CN103704173A - 一种内啮齿动物分散贮存食物行为的测定方法 - Google Patents

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杨慧娣
杨铮
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Abstract

本发明公开了一种内啮齿动物分散贮存食物行为的测定方法,将分散贮食行为分为贮存食物行为阶段和记忆食物贮存的位置及取回贮存食物的阶段。用贮存食物的重量来准确衡量贮存食物行为,用动物进入贮存食物的臂的正确次数和时间来衡量记忆在分散贮食行为时所起的作用及准确找回食物时所起到的的作用。

Description

一种内啮齿动物分散贮存食物行为的测定方法
技术领域
本发明属于动物行为学领域和认知科学领域,结合了贮食行为和记忆行为的测定。
背景技术
贮存食物行为对动物的生存和繁殖非常重要。分散贮食行为是动物贮存食物行为的一种,分散贮存食物行为的研究为空间记忆的神经机制和认知的研究及动物导航机制的研究提供有价值的证据。分散贮食行为包括动物贮存食物,记忆食物贮存的位置和准确找回食物三个过程。目前研究分散贮食行为均在野外完成。由于分散贮食行为涉及的过程复杂,目前还没有可行的方法在室内测定动物分散贮食行为。
发明内容
本发明目的在于将动物贮存食物,记忆食物贮存的位置(用30分钟内动物正确进入贮存位置的次数和时间来量化.)和准确找回食物(用记忆分数衡量)这三个阶段准确的分开,并且准确量化这三个过程。本方法可以在室内研究分散贮食行为。研究这种以记忆为基础的行为的调节机制可以将生态,心理,生理和神经生物学整合在一起。其中对于定性分析:贮食重量,准确进入贮存位点的次数,时间和记忆分数,这些数据的组间的差异用t-test检测,组内差异用重复测量[variance(ANOVA)with repeated measures]来统计。
本发明的整体构思是:将分散贮食行为分为贮存食物行为阶段和记忆食物贮存的位置及取回贮存食物的阶段。用贮存食物的重量来准确衡量贮存食物行为,用动物进入贮存食物的臂的正确次数和时间来衡量记忆在分散贮食行为时所起的作用及准确找回食物时所起到的的作用。
实验结果稳定,重复性强。
本发明分散贮存食物行为的测定方法具体包括:测定行为时房间的灯全部关闭,仅有八臂迷宫里的灯开着。测定贮食行为前动物禁食6小时后测定30分钟的贮食行为,当动物将食物从圆形平台携带到某个壁里时定义贮食行为发生。贮食行为用八臂迷宫里的食物的重量来衡量,这可以用来确定贮食行为的大小或者说贮食的强度。。
将八臂迷宫的八个臂用阿拉伯数字1-8标记。测定分散贮食行为时动物分成自由组和固定组。自由组:动物放到迷宫时八个臂均打开,动物可以选择任何一个臂贮存食物。固定组:动物放到迷宫时八个壁均关闭,第一个臂被打开,动物只能将食物贮存在特定的臂里,7.5分钟后关闭并开启第二个臂,7.5分钟后关闭并开启第三个臂,最后依此程序共开启4个臂。臂开启的顺序和编号由随机数产生。
记忆食物贮存的位置和取回贮存食物的测定:贮存食物结束后,将动物拿出放到一个笼子里(30cm长Х20cm宽Х15cm高),并用酒精清理迷宫(消除动物留下的气味,避免动物用气味定位)。1分钟,5分钟,1小时和24小时后再次将动物放入八臂迷宫(圆形平台的食物拿出),打开所有的臂测定30分钟。记录动物进入臂的顺序,次数和时间,统计进入正确臂(指贮存食物的臂)的总时间和次数(次数/分钟),及记忆分数(而用来衡量取回食物的行为)。用进入正确臂的总时间和次数衡量动物记忆食物贮存的位置。进入正确臂的总时间,次数和记忆分数的组间差异采用t-test检测,组内差异用重复测量[variance(ANOVA)with repeated measures]来统计。记忆分数计算方式如下:记忆分数=(最大记忆分数-实际测得的分数)/(最大记忆分数-最佳记忆分数)。例如,动物到达八个臂的顺序标记为1-8,重复到达的臂忽略不计。假如,有四个臂里有食物,动物到达这4个臂的实际顺序为第1,第3,第4和第6。实际测得的分数=(1+3+4+6)/4=3.50,最佳记忆是指花鼠到达这4个臂的顺序为第1,第2,第3和第4。最佳的记忆分数=(1+2+3+4)/4=2.50。最大记忆分数指动物到达所有臂的顺序为第1至第8,最大记忆分数=(1+2+3+4+5+6+7+8)/8=4.5。
附图说明
图1显示了固定组和自由组贮存食物重量的比较(X±SE)。
图2显示了固定组和自由组准确进入贮存食物位置的总次数的比较(X±SE)。
图3显示了固定组和自由组准确进入贮存食物位置的总时间的比较(X±SE)。
图4显示了固定组和自由组记忆分数的比较。
具体实施方式
下面结合具体实例对本发明进行进一步描述。
实施例1:花鼠(Tamias sibiricus senescens)分散贮食行为的研究
实验方法:16只雄性花鼠分为自由组(n=8)和固定组(n=8)两组,动物禁食6小时后,将其放入八臂迷宫的圆盘中测定30分钟的贮食行为,当动物将食物从圆形平台携带到某个壁里时定义贮食行为发生。将八臂迷宫的八个臂用阿拉伯数字1-8标记。自由组:动物放到迷宫时八个臂均打开,动物可以选择任何一个臂贮存食物。固定组:动物放到迷宫时八个壁均关闭,第一个臂被打开,动物只能将食物贮存在特定的臂里,7.5分钟后关闭并开启第二个臂,7.5分钟后关闭并开启第三个臂,最后依次程序共开启4个臂。臂开启的顺序和编号由随机数产生。30分钟测试结束后,称量贮食的重量。
记忆食物贮存的位置和取回贮存食物的测定:贮存食物结束后,将动物拿出放到一个30cm长Х20cm宽Х15cm高的笼子里,并用酒精清理迷宫(消除动物留下的气味,避免动物用气味定位)。1分钟,5分钟,1小时和24小时后再次将动物放入八臂迷宫(圆形平台的食物拿出),打开所有的臂测定30分钟。记录动物进入臂的顺序,次数和时间。
实验结果请参见附图。其中:
附图1注:第1天(t(14)=4.289,P<0.01),第2天(t(14)=4.833,P<0.01),第3天(t(14)=2.220,P<0.05)固定组的贮食量明显高于自由组,但是第4天后没有差异。重复测量结果1-4天(F(1,10)=14.260,P<0.01)两组的贮食量显著增加。*表示固定组和自由组比较有显著差异,**表示固定组和自由组比较有极显著差异。
附图2注:30分钟的记忆食物贮存的位置和取回贮存食物的测定:第1天(t(14)=2.189,P<0.01),第2天(t(14)=3.183,P<0.05),第3天(t(14)=2.170,P<0.05)固定组的进臂正确次数明显高于自由组,但是第4天后没有差异。重复测量结果1-4天(F(1,10)=16.130,P<0.01)两组的进臂正确次数显著增加。*表示固定组和自由组比较有显著差异,**表示固定组和自由组比较有极显著差异。
附图3注:30分钟的记忆食物贮存的位置和取回贮存食物的测定:第1天(t(14)=3.179,P<0.05),第2天(t(14)=4.633,P<0.05),第3天(t(14)=2.760,P<0.05)固定组的进正确臂的总时间明显高于自由组,但是第4天后没有差异。重复测量结果两组的贮食量显著增加(F(1,144)=16.160,P<0.01)。*表示固定组和自由组比较有显著差异。
附图4注:记忆分数=(最大记忆分数-实际测得的分数)/(最大记忆分数-最佳记忆分数)。例如,花鼠到达八个臂的顺序标记为1-8,重复到达的臂忽略不计。假如,有四个臂里有食物,花鼠到达这4个臂的实际顺序为第1,第3,第4和第6。实际测得的分数=(1+3+4+6)/4=3.50,最佳记忆是指花鼠到达这4个臂的顺序为第1,第2,第3和第4。最佳的记忆分数=(1+2+3+4)/4=2.50。最大记忆分数指花鼠到达所有臂的顺序为第1至第8,最大记忆分数=(1+2+3+4+5+6+7+8)/8=4.5。重复测量结果两组的记忆分数显著增加(F(1,144)=9.87,P<0.01)。第1天(t(14)=3.261,P<0.01),第2天(t(14)=1.753,P<0.01),第3天(t(14)=1.920,P<0.01),第4天(t(14)=5.361,P<0.01)固定组的记忆分数明显高于自由组。**表示固定组和自由组比较有极显著差异。
实验结论:花鼠能快速地从八臂迷宫的圆盘中隐藏食物到不同的臂中。他们也能快速地回到他们隐藏食物的臂中,并取回这些食物。10次实验中,固定组和自由组的动物均偏好回到藏有食物的臂中,1-3天固定组进入贮存食物的臂的时间和次数高于自由组,表明固定组的记忆复杂程度低于自由组,4-10天花鼠适应了实验程序,所以没有差异。1-10天记忆分数的快速上升暗示花鼠使用空间记忆去寻找隐藏的食物。

Claims (2)

1.一种内啮齿动物分散贮存食物行为的测定方法,包括对动物贮存食物,记忆食物贮存的位置和准确找回食物三个过程的测定。
2.根据权利要求1的测定方法,具体包括:使用八臂迷宫进行测定,并且环境光源关闭,仅八臂迷宫内光源开启,测定贮食行为前动物禁食6小时后测定30分钟的贮食行为,当动物将食物从圆形平台携带到某个臂里时定义贮食行为发生,贮食行为用八臂迷宫里的食物的重量来衡量,将八臂迷宫的八个臂事先进行标记;
1)分散贮食行为的测定:时动物分成自由组和固定组;自由组:动物放到迷宫时八个臂均打开,动物可以选择任何一个臂贮存食物;固定组:动物放到迷宫时八个壁均关闭,第一个臂被打开,动物只能将食物贮存在特定的臂里,7.5分钟后关闭并开启第二个臂,7.5分钟后关闭并开启第三个臂,最后依此程序共开启4个臂,臂开启的顺序和编号由随机数产生。
2)记忆食物贮存的位置和取回贮存食物的测定:贮存食物结束后,将动物拿出放到一个笼子里,并用酒精清理迷宫;1分钟,5分钟,1小时和24小时后再次将动物放入八臂迷宫,此时圆形平台的食物已拿出,打开所有的臂测定30分钟,记录动物进入臂的顺序,次数和时间,并计算记忆分数。
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