CN105766415A

CN105766415A - 一种筛选耐盐葡萄品种的方法

Info

Publication number: CN105766415A
Application number: CN201610248485.5A
Authority: CN
Inventors: 杜磊
Original assignee: Yuncheng University
Current assignee: Yuncheng University
Priority date: 2016-04-20
Filing date: 2016-04-20
Publication date: 2016-07-20

Abstract

本发明提供了一种筛选耐盐葡萄品种的方法，所述方法从不同品种的葡萄枝条中挑选出枝条长度相同、茎径相同、插条带芽数相同、芽饱满的枝条，移栽至盛有1/2Hoagland营养液的气雾栽培周转箱中培育成葡萄植株，选出长势一致的植株记录下植株叶片的叶绿素含量X1并分成盐处理组和空白对照组两组，空白对照组仍采用1/2Hoagland营养液进行气雾栽培，盐处理组采用加入了100mmol/L的NaCl的1/2Hoagland营养液进行气雾栽培。过预定时间之后，分别对盐处理组和空白对照组的葡萄植株叶片的叶绿素含量进行测定，通过对叶片的叶绿素含量进行分析对比即可筛选出更耐盐的葡萄品种。该方法成本不高，易于操作便于在各个地方推广实施。

Description

一种筛选耐盐葡萄品种的方法

技术领域

本发明涉及一种筛选葡萄品种的方法，尤其涉及一种筛选耐盐葡萄品种的方法。

背景技术

土壤盐渍化一直是一个严重的世界性问题，是限制果树发展的重要因素。葡萄属于葡萄科葡萄属，落叶藤本植物，是世界第二大水果，其产量几乎占全世界水果的四分之一。虽然葡萄是抗旱、耐瘠、耐盐碱的植物，但品种之间的差异性较大，因此需要筛选出耐盐的葡萄品种。

长期以来，对耐盐碱葡萄的筛选或鉴定，均是采用田间盐碱地、人工盐池进行试验，或室内测定一些生理生化的参数，作为比较参考。现有方法是根据葡萄材料在盐碱地或者盐池中生长状况进行盐害调查进行判断是否对盐碱具有耐性。虽然该方法是直接在田间鉴定的，鉴定结果相对较直接，但每年葡萄有特定的生长季节，即每年只能在特定季节进行试验；另外，对检定场所要求也较高，如盐浓度要有一定的梯度，盐池或盐碱地场所无法更换，因为经过这类鉴定试验的盐碱地或盐池不可以用来种植其他植物，以防对其他作物带来盐害，占地面积大，鉴定效率低；而且盐害症状是个定性的范围，没有具体的数字量化，不同的检定人员观察的结果差异较大，得出的结论具有差异和不稳定；田间盐碱地是自然状态的，且土壤的混匀程度及盐碱度不易统一，盐池的盐分虽然是人工撒入的NaCl，但进入土壤后，土壤的成分、PH值以及天气降雨等因素均会引起盐分水平的随时变化，年度间及平行间试验结果的可比性较差。

现有技术还有一种水培耐盐筛选方法，以人工创造的根系环境取代了土壤环境，由于其在耐盐鉴定中有许多优势，特别它提供了一个均一的根系生态环境，因而可以准确测定出植物对盐害的反应，所以在植物耐盐鉴定中得到了广泛应用。但是水培由于植物根系进行无氧呼吸容易出现烂根的情况。

因此缺少一种栽培环境易控制且植株不易烂根、易操作的筛选耐盐葡萄品种的方法。

发明内容

为了解决上述问题，本发明采用气雾栽培葡萄植株来选育耐盐葡萄品种。该方法的栽培环境容易统一控制、成本更低、检测周期更短、耐盐检测的准确度更高、植株根系环境好不易烂根并易于操作便于在各个地方推广实施。

一种筛选耐盐葡萄品种的方法，包括以下步骤：

步骤一：将预定盐浓度的培养液灌注到容器中；

步骤二：将不同品种的葡萄枝条浸泡在培养液里；

步骤三：培育预定时间后，选出枝条长度一致的葡萄植株，观测并记录葡萄植株长势；

步骤四：比较测量的各品种葡萄的植株长势选出更耐盐的葡萄品种。

一种筛选耐盐葡萄品种的方法，包括以下步骤：

步骤S1，从不同品种的葡萄枝条中挑选出枝条长度相同、茎径相同、插条带芽数相同、芽饱满的枝条，分别移栽至气雾栽培周转箱中，每个气雾栽培周转箱内倒入1/2Hoagland营养液，所述1/2Hoagland营养液的PH值为6.5，采用定时开关控制气雾栽培周转箱中的超声波雾化器，每工作10～20分钟，休息3～5分钟，每过20～24小时更换1/2Hoagland营养液；

步骤S2，培育10～20天后，选取长势一致的葡萄植株并测量记录下叶片的叶绿素含量X1，将选出的葡萄植株分成盐处理组和空白对照组两组，空白对照组仍采用步骤S1进行培育，盐处理组移栽至另一气雾栽培周转箱中，该盐处理组的气雾栽培周装箱内倒入NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液，采用定时开关控制气雾栽培周转箱中的超声波雾化器每工作15～25分钟，休息5～10分钟，每过10～15小时更换含有NaCl的1/2Hoagland营养液；

步骤S3，按照步骤S2的培育步骤再培育15～25天，分别对盐处理组和空白对照组的葡萄植株叶片的叶绿素含量进行测定，将盐处理组的葡萄叶片的叶绿素含量记为X2，空白对照组的葡萄叶片的叶绿素含量记为X3，测量时每片叶子至少选取3个不同部位进行测量然后求平均值得到该葡萄叶片的叶绿素含量；

步骤S4，计算每一株葡萄植株叶片的叶绿素含量变化幅度Y1，其中Y1＝X1-X2，

Y1值为正值，则数值越大，表明经过步骤S2处理后的葡萄叶片的叶绿素含量减少的幅度越大，对应的葡萄品种的耐盐性越差；

Y1值为负值，则绝对值越大，表明经过步骤S2处理后的葡萄叶片的叶绿素含量增加的幅度越大，对应的葡萄品种的耐盐性越好；

Y1值为负值时对应的葡萄品种的耐盐性，比Y1值为正值时对应的葡萄品种的耐盐性要好。

步骤S5，若Y1数值相同，则比较同一品种的葡萄植株盐处理组和空白对照组的叶片的叶绿素含量增量Y2，其中Y2＝X3-X2，

Y2值为正值时，其他培养条件相同时，数值越小，则表明盐处理同空白对照相比，该葡萄品种的叶片的叶绿素含量下降的幅度越小，说明对应葡萄品种的耐盐性越好；

Y2值为负值时，其他培养条件相同时，该负值的绝对值越大，则表明盐处理同空白对照相比，该葡萄品种的叶片的叶绿素含量增加的幅度越大，说明对应葡萄品种的耐盐性越好；

Y2值为负值时对应品种的耐盐性，比Y2值为正值时对应品种耐盐性要好。

进一步地，步骤S1和/或S2中的气雾栽培周转箱包括多孔泡沫板和箱体，每孔插入1株葡萄枝条或植株，该多孔泡沫板置于周转箱的箱体中。更进一步地，所述多孔泡沫板为多孔聚苯乙烯泡沫板。

进一步地，步骤S2和S3中用叶绿素仪对葡萄叶片的叶绿素含量进行测定。更进一步地，步骤S2和S3中测量叶绿素含量的叶片为取自葡萄植株上相同部位、相同功能的叶片更进一步地，步骤S3中盐处理组和空白对照组的葡萄植株每个品种都至少包括3株植株。

本发明的筛选耐盐葡萄品种的方法，从不同品种的葡萄枝条中挑选出枝条长度相同、茎径相同、插条带芽数相同、芽饱满的枝条，分别移栽至气雾栽培周转箱中，保证了葡萄枝条的成活率并且排除了品种之外的其他因素的影响。气雾栽培周转箱中盛有1/2Hoagland营养液，所述1/2Hoagland营养液的PH值为6.5，适宜葡萄植株的生长。同时采用定时开关控制气雾栽培周转箱中的超声波雾化器，每工作10～20分钟，休息3～5分钟，每过20～24小时更换1/2Hoagland营养液直至枝条培育成葡萄植株。培育10～20天后，选出长势一致的葡萄植株测量并记录下其叶片的叶绿素含量X1，并将选出的各品种葡萄植株都分成盐处理组和空白对照组两组，空白对照组仍采用1/2Hoagland营养液进行气雾栽培，盐处理组采用加入了100mmol/L的NaCl的1/2Hoagland营养液进行气雾栽培。再过15～25天之后，分别对盐处理组和空白对照组的葡萄叶片的叶绿素含量进行测定，将盐处理组的葡萄叶片的叶绿素含量记为X2，空白对照组的葡萄叶片的叶绿素含量记为X3，最后计算每一株葡萄叶片的叶绿素含量变化幅度Y1和同一品种的葡萄盐处理组和空白对照组的叶片的叶绿素含量增量Y2，分析Y1和Y2的数据进行对比即可筛选出更耐盐的葡萄品种。该方法相比于现有技术而言，栽培环境容易统一控制、成本更低、检测周期更短、耐盐检测的准确度更高、植株根系环境好不易烂根并易于操作便于在各个地方推广实施。

附图说明

图1为本发明筛选耐盐葡萄品种的方法流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种筛选耐盐葡萄品种的方法，具体包括以下步骤：

枝条的选育：从不同品种的葡萄枝条中挑选出枝条长度相同、茎径相同、插条带芽数相同、芽饱满的枝条，分别移栽至气雾栽培周转箱中。从不同品种的葡萄枝条中挑选出饱满、整齐无损伤的枝条分别进行移栽培育，保证了葡萄枝条的成活率的同时也排除了品种之外的其他因素的影响。其中气雾栽培周转箱包括盛有营养液的周转箱和置于周转箱中的多孔泡沫板，优选采用40孔的聚苯乙烯泡沫板，每孔插入1株葡萄枝条，每个容积为25L的气雾栽培周转箱中倒入10L的1/2Hoagland营养液，该营养液使用前将PH值调整为6.5。在此需要特别指出，土壤酸碱性划分为9等级。PH值小于4.5为极强酸性，4.5-5.5为强酸性，5.5-6.0为酸性，6.0-6.5为弱酸性，6.5-7.0为中性，7.0-7.5为弱碱性，7.5-8.5为碱性，8.5-9.5为强碱性，大于9.5为极强碱性。虽然葡萄对土壤要求不严格,在PH值位于4-8.5之间的各类土壤上均能生长，有较强的耐酸碱能力，但是发明人在大量实验的基础上，发现若将1/2Hoagland营养液的PH值调整为6.0-6.5等弱酸性范围，试验中的葡萄成活率会大大提高且烂根率都会大大降低，具体效果对比参见下表：

表1

PH值	土壤酸碱性	葡萄成活率	葡萄烂根率	葡萄结实率
					4.5	极强酸性	20％	75％-80％	15％
5.5	酸性	50％	40％	30％
					6.0	弱酸性	65-70％	20％	50-60％
6.5	弱酸性	85％	5％	80％以上
					7.0	中性	80％	15％-20％	75％
7.5	弱碱性	60％	20％	60-70％
					8.0	碱性	20％	20％-30％	30％

本发明优选的1/2Hoagland营养液在使用前将PH值调整为6.5，该PH值的营养液培育下的葡萄植株成活率很高、烂根率很低、结实率很高。同时采用定时开关控制气雾栽培周转箱中的雾化器间歇式工作，产生营养液气雾供植株根系吸收，优选采用超声波雾化器，超声波雾化器使用时方便快捷，且无噪音、震动等因素影响，超声波雾化器工作10～20分钟然后休息3～5分钟交替进行，经过实验验证工作15分钟然后休息4分钟为最佳的间歇工作频率，也是本发明的超声波雾化器的优选工作频率，不同工作频率下的超声波雾化器对实验结果的影响如表2所示。

表2

综合来看，营养液消耗越慢、对雾化器的损耗越小、枝条生长状态和枝条对营养液的吸收率越好的方案越符合本发明的要求，其中工作15分钟休息4分钟的方案效果最好。

每过20～24小时更换(优选24小时，每天定时更换，便于时间控制)周转箱中的营养液，防止营养液挥发或者被吸收导致的浓度差异过大，从而保持营养液新鲜足量以及浓度足够葡萄生长。周转箱的容积和营养液的体积可以自行选定，本发明部对此做限定，本发明优选用25L的周转箱中加入10L的营养液只是一个示例。

植株的分组处理：培育10～20天后(优选15天)，选出长势一致的葡萄植株测量记录下叶片的叶绿素含量X1，并将选出的各品种葡萄植株都分成盐处理组和空白对照组两组，其中盐处理组和空白对照组的葡萄植株每个品种都至少包括3株植株，更好地保证了不同植株个体对实验结果的影响。空白对照组仍采用上述“枝条的选育”步骤进行培育，盐处理组移栽至另一气雾栽培周转箱中，该盐处理组的气雾栽培周装箱内倒入NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液，采用定时开关控制气雾栽培周转箱中的雾化器间歇式工作，优选采用超声波雾化器，超声波雾化器使用时方便快捷，且无噪音、震动等因素影响，由于“植株的分组处理”步骤中的葡萄植株比“枝条的选育”步骤中的植株的株龄大，因此葡萄植株对营养液的吸收效率和吸收量更大，相应地超声波雾化器产生的营养液气雾要更充足，此时的雾化器每工作15～25分钟，休息5～10分钟交替进行，且每过10～15小时(优选12小时更换一次营养液便于时间控制，可每天早晚各更换一次)更换周转箱中的营养液，保持营养液新鲜足量以及浓度足够葡萄生长。发明人经过大量的试验之后优选每工作20分钟，休息7分钟。不同工作频率下超声波雾化器对处于生长期的葡萄植株的影响如表3所示。

表3

由于葡萄植株比葡萄枝条对营养液的吸收效率和吸收量更大，相应地超声波雾化器产生的营养液气雾就需要更充足，而长时间工作或者频繁开关机也对雾化器的损耗较大。综合来看，营养液消耗越慢、对雾化器的损耗越小、植株生长状态和植株对营养液的吸收率越好的方案越符合本发明的要求，其中工作20分钟休息7分钟的方案效果最好。

其中，选出长势一致的葡萄植株是为了控制初始条件一致，不至于干扰试验结果。对于NaCl的浓度的选用，发明人通过对常见的盐碱化土壤进行研究发现NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液更为契合常见的葡萄种植地区的盐碱地环境。过高则超过了盐碱化土壤对葡萄的生长的影响，一般葡萄在过高的盐碱化土壤中不能成活或者不结实。过低则没有很好的筛选作用，盐处理组和空白对照组之间的差异不明显。表4是发明人试验的不同浓度的含NaCl的1/2Hoagland营养液对葡萄的影响。其中，NaCl浓度过低则起不到应有的盐处理效果，过高则大大超出了现有耐盐植物的耐盐承受力而没有参考性。

表4

叶片的叶绿素含量测定：分组处理后再培育15～25天(优选20天，时间太短没有明显差距，太长葡萄植株易受其它因素影响产生误差)，分别对盐处理组和空白对照组的葡萄叶片的叶绿素含量进行测定，将盐处理组的葡萄叶片的叶绿素含量记为X2，空白对照组的葡萄叶片的叶绿素含量记为X3；对葡萄叶片的叶绿素含量X1、X2和X3采用叶绿素仪进行测定，测量叶绿素含量的叶片应当取自葡萄植株上相同部位、相同功能的叶片，并且每片叶子至少选取3个不同部位进行测量然后求平均值得到该葡萄叶片的叶绿素含量。

耐盐性初步对比：计算每一株葡萄植株叶片的叶绿素含量变化幅度Y1，其中Y1＝X1-X2，Y1值为正值，则数值越大，表明经过步骤S2处理后的葡萄叶片的叶绿素含量减少的幅度越大，对应的葡萄品种的耐盐性越差；Y1值为负值，则绝对值越大，表明经过步骤S2处理后的葡萄叶片的叶绿素含量增加的幅度越大，对应的葡萄品种的耐盐性越好；Y1值为负值时对应的葡萄品种的耐盐性，比Y1值为正值时对应的葡萄品种的耐盐性要好。

耐盐性进一步对比：若Y1数值相同，则比较同一品种的葡萄植株盐处理组和空白对照组的叶片的叶绿素含量增量Y2，其中Y2＝X3-X2，Y2值为正值时，其他培养条件相同时，数值越小，则表明盐处理同空白对照相比，该葡萄品种的叶片的叶绿素含量下降的幅度越小，说明对应葡萄品种的耐盐性越好；Y2值为负值时，其他培养条件相同时，该负值的绝对值越大，则表明盐处理同空白对照相比，该葡萄品种的叶片的叶绿素含量增加的幅度越大，说明对应葡萄品种的耐盐性越好；Y2值为负值时对应品种的耐盐性，比Y2值为正值时对应品种耐盐性要好。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤一：将预定盐浓度的培养液灌注到容器中；

步骤二：将不同品种的葡萄枝条浸泡在培养液里；

2.一种筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

Y1值为负值时对应的葡萄品种的耐盐性，比Y1值为正值时对应的葡萄品种的耐盐性要好；

Y2值为正值时，其他培养条件相同时，数值越小，则表明盐处理组同空白对照组相比，该葡萄品种的叶片的叶绿素含量下降的幅度越小，说明对应葡萄品种的耐盐性越好；

Y2值为负值时，其他培养条件相同时，该负值的绝对值越大，则表明盐处理组同空白对照组相比，该葡萄品种的叶片的叶绿素含量增加的幅度越大，说明对应葡萄品种的耐盐性越好；

3.根据权利要求2所述的筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于，所述气雾栽培周转箱包括多孔泡沫板和箱体，每孔插入1株葡萄枝条或植株，该多孔泡沫板置于周转箱的箱体中。

4.根据权利要求3所述的筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于，所述多孔泡沫板为多孔聚苯乙烯泡沫板。

5.根据权利要求2所述的筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于，步骤S2和S3中用叶绿素仪对葡萄叶片的叶绿素含量进行测定。

6.根据权利要求2所述的筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于，步骤S2和S3中测量叶绿素含量的叶片为取自葡萄植株上相同部位、相同功能的叶片。

7.根据权利要求2所述的筛选耐盐葡萄品种的方法，其特征在于，步骤S2和S3中盐处理组和空白对照组的葡萄植株每个品种都至少包括3株植株。