CN105377268A - 用于治疗心肌梗塞的sdf-1的逆行递送 - Google Patents

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Abstract

本文描述了治疗患有心肌病的受试者的方法，所述方法通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向所述受试者的心脏施用一种药物组合物，所述药物组合物包含编码SDF-1的DNA质粒和药学上可接受的载体或稀释剂。

Description

用于治疗心肌梗塞的SDF-1的逆行递送
相关专利申请的交叉引用
本专利申请要求2013年3月15日提交的美国临时专利申请61/792,954的权益，所述专利申请全文以引用方式并入本文。
技术领域
本文所公开的发明涉及缺血性心脏疾病的治疗领域。
背景技术
心力衰竭(HF)是西方国家发病率和死亡率的主要原因之一。即使当前已有规范化原则指导下的治疗方法，但在美国仍有660万的HF患者，并且每年的新发病例为670000。HF的治疗费用在医疗保健系统中极为高昂。2008年，美国的慢性HF的估算直接和间接治疗费用为348亿美元，主要原因是与疾病相关的反复长期住院治疗。新型有效的HF治疗将提高生活质量并减少HF住院治疗次数，这将为医疗保健系统提供临床益处并节省费用。
产生HF的主要原因之一是由于缺血性心血管疾病(包括心肌梗塞(MI))引起的先前损伤。大多数缺血性HF患者的症状为心脏收缩功能障碍或心脏泵送能力下降。根据最新的临床试验数据，据估计，62％-67％的患有收缩性HF的患者都是由于以前的缺血性心脏疾病而引起HF。这部分HF人群很有可能从治疗性干预中受益。
最近，已通过具有良好初期效果的基于干细胞的再生医疗对缺血病因及其前体、急性MI引起的两种HF进行了针对性治疗。再生医疗对于缺血性心脏病的治疗具有较高的治疗潜力，因为与目前的治疗不同，其重点是减轻症状或减少心脏的工作量，为退化器官提供了修复和保留功能的机会。初步有效性(即，心脏功能的改善)已在若干临床试验中得到证明。虽然临床效果良好，但干细胞治疗仍然面临与获得和制备临床用细胞的复杂和耗时过程相关的挑战。
发明内容
本文描述了治疗局部缺血受试者的方法，该方法包括通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向受试者的心脏施用一种药物组合物，该药物组合物包含编码SDF-1的DNA质粒和药学上可接受的载体或稀释剂。
附图说明
图1示出了编码荧光素酶的质粒的逆行灌注之后的荧光素酶表达。将施用了5mg(A和B)或15mg(C和D)的质粒的猪心脏切片并进行生物发光成像，从而测定表达。
图2示出了编码荧光素酶的质粒的逆行灌注之后的荧光素酶表达。有色区域代表蛋白质表达的区域。图中示出了两个单独的心脏的前部(A和D)、后部(B和E)以及心肌内(C和F)等角度。
图3示出了在心力衰竭的猪模型中，在JVS-100的逆行冠状静脉窦递送给药60天后的左室射血分数(A)、左室收缩末期容积(B)和室壁运动评分指数(WMSI)(C)的变化。
图4示出了逆行灌注的冠状静脉窦中的球囊导管的荧光镜图像。
具体实施方式
除非另外限定，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与应用所属领域的技术人员通常所理解的含义相同的含义。除非另外指明，否则本文全部公开内容通篇提及的所有专利、专利申请、已公布的申请和公布、Genbank序列、网站和其他已公布资料的全文以引用方式并入本文。在本文中存在对术语的多个定义的情况下，此部分中的定义优先。除非另外限定，否则本文所用的所有技术术语具有与应用所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。分子生物学术语的通常所理解的定义可见于例如Riegeretal.,GlossaryofGenetics:ClassicalandMolecular,5thedition,Springer-Verlag:NewYork,1991(Rieger等人，《经典分子遗传学词汇表》，第五版，施普林格出版社纽约分社，1991年)；以及Lewin,GenesV,OxfordUniversityPress:NewYork,1994(Lewin，《基因5》，牛津大学出版社纽约分社，1994年)。
本文描述了涉及常规分子生物学技术的方法。此类技术在本领域中是众所周知的，并且在方法论文中进行了详细描述，例如MolecularCloning:ALaboratoryManual,2nded.,vol.1-3,ed.Sambrooketal.,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.,1989(《分子克隆实验指南》，第二版，第1-3卷，Sambrook等人编辑，冷泉港实验室出版社，纽约，1989年)；以及CurrentProtocolsinMolecularBiology,ed.Ausubeletal.,GreenePublishingandWiley-Interscience,NewYork,1992(《现代分子生物学实验技术》，Ausubel等人编辑，GreenePublishing和Wiley-Interscience，纽约，1992年)(定期更新)。还讨论了核酸的化学合成方法，例如在BeaucageandCarruthers,Tetra.Letts.22:1859-1862,1981(Beaucage和Carruthers，《四面体通讯》，第22卷，第1859-1862页，1981年)；以及Matteuccietal.,J.Am.Chem.Soc.103:3185,1981(Matteucci等人，《美国化学会志》，第103卷，第3185页，1981年)中所述。核酸的化学合成可在例如商用的寡核苷酸自动合成仪中进行。免疫学方法(例如，抗原特异性抗体的制备、免疫沉淀和免疫印迹)在例如CurrentProtocolsinImmunology,ed.Coliganetal.,JohnWiley&Sons,NewYork,1991(《免疫学实验室指南》，Coligan等人编辑，约翰威立出版社，纽约，1991年)；以及MethodsofImmunologicalAnalysis,ed.Masseyeffetal.,JohnWiley&Sons,NewYork,1992(《免疫分析方法》，Masseyeff等人编辑，约翰威立出版社，纽约，1992年)中有所描述。基因转移和基因治疗的常规方法也可适用于本应用。参见例如GeneTherapy:PrinciplesandApplications,ed.T.Blackenstein,SpringerVerlag,1999(《基因治疗：原理和应用》，T.Blackenstein编辑，施普林格出版社，1999年)；GeneTherapyProtocols(MethodsinMolecularMedicine),ed.P.D.Robbins,HumanaPress,1997(《基因治疗方案(分子医学方法)》，P.D.Robbins编辑，Humana出版社，1997年)；以及Retro-vectorsforHumanGeneTherapy,ed.C.P.Hodgson,SpringerVerlag,1996(《人类基因治疗的逆转录病毒载体》，C.P.Hodgson编辑，施普林格出版社，1996年)。
在引用URL或其他此类标识符或地址时，应当理解，此类标识符可能发生改变并且互联网上的具体信息可不断变化，但是可以通过搜索互联网获取等效的信息。对此类标识符的引用表明了此类信息的可获得性和公众传播性。
如本文所用，“核酸”是指包含至少两个共价连接的核苷酸或核苷酸类似物亚基的多核苷酸。核酸可为脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、或者DNA或RNA的类似物。核苷酸类似物可以商购获得，并且制备包含此类核苷酸类似物的多核苷酸的方法是已知的。核酸可以是单链的、双链的、或它们的混合。出于本文的目的，除非另外指明，或者从上下文中可明显看出，否则核酸是双链的。
如本文所用，“DNA”旨在包括所有类型和大小的DNA分子，包括cDNA、质粒以及包含改性核苷酸和核苷酸类似物的DNA。
如本文所用，“核苷酸”包括单磷酸核苷、二磷酸核苷和三磷酸核苷。核苷酸还包括改性的核苷酸，例如但不限于硫代磷酸核苷酸和脱氮嘌呤核苷酸以及其他核苷酸类似物。
如本文所用，术语“受试者”是指例如哺乳动物和鸟类的动物，包括人类、灵长类动物、啮齿类动物、牛、猪、兔、山羊、绵羊、小鼠、大鼠、豚鼠、猫、狗、马、鸡以及其他动物。
如本文所用，“施用”给受试者是一种过程，一种或多种递送试剂和/或大核酸分子通过该过程一起或单独地被引入或施用到受试者身上，使得存在于受试者体内的靶细胞最终与所述试剂和/或大核酸分子接触。
如本文所用，“表达”是指这样的过程：核酸通过该过程被转译成肽或转录生成RNA，其例如可被转译成肽、多肽或蛋白质。如果核酸来源于基因组DNA，则表达可在选择了合适的真核宿主细胞或生物体的情况下包括mRNA的剪接。对于要在宿主细胞中表达的异源核酸而言，其必须首先被递送到细胞中，并在到达细胞后最终驻留在细胞核中。
如本文所用，术语“心肌病”是指由于任何原因引起的心肌(即，实际的心脏肌肉)功能恶化。患有心肌病的受试者往往具有心律失常、心源性猝死、或因心力衰竭导致的住院治疗或死亡的风险。
如本文所用，术语“缺血性心肌病”是指由于心肌供氧不足而导致的心脏肌肉衰弱，其中冠状动脉疾病是最常见原因。
如本文所用，术语“缺血性心脏病”是指由于缺乏或相对缺乏血液供应而导致的心脏肌肉受损或动力不足的任何情况；最常由动脉粥样硬化所引起，其包括心绞痛、急性心肌梗塞、慢性缺血性心脏病和猝死。
如本文所用，术语“心肌梗塞”是指心脏肌肉(心肌)的某个区域由于血液供应阻塞而导致的该区域的受损或坏死。
如本文所用，术语“6分钟步行测试”或“6MWT”是指用于测量在6分钟(6MWD)期间患者可于平坦的硬表面上快速步行的距离的测试。其评估在运动过程中所涉及的所有系统的全局和综合响应，包括肺和心血管系统、体循环、外周循环、血液、神经肌肉单元以及肌肉代谢。该测试并不针对参与运动的不同器官和系统或运动限制机构中的每一者的功能提供具体信息，因为只有在极限心肺运动测试中才能获得这些信息。自定步速6MWT评估亚极限水平的功能容量。(参见例如AMJRespirCritCareMed,Vol.166.Pp111-117(2002)(《美国呼吸和重症监护医学杂志》，第166卷，第111-117页，2002年))。
如本文所用，“纽约心脏协会(NYHA)功能分类”是指对心力衰竭程度的分类。其基于身体活动期间对患者的限制程度而将患者分为四类中的一类；限制/症状与正常呼吸以及呼吸急促和/或心绞痛的各种程度相关：
本申请涉及用于治疗受试者的心肌病的组合物和方法，该受试者的心肌病导致心肌功能下降和/或受损。使用本文所述组合物和方法治疗的心肌病可包括与肺栓塞、静脉血栓形成、心肌梗塞、短暂性脑缺血发作、外周血管疾病、动脉粥样硬化、缺血性心脏病和/或其他心肌损伤或血管疾病相关的心肌病。
在本发明的某些实施例中，患者是表现出缺血病因的HF的患者，并且可能具有心脏收缩功能障碍和/或过往MI的已知病史。患者可具有明确限定的区域性功能障碍区域，所述区域被限定为超声波心动图上的3个连续异常壁运动段。症状性收缩性心力衰竭患者与健康测试者相比表现出6分钟步行距离减少、心脏扩大、运动能力降低以及生活质量较差。他们还可表现出NTproBNP浓度升高。
经皮冠状静脉窦逆行灌注是一种技术成熟的替代性给药途径，其已被证明对于临床前模型和临床试验中的生物制剂的递送是安全和可行的。与该技术相关联的方法通常涉及使用无菌技术和局部麻醉，将引导套管插入颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉、股静脉、桡静脉或其他合适的进入点，随后通过标准程序将由线引导的球囊导管推入静脉中。到达下腔静脉后，将导管推入右心房中，再沿心房后壁旋转到隔叶或三尖瓣上方的部位。轻轻地将导管推入冠状静脉窦内，然后将球囊置于非阻断中间位置处。球囊应定位在根据治疗医生的临床判断确定的梗塞区域附近的下列位置中一者处的冠状静脉窦中：1)冠状静脉窦；2)心中静脉；3)心小静脉；或4)心大静脉。然而，根据每个案例的具体情况，可能需要将球囊放置在这四个位置以外的位置。一旦就位，该球囊将扩张(优选地扩张至不超过约2ATM的压力)并且待灌注药物将在指定的时间段(优选地，约2分钟)内通过导管腔注入冠状静脉窦中。在一些实施例中，球囊在灌注之后将保持扩张约10分钟，以允许药物逆行扩散到心脏组织中。
本文描述了通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向受试者的心脏施用编码基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的多核苷酸以治疗患有心肌病的受试者的方法。在所述方法的一些实施例中，编码SDF-1的多核苷酸为DNA质粒。在所述方法的一些实施例中，编码SDF-1的DNA质粒包含序列SEQIDNO:1。
本文描述了通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向受试者的心脏施用编码基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的多核苷酸以治疗患有非缺血性心肌病的受试者的方法。在所述方法的一些实施例中，编码SDF-1的多核苷酸为DNA质粒。在所述方法的一些实施例中，编码SDF-1的DNA质粒包含序列SEQIDNO:1。
本文描述了通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向受试者的心脏施用编码基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的多核苷酸以治疗患有缺血性心肌病的受试者的方法。在所述方法的一些实施例中，编码SDF-1的多核苷酸为DNA质粒。在所述方法的一些实施例中，编码SDF-1的DNA质粒包含序列SEQIDNO:1。
本文所述的方法可用于治疗患有急性心肌梗塞的受试者。该方法也可用于治疗具有慢性心脏收缩功能障碍的已知病史的受试者。此外，可采用这些方法来治疗以前患有心肌梗塞的受试者。在一些实施例中，所述方法可包括识别正患有或曾患有心肌梗塞的受试者或具有慢性心脏收缩功能障碍病史的受试者，以及通过冠状静脉窦逆行灌注向受试者的心脏施用编码SDF-1的多核苷酸。
本文描述了包含所述编码SDF-1的多核苷酸和药学上可接受的载体中至少一者的组合物。所述组合物可用于例如施用给受试者以治疗心肌病。此类组合物可用于例如施用给受试者以治疗缺血性心肌病，例如在本文中描述和例示的那些。所述组合物可用于例如施用给受试者以治疗非缺血性心肌病。所述组合物可被配制成本领域中已知且合适的多种制剂中的任一种，包括在本文中描述和例示的那些。在一些实施例中，所述组合物为水性制剂。可通过将抗体或抗原结合片段混合在水或合适的生理缓冲液中，并根据需要任选地加入合适的着色剂、调味剂、防腐剂、稳定剂和增稠剂等来制备水溶液。也可通过将多核苷酸分散于含有或不含有粘性物质(如天然或合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其他熟知的悬浮剂)的水或生理缓冲液中来制备水性悬浮液。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和药学上可接受的载体的组合物。
如本文所述，药学上可接受的载体可为具有特定百分比右旋糖的溶液。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约1％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约2％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约3％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约4％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约5％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约6％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约7％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约8％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约9％的右旋糖。在一些实施例中，药学上可接受的载体含有约10％的右旋糖。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约2％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约2％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约3％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约3％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约4％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约4％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约5％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约5％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约6％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约6％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约7％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约7％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1的DNA质粒和含有约8％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。所述方法的一些实施例包括使用包含编码SDF-1且具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒和含有约8％右旋糖的药学上可接受的载体的组合物。
除了药学上可接受的载体之外，本文所述组合物(其包含用于治疗心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病的所述方法中的编码SDF-1的多核苷酸)还可包含缓冲液。在一些实施例中，所述组合物可包含缓冲液，该缓冲液包含二元酸、碳酸和多元酸、磷酸或其合适的盐。在一些实施例中，所述组合物可加入缓冲液以维持生理pH。在一些实施例中，所述组合物可加入缓冲液以维持偏酸性pH。在一些实施例中，所述组合物可加入缓冲液以维持偏碱性pH。在一些实施例中，所述组合物可加入缓冲液以将pH从约5.4提高至约7.4。
本文所述组合物(其包含用于治疗心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病的所述方法中的编码SDF-1的多核苷酸)可包含浓度为约0.125mg/mL至约2.0mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约0.125mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约0.25mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约0.375mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约0.5mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约0.625mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。
在一些实施例中，所述组合物含有约0.75mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约0.875mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.125mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.25mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.375mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.5mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.625mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.75mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约1.875mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在一些实施例中，所述组合物含有约2mg/mL的编码SDF-1的多核苷酸。在所述实施例的每一个中，编码SDF-1的多核苷酸可为具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒。
所述组合物(其包含用于治疗心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病的所述方法中的编码SDF-1的多核苷酸)可用于向受试者施用总量为约10mg至约75mg的多核苷酸。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约10mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约15mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约20mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约25mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约30mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约35mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约40mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约45mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约50mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约55mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约60mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约65mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约70mg。在一些实施例中，递送至受试者的编码SDF-1的多核苷酸的总量为约75mg。在所述实施例的每一个中，编码SDF-1的多核苷酸可为具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒。
所述组合物(其包含用于治疗心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病的所述方法中的编码SDF-1的多核苷酸)可以约30mL至约100mL的总量递送至受试者的心脏。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约30mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约35mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约40mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约45mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约50mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约55mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约60mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约65mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约70mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约75mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约80mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约85mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约90mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约95mL。在一个实施例中，递送至受试者心脏的组合物(其包含编码SDF-1的多核苷酸)的总量为约100mL。在所述实施例的每一个中，编码SDF-1的多核苷酸可为具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒。
通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向受试者的心脏施用编码SDF-1的多核苷酸以治疗患有心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病的受试者的所述方法可以通过多种方式执行，这些方法中的一些随球囊导管在受试者体内的扩张位置变化而变化。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者冠状静脉窦中的球囊扩张，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心中静脉中的球囊扩张，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心小静脉中的球囊扩张，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心大静脉中的球囊扩张，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在所述方法的一些实施例中，可先施用造影剂，然后再递送包含SDF-1质粒的组合物，以便进行荧光镜成像。在所述实施例的每一个中，编码SDF-1的多核苷酸可为具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒。应当理解，可使用本领域的技术人员已知的多种不同导管类型来执行所述方法。例如，合适的导管可具有顺应性球囊或非顺应性球囊，可填充有气体或液体以使球囊扩张，或者具有不同于本文所述具体导管的其他性质。
在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者冠状静脉窦中的球囊扩张至不超过2ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心中静脉中的球囊扩张至不超过2ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心小静脉中的球囊扩张至不超过2ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心大静脉中的球囊扩张至不超过2ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者冠状静脉窦中的球囊扩张至不超过1ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心中静脉中的球囊扩张至不超过1ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心小静脉中的球囊扩张至不超过1ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在一个实施例中，该方法可通过以下方式执行：将具有球囊的导管插入受试者的股静脉、颈内静脉、锁骨下静脉、肘前静脉、肱静脉或桡静脉，将所述导管推入受试者的冠状静脉窦，并使受试者心大静脉中的球囊扩张至不超过1ATM的压力，然后再施用包含编码SDF-1的质粒的组合物。在所述方法的一些实施例中，可先施用造影剂，然后再递送包含SDF-1质粒的组合物，以便进行荧光镜成像。在所述实施例的每一个中，编码SDF-1的多核苷酸可为具有序列SEQIDNO:1的DNA质粒。
球囊扩张后，药物组合物可在约2分钟的时间内通过导管注入受试者体内。在所述方法的一些实施例中，在注入药物组合物之后，球囊可保持扩张约5至15分钟。在所述方法的一些实施例中，在注入药物组合物之后，球囊可保持扩张约7至12分钟。在所述方法的一些实施例中，在注入药物组合物之后，球囊可保持扩张约10分钟。
在施用含有编码SDF-1的质粒的所述药物组合物之后，SDF-1蛋白可在心脏细胞中得以表达。在一些实施例中，质粒在一些心脏细胞中的持续时间可为约10天。在一些实施例中，质粒在一些心脏细胞中的持续时间可为约20天。在一些实施例中，质粒在一些心脏细胞中的持续时间可为约30天。在一些实施例中，质粒在一些心脏细胞中的持续时间可为约40天。在一些实施例中，质粒在一些心脏细胞中的持续时间可为约50天。在一些实施例中，质粒在一些心脏细胞中的持续时间可为约60天。
本文提供了以下实例，以便更详细地描述本文所述主题的某些实施例。这些实例旨在说明而非限制实施例。
实例I-猪的荧光素酶逆行灌注
本研究的目的是在将质粒逆行递送到先前已梗塞的心肌内之后，确定蛋白质表达的存在和分布。为了实现这一目的，在对已患有急性心肌梗塞4个月的猪进行逆行灌注后3天时，评估猪心的荧光素酶质粒DNA表达。本研究(ACL-01110L)中所用的质粒具有与JVS-100中包含的质粒相同的主链，但其表达荧光素酶报告基因而非SDF-1，以监测表达。通过逆行递送向已患有急性心肌梗塞4个月的三头成年约克夏猪注入40mL含5mg(1只动物)或15mg(2只动物)质粒的ACL-01110L。逆行递送过程包括，插入球囊导管(ARROW双腔楔形球囊导管(ARROWDoubleLumenWedgeBalloonCatheter))使其穿过冠状静脉窦进入大冠状静脉，使球囊扩张，并将ACL-01110L注入冠状静脉系统。注入后三天时，处死动物并切除心脏肌肉。使用Xenogen成像系统测量完整切除心脏中的报告基因(荧光素酶)表达。在接受5mg剂量的动物中未检测到表达(图1(A和B))；然而，在接受15mg的两个动物中检测到显著的蛋白质表达(图1(C和D))。这些结果表明，通过逆行灌注引发JVS-100蛋白质表达所需的最小剂量在5至15mg之间。
实例II-逆行冠状静脉窦递送后的质粒表达
为确定注入部位的影响，使用CookAdvance35LP导管(n＝2)或使用配有Cook微导管的Cook35LP导管测试4头猪体内的质粒生物分布。将四(4/4)头家猪麻醉并经右颈内静脉获得血管入口。在对心大静脉进行测量后，将经过正确尺寸调节的Cook35LP球囊导管置于心脏静脉中。在四只动物的两只中，在2分钟的时间内分别注入40mL荧光素酶标记的JVS-100、ACL-01110L(1mg/mL)。在四个位置中的每一个处将十(10)mL的质粒通过微导管注入。注入后，保持阻塞10分钟。在注入过程后的四十八(48)小时时，处死动物并切除心脏。将每个心脏放置在D-萤光素酶底物上，然后成像以使荧光素酶表达可视化(图2(A-F))。
在单独通过CookAdvance35LP进行逆行灌注之后，本研究的结果显示出两只动物的心脏组织中的稳定蛋白质表达。基于这些结果，我们认为通过CookAdvance35LP气囊导管进行的逆向冠状静脉窦施用会使质粒分布到心脏中，并且在48小时仍可检测到。
实例III-猪模型中的JVS-100逆行冠状静脉窦递送
在已建立的猪阻塞/再灌注MI模型中，通过逆向冠状静脉窦施用质粒来测试JVS-100的递送。在本研究中，在阻塞左前降支的冠状动脉(LAD)30天后，以两种剂量水平即15mg或45mg(所有注射量中所递送的总DNA)中的一种向24头猪注入单一剂量JVS-100。在注入JVS-100时(MI后30天)，所有猪均表现出收缩功能障碍(LVEF<40％)并有心脏重塑(LVESV>55mL)的迹象。每个组中的四只动物在第3天或第60天被处死。在第3天和第60天时，这些动物被用于评估安全终点，该安全终点包括质粒在心脏和其他组织中的生物分布、临床病变(血液学、血清化学、凝结作用)以及组织的组织病理学检测。在第60天的动物身上测量有效性。
通过逆向灌注以15mg和45mg的剂量施用溶于40mL5％右旋糖溶液中的测试物质未发现任何不良反应。仅一头猪在计划的尸检之前死亡。这例死亡的原因是动物模型心脏损伤引起的并发症，与施用的测试物质无关。该测试物质的施用并未伴随着任何死亡率、临床表现、体重变化、临床病变终点的变化或不利的宏观发现。与载体对照相比，任何处理组的血液学参数中都没有任何与测试相关的影响。相对于对照，处理组在测试物质施用6小时后肌酸酐激酶MB和肌钙蛋白I的表达有短暂轻微的增加。增加的幅度小于MI后所记录的临床相关增加量。
在给药前和给药后第60天，通过连续超声波心动图监测心脏尺寸和功能，从而测量其有效性。在60天时，对照动物显示出LVESV增加(即，恶化)的趋势，而且在心脏功能(即，LVEF和室壁运动评分指数(WMSI))上也没有改善，与心力衰竭模型一致。相比之下，低剂量组和高剂量组均表现出心脏功能(LVEF和WMSI)改善的趋势和LV重塑的衰减(LVESV)(图4)。尽管这些处理对于LVEF或LVESV没有统计意义上的显著影响，但相比于安慰剂对照(p＝0.029)，低剂量处理组的WMSI具有统计意义上的显著改善(图3(C))。在这些分析中，对照组和治疗组之间未观察到任何参数的显著的基线值差异。基线被定义为处理之前的第0天，梗塞之后的第30天。从基线到第60天，无论是处理组还是对照组，任何参数都没有显著差异。
相较于彼此，不同剂量组之间的测量结果也没有统计意义上的差异。另外，对于最有效剂量未出现非统计趋势，功能测量在低剂量下显示出略多的优势(LVEF和WMSI)，而在高剂量处理组中LV重塑测量则显示出较少的恶化(LVESV和LVEDV)。
在注射后的第3天和第60天测量JVS-100在心脏和非心脏组织中的分布。在心脏组织中，在每个时间点，JVS-100质粒出现在心脏的所有分析区域中，这表明其在注入冠状静脉窦之后广泛分布。3天后在非目标器官中检测到低水平的JVS-100，而在肾脏中检测到最高水平的JVS-100。在处理后约60天，JVS-100从检测的所有非目标器官中被完全清除。仅在猪心的左右心室中的一些区域检测到有限量的JVS-100。在用40mL15mg剂量的JVS-100处理时，在一个冠状静脉窦远侧组织也检测到了JVS-100，并且每微克猪组织DNA中为98个拷贝。
此猪MI的有效性和安全性研究的结果表明，通过逆向冠状静脉窦递送以15mg和30mg的剂量施用JVS-100表现出治疗有益效果。在每个剂量下都没有观察到毒性效应的证据。
实例IV-人受试者中的JVS-100逆行灌注
我们计划使用球囊阻塞导管系统通过逆行灌注将JVS-100递送到患有缺血性心力衰竭的患者体内。首先通过使用无菌技术和局部麻醉，将通道套管插入股静脉的最远侧部分。再用标准导管技术获得通往冠状静脉窦的通道。获得通往冠状静脉窦的通道后，再使用标准导管技术将球囊阻塞导管置于冠状静脉窦中。轻轻地将导管推入冠状静脉窦内，球囊将置于非阻断中间位置处。球囊应定位在根据治疗医生的临床判断确定的梗塞区域附近的下列位置中一者处的冠状静脉窦中：
1)冠状静脉窦，
2)心大静脉，
3)前室间静脉，以及
4)后外侧静脉
然而，根据每个案例的具体情况，可能需要将球囊放置在这四个位置以外的位置(图4)。记录球囊的实际位置以确定相应情况发生的频率。放置到位后，球囊将会扩张至不超过2ATM的压力，总体积为40mL的JVS-100将会分到四个10mL注射器中并在共2分钟的时间内通过导管腔注入冠状静脉窦中。球囊在注入后将保持扩张10分钟，以允许质粒扩散到心脏组织中。
根据积累的数据，通过逆向灌注递送的JVS-100的建议剂量为15mg、30mg和45mg，这些数据汇总于表1中。15mg(0.375mg/mL)的剂量等同于表现出JVS-100蛋白质表达并被证明有效的最低剂量。30mg(0.75mg/mL)的剂量大于在我们的GLP研究中的JVS-100逆向灌注表达研究有效性中表现出JVS-100蛋白表达的最低剂量，其中JVS-100通过心内膜心肌注射被递送到心力衰竭猪模型(1564-003)中。45mg(1.125mg/mL)的剂量在GLP逆向研究中被证明是有效的，该剂量少于100mg剂量的一半，其中100mg的剂量在探索性研究中未观察到毒性。
表1：通过逆向灌注施用的JVS-100建议剂量的支持数据
SEQIDNO:1
AGATCTCCTAGGGAGTCCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCGTTTAGTGAACCGTCAGATCGCCTGGAGACGCCATCCACGCTGTTTTGACCTCCATAGAAGACACCGGGACCGATCCAGCCTCCGCGGCCGGGAACGGTGCATTGGAACGCGGATTCCCCGTGCCAAGAGTGACGTAAGTACCGCCTATAGAGTCTATAGGCCCACCCCCTTGGCTTCTTATGCATGCTATACTGTTTTTGGCTTGGGGTCTATACACCCCCGCTTCCTCATGTTATAGGTGATGGTATAGCTTAGCCTATAGGTGTGGGTTATTGACCATTATTGACCACTCCCCTATTGGTGACGATACTTTCCATTACTAATCCATAACATGGCTCTTTGCCACAACTCTCTTTATTGGCTATATGCCAATACACTGTCCTTCAGAGACTGACACGGACTCTGTATTTTTACAGGATGGGGTCTCATTTATTATTTACAAATTCACATATACAACACCACCGTCCCCAGTGCCCGCAGTTTTTATTAAACATAACGTGGGATCTCCACGCGAATCTCGGGTACGTGTTCCGGACATGGGCTCTTCTCCGGTAGCGGCGGAGCTTCTACATCCGAGCCCTGCTCCCATGCCTCCAGCGACTCATGGTCGCTCGGCAGCTCCTTGCTCCTAACAGTGGAGGCCAGACTTAGGCACAGCACGATGCCCACCACCACCAGTGTGCCGCACAAGGCCGTGGCGGTAGGGTATGTGTCTGAAAATGAGCTCGGGGAGCGGGCTTGCACCGCTGACGCATTTGGAAGACTTAAGGCAGCGGCAGAAGAAGATGCAGGCAGCTGAGTTGTTGTGTTCTGATAAGAGTCAGAGGTAACTCCCGTTGCGGTGCTGTTAACGGTGGAGGGCAGTGTAGTCTGAGCAGTACTCGTTGCTGCCGCGCGCGCCACCAGACATAATAGCTGACAGACTAACAGACTGTTCCTTTCCATGGGTCTTTTCTGCAGTCACCGTCCTTGCCATCGGTGACCACTAGTGGCTCGCATCTCTCCTTCACGCGCCCGCCGCCCTACCTGAGGCCGCCATCCACGCCGGTTGAGTCGCGTTCTGCCGCCTCCCGCCTGTGGTGCCTCCTGAACTGCGTCCGCCGTCTAGGTAAGTTTAAAGCTCAGGTCGAGACCGGGCCTTTGTCCGGCGCTCCCTTGGAGCCTACCTAGACTCAGCCGGCTCTCCACGCTTTGCCTGACCCTGCTTGCTCAACTCTACGTCTTTGTTTCGTTTTCTGTTCTGCGCCGTTACAGATCGGTACCAAGCTTGCCACCACCATGAACGCCAAGGTCGTGGTCGTGCTGGTCCTCGTGCTGACCGCGCTCTGCCTCAGCGACGGGAAGCCCGTCAGCCTGAGCTACAGATGCCCATGCCGATTCTTCGAAAGCCATGTTGCCAGAGCCAACGTCAAGCATCTCAAAATTCTCAACACCCCAAACTGTGCCCTTCAGATTGTAGCCCGGCTGAAGAACAACAACAGACAAGTGTGCATTGACCCGAAGCTAAAGTGGATTCAGGAGTACCTGGAGAAAGCCTTAAACAAGTAATCTAGAGGGCCCTATTCTATAGTGTCACCTAAATGCTAGAGCTCGCTGATCAGCCTCGACTGTGCCTTCTAGTTGCCAGCCATCTGTTGTTTGCCCCTCCCCCGTGCCTTCCTTGACCCTGGAAGGTGCCACTCCCACTGTCCTTTCCTAATAAAATGAGGAAATTGCATCGCATTGTCTGAGTAGGTGTCATTCTATTCTGGGGGGTGGGGTGGGGCAGGACAGCAAGGGGGAGGATTGGGAAGACAATAGCAGGCATGCTGGGGATGCGGTGGGCTCTATGGCTTCTGAGGCGGAAAGAACCAGGGCCGCGGTGGCCATCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTTCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGAATTCAGAAGAACTCGTCAAGAAGGCGATAGAAGGCGATGCGCTGCGAATCGGGAGCGGCGATACCGTAAAGCACGAGGAAGCGGTCAGCCCATTCGCCGCCAAGCTCTTCAGCAATATCACGGGTAGCCAACGCTATGTCCTGATAGCGGTCCGCCACACCCAGCCGGCCACAGTCGATGAATCCAGAAAAGCGGCCATTTTCCACCATGATATTCGGCAAGCAGGCATCGCCATGGGTCACGACGAGATCCTCGCCGTCGGGCATGCTCGCCTTGAGCCTGGCGAACAGTTCGGCTGGCGCGAGCCCCTGATGCTCTTCGTCCAGATCATCCTGATCGACAAGACCGGCTTCCATCCGAGTACGTGCTCGCTCGATGCGATGTTTCGCTTGGTGGTCGAATGGGCAGGTAGCCGGATCAAGCGTATGCAGCCGCCGCATTGCATCAGCCATGATGGATACTTTCTCGGCAGGAGCAAGGTGAGATGACAGGAGATCCTGCCCCGGCACTTCGCCCAATAGCAGCCAGTCCCTTCCCGCTTCAGTGACAACGTCGAGCACAGCTGCGCAAGGAACGCCCGTCGTGGCCAGCCACGATAGCCGCGCTGCCTCGTCTTGCAGTTCATTCAGGGCACCGGACAGGTCGGTCTTGACAAAAAGAACCGGGCGCCCCTGCGCTGACAGCCGGAACACGGCGGCATCAGAGCAGCCGATTGTCTGTTGTGCCCAGTCATAGCCGAATAGCCTCTCCACCCAAGCGGCCGGAGAACCTGCGTGCAATCCATCTTGTTCAATCATGCGAAACGATCCTCATCCTGTCTCTTGATC

Claims (18)

1.一种治疗患有心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病中任一种的受试者的方法，所述方法包括通过经皮冠状静脉窦逆行灌注向所述受试者的心脏施用一种药物组合物，所述药物组合物包含编码SDF-1的DNA质粒和药学上可接受的载体或稀释剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述DNA质粒包括具有序列SEQIDNO:1的多核苷酸。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述受试者患有急性心肌梗塞。
4.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述受试者具有慢性收缩功能障碍的已知病史和/或之前患有心肌梗塞。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述DNA质粒在所述组合物中的浓度为约0.125mg/mL至约2.0mg/mL。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述DNA质粒在所述组合物中的浓度为约0.375mg/mL至约1.125mg/mL。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用至所述受试者的所述DNA质粒的总量为约10mg至约75mg。
8.根据权利要求7所述的方法，其中施用至所述受试者的所述DNA质粒的总量为约15mg至约45mg。
9.根据权利要求8所述的方法，其中施用至所述受试者的所述DNA质粒的总量为约30mg。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中递送至所述受试者的心脏的所述药物组合物的总体积为约30mL至约100mL。
11.根据权利要求10所述的方法，其中递送至所述受试者的心脏的所述药物组合物的总体积为约40mL。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述药学上可接受的载体或稀释剂为5％右旋糖。
13.根据利要求12所述的方法，其中所述药学上可接受的载体或稀释剂还包括惰性缓冲液。
14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述经皮冠状静脉窦逆行灌注施用包括将包含球囊的导管插入所述受试者的股静脉、颈内静脉、肘前静脉、肱静脉或锁骨下静脉，将所述导管推入所述冠状静脉窦，并使冠状静脉窦、前室间静脉、后外侧静脉或心大静脉中的所述球囊扩张。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述球囊扩张至不超过2ATM的压力。
16.根据权利要求14或权利要求15所述的方法，其中所述药物组合物在约2分钟的时间内通过所述导管注入所述冠状静脉窦、所述前室间静脉、所述后外侧静脉或所述心大静脉，并且在所述注入后，所述气囊保持扩张约10分钟的时间。
17.编码SDF-1的DNA质粒用于治疗患有心肌病、缺血性心肌病或非缺血性心肌病中任一种的受试者的用途，其中所述编码SDF-1的DNA质粒以药物组合物的形式提供，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或稀释剂，并且所述药物组合物通过经皮冠状静脉窦逆行灌注施用至所述受试者。
18.根据权利要求17所述的用途，其中所述DNA质粒包括具有序列SEQIDNO:1的多核苷酸。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180069081A (ko) 2015-11-11 2018-06-22 인트렉손 코포레이션 심장 이상 및 기타 병리 이상의 치료를 위한 복수의 생물학적으로 활성화된 폴리펩티드를 단일 벡터로부터 발현하기 위한 조성물 및 방법
US11583571B2 (en) 2017-05-13 2023-02-21 The Johns Hopkins University Stromal derived factor 1 and its use in the prevention and treatment of erectile dysfunction

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102740894A (zh) * 2009-08-28 2012-10-17 克利夫兰临床医学基金会 用于治疗缺血组织的sdf-1递送

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050222075A1 (en) * 1998-09-14 2005-10-06 Hans Herweijer Process for delivering nucleic acids to cardiac tissue
US20050271639A1 (en) * 2002-08-22 2005-12-08 Penn Marc S Genetically engineered cells for therapeutic applications

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102740894A (zh) * 2009-08-28 2012-10-17 克利夫兰临床医学基金会 用于治疗缺血组织的sdf-1递送

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FAN J.: "AB513134.1", 《GENBANK》 *
FAN,J ET AL.: "APOBEC3G Generates Nonsense Mutations In Human T-Cell Leukemia Virus Type 1 Proviral Genomes In Vivo.", 《J. VIROL》 *
MURPHY,E.: "AC146999.1", 《GENBANK》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020259358A1 (zh) * 2019-06-28 2020-12-30 北京康瑞迪医疗科技有限公司 心脏冠状静脉血流阻断装置

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