CN103293301A - 人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,所述的试剂盒包括:待检测血清标识物的标准品;包被有标识物特异抗原系统的固相板;联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体;洗涤液;辣根过氧化酶底物的溶液;终止液。本发明试剂盒采用微孔板为固相载体,通过免疫反应将溃疡性结肠炎特异的血清标识物与固定到微孔板上的特异抗原系统结合,然后与特异识别标识物的免疫球蛋白-辣根过氧化物酶结合,在所联酶对底物的酶促反应下使底物呈现颜色改变来定量测定溃疡性结肠炎特异的血清标识物。本测定方法灵敏,准确,重复性好,反应快速,无同位素污染;所组成的试剂盒性能稳定,操作简便,适于临床推广应用。
Description
技术领域
本发明属于免疫分析领域诊断试剂盒技术领域,尤其是涉及一种人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒及其制备方法。通过鉴别、诊断获取抗体信息,研发针对靶点的生物大分子药物,并对患者开展个性化诊疗及用药。
背景技术
炎症性肠病(IBD)是一组病因尚不十分明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病,主要包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)两个相对独立的疾病。IBD在西方国家多见,亚洲国家的发病率和患病率低于西方,但近年来呈明显上升趋势。我国IBD发病率也逐年增高,其中UC最多,危重病例也逐渐增多。
该病的发病原因目前仍在研究之中。从病理学上看,炎症性肠病被认为是由于人体的免疫系统对一些胃肠道细菌的过度免疫反应所造成的自身免疫性损伤。临床上主要表现为不明原因的腹泻,以及发烧,腹痛,直肠出血等。随着病情的发展,有些病人还出现不同程度的肠道外症状(如肝脏方面的疾患,关节炎,皮肤和眼睛方面的症状)。炎症性肠病发生在各个人群的不同年龄段。在过去的几十年里,炎症性肠病在全球的发病率呈逐渐上升的趋势。据不完全的估计,目前在我国的发病总人数约在一百万左右,其中溃疡性结肠炎占得比率较高。临床上对炎症性肠病的治疗主要包括了手术和药物治疗。但炎症性肠病在治疗后常有反复,许多病人需要反复多次的手术治疗。除了疾病本身对病人造成痛苦以外,心理压力和经济负担也很大。
炎症性肠病的诊断和鉴别诊断对于治疗方案的决定至关重要。传统上对炎症性肠病的诊断和对克罗恩病与溃疡性结肠炎的鉴别诊断主要是依赖X光和内窥镜检查,并通过活检来确诊。实验室的检测仅限于一些非特异性方法,如C-反应蛋白的检测和对血细胞的计数。这些指标特异性差,诊断参考价值有限。正因为如此,临床上需要一个更为特异的简单和低价的体外检测手段。天津瑞华生物科技有限公司开发了一个全新的有自主知识产权的体外诊断炎症性肠病的方法。从原理上说这些标识物的存在和在血液中含量的升高提示了体内特异免疫反应的升高。而这些特异免疫反应的升高与炎症性肠病,包括克罗恩病与溃疡性结肠炎的发病和发展有密切的相关性。
临床研究报告表明炎症性肠病(IBD)患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)对IBD诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。通过对病患血清中ANCA抗体的监测,可以给临床医生提供免疫抑制治疗的参考依据,并通过抗体的有无以及抗体含量的高低,对病患进行与普通验证的区别和对确诊病例进行临床治疗的跟踪监测。
发明目的
本发明的目的是提供一种检测对炎症性肠病溃疡性结肠炎特异的的血清标识物的免疫分析测定方法和依据该方法制备的检验试剂盒,及一种针对特异靶点的生物大分子药物的研发。(1)测定内容的独特性和专有性:目前在中国所要检测的全部标识物都属创新产品,而针对标识物所开发的炎症性肠病体外诊断试剂也是目前中国体外诊断试剂市场中在炎症性肠病方面唯一的产品。(2)测定试剂盒的灵敏性,特异性,重复性,和可靠性:该方法灵敏,特异并且重复性好,测定结果可靠性强。可以在血清反应很低时或者在疾病发生发展的早期阶段测到待测物。与其他一些非特异炎症测试方法不同,本测试方法能够可靠地检测炎症性肠病溃疡性结肠炎特有的血清标识物。(3)测定试剂盒的临床应用价值:瑞华生物科技有限公司对炎症性肠病标识物的检测技术包含了对标识物的检测以及在测定过程中结合免疫荧光技术可以鉴别靶抗原的类型。这些检测结果可协助医生对炎症性肠病的诊断,同时这些结果对治疗预后和治疗监控也提供了重要的参考价值。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的试剂盒包括:
待检测血清标识物的标准品;
包被有标识物特异抗原系统的固相板;
联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体;
洗涤液;
辣根过氧化酶底物的溶液;
终止液。
优选的方案为标识物为抗人中性粒细胞抗原免疫球蛋白G。
优选的方案为联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体为抗非人类免疫球蛋白G抗体。
优选的方案为的辣根过氧化酶底物的溶液包含A液和B液,其中A液为过氧化氢溶液,B液为四甲基联苯胺溶液或者A液为四甲基联苯胺,B液为醋酸钠/枸橼酸缓冲液。
优选的方案为辣根过氧化酶连接抗体的采用碘酸钠法制备。
优选的方案为洗涤液为磷酸盐缓冲液。
优选的方案为终止液为硫酸。
优选的方案为待检测血清标识物的标准品的制备方法为:由高效价抗人中性粒细胞的血清中制备免疫球蛋白G抗血清,提纯IgG,经QAE化学试剂处理血清并分离血清,将高效价的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制备,灭活补体,再加稳定剂处理,然后对所获样品用电泳法做纯度检测,计算纯度。
优选的方案为包被有标识物特异抗原系统的固相板的制备方法为:包括进行粒细胞提取,计算细胞纯度和活性检测,细胞包被步骤,其细胞包被的方法为用1×HBBS稀释粒细胞,使其至终浓度约为100-1,000,000cells/mL,然后将悬液加入到96孔细胞培养板中,每孔100uL,静置于室温,去上清,室温干燥,后用冷甲醇固定并干燥,用封盖膜将固定细胞的微孔板封盖,放置-20℃保存备用,制成包被有标识物特异抗原系统的固相板。
一种人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒的制备方法,其特征在于:
述的试剂盒包括:
待检测血清标识物的标准品;
包被有标识物特异抗原系统的固相板;
联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体;
洗涤液;
辣根过氧化酶底物的溶液;
终止液;
其中所述的待检测血清标识物的标准品的制备方法为:由高效价抗人中性粒细胞的血清中制备免疫球蛋白G抗血清,提纯IgG,经QAE化学试剂处理血清并分离血清,将高效价的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制备,灭活补体,再加稳定剂处理,然后对所获样品用电泳法做纯度检测,计算纯度;
所述的包被有标识物特异抗原系统的固相板的制备方法为:包括进行粒细胞提取,计算细胞纯度和活性检测,细胞包被步骤,其细胞包被的方法为用1×HBBS稀释粒细胞,使其至终浓度约为100-1,000,000cells/mL,然后将悬液加入到96孔细胞培养板中,每孔100uL,静置于室温,去上清,室温干燥,后用冷甲醇固定并干燥,用封盖膜将固定细胞的微孔板封盖,放置-20℃保存备用,制成包被有标识物特异抗原系统的固相板;
所述的辣根过氧化酶连接抗体的采用碘酸钠法制备;
所述的辣根过氧化酶底物的溶液包含A液和B液,其中A液为过氧化氢溶液,B液为四甲基联苯胺溶液或者A液为四甲基联苯胺;B液为醋酸钠/枸橼酸缓冲液;
所述的终止液为硫酸,洗涤液为磷酸盐缓冲液。
本发明与现有技术相比,具有如下优点和有益效果:本发明涉及免疫分析领域。具体地公开了一种体外诊断溃疡性结肠炎的创新性方法。这一方法可检测对炎症性肠病中溃疡性结肠炎(UC)特异的的血清标识物。具体公开的内容还包括了对溃疡性结肠炎血清标识物的免疫分析测定的试剂盒及其制备方法。本发明试剂盒采用微孔板为固相载体,通过免疫反应将溃疡性结肠炎特异的的血清标识物与固定到微孔板上的特异抗原系统结合,然后与特异识别标识物的免疫球蛋白-辣根过氧化物酶结合,在所联酶对底物的酶促反应下使底物呈现颜色改变来定量测定溃疡性结肠炎特异的的血清标识物。本测定方法灵敏,准确,重复性好,反应快速,无同位素污染;所组成的试剂盒性能稳定,操作简便,适于临床推广应用。
附图说明
图1为标准曲线-标识物;
图2为制备的细胞;
图3为制备的细胞;
图4为ANCA检测系统检测106例溃疡性结肠炎病人血清的OD值分布。
具体实施方式
下面结合具体实施例和附图对本发明做进一步详细说明。
实施例1试剂盒的成分
所述试剂盒中包含有:(1)待检测血清标识物的标准品;(2)包被有标识物特异抗原系统的固相板;(3)联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体;(4)洗涤液;(5)辣根过氧化酶底物的溶液;(6)终止液。
实施例2待检测血清标识物的标准品的制备
用通过免疫荧光抗人中性粒细胞抗体靶抗原特异的检测系统确证的具有高效价抗人中性粒细胞(ANCA)的血清中制备免疫球蛋白G抗血清。
取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸盐缓冲液中平衡,将水分抽干,称湿重1g加于10ml血清中,在室温30min后,离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次,即获得较纯的IgG。经QAE化学试剂处理血清并分离后,将高效价的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制备,置于56℃水温箱30min,灭活补体,再加ProClin300做稳定剂处理,然后对所获样品用电泳法做纯度检测,通过电泳凝胶上IgG条带位置与mark条带对比,分析确定其分子量大小,计算其制备的纯度。
附图1为本方法对阳性标准品梯度稀释后,用专业数据处理软件得到的标准曲线,其R值可以达到0.999,线性关系良好。待检病人血清经本方法检测获取吸光度值以后,通过本标曲拟合公式或矩阵图换算,可以得到病人血清内含有待检抗体的含量。
实施例3包被有标识物特异抗原系统的固相微孔板的制备
A、人源外周血的获取:从健康供血者抽取新鲜的外周血到加有抗凝剂的抽血管中备用
B、炎症性肠病溃疡性结肠炎特异的血清标识物包被抗原(粒细胞)的提取制备
1)、提取粒细胞所用试剂耗材等
a.用Ficoll paque plus试剂提取制备人中性粒细胞;
b.其他制备试剂包括HBSS、Ficoll paque plus、葡聚糖、甲醇、红细胞裂解液、细胞洗涤液、瑞氏染液、台盼兰;
c.血球计数板计算细胞数。
附图2为通过本专利方法所涉及步骤,获取的目的细胞,根据方法要求,对其形态及数量做出统计做后续处理。附图3为10x40倍普通物镜下观察到的目的细胞的形态
2)、粒细胞制备的准备工作
a.将Ficoll paque plus溶液调至20℃
b.3%葡聚糖的配置:用灭菌水溶解3g葡聚糖,定容至100ml
c.0.08%台盼兰的配制:用PBS将台盼兰配置成0.08的溶液,
用时与细胞悬液等体积混合。
3)、粒细胞提取步骤方法
a.采集人外周新鲜血液到含肝素钠抗凝剂的采血管中;
b.将采集的全血用不含内毒素、钙、镁离子的1×HBSS按1∶1稀释;
c.稀释后的全血加入含Ficoll-paque plus溶液层的上面,20℃,400g,离心后,取出外周血单核细胞,并在HBSS缓冲液轻轻重悬,备用;
d.迅速将细胞与葡聚糖轻轻混合,在暗室室温条件下沉降并收集中性粒细胞。再用1xHBBS混,20℃,400g,离心5min;
e.按全血量50%加入细胞溶解液,时间为3min。用2倍细胞裂解液体积的1×HBSS缓冲液终止溶解反应,4℃,400g,离心5min。弃去上清,得到需要的粒细胞;
f.弃去上清,用细胞洗涤液将细胞沉淀重悬,洗涤一次,4℃,400g,离心5min;
g.将得到的细胞用1×HBSS重悬备用。
4)、粒细胞提取率及纯度检测
a.用移液器取细胞悬液,滴于载玻片上并干燥;
b.用有机试剂固定;
c.染色液在载玻片上做细胞染色观察其形态;
d.用水冲洗,晾干并显微镜下观察;
e.显微镜下计数细胞种类并计算粒细胞纯度;
f.细胞活性检测:取少量细胞悬液加入台盼蓝,在显微镜下检测细胞存活情况并计算细胞浓度。
5)、细胞包被:
a.计算细胞浓度,用1×HBBS稀释中性粒细胞,使其至终浓度约为100-1,000,000cells/mL。然后将悬液加入到96孔细胞培养板中,每孔100uL,静置于室温。去上清,室温干燥。后用冷甲醇固定并干燥;
b.用封盖膜将固定细胞的微孔板封盖,放置-20℃保存备用。
实施例4制备辣根过氧化酶连接的标识物抗体
本试剂盒所含辣根过氧化酶连接抗体的制备方法为碘酸钠法。称辣根过氧化酶溶于双蒸馏水中,加入新鲜配制的0.1M NaIO4溶液。室温避光。对醋酸钠缓冲液透析,4℃过夜,加入碳酸盐缓冲液,然后加入含有抗体的碳酸盐缓冲液,室温反应2小时。再加入新鲜配制的NaBH,混匀,在4℃下反应。对PBS透析4℃过夜。随后在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵。之后3000rpm离心0.5小时,弃上清,将沉淀物溶于PBS.然后对PBS透析4℃4小时,10000rpm离心30分钟。制得酶的结合物,加入丙三醇,-20℃保存。通常用酶连接的抗体的稀释倍数为1∶1000-1∶100000之间。稀释液为磷酸盐缓冲液。配置完成后混匀,放置30分钟后用肉眼观察无结晶或沉淀析出。
实施例5洗涤液的配制
根据本试剂盒的成分配置,洗涤液为磷酸盐缓冲液
3.58g/L Na2HPO4.12H2O,
0.2g/L KCl,
0.27g/L KH2PO4,
8g/LNaCl。
实施例6检测方法
(1)加样:
a.病人标本无需特殊处理。采用常规医用技术收集全血标本,置血30分钟后吸取血清待用。待测血清如在24小时内使用,可于2-8℃条件保存,若需长期存放,应保存于-20℃以下,并避免反复冻融,
b.向包被有标识物特异抗原系统的固相板的微孔中加入待检血清样品,静置使其抗原抗体反应结合。用PBST将待测血清按比例稀释,每孔加入100uL,室温振荡孵育;
(2)洗涤:去掉孔内溶液,加入PBST,静置,去掉PBST,并重复2次;
(3)酶标二抗:用酶稀释液将联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体稀释(1∶500-1∶2,000,000),每孔100uL,室温振荡孵育。
(4)洗涤:同步骤(2)。
(5)显色:加辣根过氧化酶底物的溶液,室温振荡显色30min,在酶的作用下,酶底物转换成显色物质。这样,通过对所转换的颜色的测定而得到样品中待测标识物的量。根据标准曲线中各已知标准品的浓度与显色的比,可以通过公式来计算待测标识物的浓度值。
(6)终止反应:每孔加入终止液,然后测OD450。
(7)随后根据临床资料所定的正常值来确定该病人血中的标识物浓度是否是在正常范围还是在异常范围。
(8)生物科技有限公司对炎症性肠病标识物的检测技术包含了对多种标识物的检测以及在测定过程中对遗传信息的捕获。其测定过程基本依据酶联免疫测定法的原理完成。
试剂盒中标准品可以同步得到标准曲线,待检血清所得OD值,代入标准曲线中求得病人血清中ANCA-IgG抗体的含量,其抗体含量超过Cutoff值的病人血清,再根据临床症状,即可确诊病人体内产生高浓度的ANCA-IgG抗体,提示其患溃疡性结肠炎。
附图4为通过本实验方法,检测临床收集的确诊病例血清,其吸光度值的散点分布,由图可知,本方法对病人体内抗体检测可以做到明显的区分度,即可以明显区别有无病症及病症程度(通过所检抗体含量予以判定),给予临床医生确实可信的参考数据。
对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的试剂盒包括:
待检测血清标识物的标准品;
包被有标识物特异抗原系统的固相板;
联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体;
洗涤液;
辣根过氧化酶底物的溶液;
终止液。
2.根据权利要求1所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的标识物为抗人中性粒细胞抗原免疫球蛋白G。
3.根据权利要求2所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体为抗非人类免疫球蛋白G抗体。
4.根据权利要求3所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的辣根过氧化酶底物的溶液包含A液和B液,其中A液为过氧化氢溶液,B液为四甲基联苯胺溶液或者A液为四甲基联苯胺,B液为醋酸钠/枸橼酸缓冲液。
5.根据权利要求3所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的辣根过氧化酶连接抗体的采用碘酸钠法制备。
6.根据权利要求3所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的洗涤液为磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求3所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的终止液为硫酸。
8.根据权利要求1-7任一项所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的待检测血清标识物的标准品的制备方法为:由高效价抗人中性粒细胞的血清中制备免疫球蛋白G抗血清,提纯IgG,经QAE化学试剂处理血清并分离血清,将高效价的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制备,灭活补体,再加稳定剂处理,然后对所获样品用电泳法做纯度检测,计算纯度。
9.根据权利要求1-7任一项所述的人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒,其特征是:所述的包被有标识物特异抗原系统的固相板的制备方法为:包括进行粒细胞提取,计算细胞纯度和活性检测,细胞包被步骤,其细胞包被的方法为用1×HBBS稀释粒细胞,使其至终浓度约为100-1,000,000cells/mL,然后将悬液加入到96孔细胞培养板中,每孔100uL,静置于室温,去上清,室温干燥,后用冷甲醇固定并干燥,用封盖膜将固定细胞的微孔板封盖,放置-20℃保存备用,制成包被有标识物特异抗原系统的固相板。
10.一种人自身免疫性疾病溃疡性结肠炎诊断试剂盒的制备方法,其特征在于:
述的试剂盒包括:
待检测血清标识物的标准品;
包被有标识物特异抗原系统的固相板;
联接有辣根过氧化酶的标识物的抗体;
洗涤液;
辣根过氧化酶底物的溶液;
终止液;
其中所述的待检测血清标识物的标准品的制备方法为:由高效价抗人中性粒细胞的血清中制备免疫球蛋白G抗血清,提纯IgG,经QAE化学试剂处理血清并分离血清,将高效价的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制备,灭活补体,再加稳定剂处理,然后对所获样品用电泳法做纯度检测,计算纯度;
所述的包被有标识物特异抗原系统的固相板的制备方法为:包括进行粒细胞提取,计算细胞纯度和活性检测,细胞包被步骤,其细胞包被的方法为用1×HBBS稀释粒细胞,使其至终浓度约为100-1,000,000cells/mL,然后将悬液加入到96孔细胞培养板中,每孔100uL,静置于室温,去上清,室温干燥,后用冷甲醇固定并干燥,用封盖膜将固定细胞的微孔板封盖,放置-20℃保存备用,制成包被有标识物特异抗原系统的固相板;
所述的辣根过氧化酶连接抗体的采用碘酸钠法制备;
所述的辣根过氧化酶底物的溶液包含A液和B液,其中A液为过氧化氢溶液,B液为四甲基联苯胺溶液或者A液为四甲基联苯胺;B液为醋酸钠/枸橼酸缓冲液;
所述的终止液为硫酸,洗涤液为磷酸盐缓冲液。
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---|---|
CN (1) | CN103293301A (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103713121A (zh) * | 2013-12-23 | 2014-04-09 | 天津瑞华生物科技有限公司 | 人血管炎诊断试剂盒及其制备方法 |
CN105807044A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-07-27 | 山西瑞豪生物科技有限公司 | 一种固定炎症性肠病靶抗原细胞的方法 |
CN109884310A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-06-14 | 苏州和锐生物科技有限公司 | 肠道菌外膜多肽、抗体捕获器件及试剂盒 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6218129B1 (en) * | 1998-05-15 | 2001-04-17 | Prometheus Laboratories, Inc. | Inflammatory bowel disease first step assay system |
CN1687780A (zh) * | 2005-05-01 | 2005-10-26 | 李小峰 | 中性粒细胞抗原底片的制备方法 |
CA2251058C (en) * | 1996-04-12 | 2006-12-19 | The Regents Of The University Of California | Diagnosis, prevention and treatment of ulcerative colitis, and clinical subtypes thereof, using histone h1 |
US20110218956A1 (en) * | 2005-12-01 | 2011-09-08 | Prometheus Laboratories Inc. | Methods of diagnosing inflammatory bowel disease |
CN102707055A (zh) * | 2012-06-11 | 2012-10-03 | 郑州安图绿科生物工程有限公司 | 一种联合或单独检测自身免疫性肝病相关抗体的试剂盒及其检测方法 |
-
2013
- 2013-06-17 CN CN2013102378585A patent/CN103293301A/zh active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2251058C (en) * | 1996-04-12 | 2006-12-19 | The Regents Of The University Of California | Diagnosis, prevention and treatment of ulcerative colitis, and clinical subtypes thereof, using histone h1 |
US6218129B1 (en) * | 1998-05-15 | 2001-04-17 | Prometheus Laboratories, Inc. | Inflammatory bowel disease first step assay system |
CN1687780A (zh) * | 2005-05-01 | 2005-10-26 | 李小峰 | 中性粒细胞抗原底片的制备方法 |
US20110218956A1 (en) * | 2005-12-01 | 2011-09-08 | Prometheus Laboratories Inc. | Methods of diagnosing inflammatory bowel disease |
CN102707055A (zh) * | 2012-06-11 | 2012-10-03 | 郑州安图绿科生物工程有限公司 | 一种联合或单独检测自身免疫性肝病相关抗体的试剂盒及其检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
付平平 等: "抗中性粒细胞胞浆抗体对溃疡性结肠炎诊断价值的研究", 《白求恩医科大学学报》, vol. 26, no. 5, 30 September 2000 (2000-09-30) * |
王云双 等 主编: "《临床免疫学检验》", 31 March 2009, article "离子交换层析法提取IgG" * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103713121A (zh) * | 2013-12-23 | 2014-04-09 | 天津瑞华生物科技有限公司 | 人血管炎诊断试剂盒及其制备方法 |
CN105807044A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-07-27 | 山西瑞豪生物科技有限公司 | 一种固定炎症性肠病靶抗原细胞的方法 |
CN109884310A (zh) * | 2017-12-25 | 2019-06-14 | 苏州和锐生物科技有限公司 | 肠道菌外膜多肽、抗体捕获器件及试剂盒 |
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