CN106282111A - 一种树突状细胞诱导因子组合物 - Google Patents
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Abstract
一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1‑90%。本发明的有益效果为:具有操作方便,单核细胞诱导成树突状细胞比例高,长时间培养不易污染以及缩短树突状细胞的诱导成熟时间等特点。
Description
技术领域
本发明涉及药物领域,具体涉及一种树突状细胞诱导因子组合物。
背景技术
树突状细胞(Dendritc Cell,DC)是正常人体内存在的一种具有强大的抗原提呈功能的一类特殊的细胞,被喻为机体的“天然佐剂”,能够直接摄取、加工和呈递抗原,刺激体内的初始型T细胞活化,是机体免疫应答的“启动者”。此外DC还可以通过直接或间接方式促进B细胞的增殖与活化,调控体液免疫应答;刺激记忆T细胞活化从而诱导再次免疫应答;与NK相互作用影响非特异性的、天然免疫应答。因此,DC是机体内免疫应答反应的“始作俑者”。DC处于免疫的关键环节,能摄取和加工处理抗原并调动机体主动特异性免疫反应。
发明内容
为解决上述问题,本发明旨在提供一种树突状细胞诱导因子组合物。
本发明的目的采用以下技术方案来实现:
一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
本发明的有益效果为:具有操作方便,单核细胞诱导成树突状细胞比例高,长时间培养不易污染以及缩短树突状细胞的诱导成熟时间等特点。
附图说明
利用附图对本发明作进一步说明,但附图中的实施例不构成对本发明的任何限制,对于本领域的普通技术人员,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据以下附图获得其它的附图。
图1是细胞识别模块的结构示意图。
附图标记:
细胞识别模块1、细胞图像分割单元11、特征提取单元12、分类识别单元13。
具体实施方式
结合以下应用场景对本发明作进一步描述。
应用场景1
参见图1,本应用场景的一个实施例的一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
优选地,所述的人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(3±0.2)。
本优选实施例培养效果良好。
优选地,所述的人肿瘤坏死因子-α∶人γ-干扰素∶人热休克蛋白70的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(8±1)。
本优选实施例有利于快速诱导。
优选的,所述细胞识别模块1包括细胞图像分割单元11、特征提取单元12、分类识别单元13;所述细胞图像分割单元11用于区分由细胞图像采集模块采集的细胞图像中的背景、细胞核和细胞质;所述特征提取单元12用于对细胞图像的纹理特征进行提取;所述分类识别单元13用于根据纹理特征利用分类器实现对细胞图像分类识别。
本优选实施例构建了细胞识别模块1的单元架构。
优选的,所述细胞图像分割单元11包括图像转换子单元、噪声去除子单元、粗分割子单元、细胞核中心标定子单元、精确分割子单元,具体为:
(1)图像转换子单元,用于将采集的细胞图像转化为灰度图像;
(2)噪声去除子单元,用于对灰度图像进行去噪处理,包括:
对于像素点(x,y),选取其3×3的邻域Sx,y和(2N+1)×(2N+1)的邻域Lx,y,N为大于等于2的整数;
首先对像素点是否为边界点进行判断,设定阈值T,T∈[13,26],计算像素点(x,y)与其邻域Sx,y中每个像素点的灰度差值,并与阈值T进行比较,若灰度差值大于阈值T的个数大于等于6,则像素点(x,y)为边界点,否则,像素点(x,y)为非边界点;
若(x,y)为边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(x,y)为降噪前像素点(x,y)的灰度值,σ为像素点(x,y)邻域Lx,y内灰度值标差,q(i,j)∈[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点,k表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点的数量;
若(x,y)为非边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(i,j)代表图像中点(i,j)处的灰度值,w(i,j)为邻域Lx,y内点(i,j)对应的高斯权重;
(3)粗分割子单元,用于对去噪后的细胞图像中的背景、细胞质、细胞核进行粗划分,具体为:
将每个像素(x,y)用一个四维特征向量表示:
式中,h(x,y)代表(x,y)的灰度值,have(x,y)代表其邻域Sx,y灰度均值,hmed(x,y)代表其邻域Sx,y灰度中值,hsta(x,y)代表其邻域Sx,y灰度方差;
采用K-means聚类法将其划分为背景、细胞质、细胞核三类;
(4)细胞核中心标定子单元,用于对细胞核中心进行标定:
由粗分割子单元得到细胞核大致区域,设细胞核区域包含n个点:(x1,y1),…,(xn,yn),对该区域进行灰度加权标定和几何中心标定,取其平均值作为细胞核中心(xz,yz):
(5)精确分割子单元,用于对细胞核、细胞质进行精确分割;
构建从细胞核中心(xz,yz)到细胞核和细胞质边界点(xp,yp)的有向线段 的距离表示向下取整;
沿线段以单位长度进行采样可以得到disp个点若采样点的坐标不是整数,其灰度值通过周围像素线性插值得到;
点(xi,yi)处沿线段方向的灰度差:
hd(xi,yi)=h(xi-1,yi-1)-h(xi,yi)
定义灰度差抑制函数:
点(xi,yi)处沿线段方向的梯度gra(xi,yi):
选取梯度最大的值点作为细胞核和细胞质的精确边缘。
本优选实施例设置噪声去除子单元,有效融合了中心像素与邻域像素的空间临近性和灰度相似性来进行降噪处理,在图像中的平坦区域,邻域内像素灰度值相差不大,采用高斯滤波器对灰度值进行加权滤波,在变化剧烈的边界区域,行边界保持滤波,有利于图像边缘的保持;采用K均值聚类提取细胞核和细胞质粗轮廓,可有效去除噪声的干扰;设置细胞核中心标定子单元,便于后续对细胞核和细胞质轮廓进行精确定位;精确分割子单元充分利用了方向信息,克服了炎症细胞对边缘图的干扰,能够准确提取出细胞核和细胞质边缘。
优选的,所述对细胞图像的纹理特征进行提取,包括:
(1)基于改进的灰度共生矩阵法求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,所述综合灰度共生矩阵体现了细胞在不同方向上的纹理特征:
设在0°、45°、90°、135°四个方向上的灰度共生矩阵分别为h(x,y,d,0°)、h(x,y,d,45°)、h(x,y,d,90°)、h(x,y,d,135°),所对应的矩阵元素项目为X1、X2、X3、X4,则综合灰度共生矩阵的计算公式为:
H(x,y,d)=w1h(x,y,d,0°)+w2h(x,y,d,45°)+w3h(x,y,d,90°)+w4h(x,y,d,135°)
综合灰度共生矩阵元素数目为:
式中,d表示距离,d的取值范围为[2,4],wi为加权系数,i=1,2,3,4,其由四个方向中的每个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数计算,设四个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数分别为Di,均值为i=1,2,3,4,则加权系数wi的计算公式为:
(2)利用所述综合灰度共生矩阵和矩阵元素项目获取所需的四个纹理特征参数:对比度、方差和、能量和均值;
(3)对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,最终获得归一化的纹理特征值。
本优选实施例基于改进的灰度共生矩阵法,采用设置加权系数的方式求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,进而提取细胞在指定四个方向上的纹理特征,解决了由于外部干扰(如细胞图像采集时光照角度造成的影响、气体的流动干扰等)造成的细胞的纹理特征参数值在不同方向上有较大差别的问题,提高了细胞图像纹理特征提取的精度;选定对比度、方差和、能量和均值四个纹理特征,去掉了冗余和重复的特征参数;对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,方便了后续的细胞图像的分类识别处理。
在此应用场景中,设定阈值T=13,d=2,图像去噪效果相对提高了5%,细胞图像特征的提取精度提高了8%。
应用场景2
参见图1,本应用场景的一个实施例的一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
优选地,所述的人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(3±0.2)。
本优选实施例培养效果良好。
优选地,所述的人肿瘤坏死因子-α∶人γ-干扰素∶人热休克蛋白70的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(8±1)。
本优选实施例有利于快速诱导。
优选的,所述细胞识别模块1包括细胞图像分割单元11、特征提取单元12、分类识别单元13;所述细胞图像分割单元11用于区分由细胞图像采集模块采集的细胞图像中的背景、细胞核和细胞质;所述特征提取单元12用于对细胞图像的纹理特征进行提取;所述分类识别单元13用于根据纹理特征利用分类器实现对细胞图像分类识别。
本优选实施例构建了细胞识别模块1的单元架构。
优选的,所述细胞图像分割单元11包括图像转换子单元、噪声去除子单元、粗分割子单元、细胞核中心标定子单元、精确分割子单元,具体为:
(1)图像转换子单元,用于将采集的细胞图像转化为灰度图像;
(2)噪声去除子单元,用于对灰度图像进行去噪处理,包括:
对于像素点(x,y),选取其3×3的邻域Sx,y和(2N+1)×(2N+1)的邻域Lx,y,N为大于等于2的整数;
首先对像素点是否为边界点进行判断,设定阈值T,T∈[13,26],计算像素点(x,y)与其邻域Sx,y中每个像素点的灰度差值,并与阈值T进行比较,若灰度差值大于阈值T的个数大于等于6,则像素点(x,y)为边界点,否则,像素点(x,y)为非边界点;
若(x,y)为边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(x,y)为降噪前像素点(x,y)的灰度值,σ为像素点(x,y)邻域Lx,y内灰度值标差,q(i,j)∈[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点,k表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点的数量;
若(x,y)为非边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(i,j)代表图像中点(i,j)处的灰度值,w(i,j)为邻域Lx,y内点(i,j)对应的高斯权重;
(3)粗分割子单元,用于对去噪后的细胞图像中的背景、细胞质、细胞核进行粗划分,具体为:
将每个像素(x,y)用一个四维特征向量表示:
式中,h(x,y)代表(x,y)的灰度值,have(x,y)代表其邻域Sx,y灰度均值,hmed(x,y)代表其邻域Sx,y灰度中值,hsta(x,y)代表其邻域Sx,y灰度方差;
采用K-means聚类法将其划分为背景、细胞质、细胞核三类;
(4)细胞核中心标定子单元,用于对细胞核中心进行标定:
由粗分割子单元得到细胞核大致区域,设细胞核区域包含n个点:(x1,y1),…,(xn,yn),对该区域进行灰度加权标定和几何中心标定,取其平均值作为细胞核中心(xz,yz):
(5)精确分割子单元,用于对细胞核、细胞质进行精确分割;
构建从细胞核中心(xz,yz)到细胞核和细胞质边界点(xp,yp)的有向线段 的距离表示向下取整;
沿线段以单位长度进行采样可以得到disp个点若采样点的坐标不是整数,其灰度值通过周围像素线性插值得到;
点(xi,yi)处沿线段方向的灰度差:
hd(xi,yi)=h(xi-1,yi-1)-h(xi,yi)
定义灰度差抑制函数:
点(xi,yi)处沿线段方向的梯度gra(xi,yi):
选取梯度最大的值点作为细胞核和细胞质的精确边缘。
本优选实施例设置噪声去除子单元,有效融合了中心像素与邻域像素的空间临近性和灰度相似性来进行降噪处理,在图像中的平坦区域,邻域内像素灰度值相差不大,采用高斯滤波器对灰度值进行加权滤波,在变化剧烈的边界区域,行边界保持滤波,有利于图像边缘的保持;采用K均值聚类提取细胞核和细胞质粗轮廓,可有效去除噪声的干扰;设置细胞核中心标定子单元,便于后续对细胞核和细胞质轮廓进行精确定位;精确分割子单元充分利用了方向信息,克服了炎症细胞对边缘图的干扰,能够准确提取出细胞核和细胞质边缘。
优选的,所述对细胞图像的纹理特征进行提取,包括:
(1)基于改进的灰度共生矩阵法求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,所述综合灰度共生矩阵体现了细胞在不同方向上的纹理特征:
设在0°、45°、90°、135°四个方向上的灰度共生矩阵分别为h(x,y,d,0°)、h(x,y,d,45°)、h(x,y,d,90°)、h(x,y,d,135°),所对应的矩阵元素项目为X1、X2、X3、X4,则综合灰度共生矩阵的计算公式为:
H(x,y,d)=w1h(x,y,d,0°)+w2h(x,y,d,45°)+w3h(x,y,d,90°)+w4h(x,y,d,135°)
综合灰度共生矩阵元素数目为:
式中,d表示距离,d的取值范围为[2,4],wi为加权系数,i=1,2,3,4,其由四个方向中的每个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数计算,设四个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数分别为Di,均值为i=1,2,3,4,则加权系数wi的计算公式为:
(2)利用所述综合灰度共生矩阵和矩阵元素项目获取所需的四个纹理特征参数:对比度、方差和、能量和均值;
(3)对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,最终获得归一化的纹理特征值。
本优选实施例基于改进的灰度共生矩阵法,采用设置加权系数的方式求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,进而提取细胞在指定四个方向上的纹理特征,解决了由于外部干扰(如细胞图像采集时光照角度造成的影响、气体的流动干扰等)造成的细胞的纹理特征参数值在不同方向上有较大差别的问题,提高了细胞图像纹理特征提取的精度;选定对比度、方差和、能量和均值四个纹理特征,去掉了冗余和重复的特征参数;对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,方便了后续的细胞图像的分类识别处理。
在此应用场景中,设定阈值T=15,d=2,图像去噪效果相对提高了6%,细胞图像特征的提取精度提高了8%。
应用场景3
参见图1,本应用场景的一个实施例的一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
优选地,所述的人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(3±0.2)。
本优选实施例培养效果良好。
优选地,所述的人肿瘤坏死因子-α∶人γ-干扰素∶人热休克蛋白70的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(8±1)。
本优选实施例有利于快速诱导。
优选的,所述细胞识别模块1包括细胞图像分割单元11、特征提取单元12、分类识别单元13;所述细胞图像分割单元11用于区分由细胞图像采集模块采集的细胞图像中的背景、细胞核和细胞质;所述特征提取单元12用于对细胞图像的纹理特征进行提取;所述分类识别单元13用于根据纹理特征利用分类器实现对细胞图像分类识别。
本优选实施例构建了细胞识别模块1的单元架构。
优选的,所述细胞图像分割单元11包括图像转换子单元、噪声去除子单元、粗分割子单元、细胞核中心标定子单元、精确分割子单元,具体为:
(1)图像转换子单元,用于将采集的细胞图像转化为灰度图像;
(2)噪声去除子单元,用于对灰度图像进行去噪处理,包括:
对于像素点(x,y),选取其3×3的邻域Sx,y和(2N+1)×(2N+1)的邻域Lx,y,N为大于等于2的整数;
首先对像素点是否为边界点进行判断,设定阈值T,T∈[13,26],计算像素点(x,y)与其邻域Sx,y中每个像素点的灰度差值,并与阈值T进行比较,若灰度差值大于阈值T的个数大于等于6,则像素点(x,y)为边界点,否则,像素点(x,y)为非边界点;
若(x,y)为边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(x,y)为降噪前像素点(x,y)的灰度值,σ为像素点(x,y)邻域Lx,y内灰度值标差,q(i,j)∈[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点,k表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点的数量;
若(x,y)为非边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(i,j)代表图像中点(i,j)处的灰度值,w(i,j)为邻域Lx,y内点(i,j)对应的高斯权重;
(3)粗分割子单元,用于对去噪后的细胞图像中的背景、细胞质、细胞核进行粗划分,具体为:
将每个像素(x,y)用一个四维特征向量表示:
式中,h(x,y)代表(x,y)的灰度值,have(x,y)代表其邻域Sx,y灰度均值,hmed(x,y)代表其邻域Sx,y灰度中值,hsta(x,y)代表其邻域Sx,y灰度方差;
采用K-means聚类法将其划分为背景、细胞质、细胞核三类;
(4)细胞核中心标定子单元,用于对细胞核中心进行标定:
由粗分割子单元得到细胞核大致区域,设细胞核区域包含n个点:(x1,y1),…,(xn,yn),对该区域进行灰度加权标定和几何中心标定,取其平均值作为细胞核中心(xz,yz):
(5)精确分割子单元,用于对细胞核、细胞质进行精确分割;
构建从细胞核中心(xz,yz)到细胞核和细胞质边界点(xp,yp)的有向线段 的距离表示向下取整;
沿线段以单位长度进行采样可以得到disp个点若采样点的坐标不是整数,其灰度值通过周围像素线性插值得到;
点(xi,yi)处沿线段方向的灰度差:
hd(xi,yi)=h(xi-1,yi-1)-h(xi,yi)
定义灰度差抑制函数:
点(xi,yi)处沿线段方向的梯度gra(xi,yi):
选取梯度最大的值点作为细胞核和细胞质的精确边缘。
本优选实施例设置噪声去除子单元,有效融合了中心像素与邻域像素的空间临近性和灰度相似性来进行降噪处理,在图像中的平坦区域,邻域内像素灰度值相差不大,采用高斯滤波器对灰度值进行加权滤波,在变化剧烈的边界区域,行边界保持滤波,有利于图像边缘的保持;采用K均值聚类提取细胞核和细胞质粗轮廓,可有效去除噪声的干扰;设置细胞核中心标定子单元,便于后续对细胞核和细胞质轮廓进行精确定位;精确分割子单元充分利用了方向信息,克服了炎症细胞对边缘图的干扰,能够准确提取出细胞核和细胞质边缘。
优选的,所述对细胞图像的纹理特征进行提取,包括:
(1)基于改进的灰度共生矩阵法求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,所述综合灰度共生矩阵体现了细胞在不同方向上的纹理特征:
设在0°、45°、90°、135°四个方向上的灰度共生矩阵分别为h(x,y,d,0°)、h(x,y,d,45°)、h(x,y,d,90°)、h(x,y,d,135°),所对应的矩阵元素项目为X1、X2、X3、X4,则综合灰度共生矩阵的计算公式为:
H(x,y,d)=w1h(x,y,d,0°)+w2h(x,y,d,45°)+w3h(x,y,d,90°)+w4h(x,y,d,135°)
综合灰度共生矩阵元素数目为:
式中,d表示距离,d的取值范围为[2,4],wi为加权系数,i=1,2,3,4,其由四个方向中的每个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数计算,设四个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数分别为Di,均值为i=1,2,3,4,则加权系数wi的计算公式为:
(2)利用所述综合灰度共生矩阵和矩阵元素项目获取所需的四个纹理特征参数:对比度、方差和、能量和均值;
(3)对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,最终获得归一化的纹理特征值。
本优选实施例基于改进的灰度共生矩阵法,采用设置加权系数的方式求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,进而提取细胞在指定四个方向上的纹理特征,解决了由于外部干扰(如细胞图像采集时光照角度造成的影响、气体的流动干扰等)造成的细胞的纹理特征参数值在不同方向上有较大差别的问题,提高了细胞图像纹理特征提取的精度;选定对比度、方差和、能量和均值四个纹理特征,去掉了冗余和重复的特征参数;对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,方便了后续的细胞图像的分类识别处理。
在此应用场景中,设定阈值T=18,d=3,图像去噪效果相对提高了7%,细胞图像特征的提取精度提高了7%。
应用场景4
参见图1,本应用场景的一个实施例的一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
优选地,所述的人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(3±0.2)。
本优选实施例培养效果良好。
优选地,所述的人肿瘤坏死因子-α∶人γ-干扰素∶人热休克蛋白70的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(8±1)。
本优选实施例有利于快速诱导。
优选的,所述细胞识别模块1包括细胞图像分割单元11、特征提取单元12、分类识别单元13;所述细胞图像分割单元11用于区分由细胞图像采集模块采集的细胞图像中的背景、细胞核和细胞质;所述特征提取单元12用于对细胞图像的纹理特征进行提取;所述分类识别单元13用于根据纹理特征利用分类器实现对细胞图像分类识别。
本优选实施例构建了细胞识别模块1的单元架构。
优选的,所述细胞图像分割单元11包括图像转换子单元、噪声去除子单元、粗分割子单元、细胞核中心标定子单元、精确分割子单元,具体为:
(1)图像转换子单元,用于将采集的细胞图像转化为灰度图像;
(2)噪声去除子单元,用于对灰度图像进行去噪处理,包括:
对于像素点(x,y),选取其3×3的邻域Sx,y和(2N+1)×(2N+1)的邻域Lx,y,N为大于等于2的整数;
首先对像素点是否为边界点进行判断,设定阈值T,T∈[13,26],计算像素点(x,y)与其邻域Sx,y中每个像素点的灰度差值,并与阈值T进行比较,若灰度差值大于阈值T的个数大于等于6,则像素点(x,y)为边界点,否则,像素点(x,y)为非边界点;
若(x,y)为边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(x,y)为降噪前像素点(x,y)的灰度值,σ为像素点(x,y)邻域Lx,y内灰度值标差,q(i,j)∈[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点,k表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点的数量;
若(x,y)为非边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(i,j)代表图像中点(i,j)处的灰度值,w(i,j)为邻域Lx,y内点(i,j)对应的高斯权重;
(3)粗分割子单元,用于对去噪后的细胞图像中的背景、细胞质、细胞核进行粗划分,具体为:
将每个像素(x,y)用一个四维特征向量表示:
式中,h(x,y)代表(x,y)的灰度值,have(x,y)代表其邻域Sx,y灰度均值,hmed(x,y)代表其邻域Sx,y灰度中值,hsta(x,y)代表其邻域Sx,y灰度方差;
采用K-means聚类法将其划分为背景、细胞质、细胞核三类;
(4)细胞核中心标定子单元,用于对细胞核中心进行标定:
由粗分割子单元得到细胞核大致区域,设细胞核区域包含n个点:(x1,y1),…,(xn,yn),对该区域进行灰度加权标定和几何中心标定,取其平均值作为细胞核中心(xz,yz):
(5)精确分割子单元,用于对细胞核、细胞质进行精确分割;
构建从细胞核中心(xz,yz)到细胞核和细胞质边界点(xp,yp)的有向线段 的距离表示向下取整;
沿线段以单位长度进行采样可以得到disp个点若采样点的坐标不是整数,其灰度值通过周围像素线性插值得到;
点(xi,yi)处沿线段方向的灰度差:
hd(xi,yi)=h(xi-1,yi-1)-h(xi,yi)
定义灰度差抑制函数:
点(xi,yi)处沿线段方向的梯度gra(xi,yi):
选取梯度最大的值点作为细胞核和细胞质的精确边缘。
本优选实施例设置噪声去除子单元,有效融合了中心像素与邻域像素的空间临近性和灰度相似性来进行降噪处理,在图像中的平坦区域,邻域内像素灰度值相差不大,采用高斯滤波器对灰度值进行加权滤波,在变化剧烈的边界区域,行边界保持滤波,有利于图像边缘的保持;采用K均值聚类提取细胞核和细胞质粗轮廓,可有效去除噪声的干扰;设置细胞核中心标定子单元,便于后续对细胞核和细胞质轮廓进行精确定位;精确分割子单元充分利用了方向信息,克服了炎症细胞对边缘图的干扰,能够准确提取出细胞核和细胞质边缘。
优选的,所述对细胞图像的纹理特征进行提取,包括:
(1)基于改进的灰度共生矩阵法求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,所述综合灰度共生矩阵体现了细胞在不同方向上的纹理特征:
设在0°、45°、90°、135°四个方向上的灰度共生矩阵分别为h(x,y,d,0°)、h(x,y,d,45°)、h(x,y,d,90°)、h(x,y,d,135°),所对应的矩阵元素项目为X1、X2、X3、X4,则综合灰度共生矩阵的计算公式为:
H(x,y,d)=w1h(x,y,d,0°)+w2h(x,y,d,45°)+w3h(x,y,d,90°)+w4h(x,y,d,135°)
综合灰度共生矩阵元素数目为:
式中,d表示距离,d的取值范围为[2,4],wi为加权系数,i=1,2,3,4,其由四个方向中的每个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数计算,设四个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数分别为Di,均值为i=1,2,3,4,则加权系数wi的计算公式为:
(2)利用所述综合灰度共生矩阵和矩阵元素项目获取所需的四个纹理特征参数:对比度、方差和、能量和均值;
(3)对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,最终获得归一化的纹理特征值。
本优选实施例基于改进的灰度共生矩阵法,采用设置加权系数的方式求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,进而提取细胞在指定四个方向上的纹理特征,解决了由于外部干扰(如细胞图像采集时光照角度造成的影响、气体的流动干扰等)造成的细胞的纹理特征参数值在不同方向上有较大差别的问题,提高了细胞图像纹理特征提取的精度;选定对比度、方差和、能量和均值四个纹理特征,去掉了冗余和重复的特征参数;对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,方便了后续的细胞图像的分类识别处理。
在此应用场景中,设定阈值T=20,d=4,图像去噪效果相对提高了8%,细胞图像特征的提取精度提高了6%。
应用场景5
参见图1,本应用场景的一个实施例的一种树突状细胞诱导因子组合物,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
优选地,所述的人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(3±0.2)。
本优选实施例培养效果良好。
优选地,所述的人肿瘤坏死因子-α∶人γ-干扰素∶人热休克蛋白70的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(8±1)。
本优选实施例有利于快速诱导。
优选的,所述细胞识别模块1包括细胞图像分割单元11、特征提取单元12、分类识别单元13;所述细胞图像分割单元11用于区分由细胞图像采集模块采集的细胞图像中的背景、细胞核和细胞质;所述特征提取单元12用于对细胞图像的纹理特征进行提取;所述分类识别单元13用于根据纹理特征利用分类器实现对细胞图像分类识别。
本优选实施例构建了细胞识别模块1的单元架构。
优选的,所述细胞图像分割单元11包括图像转换子单元、噪声去除子单元、粗分割子单元、细胞核中心标定子单元、精确分割子单元,具体为:
(1)图像转换子单元,用于将采集的细胞图像转化为灰度图像;
(2)噪声去除子单元,用于对灰度图像进行去噪处理,包括:
对于像素点(x,y),选取其3×3的邻域Sx,y和(2N+1)×(2N+1)的邻域Lx,y,N为大于等于2的整数;
首先对像素点是否为边界点进行判断,设定阈值T,T∈[13,26],计算像素点(x,y)与其邻域Sx,y中每个像素点的灰度差值,并与阈值T进行比较,若灰度差值大于阈值T的个数大于等于6,则像素点(x,y)为边界点,否则,像素点(x,y)为非边界点;
若(x,y)为边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(x,y)为降噪前像素点(x,y)的灰度值,σ为像素点(x,y)邻域Lx,y内灰度值标差,q(i,j)∈[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点,k表示邻域Lx,y内灰度值落于区间[q(x,y)-1.5σ,q(x,y)+1.5σ]的点的数量;
若(x,y)为非边界点,则进行如下降噪处理:
式中,h(x,y)为降噪后像素点(x,y)的灰度值,q(i,j)代表图像中点(i,j)处的灰度值,w(i,j)为邻域Lx,y内点(i,j)对应的高斯权重;
(3)粗分割子单元,用于对去噪后的细胞图像中的背景、细胞质、细胞核进行粗划分,具体为:
将每个像素(x,y)用一个四维特征向量表示:
式中,h(x,y)代表(x,y)的灰度值,have(x,y)代表其邻域Sx,y灰度均值,hmed(x,y)代表其邻域Sx,y灰度中值,hsta(x,y)代表其邻域Sx,y灰度方差;
采用K-means聚类法将其划分为背景、细胞质、细胞核三类;
(4)细胞核中心标定子单元,用于对细胞核中心进行标定:
由粗分割子单元得到细胞核大致区域,设细胞核区域包含n个点:(x1,y1),…,(xn,yn),对该区域进行灰度加权标定和几何中心标定,取其平均值作为细胞核中心(xz,yz):
(5)精确分割子单元,用于对细胞核、细胞质进行精确分割;
构建从细胞核中心(xz,yz)到细胞核和细胞质边界点(xp,yp)的有向线段 的距离表示向下取整;
沿线段以单位长度进行采样可以得到disp个点若采样点的坐标不是整数,其灰度值通过周围像素线性插值得到;
点(xi,yi)处沿线段方向的灰度差:
hd(xi,yi)=h(xi-1,yi-1)-h(xi,yi)
定义灰度差抑制函数:
点(xi,yi)处沿线段方向的梯度gra(xi,yi):
选取梯度最大的值点作为细胞核和细胞质的精确边缘。
本优选实施例设置噪声去除子单元,有效融合了中心像素与邻域像素的空间临近性和灰度相似性来进行降噪处理,在图像中的平坦区域,邻域内像素灰度值相差不大,采用高斯滤波器对灰度值进行加权滤波,在变化剧烈的边界区域,行边界保持滤波,有利于图像边缘的保持;采用K均值聚类提取细胞核和细胞质粗轮廓,可有效去除噪声的干扰;设置细胞核中心标定子单元,便于后续对细胞核和细胞质轮廓进行精确定位;精确分割子单元充分利用了方向信息,克服了炎症细胞对边缘图的干扰,能够准确提取出细胞核和细胞质边缘。
优选的,所述对细胞图像的纹理特征进行提取,包括:
(1)基于改进的灰度共生矩阵法求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,所述综合灰度共生矩阵体现了细胞在不同方向上的纹理特征:
设在0°、45°、90°、135°四个方向上的灰度共生矩阵分别为h(x,y,d,0°)、h(x,y,d,45°)、h(x,y,d,90°)、h(x,y,d,135°),所对应的矩阵元素项目为X1、X2、X3、X4,则综合灰度共生矩阵的计算公式为:
H(x,y,d)=w1h(x,y,d,0°)+w2h(x,y,d,45°)+w3h(x,y,d,90°)+w4h(x,y,d,135°)
综合灰度共生矩阵元素数目为:
式中,d表示距离,d的取值范围为[2,4],wi为加权系数,i=1,2,3,4,其由四个方向中的每个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数计算,设四个方向上的灰度共生矩阵对应的对比度参数分别为Di,均值为i=1,2,3,4,则加权系数wi的计算公式为:
(2)利用所述综合灰度共生矩阵和矩阵元素项目获取所需的四个纹理特征参数:对比度、方差和、能量和均值;
(3)对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,最终获得归一化的纹理特征值。
本优选实施例基于改进的灰度共生矩阵法,采用设置加权系数的方式求取细胞图像的综合灰度共生矩阵,进而提取细胞在指定四个方向上的纹理特征,解决了由于外部干扰(如细胞图像采集时光照角度造成的影响、气体的流动干扰等)造成的细胞的纹理特征参数值在不同方向上有较大差别的问题,提高了细胞图像纹理特征提取的精度;选定对比度、方差和、能量和均值四个纹理特征,去掉了冗余和重复的特征参数;对所述四个纹理特征参数进行归一化处理,方便了后续的细胞图像的分类识别处理。
在此应用场景中,设定阈值T=26,d=2,图像去噪效果相对提高了7.5%,细胞图像特征的提取精度提高了8%。
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (3)
1.一种树突状细胞诱导因子组合物,其特征是,包括细胞识别模块和诱导因子组合物,所述细胞识别模块用来确定细胞种类,所述诱导因子组合物含有人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,且人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.2)∶(1±0.2)∶(3±0.5),且人白细胞介素4、人干细胞刺激因子和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子占组合物总重量的0.1-90%。
2.根据权利要求1所述的一种树突状细胞诱导因子组合物,其特征是,所述的人白细胞介素4∶人干细胞刺激因子∶人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(3±0.2)。
3.根据权利要求1所述的一种树突状细胞诱导因子组合物,其特征是,所述的人肿瘤坏死因子-α∶人γ-干扰素∶人热休克蛋白70的重量比为(1±0.1)∶(1±0.1)∶(8±1)。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610769510.4A CN106282111A (zh) | 2016-08-30 | 2016-08-30 | 一种树突状细胞诱导因子组合物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610769510.4A CN106282111A (zh) | 2016-08-30 | 2016-08-30 | 一种树突状细胞诱导因子组合物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106282111A true CN106282111A (zh) | 2017-01-04 |
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610769510.4A Pending CN106282111A (zh) | 2016-08-30 | 2016-08-30 | 一种树突状细胞诱导因子组合物 |
Country Status (1)
Country | Link |
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CN (1) | CN106282111A (zh) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1609195A (zh) * | 2003-10-17 | 2005-04-27 | 高斌 | 树突状细胞的培养方法和试剂盒 |
-
2016
- 2016-08-30 CN CN201610769510.4A patent/CN106282111A/zh active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1609195A (zh) * | 2003-10-17 | 2005-04-27 | 高斌 | 树突状细胞的培养方法和试剂盒 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
李宽: "细胞图像的分割、纹理提取及识别方法研究", 《中国博士学位论文全文数据库信息科技辑》 * |
梁光明: "体液细胞图像有形成分智能识别关键技术研究", 《中国博士学位论文全文数据库信息科技辑》 * |
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