的影响
每组动物数5-8只。*表示统计学分析有显著性意义。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已,并不用于限制本申请,对于本领域的技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.RNA聚合酶I的抑制剂在制备预防或治疗血管损伤后血管再狭窄的药物或产品中的应用;在制备治疗血管损伤的药物或产品中的应用;在制备预防或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用;在用于制备抑制血管平滑肌细胞增殖的药物或产品中的应用,或者用于抑制血管内膜增生的药物或产品中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述血管损伤为动脉粥样硬化介入治疗、移植后动脉病引起的血管损伤。
3.一种组合物,其特征在于,所述组合物含有RNA聚合酶I的抑制剂,所述组合物用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
4.一种药物洗脱支架,其特征在于,所述药物洗脱支架包被有RNA聚合酶I的抑制剂,所述药物洗脱支架用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
5.一种药物释放球囊,其特征在于,所述药物释放球囊包被有RNA聚合酶I的抑制剂,所述药物释放球囊用于预防或治疗血管损伤后再狭窄,或者用于预防或治疗血管损伤,或者用于预防或治疗动脉粥样硬化。
6.一种检测RNA聚合酶I表达水平或功能活性,或者检测其抑制剂抑制效率的试剂在制备试剂盒中的应用,所述试剂盒用于诊断血管损伤后的再狭窄和血管平滑肌细胞增生性的血管疾病。
7.一种用于诊断血管损伤后的再狭窄和血管平滑肌细胞增生性的血管疾病的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括检测RNA聚合酶I表达水平或功能活性,或者检测其抑制剂抑制效率的试剂。
8.一种筛选预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的药物的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)将待测物质加入含有RNA聚合酶I的体系中;
(2)测定所述待测物质是否特异性抑制RNA聚合酶I的表达或者功能活性。
9.如权利要求8所述的一种筛选预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的药物的方法,其特征在于,预防或者治疗血管介入治疗后血管再狭窄的候选药物为与未加入待测物质的实验相比,能够特异性抑制RNA聚合酶I表达或者功能活性的待测物质。
10.权利要求1-2或6任一项的应用、权利要求3的组合物、权利要求4的药物洗脱支架、权利要求5的药物释放球囊、权利要求7的试剂盒、权利要求8的方法,其特征在于,所述的RNA聚合酶I的抑制剂是能够特异抑制RNA聚合酶I表达或者功能活性的任何物质;包括在细胞中特异抑制RNA聚合酶I表达或者功能活性的物质,或是与RNA聚合酶I具有特异性相互作用的物质;
优选的,所述RNA聚合酶I抑制剂选自RNA聚合酶I的小干扰RNA、硫代核苷或者硫代核苷的类似物或衍生物、放线菌素D或者放线菌素D的类似物或衍生物、CX-5461或者CX-5461的类似物或衍生物、BMH-21或者BMH-21的类似物或衍生物;
进一步优选的,所述RNA聚合酶I抑制剂为CX-5461。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710155932.7A CN106822900A (zh) | 2017-03-14 | 2017-03-14 | Rna聚合酶i的抑制剂在抑制血管损伤后再狭窄的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710155932.7A CN106822900A (zh) | 2017-03-14 | 2017-03-14 | Rna聚合酶i的抑制剂在抑制血管损伤后再狭窄的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106822900A true CN106822900A (zh) | 2017-06-13 |
Family
ID=59145247
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710155932.7A Pending CN106822900A (zh) | 2017-03-14 | 2017-03-14 | Rna聚合酶i的抑制剂在抑制血管损伤后再狭窄的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106822900A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109045304A (zh) * | 2018-04-13 | 2018-12-21 | 中山大学 | 一种携带Polymerase I抑制剂的核仁靶向纳米载体及其制备方法和应用 |
-
2017
- 2017-03-14 CN CN201710155932.7A patent/CN106822900A/zh active Pending
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
QING YE,ET AL: "Therapeutic Targeting of RNA Polymerase I With the Small-Molecule CX-5461 for Prevention of Arterial Injury-Induced Neointimal Hyperplais", 《ARTERIOSCLEROSIS,THROMBOSIS,AND VASCULAR BIOLOGY》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109045304A (zh) * | 2018-04-13 | 2018-12-21 | 中山大学 | 一种携带Polymerase I抑制剂的核仁靶向纳米载体及其制备方法和应用 |
CN109045304B (zh) * | 2018-04-13 | 2022-04-05 | 中山大学 | 一种携带Polymerase I抑制剂的核仁靶向纳米载体及其制备方法和应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20190247306A1 (en) | Articles and methods of treating vascular conditions | |
CN106822900A (zh) | Rna聚合酶i的抑制剂在抑制血管损伤后再狭窄的应用 | |
US11547702B2 (en) | Use of amlexanox | |
Genoni et al. | Use of the eSVS Mesh: external vein support does not negatively impact early graft patency | |
EP3763371B1 (en) | Methods of acute restoration of vascular compliance | |
Todiras et al. | Evaluation of endothelial dysfunction in vivo | |
US10856907B2 (en) | Atraumatic trocar medication delivery method | |
Yang et al. | In vivo quantitative assessment of catheter patency in rats | |
Rajiv et al. | Nanoburrs: a novel approach in the treatment of cardiovascular disease | |
CN107865983B (zh) | 一种药物支架及其制备方法 | |
El Tahaan et al. | Immediate outcomes of trans radial approach versus anatomical snuff box access for coronary procedures | |
Isaji et al. | The mouse aortocaval fistula model with intraluminal drug delivery | |
CN208892871U (zh) | 一种带末端血栓拦阻网的血管支架 | |
Yasuda et al. | New intraluminal coronary shunt tube for off-pump coronary artery bypass grafting | |
RU2760960C1 (ru) | Способ обработки дорзального венозного комплекса при позадилонной аденомэктомии | |
Leclère et al. | Microsurgery in liver research: end-to-side portocaval microanastomoses in dogfish | |
CN202843855U (zh) | 一种新型冠状动脉血管支架 | |
Chen et al. | Modified Intravascular Interventional Operation of Balloon-Bound Elastase Induction Method to Establish Rabbit Aneurysm Model Using Cardiovascular Angiography | |
Jing et al. | A causal analysis of intra-abdominal hemorrhage after reduced-size liver transplantation in rat | |
van den Bosch et al. | Fundamentals of Oculoplastic Surgery | |
AU2013245532B2 (en) | Articles and methods of treating vascular conditions | |
Zhou et al. | Aortic Arch Stenosis Caused by Minimally Invasive Surgery in Mouse Heart Failure Model. | |
Vriens et al. | Arterial clamping leads to stenosis at clamp sites after femoropopliteal bypass surgery | |
Yang et al. | A Rat Carotid Model with Direct Stent Implantation for the Study of Thrombosis and Restenosis | |
Byzov et al. | Simple rabbit model for vascular stent studies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170613 |