CN105123379B - 曼地亚红豆杉快速繁育方法 - Google Patents

曼地亚红豆杉快速繁育方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种曼地亚红豆杉快速繁育方法，包括如下步骤：(1)育苗设施及育苗床的准备：搭建塑料小拱棚，在拱棚内修砌育苗床；将河沙平铺在育苗床上，厚度为0.8～1.2厘米；(2)配制适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号～12号；(3)育苗床的湿度调节：保持河沙含水量在40％；(4)繁育材料的准备：从枝条上切取插穗，插穗长度为0.5cm‑5cm；(5)接种：将切好的茎段的下切口先后在“生长剂”1、2号液中迅速浸蘸后插入河沙中；(6)接种后的管理：育苗过程中，每天用前述配制的营养液对插穗进行喷雾，每天用一种营养液，从“生长剂”3号至“生长剂”12号依次使用，总共使用4轮；(7)炼苗及出圃。

Description

曼地亚红豆杉快速繁育方法
技术领域
本发明涉及植物苗木的繁育方法，具体涉及的是曼地亚红豆杉快速繁育方法。
背景技术
红豆杉(Taxus chinensis)又名紫杉、赤柏松，属红豆杉科红豆杉属常绿乔木，是第四纪冰川遗留下来的世界珍稀濒危古老树种，至今已有250万年的历史。该属植物全世界共11种，产于北半球，我国仅有4品种及1变种。这种珍稀树种在自然条件下生长速度缓慢，再生能力差，所以很长时间以来，世界范围内还没有形成大规摸的红豆杉原料林基地。
曼地亚红豆杉(Taxus media)是红豆杉中的一种，1996年从加拿大引种到中国，其树中含有二萜类化合物紫杉醇(Taxol，商品名paclitaxel)，是对晚期卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等多种癌症均有显著的疗效的天然化合物之一，被誉为“晚期癌症患者的最后一道防线”，是一种极具发展前途的新药。曼地亚红豆杉中的紫杉醇含量是所有红豆杉树种中最高的。目前紫杉醇合法来源的原料十分短缺，全世界紫杉醇产量尚不能满足需求量的10％。
曼地亚红豆杉生长速度快、侧根发达，是天然林保护工程、退耕还林工程等国家重点生态建设工程首选的经济型树种之一。曼地亚红豆杉资源非常稀少，自然更新较慢。目前在我国还没有一套高效的、科技含量高、同时又便于推广的曼地亚红豆杉繁育体系。
发明内容
本发明的目的是提供一种取材小、繁育时间短、成活率高、成本低、容易推广的曼地亚红豆杉快速繁育方法。
本发明实现其目的的技术方案是：
一种曼地亚红豆杉快速繁育方法，包括以下步骤：
(1)育苗设施及育苗床的准备：搭建小拱棚，在拱棚内修砌育苗床，将河沙平铺在育苗床上，厚度为0.8～1.2厘米，喷洒农药闷棚消毒。塑料小拱棚长度为5.5～6.5米、宽度为2.4～2.8米，棚高为1.7米；小拱棚南北向中部预留一走道，走道宽0.4米，走道两边为育苗床，苗床长为6米，宽1.1米，高0.1米。小拱棚最佳方向为南北方向，南北两端中部各有一通风口，育苗床用砖体砌成，以便于操作和美观。
可采用易获得、成本低的楠竹片搭建，要求楠竹片宽4厘米以上，东西向楠竹片长5.4米，每棚11片，用以作拱，每60厘米处搭建一片；南北向楠竹片每棚3片，长6米，用以连接，连接时可用细铁丝捆扎；小拱棚搭建完成后，将8丝以上厚度的无滴大棚膜覆盖在小拱棚上，要求大棚膜长9米，宽6米，东西向两边用泥土压紧，压实，南北向大棚膜各下垂1.5米，作为通风口，可根据需要卷起或放下；建棚和覆膜完成后，将河沙(干净无污染，粗细均可)平铺在苗床上，厚度为1厘米，并用多菌灵500倍或敌克松700倍液将沙层消毒，消毒液用量为每棚50公斤，均匀喷洒，放下拱棚两头的大棚膜关闭小拱棚通风口72小时后备用；
(2)配制适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号～12号，配方如下：
“生长剂”1号：NAA(α萘乙酸)300～360mg，6－BA(6－苄基氨基嘌呤)0.3～0.55mg，蔗糖(C12H22O11)2000～2250mg，蒸馏水加至1000ml；配制要点：先用少量的95％的酒精溶解NAA，形成少量溶液，6－BA用1mol·L_1的少量HCl溶解后，倒入NAA溶液，再加入蒸馏水(配制过程中切记要先倒入溶液再加蒸馏水)；配制完毕后，用酸度计测量其pH值，该溶液的pH值应为6.0，若偏酸可用1mol·L_1NaOH来调节，若偏碱可用1mol·L_1HCl来调节；
“生长剂”2号：IBA(3－吲哚丁酸)1200～1350mg，医用滑石粉900～1100g；配制要点：先用少量的95％的酒精溶解IBA，再将溶液加入医用滑石粉中，均匀混合并阴干后即成；
“生长剂”3号：KH2PO4(磷酸二氢钾)300～370mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”4号：NH4NO3(硝酸铵)1100～1250mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”5号：H3BO3(硼酸)30～40mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”6号：KNO3(硝酸钾)1700～1845mg，MgSO4·7H2O(硫酸镁)300～390mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”7号：CuSO4·5H2O(硫酸铜)10～30mg，MnSO4·4H2O(硫酸锰)13.5～27.5mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”8号：ZnSO4·7H2O(硫酸锌)150～225mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”9号：Vit.B6(盐酸吡哆辛)100～150mg，肌醇100～140mg，烟酸1～1.8mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”10号：CaCl2·2H2O(氯化钙)1400～1600mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”11号：FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)500～650mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”12号：Gly(甘氨酸)3～3.5mg，C2H22O11(蔗糖)2250～2600mg，蒸馏水加至1000ml；
(3)育苗床的湿度调节：
打开消毒后的小拱棚，交换棚内空气，调节育苗床湿度，保持河沙含水量在40％；苗床含水量大于40％时增加通风时间，直到达到要求时为准，苗床含水量小于40％时对苗床进行浇水到苗床含水量达到40％时为准；平整沙床，要求松软透气；
(4)繁育材料的准备：
用消毒后的剪刀将曼地亚红豆杉的枝条从母树上剪下，用杀菌剂对枝条消毒后水洗，母树枝条的年龄及枝条剪取部位不限；
在阴凉通风的环境下用消毒后的刀片切取水洗后的枝条，插穗切取长度为0.5cm-5cm，茎段切口为平口，将茎段从下切口以上三分之一部分的叶片去除；
(5)接种：
将切好的茎段的下切口在“生长剂”1号液中迅速浸蘸1秒钟，浸蘸深度为茎段的三分之一；然后在“生长剂”2号粉剂中速蘸1秒钟；
将浸蘸后的茎段立即接种在已平整的育苗床上，蘸营养液的一端插入河沙中，接种深度为茎段的三分之一，接种密度为要求叶片不重叠；
接种完毕后，用多菌灵600倍液喷雾叶面及育苗床；
(6)接种后的管理：
光照控制：
在4月－11月份接种，白天要进行遮光处理，光照较强时可用75％遮光网遮光，必要时可用2层遮光网(接种材料上有部分叶片，适当的光照可进行光合作用，产生部分养料)；遮光网拉在小拱棚棚顶60厘米处为宜；
其余时间接种，可根据实际情况进行适当遮光或不遮光；
温度控制：
曼地亚红豆杉的插穗进入生根活动的最低温度为8℃，最适温度为12—24℃，超过32℃其生根活动显著下降；在5－11月份，小拱棚内白天温度控制在16—24℃，夜间控制在10—22℃；在12月－次年4月份，小拱棚内白天温度控制在12℃-24℃，夜间控制在8℃-16℃；小拱棚内温度过高时(高于24℃)可采用背负式电动喷雾器进行间歇喷雾，每2小时喷雾一次，并增加棚口通风时间，直到小拱棚内温度降至16—24℃之间时为止。温度过低时(低于10℃)，苗床不再喷雾，尽量关闭通风口(但要注意间歇式通风)，有增温条件的可开启加温设备。
水分管理：
在5－11月份育苗，苗床湿度保持在含水量40％，小拱棚内空气湿度保持在95％以上；在12月—次年4月份育苗，苗床湿度保持在含水量40％，小拱棚内空气湿度保持在85％-95％；在全年生产中叶面白天要求保持雾状水，夜间不要求；
可采用背负式电动喷雾器进行间歇喷雾来控制插穗叶面水分及育苗床水分。在一天中日照强度和温度有时变得非常高，应增加喷雾次数，以满足插穗在高温下对水分的需求，这一方面要保证插穗在生根前不失水分，同时也要保证苗床不会因喷水次数增加而产生积水现象；
通风管理：
气温过高时打开棚口，并配合喷雾降温，气温过低时关上棚口，根据实际情况间歇式通风；通风可交换小拱棚内外空气，增加氧气及二氧化碳，有利于加强插穗的光合作用，并可减少病虫害的发生；
养分管理：
育苗过程中，每天用前述配制的营养液对插穗进行喷雾，每天用一种营养液，从“生长剂”3号至“生长剂”12号依次轮流使用，施用时间为每天的最后一次喷雾时间，即当天不再喷水雾之后喷营养液，喷营养液时以叶片不滴液为宜；一共进行4轮营养液喷雾，共计40天，即从“生长剂”3号至“生长剂”12号每天使用一种进行喷雾，第1天用“生长剂”3号进行喷雾，第2天用“生长剂”4号，依次类推，到第10天用“生长剂”12号，此为一轮，从第11天又用“生长剂”3号喷雾，第12天用“生长剂”4号，依此类推；
病害防治：
接种完成后每周进行一次杀菌消毒，在下午停喷水雾后喷杀菌剂，一般在下午停喷水雾后喷1次800倍多菌灵药液，以便防止腐烂病的发生，及时清除落叶和死去的插穗；
(7)炼苗及出圃：
前述营养液喷雾进行40天后，停止营养液喷雾，进行炼苗；本发明在5月－11月份育苗，经过20天的培养，生根率可达95％；在12月－次年4月份育苗，经过20天的培养，生根率可达90％。40天时，生根率可达100％。到第60天时，幼苗根部木质化，即可出圃。
作为优选地，所述适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号至“生长剂”12号中各原料的重量配比为：
“生长剂”1号：NAA(α萘乙酸)310～350mg，6－BA(6－苄基氨基嘌呤)0.35～0.5mg，蔗糖(C12H22O11)2100～2220mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”2号：IBA(3－吲哚丁酸)1250～1340mg，医用滑石粉1000g；
“生长剂”3号：KH2PO4(磷酸二氢钾)310～360mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”4号：NH4NO3(硝酸铵)1150～1230mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”5号：H3BO3(硼酸)32～38mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”6号：KNO3(硝酸钾)1750～1830mg，MgSO4·7H2O(硫酸镁)320～380mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”7号：CuSO4·5H2O(硫酸铜)15～25mg，MnSO4·4H2O(硫酸锰)15～25mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”8号：ZnSO4·7H2O(硫酸锌)160～210mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”9号：Vit.B6(盐酸吡哆辛)110～140mg，肌醇120～135mg，烟酸1.2～1.6mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”10：CaCl2·2H2O(氯化钙)1450～1550mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”11号：FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)520～600mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”12号：Gly(甘氨酸)3.1～3.4mg，C2H22O11(蔗糖)2350～2500mg，蒸馏水加至1000ml。
作为优选地，所述适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号至“生长剂”12号中各原料的重量配比为：
“生长剂”1号：NAA(α萘乙酸)330mg，6－BA(6－苄基氨基嘌呤)0.4mg，蔗糖(C12H22O11)2150mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”2号：IBA(3－吲哚丁酸)1300mg，医用滑石粉1000g；
“生长剂”3号：KH2PO4(磷酸二氢钾)350mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”4号：NH4NO3(硝酸铵)1200mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”5号：H3BO3(硼酸)35mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”6号：KNO3(硝酸钾)1800mg，MgSO4·7H2O(硫酸镁)350mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”7号：CuSO4·5H2O(硫酸铜)20mg，MnSO4·4H2O(硫酸锰)20mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”8号：ZnSO4·7H2O(硫酸锌)180mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”9号：Vit.B6(盐酸吡哆辛)120mg，肌醇130mg，烟酸1.5mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”10号：CaCl2·2H2O(氯化钙)1500mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”11号：FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)550mg，蒸馏水加至1000ml；
“生长剂”12号：Gly(甘氨酸)3.2mg，C2H22O11(蔗糖)2400mg，蒸馏水加至1000ml。
作为优选地，所述步骤(4)繁育材料的准备，剪下的枝条浸泡于1000倍多菌灵药液中5分钟进行消毒，然后在清水中浸洗2分钟，取出备用；切插穗时每个插穗切取长度为0.5cm-1.5cm。
本发明的有益效果是：申请人经过2010年到2015年5年的大量研究，结果表明：本发明的曼地亚红豆杉快速繁育方法是现有红豆杉繁殖领域的重大突破，是植物无性繁殖领域的一场革命。该技术与其它红豆杉育苗技术相比，具有如下优点：
(1)在诱导植株生根、分化及培养快繁过程中，利用自行研制的“生长剂”1～12号对材料切口及其周围组织细胞进行处理，保证了红豆杉插穗快速生根、生长，缩短成苗、炼苗时间，繁育时间短，成活率高，全年均可生产。本发明方法在5月－11月份育苗，经过20天的培养，生根率可达95％以上；在12月－次年4月份育苗，经过20天的培养，生根率可达90％；30～40天时，生根率可达99％以上；40天时，即可进行炼苗；到第60天时，幼苗根部木质化，即可出圃。
而组织培养需60天左右才生根；常规扦插用ABT等生根粉处理后，90天左右才生根，且生根率低。
(2)繁育材料小，设备设施投资小，一次性投资少，扩繁成本比常规扦插低70％以上。
(3)本技术在全年的生产过程中无需特殊的消毒灭菌程序，成本低、推广容易。
本发明与现有其它技术先进性对比表：
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，但并不因此而限制本发明。
以下实施例1～3的实验材料、来源、场地、材料数量、接种时间均为：
实验材料：曼地亚红豆杉；材料提供单位：重庆紫逸农业发展有限公司
实验地点：重庆紫逸农业发展有限公司实验基地
每个实施例接种茎段数：10000个
接种时间：2014年6月20日
实施例1、曼地亚红豆杉快速繁育方法
(1)、育苗设施及育苗床的准备
A：采用小拱棚作为基本育苗设施。小拱棚为南北方向，长度(南北向)为6米，最佳宽度(东西向)为2.6米，棚高为1.7米。南北两端、中部各有一通风口，小拱棚内中间预留一宽0.4米的南北向工作道，工作道两边为育苗床，要求苗床长为6米，宽1.1米，高0.1米。每个小拱棚内共2个育苗床，育苗床用砖体砌成，以便于操作和美观。
B：根据地形和方向完成育苗小拱棚放线后，进行小拱棚的搭建：采用易获得、成本低的楠竹片搭建，要求楠竹片宽4厘米以上，东西向楠竹片长5.4米，每棚11片，用以作拱，每60厘米处搭建一片；南北向楠竹片每棚3片，长6米，用以连接，连接时可用细铁丝捆扎。
C：小拱棚搭建完成后，将8丝以上厚度的无滴大棚膜覆盖在小拱棚上，要求大棚膜长9米，宽6米，东西向两边用泥土压紧，压实，南北向大棚膜各下垂1.5米，作为通风口，可根据需要卷起或放下。
D:建棚和覆膜完成后，将河沙(干净无污染，粗细均可)平铺在苗床上，厚度为1厘米，并用多菌灵500倍或敌克松700倍液将沙层消毒，消毒液用量为每棚50公斤配好的药液，均匀喷洒。消毒完成后，放下棚两头的大棚膜关闭小拱棚通风口72小时后备用。
(2)、适合曼地亚红豆杉生长的营养液--“生长剂”的配制；
A：本实施例中“生长剂”1号液中各原料的重量配比是：
NAA(α-萘乙酸)330mg，6－BA(6－苄基氨基嘌呤)0.4mg，蔗糖(C12H22O11)2150mg，蒸馏水加至1000ml
B：本实施例中“生长剂”2号粉剂中各原料的重量配比是：
IBA(3－吲哚丁酸)1300mg，医用滑石粉1000g
C：本实施例中“生长剂”3号液中各原料的重量配比是：
KH2PO4(磷酸二氢钾)350mg，蒸馏水加至1000ml
D：本实施例中“生长剂”4号液中各原料的重量配比是：
NH4NO3(硝酸铵)1200mg，蒸馏水加至1000ml
E：本实施例中“生长剂”5号液中各原料的重量配比是：
H3BO3(硼酸)35mg，蒸馏水加至1000ml
F：本实施例中“生长剂”6号液中各原料的重量配比是：
KNO3(硝酸钾)1800mg，MgSO4·7H2O(硫酸镁)350mg，蒸馏水加至1000ml
G：本实施例中“生长剂”7号液中各原料的重量配比是：
CuSO4·5H2O(硫酸铜)20mg，MnSO4·4H2O(硫酸锰)20mg，蒸馏水加至1000ml
H：本实施例中“生长剂”8号液中各原料的重量配比是：
ZnSO4·7H2O(硫酸锌)180mg，蒸馏水加至1000ml
I：本实施例中“生长剂”9号液中各原料的重量配比是：
Vit.B6(盐酸吡哆辛)120mg，肌醇130mg，C6H5NO2(烟酸)1.5mg，蒸馏水加至1000ml
J：本实施例中“生长剂”10号液中各原料的重量配比是：
CaCl2·2H2O(氯化钙)1500mg，蒸馏水加至1000ml
K：本实施例中“生长剂”11号液中各原料的重量配比是：
FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)550mg，蒸馏水加至1000ml
L：本实施例中“生长剂”12号液中各原料的重量配比是：
Gly(甘氨酸)3.2mg，C2H22O11(蔗糖)2400mg，蒸馏水加至1000ml
(3)育苗床的湿度调节；
打开已消毒后的小拱棚，交换小拱棚内空气，调节育苗床湿度，保持河沙含水量在40％为宜，苗床含水量大于40％时增加通风时间，直到达到要求时为准，苗床含水量小于40％时对苗床进行浇水到苗床含水量达到40％时为准。平整沙床，要求松软透气。
(4)繁育材料的准备；
用消毒后的剪刀将曼地亚红豆杉的枝条从母树上取下，母树年龄为5年，枝条剪取部位不限。取下的枝条浸泡于1000倍多菌灵液中5分钟后取出，然后在清水中浸泡2分钟取出备用。
在阴凉通风的环境下用消毒后的刀片切取备用的繁育材料，插穗切取长度为1cm，茎段切口为平口，将茎段从下切口以上三分之一部分的叶片去除。
(5)接种；
将切好的茎段下切口在“生长剂”1号液中速蘸，浸蘸时间为1秒，浸蘸深度为茎段的三分之一。在“生长剂”1号液中速蘸后，再在“生长剂”2号粉剂中速蘸，浸蘸时间为1秒。
将浸蘸后的茎段立即接种在已平整的育苗床上，接种深度为茎段的三分之一。接种密度要求叶片不重叠为宜，通常为每平方米800～1000个插穗。
接种完毕后，用多菌灵600倍液喷雾叶面及育苗床。
(6)接种后的管理；
光照控制：接种苗白天依照光照的强度用75％遮光网遮光，遮光时间主要集中在上午11点至下午4点。晚上不遮光。
温度控制：白天温度控制在16—24℃，夜间控制在10—22℃。
水分管理：采用人工喷雾方法，白天一般保持叶面雾状水，夜间不要求，不产生积水现象。
通风管理：采用人工打开棚口通风方式，并配合喷雾降温(高于24℃时)，气温过低时(低于10℃)关闭棚口，根据实际情况间歇式通风。
养分管理：育苗过程中，每天用前述配制的营养液对插穗进行喷雾，每天用一种营养液，从“生长剂”3号至“生长剂”12号依次轮流使用，施用时间为每天的最后一次喷雾时间，即当天不再喷水雾之后喷营养液，喷营养液时以叶片不滴液为宜；一共进行4轮营养液喷雾，共计40天，即从“生长剂”3号至“生长剂”12号每天使用一种进行喷雾，第1天用“生长剂”3号进行喷雾，第2天用“生长剂”4号，依次类推，到第10天用“生长剂”12号，此为一轮，从第11天又用“生长剂”3号喷雾，第12天用“生长剂”4号，依此类推。
病害防治：接种完成后的每周进行一次消毒灭菌，一般在下午停喷水雾后喷1次800倍多菌灵药液。
(7)实验结果；经过20天的培养，在7月10日，约有9680株生根，生根率达96.8％。在7月30日，插穗全部生根，生根率达100％。8月20日，幼苗根部木质化，并有萌芽。
实例2、曼地亚红豆杉快速繁育方法
本实施例中的各项准备工作和育苗管理方法均与实例1中一致，不同的是生长剂的配制原料重量配比不同，详细配方如下：
A：本实施例中“生长剂”1号液中各原料的重量配比是：
NAA(α萘乙酸)310mg，6－BA(6－苄基氨基嘌呤)0.35mg，蔗糖(C12H22O11)2100mg，蒸馏水加至1000ml
B：本实施例中“生长剂”2号剂中各原料的重量配比是：
IBA(3－吲哚丁酸)1250mg，医用滑石粉1000g
C：本实施例中“生长剂”3号液中各原料的重量配比是：
KH2PO4(磷酸二氢钾)310mg，蒸馏水加至1000ml
D：本实施例中“生长剂”4号液中各原料的重量配比是：
NH4NO3(硝酸铵)1150mg，蒸馏水加至1000ml
E：本实施例中“生长剂”5号液中各原料的重量配比是：
H3BO3(硼酸)32mg，蒸馏水加至1000ml
F：本实施例中“生长剂”6号液中各原料的重量配比是：
KNO3(硝酸钾)1750mg，MgSO4·7H2O(硫酸镁)320～380mg，蒸馏水加至1000ml
G：本实施例中“生长剂”7号液中各原料的重量配比是：
CuSO4·5H2O(硫酸铜)15mg，MnSO4·4H2O(硫酸锰)15mg，蒸馏水加至1000ml
H：本实施例中“生长剂”8号液中各原料的重量配比是：
ZnSO4·7H2O(硫酸锌)160mg，蒸馏水加至1000ml
I：本实施例中“生长剂”9号液中各原料的重量配比是：
Vit.B6(盐酸吡哆辛)110mg，肌醇120mg，烟酸1.2mg，蒸馏水加至1000ml
J：本实施例中“生长剂”10号液中各原料的重量配比是：
CaCl2·2H2O(氯化钙)1450mg，蒸馏水加至1000ml
K：本实施例中“生长剂”11号液中各原料的重量配比是：
FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)520mg，蒸馏水加至1000ml
L：本实施例中“生长剂”12号液中各原料的重量配比是：
Gly(甘氨酸)3.1mg，C2H22O11(蔗糖)2350mg，蒸馏水加至1000ml
实验结果：
本实施例经过20天的培养，在7月10日，约有4480株生根，生根率为44.8％。在7月30日，约有6000株生根，生根率为60％。8月20日，生根率为75％，部分幼苗根部木质化，少有萌芽。
实例3、曼地亚红豆杉快速繁育方法
本实施例中的各项准备工作和育苗管理方法均与实例1中一致，不同的是生长剂的配制原料重量比不同，详细配方如下：
A：本实施例中“生长剂”1号液中各原料的重量配比是：
NAA(α萘乙酸)350mg，6－BA(6－苄基氨基嘌呤)0.5mg，蔗糖(C12H22O11)2220mg，蒸馏水加至1000ml
B：本实施例中“生长剂”2号剂中各原料的重量配比是：
IBA(3－吲哚丁酸)1340mg，医用滑石粉1000g
C：本实施例中“生长剂”3号液中各原料的重量配比是：
KH2PO4(磷酸二氢钾)360mg，蒸馏水加至1000ml
D：本实施例中“生长剂”4号液中各原料的重量配比是：
NH4NO3(硝酸铵)1230mg，蒸馏水加至1000ml
E：本实施例中“生长剂”5号液中各原料的重量配比是：
H3BO3(硼酸)38mg，蒸馏水加至1000ml
F：本实施例中“生长剂”6号液中各原料的重量配比是：
KNO3(硝酸钾)1830mg，MgSO4·7H2O(硫酸镁)380mg，蒸馏水加至1000ml
G：本实施例中“生长剂”7号液中各原料的重量配比是：
CuSO4·5H2O(硫酸铜)25mg，MnSO4·4H2O(硫酸锰)25mg，蒸馏水加至1000ml
H：本实施例中“生长剂”8号液中各原料的重量配比是：
ZnSO4·7H2O(硫酸锌)210mg，蒸馏水加至1000ml
I：本实施例中“生长剂”9号液中各原料的重量配比是：
Vit.B6(盐酸吡哆辛)140mg，肌醇135mg，烟酸1.6mg，蒸馏水加至1000ml
J：本实施例中“生长剂”10号液中各原料的重量配比是：
CaCl2·2H2O(氯化钙)1550mg，蒸馏水加至1000ml
K：本实施例中“生长剂”11号液中各原料的重量配比是：
FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)600mg，蒸馏水加至1000ml
L：本实施例中“生长剂”12号液中各原料的重量配比是：
Gly(甘氨酸)3.4mg，C2H22O11(蔗糖)2500mg，蒸馏水加至1000ml
实验结果：
本实施例经过20天的培养，在7月10日，约有5470株生根，生根率为54.7％。在7月30日，约有7800株生根，生根率为78％。8月20日，生根率为86％，部分幼苗根部木质化，少有萌芽。
本发明方法具有如下优点：
(1)本发明方法生产曼地亚红豆杉幼苗，时间快(20天左右即可生根)，成活率高(生根率可达100％)，是目前同行业中其它技术所无法达到的。
(2)用本发明生产曼地亚红豆杉周期短，一般只需60天即可出圃，可以在较短的时间内，获得大量的曼地亚红豆杉种苗，对保护我国红豆杉资源，发展红豆杉相关产业具有举足轻重的作用。
(3)本发明是一项全新的曼地亚红豆杉小拱棚快速繁育方法，生产成本极低，具有很强的推广性。

Claims (6)

1.一种曼地亚红豆杉快速繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)育苗设施及育苗床的准备：搭建小拱棚，在拱棚内修砌育苗床，将河沙平铺在育苗床上，厚度为0.8～1.2厘米，喷洒农药闷棚消毒；
(2)配制适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号～12号，配方如下：
“生长剂”1号：
“生长剂”2号：
IBA(3－吲哚丁酸) 1200～1350mg
医用滑石粉 900～1100g
配制要点：先用少量的95％的酒精溶解IBA，再将溶液加入医用滑石粉中，均匀混合并阴干后即成；
“生长剂”3号：
KH2PO4(磷酸二氢钾) 300～370mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”4号：
NH4NO3(硝酸铵) 1100～1250mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”5号：
H3BO3(硼酸) 30～40mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”6号：
KNO3(硝酸钾) 1700～1845mg
MgSO4·7H2O(硫酸镁) 300～390mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”7号：
CuSO4·5H2O(硫酸铜) 10～30mg
MnSO4·4H2O(硫酸锰) 13.5～27.5mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”8号：
ZnSO4·7H2O(硫酸锌) 150～225mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”9号：
“生长剂”10号：
CaCl2·2H2O(氯化钙) 1400～1600mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”11号：
FeSO4·7H2O(硫酸亚铁) 500～650mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”12号：
Gly(甘氨酸) 3～3.5mg
C2H22O11(蔗糖) 2250～2600mg
蒸馏水 加至1000ml；
(3)育苗床的湿度调节：
打开消毒后的小拱棚，交换棚内空气，调节育苗床湿度，保持河沙含水量在40％；
(4)繁育材料的准备：
用消毒后的剪刀将曼地亚红豆杉的枝条从母树上剪下，用杀菌剂对枝条消毒后水洗，母树枝条的年龄及枝条剪取部位不限；在阴凉通风的环境下用消毒后的刀片切取水洗后的枝条，插穗切取长度为0.5cm-5cm，茎段切口为平口，将茎段从下切口以上三分之一部分的叶片去除；
(5)接种：
将切好的茎段的下切口在“生长剂”1号液中迅速浸蘸1秒钟，浸蘸深度为茎段的三分之一；然后在“生长剂”2号粉剂中速蘸1秒钟；将浸蘸后的茎段立即接种在已平整的育苗床上，蘸营养液的一端插入河沙中，接种深度为茎段的三分之一，接种密度为要求叶片不重叠；
(6)接种后的管理：
接种育苗过程中做好光照、温度、水分、通风、病害、养分管理；白天拱棚内温度控制在12℃-24℃，夜间控制在8℃-22℃；苗床湿度保持在含水量40％，拱棚内空气湿度保持在85％以上，叶面白天要求保持雾状水；
养分管理：
育苗过程中，每天用前述配制的营养液对插穗进行喷雾，每天用一种营养液，从“生长剂”3号至“生长剂”12号依次轮流使用，施用时间为每天的最后一次喷雾时间，即当天不再喷水雾之后喷营养液，喷营养液时以叶片不滴液为宜；一共进行4轮营养液喷雾，共计40天，即从“生长剂”3号至“生长剂”12号每天使用一种进行喷雾，第1天用“生长剂”3号进行喷雾，第2天用“生长剂”4号，依次类推，到第10天用“生长剂”12号，此为一轮，从第11天又用“生长剂”3号喷雾，第12天用“生长剂”4号，依此类推；
(7)炼苗及出圃：
前述营养液喷雾进行40天后，停止营养液喷雾，进行炼苗；到第60天时，幼苗根部木质化，即可出圃。
2.如权利要求1所述的曼地亚红豆杉快速繁育方法，其特征在于，步骤(6)中所述对光照、温度、水分、通风、病害的管理具体为：
光照控制：
在4－11月份接种，白天要进行遮光处理；其余月份接种，可根据实际情况适当遮光或不遮光；
温度控制：
在5－11月份，小拱棚内白天温度控制在16—24℃，夜间控制在10—22℃；在12月－次年4月份，小拱棚内白天温度控制在12℃-24℃，夜间控制在8℃-16℃；
水分管理：
在5－11月份育苗，苗床湿度保持在含水量40％，小拱棚内空气湿度保持在95％以上；在12月—次年4月份育苗，苗床湿度保持在含水量40％，小拱棚内空气湿度保持在85％-95％；在全年生产中叶面白天要求保持雾状水，夜间不要求；
通风管理：
气温过高时打开棚口，气温过低时关上棚口，根据实际情况间歇式通风；
病害防治：
接种完成后每周进行一次杀菌消毒，在下午停喷水雾后喷杀菌剂，及时清除落叶和死去的插穗。
3.如权利要求1所述的曼地亚红豆杉快速繁育方法，其特征在于，所述适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号至“生长剂”12号中各原料的重量配比为：
“生长剂”1号：
“生长剂”2号：
IBA(3－吲哚丁酸) 1250～1340mg
医用滑石粉 1000g；
“生长剂”3号：
KH2PO4(磷酸二氢钾) 310～360mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”4号：
NH4NO3(硝酸铵) 1150～1230mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”5号：
H3BO3(硼酸) 32～38mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”6号：
KNO3(硝酸钾) 1750～1830mg
MgSO4·7H2O(硫酸镁) 320～380mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”7号：
CuSO4·5H2O(硫酸铜) 15～25mg
MnSO4·4H2O(硫酸锰) 15～25mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”8号：
ZnSO4·7H2O(硫酸锌) 160～210mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”9号：
“生长剂”10：
CaCl2·2H2O(氯化钙) 1450～1550mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”11号：
FeSO4·7H2O(硫酸亚铁) 520～600mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”12号：
Gly(甘氨酸) 3.1～3.4mg
C2H22O11(蔗糖) 2350～2500mg
蒸馏水 加至1000ml。
4.如权利要求1所述的曼地亚红豆杉快速繁育方法，其特征在于，所述适合曼地亚红豆杉生长的营养液—“生长剂”1号至“生长剂”12号中各原料的重量配比为：
“生长剂”1号：
“生长剂”2号：
IBA(3－吲哚丁酸) 1300mg
医用滑石粉 1000g；
“生长剂”3号：
KH2PO4(磷酸二氢钾) 350mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”4号：
NH4NO3(硝酸铵) 1200mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”5号：
H3BO3(硼酸) 35mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”6号：
KNO3(硝酸钾) 1800mg
MgSO4·7H2O(硫酸镁) 350mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”7号：
CuSO4·5H2O(硫酸铜) 20mg
MnSO4·4H2O(硫酸锰) 20mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”8号：
ZnSO4·7H2O(硫酸锌) 180mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”9号：
“生长剂”10号：
CaCl2·2H2O(氯化钙) 1500mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”11号：
FeSO4·7H2O(硫酸亚铁) 550mg
蒸馏水 加至1000ml；
“生长剂”12号：
Gly(甘氨酸) 3.2mg
C2H22O11(蔗糖) 2400mg
蒸馏水 加至1000ml。
5.如权利要求1至4中任一项所述的曼地亚红豆杉快速繁育方法，其特征在于，步骤(1)中所述小拱棚长度为5.5～6.5米、宽度为2.4～2.8米，棚高为1.7米，小拱棚南北向中部预留一走道，走道两边为育苗床，苗床长为6米，宽1.1米，高0.1米。
6.如权利要求1至4中任一项所述的曼地亚红豆杉快速繁育方法，其特征在于，所述步骤(4)繁育材料的准备，剪下的枝条浸泡于1000倍多菌灵药液中5分钟进行消毒，然后在清水中浸洗2分钟，取出备用；切插穗时每个插穗切取长度为0.5cm-1.5cm。
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