CN106447021A - 一种对角线式浮游植物计数方法 - Google Patents

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孟顺龙
陈家长
邴旭文
胡庚东
范立民
宋超
裘丽萍
郑尧
李丹丹
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Abstract

本发明公开了一种对角线式浮游植物计数方法，包括以下步骤：(1)取浮游植物水样，放在被均匀分割成正方形小格的浮游植物计数框的中部，盖上盖玻片，并静置，使浮游植物处于静止状态；(2)移动浮游植物计数框至显微镜的载物台上，沿着浮游植物计数框的对角线方向上的每个正方形小格逐个进行观察计数；(3)记录显微镜观察视野中的所有藻类种类及其数量，完成计数过程。本发明操作简便易行、计数科学，由于使用了对角线式的计数方法，能够使视野均匀分布在浮游植物计数框内，从而有效避免了涂片不均匀而导致的计数偏差大的问题。

Description

一种对角线式浮游植物计数方法
技术领域
本发明属于生物实验方法技术领域，具体涉及一种对角线式浮游植物计数方法。
背景技术
浮游植物是水生态系统中的初级生产者，是整个水生态系统中物质循环和能量流动的基础。它对水体营养状态的变化能迅速做出响应。浮游植物种类组成与数量的季节变化是浮游植物群落动态的重要特征。由于浮游植物的种群结构与其生活水域的水质状况密切相关，在不同营养状态的水体中，分布着不同种群结构的浮游植物，所以浮游植物的种群结构能够综合、真实地反映出水体的生态条件和营养状况。为此，调查分析特定水域浮游植物生态学特征和利用微型藻类评价、监测水质已经成为水质监测工作的重要组成部分。目前浮游植物计数过程中采用的计数框的容积为0.1mL，面积为20mm×20mm（400mm2）；为便于找准相对位置，400mm2的面积被均匀分割成100个小格，每个小格面积为2mm×2mm（4mm2）；浮游植物一般在10×40倍显微镜下计数，每片计数100个视野。目前对100个视野的选择只强调分布的均匀性，而没有固定的模式，导致不同计数方法得出的浮游植物数量差别较大，从而影响了浮游植物计数的科学性。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种对角线式浮游植物计数方法，用于计数浮游植物的种类和数量，该方法操作简便易行、计数科学，能够科学准确地计数水体中的浮游植物数量。
本发明采用的技术方案如下：
一种对角线式浮游植物计数方法，包括以下步骤：
(1)取浮游植物水样，放在被均匀分割成正方形小格的浮游植物计数框的中部，盖上盖玻片，并静置，使浮游植物处于静止状态；
(2)移动浮游植物计数框至显微镜的载物台上，沿着浮游植物计数框的对角线方向上的每个正方形小格逐个进行观察计数；
(3)记录显微镜观察视野中的所有藻类种类及其数量，完成计数过程。
优选的，所述步骤(1)中浮游植物计数框面积为20mm×20mm，被均匀分割成面积为2mm×2mm的100个正方形小格。
优选的，所述步骤(1)中静置5分钟。
优选的，所述步骤(2)中在10×40倍显微镜下观察计数。
优选的，所述步骤(2)中每个正方形小格计数5个观察视野，两条对角线，合计100个观察视野。
有益效果：本发明提供的一种对角线式浮游植物计数方法操作简便易行、计数科学，由于使用了对角线式的计数方法，能够使视野均匀分布在浮游植物计数框内，从而有效避免了涂片不均匀而导致的计数偏差大的问题。
附图说明
图1为对角线式浮游植物计数方法操作图。
其中，1、浮游植物计数框，2、正方形小格，3、观察视野。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详细介绍，但不局限于此。
实施例1
一种对角线式浮游植物计数方法，其操作图如图1所示，包括以下步骤：
(1)取浮游植物水样0.1ml，放在被均匀分割成正方形小格2的浮游植物计数框1的中部，所述浮游植物计数框1面积为20mm×20mm，被均匀分割成面积为2mm×2mm的100个正方形小格2，盖上盖玻片，并静置5分钟，使浮游植物处于静止状态；
(2)移动浮游植物计数框至显微镜的载物台上，在10×40倍显微镜下沿着浮游植物计数框的对角线方向上的每个正方形小格2逐个进行观察计数，如图1所示，每个正方形小格计数5个观察视野3，两条对角线，合计100个观察视野3，10×40倍显微镜下的视野直径为540μm，每正方形小格2沿边长方向计数3个观察视野3，则3个观察视野的累计长度为1620μm；
(3)记录显微镜100个观察视野3中的所有藻类种类及其数量，完成计数过程。
使用本发明提供的方法对实验室培养的四尾柵藻（Scenedesmus quadricauda）培养液进行了5次平行观察计数；第1次计数得到的四尾柵藻密度为2.58×106 cell/L；第2次计数得到的四尾柵藻密度为2.72×106 cell/L；第3次计数得到的四尾柵藻密度为2.66×106 cell/L；第4次计数得到的四尾柵藻密度为2.51×106 cell/L；第5次计数得到的四尾柵藻密度为2.47×106 cell/L；5次计数的平均值±标准差为（2.58±0.10）×106 cell/L，最大值和平均值之间相差5.1%，最小值和平均值之间相差4.6%。
对比例1
传统的浮游植物计数方法：采用“五点法”计数，步骤如下：
(1)取浮游植物水样0.1ml，放在被均匀分割成正方形小格的浮游植物计数框的中部，所述浮游植物计数框面积为20mm×20mm，被均匀分割成面积为2mm×2mm的100个正方形小格，盖上盖玻片，并静置5分钟，使浮游植物处于静止状态；
(2)移动浮游植物计数框至显微镜的载物台上，在10×40倍显微镜下在浮游植物计数框的中部随机选择20个视野，在浮游植物计数框的4个拐角分别随机选择20个视野，合计观察100个视野；
(3)记录显微镜100个观察视野中的所有藻类种类及其数量，完成计数过程。
使用传统的浮游植物计数方法对实验室培养的四尾柵藻（Scenedesmus quadricauda）培养液进行了5次平行观察计数；第1次计数得到的四尾柵藻密度为2.34×106 cell/L；第2次计数得到的四尾柵藻密度为3.05×106 cell/L；第3次计数得到的四尾柵藻密度为2.69×106 cell/L；第4次计数得到的四尾柵藻密度为2.82×106 cell/L；第5次计数得到的四尾柵藻密度为2.59×106 cell/L；5次计数的平均值±标准差为（2.70±0.26）×106 cell/L，最大值和平均值之间相差13.0%，最小值和平均值之间相差13.2%。
通过上述比较，本发明由于使用了对角线式的计数方法，能够使观察视野均匀分布在浮游植物计数框内，从而有效避免了涂片不均匀而导致的计数偏差大的问题。可见本发明提供的方法的准确性更高、重复性更好、科学性更强。

Claims (5)

1.一种对角线式浮游植物计数方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)取浮游植物水样，放在被均匀分割成正方形小格的浮游植物计数框的中部，盖上盖玻片，并静置，使浮游植物处于静止状态；
(2)移动浮游植物计数框至显微镜的载物台上，沿着浮游植物计数框的对角线方向上的每个正方形小格逐个进行观察计数；
(3)记录显微镜观察视野中的所有藻类种类及其数量，完成计数过程。
2.根据权利要求1所述的对角线式浮游植物计数方法，其特征在于所述步骤(1)中浮游植物计数框面积为20mm×20mm，被均匀分割成面积为2mm×2mm的100个正方形小格。
3.根据权利要求1所述的对角线式浮游植物计数方法，其特征在于所述步骤(1)中静置5分钟。
4.根据权利要求1所述的对角线式浮游植物计数方法，其特征在于所述步骤(2)中在10×40倍显微镜下观察计数。
5.根据权利要求1所述的对角线式浮游植物计数方法，其特征在于所述步骤(2)中每个正方形小格计数5个观察视野，两条对角线，合计100个观察视野。
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