CN102285944A

CN102285944A - 具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物及制备与应用

Info

Publication number: CN102285944A
Application number: CN2011101576575A
Authority: CN
Inventors: 陈填烽; 黄晓纯; 郑文杰; 杨芳; 罗懿
Original assignee: Jinan University
Current assignee: Guangdong Jichuang Selenium Source Nanometer Research Institute Co Ltd
Priority date: 2011-06-13
Filing date: 2011-06-13
Publication date: 2011-12-21
Anticipated expiration: 2031-06-13
Also published as: CN102285944B

Abstract

本发明公开了一种具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物及制备方法与应用。该苯并硒二唑衍生物的化学结构如式I所示，式中的R₁为-H或-NO₂；R₂为-H、-NO₂或

且R₁和R₂不能同时为H。将邻二胺类化合物与二氧化硒通过液相或固相反应合成，即可得到本发明所述的苯并硒二唑衍生物。该苯并硒二唑衍生物具有良好的抗肿瘤及抗氧化活性，而且其制备方法简单，产率高。本发明所述的苯并硒二唑衍生物可用于制备抗肿瘤药物和/或抗氧化药物。

(式I)

Description

具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物及制备与应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及一种具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物及制备方法与应用。

背景技术

恶性肿瘤是本世纪人类健康最大的威胁。目前全世界恶性肿瘤的发病率不断上升，每年新增恶性肿瘤病人近1000万。根据目前癌症的发病趋势，2020年全世界癌症发病率将比现在增加50％，全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人。因恶性肿瘤导致死亡的死因占17.9％，占死因的第二位。据2006年中国卫生事业发展情况统计公报的数据，我国城乡居民主要死亡原因第一位为恶性肿瘤。2007年广东省卫生统计信息中心的数据也有力地显示：恶性肿瘤(126.36/10万)为我省居民第一位的死因。因此，各国政府、研究机构及制药公司长期以来一直对肿瘤研究和抗肿瘤药物予以高度重视。对于抗肿瘤药物的开发与研究，目前仍任重而道远。

微量元素硒是人体和动物的必须营养物质，是哺乳动物体内的谷光甘肽过氧化酶，碘化甲腺原氨酸-去碘酶等一系列硒酶的活性中心，已往研究发现人体缺或者过量硒会导致许多疾病的发生和恶化，如适量摄入硒不仅能预防缺硒引起的克山病和大骨节病，而且能增强机体的抗氧化作用和拮抗重金属的毒性(YuLL，et al，Animal Feed Science and Technology.2008，140，39-51)。即微量元素硒对人体的多种生理功能起关键性作用。自从1970s发现了有机硒化合物的新的化学反应以及具有特殊性质的新化合物之后，特别是发现有机硒化合物比无机硒具有更低的毒性，有机硒化学的研究逐渐成为研究热点。人们合成出大量具有生物活性的有机硒化合物，主要包括含硒杂环、二硒醚、硒醚、硒氰、甲基硒酸、含硒氨基酸(蛋白)、硒糖等几大类(Yan J，et al，J.Chin.Pharm.Sci.2004，13，199-204；Wirth，Molecules.，1998，3，164-166；Hu LM，et al，Phosphorus，Sulfurand Silicon and the Related Elements，2002，177，2785-90；Rao CV，et al，CancerRes.，2001，61，3647-52；Y D，et al，Cancer Res.，2003，63，52-59；Caputo R，et al，Tetrahe-dron Lett.，2007，48，1425-27；)。含硒杂环化合物因其潜在的药理学活性以及独特的化学性质引起越来越的重视。因此，寻找新的有机硒化合物并研究其抗肿瘤活性和机制，是当今化学、生物与相关学科交叉的研究前沿。

硒的抗氧化活性是其生化作用的基础。机体抗氧化防御能力下降，活性氧代谢失衡是导致多种疾病的主要原因。含硒蛋白GSH-Px是一种能使有害的过氧化物(ROOH)及双氧水还原成无害的羟基化合物和水的过氧化物酶，保护细胞膜等的结构和功能不受过氧化物的干扰和损伤。研究发现Ebselen明显地抑制VC/GSH-Fe²⁺诱导的大鼠微粒体脂质过氧化作用，Ebselen不仅抗氧化活性高，而且毒性低，是目前公认的模拟GSH-Px最成功的小分子化合物，现已进入三期临床研究(Mueller Armin，et al，Biochemical Pharmacology，1984，33，3235-39)。

抗肿瘤活性是硒化合物最重要的生物学功能，流行病理学和临床实验的研究表明硒化合物是一种潜在的防癌治癌药物(LetavayováL，Toxicology，2006，227，1-14；Sinha R，et al，Curr Cancer Drug Targets，2004，4，13-28；El-Bayoumy K，Mutat Res.，2004，551，181-97)。硒化合物通过细胞毒性作用、清除自由基、诱导细胞凋亡、调节机体免疫功能、阻断癌细胞分裂增殖的信息传递、抑制新生血管的生成和改变某些致癌物代谢过程等机制起到抗肿瘤的作用(G Mugesh，et al，Chem.Rev.，2001，101，2125-79)。许多硒唑衍生物在体内和体外均表现出奇特的抗肿瘤活性，目前已经报道的2-(4-甲苯)-1，3-硒唑-4-酮能够通过不同的途径有效地诱导卵巢癌细胞SKOV3和血癌细胞HL60凋亡(Ahn HJ，Journal ofCellular Biochemistry，2006，99，807-815)。硒吩衍生物D-501036通过p53关连的线粒体途径诱导癌细胞凋亡(Shiah HS，Biochemical Pharmacology，2007，73，610-619)。有机硒化合物因其特异的功能和作用，在治疗癌症方面有着良好的前景，还有许多疾病也可以经由它进行治疗，是目前药物研究的热点。各种新型有机硒化合物正在不断的被合成出来，现有的也正在被逐步阐明其药理作用，有望成为高效低毒的新型药物，利用硒独特的化学和生物学性质来开发新的治疗药物已越来越引起人们的关注。

而前人关于1，2，5-硒二唑的研究主要集中于化合物的液相合成、光谱性质、硒含量的测定、抗菌能力等，对其抗肿瘤活性与机制的研究相对较少。Shealy等通过开环反应合成了7种1，2，5-硒二唑衍生物，其中4种胺基硒二唑化合物对人口腔上皮癌细胞KB有强的细胞毒性，对老鼠S180(肉瘤)和L1210(淋巴癌)的体内实验也表明胺基硒二唑衍生物比嘧啶衍生物具有较高的细胞毒性(Shealy Y，et al，Journal of Heterocyclic Chemistry，1967，4，96-101)。Endo等合成的嘧啶硒二唑衍生物对老鼠的血癌的抑制作用较低(Endo H，et al，Sci.Rept.Res.Inst.，1963，11，201-202)。本实验室在前期工作中合成了一系列新型的硒氮芳香杂环化合物，研究了其在抗肿瘤方面的应用，获得了一些列有意义的数据，并申请了专利保护(CN 100497348)。关于分子机制的研究发现，所合成的硒氮芳香杂环化合物能高效、选择性地抑制多种肿瘤细胞的增殖，其机制是通过激活Caspases及Bcl-2家族蛋白、线粒体跨膜电位的消散和细胞氧化损伤而导致细胞凋亡。其中，p53信号通路在细胞凋亡中其中起着重要作用(Chen TF，et al，Biomed.Pharmacother.2008，62，77-84；Chen TF，et al，Chem.Biol.Interact.，2009，180，54-60)。但是，上述有机硒化合物的抗肿瘤活性均有进一步改进的空间。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物。

本发明的另一目的在于提供所述具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供所述具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物，其化学结构如式I所示：

(式I)；

其中，R₁为-H或-NO₂；R₂为-H、-NO₂或

且R₁和R₂不能同时为H；

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物优选如式II所示的5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑、如式III所示5，6-二硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑、或如式IV所示的5-(3，4-二氨基苯)-苯并[c][1，2，5]硒二唑；

(式II) (式III) (式IV)；

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，包括如下步骤：将邻二胺类化合物与二氧化硒通过液相或固相反应合成得到；更优选为邻二胺类化合物与二氧化硒按摩尔比为1∶1～2反应，接着通过重结晶或洗涤等方法提纯，得到具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物；

所述的邻二胺类化合物优选为4-硝基邻苯二胺、4，5-二硝基邻苯二胺或3，3′，4，4′-联苯四胺；

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物为5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑(简称为NS)时，其制备方法优选如下：将4-硝基邻苯二胺溶解于乙醇中，接着加入等摩尔量的二氧化硒，于80～90℃回流反应2～4小时，得到5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑；

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物为5，6-二硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑(简称为DNS)时，其制备方法优选如下：将4，5-二硝基邻苯二胺与等物质的量的二氧化硒研磨，再用乙醇重结晶，得到5，6-二硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑；

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物为5-(3，4-二氨基苯)-苯并[c][1，2，5]硒二唑(简称为BSBD)时，其制备方法优选如下：取相当于二氧化硒物质两倍摩尔量的3，3′，4，4′-联苯四胺溶于1～2mol/L的盐酸溶液中，加入二氧化硒水溶液，反应2～4h后过滤，滤液用氢氧化钠溶液调节至弱碱性，析出的产物为5-(3，4-二氨基苯)-苯并[c][1，2，5]硒二唑；

所述的氢氧化钠溶液优选为饱和的氢氧化钠溶液；

所述的弱碱性优选为pH值为8～9；

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物在抗肿瘤药物和/或抗氧化药物中的应用。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

(1)本发明所述的苯并硒二唑衍生物具有良好的抗肿瘤及抗氧化活性。以BSBD为例，其抗肿瘤活性显著高于前人已报道的硒杂环化合物、常用硒化合物亚硒酸钠及常规抗肿瘤药物顺铂。

(2)本发明所述的的硒二唑衍生物具有高的抗氧化活性，其抗氧化活性明显的高于常规阳性对照水溶性维生素E(Trolox)。

(3)本发明所述的制备方法简单，得到的苯并硒二唑衍生物产率高。

附图说明

图1是BSBD对ABTS和DPPH反应体系吸收光谱的影响曲线图，其中

图a为ABTS反应体系；图b为DPPH反应体系。

图2是NS处理对肿瘤细胞存活率的影响柱形图。

图3是DNS处理对肿瘤细胞存活率的影响柱形图。

图4是BSBD处理对肿瘤细胞存活率的影响柱形图。

图5是NS、DNS和BSBD分别对Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞形貌的影响图。

图6是NS、DNS和BSBD分别对PC-3人前列腺癌细胞形貌的影响图。

图7是流式细胞分析法检测所合成化合物诱导的细胞凋亡图。

图8是TUNEL-DAPI共染法检测BSBD诱导的肿瘤细胞凋亡图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑(简称为NS)的制备

在三口烧瓶中加入1mmol 4-硝基邻苯二胺，再加入95％(v/v)乙醇使其完全溶解，加热搅拌，逐滴加入溶解于少许水中的等摩尔量的SeO₂，升温至85℃回流，反应3小时后析出大量土黄色沉淀，抽滤，95％的乙醇洗涤三次，干燥得土黄色固体，产率80％(质量百分比)。ESI-MS(CH₃OH)：m/z 227.1((M-H)，100％).¹H NMR(DMSO)：δ8.8(s 1H)，δ8.2(m 1H)，8.1(d 1H).IR特征峰(KBr)，υ/cm^-1：449，527，560(υ_N-Se-N).UV-Vis(DMSO)：λ_max 351nm.荧光发射峰(DMSO和水)：λ_max 689nm。

实施例2：5，6-二硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑(简称为DNS)的制备

取1mmol 4，5-二硝基邻苯二胺于玛瑙研钵中，再加入1mmol研成细粉的SeO₂固体，接着于室温下研磨半小时，再将研磨后的混合物转移到95％(v/v)的乙醇溶液中，加热使沉淀完全溶解，热过滤除去不溶物，滤液冷却后析出黄灰色针状晶体，产率80％(质量百分比)。ESI-MS(CH₃OH)：m/z 274.2((M-H)-，100％).¹H NMR(DMSO)：δ9.2(m 1H)，δ9.0(m 1H).IR特征峰(KBr)，υ/cm^-1：437，583(υ_N-Se-N).UV-Vis(DMSO)：λ_max 364nm。

实施例3：5-(3，4-二氨基苯)-苯并[c][1，2，5]硒二唑(简称为BSBD)的制备

在单口烧瓶中称取2mmol 3，3′，4，4′-联苯四胺，加入1.5mol/L的盐酸溶液使其完全溶解，室温下逐滴加入1mmol SeO₂水溶液，反应2h后过滤除杂，滤液在冰浴搅拌条件下用饱和的NaOH溶液调节至pH值为8，析出土灰色沉淀，抽滤，所得固体用少量水洗涤数次后真空干燥，即得所要产品，产率60％(质量百分比)。ESI-MS(CH₃OH)：m/z 291.1((M+H)⁺，100％).¹H NMR(DMSO)：δ7.8(m1H)，δ7.0(m 1H)，δ6.6(m 1H)，δ4.8(s 1H)，δ4.6(s 1H)，δ3.3(d 1H).IR特征峰(KBr)，υ/cm^-1：455，671(υ_N-Se-N).UV-Vis(DMSO)：λ_max 467nm.荧光发射峰(DMSO和水)：λ_max 669nm.

实施例4：抗氧化活性测试

(1)ABTS(2，2-连氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐)可被K₂S₂O₈、MnO₂、ABAP和H₂O₂等各种试剂氧化，生成蓝绿色的自由基阳离子ABTS·⁺。ABTS·⁺相当稳定，在414、645、734和805nm处有最大吸收峰。在有供氢能力的抗氧化剂(如酚类物质)存在下，ABTS·⁺与之反应，变成没有颜色的ABTS。抗氧化剂清除ABTS·⁺的能力可用414或734nm处吸光度的变化测量。

用0.5mol/L pH 7.4的PBS配制5mM的ABTS储液，在储备液中加入足量MnO₂，漩涡震荡使ABTS与MnO₂充分反应后用0.2μm的PVDF膜过滤，再用PBS(pH＝7.4)稀释到734nm处吸光度为0.70±0.02，得到ABTS反应溶液，-20℃保存备用。用二甲基亚砜(DMSO)将NS、DNS和BSBD分别稀释成不同浓度的样品；于10mL比色管中分别加入50μL不同浓度的样品或参比溶液(DMSO)，再分别加入3mL的ABTS反应溶液，振荡摇匀，于室温下避光静置6分钟，测定溶液在734nm处的吸光值，并扫描UV-Vis光谱。

(2)DPPH·(2，2’-diphenyl-1-picrylhydrazyl，2，2-二苯代苦味酰基苯肼)是一种稳定的自由基，其有机溶剂中显紫色，在515nm处有最大吸收。当反应体系中存在抗氧化剂时，抗氧化剂提供氢原子和电子给DPPH自由基，使其生成无色产物，导致溶液的特征吸收峰下降，吸光值变小。在此反应中，体系颜色变得越浅表明所检测物质的抗氧化能力越强。

准确称取DPPH粉末，用甲醇溶解配制6mmol/L储备液，-20℃保存，临用前用甲醇稀释至60μmol/L。用二甲基亚砜(DMSO)将NS、DNS和BSBD分别稀释成不同浓度的样品；于10mL比色管中加入分别50μL不同浓度的样品或参比溶液(DMSO)，再加入3mL的60μmol/L DPPH甲醇溶液，振荡摇匀，于室温下避光静置30分钟，然后测定溶液在515nm处的吸光值，并扫描UV-Vis光谱。

抗氧化活性测试的结果显示：所合成的BSBD的抗氧化活性明显的高于常规阳性对照水溶性维生素E(Trolox)(如图1所示)，其TEAC(当量抗氧化能力)值为2.76，EC₅₀值为0.9μmol/L。TEAC即被测抗氧化剂清除ABTS·⁺的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂Trolox清除ABTS·⁺的能力的比值，具体是指浓度为1mmol·L^-1的受试物质相当于产生相同清除ABTS·⁺效果的Trolox的浓度。Trolox的TEAC值是1。同样的，NS与DNS亦具有不同程度的抗氧化活性。例如，NS的浓度为0.02mM时，清除ABTS自由基达16.8％，DNS在0.02mM时清除9.5％的ABTS自由基。NS清除DPPH自由基的EC₅₀值为4.45mM。从上可看出，所合成的硒化合物均能明显的抑制ABTS及DPPH自由基的形成，具有不同程度的抗氧化活性。

实施例5：抗肿瘤活性的检测

(1)MTT法检测：试验所使用的细胞株均为购自ATCC公司的国际通用的肿瘤细胞株，即A-375黑色素瘤细胞，Hela-229宫颈癌细胞，MCF-7人乳腺癌细胞，Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞，PC-3人前列腺癌细胞和MG-63人骨髓瘤细胞。

各种肿瘤细胞分别以3×10⁴个/mL接种于96孔板，每孔100μL，每组设6个重复。接种细胞24h后分别加入不同浓度的NS、DNS和BSBD，并继续培养72h。然后每孔加入5mg/ml MTT 20μL，继续培养5h，再吸去上清培养基，加入DMSO 150μL/孔，振荡5min后于自动酶标仪上测定570nm处的吸光值。同时计算所测试化合物对各种肿瘤细胞的生长抑制率(％)＝(空白对照组平均OD值一实验组平均OD值)/空白对照组平均OD值×100％。结果如表1和图2～4所示，NS、DNS和BSBD能很好的抑制A-375黑色素瘤细胞，Hela-229宫颈癌细胞，MCF-7人乳腺癌细胞，Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞，PC-3人前列腺癌细胞和MG-63人骨髓瘤细胞的生长，且表现为剂量依赖关系。其中5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑(NS)的抗肿瘤活性最强。

表1苯并硒二唑衍生物抗肿瘤活性(μg/ml)

*化合物I为：1，2，5-硒二唑并[3，4-d]-5，7-(4H，6H)酮；

化合物II为：1，2，5-硒二唑并[3，4-d]-7-(5H，6H)酮；

化合物III为：2-疏基-1，2，5硒二唑并[3，4-d]嘧啶-7(6H)酮。

“-”表示所在的细胞株未测其IC₅₀值。

(2)本发明还观察了不同浓度硒二唑衍生物作用下Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞和PC-3人前列腺癌细胞的形态学变化(图5和图6)。结果表明，药物作用处理后，细胞的形态发生明显的变化：细胞数量的减少、细胞脱落、细胞表面绒毛消失、固缩、变圆，并伴有明显的凋亡小体出现。这些结果说明，所合成化合物主要通过诱导肿瘤细胞凋亡而抑制细胞生长。

(3)本发明用流式细胞仪进行细胞周期分析。流式细胞仪用于分析观察是否在G1峰前出现凋亡特有的凋亡峰(Sub-G1 phase)，计算该峰细胞占总细胞的百分数，即为凋亡百分数(AP：％)。实验采用PI染色，在Beckman Coulter EpicsXL·MCL流式细胞仪上进行分析。Hela细胞分别用不同浓度的NS、DNS及BSBC处理72小时后，离心收集细胞，用PBS清洗两次，加入70％乙醇，-20℃放置固定过夜，离心，清洗后进行细胞PI染色。DNA含量测定利用Beckman流式细胞分析仪(Beckman Coulter Epics XL MCL flow cytometer，Miami，FL)。细胞周期分布利用软件MultiCycle(Phoenix Flow Systems，San Diego，CA)。用DNA柱状图表示细胞在G0/G1、S和G2/M各相的分布比例，。凋亡细胞亚二倍体DNA含量测定通过定量图中sub-G1峰测得。每个样品分析10000颗细胞。本发明的实验结果如图7所示。所合成的苯并硒二唑衍生物能显著地诱导Hela宫颈癌细胞凋亡峰的出现，且呈剂量效应，这提示所合成的化合物是通过诱导细胞凋亡而抑制肿瘤细胞生长的。

(4)本发明还采TUNEL法进一步确认所合成的苯并硒二唑衍生物诱导的肿瘤细胞凋亡。TUNEL技术是目前原位检测细胞凋亡最敏感、快速、特异的新方法，已广泛用于生物、医学研究领域。以化合物BSBD对Hela宫颈癌细胞的作用为例进行试验，Hela细胞分别用不同浓度的BSBC处理24小时后，用PBS清洗两次，细胞在含3.7％的甲醛和0.1％ TritonX-100的PBS缓冲液的细胞培养片中孵育10分钟，再将细胞在含100μL/well TUNEL(核苷酸与末端脱氧核苷酸转移酶)细胞培养板中培养1小时。PBS清洗后在1μg/ml的DAPI中孵育15分钟。最后以PBS溶液洗涤后用荧光显微镜(Nikon Eclipse 80i)检测。结果如图8所示，在荧光显微镜下，正常细胞无荧光；凋亡细胞发出绿色荧光，且荧光强度随硒化合物浓度的增加而增加，这说明BSBD能有效的诱导Hela细胞凋亡。

(5)本发明还比较了所合成的化合物NS、DNS和BSBD与专利CN100497348中的三个1，2，5-硒二唑衍生物：1，2，5-硒二唑并[3，4-d]-5，7-(4H，6H)酮、1，2，5-硒二唑并[3，4-d]-7-(5H，6H)酮和2-疏基-1，2，5硒二唑并[3，4-d]嘧啶-7(6H)酮的抗肿瘤活性。结果如表1所示，本发明所合成的化合物其抗肿瘤活性优于专利100497348中的三个化合物。

(6)本发明还比较了所合成的化合物NS、DNS和BSBD与常用的硒化合物亚硒酸钠及常规抗肿瘤药物顺铂的体外抗肿瘤活性。结果如表1所示，NS及DNS的抗肿瘤活性明显优于亚硒酸钠及顺铂。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物，其特征在于其化学结构如式I所示：

(式I)；

其中，R₁为-H或-NO₂；R₂为-H、-NO₂或

且R₁和R₂不能同时为H。

2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物，其特征在于：

所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物为如式II所示的5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑、如式III所示5，6-二硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑、或如式IV所示的5-(3，4-二氨基苯)-苯并[c][1，2，5]硒二唑；

(式II) (式III) (式IV)。

3.权利要求1或2所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：将邻二胺类化合物与二氧化硒通过液相或固相反应合成得到具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物。

4.根据权利要求3所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，其特征在于：将邻二胺类化合物与二氧化硒按摩尔比为1∶1～2反应，接着通过重结晶或洗涤等方法提纯，得到具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物。

5.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，其特征在于：所述的邻二胺类化合物为4-硝基邻苯二胺、4，5-二硝基邻苯二胺或3，3′，4，4′-联苯四胺。

6.根据权利要求5所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，其特征在于：所述的邻二胺类化合物为4-硝基邻苯二胺时，是将4-硝基邻苯二胺溶解于乙醇中，接着加入等摩尔量的二氧化硒，于80～90℃回流反应2～4小时，得到5-硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑。

7.根据权利要求5所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，其特征在于：所述的邻二胺类化合物为4，5-二硝基邻苯二胺时，是将4，5-二硝基邻苯二胺与等物质的量的二氧化硒研磨，再用乙醇重结晶，得到5，6-二硝基苯并[c][1，2，5]硒二唑。

8.根据权利要求5所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物的制备方法，其特征在于：所述的邻二胺类化合物为3，3′，4，4′-联苯四胺时，是取相当于二氧化硒物质两倍摩尔量的3，3′，4，4′-联苯四胺溶于1～2mol/L的盐酸溶液中，加入二氧化硒水溶液，反应2～4h后过滤，滤液用饱和的氢氧化钠溶液调节至弱碱性，析出的产物为5-(3，4-二氨基苯)-苯并[c][1，2，5]硒二唑。

9.权利要求1或2所述的具有抗肿瘤及抗氧化活性的苯并硒二唑衍生物在抗肿瘤药物和/或抗氧化药物中的应用。