CN104230404B - 一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法及其产品 - Google Patents

Abstract

本发明属于现代农业/新型农业投入品/新型肥料和土壤调理剂领域，涉及一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，主要是采用两段酶解法完整地提取海藻內源活性物质和营养成分的方法，先用放线菌发酵，再用芽孢杆菌发酵，制备出了含海藻活性成份高的有机肥料。本发明的海藻有机肥主要技术指标满足：有机质≥95g/L，海藻酸≥20g/L，Cu、Zn、Mo和B四种物质总量≥4g/L，能提高作物产量，改善农产品品质，特别是对棉花、烟草、桑茶等经济作物和园艺业有更大的增产效果和经济效益。

Description

一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法及其产品

技术领域

本发明属于现代农业/新型农业投入品/新型肥料和土壤调理剂领域，涉及一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法及其产品。

背景技术

目前世界上肥料行业正在从能源型的化学肥料向环保型的天然有机肥方向发展。以海洋藻类为原料生产的海藻肥，是当今世界上正在兴起的新型绿色有机肥料，十分适应现代人们青睐绿色食品、有机食品的潮流，市场需求量已呈现快速增长态势。

目前生产海藻有机肥最好的方法是生物酶解法，其次是物理法，而化学水解法则较差。目前世界上绝大部分厂家主要采用化学水解法生产海藻肥，化学水解法的缺点在于强碱高温破坏了海藻内源物质的活性，如公开号为CN102515938A的中国发明，公开了一种海藻肥的制备方法，包括如下步骤：1)海藻，除去杂质和外来物；2)用乙醇完全浸泡24小时；3)浸出液减压浓缩至浸膏；4)残渣部分冷冻干燥；5)将浸膏和残渣混合均匀；6)喷雾干燥，干法制粒，获得海藻肥。物理提取法是采用冷冻高压的工艺达到海藻细胞壁破碎的目的，该提取方法优于化学提取法，但目前掌握物理提取技术的企业也是屈指可数，如南非的kelpak等；所谓酶解法就是利用微生物——真菌、细菌所产生的酶，将海藻的大分子结构物质及其内含物降解为低分子、水溶的物质，以供植物用作养分。

发明内容

本发明旨在提供一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，使获得的有机肥料具有海藻活性物质含量高的特点，绿色环保，能改进肥料结构，促进作物营养的平衡吸收，提高作物产量，改善农产品品质，同时还能改善补充土壤养分，减少资源浪费，提高肥料利用率，减少环境污染，保护生态环境。

为实现本发明的发明目的，发明人提供如下技术方案：

一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，包括：

以海黍子为主要原材料，首先接种放线菌后进行第一段酶解发酵，接着接种芽孢杆菌后进行第二段酶解发酵，得到的发酵液经过滤后再经浓缩得到酶解高活性海藻有机肥料产品，其中：

第一段酶解发酵中：接种量1-5％，发酵温度35-42℃，发酵时间48-72小时；

第二段酶解发酵中：接种量1-5％，发酵温度35-42℃，发酵时间48-72小时。

本发明以海黍子为主要原材料，采用两段酶解法制备出酶解高活性海藻有机肥料，其中：第一段酶解法采用放线菌发酵，第二段酶解法采用芽孢杆菌发酵。酶解法就是利用微生物所产生的酶，将生产原料海藻的大分子结构物质及其细胞内含物降解为低分子、水溶的物质。因为构成海藻植物体的每个细胞都有厚实的细胞壁，根据细胞壁的组成成分，发明人先用放线菌进行第一段发酵，以将细胞壁降解，释放出细胞内含物，继后用芽孢杆菌进行第二段发酵，将已被放线菌降解的细胞壁物质和细胞内含物进一步降解为低分子、水溶物质。由于整个发酵过程没有高温高压强碱强酸，因而最大限度地提取了海藻内源活性物质。提取方法对于产品活性物质和营养成分含量的影响极大，即使营养成分含量相同，但活性物质的含量可能有很大差异。本发明是一种采用两段酶解法完整地提取海藻内源活性物质和营养成分的方法，制备出了含海藻活性成份高的有机肥料，本发明的两次酶解法是国内外其他生产企业所未曾采用的，为发明人首创。

作为优选方案，根据本发明所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其中，所述的海黍子原材料中添加有车前子，海黍子与车前子的质量百分比的配比为：98-99∶2-1。研究发现，这样的配方提高了产品中生物活性物质的含量。

作为优选方案，根据本发明所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其中，所述的浓缩至浓缩液的比重达到1.16-1.22。这么做，提高了产品性能稳定性，产品不易腐烂变质，可延长储存期3-5年。

作为优选方案，根据本发明所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其中，所述的放线菌采用已培养好的放线菌液体种子，培养方法按如下操作：

(1)斜面微生物培养：

采用高氏培养基，根据培养基配方，加入琼脂，并加热搅拌使之溶解后，调pH值至7.2～7.4，分装，高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后趁热斜放，冷却至室温即成斜面培养基；从砂土管挑取放线菌菌种接入斜面培养基，置28℃恒温箱培养72小时后，待放线菌菌种长满斜面后停止培养，备用；

所述的高氏培养基为本领域通用，具体高氏培养基配方如可采用：可溶性淀粉2克，硝酸钾0.1克，磷酸氢二钾0.05克，氯化钠0.05克，硫酸镁0.05克，硫酸亚铁0.001克，琼脂2克，水100毫升。

(2)种子罐培养：

采用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基，根据液体种子培养基配方，制成种子罐培养基，高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后待培养基冷却至室温；用无菌操作法收集步骤(1)培养好的种子，接入种子罐培养基，控制温度28℃培养72小时后停止培养，备用。

所述的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基为本领域通用，具体马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配方如可采用：称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖，充分溶解后定容到1000ml。

作为优选方案，根据本发明所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其中，所述的芽孢杆菌采用已培养好的芽孢杆菌液体种子，培养方法按如下操作：

(1)微生物培养：

采用SC培养基，根据培养基配方，加入琼脂，并加热搅拌使之溶解后，调pH值至7.2-7.4，分装，高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后趁热斜放，冷却至室温即成斜面培养基；从砂土管挑取放线菌菌种接入斜面培养基，置37℃恒温箱培养48小时后，待芽孢杆菌菌种长满斜面后停止培养，备用；

所述的SC培养基为本领域通用，具体SC培养基配方如可采用：胰酪蛋白胨15.0g，大豆胨5.0g，酵母浸粉5.0g，亚硫酸氢钠1.0g，柠檬酸铁铵1.0g，琼脂13.0g。

(2)种子罐培养：

采用LB培养基，根据LB培养基配方，制成种子罐培养基，调pH值至7.0-7.4，高压下蒸汽灭菌，灭菌完毕后待培养基冷却至室温；用无菌操作法收集步骤(1)培养好的种子，接入种子罐培养基，控制温度37℃培养48小时后停止培养，备用。

所述的LB培养基为本领域通用，具体LB培养基配方如可采用：950ml去离子水中加入：胰化蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl10g。

本发明中比较好的是对海黍子和车前子原材料做干燥粉粹处理，粉碎成约0.1mm细度的粉末。另外，藻体内所含的物质成分及其含量是随季节变化的，控制海藻收获期，确定最佳的收获季节，可以保证原材料的质量，从而确保产品的质量。发明人发现，海黍子最佳的收获季节是9-12月份。

本发明还提供了由上述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法得到的产品。

本发明提供的酶解高活性海藻有机肥料，是一种有机水溶肥料，产品形态是一种水剂，主要技术指标满足：有机质≥95g/L，海藻酸≥20g/L，Cu、Zn、Mo和B四种物质总量≥4g/L。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

本发明的酶解高活性海藻有机肥料除给植物提供养分外，还能为植物提供对植物生理过程有显著影响的内源植物生长物质如植物生长素、细胞分裂素、赤霉素，还有植物可直接吸收用作养分的蛋白质氨基酸和其它一些游离氨基酸、肽类、核苷酸等；还有海藻多酚、黄酮类化合物、萜类化合物等，这些物质能增强植物的抗旱、抗寒、抗病虫害等抗逆能力；此外还有各类维生素、海藻酸和腐植酸等。且这些对植物有用的物质都是海藻中天然存在的，通过发酵工艺以均衡的比例完整提取出来的，不是人为外加的化学化合物，这些物质对环境友好，对人畜无毒。试验表明，本发明的酶解海藻高活性有机肥料对粮食作物，蔬菜作物和果树，特别是对棉花、烟草、桑茶等经济作物和园艺业有更大的增产效果和经济效益。

酶解高活性海藻有机肥料的主要功能有：

促进种子萌发，提高发芽率，有利于育全苗、育壮苗；

促进植物根系发育，有利于植物吸收水分，养分；

活化微量元素，对抗土壤中磷酸盐对多数微量元素的拈抗作用，有利于植物对微量元素的吸收。

提高植物体内多种酶的活性，增强植物代谢活动，有利于植物生长发育及均衡生长；

促进花芽分化，提高坐果率，促进果实膨大并着色鲜艳，提早成熟；

增强植物抗逆性能，提高植物对干旱、寒冷、病虫害等的抵抗能力；

提高作物产量，改善农产品品质。

附图说明

图1是本发明工艺流程示意图。

具体实施方式

下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。

在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。若无特别指明，实施例采用的方法为本领域通用技术。

实施例中的放线菌和芽孢杆菌按如下方法培养好后备用：

1.放线菌培养

(1)斜面微生物培养：

根据培养基配方(高氏培养基：可溶性淀粉2克，硝酸钾0.1克，磷酸氢二钾0.05克，氯化钠0.05克，硫酸镁0.05克，硫酸亚铁0.001克，琼脂2克，水100毫升)，加入2克琼脂，并加热搅拌使之溶解后，调pH值至7.4，分装，121℃灭菌30min高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后趁热斜放，冷却至室温即成斜面培养基；从砂土管挑取放线菌菌种接入斜面培养基，置28℃恒温箱培养72小时后，待放线菌菌种长满斜面后停止培养，备用；

(2)种子罐培养：

根据液体种子培养基配方(马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基)：称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖，充分溶解后定容到1000ml)，制成种子罐培养基，121℃灭菌30min高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后待培养基冷却至室温；用无菌操作法收集步骤(1)培养好的种子，接入种子罐培养基，控制温度28℃培养72小时后停止培养，备用。

2.芽孢杆菌培养：

(1)微生物培养：

根据培养基配方(SC培养基：胰酪蛋白胨15.0g，大豆胨5.0g，酵母浸粉5.0g，亚硫酸氢钠1.0g，柠檬酸铁铵1.0g，琼脂13克)，加热搅拌使之溶解后，调pH值至7.4，分装，在15psi高压下蒸汽灭菌20min，灭菌完毕后趁热斜放，冷却至室温即成斜面培养基；从砂土管挑取放线菌菌种接入斜面培养基，置37℃恒温箱培养48小时后，待放线菌菌种长满斜面后停止培养，备用；

(2)种子罐培养：

根据液体种子培养基配方(LB培养基：950ml去离子水，胰化蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl10g)，制成种子罐培养基，在15psi高压下蒸汽灭菌20min，灭菌完毕后待培养基冷却至室温；用无菌操作法收集步骤(1)培养好的种子，接入种子罐培养基，控制温度37℃培养48小时后停止培养，备用。

实施例1

如图1所示，一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，包括：

(1)原料筛选

选用9-12月份季节采摘的海黍子，将其干燥并粉碎成约0.1mm细度的粉末；车前子同样干燥粉粹，将两种物质按海黍子∶车前子＝99∶1的质量比混合均匀。

(2)酶解发酵

第一段发酵：将混合好的海黍子和车前子原材料，按发酵工艺规程称取400kg，置发酵罐中，加入1600kg的水，开搅拌搅匀，121℃下进行30分钟蒸汽灭菌。灭菌后待物料温度降至38℃，恒温，按无菌操作法接入已培养好的放线菌液体种子，接种量40kg，在38℃温度下进行发酵48小时，放线菌在发酵过程中产生的混合酶将物料初步降解。发酵完毕，发酵液经板框压滤，收集滤液，滤渣灭活后另外处理。

第二段发酵：将第一段发酵收集的滤液约2040kg打入发酵罐，121℃下30分钟蒸汽灭菌，灭菌完毕后待温度降至38℃，恒温，按无菌操作法接入已培养好的芽孢杆菌液体种子，接种量40kg，在38℃温度下进行发酵48小时，使物料又一次发酵降解。待发酵完毕时，物料的大分子物质已降解成低分子量的水溶性物质，也就是可被植物直接吸收利用的物质。将发酵液过滤，收集滤液，滤渣灭活后处理。

(3)将步骤(2)收集的滤液，灭活后经薄膜蒸发器脱水浓缩，使浓缩液的比重达到1.2。再加入其他配料(七水硫酸锌0.68％，四水八硼酸钠0.71％，七钼酸铵0.19％和五水硫酸铜0.40％)，搅拌，取样分析测试，各项数据符合产品质量要求，即可分装包装、入库、出厂。

实施例2

如图1所示，一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，包括：

(1)原料筛选

选用9-12月份季节采摘的海黍子，将其干燥并粉碎成约0.1mm细度的粉末；车前子同样干燥粉粹，将两种物质按海黍子∶车前子＝99∶1的质量比混合均匀。

(2)酶解发酵

第一段发酵：将混合好的海黍子和车前子原材料，按发酵工艺规程称取400kg，置发酵罐中，加入1600kg的水，开搅拌搅匀，121℃下进行30分钟蒸汽灭菌。灭菌后待物料温度降至42℃，恒温，按无菌操作法接入已培养好的放线菌液体种子，接种量20kg，在42℃温度下进行发酵48小时，放线菌在发酵过程中产生的混合酶将物料初步降解。发酵完毕，发酵液经板框压滤，收集滤液，滤渣灭活后另外处理。

第二段发酵：将第一段发酵收集的滤液(约2020kg)打入发酵罐，121℃下30分钟蒸汽灭菌，灭菌完毕后待温度降至42℃，恒温，按无菌操作法接入已培养好的芽孢杆菌液体种子，接种量20kg，在42℃温度下进行发酵48小时，使物料又一次发酵降解。待发酵完毕时，物料的大分子物质已降解成低分子量的水溶性物质，也就是可被植物直接吸收利用的物质。将发酵液过滤，收集滤液，滤渣灭活后处理。

(3)将步骤(2)收集的滤液，灭活后经薄膜蒸发器脱水浓缩，使浓缩液的比重达到1.16。再加入其他配料(七水硫酸锌0.68％，四水八硼酸钠0.71％，七钼酸铵0.19％和五水硫酸铜0.40％)，搅拌，取样分析测试，各项数据符合产品质量要求，即可分装包装、入库、出厂。

实施例3

如图1所示，一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，包括：

(1)原料筛选

选用9-12月份季节采摘的海黍子，将其干燥并粉碎成约0.1mm细度的粉末；车前子同样干燥粉粹，将两种物质按海黍子∶车前子＝98∶2的质量比混合均匀。

(2)酶解发酵

第一段发酵：将混合好的海黍子和车前子原材料，按发酵工艺规程称取400kg，置发酵罐中，加入1600kg的水，开搅拌搅匀，121℃下进行30分钟蒸汽灭菌。灭菌后待物料温度降至35℃，恒温，按无菌操作法接入已培养好的放线菌液体种子，接种量100kg，在35℃温度下进行发酵72小时，放线菌在发酵过程中产生的混合酶将物料初步降解。发酵完毕，发酵液经板框压滤，收集滤液，滤渣灭活后另外处理。

第二段发酵：将第一段发酵收集的滤液(约2100kg)打入发酵罐，121℃下30分钟蒸汽灭菌，灭菌完毕后待温度降至35℃，恒温，按无菌操作法接入已培养好的芽孢杆菌液体种子，接种量100kg，在35℃温度下进行发酵72小时，使物料又一次发酵降解。待发酵完毕时，物料的大分子物质已降解成低分子量的水溶性物质，也就是可被植物直接吸收利用的物质。将发酵液过滤，收集滤液，滤渣灭活后处理。

(3)将步骤(2)收集的滤液，灭活后经薄膜蒸发器脱水浓缩，使浓缩液的比重达到1.22。再加入其他配料(七水硫酸锌0.68％，四水八硼酸钠0.71％，七钼酸铵0.19％和五水硫酸铜0.40％)，搅拌，取样分析测试，各项数据符合产品质量要求，即可分装包装、入库、出厂。

本发明产品送样到中国林科院分析中心检测，结果如下：

表1

表2

表3

产品送国家化肥质量监督检验中心，检测结果如下：

表4

表5

实验例

1、海藻肥棉花应用效果联合试验报告

本发明的海藻肥是一种新型植物生长促进剂，经中国农科院棉花研究所组织的我国三大棉区(黄淮海棉区、长江中下游棉区、新疆棉区)五省(自治区)河南、河北、山东、江苏、新疆9点联合试验，结果表明，本发明的海藻肥能明显促进棉花的生长发育，可增加棉株的果枝数、果节数，降低棉株的脱落率；对棉花产量构成因素铃数、衣分和铃重均有影响，但以对棉花的铃数影响最大。棉花使用本发明海藻肥增产效果明显，9个试验点综合结果，浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次两个处理每亩增产皮棉分别为7.9千克和8.2千克，增产率分别为8.9％和9.3％。使用本发明海藻肥应主要放在棉花的生长前期，用海藻肥浸种后，再于开花期前喷施1～2次效果较好。

1.1试验材料与方法

试验产品由东阳联丰生物技术有限公司提供，中国农业科学院棉花研究所负责试验组织安排。于2007年在黄淮棉区的河南安阳、商丘、山东巨野、陵县、河北威县，长江中下游棉区的江苏南京、徐州和新疆棉区的石河子、新疆生产建设兵团农一师三团(阿克苏)设9个试验点，按统一试验方案(表6)实施，试验采用随机区组设计，3次重复。9个试验点分别用当地主栽棉花品种，田间管理同当地水平，各小区管理标准一致，不施用其它叶面肥。处理具体要求：(1)浸种：用1∶1500倍“力力加”海藻肥稀释液浸种6小时，阴凉处晾干后播种，每亩棉花地种子用药量为13克原液；(2)喷施：蕾期每亩棉花用13克原液，初花期和盛花期每亩每次各用20克原液，配成1∶2000倍稀释液喷至叶面湿润。

表6试验方案

注：徐州试验点采用方案2，其它8个试验点均采用方案1。

1.2、试验结果与分析

1.2.1海藻肥的增产效果，见表7。

表7 9个试验点各处理平均产量(千克/亩)及比对照的增产率(％)

海藻肥2007年试验结果表明，9个试验点均表现出不同程度的增产效果，全部9个试验点综合结果，增产幅度4.7～8.2千克/亩，增产率5.5～9.3％，平均增产6.9千克/亩，增产率7.9％，浸种、浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次三个处理分别比对照增产5.5％、8.2％和9.3％，其中浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次与对照相比增产效果明显，浸种与对照相比效果不明显。黄淮海棉区5点结果综合分析，浸种、浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次三个处理分别比对照增产7.4％、11.2％和11.7％，其中浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次增产效果显著；江苏徐州试验点浸种、浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次分别比对照增产3.2％、18.7％和9.7％，浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次与对照相比增产效果显著；新疆2点综合结果，浸种、浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次分别比对照增产2.0％、5.1％和3.6％，浸种+初花期喷施增产效果明显。

1.2.2海藻肥对棉花产量构成因素的影响

综合分析9点试验结果，海藻肥对棉花产量构成因素铃数、铃重和衣分均有影响，但以对棉花铃数的影响最大；9个试验点平均，浸种、浸种+初花期喷施和浸种+初花期、盛花期各喷1次单株成铃分别比对照增加0.9个/株、2.0个/株和1.8个/株。因此，海藻肥的增产效果主要是通过提高棉花的结铃性，增加棉株铃数来实现的。

1.2.3海藻肥对棉花生长发育的影响

使用海藻肥能明显促进棉花的生长发育，增加棉花的株高、果枝数、果节数和成铃数。9个试点综合结果，浸种、浸种+初花期喷施、浸种+初花期、盛花期各喷1次的最终株高分别比对照增加4.7cm、5.9cm和7.0cm，单株果枝数分别增加1.3台/株、2.0台/株、2.1台/株，单株果节数分别增加6个/株、7个/株、5个/株，最终单株成铃数分别增加0.9个/株、2.0个/株和1.8个/株。使用海藻肥对降低棉株的脱落率也有一定的效果，9个试点平均，浸种、浸种+初花期喷施、浸种+初花期、盛花期各喷1次的棉株脱落率分别比对照降低1.4、4.0和4.0个百分点。植物生长促进剂对提高棉花的纤维也有一定的效果。

2、阿克苏棉花使用情况说明

阿克苏棉花示范基地，选200亩同样的耕地，100亩用海藻肥喷施五遍，200亩用同类产品喷施五遍，结果用海藻肥的比同类产品增产率高达15％左右，且海藻肥投入比同类产品低。

3、水稻施用海藻肥抗倒伏情况说明

3.1材料与方法

水稻品种为辽农20号，试验地点在盘锦鼎翔集团水稻生产基地。

3.2试验方法

田间试验设三个处理，分别为①海藻肥在水稻分蘖末期，以每亩30克兑水20公斤喷雾；②海藻肥分别在水稻分蘖末期和抽穗始期，以每亩30克对水20公斤喷雾；③不施肥的空白对照。每个处理两次重复每小区面积100亩，共6个试验小区。其他田间管理活动正常进行。

3.3结果与分析

海藻肥对水稻具有明显的抗倒伏作用，与对照相比，处理①的防倒伏效果为82.0％，处理②的防倒伏效果为98.8％。说明在水稻分蘖末期和抽穗始期施用海藻肥的抗倒伏效果更好，尤其对本身不具有抗倒伏特性的水稻品种作用尤为明显。海藻肥对水稻产量的影响：两个处理的试验区均取得了一定的增产效果，与空白对照相比，分别增产3.9％和5.2％，而且籽粒饱满度也有所提高。

4、东阳市宅口乡茶叶使用情况说明

该乡有机茶生产基地占地2000余亩，对有机茶施用海藻肥，以2000倍稀释液喷施叶面，共喷3次，肥效明显，提前采茶7天左右，增产15-17％，提高品质及价值，给该乡茶农带来了可观的经济效益。

5、用户使用海藻肥典型报告例

5.1辽宁省凌源市三家子乡三家子村的大棚种植户，祁学孟。生产温室越冬茬黄瓜，辽两入冬数九的时候气温特别低，都达到了零下二十几度，所以温室内的地温随之下降，任何作物的根系生长都几乎是停滞的状态，作物所必须的营养也都无法补充，以前一直都是在用市场上琳琅满目的海藻精、海藻酸、腐植酸、核苷酸类的冲施肥，效果却都不是很好，自从用了东阳联丰生物技术有限公司生产的海藻肥以后，作物的生殖生长、营养生长都得到非常显著的改善，使用了几天以后，掀起地膜会看见许许多多小白根，瓜秧的龙头看上去也是特别打眼，瓜型端正，颜色鲜亮，比用普通有机冲施肥和化学成份冲施肥单瓜重量增加了30％，叶面喷施效果更是显著，促进了花芽分化，又防止落花落果，品尝起来口感也是特别香甜，真正达到了绿色无公害，成了市场上的抢手货，经济效益比往年增加了上万元，所以该海藻肥真是让广大种植棚户得到了很好的收益。

5.2辽宁省凌源市三家子乡，辛九平。种植十几年温室黄瓜了，也总结了不少的经验，也能舍得投入和付出辛苦，多少次向农技部门认真学习过种植技术和施肥方面的经验，所以收入还算不小，冬天地温低都是用有机肥和大量元素水溶肥混合使用，以往都是一直在用一些腐植酸和普通海藻类，可是今年从一开始自从选择了东阳联丰生物技术有限公司生产的海藻肥以后，他家大棚的经济效益就向上攀了一大节，该海藻肥即便是零下20摄氏度也照样能让植物的根系继续生长，它还富含各种对作物有益的微量和中量元素及氮、磷、钾，使作物的营养生长和生殖生长都达到了同步，而且是没有任何残留的，不管是从叶面喷施还是从根部冲施效果都是非常的显著，坐花保果能力也特强，生长出来的黄瓜瓜型好，瓜刺硬实，尖嘴瓜和大肚瓜都不见了，品尝起来也特别香甜可口，深受百姓和商贩的喜爱。半亩多一点的温室地块就比往年增加了7、8千元的收入。

工业实用性

本发明申请人是国内最早涉足海藻肥研发和生产的厂家之一，研发的新型酶解高活性海藻有机肥料，能有效改进肥料结构，促进作物营养的平衡吸收，提高作物产量，改善农产品品质，同时还能改善补充土壤养分，减少资源浪费，提高肥料利用率，减少环境污染，保护生态环境，其生产技术和产品质量达到国际同类产品的先进水平。

尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域一个熟练的技术人员来说，对上述实施例作出修改和/或变通或者采用等同的替代方案是显然的，都不能脱离本发明精神的实质，本发明中出现的术语用于对本发明技术方案的阐述和理解，并不能构成对本发明的限制。

Claims (4)

1.一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其特征在于包括：

以海黍子为主要原材料，所述的海黍子原材料中添加有车前子，海黍子与车前子的质量百分比的配比为：98-99:2-1，首先接种放线菌后进行第一段酶解发酵，接着接种芽孢杆菌后进行第二段酶解发酵，得到的发酵液经过滤后再经浓缩得到酶解高活性海藻有机肥料产品，所述的浓缩至浓缩液的比重达到1.16-1.22，其中：

第一段酶解发酵中：接种量1-5%，发酵温度35-42℃，发酵时间48-72小时；

第二段酶解发酵中：接种量1-5%，发酵温度35-42℃，发酵时间48-72小时。

2.根据权利要求1所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其特征在于，所述的放线菌采用已培养好的放线菌液体种子，培养方法按如下操作：

（1）斜面微生物培养：

采用高氏培养基，根据培养基配方，加入琼脂，并加热搅拌使之溶解后，调pH值至7.2~7.4，分装，高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后趁热斜放，冷却至室温即成斜面培养基；从砂土管挑取放线菌菌种接入斜面培养基，置28℃恒温箱培养72小时后，待放线菌菌种长满斜面后停止培养，备用；

（2）种子罐培养：

采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基，根据液体种子培养基配方，制成种子罐培养基，高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后待培养基冷却至室温；用无菌操作法收集步骤（1）培养好的种子，接入种子罐培养基，控制温度28℃培养72小时后停止培养，备用。

3.根据权利要求1所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法，其特征在于，所述的芽孢杆菌采用已培养好的芽孢杆菌液体种子，培养方法按如下操作：

（1）微生物培养：

采用SC培养基，根据培养基配方，加入琼脂，并加热搅拌使之溶解后，调pH值至7.2-7.4，分装，高压蒸汽灭菌，灭菌完毕后趁热斜放，冷却至室温即成斜面培养基；从砂土管挑取芽孢杆菌菌种接入斜面培养基，置37℃恒温箱培养48小时后，待芽孢杆菌菌种长满斜面后停止培养，备用；

（2）种子罐培养：

采用LB培养基，根据LB培养基配方，制成种子罐培养基，调pH值至7.0-7.4，高压下蒸汽灭菌，灭菌完毕后待培养基冷却至室温；用无菌操作法收集步骤（1）培养好的种子，接入种子罐培养基，控制温度37℃培养48小时后停止培养，备用。

4.一种由权利要求1-3之一所述的一种酶解高活性海藻有机肥料的制备方法得到的产品。