CN103254286A - 一种vegfr2酪氨酸激酶抑制剂多肽及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物领域，具体涉及用于治疗湿性型老年性黄斑变性的VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽。本发明技术方案是提供一种VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽，其序列为SEQNO.1,具体为ProLeuGlyArgGlyAlaPheGlyGlnValIle，及在制备治疗湿性型老年性黄斑变性药物中的应用。本发明中的VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4序列PLGRAFGQVI，可以靶向抑制VEGFR2酪氨酸激酶，抑制VEGFR2产生的生理或病理的效应，达到治疗湿性型老年性黄斑变性的效果。

Description

一种VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽及其应用

技术领域：

本发明涉及药物领域，具体涉及用于治疗湿性型老年性黄斑变性的VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽。

背景技术：

湿性型老年性黄斑变性（exudative senile macular degenetion）是老年性黄斑变性的一种，随着年龄越大，患病率越高，是老年人失明的主要原因之一。

湿性型老年性黄斑变性的特点是色素上皮层下有活跃的新生血管，从而引起一系列渗出、出血、瘢痕改变。湿性型老年性黄斑变性与新生血管密切相关。新生血管生成，在正常生理条件下，受到高度调节，在生殖、胚胎发育、组织修复和创伤愈合中是必不可少的过程。血管生成在多种病理条件下也发生。湿性型老年性黄斑变性早期，荧光造影显示在背景荧光消失后仍留有强荧光斑，说明有两种情况：一是玻璃膜疣着色，二是色素上皮层下存在新生血管；中期，主要特征为黄斑部由于新生血管渗漏，形成色素上皮层和/或神经上皮层浆液或/和出血性脱离，造影后期，大片荧光遮蔽区内可出现1～2个逐渐增强扩大的荧光斑点（称为热点-hot spot）证明视网膜下新生血管的存在；晚期，渗出和出血逐渐吸收并为瘢痕组织所替代，之后，病变并不就此结束，而在瘢痕边缘处出现新的新生血管，再度经历渗出、出血、吸收、瘢痕的过程。如此反复。由此可见新生血管贯穿于湿性型老年性黄斑变性病变的全过程中，与病情的发展。严重程度密切相关。 

血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）亦称含激酶插入域的受体(KDR)， 属于受体酪氨酸激酶超家族。血管内皮生长因子受体2在新生血管生成过程中起着主要的作用。其配体VEGF通过刺激细胞表面VEGFR2活化内皮细胞，发生生化信号的复杂级联与细胞外基质组分和可溶性因子相互作用，导致腔管形成并且分化成成熟的血管。另外，这些被活化的细胞经过细胞增殖过程，来提高细胞粘附分子的表达，增加蛋白水解酶的分泌，增加细胞迁移和侵袭。 

目前， 靶向KDR的抑制剂已成为开发新兴抗血管新生药物的研究热点。尽管如此，并没有成熟开发的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂问世，用于治疗湿性型老年性黄斑变性。 

发明内容：

本发明目的是针对设计一种VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽，可以用于治疗湿性型老年性黄斑变性。

本发明技术方案是提供一种VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4，其序列为SEQ NO.1,具体为Pro Leu Gly Arg Gly Ala Phe Gly Gln Val Ile，及在制备治疗湿性型老年性黄斑变性药物中的应用。 

本发明的原理在于VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽与VEGFR2结合，抑制VEGFR2产生生理或病理的效应，起到抑制血管内皮细胞增殖，迁移，血管腔管形成，以及相关细胞因子分泌，从而起到治疗湿性型老年性黄斑变性的作用。 

有益结果：

本发明中的VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4序列PLGRAFGQVI，可以靶向抑制VEGFR2酪氨酸激酶， 抑制VEGFR2产生的生理或病理的效应，达到治疗湿性型老年性黄斑变性的效果。

发明人经过大量实验获知VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4能够抑制兔眼视网膜血管新生和小鼠眼角膜血管新生的发展，体内实验证明具有显著的治疗湿性型老年性黄斑变性的效果，并且副作用少。说明本发明设计的VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4科学、合理、可行有效，能作为治疗湿性型老年性黄斑变性药物。 

  

具体实施方式

本发明涉及多肽4上海生工合成。 

实施例1 

VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4对兔眼视网膜新生血管动物模型的影响

　　VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4对兔眼视网膜新生血管动物模型的影响，观察VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽治疗兔眼视网膜新生血管的疗效。    

方法：选取健康有色家兔为试验对象，应用电凝器分别对双眼视盘两侧集束状视网膜血管进行电凝，建立兔RNV模型。电凝2周后，经FFA检查和病理组织切片光镜检查证实有视网膜新生血管形成，选取36只(72眼)兔视网膜新生血管眼，随机分为治疗组和对照组。治疗组玻璃体腔内注射VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4，剂量1.25mg/0.05ml，对照组玻璃体腔内注射PBS 0.05ml。注射后1W、2 W及4 W及各处死动物12摘除眼球，10只制作石蜡切片，两只行电镜检查。免疫组织化学检查对VEGF因子和FⅧ-Rag蛋白表达进行灰度值检测。郑州大学一附院眼科王文战　　

结果：免疫组织化学检测结果显示注射后1W、2 W及4 W时治疗组VEGF因子表达的灰度值与对照组相比明显减少，FⅧ-Rag蛋白表达的灰度值与对照组相比明显减少;光镜和电镜显示：注射后1W、2 W及4 W治疗组光镜切片中突破视网膜内界膜的毛细血管内皮细胞数目较对照组降低。观察注射后组织学和超微结构无明显异常。

　　结论：VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4玻璃体腔内注射治疗实验性RNV，疗效明显，可作为临床视网膜新生血管有效的治疗方法。 

实施例2 

VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4对小鼠角膜新生血管模型的影响。

VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4对小鼠角膜新生血管模型的影响，观察VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽治疗小鼠角膜新生血管的疗效。 

方法：以碱烧伤法(1mol/LNaOH溶液)诱导角膜新生血管的生成。模型建立后选取36只(72眼)小鼠角膜新生血管眼，随机分为治疗组和对照组。各组均于碱烧伤后第7d给予相应药物滴眼，4次/d，共14d;治疗组滴眼VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4，剂量1.25mg/0.05ml，对照组PBS 0.05ml滴眼。通过裂隙灯观察并记录碱烧伤后第7d、14d、28d、56d角膜情况，拍照计算角膜新生血管面积;免疫组织化学法检测角膜组织中VEGF蛋白的表达。 

　　结果：结果显示碱烧伤后第7d、14d、28d、56d角膜，治疗组角膜新生血管面积与对照组相比明显减少，治疗组VEGF因子表达的灰度值与对照组相比也明显减少。 

结论：VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4滴眼治疗角膜血管新生，疗效明显，可作为临床角膜新生血管有效的治疗方法。 

  

                             SEQUENCE LISTING

<110>  苏州普罗达生物科技有限公司

<120> 

<130>  一种VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4及其应用

<160>  1    

<170>  Patent In version 3.3

<210>  1

<211>  11

<212>  PRT

<213>  人工序列

<400>  1

Pro Leu Gly Arg Gly Ala Phe Gly Gln Val Ile

1             5

 

 

Claims (2)

1.VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4，其特征在于其序列为SEQ NO.1。

2.根据权利要求1所述的VEGFR2酪氨酸激酶抑制剂多肽4在制备治疗湿性型老年性黄斑变性药物中的应用。