CN102283102B - 一种抗病甘蓝的育种及制种方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种甘蓝的育种和制种方法，尤其是一种抗病甘蓝的育种及制种方法，属于植物育种培育技术领域。本发明在甘蓝的育种阶段创造易发病的环境条件，选育出耐高温、高湿，抗病性强的杂交种，相较于常规育种方法，由被动测定品质优劣转变为主动筛选优良品种，可控性高。在抗病性鉴定方面，相较于人工接种的方法更加全面准确、简便易行。

Description

一种抗病甘蓝的育种及制种方法

技术领域

本发明涉及一种甘蓝的育种和制种方法，尤其是一种抗病甘蓝的育种及制种方法，属于植物育种制种技术领域。

背景技术

甘蓝是我国各地普遍种植的一种重要蔬菜，在蔬菜栽培和供应中占有重要地位。到目前为止，虽然我国甘蓝抗病育种工作取得了很大进展和显著的成果，但从当前蔬菜生产和市场需求来看，以及与发达国家的甘蓝遗传育种先进技术相比，还存在一定的差距。近年来随着消费需求的变化，设施栽培和反季节栽培面积逐年扩大，这对甘蓝品种提出了更高的要求。如抗病性方面，就夏秋甘蓝而言，北方主要要求抗黑腐病、病毒病、霜霉病及干烧心等，而南方则主要要求抗黑腐病、根肿病、软腐病、菌核病等（见参考文献：司军，李成琼，任雪松.我国甘蓝抗病育种研究进展和展望.北方园艺，2001（1）：10~12）。目前利用自交不亲和系配制甘蓝杂交种常用的方法和技术路线是：根据杂种优势和抗病育种原理，通过连续多代自交分离、定向选择，选育出稳定的甘蓝自交不亲和系，再配制出杂交种,也就是在夏秋季露地栽培条件下，对后代群体进行田间种植比较，选择抗逆、抗病性强，农艺性状优良的单株，到翌年春季进行自交留种，如此连续多代的自交分离和定向选择，育成稳定的自交不亲和系，再利用这些稳定的自交不亲和系进行配合力测定。由于育种过程中对后代群体的品比、鉴定筛选是在露地栽培条件下进行，虽然在自然条件下, 病原种类多而复杂, 甘蓝材料易受多种病原浸染，但病害发生及发生轻重还与温湿度条件关系很大，因此露地栽培条件下存在着抗逆性、抗病性不明显，品质性状不突出等问题。虽然也有通过苗期人工接种方法，对甘蓝材料进行抗病性鉴定，但这样的方法不仅费工，麻烦，而且往往只能接种一种或两种病害，治标不治本，目前有报道的甘蓝人工接种最多只对芜菁花叶病毒（TuMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）和黑腐病这3 种病害的抗性联合鉴定方法进行了研究与利用。而且人工接种的抗病性表现常受到接种方法、病原物浓度、温湿度、苗龄等影响，有时尚不能确切反映成株期的抗病性（参考文献：李树德主编. 中国主要蔬菜抗病育种进展[ C] . 北京: 科学出版社, 1995. 613）。

发明内容

    本发明要解决的技术问题是：针对现有技术存在的缺陷，提出一

种抗病甘蓝的育种方法及其种子的培育方法,育成具有较强抗病性的品种。

本发明通过以下基本技术方案实现：一种抗病甘蓝的育种方法，包括以下步骤：

步骤一，选育母本，由“H-60”甘蓝品种在大棚中经过连续5代自交纯化、定向选择，得到的稳定自交不亲和系（99-2-1-3-5）作为母本； 

步骤二，选育父本，由“强力50”甘蓝品种在大棚中经过连续5代自交纯化、定向选择，得到的稳定自交不亲和系（02-7）作为父本；

步骤三，培育杂交种 ，将所述母本（99-2-1-3-5）与所述父本（02-7）采取空间隔离、人工授粉进行配种，得到抗病甘蓝的杂交种子。

进一步地，所述大棚内的相对湿度控制在75%-85%，温度为22℃-30℃。 所述自交方式为春季花期、蕾期自交，每代自交后的种子于秋季播种育苗，再定植于大棚中进行品比鉴定，从中筛选出生长势旺、抗病性强、农艺性状好的单株留种。所述步骤一和步骤二分别在第3代自交纯化、定向选择之后，进行品质测定和自交不亲和指数测定，选择总糖含量≥3.50% 、VC含量 ≥410.0 mg·kg^-1、粗蛋白含量≥1.35%、粗纤维含量≤0.55%和花期自交亲和指数≤1、蕾期自交亲和指数≥5的单株继续进行自交纯化、定向选择。

本发明对上述抗病甘蓝的杂交制种方法，包括以下步骤：

步骤一，8月上旬，将所述母本和父本（99-2-1-3-5和02-7）播种育苗；

步骤二，待出苗后搭建荫棚，防暴雨、烈日；

步骤三，当苗具有7-8片叶子时，将所述母本和父本按行比1：1定植，每亩定植总株数为2000±20株；

步骤四，在苗期至开花期，拔除不符合亲本典型特征的杂株、弱株；

步骤五，开花期每亩放蜜蜂2－3箱；

步骤六，待70％种荚变黄干枯时，在晨露未干时收获，后熟2～3 天后， 晒干、脱粒，脱下的种子及时晾晒、扬净。    

本发明在甘蓝的育种阶段人为创造多种病害易发病的温、湿度条件, 在此环境中选育出的杂交种不仅抗病性强, 而且可根据育种目标进行相关性状选择, 对于选配抗病及多育种目标品种能够起到快速、准确、高效的目的。相对于常规育种方法，由被动测定品质优劣转变为主动筛选优良品种，可控性高；在抗病性鉴定方面，本发明的方法相较于人工接种的方法更加全面准确、简便易行。

附图说明

   下面结合附图对本产品作进一步的说明。

图1 为本发明一个杂交实施例的过程模式图。

具体实施方式

实施例一

材料：H-60（来源：日本野崎采种场，镇江瑞繁农艺有限公司有售），强力50（来源：日本小林公司，武汉九头鸟种业公司有售）。

本实施例的过程模式见图1，具体是按以下步骤育种的：

步骤一，选育母本，育种初始1998年秋季将H-60甘蓝播种、栽培，从中选择长势好、叶球圆整、抗病性强的优良单株进行留种，在翌年春季进行花期和蕾期自交获得种子，1999年秋季将获得的种子播种，然后定植于大棚内，共定植了42株，人为控制棚内相对湿度在75%-85%，温度为22℃-30℃。成株期从42株中选择长势好、叶球圆整、抗病性强的优良单株继续留种，翌年春季进行花期和蕾期自交获得种子，当年秋季再将获得的种子播种，然后定植于大棚内，进行品比、鉴定，选择优良单株继续留种，如此连续多代自交纯化、定向选择，在第3代基本性状稳定后，进行品质测定，并结合留种进行自交不亲和性测定，选择品质好，即总糖含量≥3.50% ，VC含量 ≥410.0 mg·kg^-1，粗蛋白含量≥1.35%，粗纤维含量≤0.55%，且花期自交亲和指数≤1，而蕾期自交亲和指数≥5、的单株继续自交纯化、定向选择，到第五代选育出农艺性状好、抗病性强、自交不亲和性稳定的自交不亲和系99-2-1-3-5，该自交不亲和系99-2-1-3-5的植株开展度52～54 cm，外叶数14～15片，长势旺，耐热性、耐湿性强，较抗病，叶球扁圆，整齐，结球紧实，单球重1.15 kg左右，总糖含量3.57% ，VC 422.3 mg·kg^-1，粗蛋白1.39%，粗纤维0.54%，外观整齐。全生育期60天左右，花期和蕾期自交亲和指数分别为0.35和9.6（上述自交纯化、定向选择的含义参见本领域工具书，此处不展开描述；上述农艺性状是指：外叶数、开展度、株高、叶球颜色、球形、中心柱长和宽、叶球长和宽、单球重、紧实度）。

步骤二，选育父本，育种初始1998年秋季将强力50甘蓝播种、栽培，从中选择长势好、叶球圆整、抗病性强的优良单株进行留种，在翌年春季进行花期和蕾期自交获得种子，1999年秋季将获得的种子播种，然后定植于大棚内，共定植了55株，人为控制棚内相对湿度在75%-85%，温度为22℃-30℃。成株期从55株中选择长势好、叶球圆整、抗病性强的优良单株继续留种，翌年春季进行花期和蕾期自交获得种子，当年秋季再将获得的种子播种，然后定植于大棚内，进行品比、鉴定，选择优良单株继续留种，如此连续多代自交纯化、定向选择，在第3代基本性状稳定后，进行品质测定，并结合留种进行自交不亲和性测定，选择花期自交亲和指数≤1，而蕾期自交亲和指数≥5、且品质好（总糖含量≥3.50% ，VC含量 ≥410.0 mg·kg^-1，粗蛋白含量≥1.35%，粗纤维含量≤0.55%）的单株继续自交纯化、定向选择，到第五代选育出农艺性状好、抗病性强、自交不亲和性稳定的自交不亲和系，命名为02-7，作为父本，该自交不亲和系02-7的植株开展度50～52 cm，外叶数12～13片，抗逆性强，抗病毒病、黑腐病，耐热性、耐湿性强、不易裂球、较高产，叶球高扁圆，平均单球重1.1 kg，总糖含量3.60% ，VC 436.5 mg·kg^-1，粗蛋白1.37%，粗纤维0.51%。全生育期56天。花期和蕾期自交亲和指数分别为0.48和11.9；

步骤三，培育杂交种 ， 2004年春季，选择已稳定、优良甘蓝自交不亲和系99-2-1-3-5和02-7配制杂交组合，进行配合力测定，经试种品比，该组合的正反交均表现抗逆、抗病性强，品质好，产量高。

按以下方法对上述杂交种进行制种：

步骤一，8月上旬，将父、母本02-7和99-2-1-3-5进行播种育苗；

步骤二，待出苗后搭建荫棚，防暴雨、烈日；

步骤三，苗具7-8叶时，父母本按行比1：1定植，每亩定植总株数为2000±20株；

步骤四，在苗期至开花期，严格检查，拔除不符合亲本典型特征的杂株、弱株；（上述不符合亲本典型特征是指：株型、叶形、叶色、叶缘波纹、球形、花期与亲本不一致）；

步骤五，开花期每亩放蜜蜂2－3箱，提高杂交率和杂交种产量。

步骤六，待70％种荚变黄干枯时，即可在晨露未干时收获，后熟2～3 天后， 晒干、脱粒，脱下的种子及时晾晒、扬净。

将上述所得甘蓝参加了省级品种鉴定试验，定名为瑞甘60，该品种2010年已通过江苏省省级品种鉴定，审定编号：苏鉴甘蓝201002，其主要农艺性状及特征特性如下： 

瑞甘60 植株生长势较旺盛，耐暑、耐湿性强，抗逆性强，抗病毒病、黑腐病。株高29 cm左右，开展度51 cm左右，外叶数15～16片，叶色浅绿，倒卵圆形，叶球高扁圆，结球紧实，绿色，质地脆甜，市场性高，耐裂球，单球重1.3 kg左右，球高12.5 cm左右，横径17.5 cm左右，中心柱长6.5 cm左右，中心柱宽2.7 cm左右。全生育期94 d左右。667m²产量达到4000 kg左右。

为了与人工接种鉴定方法进行比较，2003-2004年对两亲本材料进行了苗期抗黑腐病、软腐病和根肿病3种病害的人工接种鉴定。甘蓝三种病害人工接种抗性鉴定方法详见参考文献：1、张恩慧, 程永安, 许忠民等. 甘蓝3 种病害抗源筛选及抗病品种选育研究. 西北农林科技大学学报，2001，29（6）：30-33中1.1病原的分离提纯-1.2苗期抗性鉴定方法和程序；2、司军,李成琼,宋洪元等. 结球甘蓝对根肿病的抗性鉴定与评价. 西南大学学报，2009，31（6）：26-31中1.2方法。此处不展开描述。结果见表1，可见，两亲本材料对黑腐病、软腐病和根肿病3种病害的抗性均较强，且人工接种与田间大棚条件下抗病性鉴定趋势一致。

       表1. 亲本材料人工接种与田间大棚抗病性鉴定 

品比试验：

以H-60作为对照品种，进行比较，结果见表2-表5

表2 .抗病性比较 

表3.2007～2008年区域试验

表4.2009年省级鉴定试验

表5.品质测定

由上述试验可以得出，由本实施例育出的瑞甘60具有抗病、产量高、品质佳等特性，相对于常规育种方法，由被动测定品质优劣转变为主动筛选优良品种，可控性高。在抗病性鉴定方面，相较于人工接种的方法更加全面准确、简便易行。

除上述实施外，本产品还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本产品发明要求的保护范围。

Claims (2)

1.一种抗病甘蓝的育种方法，包括以下步骤：

步骤一，选择母本，选择自交不亲和系99-2-1-3-5作为母本； 

步骤二，选择父本，选择自交不亲和系02-7作为父本；

步骤三，培育杂交种 ，将所述母本99-2-1-3-5与所述父本02-7采取空间隔离、人工授粉进行配种，得到抗病甘蓝的杂交种子。

2.权利要求1的抗病甘蓝的制种方法，包括以下步骤：

步骤一，8月上旬，将母本99-2-1-3-5和父本02-7播种育苗；

步骤二，待出苗后搭建荫棚，防暴雨、烈日；

步骤三，当苗具有7-8片叶子时，将所述母本和父本按行比1：1定植，每亩定植总株数为2000±20株；

步骤四，在苗期至开花期，拔除不符合亲本典型特征的杂株、弱株；

步骤五，开花期每亩放蜜蜂2－3箱；

步骤六，待70％种荚变黄和干枯时，在晨露未干时收获，后熟2～3 天后， 晒干、脱粒，脱下的种子及时晾晒、扬净。