CN105907397A - 一种复合微生物肥及其制备 - Google Patents
一种复合微生物肥及其制备 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105907397A CN105907397A CN201610252130.3A CN201610252130A CN105907397A CN 105907397 A CN105907397 A CN 105907397A CN 201610252130 A CN201610252130 A CN 201610252130A CN 105907397 A CN105907397 A CN 105907397A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus plantarum
- culture
- parts
- fertilizer
- aspergillosis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 title claims abstract description 48
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 15
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title abstract description 13
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 81
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 81
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract description 81
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims abstract description 31
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 claims abstract description 15
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims abstract description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 77
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 36
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 24
- 201000002909 Aspergillosis Diseases 0.000 claims description 21
- 208000036641 Aspergillus infections Diseases 0.000 claims description 21
- 241001513093 Aspergillus awamori Species 0.000 claims description 18
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 17
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 claims description 10
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 4
- 238000005469 granulation Methods 0.000 claims description 3
- 230000003179 granulation Effects 0.000 claims description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 22
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 abstract description 19
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract description 5
- 230000035558 fertility Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 abstract description 2
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 59
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 59
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 56
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 50
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 35
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 35
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 28
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L calcium carbonate Substances [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 26
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 21
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 21
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 21
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 20
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 19
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 16
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 16
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 15
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 14
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 12
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 12
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 12
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 12
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 11
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 11
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 10
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 9
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 9
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 8
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 8
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 8
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 8
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 235000021110 pickles Nutrition 0.000 description 8
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 8
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 8
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 8
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 7
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 6
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 6
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000010149 Brassica rapa subsp chinensis Nutrition 0.000 description 5
- 235000000536 Brassica rapa subsp pekinensis Nutrition 0.000 description 5
- 241000499436 Brassica rapa subsp. pekinensis Species 0.000 description 5
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 4
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 4
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 4
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000002361 compost Substances 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 4
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 241000195474 Sargassum Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 3
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 3
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 206010010254 Concussion Diseases 0.000 description 2
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 Endo-β-glucanase Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000009514 concussion Effects 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000003864 humus Substances 0.000 description 2
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 2
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003621 irrigation water Substances 0.000 description 2
- 235000021109 kimchi Nutrition 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 2
- 239000003895 organic fertilizer Substances 0.000 description 2
- 238000000206 photolithography Methods 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000002688 soil aggregate Substances 0.000 description 2
- 238000010563 solid-state fermentation Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 244000153158 Ammi visnaga Species 0.000 description 1
- 235000010585 Ammi visnaga Nutrition 0.000 description 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 1
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 1
- 241000193764 Brevibacillus brevis Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 239000009636 Huang Qi Substances 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000715 Mucilage Polymers 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 230000000184 desmutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate monohydrate Chemical compound O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005360 mashing Methods 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 238000010422 painting Methods 0.000 description 1
- 238000011056 performance test Methods 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 208000022530 polyphagia Diseases 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000001117 sulphuric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
- C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2101/00—Agricultural use
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种复合微生物肥，重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂15‑30份，曲霉混合培养物10‑16份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1‑3份，枯草芽孢杆菌菌粉5‑10份，聚谷氨酸0.5‑1份。肥料颗粒表面的聚谷氨酸可以在实际使用过程中吸纳水分形成水凝胶，为颗粒内部肥料的迅速生长繁殖提供水分环境，同时也可以达到缓慢释放生物菌肥力的效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种微生态肥，属于农用肥料技术领域。
背景技术
微生物肥料是活体肥料，它的作用主要靠它含有的大量有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物处于旺盛的繁殖和新陈代谢的情况下，物质转化和有益代谢产物才能不断形成。因此，微生物肥料中有益微生物的种类、生命活动是否旺盛是其有效性的基础，而不像其它肥料是以氮、磷、钾等主要元素的形式和多少为基础。正因为微生物肥料是活制剂，所以其肥效与活菌数量、强度及周围环境条件密切相关，包括温度、水分、酸碱度、营养条件及原生活在土壤中土著微生物排斥作用都有一定影响。
发明名称为微生态海藻酸有机肥料增效剂制备方法，申请号：201110221042.4，发明提供一种微生态海藻酸有机肥料增效剂，包括海藻酸2-60％、甘露醇0.1-5％、粗蛋白1-20％以及复合芽孢杆菌，其中复合芽孢杆菌活性成分包括：地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多食鞘芽孢杆菌和胶冻样芽胞杆菌，活菌总数0.1-50亿/ml；该增效剂的制备方法以海藻为原料，利用高活性解聚酶裂解，再接入复合菌种进行升温加氧发酵，所得到的增效剂完全保留海藻中的天然活性有效成分，如海藻酸(海藻多糖)、粗蛋白以及氮、磷、钙、碘、钾、镁、锰、硒等微量元素。
名称为一种微生物肥料的制备方法申请，申请号：201310743759.4，发明公开了一种微生物肥料的制备方法，属于农用肥料技术领域，所述微生物肥料的生产方法，是将黑曲霉培养物、解磷巨大芽孢杆菌、植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌按比例混合为微生物肥料。本发明的肥料通过复合微生物发酵的方法制成，能够改善土壤的微生态环境，为农作物的生长提供有益条件。解磷巨大芽孢杆菌能分解土壤中的有机磷成为植物可利用的速效磷；本发明使用的黑曲霉具有产高活力纤维素酶的特性，纤维素酶有利于土壤有机质的分解，腐殖质的形成和碳素营养的释放。每亩土地使用本发明的肥料的量为50-100克，是目前国内外使用量较少的微生物肥料之一。
一种复合饲料添加剂产品，申请号为201210182772.2，该专利公开了一种复合饲料添加剂产品，组成如下：低聚果糖10-15％，大豆多肽10-20％，黄芪萃取物10-25％，枯草芽孢杆菌冻干菌粉，灵芝菌固体发酵培养物；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为CGMCC 6012， 上述比例为质量百分比；本发明产品可以有效降低抗生素类药物在饲养动物中的使用量，提高动物肉制品的安全性，提高动物的饲料利用效率，增强动物的免疫力，提高饲养效益。
一株产耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌,申请号：201310566374.5,本发明公开了一株产耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)Li-2013-02于2013年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.7926。该菌株产耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌Li-2010经紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变筛选获得，该菌株具有强耐酸、耐热性，产酶活力高的特点，应用前景非常广阔。一株高产纤维素酶的黑曲霉.申请号：201310571925.7.本发明公开了一株高产纤维素酶的黑曲霉，本发明属于黑曲霉领域，特别涉及高产纤维素酶的黑曲霉菌株。本发明所提供的黑曲霉(Aspergillusniger)，该菌株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.7927。发酵罐实验跟踪的各项性能指标表明，该菌株代谢正常，产纤维素酶能力强，是一株优良的纤维素酶高产菌株。
由于我国长期在微生物肥料方面研究缺乏投入，使得我国的微生物肥料产业依然存在整体水平不高、技术创新不足、产品质量与应用效果表现欠稳定的问题。在农业可持续发展已成为人类共识的今天，这些问题成了微生物肥行业函待打通的“瓶颈”。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种复合微生物肥.
复合微生物肥重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂15-30份，曲霉混合培养物10-16份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1-3份，枯草芽孢杆菌菌粉5-10份，聚谷氨酸0.5-1份。
植物乳杆菌混合菌剂由植物乳杆菌为CGMCC9405和植物乳杆菌CGMCC11763组成.
植物乳杆菌混合菌剂重量份数组成为植物乳杆菌CGMCC9405 3-8份,植物乳杆菌CGMCC11763 2-4份。
曲霉混合培养物由泡盛曲霉培养物和黑曲霉培养物组成；
曲霉混合培养物重量份数组成为泡盛曲霉培养物1-3份，黑曲霉培养物6-8份。
所述聚谷氨酸为γ-聚谷氨酸。
所述复合微生物肥的制备方法如下：
将植物乳杆菌混合菌剂15-30份，曲霉混合培养物10-16份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1-3份，枯草芽孢杆菌菌粉5-10份，按照比例混合均匀，采用肥料造粒机造粒，粒径在0.5-2mm之间，随后将上述肥料颗粒与聚谷氨酸进行混合，使聚谷氨酸黏附在肥料颗粒表面。
所述枯草芽孢杆菌菌粉制备：发酵法培养的发酵液离心分离，采用常规冷冻干燥法获得的菌粉。
植物乳杆菌剂的制备方法：从斜面转接培养植物乳杆菌，逐级扩培后的种子液转接入发酵罐中，发酵完毕发酵液经低温负压真空浓缩到原体积的45％，得到菌浓缩液。添加载体：向浓缩液中添加混合好的载体，混合均匀；浓缩液与载体的重量比为0.5-0.6:1，载体组成为：CaCO3 20-30份，糊精10-15份。流化床干燥，干燥温度50℃。
泡盛曲霉培养物制备：菌种培养，固体发酵培养：孢子液接种到固态发酵培养料中，26-33℃培养至菌丝长满培养料，低温流化床干燥，粉碎干燥物。
黑曲霉培养物制备：菌种培养，采用常见固体发酵培养方法制备：孢子液接种到固态发酵培养料中，26-33℃培养至菌丝长满培养料，干燥，粉碎干燥物。黑曲霉(Aspergillus niger)Li-2013-03保藏号为CGMCC NO.7927。
本发明中植物乳杆菌CGMCC 9405菌株特点如下：在显微镜下观察，该菌株为短杆状，革兰氏染色呈阳性，无鞭毛，不产芽孢；在固体培养基上，该菌菌落为白色，表面光滑，致密，形态为圆形，边缘较整齐。
理化特征为：过氧化氢酶(-)，明胶液化(-)，吲哚实验(+)，运动性(-)，发酵产气(-)，亚硝酸盐还原(-)，发酵产气(-)，产硫化氢气体(-)，pH4.0MRS培养基中生长(+)。
本发明植物乳杆菌采用下述流程进行选育：
原始出发菌种→试管活化→硫酸二乙酯(DES)诱变→亚硝基胍(NTG)诱变→等离子体诱变→平板初筛→摇瓶复筛→传代稳定性试验。
本发明所采用的出发菌株在MRS葡萄糖培养基中，其乳酸的生产速率为1.5g/L/d,当培养基pH为3.5时几乎停止生长，对亚硝酸钠的分解速率为0.34mg/h/kg白菜。出发菌株为李政采集于宁夏盐池县育肥羊场的青储饲料，采集时间2013年9月15日。
为了提高其乳酸生产速率、耐酸能力和亚硝酸盐的分解速率，依次采用DES和NTG技术对该菌种进行诱变，诱变后菌株采用MRS碳酸钙平板进行初筛，然后采用500mL摇瓶发酵，生物传感器分析仪对高产菌进行复筛，选育优良的植物乳杆菌菌株，然后做传代实验，评价其遗传稳定性。
植物乳杆菌tlj-2014遗传稳定性结果表明：经过连续传代十次，各项性能指标都比较稳定，遗传性较好，性状没有回复，因此把植物乳杆菌tlj-2014作为选育得到的目的菌株。
经验证发现：该诱变菌株的乳酸生产速率可以达到35g/L/d，该菌株经过71小时发酵后乳酸浓度达到95g/L；能够在pH为1.80的条件下存活。降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到9.8mg/h/kg(自然发酵过程亚硝酸盐积累的速率大约为1.1mg/h/kg)，能够耐1％胆盐。
因此采用该菌种生产泡菜，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在5mg/kg以下，远低于国家标 准GB2714-2003中规定的含量(20mg/kg)。
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2014，该菌株已于2014年7月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编：100101)，保藏号为CGMCC NO.9405。
1.DES诱变选育
1)在超净台上取试管斜面上的植物乳杆菌L一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂，葡萄糖20g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12h左右，使菌体处于对数生长前期。
2)取5mL菌液，5000rpm离心10min收集菌体，用生理盐水洗涤2次。
3)用pH7.0磷酸缓冲液稀释成107个/mL菌悬液。
4)取32mL pH7.0的磷酸钾缓冲液、8mL菌悬液、0.4mL DES在预先放入转子的150mL三角瓶中充分混合，使DES最终浓度为1％(v/v)。
5)在37℃摇床中150rpm反应30min，取1mL混合液，加入0.5mL 25％Na2S2O3溶液中止反应。
6)适当稀释，取最后稀释度的菌液0.2mL，涂布于碳酸钙筛选培养基(含100g/L葡萄糖的碳酸钙MRS培养基)平皿中。在37℃培养2～3天后，采用影印法将该筛选平板的菌株转印到pH为1.5、1.8和2.0的LPHMRS培养基(低pH值改性MRS培养基)上和亚硝酸钠筛选培养基(单一氮源为2g/L亚硝酸钠的改性MRS筛选培养基)上。
7)在37℃培养2～3天后，挑选菌落较大，分别能在LPHMRS培养基、亚硝酸钠筛选培养基上生长并且在碳酸钙筛选培养基上。经初步筛选，挑取出的菌落命名为植物乳杆菌L1。
2.亚硝基胍诱变
1)在超净台上取试管斜面上的植物乳杆菌L1一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)培养基(葡萄糖浓度为60g/L)的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12h左右，使菌体处于对数生长前期。
2)取5mL菌液5000rpm离心10min收集菌体，用生理盐水洗涤2次。
3)用pH6.0磷酸缓冲液稀释成107个/mL菌悬液。
4)取10mL菌悬液转移至100mL三角瓶中，加入10mg的NTG，配制成终浓度为10mg/mL的NTG溶液，并加入4-5滴丙酮，以利于NTG溶解。
5)在37℃下200rpm振荡反应30min，5000rpm离心10min收集菌体，用无菌生理盐水洗涤数次，中止反应。
6)适当稀释，取最后稀释度的菌液0.2mL，涂布于碳酸钙筛选培养基(含100g/L葡萄糖的碳酸钙MRS培养基)平皿中。在37℃培养2～3天后，采用影印法将该筛选平板的菌株转印到pH为1.5、1.8和2.0的LPHMRS培养基(低pH值改性MRS培养基)上和亚硝酸钠筛选培养基(单一氮源为2g/L亚硝酸钠的改性MRS筛选培养基)上。
7)挑选菌株方法：挑选菌落较大，分别能在LPHMRS培养基、亚硝酸钠筛选培养基上生长并且在碳酸钙筛选培养基上。经初步筛选，挑取100支符合以上条件的菌落。
3.摇瓶复筛
1)在超净台上分别取各试管斜面上的植物乳杆菌一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)培养基(葡萄糖浓度为100g/L)的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养15h左右，使菌体处于对数生长中期。
2)分别取5mL菌液，接入装有50mL碳酸钙筛选液体培养基(含250g/L葡萄糖的碳酸钙MRS培养基)平皿中、pH为1.5、1.8和2.0的LPHMRS液体培养基(低pH值改性MRS培养基)和亚硝酸钠液体筛选培养基(单一氮源为2g/L亚硝酸钠的改性MRS筛选培养基)上(注：采用250mL三角瓶)。200rpm，37℃培养3-4天，每天分别检测碳酸钙筛选液体培养基中L-乳酸产生速率、LPHMRS液体培养基中的生物量和亚硝酸钠液体筛选培养基中亚硝酸盐的消耗速率。发酵结束后，比较100株菌种的碳酸钙筛选液体培养基中L-乳酸产生速率、LPHMRS液体培养基中的生物量和亚硝酸钠液体筛选培养基中亚硝酸盐的消耗速率。
3)选择兼具高L-乳酸产生速率、耐受低pH(该菌种仅能在最低为pH1.8的培养基中生长)和亚硝酸盐的消耗速率高的菌株，将其命名为L2菌。
4.遗传稳定性试验
将L2菌在斜面上连续十次传代，并用摇瓶复筛的方法检测每次传代后的发酵情况。实验发现，在斜面上连续十次传代，该菌种性状没有明显变化，各项性能指标都正常，说明该菌种的遗传稳定性较强。菌株命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2014。
5. 5L发酵罐试验
1)取斜面上的植物乳杆菌L2一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12h左右，使菌体处于对数生长中期。
2)将对数期的菌种接入装有3L MRS液体培养基(初始葡萄糖为150g/L)的5L发酵罐中。接种量为10％，37℃下100rpm培养8小时，对数前期溶氧控制10％(通气0.5L/min)，后期厌氧培养63小时。发酵结束后，植物乳杆菌L2的乳酸产量达到95g/L。这样的 产乳酸速率利于泡菜的快速发酵。
3)将对数期的菌种接入装有3L pH为1.8的LPHMRS液体培养基(初始葡萄糖为50g/L)的5L发酵罐中。接种量为10％，37℃下100rpm培养8小时，对数前期溶氧控制10％(通气0.5L/min)，后期厌氧，整个过程用0.5mol/L的氢氧化钠将发酵液pH控制在1.8，总培养时间为48小时。发酵结束后，检测植物乳杆菌L2的生物量为2.5g/L，说明植物乳杆菌L2能够在pH1.8的环境中生存。
4)将对数期的菌种接入装有3L亚硝酸钠液体筛选培养基(单一氮源为2g/L亚硝酸钠的改性MRS筛选培养基)的5L发酵罐中。接种量为10％，37℃下100rpm培养8小时，对数前期溶氧控制10％(通气0.5L/min)，后期厌氧，发酵过程根据亚硝酸盐的消耗速率流加20g/L的亚硝酸钠溶液，培养2-3天。发酵结束后，计算发酵过程植物乳杆菌L2对亚硝酸钠的降解速率。结果发现：在该条件下，L2对亚硝酸钠的降解速率可以达到563mg/h/L。
5)将对数期的菌种10mL接入装有2kg预处理过的白菜中，按照传统泡菜方法进行加工，每12小时测定泡菜中的亚硝酸盐含量。结果发现，在整个发酵过程中，L2菌对亚硝酸钠的分解速率为9.8mg/h/kg白菜。泡菜中的亚硝酸钠含量始终低于5mg/kg，远低于国家标准GB2714-2003中规定的含量(20mg/kg)。
有益效果
本发明的肥料由复合微生物发酵而成，能够改善土壤的微生态环境，为农作物的生长提供有益条件。本发明的肥料能够改良土壤。肥料中有益微生物能产生糖类物质，占土壤有机质的0.1％，与植物粘液，矿物胚体和有机胶体结合在一起，可以改善土壤团粒结构，增强土壤的物理性能和减少土壤颗粒的损失，在一定的条件下，还能参与腐殖质形成。所以施用微生物肥料能改善土壤物理性状，有利于提高土壤肥力。本发明的肥料能够增强作物的抗旱能力。本发明的复合菌种分解土壤里硅元素供植物利用，使得植物的蜡质层增厚，提高植物保水能力；能促进土壤团粒结构形成，防止土壤板结；破坏土壤毛细现象，防止土壤水分蒸发。
肥料颗粒表面的聚谷氨酸可以在实际使用过程中吸纳水分形成水凝胶，为颗粒内部肥料的迅速生长繁殖提供水分环境，同时也可以达到缓慢释放生物菌肥力的效果，且可以有效减少作物生长阶段的灌溉用水量13％以上。
本产品使用方法简单，每亩地使用量0.3-1公斤，成本仅为80-100元/亩，拌种或生长期灌水前使用。
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。
本发明提供的黑曲霉菌株(Aspergillus niger)Li-2013-03是由实验室保藏的一株产纤维素酶产的黑曲霉(Aspergillus niger)Li-2010经多轮亚硝基胍诱变，然后对突变株逐级筛选淘汰，最后对优良菌株经发酵性能测试筛选得到产高活力纤维素酶的黑曲霉菌株(Aspergillus niger)Li-2013-03。
本发明提供的产高活力纤维素酶的菌株具体为黑曲霉(Aspergillus niger)Li-2013-03。该菌株已于2013年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编100101)，保藏号为CGMCC NO.7927。
产高活力纤维素酶菌株的筛选方法，包括以下步骤：
1)斜面培养：将原始黑曲霉菌株(Aspergillus niger)Li-2010划线接种斜面培养基，30℃培养2～3d，直至菌丝体成熟、产大量黑色孢子。所述斜面培养基组成如下：12OBrix麦芽汁l000mL，pH值自然，121℃灭菌20min；
2)孢子悬液制备(以下步骤均在无菌条件下操作)：向试管斜面加入15mL无菌水，把孢子刮下，用滤纸过滤，将滤过液倒入已灭菌、并加有5-10粒无菌玻璃珠的150mL三角瓶中，将三角瓶放入摇床振荡10-15min，使孢子分散。
3)亚硝基胍(NTG)诱变
A.用无菌水将孢子悬浮液调节为稀释成106-107个/mL。
B.取10mL菌悬液转移至100mL三角瓶中，加入10mg的NTG，配制成终浓度为10mg/mL的NTG溶液，并加入4-5滴丙酮，以利于NTG溶解。
C.在30℃下200rpm振荡反应30min，5000rpm离心10min收集菌体，用无菌生理盐水洗涤数次，中止反应。
D.适当稀释将孢子浓度调节为103个/mL，取最后稀释度的菌液0.2mL，稀释涂布于纤维素-刚果红平板筛选培养基上。在30℃培养2～3天后挑取透明圈/菌落直径较大的菌株200支。(所述纤维素-刚果红平板筛选培养基组成如下：纤维素粉10g、刚果红 0.2g、硫酸铵5g、硫酸镁0.25g、磷酸二氢钾1g、氯化钠0.1g、明胶2g、琼脂20g、自来水定容1000mL，pH值5-6，121℃灭菌20min)。
E.复筛：将获得的200株菌分别用无菌牙签接种于斜面培养基，30℃培养至孢子铺满斜面。分别将孢子以无菌水洗下接种于装有50mL复筛培养基的250mL三角瓶中进行发酵，接种量10％(v/v)，30℃、100r/min培养96h，分别测定各菌株的纤维素酶活性。(所述复筛培养基组成如下：纤维素粉50g、硫酸铵5g、硫酸镁0.25g、磷酸二氢钾1g、氯化钠0.1g、自来水定容1000mL，pH值5-6，121℃灭菌20min)。选取纤维素酶酶活力最高的菌株进行放大实验。
4)遗传稳定性试验
将Li-2013-03菌株在斜面上连续十次传代，并用摇瓶复筛的方法检测每次传代后的发酵情况。实验发现，在斜面上连续十次传代，该菌种性状没有明显变化，各项性能指标都正常，说明该菌种的遗传稳定性较强。
5)放大试验
①种子培养：将纤维素酶酶活力最高的菌株Aspergillus niger Li-2013-03接入500mL三角瓶中，种子培养基装量100毫升，30℃、150rpm摇床培养72-96h。
③种子罐培养：将种子液以10％(v/v)接种量接入装有7.5L发酵液的10L发酵罐中，控制pH值恒定为6.0±0.2，培养温度30±0.1℃，搅拌速度300rpm，通风量(v/v)1:0.8-1.2,培养时间96h，溶解氧20-30％。所述发酵培养基组成为：纤维素粉100g、硫酸铵5g、硫酸镁0.25g、磷酸二氢钾1g、氯化钠0.1g、自来水定容1000mL，pH值5-6，121℃灭菌20min。
发酵结束后，取发酵上清液(粗酶液)进行酶活力检测经测定，菌株Aspergillus niger Li-2013-03的外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和滤纸酶活力分别达到620U/mL、1289U/mL、456U/mL和732U/mL，分别比出发菌株Aspergillus niger Li-2010提高了9.21倍、7.43倍、8.15倍和10.31倍。
解磷巨大芽抱杆菌是芽抱杆菌属(Bacillus)中的一个种。运动，形成荚膜，好氧。从葡萄糖产酸，也常从阿拉伯糖和甘露醇产酸。水解淀粉，不产生卵磷脂酶，VP阴性。能分解土壤中的有机磷成为植物可利用的速效磷。
解磷巨大芽孢杆菌剂由沧州旺发生物技术研究所提供，地址：中国河北沧州市运河区解放西路颐和国际商务中心A座1区807-812。
本发明提供的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Li-2013-02。该菌株已于2013年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.7926。
所述菌株特点如下：
所述菌株在固体平板上菌落颜色为乳白色，表面干燥不透明，边缘整齐，为具有运动性的好氧菌。镜检为长杆状，革兰氏染色呈阳性。该菌可利用柠檬酸盐，硝酸还原、V-P实验成阳性。
所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Li-2013-02由一株保藏于本实验室的产耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌Li-2013经紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变筛选获得，具体筛选步骤如下：
(1)菌悬液的制备
将在平板划线分离后长出的Li-2013单菌落接入种子培养基中，100r/min，40℃培养12h后，取1mL培养液离心后用生理盐水洗涤两次，并重悬与9mL生理盐水中。
(2)紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变
将菌悬液置于无菌平板中，在距离为30cm，功率15w的紫外灯下搅拌照射100s。将经过照射的菌液经梯度稀释后涂布于氯化锂平板，并以未经紫外照射的菌液稀释涂平板做对照。将上述涂布均匀的平板，用黑色的布或报纸包好，置40℃培养48h，在长出菌落的平板上筛选出水解圈与菌落直径比值最大者挑至斜面保存，纯化后配制成菌悬液，经梯度稀释后与硫酸二乙酯原液充分混合，并于40℃震荡处理40min，将处理过的菌液经梯度稀释后涂布于氯化锂平板。
(3)高产菌种的初筛
将上述涂布均匀的平板，置40℃培养48h，在长出菌落的平板上初筛出水解圈与菌落直径比值较大者挑至斜面保存，纯化后获得三株菌Li-2013-01，Li-2013-02,Li-2013-03
(4)摇瓶发酵复筛
将获得的三株菌Li-2013-01，Li-2013-02,Li-2013-03在含有30mL发酵培养基的250mL摇瓶中进行摇瓶发酵，种子接种量10％(V/V)，40℃、100r/min培养72h，离心取发酵上清液制得粗酶液。
(5)酶活测定
酶活单位的定义：1mL粗酶液，于105℃、pH 4.2条件下，1min液化1mg可溶性淀粉，即为1个酶活力单位，以U/mL表示。
经测定，菌株Li-2013-02,为稳定的最高产菌株，且酶活达到30000U/mL，比原始菌株酶活提高1.6倍。
所述氯化锂平板：淀粉1％，蛋白胨1％，(NH)2SO40.4％，K2HPO40.8％，CaCl20.2％，氯化锂0.9％，琼脂2％。
所述的种子培养基：酵母粉0.5％，蛋白胨1％，可溶性淀粉1％，NaCl 1％。
所述的发酵培养基：玉米粉5％～15％，豆饼粉4％～10％，(NH)2SO40.4％，K2HPO40.8％，CaCl20.2％。
所述的摇瓶培养条件：该菌在含有30mL发酵培养基的250mL摇瓶中，接种量10％(V/V)，100r/min、40℃发酵培养72h。
由菌株Li-2013-02发酵获得了一种耐高温的α-淀粉酶，其酶学性质如下：
(1)该酶温度适应范围较宽，最适作用温度在105-115℃之间，且在110℃以下保存的温度稳定性较好，而115℃以上保存长时间温度稳定性较差。
(2)该酶最适反应pH值为4.2。在pH值3.0-7.0之间均有较高酶活力，在pH值为3.0时酶活完全稳定。
(3)酶活性：由本发明所提供的突变株Li-2013-02,制备的耐高温α-淀粉酶酶活力为30000-35000U/ml。
1、本发明使用紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变的方法获得了一株高产耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌Li-2013-02，该菌株具有强耐酸、耐热性，产酶活力高的特点。
2、有该菌株生产所得的耐高温α-淀粉酶酶活力高达30000-35000u/ml,；适用温度范围为25-115℃，最适反应温度110℃，在110℃酶活完全稳定；适用反应pH值范围为3.0-7.0，在pH值为3.0时酶活完全稳定，最适反应pH值为4.2，比现有的耐高温α-淀粉酶酶活力高，酶作用最适pH值范围宽泛，耐温度高，特别适合反应温度高、液化工艺与糖化工艺并存的工业化需求。
发明所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101。。
植物乳杆菌益生特性如下：
本发明所提供的植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCC NO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％。
CGMCC NO.11763对胆固醇降解能力研究和测定：
取1ml CGMCC NO.11763母液接种于10mL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量0.1mg/ml,pH 6.2)中，37℃的恒温静置分别培养20h、40h、60h备用，以接入1mL无菌水的MRS胆固醇培养基为对照，取以上培养不同时间的菌液样品及对照液各1ml,9000r/min，4℃下离心10min，得到发酵上清液，邻苯二甲醛法测定上清液中胆固醇含量(具体为：取各上清液0.1ml于相应的试管中,加冰醋酸0.3ml,1mg/ml的邻苯二甲醛0.15ml，缓缓加入浓硫酸1.0ml，混合均匀。室温静置10min，于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复，以同样方法制作胆固醇标准曲线，计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知，CGMCC NO.11763对胆固醇有很好的降解作用，在发酵60h小时后，降解率可达到64.76％。
表1对胆固醇的降解情况
CGMCC NO.11763菌株的耐胆盐试验：
取CGMCCNO.11763菌液1mL接种菌种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％)的10mL MRS液体培养基(PH＝6.4)，置于37℃下分别培养0、2、4h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1％处理4h后菌的生长量依然达到0.59±0.92×107(cfu/ml)，有很好的耐胆盐能力。
表2耐胆盐能力检测[(±s)×107cfu/ml]
CGMCC NO.11763菌株的耐酸试验
取CGMCC NO.11763母液按1ml接种菌种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、 3.0、3.5、4.0)的10mL MRS液体培养基，置于37℃下分别培养0、2、4h，每一处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有很强的耐酸能力。
表3耐酸能力检测[(±s)×107cfu/ml]
CGMCC NO.11763菌株的黏附能力测定
培养CGMCC NO.11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌DH5α(LB液体培养基)24h得发酵液，分别置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌泥，分别用pH＝7.0的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤菌泥2次(即在菌落中加入PBS，震荡混合均匀后，置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌体)。自凝集率(％)：用无菌的PBS将菌泥CGMCC NO.11763制成在波长600nm处的吸光值为0.4±0.1(A 0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A 24，自凝集率(％)公式为(A 0—A 24)/A 0。；他凝集率(％)：将CGMCC NO.11763和大肠杆菌DH5α的悬菌液调节成在波长600nm处的吸光值为0.6±0.1(A 0)的混合悬浮菌液。静置24H后测定吸光值A 24，他凝集率(％)公式为(A 0—A 24)/A 0。测定结果见表4，可知CGMCC NO.11763的自凝集率为95.71％，有很强的黏附能力。
表4黏附能力表
菌株生理特性
所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101。
该菌株特点如下：在显微镜下观察，该菌株为短杆状，革兰氏染色呈阳性，无鞭毛，不 产芽孢；在固体培养基上，该菌菌落为白色，表面光滑，致密，形态为圆形，边缘较整齐。
理化特征为：过氧化氢酶(-)，明胶液化(-)，吲哚实验(+)，运动性(-)，发酵产气(-)，亚硝酸盐还原(-)，发酵产气(-)，产硫化氢气体(-)，pH4.0MRS培养基中生长(+)。经过生理生化鉴定为为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH。
菌株能够在57℃下生长良好，葡萄糖耐受能力为275g/L。
本发明植物乳杆菌由采集人李建树，从新疆维吾尔族老乡家中酸奶中分离得到，采集时间2015年6月2日。
5L发酵罐试验
(1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCC NO.11763一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12h左右，使菌体处于对数生长中期。
(2)将对数期的菌种接入装有3L MRS液体培养基(初始葡萄糖为150g/L)的5L发酵罐中。接种量为10％，37℃下100rpm培养8小时，对数前期溶氧控制10％(通气0.5L/min)，后期厌氧培养63小时。发酵结束后，植物乳杆菌CGMCC NO.11763的乳酸产量达到110g/L。这样的产乳酸速率利于泡菜的快速发酵。
(4)将对数期的菌种接入装有3L亚硝酸钠液体筛选培养基(单一氮源为2g/L亚硝酸钠的改性MRS筛选培养基)的5L发酵罐中。接种量为10％，37℃下100rpm培养8小时，对数前期溶氧控制10％(通气0.5L/min)，后期厌氧，发酵过程根据亚硝酸盐的消耗速率流加20g/L的亚硝酸钠溶液，培养2-3天。发酵结束后，计算发酵过程植物乳杆菌CGMCC NO.11763对亚硝酸钠的降解速率。结果发现：在该条件下，XH对亚硝酸钠的降解速率可以达到653mg/h/L。
(5)将对数期的菌种10mL接入装有2kg预处理过的白菜中，按照传统泡菜方法进行加工，每12小时测定泡菜中的亚硝酸盐含量。结果发现，在整个发酵过程中，XH菌对亚硝酸钠的分解速率为10.9mg/h/kg白菜。泡菜中的亚硝酸钠含量始终低于4.8mg/kg，远低于国家标准GB2714-2003中规定的含量(20mg/kg)。
实施例1
复合微生物肥重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂20份，曲霉混合培养物14份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1份，枯草芽孢杆菌菌粉8份，聚谷氨酸0.6份。
植物乳杆菌混合菌剂由植物乳杆菌CGMCC9405和植物乳杆菌CGMCC11763组成.
植物乳杆菌混合菌剂重量份数组成为：植物乳杆菌CGMCC9405 6份,植物乳杆菌CGMCC11763 2份。
曲霉混合培养物由泡盛曲霉培养物和黑曲霉培养物组成；
曲霉混合培养物重量份数组成为泡盛曲霉培养物2份，黑曲霉培养物7份。
所述聚谷氨酸为γ-聚谷氨酸。
所述复合微生物肥的制备方法如下：
将植物乳杆菌混合菌剂，曲霉混合培养物，解磷巨大芽抱杆菌菌剂，枯草芽孢杆菌菌粉，聚谷氨酸按照比例混合均匀，采用肥料造粒机造粒，粒径在0.5-2mm之间，随后将上述肥料颗粒与聚谷氨酸进行混合，使聚谷氨酸黏附在肥料颗粒表面。
采用的菌种如下：
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp)CGMCC7926
泡盛曲霉(Aspergillus awamori)CGMCC3.6484
黑曲霉(Aspergillus niger)Li-2013-03保藏号为CGMCC NO.7927。
泡盛曲霉菌剂的制备方法：
技术方案如下：
斜面菌种活化培养：将泡盛曲霉斜面菌种转接到斜面培养基上，27℃培养3天。
固体一级种子培养：挑取泡盛曲霉斜面菌种接入装有100克培养基的500毫升三角瓶中进行种子培养，30℃培养3天即可。
固体二级种子培养：将上述培养好的固体一级种子搅拌为碎块后加入装有1000克培养基的5000毫升三角瓶中进行种子培养，培养条件：30℃培养3天即可。
固体发酵培养：将二级摇瓶种子粉碎，加入装有灭菌培养基的发酵池或托盘中混合均匀后培养，曲料培养温度控制在30℃，湿度85％，每隔10小时翻料一次，培养时间6天；固体曲料的培养采用常用曲料培养技术；待培养料长满菌丝即可结束培养，培养基预先经高温蒸煮灭菌处理，灭菌条件控制温度121℃，时间1小时。
干燥粉碎：发酵结束培养料在流化床或其他干燥设备上进行干燥，干燥温度控制在60℃，干燥到水分含量在10％以下，然后将固体培养料进行粉碎，物料粉碎孔径在60目以上。
培养基组成：固体原料:麸皮80％,豆饼粉10％,玉米淀粉10％，添加等量自来水；初始pH自然。
枯草芽孢杆菌培养物的制备方法：
1.发酵液的获得：采用斜面菌种逐级扩培获得枯草芽孢杆菌发酵液；
(1)一级种子培养：将枯草芽孢杆菌斜面菌种接入500毫升摇瓶中，培养基装量100毫升，旋转式摇床180转/分，培养温度30℃，培养时间24小时；
(2)二级种子培养：将一级种子按照10％的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中，培养条件与一级种子相同；
(3)三级种子培养：将二级种子以10％接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中，培养基装量1000毫升，旋转式摇床100转/分，培养温度30℃，培养时间24小时；
(4)一级种子罐培养：将三级种子以10％接种量接入总容积为150L的一级种子罐，发酵培养基装量100L，培养温度28℃，搅拌速度100转/分，通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05Mpa,培养时间24小时；
(5)发酵培养：将一级种子罐菌种以10％接种量接入总容积为1.5吨二级种子罐，发酵培养基装量1吨，培养条件培养温度28℃，搅拌速度100转/分，通风量(V/V)1:0.5,罐压0.05Mpa,培养时间24小时。
培养基组成：葡萄糖6％,酵母提取物1％,蛋白胨0.2％，CaCO3 1％,pH6.8。
植物乳杆菌剂的制备方法：
(1)一级种子培养：将植物乳杆菌菌种接入500毫升摇瓶中，培养基装量100毫升，培养温度30℃，培养时间24小时；
(2)二级种子培养：将一级种子按照10％的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中，培养条件与一级种子相同；
(3)三级种子培养：将二级种子以10％接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中，培养基装量1000毫升，培养温度30℃，培养时间24小时；
(4)一级种子罐培养：将三级种子以5％接种量接入总容积为150L的一级种子罐，发酵培养基装量100L，培养温度30℃，罐压0.05Mpa,培养时间18小时；
(5)发酵罐培养：将一级种子罐菌种以5％接种量接入总容积为3吨二级种子罐，发酵培养基装量2吨，培养条件培养温度30℃，罐压0.05Mpa,培养时间22小时。发酵完毕发酵液经低温负压真空浓缩到原体积的45％，得到菌浓缩液。添加载体：向浓缩液中添加混合好的载体，混合均匀；浓缩液与载体的重量比为0.5:1，载体组成为：CaCO3 25份，糊精12份。流化床干燥，干燥温度50℃。
培养基组成为：酪蛋白胨1％,牛肉提取物1％,酵母提取物0.5％,葡萄糖0.5％,乙酸钠0.5％,柠檬酸二胺0.2％,Tween 800.1％,K2HPO40.2％,MgSO4.7H2O 0.02％,MnSO4.H2O 0.005％,CaCO32％,琼脂1.5％,pH6.8。
实施例2
本发明所要解决的技术问题是提供一种复合微生物肥.
复合微生物肥重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂30份，曲霉混合培养物16份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1份，枯草芽孢杆菌菌粉10份，聚谷氨酸0.5份。
植物乳杆菌混合菌剂由植物乳杆菌为CGMCC9405和植物乳杆菌CGMCC11763组成.
植物乳杆菌混合菌剂重量份数组成为植物乳杆菌CGMCC9405 8份,植物乳杆菌CGMCC11763 2份。
曲霉混合培养物由泡盛曲霉培养物和黑曲霉培养物组成；
曲霉混合培养物重量份数组成为泡盛曲霉培养物1份，黑曲霉培养物7份。
所述聚谷氨酸为γ-聚谷氨酸。
实施例3
基本同实施例1
本发明所要解决的技术问题是提供一种复合微生物肥.
复合微生物肥重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂30份，曲霉混合培养物10份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂3份，枯草芽孢杆菌菌粉5份，聚谷氨酸0.5份。
植物乳杆菌混合菌剂由植物乳杆菌为CGMCC9405和植物乳杆菌CGMCC11763组成.
植物乳杆菌混合菌剂重量份数组成为植物乳杆菌CGMCC9405 3份,植物乳杆菌CGMCC11763 4份。
曲霉混合培养物由泡盛曲霉培养物和黑曲霉培养物组成；
曲霉混合培养物重量份数组成为泡盛曲霉培养物2份，黑曲霉培养物7份。
所述聚谷氨酸为γ-聚谷氨酸。
产品效果实验
试验地的选择与试验设计：试验于2015年在宁夏盐池县进行。
试验田达到田种植玉米10亩，分别在种植时使用本发明产品每亩0.4公斤，出苗1个月左右通过锄地松土方式使用发明产品0.2公斤，对照组使用市场销售同类产品。
发明产品使用玉米地玉米产量达到790公斤，对照组达到540公斤，作物生长阶段的灌溉用水量比对照减少18％。
Claims (9)
1.一种复合微生物肥，重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂15-30份，曲霉混合培养物10-16份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1-3份，枯草芽孢杆菌菌粉5-10份，聚谷氨酸0.5-1份。
2.如权利要求1所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述植物乳杆菌混合菌剂由植物乳杆菌为CGMCC9405和植物乳杆菌CGMCC11763组成。
3.如权利要求2所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述植物乳杆菌混合菌剂重量份数组成为植物乳杆菌CGMCC94053-8份,植物乳杆菌CGMCC117632-4份。
4.如权利要求1所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述曲霉混合培养物由泡盛曲霉培养物和黑曲霉培养物组成。
5.如权利要求4所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述曲霉混合培养物重量份数组成为泡盛曲霉培养物1-3份，黑曲霉培养物6-8份。
6.如权利要求1所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述复合微生物肥重量份数组成为：植物乳杆菌混合菌剂20份，曲霉混合培养物14份，解磷巨大芽抱杆菌菌剂1份，枯草芽孢杆菌菌粉8份，聚谷氨酸0.6份。
7.如权利要求6所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述植物乳杆菌混合菌剂由植物乳杆菌CGMCC9405和植物乳杆菌CGMCC11763组成；植物乳杆菌混合菌剂重量份数组成为：植物乳杆菌CGMCC94056份,植物乳杆菌CGMCC117632份。
8.如权利要求6所述一种复合微生物肥，其特征在于，所述曲霉混合培养物由泡盛曲霉培养物和黑曲霉培养物组成；曲霉混合培养物重量份数组成为泡盛曲霉培养物2份，黑曲霉培养物7份。
9.如权利要求1所述一种复合微生物肥的制备方法，如下：将植物乳杆菌混合菌剂，曲霉混合培养物，解磷巨大芽抱杆菌菌剂，枯草芽孢杆菌菌粉按照比例混合均匀，采用肥料造粒机造粒，粒径在0.5-2mm之间，随后将上述肥料颗粒与聚谷氨酸进行混合，使聚谷氨酸黏附在肥料颗粒表面。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610252130.3A CN105907397A (zh) | 2016-04-20 | 2016-04-20 | 一种复合微生物肥及其制备 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610252130.3A CN105907397A (zh) | 2016-04-20 | 2016-04-20 | 一种复合微生物肥及其制备 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105907397A true CN105907397A (zh) | 2016-08-31 |
Family
ID=56747687
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610252130.3A Pending CN105907397A (zh) | 2016-04-20 | 2016-04-20 | 一种复合微生物肥及其制备 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105907397A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112661579A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-04-16 | 沈阳农业大学 | 一种能改良盐碱地的解磷微生物制剂及其制备方法 |
| RU2761117C1 (ru) * | 2020-12-09 | 2021-12-06 | Общество с ограниченной ответственностью "ЭКОС" | Технология производства жидкой формы комбинированного биопрепарата на основе Bacillus subtilis и Bacillus megaterium var. phosphaticum |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104311169A (zh) * | 2014-09-28 | 2015-01-28 | 邵素英 | 复合生物肥及其制备方法 |
| CN104341239A (zh) * | 2014-09-22 | 2015-02-11 | 北京科慧通智慧科技有限公司 | 一种生物菌肥 |
| CN104341183A (zh) * | 2014-09-22 | 2015-02-11 | 北京科慧通智慧科技有限公司 | 一种生物菌肥制备方法 |
| CN104388332A (zh) * | 2014-09-30 | 2015-03-04 | 天津天绿健科技有限公司 | 一种泡菜发酵用复合菌剂产品及其制备方法 |
| CN104478532A (zh) * | 2014-09-24 | 2015-04-01 | 邵素英 | 一种高效微生态生物肥及其制备方法 |
| CN105061068A (zh) * | 2015-08-18 | 2015-11-18 | 山东中瀚生物科技有限公司 | 一种辣木多糖富集生物液体肥料及其制备方法 |
-
2016
- 2016-04-20 CN CN201610252130.3A patent/CN105907397A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104341239A (zh) * | 2014-09-22 | 2015-02-11 | 北京科慧通智慧科技有限公司 | 一种生物菌肥 |
| CN104341183A (zh) * | 2014-09-22 | 2015-02-11 | 北京科慧通智慧科技有限公司 | 一种生物菌肥制备方法 |
| CN104478532A (zh) * | 2014-09-24 | 2015-04-01 | 邵素英 | 一种高效微生态生物肥及其制备方法 |
| CN104311169A (zh) * | 2014-09-28 | 2015-01-28 | 邵素英 | 复合生物肥及其制备方法 |
| CN104388332A (zh) * | 2014-09-30 | 2015-03-04 | 天津天绿健科技有限公司 | 一种泡菜发酵用复合菌剂产品及其制备方法 |
| CN105061068A (zh) * | 2015-08-18 | 2015-11-18 | 山东中瀚生物科技有限公司 | 一种辣木多糖富集生物液体肥料及其制备方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2761117C1 (ru) * | 2020-12-09 | 2021-12-06 | Общество с ограниченной ответственностью "ЭКОС" | Технология производства жидкой формы комбинированного биопрепарата на основе Bacillus subtilis и Bacillus megaterium var. phosphaticum |
| CN112661579A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-04-16 | 沈阳农业大学 | 一种能改良盐碱地的解磷微生物制剂及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104478532A (zh) | 一种高效微生态生物肥及其制备方法 | |
| CN103739315B (zh) | 一种绿色微生态复合肥的制备方法 | |
| CN104293719B (zh) | 一种发酵床陈化垫料的快腐菌剂、有机肥及其生产方法 | |
| CN103773720B (zh) | 一种微生物肥料的制备方法 | |
| CN103739319B (zh) | 一种微生物肥料 | |
| CN103773719B (zh) | 一种微生态复合肥的制备方法 | |
| CN103739321B (zh) | 一种绿色微生态复合肥 | |
| CN104673675B (zh) | 一种绿色微生态复合肥及其制备方法 | |
| CN104341183A (zh) | 一种生物菌肥制备方法 | |
| CN103740616B (zh) | 一种生物复合肥 | |
| CN105777283A (zh) | 一种水溶性复合生物肥及其制备 | |
| CN103601539A (zh) | 复合生物肥料及其生产方法 | |
| CN103739317B (zh) | 一种微生态复合肥 | |
| CN103739322B (zh) | 一种生物复合肥的制备方法 | |
| CN104341239A (zh) | 一种生物菌肥 | |
| CN105907397A (zh) | 一种复合微生物肥及其制备 | |
| CN103773698B (zh) | 一种高效微生物肥的制备方法 | |
| CN103773717B (zh) | 一种高效微生物肥 | |
| CN103773718B (zh) | 一种新型微生态肥的制备方法 | |
| CN104805029B (zh) | 一种微生态肥的制备方法 | |
| CN104311169A (zh) | 复合生物肥及其制备方法 | |
| CN103739316B (zh) | 一种微生物复合肥料 | |
| CN103739318B (zh) | 一种微生物复合肥料的制备方法 | |
| CN105924238A (zh) | 一种微生物复合肥及其制备 | |
| CN104805028A (zh) | 一种微生态肥 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160831 |