CN103694059B - 一种杀虫抗病生物有机肥及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种杀虫抗病生物有机肥及其制备方法，包括下述重量比的原料：桉树叶13-23.5、烟草茎杆20-25、万寿菊茎杆20-25、苦参茎杆15-18、羊毛土17-22.5、混合菌种1-2及碳酸钾1.5-2.5。制备步骤为：⑴按重量比取桉树叶、烟草茎杆、万寿菊茎杆、苦参茎杆、羊毛土分别破碎均匀后备用； (2)制备混合菌种；(3)按重量比取混合菌种，喷至混合物上搅拌均匀，进行有氧发酵，按重量比取碳酸钾对发酵的混合物调PH值，得到有机肥基料；(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎，筛分后包装即为杀虫抗病有机肥。本发明作为有机肥，在满足促进植物健壮生长的同时对植物的杀虫抗病能力有较大提高。
Description
技术领域
本发明涉及肥料，是一种杀虫抗病生物有机肥及其制备方法。
背景技术
目前，农作物的肥料主要是氮、磷、钾肥，由于这种肥料只满足于促进植物及根系形成和生长健状、抗干旱、抗低温、含盐量等作用，对农作物的虫害的防治作用极低，因此作物在生长期需要喷洒大量农药，导致农作物特别是蔬菜水果的杀虫剂用量较大，药物残留较重，对于长期食用高农药残留食物的人群来说，患病的风险极大。为此，近几年本领域技术人员试图研究用有机物制做肥料，用以使农作物抗病害，减少虫害的发生，并同时对作物生长有促进作用。但是，已公开的肥料在抗虫害方面的作用甚少，特别是酸性土壤对农作物的多种虫害的抗病能力更是较低等。
发明内容
本发明的目的是，提供一种杀虫抗病生物有机肥及其制备方法，它作为有机肥，在满足促进植物健壮生长的同时，对植物的杀虫抗病能力有较大提高。
本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：一种杀虫抗病生物有机肥，包括下述重量比的原料：桉树叶13-23.5、烟草茎杆20-25、万寿菊茎杆20-25、苦参茎杆15-18、羊毛土17-22.5、混合菌种1-2及碳酸钾1.5-2.5。
所述的一种杀虫抗病生物有机肥，包括下述重量比的原料：桉树叶15、烟草茎杆21、万寿菊茎杆22、苦参茎杆18、羊毛土22、混合菌种1及碳酸钾2。
所述的一种杀虫抗病生物有机肥，包括下述重量比的原料：桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17、混合菌种2及碳酸钾2.5。
所述混合菌种为放线菌、光合细菌及酵母菌组成，按单位体积内菌种相同的菌种体积份计为：放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份。
所述混合菌种的制备方法为：
（1）制备放线菌：
（1.1）制备放线菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（1.2）制备放线菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度28℃、湿度45%的条件下，培养60h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2）制备光合细菌：
（2.1）制备光合细菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2）制备光合细菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度28-36℃，光照强度：3500LX ，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度30℃，光照强度3500LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（3）制备酵母菌：
（3.1）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（3.2）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度25℃，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为25℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
所述的一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶13-23.5、烟草茎杆20-25、万寿菊茎杆20-25、苦参茎杆15-18、羊毛土17-22.5破碎后备用；
⑵制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：斜面培养基原料为：麸皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg、硝酸钾0.8-1.2 kg、氯化钠 30-70g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁30-70g、硫酸铁10-15g、琼脂15-25kg及水800-1200L，调pH值7.2-7.4；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：液体培养基的原料为：麸皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2 kg、蛋白胨30-70kg和硝酸钾0.8-1.2 kg、氯化钠30-70g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁30-70g、硫酸铁 10-15g、琼脂1.5-3.5kg及水800-1200L，调pH值7.2-7.4；
对放线菌进行活化培养；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：斜面培养基的原料为：蛋白胨50-60g、醋酸钠1.1-1.2kg、碳酸钠500-700g、硫代硫酸钠 300-500g、氯化钠200-500g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁50-200g、琼脂15-25kg及水800-1200L，调pH值8-8.5；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：蛋白胨50-60g、醋酸钠 1.1-1.2kg、碳酸钠500-700g、硫代硫酸钠300-500g、氯化钠200-500g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁50-200g、琼脂1.5-3.5kg及水800-1200L，调pH值8-8.5；
对光合细菌进行活化培养；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度28-36℃，光照强度3000-4000LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：斜面培养基的原料为：蔗糖50-200g、硝酸钾80-120g、氯化钠300-700g、磷酸氢二钾300-700g、硫酸镁300-700g、硫酸铁5-12g、琼脂15-25kg、水800-1200L，调节pH值4.5-5.5；
（2.3.2）制备酵母菌液体培养基；液体培养基的原料为：蔗糖50-200g、硝酸钾80-120g、氯化钠300-700g、硫酸氢二钾300-700g、硫酸镁300-700g、硫酸铁5-12g、琼脂1.5-3.5kg、水800-1200L，调节pH值4.5-5.5；
对酵母菌进行活化培养：从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为20-30℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
所述的一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17分别破碎均匀后备用；
(2)制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾 1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度28℃、湿度45%的条件下，培养60h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠 1.15kg、碳酸钠 600g、硫代硫酸钠 400g、氯化钠 350g、磷酸氢二钾 50g及硫酸镁 125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠 1.15kg、碳酸钠 600g、硫代硫酸钠 400g、氯化钠 350g、磷酸氢二钾 50g及硫酸镁 125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度28-36℃，光照强度：3500LX ，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度30℃，光照强度3500LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.3.2）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾 100 g、、氯化钠 500g、磷酸氢二钾 500g、硫酸镁 500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度25℃，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为25℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
本发明生物有机肥中的桉树叶中含有香茅醛，蒎烯，1，8-桉油素；烟草茎秆中含有烟碱；万寿菊中含有蒎烯，三联噻吩，万寿菊酮；苦参茎杆中含有苦参碱，槐果碱，氧化苦参碱，氧化槐果碱，槐定碱，这些物质组合后具有协同作用，具有极强的杀虫杀菌活性，特别是经过有氧发酵后其营养物质极易被植物吸收，产生了极强的杀虫抗病能力，并对植物的根系及茎叶生长有较好的促进作用。本发明用天然植物的废弃物为原料，采用特制后的混合菌种发酵制取的有机肥，解决了现有有机肥功效单一、抗虫害效果低的不足，提高了杀虫抗病效果，特别是特制的混合菌种只降解有机质，不破坏生物碱。本发明的生物有机肥特别适用于酸性土壤，对于酸性土壤的改良具有极好的效果，同时，能有效抑杀多种害虫及病原菌，对土壤、环境及农作物没有任何污染，是一种纯绿色杀虫抗病有机肥。
本发明有机肥在云南，江西两地在三七，玛卡，百合，马铃薯作物上进行了两年实验，实验结果得出：每亩用80公斤本发明有机肥作为基肥，按照条沟施基肥（与25公分土均匀混合）后，定植进行常规管理。两年实验发现：地表下一尺没有常见的地下害虫（蛴螬，金针虫，蝼蛄，地老虎，根蛆，根结线虫），在防治地下害虫上效果显著；在地上同样也没有发现害虫对植株的危害，在实验期间，农民没有用过任何化学农药杀虫剂，真正实现了绿色农产品的生产。
具体实施方式
本发明的一种杀虫抗病生物有机肥，由下述重量比的原料组成：桉树叶13-23.5、烟草茎杆20-25、万寿菊茎杆20-25、苦参茎杆15-18、羊毛土17-22.5、混合菌种1-2及碳酸钾1.5-2.5。
上述重量比的原料可有下述多种组合：
1、桉树叶15、烟草茎杆21、万寿菊茎杆22、苦参茎杆18、羊毛土22、混合菌种1及碳酸钾2。
2、桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17、混合菌种2及碳酸钾2.5。
3、桉树叶13、烟草茎杆25、万寿菊茎杆25、苦参茎杆17、羊毛土17.5、混合菌种1及碳酸钾1.5。
4、桉树叶16、烟草茎杆20、万寿菊茎杆22、苦参茎杆17、羊毛土22、混合菌种1及碳酸钾2。
5、桉树叶19、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15.5、羊毛土22.5、混合菌种1.2及碳酸钾1.8。
6、桉树叶17、烟草茎杆23、万寿菊茎杆23、苦参茎杆17、羊毛土17、混合菌种1及碳酸钾2.3。
本发明所述混合菌种为放线菌、光合细菌及酵母菌组成，按单位体积内菌种相同的菌种体积份计为：放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份。
本发明所述混合菌种的制备方法为：
（1）制备放线菌：
（1.1）制备放线菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（1.2）制备放线菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度28℃、湿度45%的条件下，培养60h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2）制备光合细菌：
（2.1）制备光合细菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2）制备光合细菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度28-36℃，光照强度：3500LX ，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度30℃，光照强度3500LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（3）制备酵母菌：
（3.1）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁 500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（3.2）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾 100g、氯化钠 500g、磷酸氢二钾 500g、硫酸镁 500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度25℃，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为25℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
本发明所述的一种杀虫抗病有机肥的制备方法，步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶13-23.5、烟草茎杆20-25、万寿菊茎杆20-25、苦参茎杆15-18、羊毛土17-22.5破碎后备用；
⑵制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：斜面培养基原料为：麸皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg、硝酸钾0.8-1.2 kg、氯化钠30-70g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁30-70g、硫酸铁10-15g、琼脂15-25kg及水800-1200L，调pH值7.2-7.4；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：液体培养基的原料为：麸皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg和硝酸钾0.8-1.2 kg、氯化钠30-70g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁30-70g、硫酸铁 10-15g、琼脂1.5-3.5kg及水800-1200L，调pH值7.2-7.4；
对放线菌进行活化培养；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：斜面培养基的原料为：蛋白胨50-60g、醋酸钠1.1-1.2kg、碳酸钠500-700g、硫代硫酸钠300-500g、氯化钠200-500g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁50-200g、琼脂15-25kg及水800-1200L，调pH值8-8.5；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：蛋白胨50-60g、醋酸钠 1.1-1.2kg、碳酸钠500-700g、硫代硫酸钠300-500g、氯化钠200-500g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁50-200g、琼脂1.5-3.5kg及水800-1200L，调pH值8-8.5；
对光合细菌进行活化培养；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度28-36℃，光照强度3000-4000LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：斜面培养基的原料为：蔗糖50-200g、硝酸钾80-120g、氯化钠300-700g、磷酸氢二钾300-700g、硫酸镁300-700g、硫酸铁5-12g、琼脂15-25kg、水800-1200L，调节pH值4.5-5.5；
（2.3.2）制备酵母菌液体培养基；液体培养基的原料为：蔗糖50-200g、硝酸钾80-120g、氯化钠300-700g、硫酸氢二钾300-700g、硫酸镁300-700g、硫酸铁5-12g、琼脂1.5-3.5kg、水800-1200L，调节pH值4.5-5.5；
对酵母菌进行活化培养：从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为20-30℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
实施例1，一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17分别破碎均匀后备用；
(2)制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度28℃、湿度45%的条件下，培养60h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠 1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度30℃，光照强度：3500LX ，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度30℃，光照强度3500LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.3.2）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度25℃，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为25℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
上述制备方法为本发明优选方案，其杀虫抗病效果显著。
实施例2，一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17分别破碎均匀后备用；
(2)制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：取200L水置入容器内，加热至55℃，将原料麸皮0.88kg、豌豆浸汁0.8kg、蛋白胨30kg、硝酸钾 0.8 kg、氯化钠30g、磷酸氢二钾30g、硫化镁30g及硫酸铁10g，置入55℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取15kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入600L的水，调pH值7.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：取200L水置入容器内，加热至55℃，将原料麸皮0.8kg、豌豆浸汁0.8kg、蛋白胨30kg、硝酸钾0.8kg、氯化钠30g、磷酸氢二钾30g、硫化镁30g及硫酸铁10g，置入55℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取1.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入600L的水，调pH值7.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度28℃、湿度40%的条件下，培养50h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：取200L水置入容器内，加热至55℃，将原料蛋白胨50g、醋酸钠1.1kg、碳酸钠500g、硫代硫酸钠300g、氯化钠200g、磷酸氢二钾30g及硫酸镁50g，置入55℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取15kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：取200L水置入容器内，加热至55℃，将原料蛋白胨50g、醋酸钠1.1kg、碳酸钠500g、硫代硫酸钠300g、氯化钠200g、磷酸氢二钾30g及硫酸镁50g，置入55℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取1.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度28℃，光照强度：3000LX ，湿度40%的条件下，培养30h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度28℃，光照强度3000LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：取200L水置入容器内，加热至55℃，将原料蔗糖50g、硝酸钾80g、氯化钠300g、磷酸氢二钾300g、硫酸镁300g及硫酸铁5g，置入55℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取15kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入600L的水，调pH值4.5；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.3.2）制备酵母菌斜面培养基：取200L水置入容器内，加热至55℃，将原料蔗糖50g、硝酸钾80g、氯化钠300g、磷酸氢二钾300g、硫酸镁300g及硫酸铁5g，置入55℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取1.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入600L的水，调pH值4.5；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度20℃，湿度40%的条件下，培养30h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为20℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
实施例3，一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17分别破碎均匀后备用；
(2)制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：取400L水置入容器内，加热至80℃，将原料麸皮1.2kg、豌豆浸汁1.2kg、蛋白胨70kg、硝酸钾 1.2 kg、氯化钠70g、磷酸氢二钾70g、硫化镁70g及硫酸铁15g，置入80℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取25kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入800L的水，调pH值7.4；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：取400L水置入容器内，加热至80℃，将原料麸皮1.2kg、豌豆浸汁1.2kg、蛋白胨70kg、硝酸钾1.2 kg、氯化钠70g、磷酸氢二钾70g、硫化镁70g及硫酸铁15g，置入80℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取3.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入800L的水，调pH值7.4；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度36℃、湿度50%的条件下，培养70h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：取400L水置入容器内，加热至80℃，将原料蛋白胨60g、醋酸钠1.2kg、碳酸钠700g、硫代硫酸钠500g、氯化钠500g、磷酸氢二钾70g及硫酸镁200g，置入80℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取25kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入800L的水，调pH值8.5；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：取400L水置入容器内，加热至80℃，将原料蛋白胨60g、醋酸钠1.2kg、碳酸钠700g、硫代硫酸钠500g、氯化钠500g、磷酸氢二钾70g及硫酸镁200g，置入80℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取3.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入800L的水，调pH值8.5；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度36℃，光照强度：4000LX ，湿度50%的条件下，培养50h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度36℃，光照强度4000LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：取400L水置入容器内，加热至80℃，将原料蔗糖200g、硝酸钾120g、氯化钠700g、磷酸氢二钾700g、硫酸镁700g及硫酸铁12g，置入80℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取25kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入800L的水，调pH55；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.3.2）制备酵母菌斜面培养基：取400L水置入容器内，加热至80℃，将原料蔗糖200g、硝酸钾120g、氯化钠700g、磷酸氢二钾700g、硫酸镁700g及硫酸铁12g，置入80℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取3.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入800L的水，调pH值55；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度30℃，湿度50%的条件下，培养50h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为30℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌。
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
本发明所述的羊毛土由河北日伊丰达绒毛加工有限公司生产。
Claims (2)
1.一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤如下：
⑴按重量比取桉树叶13-23.5、烟草茎杆20-25、万寿菊茎杆20-25、苦参茎杆15-18、羊毛土17-22.5破碎后备用；
⑵制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：斜面培养基原料为：麸皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg、硝酸钾0.8-1.2 kg、氯化钠30-70g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁30-70g、硫酸铁10-15g、琼脂15-25kg及水800-1200L，调pH值7.2-7.4；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：液体培养基的原料为：麸皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2 kg、蛋白胨30-70kg和硝酸钾0.8-1.2 kg、氯化钠30-70g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁30-70g、硫酸铁 10-15g、琼脂1.5-3.5kg及水800-1200L，调pH值7.2-7.4；
对放线菌进行活化培养；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：斜面培养基的原料为：蛋白胨50-60g、醋酸钠1.1-1.2kg、碳酸钠500-700g、硫代硫酸钠300-500g、氯化钠200-500g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁50-200g、琼脂15-25kg及水800-1200L，调pH值8-8.5；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：蛋白胨50-60g、醋酸钠1.1-1.2kg、碳酸钠500-700g、硫代硫酸钠300-500g、氯化钠200-500g、磷酸氢二钾30-70g、硫酸镁50-200g、琼脂1.5-3.5kg及水800-1200L，调pH值8-8.5；
对光合细菌进行活化培养；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度28-36℃，光照强度3000-4000LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：斜面培养基的原料为：蔗糖50-200g、硝酸钾80-120g、氯化钠300-700g、磷酸氢二钾300-700g、硫酸镁300-700g、硫酸铁5-12g、琼脂15-25kg、水800-1200L，调节pH值4.5-5.5；
（2.3.2）制备酵母菌液体培养基；液体培养基的原料为：蔗糖50-200g、硝酸钾80-120g、氯化钠300-700g、硫酸氢二钾300-700g、硫酸镁300-700g、硫酸铁5-12g、琼脂1.5-3.5kg、水800-1200L，调节pH值4.5-5.5；
对酵母菌进行活化培养：从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为20-30℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌；
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
2.根据权利要求1所述的一种杀虫抗病生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤如下：
（1）按重量比取桉树叶23.5、烟草茎杆20、万寿菊茎杆20、苦参茎杆15、羊毛土17分别破碎均匀后备用；
(2)制备混合菌种：
（2.1）制备放线菌：
（2.1.1）制备放线菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.1.2）制备放线菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料麸皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸钾1kg、氯化钠50g、磷酸氢二钾50g、硫化镁50g及硫酸铁12g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值7.3；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对放线菌进行活化培养：把放线菌菌种点种在斜面培养基的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线,在温度28℃、湿度45%的条件下，培养60h；从活化好的放线菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于放线菌液体培养基中，培养温度为28℃，培养5-14天，待菌落菌数为100亿/ml即为放线菌；
（2.2）制备光合细菌：
（2.2.1）制备光合细菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.2.2）制备光合细菌液体培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蛋白胨55g、醋酸钠1.15kg、碳酸钠600g、硫代硫酸钠400g、氯化钠350g、磷酸氢二钾50g及硫酸镁125g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值8.2；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对光合细菌进行活化培养：把光合细菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部稀波状蜿蜒划线，在温度28-36℃，光照强度：3500LX ，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的光合细菌斜面琼脂培养基中取接种量10%的菌种量接种于光合细菌液体培养基中，培养温度30℃，光照强度3500LX、培养4-7天，待斜面菌落菌数为100亿/ml即为光合细菌；
（2.3）制备酵母菌：
（2.3.1）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取20kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
（2.3.2）制备酵母菌斜面培养基：取300L水置入容器内，加热至65℃，将原料蔗糖125g、硝酸钾100 g、氯化钠500g、磷酸氢二钾500g、硫酸镁500g及硫酸铁8g，置入65℃热水内搅拌下溶解，继续加热至100℃溶解完全后得到溶解液，取2.5kg琼脂用热水融化后加入至溶解液中，搅拌均匀加入700L的水，调pH值5.0；50℃下将培养基置入密闭容器内，121.3℃下灭菌30分钟；
对酵母菌进行活化培养：把酵母菌菌种点种在斜面的中部，在斜面的中部自下而上划线，在温度25℃，湿度45%的条件下，培养40h；从活化好的酵母菌斜面培养基中取接种量10%的菌种量接种于酵母菌液体培养基中，培养温度为25℃，培养时间为5-10天，待菌落菌数为100亿/ml即为酵母菌；
（2.4）取放线菌40份、光合细菌40份及酵母菌20份混合均匀，即为混合菌种；
(3)按重量比取混合菌种1-2，喷至步骤(1)破碎后的混合物上，搅拌均匀，进行有氧发酵8-15天，按重量比取碳酸钾1.5-2.5对发酵的的混合物调pH值7-8，得到有机肥基料；
(4)将步骤(3)中有机肥基料进行干燥后粉碎至40-100目，筛分后包装，即为杀虫抗病有机肥。
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