CN105380947A - 大环内酯化合物及它们的使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的赋形剂和式(I)的化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药，其中R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自C_1-6烷氧基和OH；R¹⁰选自H、-OH、-OP(O)Me₂、(II)、(III)、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立的是2-8，下标o是1-6；L¹和L⁴各自独立地选自(IV)和(V)，其中各M⁸独立地选自C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；L²和L³各自独立地选自(VI)、(VII)和(VIII)。

Description

大环内酯化合物及它们的使用方法

本申请是2008年3月11日提交的发明名称为“大环内酯化合物及它们的使用方法”的第200880128027.1号中国专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

无。

关于在联邦政府资助的研究或开发中作出本发明的权利声明

无。

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无。

发明领域

本发明涉及去甲基、羟基、去甲基羟基、环氧化物、N-氧化物、开放式半酮缩醇环和开联(seco)-大环内酯的结构，它们的合成、药物组合物和用于全身性和定位治疗应用的应用。

背景技术

雷帕霉素(西罗莫司)是用吸湿链霉菌(Streptomyceshygroscopicus)生产的31元天然大环内酯[C51H79N1O13；MWt＝914.2]并且发现于二十世纪七十年代(美国专利第3,929,992、3,993,749号)。雷帕霉素(结构如下所示)于1999年被食品药物管理局(FDA)批准用于预防肾移植排异反应。

雷帕霉素类似于他克莫司(与相同的细胞内结合蛋白或称为FKBP-12的亲免素结合)但是其作用机理不同。然而，他克莫司和环孢霉素通过阻断淋巴因子(比如IL2)基因转录来抑制T细胞激活，西罗莫司通过结合到哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)来抑制T细胞激活和T淋巴细胞增殖。雷帕霉素能与环孢霉素或他克莫司协同作用来抑制免疫系统。

雷帕霉素还用于预防或治疗全身性红斑狼疮[美国专利第5,078,999]、肺炎[美国专利第5,080,899]、胰岛素依赖型糖尿病[美国专利第5,321,009]、皮肤病，例如银屑病[美国专利第5,286,730]、肠病[美国专利第5,286,731]、血管损伤后平滑肌细胞增殖和内膜增厚[美国专利第5,288,711和5,516,781]、成人T细胞性白血病/淋巴瘤[欧洲专利申请525,960A1]、眼部炎症[美国专利第5,387,589]、恶性癌[美国专利第5,206,018]、心脏炎性疾病[美国专利第5,496,832]、贫血症[美国专利第5,561,138]和神经突加速生长[Parker,E.M.等，Neuropharmacology39,1913-1919,2000]。

尽管雷帕霉素能用于治疗各种疾病症状，但是该化合物作为医药药物的用途受到其极低和易变的生物利用度及其高免疫抑制效力和潜在的高毒性的限制。而且，雷帕霉素仅微溶于水。为了克服这些问题，已经合成该化合物的前药和类似物。已经记载过通过衍生雷帕霉素结构的31和42位(原来的28和40位)以形成甘氨酸盐、丙酸盐和吡咯烷基丁酸盐前药来制备的水溶性前药(美国专利第4,650,803号)。本领域中所述的一些雷帕霉素的类似物包括单酰基和二酰基类似物(美国专利第4,316,885号)、缩醛类似物(美国专利第5,151,4133号)、甲硅烷基醚(美国专利第5,120,842号)、羟基酯(美国专利第5,362,781号)、以及烷基、芳基、烯基和炔基类似物(美国专利第5,665,772、5,258,389、6,384,046号；WO97/35575)。

雷帕霉素的前药和类似物通过化学合成来合成，其中需要另外的合成步骤对某些位置进行保护和去保护。类似物还能以生物学方式合成，其中链霉菌属菌株经遗传改造以产生这些雷帕霉素的类似物。类似物需要保持蛋白质结合或其它细胞相互作用所需的位置并且不产生空间位阻，以便保持其活性。这些类似物的安全性需要用一系列临床前实验和临床实验进行广泛地试验。

本发明包含新型大环内酯类和大环内酯类的新应用，其中所述组合物能以化学方法和生物方法合成并且保存至少一部分免疫抑制、抗增殖、抗真菌和抗肿瘤性质，用于全身应用和定位应用。

发明内容

在一个实施方式中，本发明提供包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药的药物组合物：

式中R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、 -O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立的是2-8，下标o是1-6；L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中各M⁸独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；L²和L³各自独立地选自下组：

在第二个实施方式中，本发明提供用于体内使用的装置，该装置包括植入体和至少一个本发明化合物的来源。

在第三个实施方式中，本发明提供通过给予需要的对象治疗有效量的本发明化合物来抑制细胞增殖的方法。

在第四个实施方式中，本发明提供下式的大环内酯化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药：

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、M¹、M²、M³、M⁴,、M⁵、M⁶、M⁷、L¹、L²、L³和L⁴如上所述；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴、R⁷和R⁹是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R²不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁷和R⁹是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R⁴不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴和R⁷是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R⁹不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴、R⁷和R⁹是OMe，M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R¹⁰不是OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃。

在第五个实施方式中，本发明提供制备本发明化合物的方法，该方法包括使大环内酯与酸接触以便用亲核试剂取代烷氧基，由此制备本发明化合物。

在第六个实施方式中，本发明提供制备本发明化合物的方法，该方法包括使大环内酯与环氧化试剂接触以便将烯基改性为环氧基团，由此制备本发明化合物。

在第七个实施方式中，本发明提供一种药物组合物，该药物组合物包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药：

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶、M⁷、L¹、L²、L³和L⁴如上所述。

在第八个实施方式中，本发明提供一种药物组合物，该药物组合物包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药：

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶、M⁷、L¹、L²、L³和L⁴如上所述。

在第九个实施方式中，本发明提供一种治疗眼科病症或疾病的方法，该方法是通过给予需要该治疗的对象治疗有效量的本发明化合物来实现的。

附图简要说明

图1显示大环内酯类化合物的结构，其中一些潜在位点经化学改性后能提供本发明化合物。用方块标记的区域是脱甲基位点，而用圆圈标记的区域是羟基化位点，并且C＝C位点(C17＝C18、C19＝C20＝、C21＝C22、C29＝C30)是环氧化位点。

图2A-2FV显示本发明化合物。

图3显示具有可扩张结构的支架结构的例子。

图4显示化合物AR的制备型HPLC色谱图。

图5显示化合物AR的质子-NMR谱图。

图6显示化合物AR的液相色谱和质谱的结果。

图7(a)显示化合物AR的分析型HPLC色谱图。

图7(b)显示具有异构体的化合物AR的分析型HPLC色谱图。

图8显示接触不同浓度的雷帕霉素和化合物AR后人平滑肌细胞的增殖百分率。

图9显示经冠状动脉血管造影(QCA)分析，在猪冠状动脉模型中植入28天后，与释放雷帕霉素的Cypher支架相比，释放化合物AR的支架发生狭窄的定量结果。

图10显示猪冠状动脉模型中不同时间点化合物AR的组织浓度。

图11显示猪冠状动脉模型中从支架释放化合物AR的百分率。

图12(a)显示通过接触10nM浓度的大环内酯化合物AR和西罗莫司来抑制活化巨噬细胞释放的IL-6、MMP-9和MCP-1。

图12(b)显示通过接触10nM浓度的大环内酯化合物AR和西罗莫司来抑制活化巨噬细胞释放的IL-10。

图13显示接触不同浓度的17,18-29,30-双环氧大环内酯和化合物AR后人平滑肌细胞的增殖百分率。

图14显示本发明的16-O-脱甲基大环内酯的合成。

图15显示19,20-双-羟基大环内酯的合成。

图16显示17,18-29,30-双环氧大环内酯的合成。

图17显示31-羟基,44-羟基和47-羟基大环内酯的合成。

图18显示43-羟基和47-羟基大环内酯的合成。

发明详述

I.定义

如本文使用的，术语“酸”指任何当溶解在水中时提供pH小于7.0的溶液的化合物。酸通常被描述为贡献氢离子(H+)(Bronsted-Lowry)的化合物或电子对受体(路易斯酸)。用于本发明的酸包括但不局限于，HCl、H₂SO₄、HNO₃和乙酸。本领域的技术人员将认识到，其它酸能用于本发明。

如本文使用的，“给药”指全身和局部给药或它们的组合，例如口服、作为栓剂给药、局部接触给药、胃肠道外给药、血管内给药、静脉内给药、腹腔内给药、肌内给药、病损内(intralesional)给药、鼻内给药、肺给药、粘膜给药、经皮给药、皮下给药、鞘内给药、眼内给药、玻璃体内给药、经临时装置，例如导管和多孔气球递送、经植入体(例如聚合物植入体、渗透泵)或假体(例如药物释放支架)或其它装置递送给个体。本领域的技术人员将认识到，其它给予本发明化合物的模式和方法可用于本发明中。

如本文使用的，术语“烷氧基”指包含氧原子的烷基，例如甲氧基、乙氧基等。“卤代烷氧基”按对于烷氧基定义的，其中部分或全部氢原子被卤素原子取代。例如，卤代烷氧基包括三氟甲氧基等。本领域的技术人员将认识到，其它烷氧基能用于本发明。

如本文使用的，术语“烷基”指具有所示碳原子数的直链或支链的、饱和的脂肪族原子团。例如，C₁-C₆烷基包括但不局限于，甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。本领域的技术人员将认识到，其它烷基能用于本发明。

如本文使用的，术语“羟烷基”指其中至少一个氢原子被羟基取代的如上所定义的烷基。例如，羟烷基包括羟甲基、羟乙基(1-或2-)、羟丙基(1-、2-或3-)、羟丁基(1-、2-、3-或4-)、羟戊基(1-、2-、3-、4-或5-)、羟己基(1-、2-、3-、4-、5-或6-)、1,2-二羟基乙基，等等。本领域的技术人员将认识到，其它羟烷基能用于本发明。

如部位使用的，术语“体腔”指动脉、静脉或器官的内衬(lining)或空腔。

如本文使用的，术语“接触”指引起至少两种不同的物质接触以便它们能发生反应的过程。然而，应该认识到，所得反应产物可以由加入试剂间的反应直接产生，或由一种或多种加入试剂的中间体(其能够在反应混合物中产生)产生。

如本文使用的，术语“水合物”指与至少一个水分子络合的化合物。本发明化合物能与1-100个水分子络合。

如本文使用的，术语“植入体”指为了治疗病症而插入身体的医疗用具。植入体包括但不局限于药物释放装置。

如本文使用的，术语“抑制作用”、“抑制”和“抑制剂”指阻止、减小、削弱或减少特定作用或功能的化合物，或指阻止、减小、削弱或减少特定作用或功能的方法。

如本文使用的，术语“体内的”指哺乳动物身体。

如本文使用的，术语“异构体”指具有不对称碳原子(光学中心)或双键的本发明化合物，外消旋物、非对映体、对映体、几何异构体、结构异构体和个别异构体都应包括在本发明范围内。

如本文使用的，术语“器官”指哺乳动物的任何器官，例如但不局限于，心脏、肺、脑、眼、胃、脾、骨骼、胰腺、肾、肝、肠、子宫、结肠、卵巢、血液、皮肤、肌肉、组织、前列腺、乳房和膀胱。本领域的技术人员应认识到，其它器官能用于本发明。

如本文使用的，术语“过酸”指酸的-OH基被-OOH基取代的酸。过酸可以是式R-C(O)-OOH的过氧羧酸，其中R基可以是例如H、烷基、烯基或芳基等基团。过酸包括但不局限于，过氧乙酸和间氯-过氧苯甲酸(MCPBA)。本领域的技术人员将认识到，其它过酸能用于本发明。

如本文使用的，术语“过氧化物”指含有氧-氧单键的化合物。过氧化物的例子包括但不局限于，过氧化氢。本领域的技术人员将认识到，其它过氧化物能用于本发明。

如本文使用的，术语“药学上可接受的赋形剂”指有助于给予对象活性药剂和被对象吸收的物质。用于本发明的药物赋形剂包括但不局限于，聚合物、溶剂、抗氧化剂、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、甜味剂、调味剂、稳定剂、着色剂、金属、陶瓷及半金属。下文中对药学上可接受的赋形剂进行了进一步讨论。本领域的技术人员将认识到，其它药物赋形剂能用于本发明。

如本文使用的，术语“聚合物”指由共价化学键连接的重复结构单元或单体组成的分子。下文叙述了用于本发明的聚合物。本领域的技术人员将认识到，其它聚合物能用于本发明。

如本文使用的，术语“前药”指当该前药给予哺乳动物对象时能够释放本发明方法的活性药剂的化合物。活性成分的释放发生在体内。前药可以用本领域的技术人员已知的技术来制备。这些技术通常改性给定化合物中的合适官能团。然而，这些改性的官能团通过常规操作或在体内再生原先的官能团。本发明活性药剂的前药包括羟基、脒基、胍基、氨基、羧基或类似基团改性的活性药剂。

如本文使用的，术语“盐”指用于本发明方法的化合物的酸式盐或碱式盐。药学上可接受的盐的说明性例子是无机酸(盐酸、氢溴酸、磷酸等)盐、有机酸(乙酸、丙酸、谷氨酸、柠檬酸)盐。合适的药学上可接受的盐的其它信息可以参见《雷明顿药物科学》(Remington'sPharmaceuticalSciences)，第17版，宾夕法尼亚州伊斯顿的马克出版公司(MackPublishingCompany,Easton,Pa.)，1985，该文献通过引用结合于此。

本发明酸性化合物的药学上可接受的盐是用碱形成的盐，即阳离子盐，例如碱金属和碱土金属盐，例如钠、锂、钾、钙、镁以及铵盐，例如铵、三甲基铵、二乙基铵、和三-(羟甲基)-甲基-铵盐。

类似的酸加成盐，例如无机酸、有机羧酸和有机磺酸，例如盐酸、甲磺酸、马来酸的盐也是可能的，只要碱性基团，例如吡啶基构成部分结构。

可以通过使碱或酸与该盐接触并且以常规方法分离母化合物来再生化合物的中性形式。化合物的母体形式与各种盐形式在某些物理性质方面，例如在极性溶剂中的溶解性方面不同，然而在别的方面，这些盐等同于本发明目的的化合物的母体形式。

如本文使用的，术语“来源”指提供本发明化合物供给和治疗剂供给的本发明装置上的位置。该本发明装置可以具有一个以上来源，例如第一和第二来源。每一个来源可以具有不同的化合物和组合物并且可用于治疗不同的适应症。

如本文使用的，术语“对象”指动物，例如哺乳动物，包括但不限于，灵长类(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、猪、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在某些实施方式中，对象是人。

如本文使用的，术语“治疗剂”指对给予该治疗剂的病人具有疗效的药剂、化合物或生物分子。

如本文使用的，术语“治疗有效量或剂量”或“治疗足够量或剂量”或“有效或足够量或剂量”指对给药的对象产生疗效的剂量。确切的剂量将取决于治疗的目的并且可由本领域的技术人员使用已知的技术(见例如Lieberman，《药物剂型》(PharmaceuticalDosageForms)(第1-3卷，1992)；Lloyd，《药物组合的方式、科学和技术》(TheArt，ScienceandTechnologyofPharmaceuticalCompounding)(1999)；Pickar，《剂量计算》(DosageCalculations)(1999)；和《雷明顿：药学科学和实践》(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy)，第20版，2003，Gennaro编辑，LWW公司(Lippincott，Williams&Wilkins))确定。在敏化细胞中，治疗有效剂量常常低于非敏化细胞常用的治疗有效剂量。

如本文使用的，术语“人造血管”指用于哺乳动物的循环系统的假体。

II.本发明化合物

大环内酯、它们的盐、前药、互变异构体和异构体在本发明中将统称为“大环内酯”。

本发明化合物是下式的大环内酯化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药：

其中R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、 -O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立的是2-8，下标o是1-6；L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中M⁸各自独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；L²和L³各自独立地选自下组：

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴、R⁷和R⁹是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R²不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁷和R⁹是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R⁴不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴和R⁷是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R⁹不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴、R⁷和R⁹是OMe，M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R¹⁰不是OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃。

在一些实施方式中，R¹⁰是

在另一些实施方式中，R¹⁰是

在另一些实施方式中，R¹⁰是-OP(O)Me₂。

在另一些实施方式中，R¹⁰是

在另一个实施方式中，R¹⁰是

在另一个实施方式中，化合物是图2所示的化合物。在其它实施方式中，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹中至少一个是OH。在其它实施方式中，R⁴是OH。在另一些实施方式中，R¹、R⁶和R⁸各自是甲基，R²、R³和R⁵各自是H，R⁴和R¹⁰各自是OH，R⁷和R⁹各自是OMe，M¹、M²、M³、M⁴和M⁵各自是H，M⁶和M⁷各自是甲基，L¹和L⁴各自是L²和L³各自是

本发明提供式IA、IB、IC和ID具体描述的大环内酯化合物。

在一个实施方式，组合物含有大环内酯类，包括羟基、脱甲基、羟基脱甲基和环氧大环内酯。

具有一些可能进行化学改性以便提供本发明化合物的位点的某些大环内酯类的结构如下所示。

其中方块表示脱甲基位置；圆圈表示羟基化位置；三角形表示环氧化位置；曲线表示N-氧化位置；虚线表示开环位置；R¹⁰选自下组：-OH、 -OP(O)Me₂、-R^aOH，其中R^a是烷基，如–(CH₂)₂到(CH₂)₇和-R^bOR^c，其中R^b是C_2-6亚烷基，R^c是C_1-5烷基，例如40-O-(乙氧基乙基)雷帕霉素。

在一些实施方式中，本发明化合物包括某些脱甲基大环内酯类，例如单独的或相互组合的16-O-脱甲基大环内酯、39-O-脱甲基大环内酯、27-O-脱甲基大环内酯、16,27-双-O-脱甲基大环内酯、27,39-双-O-脱甲基大环内酯、16,39-双-O-脱甲基大环内酯，如式IA中所示。

式IA

其中

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自-OCH₃或-OH。

R⁴和R⁷都独立地选自-OH或-OCH₃。

R⁷和R⁹都独立地选自-OH或-OCH₃。

R⁴和R⁹都独立地选自-OH或-OCH₃。

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自-OH或-OCH₃。

并且R¹⁰的定义如上所述。

在另一个实施方式中，本发明化合物包括单独的或相互组合的羟基大环内酯，例如11-羟基大环内酯、12-羟基大环内酯、14-羟基大环内酯、24-羟基大环内酯、25-羟基大环内酯、25-甲基醇大环内酯、31-甲基醇大环内酯、35-甲基醇大环内酯、13-甲基醇大环内酯的组合物，如式IB中所示。

式IB

其中

R¹、R⁶、R⁸、M⁶、M⁷、M⁸和M^8a各自选自下组：-CH₃、-CH₂OH和-OH。R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵各自选自下组：-H和-OH。R⁹选自下组：-OH和-OCH₃。L₂选自下组：和

并且R¹⁰如上所述。

在另一个实施方式中，本发明化合物包括如式IC所示的环氧大环内酯，例如19,20-21,22-29,30三环氧大环内酯、17,18-19,20-21,22三环氧大环内酯和17,18-29,30双环氧大环内酯的组合物。

式IC

其中R¹⁰的定义如上所述。

式ID

在另一个实施方式中，本发明的化合物包括N-氧化大环内酯,11-羟基与10,14开环大环内酯,开联-大环内酯(1,34环开放)的组合物，如式ID所示。

其中，R¹、R⁶、R⁸、M⁶、M⁷、M⁸和M^8a各自独立地选自下组：–CH₃、-OH和C_1-6羟烷基。R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵各自独立地选自下组：–H和–OH。R⁴、R⁷、R⁹独立地选自下组：-OH和-OCH₃。L²选自下组：和

在另一个实施方式中，本发明化合物是式IA和IB的组合，包括单独的或相互组合的脱甲基羟基大环内酯，例如14-羟基-39-O-脱甲基大环内酯、16,39-双-O-脱甲基-24-羟基大环内酯、16,27-双-O-脱甲基-24-羟基大环内酯、27,39-双-O-脱甲基-24-羟基大环内酯的组合物。

在另一个实施方式中，本发明化合物是式IA和IC的组合，包括单独的或相互组合的环氧脱甲基大环内酯，例如17,18-19,20-双环氧-16-O-脱甲基大环内酯、17,18-29,30-双环氧-16-O-脱甲基大环内酯的组合物。

在另一个实施方式中，本发明化合物是式IA、IB和IC的组合，包括单独的或相互组合的环氧脱甲基羟基大环内酯，例如17,18-19,20-双环氧-16-O-脱甲基-24-羟基-大环内酯、17,18-29,30-双环氧-16-O-脱甲基-24-羟基-大环内酯的组合物。

本发明还包括式IA、IB、IC和ID的本发明化合物的盐、水合物、异构体、互变异构体、代谢物、N-氧化物和前药的组合。

式IA、IB、IC和ID的本发明化合物及其组合的优选实施方式的结构(A、B、C、...AA、AB、AC、...FB、FC、FD)见表1，其中一些显示在图2A-2FV中。(包括立体中心(sterocenter)：和)。

在一些实施方式中，本发明化合物具有以下结构：

本发明包括16-位的立体化学是外消旋(R,S)的化合物以及单独的在16位R和S立体异构体和该化合物的所有其它异构体。

本发明包括具有不同多晶型的化合物。这包括具有不同多晶型的16-O-脱甲基大环内酯。例如，16-O-脱甲基大环内酯的不同多晶型通过使用二氯甲烷(dichloromethylene)和使用甲醇和水的混合物来获得。

大环内酯类存在不同的编号方案。为了避免混淆，当本文命名特定的大环内酯时，参考使用以上化学式的编号方案对大环内酯命名。本发明还包括所有由于不同编号方案而具有不同名字的大环内酯，如果化学结构内相同位置上存在相同官能团。例如，39-O-脱甲基大环内酯是与41-O-脱甲基大环内酯相同的化合物，16-O-脱甲基大环内酯是与7-O-脱甲基大环内酯相同的化合物。

本发明化合物能用各种方法来制备。在一些实施方式中，通过对有机物菌株进行基因改造以便产生本发明化合物或通过其它方法以生物方式合成本发明化合物。

在另一个实施方式中，本发明化合物使用化学合成来制备。本发明化合物的化学合成能利用大环内酯的17-18、19-20、21-22三烯结构，这种结构促进C16甲氧基发生酸催化亲核取代，并允许引入数个不同的取代基并对大环内酯效应结构域进行选择性操控。用酸性试剂操控大环内酯中的C16甲氧基以产生本发明化合物。例如，可用不同亲核试剂，例如醇、硫醇和富电子芳基取代C16甲氧基。该合成方法可以不包括保护和脱保护步骤。

使用酸性试剂与具有三烯官能团的化合物的合成方法可应用于其它具有三烯官能团的化合物，以便合成相应的化合物类似物，提供不包括保护和脱保护步骤的合成方法。

在一些实施方式中，本发明提供制备本发明化合物的方法，该方法包含使大环内酯与酸接触以便用亲核试剂取代烷氧基，由此制备本发明化合物。在一些实施方式中，大环内酯是雷帕霉素。在其它实施方式中，亲核试剂选自-OH、-SH或富电子芳基。本领域的技术人员将认识到，其它方法可用于制备本发明化合物。

图14中用16-O-脱甲基大环内酯作为例子提供脱甲基大环内酯的合成方法。图15中用19,20-双羟基-大环内酯作为例子提供羟基大环内酯的合成方法。图16中用17,18-29,30-双环氧大环内酯作为例子提供环氧大环内酯的合成方法。

在另一个实施方式中，本发明提供制备本发明化合物的方法，该方法包括使大环内酯与合适的试剂，例如过酸或过氧化物接触以便使烯烃基改性成环氧基，由此制备本发明化合物。用于本发明方法中的过酸包括但不局限于式R-C(O)-OOH的过氧羧酸，其中R基可以是例如H、烷基、烯基或芳基等基团。在一些实施方式中，过酸可以是过氧乙酸或间-氯-过氧苯甲酸(MCPBA)。用于本发明方法中的过氧化物包括但不局限于过氧化氢。本领域的技术人员将认识到，其它环氧化试剂可用于本发明。

本发明化合物是任选地氘化的。

在一些实施方式中，本发明提供与相应母体大环内酯功效类似的本发明化合物。在另一个实施方式中。本发明提供效力小于相应母体大环内酯以便改善化合物安全性的本发明化合物。

III.本发明化合物的递送

本发明化合物可以以任何合适的方法给药。在一些实施方式中，这些化合物可通过口服、肌内、腹膜内、皮下、经肺、粘膜、经皮、血管内、通过眼睛的眼内或玻璃体内、和其它方式给药。在其它实施方式中，化合物经临时或永久的递送装置(例如植入体)定位给药，或用全身和定位方式的组合给药。例子包括但不局限于导管、支架、血管包裹物(vascularwrap)、泵、分流器(shunt)或其它临时或永久的递送装置。

A.装置

在一些实施方式中，本发明提供用于体内使用的装置，所述装置包括人造血管和至少一个本发明化合物的来源。

在其它实施方式中，本发明提供设计成向体内的体腔或器官释放化合物以便抑制细胞增殖或细胞迁移的装置。在另一个实施方式中，该装置设计成向体内的体腔或器官释放化合物以便抑制平滑肌细胞增殖或新生血管形成的装置。

在本发明的另一个实施方式中，递送装置是诸如移植物的装置，包括移植植入体、血管植入体、非血管植入体、可植入内腔假体、伤口闭合植入体、药物递送植入体、缝线、生物递送植入体、尿路植入体、子宫内植入体、器官移植物、眼科植入体、骨植入体，包括骨板、接骨螺钉、牙植入体、脊椎垫片等等。

当装置被设计为用于眼科病症或疾病时，本发明的植入体可通过介入程序植入到眼内或玻璃体内。这种植入体可以是不可生物降解、可生物降解、可移除或永久的。在其它实施方式中，可将植入体置于管(例如泪小管)中。在其它实施方式中，可将植入体放在眼体附近，或者置于眼内晶体(vitrealbody)附近，或者置于玻璃体内。本领域技术人员将了解可用于本发明的其它位置。

植入体通常能够进行以下一项或多项内容：向体腔、器官、脉管、导管、肌肉、组织块或骨提供支撑、包含、结合、固定、插入、闭合、维持、输送药物、输送生物制品，以便预防或治疗疾病，例如过度增生性疾病、再狭窄、心血管疾病、炎症、伤口愈合、癌症、动脉瘤、糖尿病、腹主动脉瘤、高钙血症或其它疾病。

本发明的植入体可以由金属、金属合金、聚合物、陶瓷、半金属、纳米复合材料或它们的组合形成。例如，植入体可以由金属，例如钽、铁、镁、钼等制成；由可降解的或不可降解的金属合金，例如316L不锈钢、碳钢、镁合金、NI-Ti、Co-Cr，例如L605、MP35等制成；由可降解或不可降解的聚合物，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚酯、聚酰胺、共聚物等或聚合物的混合物制成；由金属和金属或金属合金的组合，例如由不锈钢层和钛层等组合制成；由纳米复合材料，例如纳米碳纤维或纳米碳管等制成。

在另一个实施方式中，本发明提供其中的植入体是人造血管的装置。在一些实施方式中，人造血管包含可扩张结构。在其它实施方式中，人造血管包括至少部分由开放网络形成的支架、移植物或构架。在其它实施方式中，人造血管是支架。

在另一个实施方式中，本发明化合物可以施用于植入体表面附近。例如，本发明化合物可以结合在植入体内，包含在包衣中或承载在植入体上。

在一些实施方式中，本发明提供包含人造血管的装置，其中人造血管具有内腔表面和面对组织的表面，化合物与内腔表面和面对组织的表面中至少一个相结合。

在另一个实施方式中，本发明化合物施加在所有植入体的表面上。在另一个实施方式中，本发明化合物仅施加于近腔室或腔内的表面。在又一个实施方式中，本发明化合物仅施加于高应力区或低应力区。

在另一个实施方式中，本发明化合物包含在邻近植入体的可腐蚀或不可腐蚀的纤丝中。

用于承载本发明化合物的支架结构的例子如图3中所示，其处于压缩状态。该支架主体由多个环110构成。该环由具有通常可扩张的波状结构，例如之字型、锯齿形、正玄波形或其它形状的冠120和支柱130构成。该主体通过联接件或连接件140连接。可理解，连接件可以是任何长度或形状，或者如果冠直接相互连接则不需要该连接件。支架的典型压缩态直径为0.25-4mm、或更优地0.7-1.5mm，长度为5-100mm。在其张开状态，支架直径通常是其压缩态直径的至少两倍，甚至10倍或更多。因此，压缩态直径为0.7-1.5mm的支架可放射状地扩张至2-10mm或更大。

在约4至12个月的血管造影随访中，具有有效的大环内酯化合物，例如雷帕霉素的药物释放支架(Cypher^TM)的晚期管腔损失约0.01mm-0.2mm。对于相同的时间周期，裸金属支架的晚期管腔损失约0.70mm-1.2mm。较小晚期管腔损失通常能降低狭窄百分率。然而，在一些病例中，药物释放支架的晚期管腔损失比裸金属支架低很多，造成支架表面的组织覆盖度不够，这可能增加晚期支架血栓的发生率。

在一个优选的实施方式中，移植后约4-12个月后，承载本发明化合物的支架的晚期管腔损失比承载相应母体大环内酯的支架的晚期管腔损失多0.05-0.6mm、较优地0.1-0.4mm、更优地0.15-0.3mm。例如，移植后晚期管腔损失是0.01-0.6mm、较优地0.1-0.5mm和最优地0.2-0.4mm。在另一个实施方式中，本发明提供承载本发明化合物的支架的晚期管腔损失与承载相应母体大环内酯的支架相似。在另一个实施方式中，本发明提供承载本发明化合物的支架的晚期管腔损失高于承载相应母体大环内酯的支架。更大的晚期管腔能增加支架的组织覆盖度，这能改善支架的安全性。

在另一个优选的实施方式中，移植后4-12个月承载本发明化合物的支架的狭窄百分率比承载相应母体大环内酯的支架的狭窄百分率大1-30％、较优地3-20％、更优地5-15％。在另一个优选的实施方式中，本发明提供承载本发明化合物的支架的狭窄百分率与承载相应母体大环内酯的支架相似。在另一个优选的实施方式中，本发明提供承载本发明化合物的支架的狭窄百分率高于承载相应母体大环内酯的支架。在另一个优选的实施方式中，承载本发明化合物的支架的狭窄百分率高于承载相应母体大环内酯的支架但是低于裸金属支架。更高的狭窄率能增加支架的组织覆盖度，这能改善支架的安全性。

在一些实施方式中，本发明提供植入体上本发明化合物的量小于约1克/厘米²的装置。在其它实施方式中，植入体上化合物的量是约1纳克/厘米²-约1000微克/厘米²、较优地约1微克/厘米²-约500微克/厘米²、更优地约10微克/厘米²-约400微克/厘米²。在其它实施方式中，植物体上化合物的量小于约1毫克。在其它实施方式中，植物体上化合物的量约为1微克到50毫克，优选约为100微克到10毫克，更优选约为200微克到500微克。

在另一个实施方式中，本发明提供使植入体邻近组织中本发明化合物的浓度达到约0.001ng/gm组织-约1000μg/gm组织、较优地约1ng/gm组织-约500μg/gm组织、更优地约100ng/gm组织-约100μg/gm组织的装置。

在另一个实施方式中，本发明化合物能在小于5分钟到2年、较优地3天-6个月、更优地1周-3个月的周期内从植入体释放。在其它实施方式中，本发明化合物能在大于1天、较优地大于2周、更优地大于1个月的周期内从植入体释放。在另一个实施方式中，本发明化合物需要大于两年时间从支架完全释放。在一些实施方式中，在给定时间期限内释放的化合物的量是至少25％。在其它实施方式中，释放的化合物的量是至少50％。在其它实施方式中，释放的化合物的量是至少75％。在其它实施方式中，释放的化合物的量可以是至少80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％。

在另一个实施方式中，本发明提供在约1天至约2年的周期内从装置释放至少75％化合物的装置。在另一个实施方式中，在约3天至约6个月的周期内至少90％化合物从装置释放。在另一个实施方式中，在约1周至约3个月的周期内至少90％化合物从装置释放。

当本发明化合物通过注射液或滴眼剂经眼内或玻璃体内体给药时，化合物单独或在聚合物基质、溶剂或载体中的浓度可以为1微克/毫升-5毫克/毫升，优选为5微克/毫升至30微克/毫升。在给药后，在给药位置附近的组织中的本发明化合物的浓度可以为约0.1nM-500μM，优选为约1nM-100μM，更优选约为10nM-10μM。本领域技术人员将认识到本发明化合物也可为其它浓度。

本发明化合物可通过本领域已知的任何方式从植入体释放。在一些实施方式中，植入体通过主动或被动方式释放化合物。在其它实施方式中，植入体通过渗透压或扩散释放化合物。本领域技术人员将认识到从植物体释放化合物的其它方式可用于本发明。

在一些实施方式中，本发明提供还包括如下所述的治疗剂的装置。在以下其它的实施方式中，治疗剂在化合物释放之前、同时或之后释放。在其它实施方式中，化合物从第一来源释放并且治疗剂从第二来源释放。在另外的其它实施方式中，化合物和治疗剂从单一来源释放。

B.给药

本发明化合物能够以每日、间歇性或一次性剂量全身给药。每日全身剂量可以是0.1-20毫克/天、较优地0.5-10毫克/天、最优地1-5毫克/天。本领域的技术人员间认识到，其它剂量也可用于本发明。

本发明化合物可以以约1纳克/厘米²/天-约1000微克/厘米²/天、较优地约1微克/厘米²/天-约200微克/厘米²/天、更优地约5微克/厘米²/天-约100微克/厘米²/天的速率从植入体释放。

当本发明的化合物被设计成用于治疗眼科病症或疾病时，本发明的化合物可作为滴眼剂或注射液经眼睛以每日、间歇或一次剂量基础给药。该剂量可以为0.1微克-30毫克/天，优选为10微克-10毫克/天，最优选为100微克-1毫克/天。本领域技术人员将认识到其它剂量也可用于本发明。

C.药物制剂

在一些实施方式中，本发明提供包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药的药物组合物：

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶、M⁷、L¹、L²、L³和L⁴如上所述。

在一些其它实施方式中，本发明提供包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药的药物组合物：

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶、M⁷、L¹、L²、L³和L⁴如上所述。

在其它实施方式中，本发明提供包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药的药物组合物：

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶、M⁷、L¹、L²、L³和L⁴如上所述。

在另一个实施方式中，药物组合物包含图2的化合物。在其它实施方式中，R¹、R⁶和R⁸各自是甲基，R²、R³和R⁵各自是H，R⁴和R¹⁰各自是OH，R⁷和R⁹各自是OMe，M¹、M²、M³、M⁴和M⁵各自是H，M⁶和M⁷各自是甲基，L¹和L⁴各自是L²和L³各自是

在一些实施方式中，本发明提供药物组合物，其中药学上可接受的赋形剂选自聚合物、溶剂、抗氧化剂、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、甜味剂、调味剂、稳定剂、着色剂、金属、陶瓷或半金属。在其它实施方式中，药学上可接受的赋形剂是聚合物。

根据给药模式和剂型的性质，本发明的活性成分可以与药学上可接受的载体、稀释剂、佐剂、赋形剂或运载体，例如防腐剂、填充剂、聚合物、崩解剂、助流剂、湿润剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、润滑剂、酸化剂和分散剂混合。这些成分、包括可用于配制口服剂型的药学上可接受的载体和赋形剂在《药物赋形剂手册，美国制药协会》(HandbookofPharmaceuticalExcipients，AmericanPharmaceuticalAssociation)(1986)中有描述，该手册以其全部通过引用结合于此。药学上可接受的载体的例子包括水、乙醇、多元醇、植物油、脂肪、蜡聚合物、包括形成凝胶的和不形成凝胶的聚合物、和它们的合适的组合物。赋形剂的例子包括淀粉、预胶凝淀粉、微晶纤维素、乳糖、牛奶糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙、色淀(lake)混合物。崩解剂的例子包括淀粉、藻酸和某些复合硅酸盐。润滑剂的例子包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、以及高分子量聚乙二醇。本领域的技术人员将认识到，其它不同的赋形剂也可用于本发明制剂，本文提供的列表是不完全的。

合适的不可降解的或缓慢降解的聚合物包衣包括但不局限于：聚丙烯酰胺，聚-N-乙烯基吡咯烷酮，聚二甲基丙烯酰胺，2-丙烯酰氨基-2-甲基-丙磺酸、丙烯酸和甲基丙烯酸的的聚合物和共聚物，聚氨酯，聚乙烯亚胺，乙烯乙烯醇共聚物，硅酮，C-flex，尼龙，聚酰胺，聚酰亚胺，聚四氟乙烯(PTFE)，聚对二甲苯(parylene)，帕里拉(parylast)，聚(甲基丙烯酸甲酯)，聚(甲基丙烯酸正丁酯)，聚(甲基丙烯酸丁酯)与聚(乙烯乙酸乙烯酯)的共聚物或共混物，聚(甲基丙烯酸甲酯)，聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)，聚(甲基丙烯酸乙二醇酯)，聚(氯乙烯)，聚(二甲基硅氧烷)，聚(乙烯乙酸乙烯酯)，聚碳酸酯，聚丙烯酰胺凝胶等，包括其它合成或天然的聚合物；它们的混合物、共聚物或组合。

合适的生物可降解聚合物包衣包括但不局限于，聚(乳酸)，聚乳酸酯，聚(乙醇酸)，聚乙醇酸酯和共聚物，聚二氧六环酮(polydioxanone)，聚(谷氨酸乙酯)、聚(羟基丁酸酯)，聚羟基戊酸酯和共聚物，聚己内酯，聚酸酐，聚(原酸酯)；聚(醚酯)，聚乙二醇，聚(环氧乙烷)，聚(碳酸三甲酯)(poly(trimethylcarbonate))，聚碳酸亚乙基酯，聚(碳酸亚乙基酯)和聚(碳酸三甲酯)的共聚物，聚(碳酸亚丙基酯)，聚(亚氨基碳酸酯)(poly(iminocarbonate))，淀粉基聚合物，醋酸丁酸纤维素，聚酯酰胺，聚酯胺，聚氰基丙烯酸酯，聚磷腈，聚N-乙烯基-2-吡咯烷酮，聚马来酸酐，透明质酸(透明质酸酯/盐)，硫酸软骨素，硫酸皮肤素，羧甲基纤维素，硫酸肝素，硫酸角质素，羧甲基羟基丙基纤维素，羧甲基羟乙基纤维素，硫酸纤维素，磷酸纤维素，羧甲基瓜尔胶，羧甲基羟基丙基瓜尔胶，羧甲基羟基乙基瓜尔胶，黄原胶，角叉菜胶，阴离子多糖，阴离子蛋白质和多肽，季铵化合物包括硬脂酰氯化铵和苄基氯化铵，共聚物和其它脂肪族聚酯，或它们的合适的共聚物，包括聚(L-乳酸)和聚(ε-己内酯)的共聚物；它们的混合物，共聚物，离子聚合物或组合。

合适的天然包衣包括：纤维蛋白、白蛋白、胶原、明胶、糖胺聚糖、寡糖和多糖、软骨素、硫酸软骨素、羟基磷灰石(hypoxyapatite)、磷脂、磷酸胆碱、糖脂、脂肪酸、蛋白质、纤维素、和它们的混合物、共聚物、或组合。

合适的非聚合包衣包括金属包衣，例如钨、镁、钴、锌、铁、铋、钽、金、铂、不锈钢例如316L、304、钛合金；陶瓷包衣，例如氧化硅；半金属，例如碳、纳米多孔包衣；或它们的组合。

在一些实施方式中，药学上可接受的赋形剂是选自下组的聚合物：聚氨酯、聚乙烯亚胺、乙烯乙烯醇共聚物、硅酮、C-弗乐斯(C-flex)、尼龙、聚酰胺、聚酰亚胺、聚四氟乙烯(PTFE烯)、聚对二甲苯、帕里拉、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(氯乙烯)、聚(二甲基硅氧烷)、聚(乙烯乙酸乙烯酯)、聚碳酸酯、聚丙烯酰胺凝胶、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸正丁酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)与聚(乙烯乙酸乙烯酯)的共聚物或共混物、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸2-羟基乙酯)、聚(乙二醇甲基丙烯酸酯)、聚(碳酸乙二酯)、聚L丙交酯-乙交酯共聚物、聚L丙交酯-碳酸三亚甲基酯共聚物和聚L-丙交酯(polyL-lactide)。在另一个实施方式中，聚合物是聚(甲基丙烯酸正丁酯)。

在另一个实施方式中，本发明提供组合物，其中化合物含量为化合物与聚合物混合物的至少10％(w/w)。在另一个实施方式中，化合物的含量为至少20、25、30、40、50、55、60、70、75、80和90％(w/w)。在其它实施方式中，化合物的含量为至少25％(w/w)。在其它一些实施方式中，化合物含量为至少50％(w/w)。在其它实施方式中，化合物的含量为至少75％(w/w)。本领域的技术人员将认识到，其它组合物能用于本发明。

在另一个实施方式中，本发明化合物能施加到没有包衣的支架上。在另一个实施方式中，本发明化合物能与聚合物包衣如本发明化合物-聚合物基质组合施加到支架上。本发明化合物是完全或部分结晶的或是无定形的。聚合物可以是不可降解的、部分可降解的或完全可降解的。包衣也可以是非聚合包衣，例如金属包衣。在另一个实施方式中，本发明化合物能单独施加到支架上，或包含在具有聚合物或非聚合物外包衣的包衣中。在另一个实施方式中，支架包括布置在支架表面和本发明化合物或本发明化合物-聚合物基质之间的底包衣。合适的底包衣可以是聚合物包衣，例如二氯对二甲苯二聚体(paralyneC)、对二甲苯二聚体(paralyneN)、乙烯乙烯醇(EVOH)、聚己内酯、羟基化乙酸乙基乙烯酯(ethylvinylhydroxylatedacetate，EVA)等或它们的组合；或是非聚合包衣，例如金属或陶瓷等。

这些包衣可以通过任何不同的方法，包括但不局限于喷雾、超声波沉积、浸渍、喷墨分配、等离子体沉积、离子注入、溅射、蒸发、气相沉积、热解、电镀、辉光放电涂布等或它们的组合来施涂。

包衣厚度可以是1纳米-100微米、较优地100纳米-50微米、更优地1微米-20微米。

本发明化合物可以与抗氧化剂或稳定剂混合以便防止由于氧化或其它方式而降解。抗氧化剂包括但不局限于丁基化羟基甲苯(BHT)、硫酸亚铁、乙二胺四乙酸(EDTA)或其它。稳定剂包括但不局限于，戊烯(amglene)、氢醌、奎宁、焦亚硫酸钠或其它。抗氧化剂和稳定剂可以与化合物直接混合或与化合物制剂，例如化合物-聚合物基质共混以便减少生产过程中的构型变化或降解，并且延长化合物或含化合物的植入体的保存期或保藏期限。化合物中抗氧化剂，例如BHT的含量可以是0.01-10％、较优地0.05-5％、最优地0.1-1％。化合物中稳定剂，例如戊烯的含量可以是0.001-0.1％、较优地0.005-0.05％、最优地0.01-0.02％。本领域的技术人员将认识到，其它抗氧化剂和稳定剂能用于本发明。

本发明化合物能与治疗剂，例如抗血小板药、抗血栓药、消炎药、抗血管生成药、抗增殖药、免疫抑制剂、抗肿瘤药、或其它药剂或它们的组合联合使用。本领域的技术人员将认识到，其它治疗药能用于本发明。

治疗剂可以与本发明化合物一起和/或独立于本发明化合物结合在支架上。至少部分治疗剂可以在本发明化合物从支架释放之前、同时或之后从支架释放。治疗剂还可以在递送本发明化合物之前、期间或之后经全身性或定位给药方式单独地给予。

例如，本发明化合物与抗血小板药或抗血栓药，例如肝素、氯吡格雷、华法林、阿司匹林、力抗栓等一起给予。在另一个实施例中，本发明化合物与消炎药，例如阿斯匹林、双氯芬酸、消炎痛、舒林酸、酮洛芬、氟比洛芬、布洛芬、萘普生、吡罗昔康、替诺昔康、托美丁、酮咯酸、奥沙普嗪、甲芬那酸、非诺洛芬、萘丁美酮片(瑞力芬)、对乙酰氨基酚和它们的混合物；COX-2抑制剂，例如尼美舒利、NS-398、氟舒胺(flosulid)、L-745337、塞来考昔、罗非昔布、SC-57666、Dup-697、帕瑞昔布钠、JTE-522、伐地昔布、SC-58125、依托昔布、RS-57067、L-748780、L-761066、APHS、依托度酸、美洛昔康、S-2474、他克莫司和它们的混合物；糖皮质激素，例如氢化可的松、可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、甲泼尼松、曲安西龙、帕拉米松、氟泼尼龙、倍他米松、地塞米松、氟氢可的松、去氧皮质酮等或其类似物或它们的组合一起给予。

在一些实施方式中，本发明的化合物可与至少一种用于治疗眼科病症或疾病的治疗剂组合使用。本领域技术人员已知的任何合适的治疗剂可与本发明的化合物组合用于治疗眼科病症或疾病。可与本发明化合物组合使用的治疗剂包括但不限于：鲁斯特斯(lucentis)、阿瓦斯汀(avastin)、玛醋酐(macugan)、维克昔单抗(volociximab)、奥洛他定、梅地克(mydriatcs)、地塞米松、毛果芸香碱、托吡卡胺、喹诺酮、加兰他敏(galentamine)、氟轻松、曲安奈德、阿托品、硫酸阿托品、盐酸阿托品、溴甲阿托品、甲硝阿托品、粘酸阿托品、N-氧化阿托品、去氧肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、羟苯丙胺、氢溴酸羟苯丙胺、盐酸羟苯丙胺、碘化羟苯丙胺、环喷托酯、盐酸环喷托酯、后马托品、氢溴酸后马托品、盐酸后马托品、甲溴后马托品、东莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱、盐酸东莨菪碱、溴甲东莨菪碱、硝甲东莨菪碱、N-氧化东莨菪碱、托吡卡胺、氢溴酸托吡卡胺、盐酸托吡卡胺、毛果芸香碱、异毛果芸香碱、毒扁豆碱和季铵化合物，包括硬脂酰氯化铵和苄基氯化铵，包括它们的混合物、离子盐和组合。

用于眼科用途的本发明化合物的制剂可包括任何上述聚合物。可用于这种制剂的聚合物可以是任何尺寸。在一些实施方式中，聚合物的分子量可以在约50千道尔顿(kD)和8,000kD之间。本领域技术人员将认识到其它尺寸的聚合物可用于本发明。

在一些实施方式中，本发明的化合物可单独给药或作为化合物-聚合物制剂、化合物-溶剂制剂或化合物-载体制剂的一部分给药。本发明的所有制剂可包括活性和非活性组分。活性组分包括但不限于：抗炎剂、免疫调节剂和抗感染剂、抗氧化剂、抗体、抗生素、抗血管生成剂、抗脉管内皮生长因子剂、抗组织胺类和润滑剂。非活性组分包括但不限于：载体、溶剂、无机材料、pH调节剂、射线不透性材料、放射性材料、荧光材料、NMR对比材料或其它“报导剂或指示剂”材料。化合物-溶剂制剂中溶剂的例子包括但不限于水、盐水(saline)、醇和二甲亚砜。化合物-载体制剂中载体的例子是甘油、石蜡、蜂蜡、乙二醇、丙二醇、聚乙二醇和大粒凝胶。无机材料的例子包括但不限于硼酸、氯化钙、氯化镁、氯化钾、氯化钠、氯化锌、硼酸钠、聚维酮和磷酸氢二钠。pH调节剂的例子包括但不限于氢氧化钠、氯化氢、缓冲剂和其它无机和有机酸/碱。防腐剂的例子包括但不限于苯扎氯铵和聚季铵盐(polyquaternium)。润滑剂的例子包括但不限于羧甲基纤维素钠、聚乙二醇、丙二醇和乙二醇。本领域技术人员将认识到其它活性和非活性组分以及溶剂和载体可用于本发明。

在一些实施方式中，本发明提供组合物，其中小于约5％的化合物代谢为雷帕霉素。在一些其它的实施方式中，小于约1％的化合物代谢为雷帕霉素。在另一些其它的实施方式中，小于约0.1％的化合物代谢为雷帕霉素。

在其它实施方式中，本发明提供每日全身剂量为约0.1mg-20mg化合物的剂型的组合物。在一些其它实施方式中，化合物的每日全身剂量是约0.5mg-10mg。在另一个实施方式中，化合物的每日全身剂量是约1mg-5mg。

IV.治疗

本发明化合物可以用于治疗对称为大环三烯或大环内酯的化合物类型有反应的疾病。

本发明化合物可以单用或与其它药剂联用，以治疗哺乳动物疾病，包括以下情况，例如：

a)治疗和预防急性或慢性器官或组织移植排斥，例如治疗心、肺、心肺联合、肝脏、肾脏、胰腺、皮肤或角膜移植的接受者。它们还能用于预防移植物抗宿主病，例如骨髓移植后的疾病。

b)治疗和预防移植物血管病，例如动脉粥样硬化。

c)治疗和预防导致血管内膜增厚、血管阻塞、阻塞血管性动脉粥样硬化、再狭窄的细胞增殖和迁移。

d)治疗和预防自身免疫疾病和炎性疾病，例如病因包括自身免疫组件的炎性疾病，例如关节炎(例如类风湿关节炎、慢性进行性关节炎和变形性关节炎)和风湿性疾病。

e)治疗和预防哮喘。

f)治疗多药耐药疾病，例如多药耐药性癌症或多药耐药性AIDS。

g)治疗增生症，例如肿瘤、癌症、过度增生性皮肤病等。

h)治疗感染，例如真菌、细菌和病毒感染。

i)治疗或预防血管分流物中的细胞增殖。

i)治疗或预防眼科病症和疾病。

k)预防新生血管形成。

在体外模型中说明化合物AR和雷帕霉素(西罗莫司)抑制人细胞增殖的效力。该试验在实施例2中叙述并且结果显示在图8中。如图8中所示，化合物AR在一定浓度范围内抑制平滑肌细胞的生长。

在一些实施方式中，本发明提供通过给予需要的对象治疗有效量的本发明化合物来抑制细胞增殖或迁移的方法。

在其它实施方式中，本发明提供通过全身、局部或其组合方式给予本发明化合物的方法。

在一些其它的实施方式中，本发明化合物的给药途径是口服给药、作为栓剂给药，经局部接触、胃肠道外、血管内、静脉内、腹腔内、肌内、病损内、鼻内、肺、粘膜、经皮、眼部、皮下给药或鞘内给药。

在另外的其它实施方式中，本发明化合物通过经临时装置或植入体递送给药。在另一个实施方式中，临时装置选自导管或多孔气球。在另一个实施方式中，植入体是人造血管。在另一些实施方式中，人造血管包含可扩张结构。在另一个实施方式中，人造血管包含至少部分由开放网络形成的支架、移植物或构架。

在一个实施方式中，本发明化合物的抑制浓度(IC₅₀)约等于其相应母体大环内酯(图1中改性前)的IC₅₀。在另一个实施方式中，IC₅₀高于其相应母体大环内酯的IC₅₀。在另一个实施方式中，IC₅₀低于其相应母体大环内酯的IC₅₀。例如，IC₅₀是其相应母体大环内酯的IC₅₀的1/2至1/2000。

在一个优选的实施方式中，本发明化合物的IC₅₀是其相应母体大环内酯的IC₅₀的1.5-1000倍、较优地是其相应母体大环内酯的2-100倍、更优地是其相应母体大环内酯的5-50倍。在另一个实施方式中，本发明化合物的IC₅₀是约0.1nM-1μM、较优地约1nM-0.5μM、更优地约5nM-100nM。

测量本发明化合物效果的其它方法包括测量有效浓度(EC₅₀)。在一个实施方式中，EC₅₀约等于相应母体大环内酯的EC₅₀。在另一个实施方式中，EC₅₀高于其相应母体大环内酯的EC₅₀。在另一个实施方式中，EC₅₀低于其相应母体大环内酯的IC₅₀。

在一些实施方式中，本发明提供化合物的有效剂量约是0.1mg-20mg的方法。在一些其它实施方式中，化合物的有效剂量约是0.5mg-10mg。在另一些实施方式中，化合物的有效剂量是约1mg-5mg。

本发明化合物、组合物和装置用于抑制细胞因子。促炎细胞因子IL-6在应答不同种炎症刺激时合成并且用作炎症级联反应中的重要调节蛋白。IL-6在刺激损伤后急性期反应中起关键作用，包括释放血纤蛋白原和C-反应蛋白。

IL-6还可以直接参与再狭窄，因为已证明它能促进将白细胞征集到血管壁上和血管平滑肌细胞增殖，这些是过度增殖疾病，例如再狭窄的发病机理的必要因素。

基质金属蛋白酶(MMP-9)在细胞迁移和增殖，例如支架移植后新生内膜生长和血管重构的情况中起关键作用。MMP的释放造成富含蛋白聚糖的细胞外基质增加，这会增加血管损伤后平滑肌细胞迁移。

血浆活性MMP-9的水平可以是裸金属支架ISR的有用独立预测指标。(血浆活性基质金属蛋白酶9水平提高与冠状动脉支架内再狭窄相关联(ElevatedPlasmaActiveMatrixMetalloproteinase-9LevelIsAssociatedWithCoronaryArteryIn-StentRestenosis)，ArteriosclerThrombVaseBiol.2006；26:e121-e125.)

单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)是由许多细胞，包括血管平滑肌细胞和内皮细胞在体外分泌的有效的单核细胞引诱物。据显示，剔除MCP-1基因或阻断MCP-1信号能减少高胆固醇血症小鼠中的动脉粥样硬化。据显示，MCP-1在猴新生内膜增生发病机理中起关键作用。(小鼠和猴发生动脉外周损伤后单核细胞趋化蛋白-1通路在新生内膜增生中的重要性(ImportanceofMonocyteChemoattractantProtein-1PathwayinNeointimalHyperplasiaAfterPeriarterialInjuryinMiceandMonkeys)，CircRes.2002；90:1167-1172)。MCP-1在人和家兔动脉粥样硬化病变的巨噬细胞富集区域的小簇细胞中强烈表达(单核细胞趋化蛋白-1在人和家兔动脉粥样硬化病变的巨噬细胞富集区域中的表达(ExpressionofMonocyteChemoattractantProtein1inMacrophage-RichAreasofHumanandRabbitAtheroscleroticLesions)，PNAS，第88卷，5252-5256)。抑制MCP-1对治疗和预防上述炎性、增殖性和其它病情具有治疗作用。

白细胞介素-10(IL-10)是对单核细胞具有强烈抑制作用的抗炎细胞因子。据显示，IL-10减少损伤后内膜增生(在高胆固醇血症家兔中进行血管成形术或植入支架后白介素-10抑制内膜增生(Interleukin-10InhibitsIntimalHyperplasiaAfterAngioplastyorStentImplantationinHypercholesterolemicRabbits)Circulation.2000；101:908-916)。在应答LDL刺激中由人单核细胞内源性地产生IL-10抑制IL-12产生，这说明IL-10的交叉调节作用可以抗衡促炎反应。

A.眼科病症和疾病

在一些实施方式中，本发明的化合物、药物组合物和装置可用于治疗眼科病症和疾病。本发明的化合物、药物组合物和装置可用于治疗任何眼科病症或疾病。可通过本发明的化合物和装置治疗的眼科病症和疾病包括但不限于眼睑病症、泪系统和眼窝病症，泪小管堵塞，结膜病症，巩膜、角质层、虹膜和睫状体病症，晶状体病症，脉络膜和视网膜病症，与年龄相关的黄斑退行性改变(AMD)，糖尿病黄斑水肿(DME),青光眼，玻璃体和眼球病症，视神经和视通路病症，眼外肌病症，双目移动，调节和曲光病症，视觉障碍和失明等。可用本发明的化合物和装置治疗的其它眼科病症和疾病包括抑制细胞增殖，预防炎症，预防新生血管形成，保护神经血管系统，预防移植后免疫反应。本领域技术人员将认识到可使用本发明化合物和装置治疗的其它眼科病症和疾病。

现有的治疗方法包括外科手术和药疗法。外科治疗方法包括视网膜植入，高速激光眼外科手术，内皮角膜移植术、内障手术、青光眼手术、曲光手术、角膜手术、玻璃体视网膜手术、眼肌手术、眼整形外科手术、使用干细胞产生可植入眼内的角膜或角膜部分。

可使用上述本发明的化合物、药物组合物和装置治疗眼科病症和疾病。本发明的化合物和药物组合物可通过本领域技术人员已知的任何方法进行给药。在一些实施方式中，本发明的化合物通过植入体、注射液或滴眼剂进行给药。在一些其它实施方式中，给药是经眼睛的眼内或玻璃体内进行。在其它实施方式中，给药通过植入体进行。在其它实施方式中，化合物通过植入体给药，在此情况中化合物通过金属、陶瓷或聚合物包衣释放。

当给药是通过植入体进行时，化合物可以本领域已知的任何方式释放。在一些实施方式中，化合物从植入体的释放是通过扩散的渗透压进行。本领域技术人员将认识到从植入体释放化合物的其它方式可用于本发明。

在一些实施方式中，本发明化合物可与至少一种其它用于治疗眼科病症或疾病的治疗剂组合使用。本领域技术人员已知的任何合适的治疗剂可与本发明的化合物组合用于治疗眼科病症或疾病。在一些实施方式中，治疗剂包括但不限于抗炎剂、免疫调变剂和抗感染剂、抗氧化剂、抗体、抗生素、抗血管生成剂、抗脉管内皮生长因子剂、抗组织胺类和润滑剂。可与本发明化合物的化合物组合的治疗剂包括但不限于：鲁斯特斯(lucentis)、阿瓦斯汀(avastin)、玛醋酐(macugan)、维克昔单抗(volociximab)、奥洛他定、梅地克(mydriatcs)、地塞米松、毛果芸香碱、托吡卡胺、喹诺酮、加兰他敏(galentamine)、氟轻松、曲安奈德、阿托品、硫酸阿托品、盐酸阿托品、溴甲阿托品、甲硝阿托品、粘酸阿托品、N-氧化阿托品、去氧肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、羟苯丙胺、氢溴酸羟苯丙胺、盐酸羟苯丙胺、碘化羟苯丙胺、环喷托酯、盐酸环喷托酯、后马托品、氢溴酸后马托品、盐酸后马托品、甲溴后马托品、东莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱、盐酸东莨菪碱、溴甲东莨菪碱、硝甲东莨菪碱、N-氧化东莨菪碱、托吡卡胺、氢溴酸托吡卡胺、盐酸托吡卡胺、毛果芸香碱、异毛果芸香碱、毒扁豆碱和季铵化合物，包括硬脂酰氯化铵和苄基氯化铵，包括它们的混合物、离子盐和组合。

本申请还涉及下列实施方案：

1.一种治疗眼科病症或疾病的方法，该方法包括对需要该治疗的对象给予治疗有效量的下式化合物，及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药，从而治疗眼科病症或疾病：

其中

R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；

R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立地是2-8，下标o是1-6；

L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中各M⁸独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

L²和L³各自独立地选自下组：

2.如实施方案1所述的方法，其特征在于，所述眼科病症或疾病选自下组：眼睑病症、泪系统和眼窝病症，泪小管堵塞，结膜病症，巩膜、角质层、虹膜和睫状体病症，晶状体病症，脉络膜和视网膜病症，与年龄相关的黄斑退行性改变(AMD)，糖尿病黄斑水肿(DME),青光眼，玻璃体和眼球病症，视神经和视通路病症，眼外肌病症，双目移动，调节和曲光病症，视觉障碍和失明。

3.如实施方案1所述的方法，其特征在于，所述治疗方法选自下组：抑制细胞增殖，预防炎症，预防新生血管形成，保护神经血管系统，预防移植后免疫反应。

4.如实施方案1所述的方法，其特征在于，所述化合物通过植入体、注射液或滴眼剂给药。

5.如实施方案4所述的方法，其特征在于，所述给药是对眼睛的眼体、眼睛的眼内体或眼睛的玻璃体内体进行。

6.如实施方案4所述的方法，其特征在于，所述给药是通过植入体进行。

7.如实施方案6所述的方法，其特征在于，所述化合物是通过渗透压或扩散从植入体释放的。

8.如实施方案1所述的方法，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

9.如实施方案8所述的方法，其特征在于，R⁴是OH。

10.如实施方案9所述的方法，其特征在于，

R¹、R⁶和R⁸各自是甲基；

R²、R³和R⁵各自是H；

R⁴和R¹⁰各自是OH；

R⁷和R⁹各自是OMe；

M¹、M²、M³、M⁴和M⁵各自是H；

M⁶和M⁷各自是甲基；

L¹和L⁴各自是

L²和L³各自是

11.如实施方案1所述的方法，其特征在于，所述化合物与至少一种治疗剂共给药。

12.如实施方案11所述的方法，其特征在于，所述治疗剂选自下组：抗血小板药、抗血栓药、消炎药、抗血管生成剂、抗增殖药、免疫抑制剂和抗癌药。

13.如实施方案11所述的方法，其特征在于，所述治疗剂选自下组：鲁斯特斯、阿瓦斯汀、玛醋酐、维克昔单抗、奥洛他定、梅地克、地塞米松、毛果芸香碱、托吡卡胺、喹诺酮、加兰他敏、氟轻松、曲安奈德、阿托品、硫酸阿托品、盐酸阿托品、溴甲阿托品、甲硝阿托品、粘酸阿托品、N-氧化阿托品、去氧肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、羟苯丙胺、氢溴酸羟苯丙胺、盐酸羟苯丙胺、碘化羟苯丙胺、环喷托酯、盐酸环喷托酯、后马托品、氢溴酸后马托品、盐酸后马托品、甲溴后马托品、东莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱、盐酸东莨菪碱、溴甲东莨菪碱、硝甲东莨菪碱、N-氧化东莨菪碱、托吡卡胺、氢溴酸托吡卡胺、盐酸托吡卡胺、毛果芸香碱、异毛果芸香碱、毒扁豆碱、硬脂酰氯化铵和苄基氯化铵。

14.一种药物组合物，该药物组合物包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药：

其中

R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；

R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立地是2-8，下标o是1-6；

L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中各M⁸独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

L²和L³各自独立地选自下组：

15.如实施方案14所述的组合物，其特征在于，所述化合物是图2的化合物。

16.如实施方案14所述的组合物，其特征在于，

R¹、R⁶和R⁸各自是甲基；

R²、R³和R⁵各自是H；

R⁴和R¹⁰各自是OH；

R⁷和R⁹各自是OMe；

M¹、M²、M³、M⁴和M⁵各自是H；

M⁶和M⁷各自是甲基；

L¹和L⁴各自是

L²和L³各自是

17.如实施方案14所述的组合物，其特征在于，所述药学上可接受的赋形剂选自下组：聚合物、溶剂、抗氧化剂、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、甜味剂、调味剂、稳定剂、着色剂、金属、陶瓷和半金属。

18.如实施方案17所述的组合物，其特征在于，所述药学上可接受的赋形剂是聚合物。

19.如实施方案18所述的组合物，其特征在于，所述聚合物选自下组：聚氨酯、聚乙烯亚胺、乙烯乙烯醇共聚物、硅酮、C-弗乐斯、尼龙、聚酰胺、聚酰亚胺、聚四氟乙烯(PTFE)、聚对二甲苯、帕里拉、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(氯乙烯)、聚(二甲基硅氧烷)、聚(乙烯乙酸乙烯酯)、聚碳酸酯、聚丙烯酰胺凝胶、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸正丁酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)与聚(乙烯乙酸乙烯酯)的共聚物或共混物、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸2-羟基乙酯)、聚(甲基丙烯酸乙二醇酯)、聚(碳酸乙二酯)、聚L丙交酯-乙交酯共聚物、聚L丙交酯-碳酸三亚甲基酯共聚物和聚L-丙交酯。

20.如实施方案19所述的组合物，其特征在于，所述聚合物是聚(甲基丙烯酸正丁酯)。

21.如实施方案19所述的组合物，其特征在于，在所述化合物和所述聚合物的混合物中所述化合物的含量为至少25％(w/w)。

22.如实施方案21所述的组合物，其特征在于，所述化合物的含量为至少50％(w/w)。

23.如实施方案21所述的组合物，其特征在于，所述化合物的含量为至少75％(w/w)。

24.如实施方案14所述的组合物，其特征在于，少于约5％的所述化合物被代谢成雷帕霉素。

25.如实施方案14所述的组合物，其特征在于，少于约1％的所述化合物被代谢成雷帕霉素。

26.如实施方案14所述的组合物，其特征在于，少于约0.1％的所述化合物被代谢成雷帕霉素。

27.如实施方案14所述的组合物，所述组合物的剂型是所述化合物的每日全身剂量为约0.1mg-20mg。

28.如实施方案27所述的组合物，其特征在于，所述化合物的每日全身剂量为约0.5mg-10mg。

29.如实施方案27所述的组合物，其特征在于，所述化合物的每日全身剂量为约1mg-5mg。

30.一种用于体内应用的装置，所述装置包括：

植入体；和

至少一个实施方案14所述化合物的来源。

31.如实施方案30所述的装置，其特征在于，所述装置设计成向体内的体腔或器官释放所述化合物以便抑制细胞增殖。

32.如实施方案31所述的装置，其特征在于，所述装置设计成向体内的体腔或器官释放所述化合物以便抑制平滑肌细胞增殖和发炎。

33.如实施方案30所述的装置，其特征在于，所述植入体是人造血管。

34.如实施方案33所述的装置，其特征在于，所述人造血管包含可扩张结构。

35.如实施方案33所述的装置，其特征在于，所述人造血管包括至少部分由开放网络形成的支架、移植物或构架。

36.如实施方案35所述的装置，其特征在于，所述人造血管是支架。

37.如实施方案34所述的装置，其特征在于，所述人造血管具有内腔表面和面对组织的表面，所述化合物与内腔表面和面对组织的表面中至少一个相结合。

38.如实施方案30所述的装置，其特征在于，所述装置上所述化合物的量约是1纳克/厘米²-1000微克/厘米²。

39.如实施方案38所述的装置，其特征在于，所述装置上所述化合物的量约是1微克/厘米²-500微克/厘米²。

40.如实施方案38所述的装置，其特征在于，所述装置上所述化合物的量约是10微克/厘米²-400微克/厘米²。

41.如实施方案30所述的装置，其特征在于，邻近组织中所述化合物的浓度约是0.001ng/gm组织-1000μg/gm组织。

42.如实施方案41所述的装置，其特征在于，邻近组织中所述化合物的浓度约是1ng/gm组织-500μg/gm组织。

43.如实施方案41所述的装置，其特征在于，邻近组织中所述化合物的浓度约是100ng/gm组织-100μg/gm组织。

44.如实施方案30所述的装置，其特征在于，在约1天至2年的时期内至少75％所述化合物从所述装置释放。

45.如实施方案30所述的装置，其特征在于，在约3天至6个月的时期内至少90％所述化合物从所述装置释放。

46.如实施方案30所述的装置，其特征在于，在约1周至3个月的时期内至少90％所述化合物从所述装置释放。

47.如实施方案30所述的装置，其特征在于，所述装置还包括治疗剂。

48.如实施方案47所述的装置，其特征在于，所述治疗剂选自下组：抗血小板药、抗血栓药、消炎药、抗血管生成剂、抗增殖药、免疫抑制剂、抗癌药。

49.如实施方案47所述的装置，其特征在于，所述治疗剂在所述化合物释放之前、同时或之后释放。

50.如实施方案49所述的装置，其特征在于，所述化合物从第一来源释放并且所述治疗剂从第二来源释放。

51.如实施方案49所述的装置，其特征在于，所述化合物和所述治疗剂从单一来源释放。

52.一种通过给予需要的对象治疗有效量的实施方案14所述的化合物来抑制细胞增殖的方法。

53.如实施方案52所述的方法，其特征在于，实施方案14所述的化合物通过全身、局部或其组合途径给药。

54.如实施方案52所述的方法，其特征在于，实施方案14所述的化合物的给药途径是口服给药、作为栓剂给药，经局部接触、胃肠道外、血管内、静脉内、腹腔内、肌内、病损内、鼻内、肺、粘膜、经皮、眼部、皮下给药或鞘内给药。

55.如实施方案52所述的方法，其特征在于，实施方案14所述的化合物经临时装置或植入体递送给药。

56.如实施方案55所述的方法，其特征在于，所述临时装置选自导管和多孔气球。

57.如实施方案55所述的方法，其特征在于，所述植入体是人造血管。

58.如实施方案57所述的方法，其特征在于，所述人造血管包含可扩张结构。

59.如实施方案57所述的方法，其特征在于，所述人造血管包含至少部分由开放网络形成的支架、移植物、或构架。

60.如实施方案52所述的方法，其特征在于，所述化合物的IC₅₀为约0.1nM-1μM。

61.如实施方案60所述的方法，其特征在于，所述化合物的IC₅₀为约1nM-0.5μM。

62.如实施方案60所述的方法，其特征在于，所述化合物的IC₅₀为约5nM-100nM。

63.如实施方案52所述的方法，其特征在于，所述化合物的有效剂量为约0.1mg-20mg。

64.如实施方案63所述的方法，其特征在于，所述化合物的有效剂量为约0.5mg-10mg。

65.如实施方案63所述的方法，其特征在于，所述化合物的有效剂量为约1mg-5mg。

66.一种下式的化合物，及其盐、水合物、异构体、代谢物、N-氧化物和前药：

其中

R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；

R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立的是2-8，下标o是1-6；

L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中各M⁸独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

L²和L³各自独立地选自下组：

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴、R⁷和R⁹是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R²不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁷和R⁹是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R⁴不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴和R⁷是OMe，R¹⁰和M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R⁹不是OH；

前提是当R¹、R⁶、R⁸、M⁶和M⁷是Me，R²、R³、R⁵、M¹、M²、M³、M⁴和M⁵是H，R⁴、R⁷和R⁹是OMe，M⁸是OH，L²和L³是–CH＝CH-，L¹和L⁴是时，R¹⁰不是OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃。

67.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，R¹⁰是

68.如实施方案67所述的化合物，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

69.如实施方案68所述的化合物，其特征在于，R⁴是OH。

70.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，R¹⁰是

71.如实施方案70所述的化合物，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

72.如实施方案71所述的化合物，其特征在于，R⁴是OH。

73.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，R¹⁰是-OP(O)Me₂。

74.如实施方案73所述的化合物，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

75.如实施方案74所述的化合物，其特征在于，R⁴是OH。

76.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，R¹⁰是

77.如实施方案76所述的化合物，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

78.如实施方案77所述的化合物，其特征在于，R⁴是OH。

79.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，R¹⁰是

80.如实施方案79所述的化合物，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

81.如实施方案80所述的化合物，其特征在于，R⁴是OH。

82.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，所述化合物是图2的化合物。

83.如实施方案66所述的化合物，其特征在于，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷中至少一个是OH。

84.如实施方案83所述的化合物，其特征在于，R⁴是OH。

85.一种制备实施方案66所述的化合物的方法，所述方法包括使大环内酯与酸接触以便用亲核试剂取代烷氧基，由此制备实施方案66所述的化合物

86.如实施方案85所述的方法，其特征在于，所述大环内酯是雷帕霉素。

87.如实施方案86所述的方法，其特征在于，所述亲核试剂选自下组：-OH、-SH和富电子芳基。

88.一种制备实施方案66所述的化合物的方法，所述方法包括使大环内酯与环氧化试剂接触以便将烯基改性为环氧基，由此制备实施方案66所述的化合物。

89.如实施方案88所述的方法，其特征在于，所述大环内酯是雷帕霉素。

90.如实施方案88所述的方法，其特征在于，所述环氧化试剂选自下组：过酸和过氧化物。

91.如实施方案90所述的方法，其特征在于，所述环氧化试剂选自下组：间氯过氧苯甲酸和过氧化氢.

92.一种药物组合物，该药物组合物包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物和前药：

其中

R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；

R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、 -O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立的是2-8，下标o是1-6；

L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中各M⁸独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

L²和L³各自独立地选自下组：

93.一种药物组合物，该药物组合物包含药学上可接受的赋形剂和下式化合物及其盐、水合物、异构体、代谢物和前药：

其中

R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁸、M¹、M²、M³、M⁴、M⁵、M⁶和M⁷各自独立地选自下组：H、C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

R⁴、R⁷和R⁹各自独立地选自下组：C_1-6烷氧基和OH；

R¹⁰选自下组：H、-OH、-OP(O)Me₂、-O-(CH₂)_n-OH和-O-(CH₂)_m-O-(CH₂)_o-CH₃，其中下标n和m各自独立的是2-8，下标o是1-6；

L¹和L⁴各自独立地选自下组：

其中各M⁸独立地选自下组：C_1-6烷基、OH和C_1-6羟烷基；

L²和L³各自独立地选自下组：

人们能够认识到，本发明中公开的所有实施方式能单独使用或与本发明的其它实施方式或实施例结合使用。

V.实施例

实施例1：16-O-脱甲基大环内酯(化合物AR)的制备

用500ml0.1N盐酸处理500ml乙腈中的大环内酯雷帕霉素(1000mg、10.75mmol)。所得溶液在室温下搅拌约28小时。然后在分液漏斗中用二氯甲烷萃取反应混合物。有机层用水和盐水洗涤，然后用0.1M磷酸钠缓冲液(pH＝7.4)洗涤两次或直到pH＝7，然后用蒸馏(DI)水洗涤三次。最后，有机层用Na₂SO₄干燥并放置在冰箱中过夜。真空浓缩得到米色的化合物AR粉末(约820mg)。

化合物AR用制备型HPLC在购自SUPECO公司的AscentisC18(21.2x250mm，10μm)柱上纯化，在0-12分钟内使用甲醇:水(80:20)，然后在12.01-20分钟改为100％甲醇作为流动相，流速为15毫升/分钟。装载浓度是350mg/ml，进样量是100μl。用254nm的UV吸光度监测化合物。在这些条件下，化合物AR在9.0-11.5分钟流出，而原料和副产物在17.0-20.0分钟流出。

制备型HPLC也能使用乙腈:水梯度(从70:30开始)作为流动相来实施并用278nm的UV吸光度监测。使用该分离方法的制备型HPLC色谱图显示在图4中。

收集含有化合物AR的组分并合并，然后使用旋转蒸发器和冷冻干燥机使溶剂蒸发以便得到米色的化合物AR粉末。

¹HNMR(CDCl₃，400MHz，反式：顺式酰胺旋转异构体的混合物，括号中的化学位移指主要的旋转异构体)见图5。δ，ppm0.532(q，J＝12Hz，1H)，0.890(d，J＝6.8Hz，3H)，0.921(d，J＝6.8Hz，3H)，0.931(d，J＝6.4Hz，3H)，0.971(d，J＝6.8Hz，3H)，0.991(d，J＝6.6Hz，3H)，1.005(d，J＝6.4Hz，3H)，1.686(s，3H)，1.772(s，3H)，1.773(s，3H)，1.823(s，3H)，3.330(s，3H)，3.380(s，3H)，3.859(d，J＝5.2Hz，1H)，4.001(d，J＝3.6Hz，1H)，4.03-4.07(m，1H)，4.22(br，1H)，5.21-5.28(m，3H)，5.336(d，J＝11.6Hz，1H)，5.384(dd，J＝14.8，9.6Hz，1H)，6.117(dd，J＝14.4，10.8Hz，1H)，6.243(dd，J＝14.4，10.4Hz，1H)，6.376(dd，J＝14.8，11.2Hz，1H)。

与母体化合物的质子NMR相比，3.14ppm处峰的消失说明仅在C16位发生脱甲基作用并且完成了反应。(见JournalofAntibiotics1991，44(6)，688，以确定雷帕霉素的NMR谱图。)

化合物AR的化学结构进一步用质谱实验证实。片段化模式表明存在m/z900，而在相同的条件下雷帕霉素提供m/z914。图6中提供液相色谱和质谱实验的结果，它显示用m/z900确认化合物AR。

通过反向HPLC使用购自西格玛奥德里奇公司(SigmaAldrich)的SupelcoC18(4.6x150mm，5μm)柱测定化合物AR的总含量，其中使用甲醇:水(90:10)作为流动相，流速为1毫升/分钟。用254nm的UV吸光度监测化合物AR。化合物AR的保留时间是7.97分钟。图7显示总含量大于98％的化合物AR的分析型HPLC色谱图。化合物AR的纯度用反向HPLC使用购自沃顿斯公司(WatersCorporation)的YMCODS-ALC18(4.6x250mm，5μm)柱进行测定，其中使用乙腈:水梯度流动相，流速为1.0毫升/分钟。图7b显示经278nm的UV吸光度监测，化合物AR主要异构体纯度大于98％。

最大程度减少化合物AR的氧化的方法是在制备型HPLC后加入0.1％w/w丁基化羟基甲苯(BHT)。

实施例2：化合物AR的生物活性

化合物AR的效力通过体外人平滑肌细胞培养实验来说明。在接触不同浓度(0.005、0.01、0.05、0.1，0.5和1μM)的化合物AR和不同浓度(0.0005、0.001、0.01和0.1μM)的雷帕霉素1、3和8小时后，测定样品的胸苷掺入量。使平滑肌细胞与化合物AR和雷帕霉素接触1和3小时的较短时间后，化合物AR和雷帕霉素的IC₅₀分别是约0.05和0.01μM(如表1和图8中所示)。使平滑肌细胞与化合物AR和雷帕霉素接触8小时后，化合物AR和雷帕霉素的IC₅₀分别是约0.005和0.001μM。化合物AR的IC₅₀约为雷帕霉素的IC₅₀的五倍。

表I：接触不同浓度的雷帕霉素和化合物AR后人平滑肌细胞的增殖百分率数据

化合物AR

雷帕霉素

实施例3：含有化合物AR的支架的制备

在室温下将15mg聚(甲基丙烯酸正丁基酯)(PBMA)溶解在3mL二氯甲烷中。将10mg化合物AR放置在小瓶中并溶解在2mL含有或不含0.1％(w/w)BHT的二氯甲烷中。合并溶液并进一步用10mL二氯甲烷稀释。

使用微处理器控制的超声波喷雾器将450μg含PBMA的药物溶液施涂到18mm金属支架(可从加州桑尼维尔的万能医药公司(ElixirMedicalCorp，Sunnyvale，Calif.)购得)的全部表面。涂布后，将支架放置在真空室中。然后将支架安装在3.0×20mmPTCA输送导管的气球上。然后将该导管插入线圈并包装在特卫强袋中。该小袋用环氧乙烷消毒。再将袋包装在箔袋中，用氧清除剂和氮气吹扫，真空密封。

实施例4：释放化合物AR的支架的体内试验

通过比较28±2天猪冠状动脉中得自实施例3的化合物AR释放支架装置(如上所述制备)的血管造影结果和非患病猪冠状动脉模型中雷帕霉素释放支架装置Cypher^TM冠状动脉支架(考迪斯(Cordis)公司)的血管造影结果的方式，评估得自实施例3的化合物AR释放支架装置(如上所述制备)的效力。

选择非动脉粥样硬化猪模型，因为该模型已经广泛用于支架和血管成形术研究，产生大量关于血管应答性质及其与人血管应答的相关性的数据(Schwartz等,Circulation.2002；106:1867-1873)。根据美国国家研究委员会制定的实验动物护理和使用指南饲养和照顾这些动物。

所有动物在实验前至少三天开始并且在研究期间持续用每口服剂量阿司匹林(325mg)和氯吡格雷(75mg)进行预治疗。在麻醉诱导后，使用标准技术进入左或右股动脉，引入动脉套管并且使其前进到动脉中。

在荧光镜导向下进行血管造影，经套管插入7号引导导管并且使其前进到适当的位置，在冠状动脉内给予硝酸甘油。选择2.25-4.0mm平均管腔直径的冠状动脉段并且插入0.014"的导丝。进行定量冠状动脉造影(QCA)以便记录参考血管的直径。

使合适大小的支架前进到展开(deployment)位置。以稳定速率对气球充气至足够压力，以便达到气球与动脉比率为1.30:1.0。将压力维持约10秒。进行血管造影以便记录术后血管通畅状态和直径。

在指定终点为各个动物进行随访血管造影。定性评估各血管造影照片，用于证明支架迁移、管腔缩小、支架附着(apposition)、剥离(dissection)或动脉瘤的存在、和流动特性。完成随访血管造影后，对动物施以安乐死。

收获各动物的心脏并且用10％缓冲福尔马林以100-120mmHg灌注冠状动脉。心脏浸没在10％缓冲福尔马林中。记录任何心肌损伤或异常的观测数据。

测定或计算的血管造影参数包括：

■边缘血管(近端和远端)平均管腔直径(仅植入支架后和最终)

■靶区的平均管腔直径(所有血管造影照片)

■靶区的最小管腔直径(MLD)(仅植入支架后和最终)

■直径狭窄[1-(MLD/RVD)]×100％，其中RVD是阻塞位置的参考直径的计算值(通过基于软件的迭代线性回归技术产生无损伤血管投影的内插获得测量值)(仅最终的血管造影照片)

■气球与动脉的比值[气球/植入支架前平均管腔直径]

■支架与动脉的比值[植入支架后/植入支架前平均管腔直径]

■晚期损失比值[MLD_最终-MLD_{植入支架后}]

所有动物都存活至指定的终点。没有文件记录支架迁移、支架贴合不良、持续剥离或动脉瘤的迹象。Cypher支架的三个远离中心的数据点(完全闭塞或接近完全闭塞)被排除。与实验方案类似的此次和以前研究的Cypher支架提供的数据，即Cypher支架的平均狭窄百分率是20.21±11.45(n＝22)相比，化合物AR支架(约10微克/毫米长度药物剂量)的平均狭窄百分率是25.7±17.8(n＝15)(图9)。

本实施例中的化合物AR释放支架植入猪模型中28天时，产生比Cypher支架更高的狭窄百分率。

实施例5：支架释放化合物AR的体内药物代谢动力学

在猪冠状动脉模型中，在6小时、3天、7天和28天对得自实施例3的化合物AR支架系统的药物代谢动力学进行评估。所用的干预手术类似于实施例4中所述的直到支架移植的体内血管造影研究。

使合适大小的支架前进到展开位置。以稳定的速率向气球充气至足够压力以便达到气球与动脉比率为1:1。将压力维持约10秒。进行血管造影以便记录术后血管通畅状态和直径。植入总共9个支架(每个时间点3个)。

在合适的时间点使动物安乐死并且切除心脏。切除装支架的部分，包括约10mm邻近装支架部分的血管和10mm远离装支架部分的血管。将近端和远端部分分离并且储存在独立的小瓶中。小心地除去支架周围的组织并且将每一个支架放置在单独的小瓶中。然后，在利用液相色谱质谱(LCMS)分析前，全都冷冻至-70℃。

所有动物都存活至指定的终点。化合物AR的平均组织浓度和支架释放速率显示在图10和11中。本实施例中的化合物AR释放支架证明化合物AR从支架释放，在7天时释放大于40％的药物。

实施例6：17,18-29,30-双-环氧大环内酯(AS)的制备

将0.8mL5％NaOH-MeOH和2ml30％H₂O₂加入1克雷帕霉素于40ml甲醇中的溶液。反应混合物在室温下时搅拌24小时。如果TLC指示仍有一些雷帕霉素未反应，那么将额外的0.8mL5％NaOH-MeOH和2ml30％H₂O₂的混合物加入反应溶液中。继续在室温下搅拌直到TCL指示反应完成。用二氯甲烷和盐水萃取溶液三次。合并有机层并且用盐水和水洗涤，经无水MgSO₄干燥、滤除MgSO₄，溶液蒸发至留下粗产物。该粗产物进一步用TCL板纯化，得到0.40g(40％得率)的淡黄色粉末。¹HNMR(CDCl₃)(～4:1构象异构体的混合物，仅列出主要构象异构体的信号)与雷帕霉素相比的主要变化δ(ppm)1.75(s，1H)，1.98(s，1H)，6.71(ddd，5H，J1＝16Hz，J2＝8Hz，J3＝2.8Hz)。¹³CDEPT135NMR(CDCl₃)(～4:1构象异构体的混合物，仅列出主要构象异构体的信号)δ(ppm)152，140，133，128，127，126，84，83，76，74，67，59，56，44，43，41，40，36，35，34，33，31，29，28，22，21，20，17，16，15，13。质谱m/z＝962，雷帕霉素m/z＝930。

实施例7：17,18-29,30-双-环氧大环内酯(AS)的生物活性

17,18-29,30-双-环氧化物大环内酯的效力用体外人平滑肌细胞培养实验来说明。在接触不同浓度(0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1μM)17,18-29,30-双-环氧大环内酯和不同浓度(0.0005、0.001、0.01和0.1μM)化合物AR8小时后，测定样品的胸苷掺入量。在平滑肌细胞接触17,18-29,30-双-环氧大环内酯和化合物AR8小时后，17,18-29,30-双-环氧化物大环内酯和化合物AR的IC₅₀分别是约0.1和0.005μM(图13)。17,18-29,30-双-环氧大环内酯的IC₅₀约为化合物AR的20倍。

实施例8：17,18-19,20-21,22-三-环氧大环内酯(AY)的制备

在室温下将间氯过氧苯甲酸0.93g(3.22mmol)加入0.50g(0.5371mmol)雷帕霉素于10mlCHCl₃的溶液中。混合物在室温下时搅拌24小时。如果TLC指示仍有一些雷帕霉素未反应，那么加入额外的间氯过氧苯甲酸0.50g和5mlCHCl₃。继续在室温下搅拌直到TCL指示没有雷帕霉素为止。反应完成后，溶液用二氯甲烷稀释，用亚硫酸钠水溶液处理直到洗液用淀粉-碘化物试纸得到负结果。这确保所有过量的过酸已经被破坏，用若干份CH₂Cl₂萃取水层。然后有机层用两份20ml的5％碳酸氢钠洗涤以便除去苯甲酸。合并的有机萃取物用水洗涤，经无水MgSO₄干燥，滤除并且蒸发至留下粗制白色固体0.46g。用TCL板进一步纯化该粗产物。MSm/z978，雷帕霉素m/z930。

实施例9：大环内酯的细胞因子抑制作用

在细胞培养研究中，用大肠杆菌脂多糖(EColilippopolysaccharide)(LPS)处理巨噬细胞，以便激活它分泌细胞因子，例如IL-6、MMP-9、MCP-1和IL-10。使用酶联免疫吸附法(ELISA)测试用10nM浓度的化合物AR和雷帕霉素处理激活的巨噬细胞对这些细胞因子的抑制作用。接触大环内酯对促炎细胞因子以及诱导细胞增殖和迁移的细胞因子的抑制作用显示在图12(a)中。接触大环内酯化合物AR和西罗莫司对抗炎性细胞因子IL-10的抑制作用显示在图12(b)中。

植入支架后第一、第三和第七天的MMP-9水平与植入支架6个月后的晚期损失指数正关联(植入支架后基质金属蛋白酶的表达升高与再狭窄有关联(Elevatedmatrixmetalloproteinaseexpressionafterstentimplantationisassociatedwithrestenosis).IntJCardiol.2006；112(l):85-90)。

化合物AR和西罗莫司不明显抑制IL-6的释放。与提高MMP-9产量并且不影响MCP-1产量的西罗莫司相比，化合物AR显著减少细胞因子MMP-9和MCP-1的产量。

化合物AR和西罗莫司在抑制IL-6的释放方面未显示任何差异。另一方面，化合物AR减少细胞因子MMP-9的产量，而西罗莫司提高MMP-9的产量。与不影响MCP-1产量的西罗莫司相比，化合物AR减少细胞因子MCP-1的产量。化合物AR和西罗莫司都抑制抗炎性细胞因子IL-10的产生。

本发明中要求保护的化合物，例如化合物AR能提供更佳的治疗反应，伴随更高水平的抗炎效果(例如对促炎性细胞因子MCP-1的抑制更强)以及更高水平的抗细胞增殖和抗细胞迁移效果(例如对促进增殖性和迁移的细胞因子MMP-9的抑制更强)。

实施例10：在人临床试验中检测化合物AR释放支架

对15位人对象进行化合物AR涂敷支架的临床试验。在临床上通过评价主要不良心脏事件来评估化合物AR涂敷支架的安全性，所述主要不良心脏事件定义为死亡、心肌梗死(Q波和非Q波)和靶病损区域的血管重建。通过4个月时的血管造影和血管内超声(IVUS)结果来评估功效。研究的第一终点是血管造影的支架内晚期管腔损失。第二终点是主要不良心脏事件(MACE)和其它血管造影和IVUS评估。临床研究得到地方伦理委员会的同意并且所有病人在参加临床研究之前签署了伦理委员会批准的知情同意书。

所有病人在标准手术(indexprocedure)那天或之前至少一天开始口服阿司匹林和噻氯匹定(500mg)进行预治疗。继续服用阿司匹林(>100毫克/天)和氯吡格雷(75毫克/天)至少6个月。根据医院标准经皮实施手术，使用标准技术进入左或右股动脉并且引入动脉套管并使其前进至动脉中。

在荧光镜导向下进行标准手术血管造影，经套管插入6或7号引导导管并且使其前进到适当的位置，在冠状动脉内给予硝酸甘油。选择3.0-3.5mm平均管腔直径的冠状动脉段并且插入0.014"的导丝。进行定量冠状动脉造影(QCA)以便记录参考血管直径。在使用标准技术植入支架之前进行病损预扩张。

预扩张后，使大约按规定尺寸制作的支架(3.0×18mm或3.5×18mm)前进至展开位置。以稳定速率对气球充气至一定压力以便完全展开支架。将压力维持约30秒。如果需要可以进行支架的后扩张以便确保支架与血管壁贴合良好。实施并记录血管造影和血管内超声成像(IVUS)。

在指定的4个月终点时，对各病人进行随访血管造影和IVUS。定性评估各血管造影照片以显示管腔缩小、支架贴合(apposition)和流动特性。

测定或计算的血管造影和IVUS参数包括：

■边缘血管(近端和远端)平均管腔直径(仅植入支架后和最终)

■靶区的平均管腔直径(所有血管造影照片)

■靶区的最小管腔直径(MLD)(仅植入支架后和最终)

■直径狭窄[1-(MLD/RVD)]×100％]，其中RVD是阻塞位置的参考直径的计算值(通过基于软件的迭代线性回归技术无损伤血管投影的内插获得测量值)(仅最终血管造影照片)

■支架内晚期管腔损失[MLD_最终-MLD_{植入支架后}]

■用IVUS评定支架内新生内膜体积百分率

所有病人经历4个月临床和血管造影随访。在随访期没有病人发生任何主要不良心脏事件。血管造影的结果显示血管造影测定的支架内晚期管腔损失的主要终点是0.16±0.32mm。对15位病人中的13位实施IVUS分析，结果显示支架内新生内膜体积百分率为3.7±2.7％。

作为比较，在预试验中测试Cypher支架，其显示类似的临床安全性，无临床事件，4个月时缓释组(目前可从市场购买的制剂)血管造影测定的支架内晚期管腔损失是0.09±0.3mm，IVUS得到的支架内新生内膜体积百分率是0.3±0.6％(Sousa，JE，Circulation2001；103；192-195)。

实施例11:制备31-羟基,44-羟基(化合物BG)和47-羟基(化合物BJ) 大环内酯

将在100ml无水乙醇中的大环内酯雷帕霉素(1g,1.1mmol)加入到二氧化硒(122mg,1.10mmol)的无水乙醇(50ml)溶液中。将该混合物在室温搅拌，直到TLC分析显示雷帕霉素消失(约15小时)。将该反应混合物浓缩，残余物在醚和水之间分配，用醚3×80ml萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。通过制备型HPLC得到最终的独立的纯产物31-羟基,44-羟基,47-羟基大环内酯。

与大环内酯雷帕霉素比较的特征波谱变化如下所示：

实施例12:制备43-羟基(化合物BF),47-羟基(化合物BJ)大环内酯

将1克大环内酯雷帕霉素(1.1mmol)溶解在100ml乙腈中。向该溶液中加入0.3克七水合硫酸亚铁(1.1mmol)，同时搅拌并用氮气吹扫20-30分钟。然后，用冰浴将该混合物冷却到-16℃到-18℃。然后，在30分钟内，在搅拌和氮气吹扫下将1ml30％H₂O₂的10ml乙腈溶液缓慢加入到上述混合物中。在过氧化氢加料完成后，继续搅拌和氮气吹扫，直到TLC分析显示雷帕霉素消失。用二氯甲烷和盐水萃取该溶液3次。合并有机层，用盐水和水洗涤，用无水MgSO₄干燥，将过滤的MgSO₄和溶液蒸发，留下粗产物。通过制备型HPLC得到纯产物43-羟基,47-羟基大环内酯。

与大环内酯雷帕霉素比较的特征波谱变化如下所示：

虽然为了透彻理解的目的，以上发明已经通过举例说明和实施例的方式略为详细地叙述，但是本领域的技术人员将认识到，在所附权利要求的范围内可以实施某些改变和修改。而且，本文提供的各参考文献以其全部通过引用结合于此，其程度如同各参考文献单独地通过引用结合于此。

Claims (12)

1.下式化合物或其盐与药学上可接受的赋形剂的组合在制备治疗疾病的药物中的应用：

其特征在于，所述疾病选自下组：与年龄相关的黄斑退行性改变(AMD)和糖尿病黄斑水肿(DME)。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物为植入体、注射液或滴眼剂给药形式。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物对眼睛的眼体、眼睛的眼内体或眼睛的玻璃体内体进行给药。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物通过植入体进行给药。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述化合物是通过渗透压或扩散从植入体释放的。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述化合物与至少一种治疗剂共给药。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗剂选自下组：抗血小板药、抗血栓药、消炎药、抗血管生成剂、抗增殖药、免疫抑制剂和抗癌药。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗剂选自下组：鲁斯特斯、阿瓦斯汀、玛醋酐、维克昔单抗、奥洛他定、梅地克、地塞米松、毛果芸香碱、托吡卡胺、喹诺酮、加兰他敏、氟轻松、曲安奈德、阿托品、硫酸阿托品、盐酸阿托品、溴甲阿托品、甲硝阿托品、粘酸阿托品、N-氧化阿托品、去氧肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、羟苯丙胺、氢溴酸羟苯丙胺、盐酸羟苯丙胺、碘化羟苯丙胺、环喷托酯、盐酸环喷托酯、后马托品、氢溴酸后马托品、盐酸后马托品、甲溴后马托品、东莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱、盐酸东莨菪碱、溴甲东莨菪碱、硝甲东莨菪碱、N-氧化东莨菪碱、托吡卡胺、氢溴酸托吡卡胺、盐酸托吡卡胺、毛果芸香碱、异毛果芸香碱、毒扁豆碱、硬脂酰氯化铵和苄基氯化铵。

9.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的赋形剂选自下组：聚合物、溶剂、抗氧化剂、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、甜味剂、调味剂、稳定剂、着色剂、金属、陶瓷和半金属。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的赋形剂包括聚合物。

11.如权利要求10所述的应用，其特征在于，所述聚合物选自下组：聚氨酯、聚乙烯亚胺、乙烯乙烯醇共聚物、硅酮、C-弗乐斯、尼龙、聚酰胺、聚酰亚胺、聚四氟乙烯(PTFE)、聚对二甲苯、帕里拉、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(氯乙烯)、聚(二甲基硅氧烷)、聚(乙烯乙酸乙烯酯)、聚碳酸酯、聚丙烯酰胺凝胶、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸正丁酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)与聚(乙烯乙酸乙烯酯)的共聚物或共混物、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸2-羟基乙酯)、聚(甲基丙烯酸乙二醇酯)、聚(碳酸乙二酯)、聚L丙交酯-乙交酯共聚物、聚L丙交酯-碳酸三亚甲基酯共聚物和聚L-丙交酯。

12.如权利要求11所述的应用，其特征在于，所述聚合物选自下组：聚(碳酸乙二酯)、聚L丙交酯-乙交酯共聚物和聚(甲基丙烯酸正丁酯)。