CN105777321A - 一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂及其制备方法，其水溶性有机质占总重量的20.9～24.7％，该水溶性有机质中的小分子水溶有机碳的重量以碳元素计算占该总重量的11.97～14.25％，枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL，并由如下重量份的组分组成：有机碳活性液92～97重量份、尿素1.5～2.5重量份、磷酸二氢钾0.8～1.2重量份和枯草芽孢杆菌制剂1.5～2.5重量份。本发明中的有机碳活性液既有其自身的肥料效果，同时又可作为枯草芽孢杆菌的碳源，使得枯草芽孢杆菌可存活一年以上；枯草芽孢杆菌又可以在应用效果上很好的辅助有机碳活性液，当这两样东西分开时，各自都在应用领域有所限制，当将其很好的结合到一起时，就产生了1+1＞2的效果。

Description

一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂及其制备方法。

背景技术

碳元素是植物必须的大量元素之首和新陈代谢的能源。以一百七十多年前西方学者创立的“化学植物营养学”为依据建立的我国经典的植物营养学和土壤肥料学，只承认植物所需的碳来源于CO₂气体通过叶片吸收和叶绿素光合转化一条碳“通道”，忽略了植物可以通过根系吸收小分子水溶有机碳的实际情况。既然人们忽略了给植物根部补充碳的重要性，而植物的光合作用所获得的碳源一般又是不够的，这样“碳短板”就产生了，这时，其他肥料施用再多也是没用的，产量只会逐年下降。

另一方面，人们常常把因果倒置过来，认为土壤板结所以土壤生物多样性受破坏。其实应该是：因土壤微生物的极度匮乏，没有微生物的活动，土壤才逐步板结的。土壤微生物为什么会极度匮乏，就是因为土壤缺碳，多数有益微生物失去碳源，也就不能繁殖了。关于微生物繁殖需要碳源，这方面普遍存在一个误解，以为土壤中有机质，有机质除以1.724就等于碳，微生物到土壤中应该不缺碳。其实土壤中有机质绝大多数须经微生物长时间分解才会产生少量微生物可直接吸收的小分子水溶有机碳，在微生物制剂中没有小分子水溶有机碳等于向无人区派出一支没有带军粮的空降兵，这支部队不但没有形成战斗力而且会被饿死。

以什么形式来给植物补碳呢？现有技术中，有人是采用施入二氧化碳气体肥的方式，这是想通过提高光合作用来给植物补碳，没有利用植物通过根系吸收碳营养的这条通道，有一些增产作用，但增长幅度达不到显著水平，且生产运行成本比较高，无法令人满意，大面积推广是不可能的。也有人将有机物料高温无氧裂解后得到单质炭就想作为碳肥用，但这种产品在水中仅是混悬物，不仅植物无法吸收，就连一般微生物也是无法利用的。也有人做出了纳米碳，这是绝佳的碳肥，但制造工艺太复杂了，短期内很难大规模应用。

那么能够作为植物补碳剂的有机养分应具备什么条件？第一是以碳元素为主要成分；第二是可水溶；第三是分子粒径应足够小，可被植物根系直接吸收。这种植物有机质养分就是小分子水溶有机碳。大量应用试验证明：排除所含的矿物质养分的因素，有机肥料中对农作物直接起促长作用的有效物质主要就是小分子水溶有机碳。普通有机肥料所含的小分子水溶有机碳含量只有1％左右，效果慢而差，有效碳还适于被土壤微生物直接吸收利用，加快其大量繁殖，这是改良土壤促进根系的重要因素。因此，将符合上述三个条件的有机碳养分以最合适的工艺和成本最大化的富集到一起，就可以做出优质的植物补碳剂。

中国发明专利ZL201210192776.9公开了一种有机碳活性液，很好的符合了上述三个条件。但该有机碳活性液不含有功能微生物，在某些领域比如有益菌已经灭绝的极度贫瘠土壤就或某些土传病害比较严重的地方需要同时施入一定量的功能微生物应用效果才能较好，因此需要制造含功能菌的水溶有机碳制剂。

功能微生物具有改善土壤理化性质、增强土壤酶活性，培肥疏松土壤，分泌促根素或其他植物信息素，提高矿物质肥料的吸收利用率，辅助植物抵御土传病害等功能。功能微生物经过多年的应用推广，这些功能效果已经得到公认，但是目前功能微生物也存在一些难以解决的问题：1、目前的功能微生物产品以固体难溶物作为载体的为主，在水肥一体化设施农业中就难以应用进去，有部分功能微生物产品是以液体水可溶作为载体的，但是其活菌数存活时间非常短，一般完全保质期只有两个月，到第三个月基本上活菌数就只剩下一半，再过一个月，活菌数就都死亡了，这就很难适应市场。2、很多功能微生物产品没有自带“口粮”，当这些功能微生物投入到贫瘠的土壤中，就无法存活，更别谈什么繁殖了。这也就是有的功能微生物制剂在应用上效果不显著或没有效果、有的功能微生物制剂用量越大效果却越差的原因？

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂。

本发明的另一目的在于提供上述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的制备方法。

本发明的具体技术方案如下：

一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，水溶性有机质占总重量的20.9～24.7％，该水溶性有机质中的小分子水溶有机碳的重量以碳元素计算占该总重量的11.97～14.25％，枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL，并由如下重量份的组分组成：有机碳活性液92～97重量份、尿素1.5～2.5重量份、磷酸二氢钾0.8～1.2重量份和枯草芽孢杆菌制剂1.5～2.5重量份；

其中，有机碳活性液的参数如下：以重量百分比计，含水率为46.0％～50.0％，水溶性有机质的含量为22.0～26.0％，小分子水溶性有机碳的含量为12.6～15.0％；枯草芽孢杆菌制剂的活菌量≥1×10¹⁰个/mL；尿素和磷酸二氢钾的含水率均为0。

在本发明的一个优选实施方案中，由如下重量份的组分组成：有机碳活性液95重量份、尿素2重量份、磷酸二氢钾1重量份和枯草芽孢杆菌制剂2重量份。

在本发明的一个优选实施方案中，所述枯草芽孢杆菌制剂采用三级扩培的方式制备。

进一步优选的，所述枯草芽孢杆菌制剂的制备方法包括如下步骤：

a、通过实验室筛选出生命力强的枯草芽孢杆菌，将其接种到100mL的营养液中于37℃恒温摇床条件下进行一级扩培24h，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌一级菌液；

b、从上述枯草芽孢杆菌一级菌液中，每5mL接种到95mL的营养液中于37℃恒温摇床条件下进行二级扩培8h，得到20瓶活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌二级菌液共2000mL；

c、将上述枯草芽孢杆菌二级菌液接种到38000mL的营养液中于37℃恒温搅拌条件进行三级扩培8h，得40000mL活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的所述枯草芽孢杆菌制剂，其含水量为90％，其比重为1.05g/mL。

一种上述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)按重量称取各组分；

(2)将有机碳活性液、尿素和磷酸二氢钾充分混合后采用80～85℃灭菌6～8h后冷却至室温，得混合溶液；

(3)将枯草芽孢杆菌制剂和上述混合溶液在15～45℃的条件下充分混合并培养2～3h，即得所述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂。

在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(2)为：将有机碳活性液、尿素和磷酸二氢钾充分混合后采用80℃灭菌6h后冷却至室温，得混合溶液。

在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(3)为：将枯草芽孢杆菌制剂和上述混合溶液在15～40℃的条件下充分混合并培养2h，即得所述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂。

本发明的有益效果是：

1、本发明的液体农用微生物制剂由有机碳活性液92～97重量份、尿素1.5～2.5重量份、磷酸二氢钾0.8～1.2重量份和1.5～2.5重量份的枯草芽孢杆菌制剂组成，其中的有机碳活性液既有其自身的肥料效果，同时又可作为枯草芽孢杆菌的碳源，使得枯草芽孢杆菌可存活一年以上；枯草芽孢杆菌又可以在应用效果上很好的辅助有机碳活性液，当这两样东西分开时，各自都在应用领域有所限制，当将其很好的结合到一起时，就产生了1+1＞2的效果。

2、本发明的液体农用微生物制剂用量少、功效强，全水溶，特别适合于各种水肥一体化设施农业使用，每亩每茬作物使用1～2次，每次使用3～5kg，比其他水肥管理同等的对照组增产15～50％(不同类作物差异比较大)，在出现土传病害或自然灾害的情况，增产率更高，而且农作物品质更好，这对农业现代化意义重大，可以避免在劳动力严重匮乏的今天，设施农业又重走单施化肥的老路，保证土壤的可持续利用。

附图说明

图1为本发明实施例1至3所制备的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的性状照片。

图2为本发明实施例1至3的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的制备工艺流程图。

图3为本发明实施例1的青花菜应用实验所得的三朵花的青花菜照片。

图4为本发明实施例1的黄瓜应用试验所得的黄瓜对比照片。

图5为本发明实施例2的玉米应用试验所得的收双棒的玉米照片。

具体实施方式

以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。

实施例1

制造本发明含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其质量要求是：产品全水溶，性状参看图1，该产品中有效成份有重量占该产品总重量20.9～24.7％的有机质且该有机质中小分子水溶有机碳的重量占该产品总重量11.97～14.25％、枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL。

制造本发明含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的过程，请参看图2。

(1)枯草芽孢杆菌制剂的生产制作，采用三级扩培的方式；首先，通过实验室筛选出生命力强的枯草芽孢杆菌，将其接种到装有100mL的营养液的三角瓶中进行一级扩培，放置到恒温37℃的摇床中扩培，24h后，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌一级菌液；从一级扩培得到的100mL一级菌液中，每5mL接种到装有95mL的营养液的三角瓶中进行二级扩培，共20瓶放置到恒温37℃的摇床中扩培8h后，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌二级菌液2000mL；将从二级扩培中得到的2000mL二级菌液接种到含有38000mL的营养液的发酵罐中进行三级扩培，恒温37℃搅拌扩培8h后可获得40000mL活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的所述枯草芽孢杆菌菌剂，其比重为1.05g/mL，其含水率为90％。其原料中的枯草芽孢杆菌的活菌量≥1×10¹⁰个/mL，耐受力强，芽孢率高，存活时间长，可自行筛选扩培或向福建绿洲生化有限公司购买。

(2)混合与灭菌；将1900kg有机碳活性液、40kg尿素、20kg磷酸二氢钾充分混合后采用80℃灭菌6个h后冷却至室温。其原料中的有机碳活性液可向福建绿洲生化有限公司购买，或者参考中国发明专利ZL201210192776.9制造，该有机碳活性液的含水率为50.0％，其比重为1.25g/mL，该有机碳活性液有重量占其总重量22.0％的有机质且该有机质中小分子水溶有机碳的重量(以碳元素计算)占该产品总重量的12.6％；其原料中的尿素为普通农用尿素，可从农资市场上购买，其含水率为零；其原料中的磷酸二氢钾为工业级磷酸二氢钾，可从化工市场上购买，其含水率为零；其中的枯草芽孢杆菌菌剂的活菌量≥1×10¹⁰个/mL。

(3)接种；将40kg的由步骤(1)所得的活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌菌剂与1960kg的由步骤(2)所得的冷却液在15℃的室温条件下充分混合并培养2h，制得全水溶的含小分子水溶有机碳和枯草芽孢杆菌的液体产品。

如此配制的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的有效成份计算如下：

1、物料总重量：1900kg+40kg+20kg+40kg＝2000kg

2、含水率：

(1900kg×50％+40kg×90％)÷2000kg×100％＝49.3％

3、有机质：

(1900kg×22％)÷2000kg＝20.9％

4、小分子水溶有机碳(以碳元素计算)：

(1900kg×12.6％)÷2000kg＝11.97％

5、产品中枯草芽孢杆菌含量：

产品中枯草芽孢杆菌总含量：

(40kg×10³g/kg÷1.05g/mL)×10¹⁰个/mL＝38.09×10¹³个

产品总容积：2000kg×10³g/kg÷1.25g/mL＝16.00×10⁵mL

产品中枯草芽孢杆菌含量：

(38.09×10¹³个)÷(16.00×10⁵mL)＝2.38×10⁸个/mL

按2×10⁸个/mL评价，符合GB20287～2006“有效活菌数”的标准。

由以上计算可知：按本配方配制的产品符合设计规定的质量指标。

青花菜应用实验

时间：2014.10.12～2015.1.16

实验材料：试验组使用本实施例制备的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂兑水300倍浇施三次，每次每亩5kg，并增施复合肥30kg/亩，其他水肥管理与对照组同。

实验结果如下表

讨论：图3为本应用试验所得的三朵花的青花菜，青花菜一般是按商品花销售，每朵花售价1.6元，使用了含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的试验组，在每株采摘了第一朵商品花后，植株没有老化，大部分又结出了第二朵商品花，追施适量肥料，在采摘了第二朵商品花后，还有大部分又长出了第三朵商品花，且第二次和第三次长出的商品花质量并不比第一朵差，卖出了一样的价格。而对照组只有少量在采摘了第一朵商品花后还能长出第二朵商品花，其他的都老化死掉了。对照组全部没有能长出第三朵商品花。这样，试验组的产值就大大增加了。

实验证明本发明的产品具有很好的增产增质效果，且对于多次采收的品种，植株采后恢复快，可以增加采收次数，延长采收期。本品用量少，携带方便，更可随水而行，对于高度自动化的水肥一体化设施农业，对于劳动力成本高和大棚、山地等地方是非常适合的。因此，本发明的产品对农业和肥料界的进步和变革将产生重大而深远的影响。

黄瓜应用试验：

时间：2015.2.15～2015.5.10

实验材料：试验组使用本实施例制备的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂兑水200倍浇施三次，第一次每亩3kg，第二次每亩5kg，第三次每亩5kg，其他水肥管理与对照组同。

实验结果如下表

讨论：图4为应用试验所得的黄瓜对比图，较直和大的为试验组所得的黄瓜，另一为对照组所得的黄瓜，从试验结果看，添加含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的试验组黄瓜采摘期延长22天，产量提高了51.1％，市场价每千g黄瓜为2元，直接带来经济增收为每亩6247.8元。且试验组的黄瓜口感更好更脆，常温下保存时间延长了5天，试验组的黄瓜会更有市场竞争力。

实施例2

制造本发明含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其质量要求是：产品全水溶，性状参看图1，该产品中有效成份有重量占该产品总重量20.9～24.7％的水溶有机质且该有机质中小分子水溶有机碳的重量占该产品总重量11.97～14.25％、枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL。

制造本发明含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的过程，请参看图2。

(1)枯草芽孢杆菌制剂的生产制作，采用三级扩培的方式；首先，通过实验室筛选出生命力强的枯草芽孢杆菌，将其接种到装有100mL的营养液的三角瓶中进行一级扩培，放置到恒温37℃的摇床中扩培，24h后，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌一级菌液；从一级扩培得到的100mL一级菌液中，每5mL接种到装有95mL的营养液的三角瓶中进行二级扩培，共20瓶放置到恒温37℃的摇床中扩培8h后，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌二级菌液2000mL；将从二级扩培中得到的2000mL二级菌液接种到含有38000mL的营养液的发酵罐中进行三级扩培，恒温37℃搅拌扩培8h后可获得40000mL活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的所述枯草芽孢杆菌菌剂，其比重为1.05g/mL，其含水率为90％。其原料中的枯草芽孢杆菌的活菌量≥1×10¹⁰个/mL，耐受力强，芽孢率高，存活时间长，可自行筛选扩培或向福建绿洲生化有限公司购买。

(2)混合与灭菌；将1900kg有机碳活性液、40kg尿素、20kg磷酸二氢钾充分混合后采用80℃灭菌6个h后冷却至室温。其原料中的有机碳活性液可向福建绿洲生化有限公司购买，或者参考中国发明专利ZL201210192776.9制造，该有机碳活性液的含水率为48.0％，其比重为1.27g/mL，该有机碳活性液有重量占其总重量24.0％的有机质且该有机质中小分子水溶有机碳的重量(以碳元素计算)占该产品总重量的13.8％；其原料中的尿素为普通农用尿素，可从农资市场上购买，其含水率为零；其原料中的磷酸二氢钾为工业级磷酸二氢钾，可从化工市场上购买，其含水率为零；其中的枯草芽孢杆菌菌剂的活菌量≥1×10¹⁰个/mL。

(3)接种；将40kg的由步骤(1)所得的活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌菌剂与1960kg的由步骤(2)所得的冷却液在15℃的室温条件下充分混合并培养2h，制得全水溶的含小分子水溶有机碳和枯草芽孢杆菌的液体产品。

如此配制的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的有效成份计算如下：

1、物料总重量：1900kg+40kg+20kg+40kg＝2000kg

2、含水率：

(1900kg×48％+40kg×90％)÷2000kg×100％＝47.4％

3、有机质：

(1900kg×24％)÷2000kg＝22.8％

4、小分子水溶有机碳(以碳元素计算)：

(1900kg×13.8％)÷2000kg＝13.11％

5、产品中枯草芽孢杆菌含量：

产品中枯草芽孢杆菌总含量：

(40kg×10³g/kg÷1.05g/mL)×10¹⁰个/mL＝38.09×10¹³个

产品总容积：2000kg×10³g/kg÷1.27g/mL＝15.75×10⁵mL

产品中枯草芽孢杆菌含量：

(38.09×10¹³个)÷(15.75×10⁵mL)＝2.42×10⁸个/mL

按2×10⁸个/mL评价，符合GB20287～2006“有效活菌数”的标准。

由以上计算可知：按本配方配制的产品符合设计规定的质量指标。

玉米应用试验：

时间：2015.2.20～2015.5.15；

实验材料：试验组使用本实施例制备的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂兑水200倍浇施两次，每次每亩5kg，其他水肥管理与对照组同。

实验结果如下表

讨论：图5为本应用试验所得的收双棒的玉米，从试验结果看，添加含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的试验组有大约八成植株长出了有商品价值的“双棒”，产量增加了77.6％，而且玉米粒更加紧实，口感更好，质量提高了。

实施例3

制造本发明含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其质量要求是：产品全水溶，，性状参看图1，该产品中有效成份有重量占该产品总重量20.9～24.7％的水溶有机质且该有机质中小分子水溶有机碳的重量占该产品总重量11.97～14.25％、枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL。

制造本发明含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的过程，请参看图2。

(1)枯草芽孢杆菌制剂的生产制作，采用三级扩培的方式；首先，通过实验室筛选出生命力强的枯草芽孢杆菌，将其接种到装有100mL的营养液的三角瓶中进行一级扩培，放置到恒温37℃的摇床中扩培，24h后，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌一级菌液；从一级扩培得到的100mL一级菌液中，每5mL接种到装有95mL的营养液的三角瓶中进行二级扩培，共20瓶放置到恒温37℃的摇床中扩培8h后，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌二级菌液2000mL；将从二级扩培中得到的2000mL二级菌液接种到含有38000mL的营养液的发酵罐中进行三级扩培，恒温37℃搅拌扩培8h后可获得40000mL活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌菌剂，其比重为1.05g/mL，其含水率为90％。其原料中的枯草芽孢杆菌的活菌量≥1×10¹⁰个/mL，耐受力强，芽孢率高，存活时间长，可自行筛选扩培或向福建绿洲生化有限公司购买。

(2)混合与灭菌；将1900kg有机碳活性液、40kg尿素、20kg磷酸二氢钾充分混合后采用80℃灭菌6个h后冷却至室温。其原料中的有机碳活性液可向福建绿洲生化有限公司购买，或者参考中国发明专利ZL201210192776.9制造，该有机碳活性液的含水率为46.0％，其比重为1.28g/mL，该有机碳活性液有重量占其总重量26.0％的有机质且该有机质中小分子水溶有机碳的重量(以碳元素计算)占该产品总重量的15.0％；其原料中的尿素为普通农用尿素，可从农资市场上购买，其含水率为零；其原料中的磷酸二氢钾为工业级磷酸二氢钾，可从化工市场上购买，其含水率为零；其中的枯草芽孢杆菌菌剂的活菌量≥1×10¹⁰个/mL。

(3)接种；将40kg的由步骤(1)所得的活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌菌剂与1960kg的由步骤(2)所得的冷却液在15℃的室温条件下充分混合并培养2h，制得全水溶的含小分子水溶有机碳和枯草芽孢杆菌的液体产品。

如此配制的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的有效成份计算如下：

1、物料总重量：1900kg+40kg+20kg+40kg＝2000kg

2、含水率：

(1900kg×46％+40kg×90％)÷2000kg×100％＝45.5％

3、有机质：

(1900kg×26％)÷2000kg＝24.7％

4、小分子水溶有机碳(以碳元素计算)：

(1900kg×15.0％)÷2000kg＝14.25％

5、产品中枯草芽孢杆菌含量：

产品中枯草芽孢杆菌总含量：

(40kg×10³g/kg÷1.05g/mL)×10¹⁰个/mL＝38.09×10¹³个

产品总容积：2000kg×10³g/kg÷1.28g/mL＝15.63×10⁵mL

产品中枯草芽孢杆菌含量：

(38.09×10¹³个)÷(15.63×10⁵mL)＝2.44×10⁸个/mL

按2×10⁸个/mL评价，符合GB20287～2006“有效活菌数”的标准。

由以上计算可知：按本配方配制的产品符合设计规定的质量指标。

白菜应用试验

时间：2015.2.26～2015.4.25

实验材料：A组为增施一次纯枯草芽孢杆菌(2×10⁸个/mL)每亩3kg；B组为增施一次本实施例制备的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂每亩3kg；C组为增施一次有机碳活性液每亩3kg；CK组为不添加以上各项，其他水肥管理各组相同。

实验结果如下表

结果证明：三种材料都有增产效果，以效果大小(功效)排列为：含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂＞有机碳活性液＞纯功能菌。

本领域普通技术人员可知，本发明的成分和参数在下述范围内变化时，仍能够得到与上述实施例相同或相近的技术效果，皆属于本发明的保护范围：

一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，水溶性有机质占总重量的20.9～24.7％，该水溶性有机质中的小分子水溶有机碳的重量以碳元素计算占该总重量的11.97～14.25％，枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL，并由如下重量份的组分组成：有机碳活性液92～97重量份、尿素1.5～2.5重量份、磷酸二氢钾0.8～1.2重量份和枯草芽孢杆菌制剂1.5～2.5重量份；

其中，有机碳活性液的参数如下：以重量百分比计，含水率为46.0％～50.0％，水溶性有机质的含量为22～26％，小分子水溶性有机碳的含量为12.6～15.0％；枯草芽孢杆菌制剂的活菌量≥1×10¹⁰个/mL，采用三级扩培的方式制备；尿素和磷酸二氢钾的含水率均为0。

一种上述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)按重量称取各组分；

(2)将有机碳活性液、尿素和磷酸二氢钾充分混合后采用80～85℃灭菌6～8h后冷却至室温，得混合溶液；

(3)将枯草芽孢杆菌制剂和上述混合溶液在15～45℃(优选15～40℃)的条件下充分混合并培养2～3h，即得所述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂。

以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。

Claims (7)

1.一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其特征在于：水溶性有机质占总重量的20.9～24.7％，该水溶性有机质中的小分子水溶有机碳的重量以碳元素计算占该总重量的11.97～14.25％，枯草芽孢杆菌的活菌量≥2×10⁸个/mL，并由如下重量份的组分组成：有机碳活性液92～97重量份、尿素1.5～2.5重量份、磷酸二氢钾0.8～1.2重量份和枯草芽孢杆菌制剂1.5～2.5重量份；

其中，有机碳活性液的参数如下：以重量百分比计，含水率为46.0％～50.0％，水溶性有机质的含量为22.0～26.0％，小分子水溶性有机碳的含量为12.6～15.0％；枯草芽孢杆菌制剂的活菌量≥1×10¹⁰个/mL；尿素和磷酸二氢钾的含水率均为0。

2.如权利要求1所述的一种含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其特征在于：由如下重量份的组分组成：有机碳活性液95重量份、尿素2重量份、磷酸二氢钾1重量份和枯草芽孢杆菌制剂2重量份。

3.如权利要求1或2所述的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌制剂采用三级扩培的方式制备。

4.如权利要求3所述的含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌制剂的制备方法包括如下步骤：

a、通过实验室筛选出生命力强的枯草芽孢杆菌，将其接种到100mL的营养液中于37℃恒温摇床条件下进行一级扩培24h，得到活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌一级菌液；

b、从上述枯草芽孢杆菌一级菌液中，每5mL接种到95mL的营养液中于37℃恒温摇床条件下进行二级扩培8h，得到20瓶活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的枯草芽孢杆菌二级菌液共2000mL；

c、将上述枯草芽孢杆菌二级菌液接种到38000mL的营养液中于37℃恒温搅拌条件进行三级扩培8h，得40000mL活菌量为1×10¹⁰个/mL以上的所述枯草芽孢杆菌制剂，其含水量为90％，其比重为1.05g/mL。

5.一种权利要求1至4中任一权利要求所述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)按重量称取各组分；

(2)将有机碳活性液、尿素和磷酸二氢钾充分混合后采用80～85℃灭菌6～8h后冷却至室温，得混合溶液；

(3)将枯草芽孢杆菌制剂和上述混合溶液在15～45℃的条件下充分混合并培养2～3h，即得所述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂。

6.如权利要求5所述得制备方法，其特征在于：所述步骤(2)为：将有机碳活性液、尿素和磷酸二氢钾充分混合后采用80℃灭菌6h后冷却至室温，得混合溶液。

7.如权利要求5所述得制备方法，其特征在于：所述步骤(3)为：将枯草芽孢杆菌制剂和上述混合溶液在15～40℃的条件下充分混合并培养2h，即得所述含小分子水溶有机碳的液体农用微生物制剂。