CN103235412A - 一种频率可调的微扫描反射镜及其荧光成像应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种频率可调的微扫描反射镜及其荧光成像应用，包括反射镜，特点是反射镜包括使反射镜上下翻转的内轴和使反射镜左右翻转的外轴，反射镜还设置有用于驱动内轴旋转的第一组梳状驱动装置和用于驱动外轴旋转的第二组梳状驱动装置，第一组梳状驱动装置包括多个围绕内轴固定不动的定子梳齿和多个围绕内轴可旋转一定角度的转子梳齿，第二组梳状驱动装置包括多个围绕外轴固定不动的定子梳齿和多个围绕外轴可旋转一定角度的转子梳齿，定子梳齿与转子梳齿上下错开间隔分布，内轴和外轴均设置有调谐反射镜的热电加热装置，优点是能使微扫描反射镜扫描频率、振幅和相位可以调整，能耗较少的同时的不会降低光学分辨率和视场大小。
Description
技术领域
本发明涉及一种基于激光扫描的荧光成像系统，尤其涉及一种频率可调的微扫描反射镜及其荧光成像应用。
背景技术
一种基于激光扫描的荧光成像系统，通常包括一个可用于激光扫描荧光成像的激光共聚焦探头，该激光共聚焦探头包括一个激光二极管、一个有效光电探针、两个微扫描反射镜和一个物镜系统。该共聚焦探头的视场领域（FOV）由物镜的光圈孔径的大小决定，此外，共聚焦探头收集荧光光子的能力还由物镜孔径的数值（NA）决定。由于现有的激光共聚焦探头的微反射镜的频率是固定不可调的，从而使用共聚焦微扫描反射镜探头进行大视野成像时，微扫描反射镜的反射区域面积是限制物镜收集光子的唯一可变因素，因此为了提高物镜收集光子的能力，必须增大微扫描反射镜的反射区域面积，从而驱动力增加，导致能耗增加，同时两个微扫描反射镜扫描频率、振幅和相位调整无法实现同步进行，致使最终得到的图像分辨率低，视场大小无法精准控制。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种能使微扫描反射镜扫描频率、振幅和相位均可以分别调整，在保证能耗较少的同时的不降低光学分辨率和视场大小的频率可调的微扫描反射镜及基于频率可调的微扫描反射镜的荧光成像系统。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种频率可调的微扫描反射镜，包括反射镜，所述的反射镜包括使反射镜上下翻转的内轴和使反射镜左右翻转的外轴，所述的反射镜还设置有用于驱动所述的内轴旋转的第一组梳状驱动装置和用于驱动所述的外轴旋转的第二组梳状驱动装置，所述的第一组梳状驱动装置包括多个围绕所述的内轴固定不动的定子梳齿和多个围绕所述的内轴可旋转一定角度的转子梳齿，所述的第二组梳状驱动装置包括多个围绕所述的外轴固定不动的定子梳齿和多个围绕所述的外轴可旋转一定角度的转子梳齿，所述的定子梳齿与所述的转子梳齿上下错开间隔分布，所述的内轴和所述的外轴均设置有调谐所述的反射镜的热电加热装置。
所述的反射镜的外周设置有可旋转的反射镜活动框，所述的内轴设置在所述的反射镜活动框上且位于所述的反射镜的外沿，所述的内轴在电压的驱动下带动反射镜上下翻转，所述的反射镜与所述的反射镜活动框通过内轴一体连接，所述的外轴设置在所述的反射镜活动框外沿且所述的外轴在电压的驱动下带动所述的反射镜与所述的反射镜活动框整体左右翻转。
所述的转子梳齿的厚度为0.5-50微米，各个所述的转子梳齿之间的距离为0.5-50微米，所述的定子梳齿的厚度为0.5-50微米，各个所述的定子梳齿之间的距离为0.5-50微米。
所述的转子梳齿的厚度为8微米，各个所述的转子梳齿之间的距离为8微米，所述的定子梳齿的厚度为8微米，各个所述的定子梳齿之间的距离为8微米。
所述的反射镜的直径为1024微米。
所述的热电加热装置采用P型掺杂形成的用于协助热电在轴内流动产生热量的肖特基二极管。
一种基于频率可调的微扫描反射镜的荧光成像系统，所述的荧光成像系统包括一个共聚焦探头，该共聚焦探头包括权利要求1-6中任一项所述的频率可调的微扫描反射镜。
工作原理：由于电压被施加在定子梳齿上，转子梳齿会经历一个静电扭矩，转子梳齿能够转动的最大旋转角度为5°-4.5°，转子梳齿围绕内轴或外轴做旋转运动时，会有一个剪切力作用于转轴使其扭曲，而剪切力又提供一个机械的复原扭矩来反作用于这种扭曲。旋转了一定角度的转子梳齿受到的静电扭矩完全匹配于转轴机械恢复扭矩时两者之间达到平衡。
为了使微扫描反射镜达到一定的有效扫描幅度，微扫描反射镜需要工作在一个共振扫描模式下。微扫描反射镜的共振频率可以通过在内轴或外轴施加额外的电流加以改变。流动的电流通过转轴上的热电阻产生热对转轴进行加热，并改变转轴的杨氏模量。换句话说，通过电流加热转轴，微扫描反射镜可以被电动调谐，根据转轴的刚性变化微扫描反射镜的谐振频率被调谐。
在最终的图像中频率可调微扫描反射镜的产品尺寸和它的光学偏转角决定图像解析点的数目，并最终决定分辨率。解析点数目为N，在一维扫描下由下式决定：
其中，
是微扫描反射镜的机械扫描半角，λ是工作波长，D是微扫描反射镜的直径。通过对上述反射镜的机械扫描半角（光学偏转角）的调整及通过改变转轴的杨氏模量来对转轴的频率进行调谐，使荧光成像系统中微扫描反射镜工作在一个共振扫描模式下，并有望实现成像效率不完全取决于微扫描反射镜表面区域的面积大小。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明一种频率可调的微扫描反射镜，微扫描反射镜的每组梳齿驱动装置可以分别沿轴旋转。第一组梳齿驱动装置和第二组梳齿驱动装置都包括多个定子梳齿和多个能够围绕相应的内轴或外轴旋转的转子梳齿，转子梳齿带动轴转动，进而带动反射镜转动从而改变反射镜的光学偏转角，使成像效率不完全取决于微扫描反射镜表面区域的面积大小，并且该微扫描反射镜可以在各个方向调动反射镜光学偏转角，可使光学偏转角翻倍叠加或者将荧光光束切换到其他任意方向的光路，保证了成像系统的能耗与微扫描反射镜的反射镜表面区域解耦，同时微扫描反射镜可以通过施加电流到转轴，然后加热转轴来改变转轴的杨氏模量，从而对微扫描反射镜进行微调，通过共振频率的调节使两个微扫描反射镜扫描频率、振幅和相位调整同步进行，以实现在两个同步微扫描反射镜之间形成光学成像。
综上所述，本发明一种频率可调的微扫描反射镜，使用激光扫描机制进行宏观的视场成像时，通过梳齿驱动装置带动转轴快速、高扭矩旋转驱动，从而使反射镜旋转一定角度，调整反射镜的机械扫描半角，实现成像效率不完全取决于微扫描反射镜表面区域的面积大小；并且通过微扫描反射镜共振频率的调节以实现两个微反射镜的扫描频率、振幅、相位同步，可实现成像系统效率与微扫描反射镜表面区域的解耦，能耗较少的同时不会降低图像光学分辨率和视场大小，通过这样，可以在不需要大的光束照射的情况下实现大规模的高质量荧光成像，并且样品白化被破坏的风险将大大降低。
附图说明
图1为本发明频率可调的微扫描反射镜的结构示意图；
图2为图1的任一组梳齿驱动装置的结构示意图；
图3为激光共聚焦探头的结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
具体实施例
本发明一种频率可调的微扫描反射镜，如图1所示，包括反射镜1，该反射镜1包括使反射镜1上下翻转的内轴2和使反射镜1左右翻转的外轴3，反射镜1还设置有用于驱动内轴2旋转的第一组梳状驱动装置4和用于驱动外轴3旋转的第二组梳状驱动装置5，如图2所示，第一组梳状驱动装置4包括多个围绕内轴2固定不动的定子梳齿6和多个围绕内轴2可旋转一定角度的转子梳齿7，第二组梳状驱动装置5包括多个围绕外轴3固定不动的定子梳齿6和多个围绕外轴3旋转一定角度的转子梳齿7，定子梳齿6与转子梳齿7上下错开间隔分布，内轴2和外轴3均设置有调谐反射镜1的热电加热装置（图中未显示）。
在此具体实施例中，反射镜1的外周设置有可旋转的反射镜活动框8，内轴2设置在反射镜活动框8上且位于反射镜1的外沿，内轴2在电压的驱动下带动反射镜1上下翻转，反射镜1与反射镜活动框8通过内轴2一体连接，外轴3设置在反射镜活动框8外沿且外轴3在电压的驱动下带动反射镜1与反射镜活动框8整体左右翻转。
在此具体实施例中，如图2所示，转子梳齿7能够被旋转，而定子梳齿6能够保持静止，转子梳齿7的厚度为0.5-50微米，各个转子梳齿7之间的距离为0.5-50微米，定子梳齿6的厚度为0.5-50微米，各个定子梳齿6之间的距离为0.5-50微米（转子梳齿7的厚度和定子梳齿6的厚度，以及转子梳齿7相互之间和定子梳齿6相互之间距离选取8微米最佳）。
在此具体实施例中，如图1所示，频率可调的微扫描反射镜14含有大小约是2.8*2.8平方毫米的基片9，可旋转的反射镜1直径大约为1024微米。反射镜1包括内轴2和外轴3，第一组梳状驱动装置4为内轴2提供快速、高扭矩旋转驱动，第二组梳状驱动装置5为外轴3提供快速、高扭矩旋转驱动。例如，相互交错的第一组梳状驱动装置4和第二组梳状驱动装置5可以沿相应的内轴2和外轴3旋转，第一组梳状驱动装置4的运动可以由基片9上的电极V1 inner11和电极V2 inner12的输入电压来驱动，第二组梳状驱动装置5的运动可以由基片9上的电极V1 outer13和电极V2 outer14的输入电压来驱动， 在第一组梳状驱动装置4或第二组梳状驱动装置5的任一个电极上施加一个静态电压，则梳状驱动装置单侧偏转；通过在两个梳状驱动装置的任一电极上施加一个静态电压来实现总的光学偏转角翻倍。通过施加静态电压240V分别到内轴2和外轴3上可实现光学偏转角大约在4.5°-5°之间。
在此具体实施例中，热电加热装置采用P型掺杂形成的电阻区（肖特基二极管），用于协助热电在轴内流动产生热量。
应用实施例
本发明一种频率可调的微扫描反射镜的应用，如图3所示，将实施例一的频率可调的微扫描反射镜14应用到激光扫描共聚焦系统中，该激光扫描共聚焦系统包括一个激光二极管15，一个光电探测器16，一个频率固定反射镜17，一个频率可调微扫描反射镜14和一个物镜系统18（包括具有3倍开普勒扩束器19和高数值孔径的非球面物镜20）。
工作过程为：从激光二极管15发射线性偏振光束到一个稳态单模偏振的光纤（PM）21中。光线通过PM光纤21后，用准直器22聚焦成1mm直径的光束，为了把光照光线转换到一个圆形偏振光，需要通过一个轴线取向在45°入射偏振角的零级四分之一波长波板23。光线通过频率固定反射镜17反射后，以22.5°角入射到实施例1的频率可调微扫描反射镜14。光线经频率可调微扫描反射镜14射出能覆盖整个物镜系统18，提供了一个有效数值孔径约0.48的组织样本24。反射光随后被转换成垂直于初始照明偏振方向的线性偏振光，然后使用消除偏振片25和偏移镜26，再通过空间滤波后到光电探测器16。
具有较高值数值孔径的物镜系统18可以在高散射的组织样本24中获得高对比度的光学图像。激光共聚焦系统的分辨率、视场和对比度很大程度上都取决于频率可调微扫描反射镜14。即使这样，然而在分辨率和视场之间也要做一个权衡。在最终的图像中频率可调微扫描反射镜14的产品尺寸和它的光学偏转角决定图像解析点的数目，并最终决定分辨率。
解析点数目为N，在一维扫描下由下式决定：
其中，
是频率可调微扫描反射镜14的机械扫描半角（光学偏转角），λ是工作波长，D是频率可调微扫描反射镜14的直径。
上述激光扫描共聚焦系统可以在3.0帧每秒的情况下提供一个200微米*125微米的视场图像。在影像中解析点的数目（408*255）与频率可调微扫描反射镜14的直径和光学扫描角度成比例，正如上式所述。在频率可调微扫描反射镜14的最大直径限制范围内，其设定的最大驱动电压和能量消耗由光学偏转角决定。
当然，上述说明并非对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内，作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种频率可调的微扫描反射镜，包括反射镜，其特征在于，所述的反射镜包括使反射镜上下翻转的内轴和使反射镜左右翻转的外轴，所述的反射镜还设置有用于所述的内轴旋转的第一组梳状驱动装置和用于驱动所述的外轴旋转的第二组梳状驱动装置，所述的第一组梳状驱动装置包括多个围绕所述的内轴固定不动的定子梳齿和多个围绕所述的内轴旋转一定角度的转子梳齿，所述的第二组梳状驱动装置包括多个围绕所述的外轴固定不动的定子梳齿和多个围绕所述的外轴旋转一定角度的转子梳齿，所述的定子梳齿与所述的转子梳齿上下错开间隔分布，所述的内轴和所述的外轴均设置有调谐所述的反射镜的热电加热装置。
2.根据权利要求1所述的一种频率可调的微扫描反射镜，其特征在于：所述的反射镜的外周设置有可旋转的反射镜活动框，所述的内轴设置在所述的反射镜活动框上且位于所述的反射镜的外沿，所述的内轴在电压的驱动下带动反射镜上下翻转，所述的反射镜与所述的反射镜活动框通过内轴一体连接，所述的外轴设置在所述的反射镜活动框外沿且所述的外轴在电压的驱动下带动所述的反射镜与所述的反射镜活动框整体左右翻转。
3.根据权利要求2所述的一种频率可调的微扫描反射镜，其特征在于：所述的转子梳齿的厚度为0.5-50微米，各个所述的转子梳齿之间的距离为0.5-50微米，所述的定子梳齿的厚度为0.5-50微米，各个所述的定子梳齿之间的距离为0.5-50微米。
4.根据权利要求3所述的一种频率可调的微扫描反射镜，其特征在于：所述的转子梳齿的厚度为8微米，各个所述的转子梳齿之间的距离为8微米，所述的定子梳齿的厚度为8微米，各个所述的定子梳齿之间的距离为8微米。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的一种频率可调的微扫描反射镜，其特征在于：所述的反射镜的直径为1024微米。
6.根据权利要求1-4中任一项所述的一种频率可调的微扫描反射镜，其特征在于：所述的热电加热装置由P型掺杂形成的用于协助热电在轴内流动的肖特基二极管。
7.一种基于频率可调的微扫描反射镜的荧光成像系统，其特征在于：所述的荧光成像系统包括一个共聚焦探头，该共聚焦探头包括权利要求1-6中任一项所述的频率可调的微扫描反射镜。
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