CN104145704B - 一种裸花紫珠快速繁殖的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于植物无性繁殖技术领域，具体涉及一种裸花紫珠快速繁殖的方法。该方法包含如下步骤：(1)穗苗的准备；(2)混合基质的准备；(3)插穗的制备与扦插；(4)后期管护。本发明可有效的缩短生根所需时间，明显地提高了生根率、生根数、最大根长，减少了偏根率；所生产的苗木成苗率和移植成活率高；此法可保持母株的优良性状，稳定可靠；本发明成本低，技术易于推广，具有广阔的应用前景。

Description

一种裸花紫珠快速繁殖的方法
技术领域
本发明属于植物无性繁殖技术领域，具体涉及一种裸花紫珠快速繁殖的方法。
背景技术
裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Am.)，为马鞭草科(Verbenaceae)紫珠属(Callicarpa)多年生灌木至小乔木。主要分布于热带和亚热带地区，如印度、越南、马来西亚、新加坡和澳大利亚北部。国内主要分布于海南、广东和广西等地。裸花紫珠全株均可入药，药用历史悠久，具有抗菌止血、解毒消炎、驱风祛湿和抗肿瘤之功效。裸花紫珠为海南省大宗性地道药材，同时也是海南黎族常用的药材。不仅被江西、湖南等省列入了地方药材标准，而且还载入了国家药典。制药企业已开发出各类裸花紫珠药品。除了较高的药用价值外，裸花紫珠还可以用作道路绿化；其木材具有材质轻而坚韧等特点，特别适合用来制作鱼竿、扁担等工具。
近年来，随着裸花紫珠药用价值的日益凸显，相关产业的迅速发展以及市场需求量的不断提升，对裸花紫珠的乱采滥挖，致使裸花紫珠的野生资源逐年锐减，已经不能满足生产需要。裸花紫珠的种子具休眠、易丧失活力及发芽率低等特性，使得通过有性繁殖发展其人工林变得缓慢和困难。为了保护裸花紫珠的野生资源，为有效的开发利用这一珍稀药材资源，开展裸花紫珠快速扦插繁殖技术的研究势在必行。目前国内对裸花紫珠扦插繁殖技术方面的研究报道甚少。唐燕从选地、整地作畦、枝条的选择和穗条的剪取、扦插、苗床管理、出圃标准等方面总结了裸花紫珠扦插繁育技术，尽管用吲哚丁酸处理，但未提及最适浓度及浸泡时间，无扦插生根及繁殖评价，可操作性弱(裸花紫珠扦插繁育技术，农技服务，2012，29(9)：1026)。张浪等人从插穗年龄、粗度、生根药物处理等方面对裸花紫珠扦插育苗技术进行研究，主要开展了插穗年龄，插穗粗度和生根剂量处理3个方面的研究，该研究主要存在的问题有：(1)当年生插穗的生根率低于2年生插条，这一结论与常理相悖，因为所有植物插穗的生根能力与其幼化程度是密切相关的，幼嫩或半木质化插条皮层分生组织的生命活力要比老、硬枝条高的多。当年生插穗的幼化程度肯定比2年生插穗的高；(2)在扦插繁殖评价上，仅以生根率指标，不能全面的衡量扦插生根、成活与繁殖质量，一些插穗即便生根了，因生根质量差，上袋移植后未必成活(海南黎药裸花紫珠扦插育苗技术研究，中国农学通报2013，29(13)：197-200)。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点或不足，提供一种裸花紫珠快速繁殖的方法，该方法能够有效地缩短生根所需时间、具有较高生根率与成活率、最低偏根率；低成本、苗木质量好、稳定可靠、能保持母株优良性状、方便推广。
本发明的发明目的通过下述技术方案实现：
一种裸花紫珠快速繁殖的方法，包含如下步骤：
(1)插穗的准备：采集野生裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Am.)优株的种子，播种育苗；选择优良幼苗营建采穗圃；从采穗圃中选取2年生实生苗的当年生半木质化枝条作为插穗材料；
(2)混合基质的准备：将泥炭土、蛭石、河沙按体积比(1～2)∶1∶1混合均匀，得到混合基质；该混合基质具有良好的保肥性、持水性及透气性，还能有效防止生根前插穗基部腐烂并为根系生长提供良好的生长环境；
(3)插穗的制备与扦插：选择特定月份，于上午7:00～9:00或下午16:30～18:30、光照小于10000lx时，取步骤(1)得到的半木质化枝条，选取特定部位并将其剪成9～11cm长的插穗，插穗保留靠近顶部的特定叶片数和特定叶面积的叶片；插穗上切口为平口，以减少水分散失，下端斜切并靠近叶节处，利于插穗吸收水分；然后清洗插穗，并进行消毒；再将插穗下部放入配制好的植物生长调节剂处理液中，然后再扦插于混合基质中；
(4)后期管护：扦插完毕后，浇一次透水，立即全面喷洒50％多菌灵可湿性粉剂200倍液进行消毒；之后扦插环境保持温度为20～33℃、相对湿度不小于80％；同时，定期对扦插环境进行消毒；
步骤(1)中所述的野生裸花紫珠优株优选海南省五指山野生裸花紫珠优株；
步骤(1)中所述的野生裸花紫珠优株优选为树高不小于4m，胸径不小于10cm，树形端正、健康的野生树木；
步骤(1)中所述的优良幼苗优选为地径不小于0.5cm、苗高不小于50cm的2年生幼苗；
步骤(1)中所述的半木质化枝条优选为下端径为0.30～0.39cm的枝条；
步骤(2)中所述的混合基质优选将其置于长540mm、宽280mm、深80mm规格的50穴轻质育苗盘，扦插前2天用质量百分比为0.5％的高锰酸钾溶液对混合基质进行淋灌消毒，以淋透混合基质为准；所选苗盘的优点在于节约混合基质，节省空间，成苗后根系团在一起，有效提高了移植成活率；
步骤(3)中所述的特定月份优选为9月份或4月份；
步骤(3)中所述的半木质化枝条用来制作插穗的特定部位为距离半木质化枝条顶端5～18cm的部分；
步骤(3)中所述的靠近顶部的特定叶片数和特定叶面积的叶片优先为靠近顶部的2个叶片，每片保留1/2叶面积；
步骤(3)中所述的消毒方式优选为用质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液消毒1～2min，再用蒸馏水冲洗干净；
步骤(3)中所述的植物生长调节剂处理液优选为吲哚丁酸(IBA)溶液；优选浓度为1000～1500mg·L-1；
步骤(3)中所述的将插穗下部放入配制好的植物生长调节剂处理液中的时间优选为速蘸13～17s；
步骤(3)中所述的扦插方式优选为直插法，即将插穗生态学上端向上，竖直插入穴盘基质中，每穴扦插1株插穗；
步骤(3)中所述的扦插方式更优选为扦插前先用竹条在基质上打一引导洞，深度为3～4cm，再将插穗竖直插入穴盘基质中，每穴扦插1株插穗；
步骤(4)中所述的全面喷洒是指插穗、基质以及周边环境都要喷洒50％多菌灵可湿性粉剂200倍液；
步骤(4)中所述的定期对扦插环境进行消毒的具体方法为每隔2～3天分别喷洒质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液和50％多菌灵可湿性粉剂500倍液进行交替消毒；20天以后，仍按此浓度交替消毒，7天1次；
一种评价裸花紫珠扦插繁殖质量的方法，包含如下步骤：
(1)根据权利要求1所述的裸花紫珠快速繁殖的方法繁殖裸花紫珠，扦插第60天后统计裸花紫珠插穗的生根率、生根数、最长根长以及偏根率；
(2)各个评价指标的隶属函数值Vi根据如下公式计算：
Vi＝(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (1)或
Vi＝1-(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (2)；
其中，Xi为某个评价指标的测定值；Xmax为某个评价指标的所有数据中的最大值；Xmin为某个评价指标的所有数据中的最小值；所述的评价指标包括生根率、发根数量、最长根长和偏根率；若所测评价指标与扦插苗质量呈正相关，则采用(1)式计算隶属值，反之则用(2)式；
(3)将步骤(2)得到的各个评价指标的隶属函数值累加，得到综合指标隶属函数值；
(4)综合指标隶属函数值越大，得到的扦插繁殖成效越高，反之则越低。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明以市场上常见的泥炭土、蛭石、河沙为扦插基质，容易获取且成本低廉；
(2)所选苗盘节约基质、节省空间。成苗后根系团在一起，能有效提高了移植成活率；扦插所需要的环境容易实现；
(3)采用本方法进行裸花紫珠扦插育苗，可有效的缩短生根所需时间；
(4)插穗生根质量好，明显的提高了生根率、成苗率和移植成活率；
(5)此法可保持母株的优良性状，稳定可靠；本发明易操作、推广，具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例中使用的原料来源：
吲哚丁酸(IBA)为上海伯奥生物科技有限公司生产；
无水乙醇为天津市富宇精细化工有限公司生产；
50％多菌灵可湿性粉剂为上海悦联化工有限公司生产。
实施例1
(1)插穗的准备：采集海南五指山野生裸花紫珠优株(树高≥4m，胸径≥10cm)的种子，在广州进行播种育苗；然后选择地径不小于0.5cm、苗高不小于50cm的优良幼苗来营建采穗圃；从采穗圃中选取2年生实生苗的当年生半木质化、下端径为0.30～0.39cm的枝条作为插穗材料；
(2)混合基质的准备：将泥炭土：蛭石：河沙按体积比2∶1∶1混合均匀，置于长540mm、宽280mm、深80mm规格的50穴轻质育苗盘中。扦插前2天用质量百分比0.5％的高锰酸钾溶液进行淋灌消毒，以淋透混合基质为准，本操作采用的扦插轻质穴盘，具有节约基质、节省空间和方便移苗的优点；
(3)插穗的制备与扦插：2012年9月份，上午(7:00～9:00)，光照小于10000lx时，取步骤(1)中距离半木质化枝条顶端5～12cm，将其剪成9～11cm长，保留最顶部2个叶片，每片叶保留1/2叶面积；插穗上切口为平口，以减少水分散失，下端为45°斜切并靠近叶节处，利于插穗吸收水分；将IBA用无水乙醇溶解，然后配制成1500mg·L-1IBA溶液；将制备好的插穗放入质量百分比0.1％的高锰酸钾溶液中消毒1min，再用蒸馏水冲洗干净，然后将插穗下部放入配置好的IBA溶液中，速蘸15s，待酒精挥发片刻进行扦插：采用直插法，即将插穗竖直插入穴盘基质中，每穴扦插1株插穗，为防止扦插时损伤插穗，扦插前先用竹条在基质上打一引导洞，深度为3.0～4.0cm，插后将其周围基质稍加压实并浇透水，上述操作在温室中进行；
(4)插后管理：扦插完毕后，浇一次透水，立即全面喷洒50％多菌灵可湿性粉剂200倍液进行消毒；苗床上搭盖塑料薄膜拱棚，保持扦插环境湿度；温室中大部分强光已被温室遮荫网滤掉，但在阳光充足的中午仍需用透光率为35％的遮荫网进行遮荫，以防插穗叶片蒸腾过大，插穗失水而干枯。扦插后，每隔2天分别喷洒质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液和50％多菌灵可湿性粉剂500倍液进行交替消毒；20天以后，仍按此浓度交替消毒，7天1次；同时每天进行水喷雾，保持扦插环境温度在20～25℃，湿度在80％以上；
扦插后第5天，插穗下切口处皮孔膨大并伴有白色絮状愈伤组织产生；12天后大部分插穗下切口处皮孔膨大开裂，切口韧皮部与木质部出现分离的迹象；第15天后，地上部分的新叶迅速生长，插穗的皮孔处陆续有白不定根逐渐露出，而蛭石基质的插穗则出现变黑或者枯死的现象(对比实施例)；第20天，插穗的不定根已经开始伸长，可达2～3cm长；第30天，插穗成活情况基本稳定；第50天，各处理的插穗的生根进程基本结束。
第60天时，插穗的生根率达到95.5％，发根数量大于5条·穗-1，最长根长6.0cm以上，且偏根率小于30％，移栽成活率高达95.0％；
各个评价指标的隶属函数值Vi根据如下公式计算：
Vi＝(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (1)或
Vi＝1-(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (2)；
其中，Xi为某个评价指标的测定值；Xmax为某个评价指标的所有数据中的最大值；Xmin为某个评价指标的所有数据中的最小值；所述的评价指标包括生根率、发根数量、最长根长和偏根率；
经计算，本实施例裸花紫珠扦插繁殖质量的综合隶属函数值达2.99。
实施例2
(1)插穗的准备：采集海南五指山野生裸花紫珠优株(树高≥4m，胸径≥10cm)的种子，在广州进行播种育苗；然后选择地径不小于0.5cm、苗高不小于50cm的优良幼苗来营建采穗圃；从采穗圃中选取2年生实生苗的当年生半木质化、下端径为0.30～0.39cm的枝条作为插穗材料；
(2)混合基质的准备：将泥炭土：蛭石：河沙按体积比2∶1∶1混合均匀，置于长540mm、宽280mm、深80mm规格的50穴轻质育苗盘中。扦插前2天用质量百分比0.5％的高锰酸钾溶液进行淋灌消毒，以淋透混合基质为准。本操作采用的扦插轻质穴盘，具有节约基质、节省空间和方便移苗的优点；
(3)插穗的制备与扦插：2012年9月份，下午(16:30～18:30)，光照小于10000lx时，取步骤(1)中距离半木质化枝条顶端9～18cm，将其剪成9～11cm长，保留最顶部2个叶片，每片叶保留1/2叶面积；插穗上切口为平口，以减少水分散失，下端为45°斜切并靠近叶节处，利于插穗吸收水分；将IBA用无水乙醇溶解，然后配制成1250mg·L-1IBA溶液；将制备好的插穗放入质量百分比0.1％的高锰酸钾溶液中消毒2.0min，再用蒸馏水冲洗干净，然后将插穗下部放入配置好的IBA溶液中，速蘸13s，待酒精挥发片刻进行扦插：采用直插法，即将插穗竖直插入穴盘基质中，每穴扦插1株插穗。为防止扦插时损伤插穗，扦插前先用竹条在基质上打一引导洞，深度为3.5～4.0cm，插后将其周围基质稍加压实并浇透水，上述操作在温室中进行；
(4)插后管理：扦插完毕后，浇一次透水，立即全面喷洒50％多菌灵可湿性粉剂200倍液进行消毒；苗床上搭盖塑料薄膜拱棚，保持扦插环境湿度；温室中大部分强光已被温室遮荫网滤掉，但在阳光充足的中午仍需用透光率为35％的遮荫网进行遮荫，以防插穗叶片蒸腾过大，插穗失水而干枯。扦插后，每隔3天分别喷洒质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液和50％多菌灵可湿性粉剂500倍液进行交替消毒；20天以后，仍按此浓度交替消毒，7天1次；同时每天进行水喷雾，保持扦插环境温度在20～25℃，湿度在80％以上。
扦插后第14天，大部分插穗下切口处皮孔膨大开裂，切口韧皮部与木质部出现分离的迹象；第22天，插穗的不定根已经开始伸长，可达2～3cm长；第31天，插穗成活情况基本稳定；第52天，各处理的插穗的生根进程基本结束。第60天时，插穗的生根率95.3％，发根数量大于5条·穗-1，最长根长6.0cm以上，且偏根率小于30％，移栽成活率达94.5％；
各个评价指标的隶属函数值Vi根据如下公式计算：
Vi＝(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (1)或
Vi＝1-(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (2)；
其中，Xi为某个评价指标的测定值；Xmax为某个评价指标的所有数据中的最大值；Xmin为某个评价指标的所有数据中的最小值；所述的评价指标包括生根率、发根数量、最长根长和偏根率；
经计算，本实施例裸花紫珠扦插繁殖质量的综合隶属函数值为2.92。
实施例3
(1)插穗的准备：采集海南五指山野生裸花紫珠优株(树高≥4m，胸径≥10cm)的种子，在广州进行播种育苗；然后选择地径不小于0.5cm、苗高不小于50cm的优良幼苗来营建采穗圃；从采穗圃中选取2年生实生苗的当年生半木质化、下端径为0.30～0.39cm的枝条作为插穗材料；
(2)混合基质的准备：将泥炭土：蛭石：河沙按体积比1∶1∶1混合均匀，置于长540mm、宽280mm、深80mm规格的50穴轻质育苗盘中。扦插前2天用质量百分比0.5％的高锰酸钾溶液进行淋灌消毒，以淋透混合基质为准。本操作采用的扦插轻质穴盘，具有节约基质、节省空间和方便移苗的优点；
(3)插穗的制备与扦插：2013年4月份，上午(7:00～9:00)，光照小于10000lx时，取步骤(1)中距离半木质化枝条顶端7～16cm，将其剪成9～11cm长，保留最顶部2个叶片，每片叶保留1/2叶面积；插穗上切口为平口，以减少水分散失，下端为45°斜切并靠近叶节处，利于插穗吸收水分；将IBA用无水乙醇溶解，然后配制成1000mg·L-1IBA溶液；将制备好的插穗放入质量百分比0.1％的高锰酸钾溶液中消毒1.5min，再用蒸馏水冲洗干净，然后将插穗下部放入配置好的IBA溶液中，速蘸17s，待酒精挥发片刻进行扦插：采用直插法，即将插穗竖直插入穴盘基质中，每穴扦插1株插穗。为防止扦插时损伤插穗，扦插前先用竹条在基质上打一引导洞，深度为3.0～3.5cm，插后将其周围基质稍加压实并浇透水，上述操作在温室中进行；
(4)插后管理：扦插完毕后，浇一次透水，立即全面喷洒50％多菌灵可湿性粉剂200倍液进行消毒；苗床上搭盖塑料薄膜拱棚，保持扦插环境湿度；温室中大部分强光已被温室遮荫网滤掉，但在阳光充足的中午仍需用透光率为35％的遮荫网进行遮荫，以防插穗叶片蒸腾过大，插穗失水而干枯。扦插后，每隔2天分别喷洒质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液和50％多菌灵可湿性粉剂500倍液进行交替消毒；20天以后，仍按此浓度交替消毒，7天1次；同时每天进行水喷雾，保持扦插环境温度在20～25℃，湿度在80％以上；
扦插后第16天，大部分插穗下切口处皮孔膨大开裂，切口韧皮部与木质部出现分离的迹象；第24天，插穗的不定根已经开始伸长，可达2～3cm长；第35天，插穗成活情况基本稳定；第55天，各处理的插穗的生根进程基本结束。
第60天时，插穗的生根率达到95.0％，发根数量大于4.6条·穗-1，最长根长5.7cm以上，且偏根率小于35％，移栽成活率达94.0％；
各个评价指标的隶属函数值Vi根据如下公式计算：
Vi＝(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (1)或
Vi＝1-(Xi-Xmin)/(Xmax-Xmin) (2)；
其中，Xi为某个评价指标的测定值；Xmax为某个评价指标的所有数据中的最大值；Xmin为某个评价指标的所有数据中的最小值；所述的评价指标包括生根率、发根数量、最长根长和偏根率；
经计算，本实施例裸花紫珠扦插繁殖质量的综合隶属函数值达2.79。
对比实施例
A组对照为采用2年生硬枝、多年生硬枝和多年生当年萌发半木质化枝，其他步骤同实例1；
B组对照为不同的插穗部位试验，基质处理为泥炭土∶蛭石∶河沙＝1∶1∶1，其他步骤同实施例1；
C组对照为不同基质配比试验；其他步骤同实施例1；
D组对照为不同激素与浓度试验，基质处理为泥炭土∶蛭石∶河沙＝1∶1∶1，其他步骤同实施例1；
E组对照为不同留叶方式试验，基质处理为泥炭土∶蛭石∶河沙＝1∶1∶1，其他步骤同实施例1；
其中C～E组对照的材料均为2年生当年萌发的半木质化枝条，距半木质化枝条顶端5～18cm的部分，具体试验设计如表1所示(各组试验三次重复)。
表1 扦插繁殖系列对照试验设计
第60天时，各对照试验组(A～E)插穗的生根率在51.2～70.0％，发根数量小于4.6条·穗-1，最长根长小5.7cm，偏根率大于35％，隶属函数值在0.53～2.48之间，见表2。
表2 扦插繁殖系列对照试验结果
综上所述，本发明所采用的扦插繁殖方法得到的生根率及隶属函数值最高，对其扦插苗进行移栽，成活率高达95％以上，且后期生长健壮。
本发明以常见的河沙、泥炭土、蛭石为扦插基质，成本低廉，且扦插容器可重复利用，节约大量成本。经过本方法进行裸花紫珠的扦插，插穗生根质量好，在插后12天即可生根，2个月即可移栽，所需时间短，能够保持优良性状，稳定可靠，容易推广。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种裸花紫珠快速繁殖的方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)插穗的准备：采集野生裸花紫珠优株的种子，播种育苗；选择优良幼苗营建采穗圃；从采穗圃中选取2年生实生苗的当年生半木质化枝条作为插穗材料；
(2)混合基质的准备：将泥炭土、蛭石、河沙按体积比(1～2):1:1混合均匀，得到混合基质；
(3)插穗的制备与扦插：选择特定月份，于上午7:00～9:00或下午16:30～18:30、光照小于10000lx时，取步骤(1)得到的半木质化枝条，选取特定部位并将其剪成9～11cm长的插穗，插穗保留靠近顶部的特定叶片数和特定叶面积的叶片；插穗上切口为平口，下端斜切并靠近叶节处；然后清洗插穗，并进行消毒；再将插穗下部放入配制好的植物生长调节剂处理液中，然后再扦插于混合基质中；
(4)后期管护：扦插完毕后，浇一次透水，立即全面喷洒50％多菌灵可湿性粉剂200倍液进行消毒；之后扦插环境保持温度为20～33℃、相对湿度不小于80％；同时，定期对扦插环境进行消毒；
步骤(1)中所述的半木质化枝条为下端径为0.30～0.39cm的枝条；
步骤(3)中所述的特定月份为9月份或4月份；
步骤(3)中所述的半木质化枝条用来制作插穗的特定部位为距离半木质化枝条顶端5～18cm的部分；
步骤(3)中所述的靠近顶部的特定叶片数和特定叶面积的叶片为靠近顶部的2个叶片，每片保留1/2叶面积；
步骤(4)中所述的定期对扦插环境进行消毒的具体方法为每隔2～3天分别喷洒质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液和50％多菌灵可湿性粉剂500倍液进行交替消毒；20天以后，仍按此浓度交替消毒，7天1次。
2.根据权利要求1所述的裸花紫珠快速繁殖的方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的野生裸花紫珠优株为树高不小于4m，胸径不小于10cm，树形端正、健康的野生树木；
步骤(1)中所述的优良幼苗为地径不小于0.5cm、苗高不小于50cm的2年生幼苗。
3.根据权利要求1所述的裸花紫珠快速繁殖的方法，其特征在于：
步骤(3)中所述的植物生长调节剂处理液为吲哚丁酸溶液；浓度为1000～1500mg·L-1。
4.根据权利要求1所述的裸花紫珠快速繁殖的方法，其特征在于：
步骤(3)中所述的消毒方式为用质量百分比为0.1％的高锰酸钾溶液消毒1～2min，再用蒸馏水冲洗干净；
步骤(3)中所述将插穗下部放入配制好的植物生长调节剂处理液中的时间为速蘸13～17s。
5.根据权利要求1所述的裸花紫珠快速繁殖的方法，其特征在于：
步骤(3)中所述的扦插方式为直插法。
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