CN103141522B - 松针提取物用于抗植物病原菌 - Google Patents

Abstract

本发明属于生物农药技术领域，具体来说是涉及松针提取物用于抗植物病原菌及采用松针提取物的抗植物病原菌的生物农药。松针提取物用于抗植物病原菌的方法。本发明原料来源丰富、易得。方法工艺简单，生产成本低，无任何毒害污染；该松针源生物农药为干粉状态，易于保存，可成功防治苦瓜枯萎病原菌、烟草赤星病原菌、小麦赤霉病原菌、番茄早疫病原菌等植物病原菌，是新一代的植物源无公害的生物农药。

Description

松针提取物用于抗植物病原菌

技术领域

本发明属于生物农药技术领域，具体来说是涉及松针提取物用于抗植物病原菌及采用松针提取物的抗植物病原菌的生物农药。

背景技术

目前，农业生产中使用的农药主要是化学农药，虽然能杀死农作物上的有害病原菌，但施用过后的残留物对人体依旧有极大的伤害，施用过化学农药的农产品也常因农药残留成分过高而被国内外销售市场拒绝，造成很大一部分的农产品滞销。此外，部分化学农药常带有剧毒，时常会造成人、畜农药中毒事故。因此，农民迫切希望寻求一种防治植物病菌效果好，对人畜无害，且价格便宜的农药，以提高农产品的安全性和环保性，并能降低生产成本。

植物源农药具有在环境中生物降解快、对人畜及对非靶标生物毒性低、有害生物不易产生抗性、成本低、易得等特点，符合现代农业环保、健康、持续发展的时代要求，具有极高的开发价值，越来越受到重视。目前已有大量研究者在进行生物农药的研发，闫双婷开发出一种中草药制成的生物农药，主要用于农作物害虫的防治；程国金等开发出一种以桑叶为来源的生物农药，主要用于灭杀菜青虫、蝗虫等害虫；洪伟等研发出一种以雷公藤为原料的生物农药，能够防治农作物害虫。虽然我国在生物农药的研发上已取得一定的成果，但对植物源农药的开发依旧处于初级阶段，广泛寻求理想的植物源农药仍然刻不容缓。

随着对植物源生物农药的不断研究与开发，为松针的利用提供了新的思路。松针资源丰富，来源广泛、再生速度快、可一年四季采收。其成分主要有黄酮、有机酸、挥发油等，具有一定的抗菌活性，可以考虑开发松针源生物农药。目前我国对针松抗菌活性成分的提取和应用尚处于起步阶段，对松针在抗菌活性方面的研究还处在基础阶段，提取松针内的有效抑菌成分并用于生产实践依然有一段较长的路要走。

如中国发明专利（申请号：200810162531.5申请日：2008-12-01）公开了湿地松松针提取物用于食品抗菌保鲜。得到的湿地松松针提取物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、霉菌有较强的抑制作用，并具有较强的抗氧化功能，该保鲜剂对热具有良好的稳定性，具有较宽的PH使用范围，用水将松针提取物溶解成不同浓度溶液，用于不同食品保鲜，保鲜效果明显。

虽然已知松针含有抗菌活性物质，对大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、黑曲霉、黄曲霉等几种常见的食品腐败菌有广泛的抑制作用，但对抗植物病害菌活性的研究依旧缺乏，没有其对植物病害菌的杀菌谱。因此，利用松针提取物对植物病原菌进行更加深入的研究，研发出新型的抗植物病原菌制剂，为丰富植物源的生防制剂品种，综合开发利用松针提供重要的理论依据。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明的第一个目的是提供松针提取物用于抗植物病原菌的方法，该方法具有方法简便、实用，成本低效果好，对环境污染小且农药本身易降解的特点。本发明的第二个目的是提供抗植物病原菌的生物农药，该生物农药中包括了松针提取物。

为了实现上述的第一个目的，本发明采用了以下的技术方案：

松针提取物用于抗植物病原菌的方法。

作为优选，所述的植物病原菌为苦瓜枯萎病菌、烟草赤星病菌、番茄早疫病菌、小麦赤霉病菌或苹果腐霉病菌。

作为优选，上述的松针提取物采用以下的方法步骤制备得到：

1）收集松针，除杂洗净，烘至恒重，粉碎为粉末；

2）在松针粉末中按体积比1:10～20加入乙醇溶液后水浴，水浴温度为60-90℃，回流提取得到滤液；

3）将步骤2）得到的滤液旋转蒸发为膏状物提取物；

4）真空干燥至恒重，取出研磨得到提取物粉末。

作为优选，上述的步骤1）中松针粉末是30～100目。

作为优选，上述的步骤2）中的乙醇体积百分比浓度为40-70%，提取次数为2～4次，每次提取时间1～2小时。

为了实现上述的第二个目的，本发明采用了以下的技术方案：

抗植物病原菌的生物农药，该生物农药中包括松针提取物。

作为优选，所述的植物病原菌为苦瓜枯萎病菌、烟草赤星病菌、番茄早疫病菌、小麦赤霉病菌或苹果腐霉病菌。

作为优选，上述的松针提取物采用以下的方法步骤制备得到：

1）收集松针，除杂洗净，烘至恒重，粉碎为粉末；

2）在松针粉末中按体积比1:10～20加入乙醇溶液后水浴，水浴温度为60-90℃，回流提取得到滤液；

3）将步骤2）得到的滤液旋转蒸发为膏状物提取物；

4）真空干燥至恒重，取出研磨得到提取物粉末。

作为优选，上述的步骤1）中松针粉末是30～100目。

作为优选，上述的步骤2）中的乙醇体积百分比浓度为40-70%，提取次数为2～4次，每次提取时间1～2小时。

本发明的技术方案具有以下优点，原料来源丰富、易得。方法工艺简单，生产成本低，无任何毒害污染；该松针源生物农药为干粉状态，易于保存，可成功防治苦瓜枯萎病原菌、烟草赤星病原菌、小麦赤霉病原菌、番茄早疫病原菌等植物病原菌，是新一代的植物源无公害的生物农药。

附图说明

图1是实施例1制备的松针源农药对苦瓜枯萎病菌的抑制效果图，左为加药，右为对照。

图2是实施例1制备的松针源农药对烟草赤星病菌的抑制效果图，左为加药，右为对照。

图3是实施例1制备的松针源农药对番茄早疫病菌的抑制效果图，左为加药，右为对照。

图4是实施例1制备的松针源农药对小麦赤霉病菌的抑制效果图，左为加药，右为对照。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式做一个详细的说明。

实施例1

松针源生物农药的制备过程，将采集来的松针除杂洗净，于50℃电热恒温烘箱内烘干，粉碎至40目，得到的粉末常温保存备用。称取一定量松针粉末，加入15倍体积的40-70%乙醇溶液，60-90℃水浴回流提取1h，之后用循环式真空泵进行抽滤，收集滤液，再向滤渣中加15倍体积40-70%乙醇溶液，进行第二次提取，水浴回流提取1h后抽滤，收集滤液，按照同样的方法提取3次，之后合并滤液，用旋转蒸发仪将溶液蒸发掉得到膏状物，放入真空干燥箱中50℃烘至恒重，取出研磨得到提取物粉末，该粉末即为松针源生物农药，常温保存即可。

实施例2

对植物病原菌抗性测定，利用生产速率法对（1）中制得的松针源生物农药进行植物病原菌生物抗性测定，具体操作如下：取（1）中制得的松针源生物农药用水配成20-100mg/ml药液；加药培养基的制备:取配制的药液0.5ml于灭菌的10ml试管中,加入9.5ml50℃左右的PDA培养基，摇匀，倒入灭菌培养皿中即成。菌种培养：选取处于同一生长势的菌落圈，用无菌小铲铲取打孔器制得菌饼，并挖出孔内培养基，倒置于上述加药培养基的平皿上，每皿三个。28℃恒温倒置培养43h。用十字交叉法量取菌落圈直径，取其平均值作为实验结果，计算抑制率。菌落圈直径越小则抗菌活性越强。以清水代替药液作为对照。

不同提取条件下所得松针源农药对植物病原菌抑制效果的比较

不同提取溶剂对6种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用比较

上表可以看出，在提取物供试质量浓度为20mg/ml时，对6种供试植物病原真菌，除杨树溃疡外，抑制菌丝效果最佳的均为乙醇提取液，且对苦瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、苹果腐霉病菌3个菌的抑制率达到40%以上。

不同提取时间对4种病原真菌菌丝生长的抑制作用比较

上表可以看出，在提取物质量浓度为20mg/ml时，不同提取时间对苦瓜枯萎病菌和烟草赤星病菌菌丝的抑制作用影响不大。对小麦赤霉病菌和番茄早疫病菌，0.5h时效果相对较差，1h以上抑制效果较好，且差异变化不大。

不同提取温度对4种病原真菌菌丝生长的抑制作用比较

上表可以看出，在提取物质量浓度为20mg/ml时，提取温度对苦瓜枯萎病菌和番茄早疫病菌的抑制作用影响不大，且抑制率达到40%以上。对烟草赤星病菌和小麦赤霉病菌，60℃以下温度提取的提取物效果相对较差，提取温度在70℃以上，得到的提取物效果较好。

不同乙醇提取浓度对4种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用比较

由上表可以看出，在提取物供试质量浓度为20mg/ml时，对烟草赤星病菌和番茄早疫病菌，抑制效果最佳的提取乙醇浓度为60%，且抑制率分别达到41.59%和63.44%。对小麦赤霉病原菌和苦瓜枯萎病菌，乙醇浓度对几种菌的抑制率影响不大。

Claims (2)

1.松针提取物用于抗植物病原菌的方法，所述的植物病原菌为苦瓜枯萎病菌、烟草赤星病菌或苹果腐霉病菌；所述的松针提取物采用以下的方法步骤制备得到：

1）收集松针，除杂洗净，烘至恒重，粉碎为粉末；

2）在松针粉末中按体积比1:10~20加入乙醇溶液后水浴，水浴温度为60-90℃，回流提取得到滤液；所述的乙醇体积百分比浓度为40-70%，提取次数为2~4次，每次提取时间1~2小时；

3）将步骤2）得到的滤液旋转蒸发为膏状物提取物；

4）真空干燥至恒重，取出研磨得到提取物粉末。

2.根据权利要求1所述的松针提取物用于抗植物病原菌的方法，其特征在于步骤1）中松针粉末是30~100目。