CN104897516A - 一种测定伪空胞相对气体含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其具体方法为：(1)分别取2份10ml的藻华样品构成一组实验材料，在其中一个样品中加入0.5M蔗糖，将2份样品通过破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置进行处理；(2)按照步骤(1)的工作程序，根据气压表，分别对多组样品按照0.0KPa、0.2KPa、0.4KPa、0.6KPa、0.8KPa、1.0KPa、1.2KPa进行处理；(3)对每组样品的不同处理，经过细胞流速仪，测定悬液的SSC值；(4)按照下列方程式，计算伪空胞的相对气体含量：y％＝(S_p-S_f)/(S_a-S_f)×100。本发明使用更加安全，而且能够快速及时的测量伪空胞相对气体含量的相关数据，使得实验精度更高。

Description

一种测定伪空胞相对气体含量的方法

技术领域

本发明涉及蓝藻伪空胞中相对气体含量的测定，具体是一种测定伪空胞相对气体含量的方法。

背景技术

蓝藻水华是某些湖库面临的严重环境问题，在蓝藻水华形成过程中，伪空胞被认为是蓝藻细胞上浮过程中的浮力提供因子，在分析伪空胞的提供浮力大小的研究中，需要测定伪空胞气体含量。在此过程中首先需要将伪空胞破裂，目前文献报道破裂伪空胞的装置(参见图1)材质为玻璃，加压后容易破碎伤人，该装置监测的伪空胞气体含量是绝对含量，而且该方法只能在实验室内监测，无法在野外采样后尽快完成，因此环境改变后伪空胞的气体含量也会随之变化，造成实验误差。在很多情况下，相对含量也完全可以达到相关研究的需要，因此研发检测伪空胞相对气体含量的装置来代替目前的测定伪空胞气体含量检测装置是十分必要的。

蓝藻水华以群体的状态存在，申请人的最近研究结果表明群体细胞间空隙也是藻细胞上浮的浮力提供因子。因此在分析群体细胞间空隙浮力贡献时，需要将群体细胞空隙内部气体排出，因此需要研发将群体细胞间空隙去除的装置

发明内容

本发明的目的在于提供一种测定伪空胞相对气体含量的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其具体方法为：

(1)分别取2份10ml的藻华样品构成一组实验材料，在其中一个样品中加入0.5M蔗糖，将2份样品通过破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置进行处理；

(2)按照步骤(1)的工作程序，根据气压表，分别对多组样品按照0.0KPa、0.2KPa、0.4KPa、0.6KPa、0.8KPa、1.0KPa、1.2KPa进行处理；

(3)对每组样品的不同处理，经过细胞流速仪，测定悬液的SSC值；

(4)按照下列方程式，计算伪空胞的相对气体含量：

y％＝(S_p-S_f/(S_a-S_f)×100

$y=M\frac{1}{1+e^{a-\mathrm{bx}}}.$

作为本发明再进一步的方案：所述破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置，包括密闭项圈及固定扣、保护盒、封闭气压缸、控制阀门室、气压表、氮气瓶、内管和气体阀门，所述封闭气压缸通过密闭项圈及固定扣实现密封固定，而封闭气压缸内设置离心管，所述封闭气压缸的进气口通过管道连接控制阀门室内的内管一端，内管的另一端通过气压表连接氮气瓶；所述内管的一侧出气口上设置气体阀门，所述封闭气压缸设置在保护盒内。

作为本发明进一步的方案：所述控制阀门室的两端分别设有进水口和出水口。

作为本发明进一步的方案：所述进水口和出水口均与恒温水箱连接。

作为本发明进一步的方案：所述气压缸保护盒是一个正方体的不锈钢盒子，在上端开有圆孔。

作为本发明进一步的方案：所述破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置的操作方法为：

(1)将野外藻华样品放于离心管；

(2)将离心管放置于密闭气压缸；

(3)用密闭项圈及固定扣固定好密闭气压缸；

(4)将固定好的密闭气压缸置于样品放置气压缸保护盒；

(5)将装置按照下列顺序链接：高纯度氮气瓶、控制阀门室、密闭气压缸；

(6)关闭控制阀门室内管气体阀门，开启外管水管阀门，恒定水流不断经过控制阀门室；

(7)开启高纯度氮气瓶的气体阀门，根据气压表选择合理气压，处理样品10秒钟；

(8)关闭高纯度氮气瓶的气体阀门；

(9)开启控制阀门室内管气体阀门；

(10)关闭控制阀门室外管水管阀门；

(11)拆卸橡皮圈和固定扣固定扣；

(12)取出藻华样品。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明使用更加安全，而且能够快速及时的测量伪空胞相对气体含量的相关数据，使得实验精度更高。

附图说明

图1为本发明的结构示意图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例中，一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其具体方法为：

(1)分别取2份10ml的藻华样品构成一组实验材料，在其中一个样品中加入0.5M蔗糖(用于去掉细胞膨胀压)，将2份样品通过破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置进行处理；

(2)按照步骤(1)的工作程序，根据气压表，分别对多组样品按照0.0KPa、0.2KPa、0.4KPa、0.6KPa、0.8KPa、1.0KPa、1.2KPa进行处理；

(3)对每组样品的不同处理，经过细胞流速仪，测定悬液的SSC值；

(4)按照下列方程式，计算伪空胞的相对气体含量：

y％＝(S_p-S_f)/(S_a-S_f)×100

$y=M\frac{1}{1+e^{a-\mathrm{bx}}}.$

其中，y是某一压强下剩余伪空胞的百分含量；

S_p是某一压强下部分伪空胞破裂后悬液的SSC值；

S_f是伪空胞全部破裂后悬液的SSC值；

S_a是伪空胞全部完整时悬液的SSC值；

M是没有加压时的伪空胞百分含量(＝100％)；

x是悬液受到的压强，表观压强Pa(悬液中还剩余50％完整伪空胞时的压强)和临界压强Pc(悬液中加入0.5M蔗糖后剩余50％完整伪空胞时的压强)可以利用各自的破裂-压力曲线和高斯-牛顿方程计算可得，即y＝50％，则x＝a/b。细胞膨压Pt＝Pc-Pa。

请参阅图1，所述破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置，包括密闭项圈及固定扣1、保护盒2、封闭气压缸3、控制阀门室4、进水口5、气压表6、氮气瓶7、内管8、气体阀门9和出水口10，所述封闭气压缸3通过密闭项圈及固定扣1实现密封固定，而封闭气压缸3内设置离心管，所述封闭气压缸3的进气口通过管道连接控制阀门室4内的内管8一端，管道为橡胶管，内管8的另一端通过气压表6连接氮气瓶7，通过氮气瓶7为破裂伪空胞和群体细胞间空隙提供压力，所述封闭气压缸3设置在保护盒2内；

所述内管8的一侧出气口上设置气体阀门9，以便于破裂结束后的排压，而所述控制阀门室4的两端分别设有进水口5和出水口10，且进水口5和出水口10均与恒温水箱连接，以便于水浴加热压缩气体。

所述内管8的一侧出气口上设置气体阀门9，以便于破裂结束后的排压，而所述控制阀门室4的两端分别设有进水口5和出水口10，且进水口5和出水口10均与恒温水箱连接，以便于水浴加热压缩气体。

所述氮气瓶为钢材质，附有压力表链接，并有橡胶管链接，该橡胶管能承受2KPa的压强。

所述密闭气压缸是由直径一致的、一端密闭的两段不锈钢管组成，开口端设有防滑齿。

所述气压缸保护盒是一个正方体的不锈钢盒子，在上端开有圆孔。

所述破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置的操作方法：

(1)将野外藻华样品放于离心管；

(2)将离心管放置于密闭气压缸；

(3)用密闭项圈及固定扣固定好密闭气压缸；

(4)将固定好的密闭气压缸置于样品放置气压缸保护盒；

(5)将装置按照下列顺序链接：高纯度氮气瓶、控制阀门室、密闭气压缸；

(6)关闭控制阀门室内管气体阀门，开启外管水管阀门，恒定水流不断经过控制阀门室；

(7)开启高纯度氮气瓶的气体阀门，根据气压表选择合理气压，处理样品10秒钟；

(8)关闭高纯度氮气瓶的气体阀门；

(9)开启控制阀门室内管气体阀门；

(10)关闭控制阀门室外管水管阀门；

(11)拆卸橡皮圈和固定扣固定扣；

(12)取出藻华样品。

根据上述步骤，对样品可以进行不同压强的处理。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (6)

1.一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其特征在于，其具体方法为：

(1)分别取2份10ml的藻华样品构成一组实验材料，在其中一个样品中加入0.5M蔗糖，将2份样品通过破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置进行处理；

(2)按照步骤(1)的工作程序，根据气压表，分别对多组样品按照0.0KPa、0.2KPa、0.4KPa、0.6KPa、0.8KPa、1.0KPa、1.2KPa进行处理；

(3)对每组样品的不同处理，经过细胞流速仪，测定悬液的SSC值；

(4)按照下列方程式，计算伪空胞的相对气体含量：

y％＝(S_p-S_f)/(S_a-S_f)×100

$y=M\frac{1}{1+e^{a-\mathrm{bx}}}$

。

2.根据权利要求1所述的一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其特征在于，所述破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置，包括密闭项圈及固定扣、保护盒、封闭气压缸、控制阀门室、气压表、氮气瓶、内管和气体阀门，所述封闭气压缸通过密闭项圈及固定扣实现密封固定，而封闭气压缸内设置离心管，所述封闭气压缸的进气口通过管道连接控制阀门室内的内管一端，内管的另一端通过气压表连接氮气瓶；所述内管的一侧出气口上设置气体阀门，所述封闭气压缸设置在保护盒内。

3.根据权利要求2所述的一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其特征在于，所述控制阀门室的两端分别设有进水口和出水口。

4.根据权利要求2所述的一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其特征在于，所述进水口和出水口均与恒温水箱连接。

5.根据权利要求2所述的一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其特征在于，所述气压缸保护盒是一个正方体的不锈钢盒子，在上端开有圆孔。

6.根据权利要求1或2所述的一种测定伪空胞相对气体含量的方法，其特征在于，所述破裂伪空胞和群体细胞间空隙的装置的操作方法为：

(1)将野外藻华样品放于离心管；

(2)将离心管放置于密闭气压缸；

(3)用密闭项圈及固定扣固定好密闭气压缸；

(4)将固定好的密闭气压缸置于样品放置气压缸保护盒；

(5)将装置按照下列顺序链接：高纯度氮气瓶、控制阀门室、密闭气压缸；

(6)关闭控制阀门室内管气体阀门，开启外管水管阀门，恒定水流不断经过控制阀门室；

(7)开启高纯度氮气瓶的气体阀门，根据气压表选择合理气压，处理样品10秒钟；

(8)关闭高纯度氮气瓶的气体阀门；

(9)开启控制阀门室内管气体阀门；

(10)关闭控制阀门室外管水管阀门；

(11)拆卸橡皮圈和固定扣固定扣；

(12)取出藻华样品。