CN106470543A - 具有高花色素苷水平的胡萝卜植物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及胡萝卜植物或其部分，其根包含至少2000μg/g FW的平均总花色素苷水平以及任选的中等水平的晕圈和分区，并涉及胡萝卜变种NUN 89682 CAC的植物及其种子和子代。本发明还涉及通过传统育种方法产生胡萝卜植物的方法。本发明还涉及用于产生在其遗传物质中含有一种或多种转基因的胡萝卜植物的方法。

Description

具有高花色素苷水平的胡萝卜植物

技术领域

本发明涉及植物育种领域。特别地，本发明提供了在根中具有高花色素苷水平的胡萝卜植物。本发明还提供了被命名为NUN 89682 CAC(或“NUN 89682”或“89682”或NUN89682杂种(hybrid)或89682 F1或NUN 89682 F1)的新的且不同的胡萝卜变种(variety)，并提供了用于这些植物的育种方法。

背景技术

胡萝卜是二年生植物，在春季和夏季生长出莲座叶，同时建立粗壮的直根，其为植物在第二年开花存储了大量的糖。开花的茎生长为数分米(例如60-200cm)高，具有产生被称为分果瓣的果实的白色花的伞形花序。

胡萝卜(野生胡萝卜栽培亚种(Daucus carota subsp.sativus))是根用蔬菜，通常为橙色，虽然存在紫色、红色、白色和黄色变种。其在新鲜时有松脆质地。胡萝卜最常食用的部分是直根，尽管绿叶也是可食用的。它是原产于欧洲和西南亚的野生胡萝卜(Daucuscarota)的驯化形式。已选择性培育驯化的胡萝卜，以使其极大地增大且更可口、具有更少的木质纹理的可食用直根。2011历年胡萝卜和萝卜的世界产量约为3565.8万吨(联合国粮食及农业组织(FAO))。

植物育种者的目的是将所需形状合并到单一变种中。这些所需性状可包括种植者和/或消费者认为有益的任何性状，包括更高的产量、对昆虫或病害的抗性、对环境胁迫的耐受性和营养价值。

总花色素苷水平是这种所需性状的一个实例。花色素苷是具有已知抗氧化活性的多酚，所述抗氧化活性可能负责一些生物活性，包括预防心血管疾病、糖尿病、关节炎和癌症或降低心血管疾病、糖尿病、关节炎和癌症的风险。然而，这样的性质、它们的稳定性和生物利用度取决于它们的化学结构(Miguel 2011Journal of Applied PharmaceuticalScience 01(06)第07-15页)。

可以通过自花授粉和选择类型而获得育种系的均一群体(population)。由此获得的植物在几乎所有基因座上均变为纯合的，即纯合植物。杂交两种具有不同基因型的这样的植物产生了许多基因座是杂合的杂种植物的均一群体。另一方面，在多个基因座处各自杂合的两个植物的杂交产生了在遗传上不同且不均一的植物群体。由于这种不均一性，这样的植物的性能是不可预测的。

因此，育种者更喜欢开发可以杂交以产生均一变种的纯合近交植物。谱系育种和重复选择是已经用于从育种群体中开发近交植物的育种方法的实例。那些育种方法将来自两种或更多种植物或各种其他广泛来源的遗传背景组合成育种库(breeding pool)中，通过自交和选择所需表型可以从所述育种库来开发新品系和由其衍生的杂种。评估新的品系和杂种以确定这些中的哪些具有商业潜力。

迄今为止，育种尝试已经提供了许多具有有益性状的有用的胡萝卜品系，然而，本领域仍然非常需要具有进一步改善的性状的新品系。因此，需要具有性状或颜色的特定组合的新的胡萝卜变种。

发明内容

本发明的目的是开发具有深紫色外皮和高花色素苷含量的成熟根的Imperator型变种。

一方面，本发明提供了被命名为NUN 89682 CAC，已经以登录号NCIMB 42144保藏的新胡萝卜(Daucus carota)变种的种子，通过生长所述种子产生的植物或其部分。本发明还提供了涉及胡萝卜变种NUN 89682 CAC的植物、植物部分、种子和子代的方法和组合物。

变种NUN 89682 CAC与比较变种Deep Purple最相似，其为由Bejo生产和销售的变种。然而，当在相同环境条件下生长时，NUN 89682 CAC与Deep Purple的区别在于以下(也参见表1)列出的一个或多个(例如至少两个，至少三个)，任选地全部形态学和/或生理学特征：

-(平均)根核心厚度(在横截面的中点处)，其比Deep Purple的核心厚度大至少约12％，或优选至少约13％、14％、15％、16％、17％、18％，或甚至约19％；

-在中点处的(平均)根直径，其比Deep Purple的中点处的直径小至少约7.5％，或优选至少约10％、11％、12％、13％、14％，或甚至约14.9％；

-(平均)胡萝卜根长度(减去直根)，其比Deep Purple的胡萝卜长度少至少约5％，或优选至少约5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％，或甚至约8.3％；

-核心和皮层(cortex)的紫色横截面内部颜色，其比Deep Purple的核心和皮层两者的紫色横截面内部颜色更深，例如，NUN 89682的RHS灰紫色N186A对比RHS灰紫色N186B；

-在市场成熟度(market maturity)下根的微弱的晕圈(haloing)和分区(zoning)，而Deep Purple的根在市场成熟度下表现出显著的晕圈和分区。

变种NUN 89682 CAC和Deep Purple之间的其他差异表明，当在相同环境条件下生长时，NUN 89682 CAC与Deep Purple的显著区别也在于以下(也参见表1)列出的一个或多个(例如至少两个，至少三个)，任选地全部形态学和/或生理学特征：

-从冠部到第一羽片的叶柄长度，其比Deep Purple的叶柄长度大例如至少约5％，优选地大至少约6％、7％、8％或甚至约9％；

-介于非常光滑和浅凹之间的表面光滑度，而Deep Purple具有浅凹的表面；

-在市场成熟度下根的圆肩，而Deep Purple具有更方形的肩；

-在收获期比Deep Purple更浅的中绿(medium green)叶颜色，例如RHS黄绿色147A，而Deep Purple具有深绿色叶，例如RHS黄绿色146A；

-在收获期比Deep Purple更粗的叶的叶片分隔，例如中等叶片分隔对比细微叶片分隔；

-在收获期叶的叶柄中少量存在花色素苷，而Deep Purple在收获期叶的叶柄中大量存在花色素苷(如图1所示)；

-在收获期没有叶柄短柔毛，而Deep Purple在收获期存在叶柄短柔毛。

本发明提供了被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物变种，所述变种的代表性种子已经以NCIMB登录号42144保藏，以及提供了所述新变种的植物部分，例如植物的种子、叶、花粉、胚珠、直根、根和细胞。

本发明还涉及杂种胡萝卜NUN 89682 CAC的种子，所述变种的代表性种子已经以登录号NCIMB 42144保藏，通过生长所述种子产生的植物或其部分。或具有NUN 89682 CAC的全部或基本上全部生理学和形态学特征的胡萝卜植物。

本发明还涉及使用胡萝卜变种NUN 89682 CAC的植物或种子的育种方法。

本发明还提供了胡萝卜植物，其根包含至少约2000μg/g FW(鲜重)的花色素苷水平和中等水平的晕圈和分区。

从以下详细描述中，本发明的其它目的、特征和优点将变得显而易见。然而，应当理解，所提供的详细的描述和任何具体实施例虽然指示本发明的具体实施方案，但是仅以举例说明的方式给出，因为根据该详细描述在本发明的精神和范围内的各种改变和修饰对本领域技术人员来说将变得显而易见。

附图说明

本文所描述的附图仅用于举例说明的目的，且不意欲以任何方式限制本发明的范围。

图1分别说明了在NUN 89682 CAC和Deep Purple的叶柄中存在/不存在花色素苷。

具体实施方式

本发明提供了胡萝卜植物或其部分，所述植物的根在市场成熟度下包含至少约2000μg/g FW(鲜重)的平均总花色素苷水平和任选的中等水平的晕圈和分区。本发明还涉及这些植物的植物部分，例如植物的种子、叶、花粉、胚珠、直根、根和细胞。在另一方面，植物部分包括植物的叶、花粉、胚珠、直根、根和细胞。在另一方面，植物部分是根。

本发明还包括本发明植物的植物种子，即从其中可以生长出胡萝卜植物的种子，所述胡萝卜植物的根包含至少2000μg/g FW(鲜重)的平均总花色素苷水平和任选的中等水平的晕圈和分区。

在一个方面，本发明的植物(即其根包含至少2000μg/g FW的平均总花色素苷水平的胡萝卜植物)是杂种(例如F1杂种或三系杂交杂种)。

在另一个实施方案中，本发明涉及本发明的植物，即胡萝卜植物，其根包含至少2000μg/g FW的平均总花色素苷水平，其中赋予所述总花色素苷水平的遗传元件可获自(或可源自或获自、源自，例如)胡萝卜变种NUN 89682 CAC，NUN 89682 CAC的种子的代表性样品已经以NCIMB登录号42144保藏。

在另一个实施方案中，本发明涉及本发明的植物，即胡萝卜植物，其根包含至少2000μg/g FW的平均总花色素苷水平，其中赋予所述总花色素苷水平以及所述晕圈和分区水平的遗传元件可获自(或可源自或获自、源自，例如)胡萝卜变种NUN 89682 CAC，NUN89682 CAC的种子的代表性样品已经以NCIMB登录号42144保藏。

在另一方面，本发明的胡萝卜植物的根具有至少约2100μg/g FW(鲜重)的总平均花色素苷水平，优选至少约2200μg/g FW、2250μg/g FW、2300μg/g FW、2350μg/g FW、2400μg/gFW，或甚至至少约2450μg/g FW。

在本文中涉及变种NUN 89682 CAC的本说明书的所有部分，例如育种、子代、植物部分、细胞、种子、EDV鉴定的发展等，也能够以更一般的方式应用，即应用于通过传统育种方法将NUN 89682 CAC的赋予高花色素苷水平的遗传元件转移到其它胡萝卜品系或变种的方法，以及应用于通过该方式获得的并且具有至少约2000μg/g FW(鲜重)的平均总花色素苷水平和任选的中等水平的晕圈和分区的胡萝卜品系或变种。因此，本发明不仅涉及上述胡萝卜植物，而且还涉及细胞、组织、植物部分、种子、EDV、子代、转化的胡萝卜植物等，它们包含可获自(获自；如存在于)NUN 89682 CAC的赋予高花色素苷含量的遗传决定因子和任选的赋予微弱的晕圈和分区的遗传元件。

通过使NUN 89682 CAC与另一胡萝卜植物杂交并选择保留高花色素苷水平和任选的中等水平的晕圈和分区的子代胡萝卜植物，可以将至少2000μg/g FW(鲜重)的高花色素苷性状(赋予该性状的遗传元件)转移到任何胡萝卜品系或变种。选择可以是表型上的，即通过生长子代植物并分析(平均)花色素苷含量/成熟胡萝卜根鲜重及任选的晕圈和分区，然后选择平均总花色素苷水平为至少约2000μg/g FW(鲜重)和任选的中等水平的晕圈和分区的子代植物。替代地或额外地，选择可利用与赋予所述性状的基因或基因座连锁的分子标记物，即标记物辅助的选择。

本发明提供了被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物变种，其具有高花色素苷性状和中等水平的晕圈和分区，所述变种的代表性种子已经以NCIMB登录号42144保藏，以及提供了所述新变种的植物部分，例如植物种子、叶、花粉、胚珠、直根、根和细胞。在另一方面，植物部分包括植物的叶、花粉、胚珠、直根、根和细胞。在另一方面，植物部分是根。还提供了具有这种植物的全部或基本上全部生理学和形态学特征的胡萝卜植物，即当在相同条件下生长时，在表1的形态学和/或生理学特征中与NUN 89682 CAC没有(统计学上)显著差异的胡萝卜植物。

本发明还涉及杂种胡萝卜NUN 89682 CAC的种子(所述变种的代表性种子已经以登录号NCIMB 42144保藏)，通过生长所述种子产生的植物或其部分(例如根)。或当在相同条件下生长时具有NUN 89682 CAC的全部或基本上全部生理学和/或形态学特征的胡萝卜植物。可以将本发明的胡萝卜种子(即由其可以生长出变种NUN 89682 CAC的植物的种子)以本发明的胡萝卜种子的基本同质的群体形式提供。种子的基本同质的群体通常没有大量的其他种子。因此，具有NUN 89682 CAC的全部或基本上全部生理学和/或形态学特征的杂种NUN89682 CAC或胡萝卜植物的种子可以定义为构成所有种子的至少约97％，包括至少约98％、99％或更多的种子。可以单独生长种子群体以提供本发明的胡萝卜植物的基本同质的群体。还提供了植物或植物部分，例如种子(在植物NUN 89682 CAC上产生，例如在自花传粉或由另一胡萝卜植物杂交授粉后)，通过生长本发明的种子产生的叶、花粉、胚珠、直根、根或细胞。在另一方面，植物部分是根。

在另一方面，本发明涉及一种变种，其具有至少一种、两种或三种(统计学上显著)不同于NUN 89682 CAC的生理学和/或形态学特征，且其还具有被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物的基本上全部生理学和形态学特征，其种子的代表性样品已经以登录号NCIMB42144保藏。

在另一方面，本发明涉及一种变种，其具有至少一个或两个显著不同于NUN 89682CAC的生理学和/或形态学特征，且其还包含NUN 89682CAC的如下定义的区别特征1)-5)中的至少3、4或5或更多个(或全部)，或优选NUN 89682 CAC的区别特征1)-11)中的至少3、4、5、6、7、8、9、10或全部11个，和/或具有被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物的基本上全部生理学和形态学特征，其可通过从被命名为NUN 89682 CAC的植物群体中选择天然或诱导的突变体、或体细胞克隆变体或天然变体而获得。

在另一方面，本发明提供了当在相同条件下生长时在胡萝卜植物NUN 89682 CAC的区别特征1)-5)方面无显著差异的胡萝卜植物或其部分。在另一方面，本发明涉及胡萝卜植物或其部分，当在相同条件下生长时其在胡萝卜植物NUN 89682 CAC的区别特征1)-5)方面无显著不同，并且额外包含(即未在统计学上显著不同于)胡萝卜植物NUN 89682 CAC的区别特征6)-11)中的至少一个、两个、三个或全部。

在另一方面，本发明涉及胡萝卜植物或其部分，当在相同条件下生长时，其与胡萝卜植物NUN 89682 CAC在表1的任何生理学和/或形态学特征中无显著差异。

在另一方面，本发明涉及胡萝卜植物或其部分，当在相同条件下生长时，其与胡萝卜植物NUN 89682 CAC在以下任何区别特征(参见USDA描述符(USDA descriptor))中无显著差异：1)在横截面中点处的平均根核心厚度；2)在中点处的平均根直径；3)平均胡萝卜长度(减去直根)；4)核心和皮层的横截面内部颜色；5)在市场成熟度下的根的晕圈和分区。

在另一方面，本发明提供了胡萝卜植物，当在相同条件下生长时，其与NUN 89682CAC在至少一种形态学和/或生理学特征上具有统计学上的显著差异，但其在以下特征中与NUN 89682 CAC无显著差异(参见USDA描述符)：1)在横截面中点处的平均根核心厚度；2)在中点处的平均根直径；3)平均胡萝卜长度(减去直根)；4)核心和皮层的横截面内部颜色；5)在市场成熟度下的根的晕圈和分区。

在另一方面，本发明提供了胡萝卜植物，当在相同条件下生长时，其与NUN 89682CAC在至少一种形态学和/或生理学特征上具有统计学上的显著差异，但其在以下特征中与NUN 89682 CAC无显著差异(参见USDA描述符)：1)在横截面中点处的平均根核心厚度；2)在中点处的平均根直径；3)平均胡萝卜长度(减去直根)；4)核心和皮层的横截面内部颜色；5)在市场成熟度下的根的晕圈和分区；并且当在相同条件下生长时，其还与被命名为NUN89682 CAC的植物在以下特征中的一个、两个、三个或更多个特征中无显著差异：6)从冠部到第一羽片的叶柄长度；7)直根的平均长度；8)叶片颜色(在收获期)；9)叶片分隔(在收获期)；10)在收获期的叶柄花色素苷水平和在收获期的叶柄短柔毛；11)在肩部的平均根直径。

在另外的实施方案中，本发明提供了胡萝卜植物，当在相同条件下生长时，其与被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物(所述胡萝卜植物的代表性种子已经以登录号NCIMB42144保藏)在至少一个、两个、三个、四个或五个形态学和/或生理学特征中具有(统计学上显著的)差异，其中所述形态学和/或生理学特征是表1中的那些特征。因此，当在相同条件下生长时，所述胡萝卜植物与NUN 89682 CAC在表1的任何形态学和/或生理学特征中无统计学显著差异，或仅在表1的形态学和/或生理学特征中的一个、两个、三个、四个或五个中具有差异，而在其他特征中无显著差异。

在一个实施方案中提供了被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物，当在相同的环境条件下生长时，其与由以登录号NCIMB 42144保藏的种子生长出的植物在表1的任何形态学和/或生理学特征中无(统计学上显著的)差异。

在本发明的另一方面，本发明提供了本发明的胡萝卜植物的可再生细胞的组织培养物或细胞培养物。所述组织培养物或细胞培养物优选地能够再生出能够表达起始植物的全部生理学和/或形态学特征的胡萝卜植物，以及能够再生出具有与起始植物基本相同的基因型的植物。当在本文概述的参照表1数据的环境条件下生长时，杂种NUN 89682 CAC的一些生理学和/或形态学特征的实例包括本文表1所示的那些性状。这种组织或细胞培养物中的可再生细胞可以来自例如胡萝卜外植体，例如胚、分生组织、叶柄、插条、原生质体、子叶、花粉、叶、节、花药、根、直根、根尖、雌蕊、花、种子和茎。另外，本发明提供了从本发明的组织培养物或细胞培养物再生的胡萝卜植物。这些植物具有本发明的植物的全部生理学和/或形态学特征。

在另一方面，上述胡萝卜植物可从体外细胞或组织培养物获得。如本申请中其他地方已经公开的，体外细胞或组织培养物是本领域中已知的，并且可用于无性繁殖从中获得所述细胞或组织的植物，或用于鉴定和/或选择表型变体(例如EDV)，并用于再生出这样的变体。表型变体可以是例如体细胞克隆变体，突变体或非典型变体(off-type)，但优选地是遗传上稳定的。因此，变体表型优选地是遗传上稳定的，在从细胞或组织培养物再生出的成熟植物中也是如此。这意味着，表型变体不显示短暂的且遗传上不稳定的表型变异。一旦选择，然后进而可使用体外细胞或组织培养物或者通过种子繁殖来对这样选择的变体进行纯种(true to type)繁殖。

因此，在一方面，本发明提供了一种胡萝卜植物，其从NUN 89682CAC细胞或组织克隆繁殖(它是无性生殖物)，并且当在相同环境条件下生长时，其包含NUN 89682 CAC的全部区别特征。在另一方面，其还包括一个或多个其他区别特征。在另一方面，其包含如表1中给出的NUN 89682 CAC的全部形态学和/或生理学特征。在另一方面，除了其与NUN 89682 CAC在表1的一个、两个、三个、四个或五个形态学和/或生理学特征中显著不同以外，其包含如表1中给出的NUN 89682 CAC的全部形态学和/或生理学特征。

本发明还涉及无性繁殖本发明植物的方法。在某些实施方案中，所述方法包括以下步骤：(a)收集能够从本发明的植物繁殖的组织或细胞；(b)培养所述组织或细胞以获得增殖的幼苗；和(c)使所述增殖的幼苗生根以获得生根的小植株。步骤(b)和(c)还可以颠倒，即首先培养所述组织以获得根，然后培养所述组织以获得幼苗，从而获得生根的小植株。然后可以进一步生长生根的小植株以获得植物。在一个实施方案中，所述方法还包括步骤(d)从所述生根的小植株生长出植物。

在本发明的另一方面，本发明提供了用于产生胡萝卜种子、植物和根的方法，该方法通常包括使第一亲本胡萝卜植物与第二亲本胡萝卜植物杂交，其中所述第一或第二亲本胡萝卜植物中的至少一个是本发明的植物。

本发明的一个实施方案涉及产生胡萝卜植物的方法，其包括使变种NUN 89682 CAC的胡萝卜植物与第二胡萝卜植物杂交一次或多次，例如一次、两次、三次、四次、五次、六次或更多次。在一个实施方案中，该方法包括从所述杂交选择子代。

这些方法可以进一步示例为用于制备杂种胡萝卜种子或植物的方法，其中第一胡萝卜植物与具有不同、独特的基因型的第二胡萝卜植物杂交，以提供亲本之一为NUN 89682CAC植物的杂种。

本发明还提供了通过包括使第一亲本胡萝卜植物与第二亲本胡萝卜植物杂交的方法产生的胡萝卜种子和植物，其中所述第一或第二亲本胡萝卜植物中的至少一个是本文提供的植物，例如来自变种NUN 89682 CAC。在本发明的另一个实施方案中，通过所述方法产生的胡萝卜种子和植物是通过使本发明的植物与另一种不同的植物杂交产生的第一子代(F1)胡萝卜种子和植物。本发明还涉及这种F1杂种胡萝卜植物的植物部分及其使用方法。因此，本发明的某些示例性实施方案提供了F1杂种胡萝卜植物及其种子。

在本发明的另一个实施方案中，使胡萝卜变种NUN 89682 CAC杂交以产生被命名为NUN 89682 CAC的变种的杂种种子。在本文的任何杂交中，任一亲本可以是雄性或雌性亲本。在这些方法中，杂交将导致种子的产生。无论种子是否被收集，种子产生都会发生。

在某些实施方案中，本发明提供了将所需性状引入胡萝卜植物的方法，其包括以下步骤：

(a)使变种NUN 89682 CAC的植物与包含所需性状的第二胡萝卜植物杂交以产生F1子代，

(b)选择包含所需性状(例如一个、两个、三个或更多个所需性状)的F1子代，

(c)任选地使F1子代自交一次或多次以产生F2、F3或进一步的自交子代，

(d)使选择的F1子代或自交子代与变种NUN 89682 CAC的植物杂交以产生回交子代，和

(e)选择包含所需性状并且另外具有胡萝卜变种NUN 89682 CAC的全部或基本上全部生理学和形态学特征的回交子代，

(f)任选地，步骤(d)和(e)可以连续重复一次或多次，例如三次或更多次，例如三次、四次、五次、六次或七次，以产生包括所需性状的更高的回交子代(例如，选择的第四、第五、第六、第七或第八或更高的回交子代)。

本发明还提供了由这些方法产生的胡萝卜植物；NUN 89682 CAC的种子的代表性样品已经以NCIMB登录号42144保藏。

在本发明的另一方面，本发明提供了包含附加的可遗传性状(除了NUN 89682 CAC的全部形态学和/或生理学特征之外)或改良的可遗传性状的变种NUN 89682 CAC的胡萝卜植物，例如NUN 89682 CAC的基本衍生变种(例如突变体或非典型变体，天然变体或体细胞克隆变体)，其具有与NUN 89682 CAC不同的一个、两个或三个生理学和/或形态学特征，并且其另外具有NUN 89682 CAC的全部生理学和形态学特征，其中变种NUN 89682 CAC的种子的代表性样品已经以NCIMB登录号42144保藏。可遗传性状可包含例如显性或隐性等位基因的遗传基因座。在本发明的一个实施方案中，本发明的植物被定义为包含单个基因座转化。例如，使用赋予一种或多种新的目的性状的不同等位基因，在任何特定基因座渗入一个、两个、三个或更多个可遗传性状。在本发明的具体实施方案中，所述单基因座转化赋予一种或多种性状，例如除草剂耐受性、昆虫抗性、病害抗性以及植物代谢和代谢物谱(profile)的调节。在另外的实施方案中，所述性状可由以下赋予：通过回交被引入到变种基因组中的天然基因、天然或诱导的突变、体细胞克隆变体、非典型变体，或通过遗传转化技术被引入到植物或其任何前代祖先中的转基因。当通过转化引入时，遗传基因座可以包含在单个染色体位置整合的一个或多个基因。因此，本发明包括产生包含附加的所需性状的植物的方法，所述方法包括将赋予所需性状的转基因引入胡萝卜变种NUN 89682 CAC的植物中。

在另一方面，本发明提供了确定本发明植物的基因型的方法，其包括在植物的基因组中检测至少第一多态性。在某些实施方案中，所述方法可以包括在植物的基因组中检测多个多态性。例如，从植物获得核酸样品，并在所述核酸中检测一个多态性或多个多态性。所述方法还可以包括将检测多个多态性的步骤的结果存储在计算机可读介质上。

在本发明的一个实施方案中，本发明提供了用于产生源自NUN 89682CAC的变种的种子的方法，其包括以下步骤：(a)使变种NUN 89682 CAC的胡萝卜植物与第二胡萝卜植物杂交；和(b)允许形成变种NUN 89682CAC来源的胡萝卜植物的种子。该方法可以进一步包括以下步骤：(c)使从所述变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜种子生长出的植物与其自身或第二胡萝卜植物杂交，以产生额外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜种子；(d)生长所述步骤(c)的额外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜种子以产生额外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜植物；和任选地(e)重复所述(c)和(d)的杂交和生长步骤以产生额外的变种NUN 89682CAC来源的胡萝卜植物，例如一次或多次，例如两次、三次、三次或更多次，例如四次、五次、六次、七次或甚至更多次。例如，所述第二胡萝卜植物是近交的胡萝卜变种，或者，所述步骤c)中的第二胡萝卜植物是NUN 89682 CAC或者NUN 89682 CAC的雄性或雌性亲本植物。

在另一方面，本发明提供了产生源自变种NUN 89682 CAC的植物或种子的方法，所述方法包括以下步骤：(a)通过使变种NUN 89682 CAC的植物与第二植物杂交来制备源自所述变种的子代植物，和(b)允许形成变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜植物的种子。在一个实施方案中，所述第二植物是近交系的植物或野生胡萝卜的野生近缘种(accession)。

所述方法可以额外地包括：(c)使由所述变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜种子生长出的植物与其自身或第二胡萝卜植物杂交，以产生额外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜种子；(d)生长所述步骤(c)的额外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜种子以产生额外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜植物；和任选地(e)重复所述(c)和(d)的杂交和生长步骤以产生另外的变种NUN 89682 CAC来源的胡萝卜植物。例如，步骤(c)和(d)可以重复一次或多次，例如一次、两次、三次、四次、五次或六次、七次、八次、九次、十次或更多次，以产生源自上述起始变种的另外的植物。源自变种NUN 89682 CAC的另外的植物可以是近交变种，并且上述重复的杂交步骤可以定义为包括足够的近交来产生近交变种。在所述方法中，可能需要选择得自步骤(c)的特定植物以用于步骤(b)和(c)的连续杂交。通过选择具有一种或多种所需性状的植物，获得具有起始植物的一些所需性状以及潜在的其它选择性状的植物。

在某些实施方案中，本发明提供了生产胡萝卜根的方法，其包括：(a)获得本发明的植物，其中所述植物已经被栽培至成熟，和(b)收集来自所述植物的胡萝卜根。

本发明还提供了食品或饲料产品，其包括本文所述的植物部分(优选胡萝卜根或其部分)和/或来自本文所述的植物部分的提取物，或者由本文所述的植物部分(优选胡萝卜根或其部分)和/或来自本文所述的植物部分的提取物组成。所述食品或饲料产品可以是新鲜的或经加工的，例如罐装(canned)、蒸煮(steamed)、煮熟(boiled)、油炸(fried)、沸水烫白(blanched)和/或冷冻(frozen)等。

在另一个实施方案中，本发明涉及通过本发明的植物的自交产生的种子或植物。

在另一方面，本发明涉及包装，例如容器、袋等，其包括以下的至少一种：被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜变种的种子或种子丸(seed pellet)，被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物、其部分(例如根)，被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物的子代、其部分，被命名为NUN 89682 CAC的植物的EDV或其部分。

在一个实施方案中，本发明的任何植物包括以下(平均)形态学和/或生理学特征的至少3、4、5或更多个：1)在横截面中点处的平均根核心厚度，其为至少约10mm，或优选至少约11mm、12mm、13mm、14mm，或甚至约14.5mm；2)在中点处的直径，其为至少约15mm，或优选至少约16mm、17mm、18mm、19mm、20mm、21mm，或甚至约21.2mm；3)胡萝卜长度(减去直根)，其为至少约15cm，或优选至少约16cm、17cm、18cm、19cm、20cm、21cm，或甚至约22cm；4)核心和皮层的紫色横截面内部颜色，例如，RHS灰紫色N186A；5)在市场成熟度下根的微弱的晕圈和微弱的分区；6)从冠部到第一羽片的平均叶柄长度，其为至少约30cm，或优选至少约31cm、32cm、33cm、34cm、35cm、36cm、37cm、38cm，或甚至约39cm；8)直根的平均长度约57.6cm，例如约47至67cm或甚至约53至62cm；8)叶的中绿色(在收获期)，例如，RHS黄绿色146A；9)叶的中等叶片分隔(在收获期)；10)在收获期叶柄花色素苷的少量存在，以及在收获期没有叶柄短柔毛；11)在肩部的平均直径约32.8mm，例如约30mm至36mm或甚至约28mm至38mm。

在另一方面，在市场成熟度下，本发明的胡萝卜植物的根的白利糖度水平为约9.82％，例如约8％至11％。

另一方面涉及胡萝卜植物或其部分，当在相同条件下生长时其具有胡萝卜变种NUN89682 CAC的胡萝卜植物全部或基本上全部生理学和/或形态学特征。

本发明还提供的是被命名为NUN 89682 CAC的胡萝卜植物的一种或多种子代植物(子代(offspring)或后代(descendant))，其通过用被命名为NUN 89682 CAC的所述变种进一步育种而获得。当在相同环境条件下生长时，所述子代植物具有变种NUN 89682 CAC的基本上全部生理学和/或形态学特征。在一个实施方案中，所述子代植物具有以下(平均)特征(参见USDA描述符)中的3、4、5、6、7、8或更多个或全部：

·Imperator型；

·直立植物习性，

·从肩部到冠部顶部的植株顶部高度为约57.9cm，例如约52至62cm，或约54至60cm，或者甚至约56.9至58.9cm；

·植物顶部颈部直径为约15mm，优选约15.2mm；

·中等绿色叶片颜色；

·中等叶片分隔；

·叶片长度为约31.3cm，例如约26至36cm，或约28至34cm，或者甚至约30.3至32.3cm；

·从冠部到第一羽片的叶柄长度为约39.4cm，例如约34至44cm，或约36至42cm，或者甚至约38.4至40.4cm；

·叶柄中少量存在的花色素苷水平；

·根皮层厚度为约4.4mm，例如约3.9至4.9mm，或约4.1至4.7mm，或者甚至约4.3至4.5mm；

·直根的平均长度为约57.6mm，例如约52至62mm，或约54至60mm，或甚至约56.6至58.6mm；

·具有肩部和外皮的紫色地下外部颜色的根；

·具有紫色核心颜色的根；

·具有紫色皮层颜色的根。

·在肩部处的平均直径为约32.8mm，例如约30mm至36mm，或甚至约28mm至38mm。

除非特别指出，本文讨论的关于本发明的一个方面的任何实施方案也适用于本发明的其它方面。

常规定义

在本文的描述和表中，使用了许多术语。为了提供对说明书和权利要求的清楚和一致的理解，提供了以下定义：

术语“约”用于指示数值包括用于测定该值的装置或方法的误差的标准偏差。

权利要求中使用的术语“或”用于表示“和/或”，除非明确指出仅指替代项或替代项是相互排斥的，尽管本公开内容支持仅指替代项以及指“和/或”的定义。

当在权利要求中与词语“包括”或其它开放式语言结合使用时，除非特别注明，词语“一”和“一个”表示“一个或多个”。

术语“包含”、“具有”和“包括”是开放式连接动词。这些动词中的一个或多个的任何形式或时态，例如“包含(comprise)”、“包含(comprising)”、“具有(has)”、“具有(having)”、“包括(include)”和“包括(including)”也是开放式的。例如，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个步骤的任何方法不限于仅具有那些一个或多个步骤，并且还涵盖其他未列出的步骤。类似地，“包含”、“具有”或“包括”一种或多种性状的任何植物不限于仅具有那些一种或多种性状，并且涵盖其它未列出的性状。上述术语也包括限于具体实施方案的术语“含有(contain)”。因此，当术语“包含”、“具有”和“包括”用于描述植物、其部分或方法时，本发明的一个实施方案是指其中使用限制性术语“含有”的实施方案。

在本文中“胡萝卜”是指物种胡萝卜(Daucus carota)的植物和其部分，例如(可食用的)根。胡萝卜最常食用的部分是根，尽管绿叶部分也是可食用的。胡萝卜是根用植物，根(胡萝卜根)通常是橙色的，虽然也存在紫色、红色、白色和黄色变种。在胡萝卜根的顶端是细的直根，而在胡萝卜根的另一端(基部)连接着绿叶部分。

“栽培胡萝卜”是指人工栽培的并具有良好农学特征的胡萝卜(Daucus carota)植物，即物种胡萝卜的变种、育种品系或栽培种；优选地，这样的植物不是“野生植物”，即通常比栽培植物具有更差的产量和更差的农学特征且例如在野生群体中自然生长的植物。“野生植物”包括例如物种的生态型、PI(植物引种)品系、地方品种或野生种或野生近缘种。

“USDA描述符”是在“Objective description of Variety Carrot Daucuscarota”，ST-470-78(如由美国农业部、农产品营销服务、科技、植物品种保护局出版的，贝尔茨维尔，MD 20705(可在万维网atams.usda.gov/AMSv1.0/上获得)中描述胡萝卜的植物变种描述符，并且其可以从万维网ams.usda.gov/AMSv1.0/getfile？dDocName＝STELDEV3002673上下载。

“UPOV描述符”是在“Guidelines for the Conduct of Tests forDistinctness,Uniformity and Stability”，TG/49/8(日内瓦2007)——如由UPOV(国际保护新品种和植物联盟，可在万维网upov.int上获得)出版的——中描述胡萝卜的植物变种描述符，并且其可以从万维网在upov.int/edocs/tgdocs/en/tg049.pdf上下载，其以引用的方式全部纳入本文中。

“RHS”是指英国皇家园艺学会，其根据定义的编号系统公布了定量地鉴定颜色的官方植物色彩图表。该图表可以从Royal Horticulture Society Enterprise Ltd RHSGarden；Wisley，Woking；Surrey GU236QB，UK购买，例如RHS颜色图表：2007(皇家园艺学会，慈善号：222879，PO Box 313London SW1P2PE；由例如TORSO-VERLAG，ObereGrüben 8，D-97877Wertheim销售，货号：Art62-00008EAN-Nr.:4250193402112)。

“核心”是指根的韧皮部和木质部，即中心维管组织。“皮层”是指围绕核心组织的非维管组织。

“基因型”是指细胞或生物体的遗传组成。

“表型”是指细胞或生物体的可检测特征，其特征是基因表达的表现。

如本文所用，术语“植物”包括整个植物或其任何部分或衍生物(优选地与获得其的植物具有相同的遗传组成)，例如植物器官(例如收获或未收获的胡萝卜根)、植物细胞、植物原生质体、由其可再生完整植物的植物细胞和/或组织培养物、植物愈伤组织、植物细胞团、植物移植物、幼苗、下胚轴、子叶、植物中完整的植物细胞、植物克隆或微繁殖体、或植物部分(例如收获的组织或器官)，例如植物插条、无性繁殖体、胚、花粉、胚珠、花、叶、种子、克隆繁殖的植物、根、直根、茎、根尖、移植物、这些中任一种的部分等。还包括任何发育阶段，例如幼苗、生根之前或之后的插条、成熟植物、根或叶。或者，植物部分还可以包括包含源自亲本植物的一组或两组染色体的植物种子。

“收获的植物材料”在本文中是指已经被收集用于进一步储存和/或进一步使用的植物部分(例如从整株植物分离的根)。

“收获的种子”是指从品系或变种(例如，自花受精或异花受精后产生的并收集的品系或变种)收获的种子。

具有“(基本上)全部生理学和/或形态学特征”的植物是指这样的植物，即当在相同环境条件下生长时，具有衍生出其的NUN 89682 CAC植物的基本上全部或全部生理学和/或形态学特征的植物，例如祖先植物(progenitor plant)、亲本、回归亲本、用于组织或细胞培养的植物等。技术人员将理解，当在相同的环境条件下生长所述变种时，应进行胡萝卜变种之间的比较。例如，当在本文概述的参照表1数据的环境条件下生长时，植物可以具有表1中提及的全部特征。在某些实施方案中，除了某些特征(例如所提到的一种、两种或三种例如源自转化或引入的基因或性状的特征)之外和/或除了在EDV中不同的特征之外，具有“基本上全部生理学和/或形态学特征”的植物是具有表1的全部生理学和/或形态学特征的植物。因此，除了表1的一种、两种或三种特征之外，植物可具有表1中提及的全部特征，其中植物可因此不同。

具有一种或多种或全部“必需的生理学和/或形态学特征”或一种或多种“区别特征”(例如一种、两种、三种、四种或五种)的植物是指当在相同环境条件下生长时，具有(或保留)一或多种、或全部表1中提及的区别特征，或除一种、两种或三种区别特征以外保留表1中提及的全部区别特征的植物，所述区别特征将NUN 89682 CAC与最类似变种DEEPPURPLE区分开。例如，这些区别特征选自(但不限于)：1)在中点横截面处的平均根核心厚度，2)在中点处的平均根直径，3)胡萝卜长度(减去直根)，4)核心和皮层的横截面内部颜色，5)在市场成熟度下的根的晕圈和分区，6)从冠到第一羽片的叶柄长度，7)直根的平均长度，8)在收获期叶的叶片颜色，9)在收获期的叶的叶片分隔，10)在收获期的叶柄花色素苷水平和叶柄短柔毛，11)在肩部的平均根直径(参见USDA描述符)。

当在相同环境条件下测量时，上述生理学和/或形态学特征通常在1％、5％、8％或10％显著性水平下评价。例如，当在相同环境条件下生长时，NUN 89682 CAC的子代植物可以具有表1中列出的NUN 89682 CAC的一种或多种(或全部，或除了一种、两种或三种以外的全部)必需生理学和/或形态学特征，或如在1％或5％显著性水平下测定的表1和上文所列出的NUN 89682 CAC的区别特征中一种或多种或全部(或除了一种、两种或三种以外的全部)。

“基本上等同”或“无显著差异”或“无显著不同”的生理学和/或形态学特征是指当进行比较时，不显示出与平均值的统计学显著性差异(例如，使用ANOVA时，p≥0.05)的(数值)特征。反之，“显著不同”或“统计学显著不同”是指当进行比较时，确实显示出与平均值的统计学显著性差异(例如，使用ANOVA时，p<0.05)的特征。

所有数值区别特征在p≤0.05时是统计学显著不同的。

如本文所用，术语“变种”或“栽培种”是指在最低已知等级的单一植物分类单位中的植物分组，不论是否充分满足授予育种者权利的条件，其分组均可以通过由给定的基因型或基因型的组合导致的特征的表达来定义，通过表达至少一种所述特征与任何其他植物分组区分开，并且被认为是关于其适于进行不变繁殖的单位。

在本文中，术语“基因转化”或“转化植物”是指通常通过回交而开发的胡萝卜植物，其中除了通过回交技术或通过遗传工程转移到亲本中的一种或多种基因以外，还基本上恢复了(recover)亲本的全部所需的形态学和/或生理学特征。同样，“单基因座转化的(转化)植物”是指通常通过包括回交或由回交组成的植物育种技术开发的植物，其中除了通过例如回交技术和/或通过遗传转化已转移到变种中的单个基因座的特征以外，恢复了胡萝卜变种的基本全部所需形态学和生理学特征。同样，双基因座转化的植物/三基因座转化植物是指除了分别在两个或三个基因座上含有来自不同变种的遗传物质(例如，等位基因)以外，具有给定变种的基本上所有所需形态学和/或生理学特征的植物。

一种变种被称为“基本衍生变种”(EDV)，即，在以下情况下应被认为基本上衍生自另一变种——“初始变种”：(i)其主要源自初始变种，或源自本身主要源自初始变种的变种，同时保留由初始变种的基因型或基因型的组合导致的必需特征的表达；(ii)它与初始变种是明显可区别的；和(iii)除了由衍生作用产生的差异外，它在由初始变种的基因型或基因型的组合导致的必需特征的表达中与初始变种一致。因此，EDV可以通过以下方式获得：例如通过天然或诱导的突变体的选择、或体细胞克隆变体或非典型变体的选择、或从初始变种的植物中对(天然)变异个体的选择、回交、或通过遗传工程的转化。这样的变体可以在任何时间选择，例如在田间或温室中，在育种期间、在细胞或组织的体外培养期间或之后、在植物再生期间等。因此，术语EDV还包括源自NUN 89682 CAC种子、植物组织或细胞的“表型变体”。在一个实施方案中，EDV是基因转化的植物。

“植物品系”是例如可用于开发一个或多个变种的育种品系。

“杂种变种”或“F1杂种”或“杂种”是指两种非同基因植物杂交的第一子代的种子。例如，通过两个近交亲本系杂交而获得杂种或F1杂种。三系杂交杂种是作为F1杂种的一个亲本与另一个来自近交系的亲本之间杂交的结果。

本文所用的“子代”(或“后代”)是指源自被命名为NUN 89682 CAC的植物的植物。可以通过以下方式获得子代：通过被命名为NUN 89682 CAC的植物的细胞培养物或组织培养物或植物部分的再生，或被命名为NUN 89682 CAC的植物的自交，或通过产生被命名为NUN 89682 CAC的植物的种子。在另外的实施方案中，子代还可以包括通过以下方式获得的植物：使至少一种被命名为NUN 89682 CAC的植物与另一种相同萝卜植物或另一变种或(育种)品系杂交、或与野生胡萝卜植物杂交，回交，向植物中插入基因座或选择包含突变的植物或选择变体。子代是例如第一代子代，即子代是通过例如传统育种方法(自交和/或杂交)或再生而直接源自、获自、可获自或可衍生自亲本植物。然而，术语“子代”通常包括进一步的世代，例如第二、第三、第四、第五、第六、第七或更多世代，即通过例如传统育种方法、再生或遗传转化技术而源自、获自、可获自或可源自以前世代的植物的世代。例如，可以通过任何上述方法从第一代子代产生第二代子代。特别地，本文包括NUN 89682 CAC的子代，其是EDV或其保留了表1中列出的NUN 89682 CAC的全部(或除了1、2或3个以外的全部)生理学和/或形态学特征，或其保留了本文其他地方和表1中描述的NUN 89682 CAC的全部(或除了1、2或3个以外的全部)区别特征。

术语“传统育种技术”在本文中包括育种者已知的杂交、自交、选择、双单倍体产生、胚拯救、原生质体融合、标记物辅助的选择、突变育种等(即，除了遗传修饰/转化/转基因方法之外的方法)，通过这些育种技术，例如，可以将遗传上可遗传的性状从一个胡萝卜品系或变种转移到另一个。

“杂交”是指两个亲本植物的交配。

“异花授粉”是指通过来自不同植物的两个配子的联合进行的授粉。

“回交”是用于将性状引入植物品系或变种的传统育种技术。含有所述性状的植物称为供体植物，并且将性状转移到其中的植物称为回归亲本。在供体亲本和回归亲本之间进行初始杂交以产生子代植物。然后将具有所述性状的子代植物与回归亲本杂交。在几代回交和/或自交后，回归亲本包含供体的性状。以这种方式产生的植物可以称为“单一性状转化的植物”。

“自交”是指植物的自花授粉，即将花粉从花药转移到同一植物的柱头。

“再生”是指从细胞培养物或组织培养物的发育或无性繁殖出植物。

“无性繁殖”、“无性生殖”或“克隆繁殖”在本文中可互换使用，是指取植物部分并使该植物部分形成至少根的方法，其中植物部分例如定义为或源自(例如通过插条)叶、花粉、胚、子叶、下胚轴、细胞、节、原生质体、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽尖、芽、茎、叶柄等。当整个植物是通过无性繁殖再生时，其也称为无性繁殖物。

术语“基因座”是指其中例如存在基因或遗传标记物的染色体上的特定位置或位点。“连锁”或“遗传连锁”是在染色体上位置彼此邻近的基因或分子标记物在减数分裂期间一起遗传的倾向。基因座彼此更接近的基因或分子标记物在染色体交换期间不太可能被分离到不同的染色单体上，并因此被称为是遗传连锁的。

“标记物”或“分子标记物”是指可容易地检测的DNA序列或核苷酸，其可以与基因或基因座遗传上紧密连锁。这种紧密连锁的标记物可用于基因或基因座的MAS(标记物辅助的选择)。

“标记物辅助的选择”或“MAS”是利用遗传连锁到特定基因座或特定染色体区域的分子标记物的存在来选择存在特定基因座或区域的植物的方法。

术语“等位基因”是指在特定基因座上的基因的任何一种或多种替代形式，所有这些等位基因均涉及在特定基因座上的一种性状或特征。在生物体的二倍体细胞中，给定基因的等位基因位于染色体上的特定位置或基因座上。一个等位基因存在于同源染色体对的每个染色体上。二倍体植物物种可以在特定基因座上包含大量不同的等位基因。这些可以是基因的相同等位基因(纯合的)或两个不同的等位基因(杂合的)。

如本文所用，术语“抗性”和“耐受性”可互换使用以描述对特定的生物害虫、病原体、非生物影响或环境条件没有表现出症状或表现出显著减轻的症状的植物。这些术语也用于描述显示一些症状但仍能够产生具有可接受产量的可销售产品的植物。“组织培养物”是指包含相同或不同类型的分离的细胞或组织的组合物，或被组织成植物部分的这些细胞的集合。

“转基因”或“嵌合基因”是指包含已经通过转化被引入到胡萝卜植物的基因组中的DNA序列的遗传基因座。包含稳定整合到其基因组中的转基因的植物称为“转基因植物”。

“平均”在本文中是指算术平均值。

术语“平均值”是指数次测量的算术平均值。技术人员理解植物的外观在一定程度上取决于所述植物的生长条件。因此，本领域技术人员将知晓本文所述的胡萝卜的典型生长条件。如果在本申请中没有另外指明，该平均值是指对至少10个不同的、随机选择的变种或品系的植物或植物部分的测量的算术平均值。

如本文所用，术语“花色素苷”是指具有糖基的花色素类，主要是花色素类的3-葡糖苷，尽管其它3-糖苷和5-糖苷也是已知的(Stintzing et al J.,2002,Agric FoodChem.第50卷第6172-6181页)。花色素苷可以细分为无糖花色素苷元和花色素苷糖苷。响应于pH变化而发生的化学结构的差异是花色素类通常用作pH指示剂的原因，因为它们从在酸中的红色变为在碱中的蓝色(即碱性环境例如pH>7或>8或甚至pH>9或>10或>11)。

术语“总花色素苷水平”或“总花色素苷含量”是指在市场成熟度下胡萝卜根中的花色素苷的量。每当提及“总花色素苷水平”时，指的是花色素的所有糖苷一起的结合水平，而不是鉴定单独的花色素苷。胡萝卜根的不同部分可以含有不同水平的花色素苷，例如取样根肩部对比根尖将得到不同的结果。胡萝卜的中间部分(顶部和肩部之间)给出了胡萝卜主要部分的花色素苷水平的良好样品。总花色素苷水平也可以在某种程度上取决于试验位置和取样时刻(例如生长阶段)，然而当在相同条件下测量时，基因型之间的变化保持相对稳定，并且基因型的排序不改变。

可以使用本领域中已知的方法测定每个胡萝卜的总花色素苷水平，所述方法例如通过纯化新鲜胡萝卜(整个胡萝卜根，不包括直根)，任选地加入内标如锦葵色素-3-半乳糖苷氯化物以测定提取效率，用10％甲酸的甲醇溶液提取5次，离心提取液并合并上清液。然后可以通过HPLC测定花色素苷，例如通过使用C18柱以及10％甲酸水溶液的流动相A和甲醇的流动相B(使用0至55％的B梯度)。可以通过将保留时间和UV或MS光谱与已知的花色素苷进行比较来鉴定花色素苷。可以从氰化-3-葡糖苷制备用于定量花色素苷的标准反应曲线。

术语“赋予总花色素苷水平的遗传元件”是指负责在胡萝卜植物根中的总花色素苷水平的所有基因。

术语“赋予晕圈和分区水平的遗传元件”是指负责在胡萝卜植物根中的晕圈和分区水平的所有基因。

赋予特定性状的遗传元件可以例如使用本领域中已知的方法确定，例如全外显子组测序(也称为靶向外显子组捕获)，其是涉及使用测序技术和序列组装工具将基因组的所有编码部分拼接到一起的方法。然后将该序列与参考基因组比较，并注意任何差异。在过滤出所有已知的多态性、同义变化和内含子变化(不影响剪接位点)之后，仅剩下可能影响性状的变体。该技术可以与其他技术组合以进一步排除被鉴定到一次以上的可能影响性状的变体。或者，可以使用遗传方法，例如基因作图或定量性状分析(使用例如由Michelmore等人描述的混合分组分析(Bulk Segregant Analysis)(Proc Natl Acad Sci U SA.1991November 1；88(21):9828–983))来鉴别确定性状的基因和与确定性状的基因或基因组区域连锁的分子标记物的数量和位置。

“中等水平的晕圈”或“微弱水平的晕圈”是指在范围“无”-“微弱”-“显著”上的“微弱”晕圈水平，如在NUN 89682 CAC中观察到的，其小于在具有显著晕圈水平的变种DeepPurple中的晕圈水平。

“中等水平的分区”或“微弱水平的分区”是指在“无”-“微弱”-“显著”上的分区水平，如在NUN 89682 CAC中观察到的，其小于在具有显著分区水平的变种Deep Purple中的分区水平。

涉及NUN 89682 CAC的(育种)方法可同样应用于其它胡萝卜变种，例如本发明的胡萝卜植物中的那些其根包含至少2000μg/g FW的平均总花色素苷水平的胡萝卜变种，除非另有(明确的或隐含的)说明。逻辑上，在以这样的方法获得的子代中的性状将根据起始材料而变化。

种子

本发明还提供了胡萝卜变种NUN 89682 CAC的种子，即可以生长出该变种的种子。

在一个实施方案中，将多个NUN 89682 CAC种子包装到小的和/或大的容器(例如袋、纸盒、罐等)中。种子可以用一种或多种化学化合物和/或生物防治剂处理(例如为了改善萌发，杀虫的、杀螨的、杀线虫的或杀真菌的化合物或组合物等)，和/或种子可以被引发(prime)。生物防治剂是保护种子或幼苗抵抗病原体的一种或多种微生物。例如，细菌和/或真菌菌株，例如链霉菌属(Streptomyces)、假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)和肠杆菌属(Enterobacter)物种的细菌，或拟茎点霉属(Phomopsis)、外生菌根(Ectomycorrhizae)、木霉属(Trichoderma)、枝孢霉属(Cladosporium)和胶霉属(Gliocladium)物种的真菌。

引发是在种子上进行的以增加从土壤中萌发和出苗(emergence)的均一性，并因此增强植物直立建立(stand establishment)的水基方法。如何引发胡萝卜种子的方法是本领域中公知的，参见WO2008/107097，其描述了可以使用的不同引发方法，例如水引发(包括鼓筒引发)、渗透引发和固体基质引发。引发过程也可以与化合物或组合物和/或生物防治剂处理相结合，因此种子可以例如在第一步中水合、在第二步中干燥并在第三步中用一种或多种种子处理化合物或组合物处理。引发有时也称为种子调节(seed conditioning)。

水引发包括其中允许种子短时间或在低温下吸收水的那些技术，主要是在充足的水供应下。这些技术有时也称为浸泡或浸渍。对于渗透引发，将种子暴露于渗透溶液(参见例如WO2008/107097)。

对于固体基质引发(SMP)，将种子与水和固体载体混合。固体载体的实例是蛭石和硅藻土产品。水被种子吸收以及被吸附在固体颗粒表面上，其以这种方式控制种子的水吸收。除了使用颗粒状载体之外，还可以使用湿毛巾、麻布袋、湿砂、无菌堆肥或压滤泥浆(press mud)以及其他载体进行SMP。

因此，一方面提供了NUN 89682 CAC的种子，其中所述种子是引发的种子并且/或者化学和/或生物方法处理的种子，包括一种或多种化学化合物或组合物和/或一种或多种生物防治剂，其选自：改善萌芽的化合物、杀虫化合物、杀螨化合物、杀线虫化合物和杀真菌化合物。

用本发明的胡萝卜植物进行的育种

本发明的一个方面涉及使本文提供的胡萝卜变种与其本身或第二胡萝卜植物杂交的方法，以及通过这些方法产生的种子和植物。这些方法可用于繁殖本文提供的变种，或可用于产生杂种胡萝卜种子和由其生长出的植物。这样的杂种种子可以通过使两个亲本品系或变种杂交以产生杂种变种而产生。

在本发明的一个实施方案中，“杂交”的第一步包括种植第一和第二亲本胡萝卜植物的种子，它们通常邻近以使得授粉将例如通过昆虫媒介介导发生。或者，可以人工转移花粉。当植物是自花传粉时，授粉可以发生而不需要除植物栽培之外的直接人为干预。

第二步可以包括将第一和第二亲本胡萝卜植物的种子栽培或生长成开花植物。第三步可以包括防止植物的自花授粉。为了相同的目的，可将自交不亲和性系统或雄性不育(核或细胞质雄性不育)用于一些杂种作物中。在杂种胡萝卜变种的生产中，广泛使用细胞质雄性不育(CMS)(参见Simon et al.2008，下文)。CMS亲本系与雄性能育亲本系的花粉交叉授粉。从CMS亲本系收获F1种子，即从其中生长出杂种胡萝卜变种的种子。然后在包装销售之前，可将它们干燥并清洁、引发、制粒(pelleted)和/或用化合物(例如杀真菌剂、杀线虫剂、杀虫剂等)处理。

杂种杂交的第四步可以包括第一和第二亲本胡萝卜植物之间的异花授粉。在某些实施方案中，可以手工或通过使用昆虫媒介转移花粉。另一步包括从至少一种亲本胡萝卜植物中收获种子。可以生长所收获的种子以产生胡萝卜植物或杂种胡萝卜植物。

使用一种或多种起始变种开发新变种是本领域中公知的。根据本发明，通过使用 细胞质雄性不育(CMS)来培育胡萝卜中的新的杂种杂交(参见例如在Simon et al.2008， “Carrot”章节，第327-357页中的第337-338页；在手册“Vegetables II-Handbook of Plant Breeding”第2卷，2008中；ISBN 978-0-387-74108-6)。

同样根据本发明，根据这样的公知的方法，可以通过使本发明的植物杂交，随后进行多代育种来产生新的品种。可以通过与任何第二植物杂交来产生新变种。在选择这样的第二植物杂交以开发新变种时，可能需要选择那些本身表现出一种或多种所选择的所需特征或当在杂种组合中时表现出所需特征的植物。一旦已经进行初始杂交，进行近交和选择以产生新变种。对于均一变种的培育，通常涉及五代或更多代的自交和选择。

新变种的均一变种也可以通过双单倍体的方式进行开发。这种技术允许产生真正的育种变种，而不需要多代自交和选择。以这种方式，真正的育种变种可以在短至一代中产生。可以使用单倍体细胞，例如微孢子、花粉、花药培养物或子房培养物。然后可以自主地或通过化学处理(例如秋水仙素处理)将单倍体细胞的染色体加倍。从双单倍体细胞获得可育的纯合植物。根据本发明，任何这样的技术可以与本发明的植物及其子代联用以得到纯合变种。

回交也可用于改良近交植物。回交将一个或多个可遗传性状从一个近交或非近交来源转移到缺乏这些性状的近交植物中。确切的回交方案将根据被改变的特性或性状以确定适当的试验方案。当在本发明的上下文中使用术语变种NUN 89682 CAC时，这也包括经修饰以包括至少第一所需可遗传性状(例如一个、两个或三个所需可遗传性状)的植物。

这可以例如通过首先使优良近交植物(回归亲本)与供体近交植物(非回归亲本)杂交而实现，所述供体近交植物在与目的性状相关的一个或多个基因座上携带适当的遗传信息(例如等位基因)。然后将该杂交的子代与回归亲本回交，随后在所得子代(第一回交代或BC1)中选择待从非回归亲本中转移的所需的性状。在选择了所需性状的5个或更多个回交世代后，子代在控制被转移的特征的基因座上是杂合的，但是对于大多数或几乎所有其他基因座而言其类似于优良的亲本。最后的回交代将自交以产生对于被转移的性状而言的纯育种子代。

贡献一个或多个所需特征的亲本胡萝卜植物称为非回归亲本，因为其可在回交方案中使用一次，因此不需要再出现。其中转移了来自非回归亲本的基因座或多个基因座的亲本胡萝卜植物被称为回归亲本，因为它在回交方案中使用几轮。

已经鉴定了许多单基因座性状，其在新的近交植物的开发中没有被经常选择，但是可以通过回交技术来改进。单基因座性状可以是或可以不是转基因的；这些性状的实例包括但不限于雄性不育，除草剂抗性，对细菌、真菌或病毒病害的抗性，昆虫抗性，雄性能育性的恢复，经修饰的脂肪酸或碳水化合物代谢以及增强的营养品质。这些包括通常通过细胞核遗传的基因。

在单个基因座(例如等位基因)以显性方式作用的情况下，可以应用直接选择或筛选。例如，当选择提供对细菌病害的抗性的显性等位基因时，可以在回交之前用细菌接种初始杂交的子代。然后所述接种淘汰了不具有抗性的那些植物，并且只有具有抗性等位基因的那些植物用于随后的回交。然后对所有额外的回交代重复该过程。

尽管当被转移的特征是显性等位基因时回交方法被简化，但隐性、共显性和数量等位基因(quantitative allele)也可以被转移。在这种情况下，可能需要引入对子代的测试以确定是否所需的基因座已被成功转移。在非回归变种不是纯合的情况下，F1子代将不是等同的。如果相应的性状在杂合或半合子状态下是表型可检测的，则可以在表型上选择在目的基因座上具有所需基因型的F1植物。在隐性等位基因将被转移并且相应的性状在杂合或半合子状态下不是表型可检测的情况下，所得子代可以自交或与供体回交以产生用于选择目的的分离群体。也可以使用非表型试验。然后可将从分离群体中选择的子代与回归亲本杂交以产生第一回交代(BC1)。

分子标记物也可以用于帮助鉴定含有所需性状并已恢复高百分比的回归亲本的遗传补体(genetic complement)的植物。用于育种的胡萝卜植物的选择不一定取决于植物的表型，而是可以基于遗传调查。例如，可以利用与目的性状密切遗传连锁的合适的遗传标记物。这些标记物之一可用于鉴定特定杂交的后代中性状的存在或不存在，并且可用于选择进行继续育种的子代。这种技术通常被称为标记物辅助的选择。能够鉴定目的性状在植物中相对存在或不存在的任何其他类型的遗传标记物或其他测定也可用于育种目的。适用于胡萝卜育种的标记物辅助的选择的方案是本领域中公知的。这种方法在隐性性状和可变表型的情况下，或者常规测定可能更昂贵、耗时或以其他方式不利的情况下将特别有用。可以根据本发明使用的遗传标记物的类型包括但不必限于：简单序列长度多态性(SSLP)、简单序列重复(SSR)、随机扩增的多态DNA(RAPD)、DNA扩增指纹(DAF)、序列特征性扩增区(SCAR)、随机引发的聚合酶链式反应(AP-PCR)、扩增片段长度多态性(AFLP)和单核苷酸多态性(SNP)。

胡萝卜变种也可以由两个以上的亲本培育。该技术(称为经修饰的回交)在回交过程中使用不同的回归亲本。可以使用经修饰的回交来用具有某些更需要的特征的变种替换原始回归亲本，或者可以使用多个亲本以从每一个获得不同的所需特征。

本发明的品种特别良好地适合于基于变种的遗传背景的优良性质的新变种的开发。出于开发新的胡萝卜变种的目的，在选择第二植物与NUN89682 CAC杂交时，将通常优选地选择那些本身表现出一种或多种选择的所需特征的植物，或者当在杂种组合中时表现出所需特征的植物。所需特征的实例可包括但不限于：除草剂耐受性，病原体抗性(例如昆虫抗性，线虫抗性，对细菌、真菌和病毒病害的抗性)，细胞质雄性不育(CMS)，改善的收获特征，增强的营养质量，增加的抗氧化剂含量，改进的加工特性，高产量，与胡萝卜根味道、质地、尺寸、形状、耐久性、保质期和产量相关的改善的特征，增加的可溶性固体含量，均匀成熟，延迟成熟或早熟，幼苗活力，对土壤条件的适应性和对气候条件的适应性。

通过遗传工程获得的本发明植物

可以通过回交引入以及直接引入到植物中的许多有用的性状是通过遗传转化技术引入的那些。因此，遗传转化可以用于将选择的转基因插入到本发明的胡萝卜变种中，或者用于制备含有转基因的变种，所述转基因随后可以通过杂交转移到目的变种中。用于植物(包括胡萝卜)转化的方法是本领域技术人员公知的。可用于胡萝卜的遗传转化的技术包括但不限于农杆菌介导的转化、微粒轰击、通过原生质体的直接DNA吸收和电穿孔。

最常见的系统利用农杆菌介导的转化将基因基因座引入到胡萝卜(Daucuscarota)的植物细胞中(参见例如Rafal Baranski，2008)。该技术的优点是可以将DNA引入到整个植物组织中，从而避免了需要从原生质体再生完整植物。现代农杆菌转化载体能够在大肠杆菌(E.coli)以及农杆菌(Agrobacterium)中复制，便于操作。此外，用于农杆菌介导的基因转移的载体中的最近的技术进步已经改进了载体中的基因和限制性酶切位点的排列，以利于能够表达各种多肽编码基因的载体的构建。所述载体具有便利的多接头区域，其两侧具有用于直接表达插入的多肽编码基因的启动子和聚腺苷酸化位点。另外，含有带甲(armed)和卸甲(disarmed)的Ti基因的农杆菌可用于转化。

可以引入到本发明的胡萝卜变种中的示例性核酸包括，例如，来自另一物种的DNA序列或基因，或甚至来自相同物种或存在于相同物种中但是通过遗传工程方法而不是标准的繁殖或育种技纳入到受体细胞中的基因或序列。然而，术语“外源的”还意指通常不存在于被转化的细胞中，或可能只是不以如在转化的DNA片段或基因中发现的形式、结构等存在的基因，或通常存在并且期望以不同于天然表达方式的方式表达(例如过表达)的基因。因此，术语“外源”基因或DNA意指引入到受体细胞中的任何基因或DNA片段，而不论相似基因是否已经存在于这样的细胞中。包括在外源DNA中的DNA类型可以包括已经存在于植物细胞中的DNA、来自另一植物的DNA、来自不同生物体的DNA或外部产生的DNA，例如含有基因反义信息的DNA序列，或编码基因的合成或修饰形式的DNA序列。

数百种(如果不是数千种)不同的基因是已知的并且可能被引入到本发明的胡萝卜植物中。可以被选择引入到胡萝卜植物中的特定基因和相应表型的非限制性实例包括针对昆虫耐受性(例如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)(B.t.)基因)、真菌病害耐受性、除草剂耐受性(例如赋予草甘膦耐受性或草铵膦耐受性的基因)的一个或多个基因，以及针对质量改善的基因，所述质量改善例如产量，营养增强，环境或胁迫耐受性，或在植物生理、生长、发育、形态或植物产品中的任何所需变化。

本发明的另一方面涉及本发明的胡萝卜植物变种的遗传补体。词组“遗传补体”用于指核苷酸序列的聚集体，其表达定义了(在本案中)胡萝卜植物的表型或该植物的细胞或组织的表型。遗传补体因此代表细胞、组织或植物的遗传构成，杂种遗传补体代表杂种细胞、组织或植物的遗传构成。因此，本发明提供了具有根据本文公开的胡萝卜植物细胞的遗传补体的胡萝卜植物细胞，以及含有此类细胞的植物、种子和植物。

植物遗传补体可以通过遗传标记物谱，以及通过遗传补体的表达所特有的表型性状的表达(例如基因表达谱、基因产物表达谱和同工酶分型谱)来评估。应当理解，本发明的植物或其第一代子代可以通过许多公知的技术中的任一种来鉴定，例如简单序列长度多态性(SSLP)、随机扩增的多态DNA(RAPD)、DNA扩增指纹(DAF)、序列特征性扩增区(SCAR)、随机引发的聚合酶链式反应(AP-PCR)、扩增片段长度多态性(AFLP)(参见例如EP 534858)和单核苷酸多态性(SNP)。

在另一方面，本发明提供了杂种遗传补体，其如由胡萝卜植物细胞、组织、植物和种子代表，其由本发明的胡萝卜植物的单倍体遗传补体与第二胡萝卜植物(优选另一种不同的胡萝卜植物)的单倍体遗传补体的组合而形成。在另一方面，本发明提供了从包含本发明的杂种遗传补体的组织培养物中再生出的胡萝卜植物。

保藏信息

由Nunhems B.V.在2013年5月8日根据布达佩斯条约在NCIMB Ltd.,FergusonBuilding，Craibstone Estate，Bucksburn，Aberdeen AB21 9YA，United Kingdom(NCIMB)保藏了变种NUN 89682 CAC的总共2500颗种子。所述保藏已被分配登录号NCIMB 42144。NUN89682 CAC的保藏以及雄性和雌性亲本系的保藏物也在Nunhems B.V.保存。在本申请未决期间，经请求由美国专利局负责人确定的被授权的人可获取所述保藏物。根据37C.F.R.§1.808(b)，保藏人对公众获得保藏材料方面所施加的所有限制将在授予专利时被不可撤销地删除。保藏将维持30年，或最近一次请求后的5年，或维持专利的可强制实施期限(以较长者为准)，如果保藏在该期间无法存活其将被替换。申请人不放弃关于本申请的本专利或根据植物品种保护法(7USC 2321及以下)授予的任何权利。

虽然为了清楚和理解的目的，已经通过举例说明和实施例的方式相当详细地描述了前述发明，但是显而易见的是，在本发明的范围内可以实施某些改变和修改，本发明的范围仅由所附权利要求的范围限制。

本文引用的所有参考文献以引用的方式明确地并入本文。

实施例

NUN 89682 CAC的开发

品种NUN 89682 CAC是从Nunhems的雄性和雌性专有近交系培育的。将雌性和雄性亲本杂交以产生NUN 89682 CAC的杂种(F1)种子。可以生长NUN 89682 CAC的种子以产生杂种植物及其部分(例如胡萝卜根)。杂种NUN 89682 CAC可以通过种子繁殖或无性繁殖。

杂种变种是均一和遗传稳定的。这已经通过园艺特征的评估而确立。数个种子生产事件在遗传稳定性中没有导致可观察到的偏差。加上雌性和雄性亲本的遗传稳定性的确认，申请人得出结论：NUN 89682 CAC是均一和稳定的。

DEEP PURPLE被认为是NUN 89682 CAC的参照变种。DEEP PURPLE是Bejo的商业变种。在表1中示出了基于在美国的试验的NUN 89682 CAC和DEEP PURPLE之间的比较。试验地点：El Centro，CA，USA(坐标：32°44.328'N 115°22.695'W)。播种日期：2011年4月11日，移植日期：2011年5月21日。

50株植物中每一株均两次重复，从中随机选择15株植物或植物部分用于测量特征。在表1中列出了NUN 89682 CAC(本申请)和参照变种(商业变种)的USDA描述符。

根据本发明的一个方面，本发明提供了具有胡萝卜变种NUN 89682 CAC的基本上全部生理学和/或形态学特征的植物。胡萝卜变种NUN 89682 CAC的生理学和/或形态学特征的描述在表1中示出。

NUN 89682 CAC的特征

表1示出了在美国加利福尼亚州El Centro的田间试验的NUN 89682 CAC和DEEPPURPLE的USDA描述符。这些值是平均值。

表1

*这些是典型值。值可能因环境而变化。基本上等同的其它值也在本发明的范围内。

-＝未测量

在NUN 89682 CAC中，木质部核心和韧皮部核心以及周围的皮层的颜色是紫色的(0/5)。

白利糖度

此外，测定了在NUN 89682 CAC中和在最相似的变种Deep Purple中的白利糖度。

使用的方法如下。

将胡萝卜根储存在40°F下并升至室温(72°F)。将根水平切开。从切开的根的中间部分(包括皮层和核心)磨下(grate off)约1英寸的根组织。将磨下的根组织置于大蒜压榨机中，并将汁液挤压到折射计(型号ATAGO PR-32Palette)上。

总花色素苷水平

使用以下方案测定NUN 89682 CAC和Deep Purple的花色素苷水平：

花色素苷提取

将外皮从根块上剥离并将根在纵向上切成两半。将一半的根切成小块。向提取袋中量入约1±0.1g切块的根，并向袋中加入5mL的0.025M氯化钾缓冲液(pH 1.0)。然后，使用粉碎机研磨根块直到块不可见。将1mL汁液移液到微量离心管中。在室温下以10000x g离心10分钟。将上清液用于花色素苷分析。

使用分光光度计测定总花色素苷：

将花青素-3-葡糖苷用作标准，以测定总花色素苷的消光系数。将来自紫胡萝卜提取的上清液在0.025M氯化钾缓冲液(pH 1.0)中稀释，并使用带吸管附件的UV-VIS分光光度计在510和700nm下读取吸光度。基于吸光度水平计算花色素苷浓度。

使用该方案进行单独的实验，在加利福尼亚州南部，El Centro的NUN 89682 CAC和Deep Purple(种植日期：2012年10月17日；收获日期：2013年4月17日(约180天))中定量测定花色素苷水平。在抽苔开始前收获植物。给出的花色素苷水平是约30个个体根的平均值。

变种	总花色素苷水平	干物质％
			NUN 89682	2453ppm	11.5％
Deep Purple	1518ppm	11.4％

通过以下方法测定干物质(DM)：i)在烘箱中干燥空铝盘1小时，并在干燥器柜中冷却；ii)称量空铝盘(A＝盘重)；iii)向盘中称入1±0.1g的切块的根(B＝盘重+新鲜根重)；iv)在100℃下于对流烘箱中干燥24小时或在90℃下于真空烘箱中干燥18小时；v)在干燥器柜中冷却；vi)称量带有干燥的根的盘(c＝盘重+干燥的根重)；vii)计算％干物质({(C-A)/(B-A)}＊100％)。

本文引用的所有参考文献均以引用的方式明确地并入本文中。

引用文献

USDA Exhibit C：

UPOV：www.upov.int/edocs/tgdocs/en/tg049.pdf

Simon et al.2008，Chapter“Carrot”pp 327-357；in the book“Vegetables II- Volume 2，2008，；ISBN 978-0-387-74108-6

Rafal Baranski(2008)：Transgenic Plant Journal 2008(2)1：18-38.

Stintzing et al，2002J.Agric Food Chem.vol 50pp 6172-6181.

WO2008/107097

EP 534 858.

Miguel 2011 Journal of Applied Phannaceutical Science 01(06)pp 07-15

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Proc Natl Acad Sci U S A.1991 November 1；88(21)：9828-9832

Michelmore et al.(Proc Natl Acad Sci U S A.1991 November 1；88(21)：9828-9832

Claims (15)

1.一种胡萝卜植物或其部分，所述植物的根包含至少2000μg/g FW的平均总花色素苷水平，任选地其中所述植物是杂种。

2.一种可从中生长出权利要求1的植物的种子。

3.权利要求1的胡萝卜植物，其中赋予所述总花色素苷水平的遗传元件可从NUN89682CAC获得，NUN 89682CAC的种子的代表性样品已经以NCIMB登录号42144保藏。

4.权利要求1的植物部分，其中所述部分为种子、叶、花粉、直根、根、胚珠或细胞；优选地，其中所述部分为根。

5.一种胡萝卜植物或其部分，其与权利要求3的胡萝卜植物在以下区别特征中的任一种中没有显著差异：1)平均根核心厚度(中点横截面)，2)中点处的平均根直径，3)平均胡萝卜长度(减去直根)，4)核心和皮层的横截面内部颜色，和5)根的晕圈和分区(在市场成熟度下)。

6.权利要求1、3或5中任一项的植物的可再生细胞的组织或细胞培养物；任选地，其中所述组织或细胞来自选自以下的植物部分：胚、原生质体、分生组织、节、叶柄、插条、子叶、花粉、叶、花药、根、根尖、直根、雌蕊、花、种子和茎。

7.一种从权利要求6的组织或细胞培养物再生的胡萝卜植物。

8.一种无性繁殖权利要求1、3、5或7中任一项的植物的方法，其包括以下步骤：

(a)收集能够由权利要求1、3、5或7中任一项的植物繁殖的组织或细胞；

(b)培养所述(a)的组织或细胞以获得增殖的幼苗；和

(c)使所述(b)的增殖的幼苗生根以获得生根的小植株；

或

(d)培养所述(a)的组织或细胞以获得根；和

(e)培养所述(d)的组织或细胞以获得增殖的幼苗，以获得小植株，以及任选地

(f)由所述(c)或(e)的生根的小植株生长出植物。

9.一种生产胡萝卜植物的方法，其包括使权利要求1、3、5或7中任一项的植物与第二胡萝卜植物杂交一次或多次，并从所述杂交中选择子代；任选地

其中所述子代植物具有大于2000μg/g FW的总花色素苷水平以及任选的中等水平的晕圈和分区。

10.一种将所需性状引入权利要求1的胡萝卜植物的方法，其包括：

(a)获得权利要求1、3、5或7中任一项的第一亲本植物；

(b)使所述(a)的植物与包含所需性状的第二胡萝卜植物杂交以产生F1子代；

(b)选择包含所需性状的F1子代；

(c)任选地使所述F1子代自交一次或多次以产生F2、F3，或进一步产生自交子代，

(d)使所选择的F1子代或自交子代与(a)的植物杂交以产生回交子代；

(e)选择包含所需性状并且另外具有(a)的植物的全部或基本上全部生理学和形态学特征的回交子代；和任选地

(f)连续重复步骤(e)和(f)一次或多次以产生所选择的包含所需性状的更高回交子代。

11.一种通过权利要求10的方法生产的胡萝卜植物。

12.一种产生包含附加的所需性状的胡萝卜植物的方法，该方法包括将赋予所需性状的转基因引入权利要求1、3、5或7中任一项的植物中。

13.一种确定权利要求1、3、5或7中任一项的胡萝卜植物的基因型的方法，其包括从所述植物中获得核酸样品，并在所述核酸中检测多种多态性；以及任选地将检测多种多态性的结果存储在计算机可读介质上。

14.一种产生胡萝卜根的方法，其包括：

(a)获得权利要求1、3、5或7中任一项的植物，其中所述植物已经被培养至成熟；和

(b)从所述植物中收集胡萝卜根。

15.一种食品或饲料产品，其包含权利要求1、3、5或7中任一项的胡萝卜根或其部分。