CN106727542A - 小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及异喹啉类生物碱的药物，具体涉及小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用。本发明所述的药物由小檗碱和药学上可以接受的辅料组成。其中，按重量百分数计算，小檗碱的含量为1％～99.5％。本发明所述的药物剂型是洗剂、喷雾剂、软膏剂、凝胶剂等外用制剂。本发明其功能明确、无毒副作用，拓宽了小檗碱防治疾病的范围，市场前景可观。

Description

小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用

技术领域

本发明涉及天然药物的技术领域，尤其涉及小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用。

背景技术

小檗碱，又称黄连素，是一种重要的生物碱，在我国应用历史悠久的中药(如黄连、黄柏、三颗针等)中都可以提取获得。在植物界中分布较广，大约有4个科10个属内发现有本品存在。临床应用主要为本品的盐酸盐和硫酸盐。我国现用合成法大量生产。小檗碱为广谱抗菌剂，并有加强白细胞吞噬金黄色葡萄球菌的作用，能对抗病原微生物，对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌及白喉杆菌等都有抑制作用。其中，对痢疾杆菌作用最强，常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。除此之外，具有降低血压及扩张冠状动脉的作用，对心脏有双相作用，小剂量兴奋，大剂量呈抑制状态；具有抗胆碱酯酶、增强乙酰胆碱的作用；有强大的抗箭毒作用；对血管平滑肌呈抑制作用，而对子宫、膀胱、支气管、胃肠平滑肌则呈兴奋作用。

急性软组织损伤系指人体运动系统、皮肤以下骨骼之外的组织所发生的一系列急性挫伤或(和)裂伤，包括肌肉、韧带、筋膜、肌腱、滑膜、脂肪、关节囊等组织以及周围神经、血管的不同情况的急性损伤。这些组织受到外来或内在的不同致伤因素的作用，造成组织急性破坏和组织生理功能的暂时紊乱而产生损伤。急性软组织损伤一般是受外来的机构应力的作用，当应力作用达到一定的强度超过软组织承受负荷，即能诱发损伤，产生症状，以肿胀、疼痛为主要表现。急性期，局部渗血、水肿，疼痛剧烈。晚期可能出现肌肉、肌腱的粘连、缺血性挛缩，关节周围炎，甚至引起关节僵直。通常可以通过镇痛、理疗、制动、中成药活血化淤等方法治疗。在受伤24小时内局部冷敷可以使皮毛血管收缩，组织水肿消退，起到止血消肿止痛的作用。对于软组织挫伤采用早期敷药方法治疗，有着非常好的疗效。患者往往在敷药后就能即时消肿止痛，敷药时的绷带固定，不仅能保持关节于受伤韧带松弛的位置，暂时限制肢体活动，还有利于损伤韧带的修复，从而缩短了治疗时间。

目前，尚无文献报道小檗碱可用于治疗急性软组织损伤，经检索，没有公开小檗碱用于治疗急性软组织损伤的专利文献，也没有将小檗碱作为治疗急性软组织损伤药物使用的制剂上市。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中的不足之处，提供小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用。小檗碱具有良好的抗炎消肿作用，可以有效的减少急性软组织损伤患者的炎症渗出液，缓解疼痛症状。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用，所述小檗碱的分子式为C20H18NO4，分子量是235.32，CAS登录号为2086-83-1。本发明所述的小檗碱可以从黄连、黄柏中提取得到，也可以由合成或其他方法制得。小檗碱可以通过商业购买获得，其提取或合成方法也有大量的文献报道；所述的黄连来源于毛茛科植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎，以上三种分别习称“味连”、“雅连”、“云连”；所述的黄柏来源于芸香科植物黄皮树的干燥树皮，习称“川黄柏”；芸香科植物黄檗的干燥树皮，习称“关黄柏”。急性软组织损伤的主要临床表现为疼痛、肿胀，尚无有关治疗急性软组织损伤的文献报道。

小檗碱具有良好的抗炎消肿作用，可以有效的减少急性软组织损伤患者的炎症渗出液，缓解疼痛症状，针对于急性软组织损伤有很好的治疗效果，不含任何有毒有害成分，既安全又有效。

更进一步地说明，按重量百分数计算，所述的药物中小檗碱的含量为1％～99.5％，其余为药学上可以接受的辅料；辅料可为防腐剂、溶剂、乳化剂或促渗剂等常规辅助物质。

更进一步地说明，所述的药物是常规制药设备可以制得的剂型。

更进一步地说明，所述的剂型为洗剂、喷雾剂、软膏剂和凝胶剂。同一药物，剂型不同，适用于疾病的发生发展阶段不同，不同剂型可根据疾病不同时期的症状和特点正确选用，如皮肤病，一般急性期局部有红肿、水疱、糜烂时，多选用溶液剂湿敷，可起到消炎作用；有渗液者，先用溶液剂湿敷，后用油剂；皮损处于亚急性期时，红肿减轻，渗液减少，可酌情选用洗剂，以发挥其消炎、止痒、收敛和保护作用；慢性期皮损增厚，多用软膏剂或凝胶剂，其穿透力强，作用持久，且有润滑护肤作用。

更进一步地说明，按重量百分数计算，所述的药物中小檗碱的含量为99.5％，此含量为最优含量，采用该含量所制备成的药物组合物在急性软组织损伤具有更优异的治疗效果。

本发明的有益效果：小檗碱具有抗微生物、抗心律失常、降血脂、降血糖、抗炎、抗肿瘤、镇静催眠等多种药理作用。小檗碱经皮肤给药浓度高，直达病所，除了起局部作用外，还可通过皮肤进人血液循环，发挥全身作用，有效缓解患者的疼痛、肿胀症状。另外，皮肤角质层还有贮存作用，使血药浓度曲线平稳，有超越一般给药方法独特的优点。通过小鼠热刺激试验、小鼠醋酸扭体试验、小鼠甲醛致痛试验、小鼠二甲苯耳肿胀试验、小鼠毛细血管通透性试验证明中药单体成分小檗碱具有抗炎、镇痛功效，通过临床实例证明其具有治疗急性软组织损伤的作用。本发明为治疗急性软组织损伤提供一种中药单体成分新药，其功能明确、无毒副作用，同时拓宽了小檗碱防治疾病的范围。

具体实施方式

下面通过具体实施例来对本发明方案进行详细说明。本领域技术人员应当理解，下列实施为优选实施例，其仅对本发明方案进行解释说明，而且其中可能会有对公知技术的适当省略，本领域技术人员应结合公知技术与实施例的说明，对本发明进行理解。

实施例1-洗剂的制备

配方：盐酸小檗碱(活性成分)10kg，羟苯乙酯(防腐剂)1kg，苯甲酸钠(防腐剂)2kg，蒸馏水适量(溶剂)。

制备方法：将活性成分和其它辅料溶解于蒸馏水中，定容至1000L，分装，灭菌，即得。

使用方法：纱布或棉签蘸取药液，清洗或湿敷患处，一日2次。

实施例2-洗剂的制备

配方：盐酸小檗碱(活性成分)11kg，羟苯乙酯(防腐剂)1kg，苯甲酸钠(防腐剂)2kg，蒸馏水适量(溶剂)。

制备方法：将活性成分和其它辅料溶解于蒸馏水中，定容至1000L，分装，灭菌，即得。

使用方法：纱布或棉签蘸取药液，清洗或湿敷患处，一日2次。

实施例3-洗剂的制备

配方：盐酸小檗碱(活性成分)13kg，羟苯乙酯(防腐剂)1kg，苯甲酸钠(防腐剂)2kg，蒸馏水适量(溶剂)。

制备方法：将活性成分和其它辅料溶解于蒸馏水中，定容至1000L，分装，灭菌，即得。

使用方法：纱布或棉签蘸取药液，清洗或湿敷患处，一日2次。

实施例4-喷雾剂的制备

配方：盐酸小檗碱(活性成分)10kg，冰片(促渗剂)1kg，蒸馏水(溶剂)适量。

制备方法：将活性成分和其它辅料(辅料可预先处理)溶解于蒸馏水中，定容至1000L，分装至喷雾器，灭菌，即得。

使用方法：均匀喷敷患处，一日2次。

实施例5-软膏剂的制备

配方：盐酸小檗碱(活性成分)1.0kg，硬脂酸(基质)2.4kg，单硬脂酸甘油脂(基质)1.4kg，白凡士林(基质)0.2kg，羊毛脂(基质)1.0kg，液体石蜡(基质)1.2kg，吐温(乳化剂)80 0.08kg，蒸馏水(溶剂)适量。

制备方法：取硬脂酸、单硬脂酸甘油脂、白凡士林和液体石蜡置小烧杯中，于水浴上加热至80℃左右，搅拌使熔化(油相)。另取吐温80和计算量蒸馏水置另一个小烧杯，于水浴上加热至约80℃，搅拌均匀(水相)。在同温下，将水相以细流加到油相中，并于水浴上不断顺方向搅拌成乳白色半固体状，再在室温下搅拌至近冷凝。取盐酸小檗碱置于软膏板上和研钵中，分次加入制得的O/W型乳化剂基质，研匀即得。

使用方法：均匀涂抹患处，一日2次。

实施例6-凝胶剂的制备

配方：盐酸小檗碱(活性成分)1.0kg，羟甲基纤维素钠(基质)1.2kg，甘油(保湿剂)2.0kg，苯甲酸钠(防腐剂)0.1kg，蒸馏水适量。

制备方法：取羟甲基纤维素钠置于置于研磨中，加入甘油研匀，然后边研匀边加入溶有苯甲酸钠和盐酸小檗碱的水溶液，待溶胀后研匀，即得。

使用方法：均匀涂抹患处，一日2次。

1、药效实验：镇痛作用

本部分实验对本发明的药物进行药效学研究。通过小鼠热刺激试验、小鼠醋酸扭体试验、小鼠甲醛致痛试验，观察小檗碱的镇痛作用。

1.1、实验材料和方法

1.1.1、小鼠热刺激致痛试验

昆明种雌性小鼠65只，体重18-22g，选取基础痛阈在5-30s之间的合格雌性小鼠，随机分成5组：空白对照组，扶他林阳性对照组，小檗碱高浓度组(10mg/ml)、中浓度组(5mg/ml)、低浓度组(2.5mg/ml)，每组13只。小鼠被放到预先加热至55℃左右的金属板上，以舔后足作为疼痛反映指标，观察给药前、后痛阈值的变化。每天给予相应的药物涂抹双足，连续给药5天，末次给药后测定0.5h、1h、1.5h、2h的小鼠痛阈值。

1.1.2、小鼠醋酸扭体试验

昆明种小鼠70只，体重18-22g，随机分成5组：空白对照组，扶他林阳性对照组，小檗碱高浓度组(10mg/ml)、中浓度组(5mg/ml)、低浓度组(2.5mg/ml)，每组15只。每天给予相应的药物涂抹腹部，连续给药5天，末次给药60min后，各组小鼠均腹腔注射0.7％醋酸0.1ml/10g，观察15min内小鼠的扭体反应次数。

1.1.3、小鼠甲醛致痛试验

昆明种小鼠70只，雌雄各半，体重18-22g，随机分为5组，分别为空白对照组、扶他林阳性对照组、小檗碱高浓度组(10mg/ml)、中浓度组(5mg/ml)、低浓度组(2.5mg/ml)，每组14只，连续给药5天，末次给药后60min各组动物以微量注射器在左后足底皮下注射2.5％甲醛溶液(50ul/只)后立即置入平底大玻璃容器内，观察小鼠舔后足的累计时间(观察时间为注射后0-10min和15-30min两个时间段)。

1.2、实验结果

1.2.1、小檗碱对热刺激致痛的影响

实验结果表明，扶他林给药组在给药后0.5h、1.5h与空白对照组比较有明显差异(P<0.05)，但小檗碱高、中、低剂量对热刺激引起的疼痛没有明显的镇痛作用。见表1。

表1、小檗碱对热刺激引起疼痛的影响(n＝13)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

1.2.2、小檗碱对醋酸扭体反应的影响

实验结果表明，小檗碱高、中剂量对醋酸引起的疼痛有明显的镇痛作用，与空白对照组比较，差异有显著性(P<0.05)。见表2。

表2、小檗碱对醋酸诱发扭体反应的影响(n＝14)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

1.2.3、小檗碱对甲醛引发小鼠疼痛的影响

实验结果表明，小檗碱高、中剂量对甲醛引起的舔足反应在0-10min有明显的缓解作用，与空白对照比较，差异有显著性(P<0.05)。见表3。

表3、小檗碱对甲醛诱发小鼠舔足反应的影响(n＝12)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

1.3、结论

小檗碱对小鼠热刺激致痛试验无明显镇痛作用，对甲醛、醋酸引起的疼痛有明显的镇痛作用。说明小檗碱具有一定的镇痛作用，对炎症引起的疼痛作用明显。

2、药效实验：抗炎作用

本部分实验对本发明的药物进行药效学研究。通过小鼠二甲苯耳肿胀试验、小鼠毛细血管通透性试验，观察小檗碱的抗炎作用。

2.1、实验材料和方法

2.1.1、小鼠二甲苯耳肿胀试验

小鼠随机分成5组：空白对照组，扶他林阳性对照组，小檗碱高浓度组(10mg/ml)、中浓度组(5mg/ml)、低浓度组(2.5mg/ml)，每组15只。连续给药7天，末次给药60min后，在小鼠左耳廓两面均匀涂抹二甲苯，右耳不涂为正常耳，30min后将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓边缘剪下左、右两耳，用直径为6mm的打孔器在左右两侧耳相同部位取下圆耳片，立即用分析天平称重，计算耳廓肿胀度，并计算耳肿胀抑制率。

2.1.2、小鼠毛细血管通透性试验

小鼠60只，雌雄各半，体重18-22g，随机分为5组，空白对照组，阳性对照组，小檗碱高浓度组(10mg/ml)、中浓度组(5mg/ml)、低浓度组(2.5mg/ml)，每组12只。上述各组小鼠连续给药7天，第7天给药后60min，小鼠尾静脉注射0.5％伊文思蓝(0.1ml/10g)，随后立即腹腔注射0.6％醋酸(0.1ml/10g)，20min后脱臼处死，每只小鼠腹腔用6ml生理盐水冲洗，吸取腹腔液，3000rpm离心15min，取上清液于紫外分光光度计上590nm测定OD值。

2.2、实验结果

2.2.1、小檗碱对二甲苯小鼠耳肿胀的影响

实验结果表明，与空白对照比较，小檗碱高、中、低剂量对二甲苯引起的耳肿胀有显著的抑制作用(P<0.01)，提示小檗碱对炎性渗出肿胀有显著的抑制作用。见表4。

表4、小檗碱对二甲苯耳肿胀的影响(n＝15)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.2.2、小檗碱对醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增加的影响

实验结果表明，小檗碱高剂量组对醋酸引起的毛细血管通透性增加有明显的抑制作用，与空白对照比较，差异有显著性(P<0.05)。见表5。

表5、小檗碱对小鼠毛细血管通透性的影响(n＝15)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.3、结论

小檗碱对二甲苯引起的耳肿胀及醋酸引起的毛细血管通透性增加有显著的抑制作用，说明小檗碱具有抗炎作用。

3、临床疗效观察：治疗急性软组织损伤

本部分实验对本发明的药物进行临床疗效观察。通过急性软组织损伤症状、体征及实验室检查，观察比较小檗碱的治疗效果。

3.1、临床资料与方法

选取符合急性软组织损伤诊断的临床病例200例。其中，男性105例，女性95例；年龄最大60岁，最小15岁；损伤部位为躯干或四肢。随机分为2组，一组采用扶他林治疗，作为对照组；另一组选用小檗碱制剂治疗，作为试验组。观察比较对照组和试验组的治疗效果。

3.2结果

实验结果表明，小檗碱治疗急性软组织损伤效果优于扶他林，总有效率为97％，结果见表6。与扶他林相比，小檗碱可有效减轻患者的肿胀和创面，周径差较小(P<0.05)，瘀斑消减迅速(P<0.01)，见表7。

表6两组疗效的比较

表7两组常见的急性软组织损伤症状、体征及实验室检查比较(n＝100)

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；同组内与治疗前比较，#P<0.05，##P<0.01。

3.3结论

小檗碱可用于治疗急性软组织损伤。相比扶他林，小檗碱起效快、疗效好，更具临床优势。

综上所述，本发明的小檗碱具有良好的抗炎消肿作用，可以有效的减少急性软组织损伤患者的炎症渗出液，缓解疼痛症状。

本发明的小檗碱具有抗微生物、抗心律失常、降血脂、降血糖、抗炎、抗肿瘤、镇静催眠等多种药理作用。小檗碱经皮肤给药浓度高，直达病所，除了起局部作用外，还可通过皮肤进人血液循环，发挥全身作用，有效缓解患者的疼痛、肿胀症状。另外，皮肤角质层还有贮存作用，使血药浓度曲线平稳，有超越一般给药方法独特的优点。通过小鼠热刺激试验、小鼠醋酸扭体试验、小鼠甲醛致痛试验、小鼠二甲苯耳肿胀试验、小鼠毛细血管通透性试验证明中药单体成分小檗碱具有抗炎、镇痛功效，通过临床实例证明具有治疗急性软组织损伤的作用。本发明为治疗急性软组织损伤提供一种中药单体成分新药，其功能明确、无毒副作用，拓宽了小檗碱防治疾病的范围，市场前景可观。

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用，其特征在于，按重量百分数计算，所述的药物中小檗碱的含量为1％～99.5％，其余为药学上可以接受的辅料。

3.根据权利要求1所述的小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用，其特征在于，所述的药物是常规制药设备可以制得的剂型。

4.根据权利要求3所述的小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用，其特征在于，所述的剂型为洗剂、喷雾剂、软膏剂和凝胶剂。

5.根据权利要求1所述的小檗碱在制备治疗急性软组织损伤的药物中的应用，其特征在于，按重量百分数计算，所述的药物中小檗碱的含量为99.5％。