CN102973495A

CN102973495A - 一种减缓玻璃酸钠在体内降解的方法

Info

Publication number: CN102973495A
Application number: CN2012104608125A
Authority: CN
Inventors: 叶湘武; 付爱玲; 周宁辉
Original assignee: SHANGHAI JINGFENG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: SHANGHAI JINGFENG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2012-11-15
Filing date: 2012-11-15
Publication date: 2013-03-20

Abstract

本发明涉及一种减缓玻璃酸钠在体内降解的方法，即在玻璃酸钠注射液的成分内添加一定量（0.5-30μmol/L）的二氯化锰。在骨性关节炎患者的关节内行粘弹性物补充疗法（注射玻璃酸钠）后，通过补充外源性玻璃酸钠,恢复滑液的润滑功能,可促进软骨的修复,改善关节功能。然而，外源性玻璃酸钠在关节内的存留时间较短，但是添加有二氯化锰的“玻璃酸钠注射液”比传统的“玻璃酸钠注射液”，能使主要成分玻璃酸钠在关节内存留时间更长，从而起到增强治疗效果并降低患者的治疗成本的目的。

Description

一种减缓玻璃酸钠在体内降解的方法

技术领域：

本发明涉及一种减缓玻璃酸钠在体内降解的方法。

背景技术：

玻璃酸（hyaluronic acid）是由N-乙酰氨基葡糖和D-葡糖醛酸双糖重复单位通过β-(1→4)糖苷键和β-(1→3)糖苷键构成的无分支高分子糖胺聚糖，而玻璃酸钠是玻璃酸的钠盐形式。玻璃酸钠在溶液中的无规则卷曲状态和流体力学特点赋予它具有许多重要的物理特性,如:高度粘弹性、可塑性、渗透性、独特的流变学特性以及良好的生物相容性，它是一种临床上用途十分广泛的生物医学材料。

“玻璃酸钠注射液”用于骨关节腔内注射治疗骨关节病是近年来在骨关节病治疗中的一大创举。它的主要作用在于保护关节软骨、润滑关节腔、改善关节滑液和抑制疼痛并营养细胞。

虽然在大多数组织中玻璃酸钠的快速分解代谢是由玻璃酸酶所控制，但由于在关节滑液中缺乏玻璃酸酶，以致分解代谢玻璃酸钠的机理不同。在健康人体中其机理是活性氧（ROS）的氧化/降解作用，它由过渡金属（铁和/或铜）离子催化抗坏血酸自氧化而产生。研究表明活性氧是炎性关节疾病中玻璃酸钠降解的主要原因，如骨性关节炎，类风湿性关节炎（RA）。

健康人体滑液中抗坏血酸的浓度达到接近于血清的值，即40-140μmol/L；健康人体滑液中Fe²⁺和Cu²⁺总浓度分别为5.2和4.3μmol/L，并且它们在病理/炎症条件下上升，如骨关节炎（OA）和类风湿性关节炎（RA）;在类风湿性关节炎患者的滑液中，与健康人体相比，Cu²⁺的总浓度增加量超过三倍；在Cu²⁺催化下的抗坏血酸自氧化过程中，直接发生将O₂转化为H₂O₂；

研究表明，在有氧条件下的三元体系，包括玻璃酸钠大分子加抗坏血酸和微量铁或铜离子，逐步诱导玻璃酸钠溶液粘度下降，以致玻璃酸钠大分子断裂/降解。而Mn²⁺在纳米级摩尔浓度能清除超氧化物阴离子自由基，而其微摩尔浓度能清除羟基自由基。增加锰浓度能更加强烈抑制脂类过氧化反应，并且当Mn²⁺浓度达到30μmol/L时能完全抑制。

锰在抑制铁诱导的脂质过氧化链式反应中充当一个链破坏器，并且提出，Mn²⁺能经由亲氧化过渡金属如铁和铜产生的羟基自由基引起的脂质过氧化传播反应方式抑制的下列反应，清除过氧化氢脂质自由基。

人体大约含有300ppm的锰;建议每日摄取这一必需元素3-9毫克。Mn的电子排布为1s²2s²2p⁶3s²3p⁶3d⁵4s²以及在pH7时Mn³⁺/Mn²⁺氧化还原反应电位等于+1.5V。锰以几种不同氧化态形式存在;但是在生物系统内，以Mn²⁺占优势。锰离子是顺磁体因而可由EPR光谱检测。在大多数（生物）产物中检测出Mn²⁺六带EPR光谱。

目前，市售“玻璃酸钠注射液”的主要成份为玻璃酸钠，辅料为氯化钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠，当它被注射入人体关节后，其降解速度较快。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于针对玻璃酸钠在人体中降解速度较快的问题而提供一种减缓玻璃酸钠在体内降解的方法。

为实现本发明的目的，本发明所采用的技术方案是：模拟骨关节炎关节腔内氧化体系环境，在玻璃酸钠注射液内添加一定量（0.5-30μmol/L）的二氯化锰，以缓解玻璃酸钠在体内降解的速率。

本发明所用“玻璃酸钠注射液”产品均由上海景峰制药有限公司提供，批号：20111001，规格：2.5ml:25mg,动力粘度为：18651mPa.s(检测条件见实施例所述)。

为更科学地反映事实，本发明模拟骨关节炎患者关节滑液中抗坏血酸、二价铁离子及二价铜离子最终浓度环境（抗坏血酸：约110μmol/L，FeCl₂：约5.5μmol/L，CuCl₂：约10μmol/L）。现先配制待用溶液：0.225mmol/L的抗坏血酸（C₆H₈O₆）溶液50ml，22.5μmol/L的FeCl₂溶液50ml，40.0μmol/L的CuCl₂溶液50ml,0.67μmol/L的MnCl₂溶液50ml,2.67μmol/L的MnCl₂溶液50ml,40μmol/L的MnCl₂溶液50ml,10.0mmol/L的MnCl₂溶液50ml，40.0mmol/L的MnCl₂溶液50ml。

具体实施方式：

通过下面给出的本发明的具体实施例可以进一步清楚地了解本发明，但它们不是对本发明的限定。

实施例1

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入已配制好的抗坏血酸溶液5.0ml，待混合均匀后，再往烧杯内加入已配制好的FeCl₂溶液2.5ml，混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例2

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入已配制好的抗坏血酸溶液5.0ml，待混合均匀后，再往烧杯内加入已配制好的CuCl₂溶液2.5ml，混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例3

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入0.67μmol/L的MnCl₂溶液7.5ml，混合均匀后二价锰离子的最终浓度为0.5μmol/L，混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例4

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入2.67μmol/L的MnCl₂溶液7.5ml，混合均匀后二价锰离子的最终浓度为2μmol/L，混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例5

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入40μmol/L的MnCl₂溶液7.5ml，混合均匀后二价锰离子的最终浓度为2μmol/L，混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例6

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入10.0mmol/L的MnCl₂溶液50μl，再往烧杯内加入已配制好的抗坏血酸溶液5.0ml，混合均匀后，接着往烧杯内加入已配制好的FeCl₂溶液2.5ml（混合均匀后二价锰离子的最终浓度约为0.5μmol/L），混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例7

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入10.0mmol/L的MnCl₂溶液50μl，再往烧杯内加入已配制好的抗坏血酸溶液5.0ml，混合均匀后，接着往烧杯内加入已配制好的CuCl₂溶液2.5ml（混合均匀后二价锰离子的最终浓度约为0.5μmol/L），混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例8

取1支“玻璃酸钠注射液”产品（批号：20111001），将针管内玻璃酸钠注射液全部转移至一个量程为50ml的烧杯内。然后，往烧杯内加入40.0mmol/L的MnCl₂溶液50μl，再往烧杯内加入已配制好的抗坏血酸溶液5.0ml，混合均匀后，接着往烧杯内加入已配制好的CuCl₂溶液2.5ml（混合均匀后二价锰离子的最终浓度约为2.0μmol/L），混合均匀。最后采用DV-II+PRO旋转式锥板粘度计检测动力粘度（CP）。分别于实验开始后30min、90min、150min、210min、270min采集数据并记录。【检测条件：转子型号为CPE-42，剪切速率0.07rpm，扭矩大于20%，剪切速率不小于0.25Hz，（25±0.1）℃】

实施例检测数据汇总如下如表1所示：

表1

从表1中数据可得出结论：在玻璃酸钠溶液中，Fe²⁺和Cu²⁺的存在会促进玻璃酸钠的降解，尤其是Cu²⁺可使玻璃酸钠在1小时内产生较大的降解速率；当有低浓度Mn²⁺（0.5-2μmol/L）存在时可减缓其降解速率，起到保护作用，从而延长外源性玻璃酸钠在体内的生物活性，增强该产品的有效性。况且，锰元素不仅是人体的必需元素，而且其本身不会对玻璃酸钠注射液产品的降解产生不利因素。

Claims

1.一种减缓玻璃酸钠在体内降解的方法，其特征在于，在玻璃酸钠注射液成品生产的配液工序中添加二氯化锰成份，其浓度范围为0.5-30μmol/L。

2.根据权利要求1所述的减缓玻璃酸钠在体内降解的方法，其特征在于，所添加二氯化锰成份的浓度为0.5-2μmol/L。