CN103880793A - 含呋喃亚胺类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体公开了具有式I结构的一类含呋喃亚胺结构的化合物，其中：n＝1，2，3；R₁为：氢，氯，溴，硝基，甲基，乙基，丙基，异丙基；R₂和R₃同为或分别为：氢，卤素，羟基，C1～C4的烷氧基。本发明还公开了上述化合物的制备方法，并同时公开了以该类化合物作为活性有效成分的药物组合物，以及其在制备抗肿瘤药物方面的应用。

Description

含呋喃亚胺类化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，更确切地说，是涉及一类具有抗肿瘤的化合物及其制备方法、含有它们的药物组合物和作为抗肿瘤药物的用途。 

背景技术

恶性肿瘤是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。癌症与心脑血管疾病和意外事故一起，构成当今世界所有国家三大死亡原因。因此，世界卫生组织（WHO）和各国政府卫生部门都把攻克癌症作为一项首要任务、据统计，世界上每年罹患癌症的人有900万，死于癌症的患者为600万，几乎每秒钟就有一名癌症患者死亡。我国癌症年发病人数在120万左右，死于癌症的人数高达90万以上，待治疗的患者超过150万，并有逐年上升的趋势。因此癌症现在已成为仅次于心血管疾病的第二大杀手。临床上治疗肿瘤，一般采用手术、放疗、化疗三大疗法。化疗方法虽较为快捷，但治愈率很低。同事临床发现许多抗癌药物存在明显的对正常机体的损伤和毒副作用，例如致突发和遗传毒性。因此，寻找有效且具有较小机体损伤和毒副作用的抗癌药物已成为新药研究的热点。 

发明内容

本发明的一个目的在于，公开一类新型含呋喃亚胺类结构的化合物。 

本发明的另一个目的在于，公开一类含呋喃亚胺类结构的化合物的制备方法。 

本发明的再一个目的在于，公开以一类含呋喃亚胺类结构的化合物为主要活性成分的药物的应用，特别是在用于制备治疗肝癌、肺癌、胃癌药物方面的用途。 

现结合本发明的目的，对本发明内容进行详细阐述。 

本发明具体涉及具有式Ⅰ结构的化合物： 

其中： 

n=1,2,3； 

R₁为：氢，氯，溴，硝基，甲基，乙基，丙基，异丙基； 

R₂和R₃同为或分别为：氢，卤素，羟基，C1～C4的烷氧基。 

更优选以下化合物： 

式Ⅰ化合物的制备路线如下： 

其中n、R₁、R₂、R₃如权利要求1所述。 

化合物Ⅱ与化合物Ⅲ在三乙胺或冰醋酸存在下，以甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷或甲苯为溶剂，0～120℃反应制的化合物Ⅳ；化合物Ⅳ与化合物Ⅴ在1-羟基苯并三唑（HOBt）、N,N’-二环己基碳二亚胺及4-二甲氨基吡啶的存在下，以二氯甲烷、三氯甲烷为溶剂，10～65℃反应制得化合物Ⅰ。 

化合物Ⅱ的制备可参考-盐酸阿齐利特的合成(张翌，任戎，刘登科,等,中国药物化学杂志,2006,16(4):226-228,232)中5-对氯苯基-2-糠醛的制备方法方便制得。 

表1不同R1对应的化合物Ⅱ 

此类化合物对于治疗人类恶性肿瘤是有效的。尽管本发明的化合物可以不经任何配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道途径（如静脉、肌肉给药）及口服给药。 

本发明化合物的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮剂，例如注射剂、粉剂等等。 

药物组合物以及单元剂型中含有的活性成为（本发明化合物）的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节，通常，活性化合物的量分为为组合物的0.5%～90%（重量）。另一优选的范围为0.5%～70%。 

本发明的具有式Ⅰ结构的化合物，在体外对肿瘤有明显的抑制作用。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，实施例仅为解释性的，绝不意味着它可以以任何方式限制本发明的范围。所述的化合物经高效液相色谱（HPLC），薄层色谱（TLC）进行检测。随后可以采用诸如红外光谱（IR），核磁共振谱（¹H NMR，¹³C NMR），质谱（MS）等更进一步确证其结构。 

实施例1：

中间体Ⅳ-1的制备 

在500ml反应瓶中加入化合物Ⅲ（10g，72.9mmol）用100ml无水乙醇将其溶解，加入三乙胺2ml，冰浴搅拌下滴加化合物Ⅱ-1（12.5g，72.6mmol）的乙醇溶液。滴毕，于室温20℃下继续反应5h（板层显示反应完全）。过滤，得到黄色固体，将得到的黄色固体加入60ml无水乙醇，加热回流，待全部溶解，加入活性炭3g，继续回流1h，趁热过滤，冷却，得到白色晶体10.3g（HPLC：98.5%）。 

实施例2：

中间体Ⅳ-2的制备 

在500ml反应瓶中加入化合物Ⅲ（10g，72.9mmol）用120ml无水乙醇将其溶解，加入冰乙酸2ml，冰浴搅拌下滴加化合物Ⅱ-2（15.8g，72.9mmol）的甲醇溶液。滴毕，于室温40℃下继续反应2h（板层显示反应完全）。过滤，得到黄色油状物，将得到的黄色油状物加入50ml无水乙醇，加热回流，待全部溶解，加入活性炭3g，继续回流1h，趁热过滤，冷却，得到白色晶体13.9g（HPLC：98.9%）。 

实施例3：

中间体Ⅳ-3的制备 

在500ml反应瓶中加入化合物Ⅲ（10g，72.9mmol）用100ml二氯甲烷将其溶解，加入三乙胺（3.7g，36.4mmol），冰浴搅拌下滴加化合物Ⅱ-3（15.1g，72.9mmol）的二氯甲烷溶液。滴毕，于室温下继续反应2.5h（板层显示反应完全）。用3╳80ml水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，无水硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，得棕色油状物，用快速制备色谱过柱子得到浅黄色固体10.2g（HPLC：98.3%）。 

实施例4：

中间体Ⅳ-4的制备 

在500ml反应瓶中加入化合物Ⅲ（10g，72.9mmol）用100ml甲苯将其溶解，加入冰乙酸2ml，冰浴搅拌下滴加化合物Ⅱ-4（13.6g，72.6mmol）的甲苯溶液。滴毕，于室温下继续反应2h，用分水器分水直至反应结束（板层显示反应完全）。减压蒸干，得黑色油状物，将得到的黑色油状物用快速制备色谱过柱子分离，得到黄色固体9.2g（HPLC：97.5%）。 

实施例5：

中间体Ⅳ-5的制备 

在500ml反应瓶中加入化合物Ⅲ（10g，72.9mmol）用100ml无水乙醇将其溶解，加入醋酸2ml，冰浴搅拌下滴加化合物Ⅱ-5（15.6g，72.9mmol）的乙醇溶液。滴毕，于室温20℃下继续反应3h（板层显示反应完全）。过滤，得到棕色固体，将得到的棕色固体加入50ml无水乙醇，加热回流，待全部溶解，加入活性炭3g，继续回流1h，趁热过滤，冷却，得到白色晶体12.5g（HPLC：99.0%）。 

实施例6：

中间体Ⅳ-6的制备 

在500ml反应瓶中加入化合物Ⅲ（10g，72.9mmol）用100ml无水甲醇将其溶解，加入三乙胺2ml，冰浴搅拌下滴加化合物Ⅱ-6（15.6g，72.9mmol）的乙醇溶液。滴毕，40℃下继续反应2h（板层显示反应完全）。过滤，得到棕黑色固体，将得到的棕黑色固体加入50ml无水乙醇，加热回流，待全部溶解，加入活性炭3g，继续回流1h，趁热过滤，冷却，得到黄色晶体11.0g（HPLC：99.2%）。 

实施例7：

化合物Ⅰ-1 

将中间体Ⅳ-1（5g，17.2mmol）置于250ml反应瓶中，加入二氯甲烷80ml，搅拌使其溶解，分批加入化合物Ⅴ-1（2.3g，18mmol），再加入DMAP（2.1g，17mmol）和HOBt（4.7g，35mmol），室温搅拌0.5h，分批加入DCC（5.3g，26.1mmol），反应16h，TLC检测反应完全。蒸干溶剂，用乙酸乙酯溶解残留固体，过滤除去副产物DCU（1,3-二环己基脲），滤液分别用饱和碳酸钠溶液和食盐水溶液洗涤，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸尽溶剂，得到浅黄色油状物。将油状物用石油醚：乙酸乙酯=4:1的溶剂50ml，重结晶，得到白色固体4.8g（HPLC:99.1%）。 

参照实施例7的方法，即可得到目标化合物Ⅰ-2～Ⅰ-9。 

表2目标化合物Ⅰ-2～Ⅰ-9 

为了更充分地说明本发明的呋喃亚胺类化合物的药物组成物，下面提供下列制剂实施例，所述实施例仅用于说明，而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可以使用本发明化合物中的任何活性化合物。 

实施例8：

用下述成分制备硬明胶胶囊： 

制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。按处方量将上述成分混合后，填充入硬明胶胶囊中。 

实施例9：

用下述成分制备片剂： 

制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。先将处方量的辅料充分混匀。将原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混匀2-3次，保证药与辅料充分混匀，过20目筛，在55℃通风烘箱中干燥2h，干颗粒过16目筛整粒，测定中间体含量，混合均匀，在压片机上压片。 

实施例10：

注射液的制备： 

制备方法：取活性成分加入到已溶解的聚山梨酯和丙二醇的注射用水中，加入药用碱调节pH值至4～8使其溶解。加入活性炭，搅拌吸附30min，除炭、精滤、灌封、灭菌。 

实施例11：

注射用冻干粉的制备： 

化合物Ⅰ-5  100mg 

药用碱      0.1-7.0% 

甘露醇      55-85% 

制备方法：取活性成分加入注射用水，用药用碱调节pH值至4-8使其溶解。再加入甘露醇，按注射剂的要求进行高压灭菌，加入活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，封口既得。 

实施例12：

体外的抗肿瘤作用 

（1）实验方法： 

采用经典的细胞毒活性体外检测法MTT法，检测发明化合物对体外培养的人肿瘤细胞的细胞增殖毒性。 

（2）实验材料： 

试验样品：式Ⅰ化合物由发明人自制提供。实验时样品以DMSO助溶，无血清DMEM培养基稀释到所需浓度，部分样品溶液呈悬浮状。 

主要试剂：MTT，美国Sigma公司；完全DMEM培养基，美国JRH Biosciences公司；小牛血清，兰州民海生物；胰蛋白酶，Amresco公司分装；氟尿嘧啶注射液，0.25g/10ml（支），天津金耀氨基酸有限公司。 

实验仪器：超净工作台，苏州净化设备厂；CO₂培箱，Thermo公司，型号：HERA Cell150；倒置显微镜，Carl Zeiss公司，型号：Axiovert200；酶联免疫检测仪，TECAN公司，型号：Sunrise；离心机，Kerdro公司，型号：Heraeus。 

细胞株：SPCA1人肺腺癌细胞株。SGC-7901人胃癌细胞购自中国科学院上海细胞研究所；SMMC-7721人肝癌细胞购自American Type Culture Collection。 

（3）实验步骤： 

细胞株培养：肿瘤细胞接种在含10%小牛血清，100IU/ml青霉素G钠盐及100μg/mL硫酸链霉素的DMEM培养液中，置于37℃，100%相对湿度、含5%CO₂的培养箱中，传代3次后备用。 

MTT法测定：取对数生长期的细胞，经0.25%胰蛋白酶消化后（悬浮细胞无需消化），悬浮于含10%小牛血清的DMEM培养液中，用玻璃滴管轻轻吹打成单细胞悬液，显微镜下用血细胞计数板计数活细胞。96孔培养板每孔接种细胞悬液90μL（细胞浓度调整为6～10╳10⁴个/mL），在37℃，100%相对湿度、含5%CO₂、95%空气的培养箱培养24小时后，每孔加10μL药液（终浓度设为：40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL和2.5μg/mL五个浓度）。另外，每个浓度设阴性对照（等浓度DMSO）及空白本底（不加细胞），各组均设6个复孔。再连续培养24小时，然后每孔加入5mg/mL的MTT溶液10μL，继续培养4h后，仔细吸去上清液（悬浮细胞，无需离心，再吸去上清）。每孔加入100μL DMSO，置于微量振荡器震荡5min以使结晶完全溶解，酶标仪492nm单波长比色、测定OD值。以下述方法计算细胞生长抑制率作为评价指标。 

抑制率（%）=[1-（实验组OD均值-空白组OD均值）/（对照组OD均值-空白组OD均值）]╳100%。根据细胞生长抑制率，以直线回归方法计算IC₅₀值。 

（4）实验结果： 

表3对体外培养的肿瘤细胞的IC₅₀值（μg/mL） 

（5）结论： 

根据上述体外试验结果，我们可以看出具有式Ⅰ结构的化合物对上述3种人类肿瘤细胞具有较强的抑制作用。 

Claims (6)

1.具有通式Ⅰ结构的化合物： 

其中： 

n=1,2,3； 

R₁为：氢，氯，溴，硝基，甲基，乙基，丙基，异丙基； 

R₂和R₃同为或分别为：氢，卤素，羟基，C1～C4的烷氧基。 

2.如权利要求1所述的通式Ⅰ化合物，选自： 

3.如权利要求1所述的式Ⅰ化合物的制备方法，其特征在于：化合物Ⅱ与化合物Ⅲ在0～120℃反应制的化合物Ⅳ；化合物Ⅳ与化合物Ⅴ在1-羟基苯并三唑、N,N’-二环己基碳二亚胺及4-二甲氨基吡啶的存在下，以二氯甲烷、三氯甲烷为溶剂，10～65℃反应制得化合物Ⅰ； 

其中n、R₁、R₂、R₃的定义如权利要求1所述。 

4.一种药物组合物，它包含治疗有效量的如权利要求1～2任一项所述的式Ⅰ化合物及一种或多种药用载体。 

5.如权利要求1～2任一项所述的式Ⅰ化合物在用于制备抗肿瘤药物方面的应用。 

6.如权利要求5所述的应用，在用于制备治疗肝癌、肺癌、胃癌药物方面的用途。