CN102090179A - 乌头种子的处理方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于药材栽培领域，尤其是涉及一种乌头种子的处理方法，本发明方法可提高种子的发芽率。具体地，将乌头种子置于3-7℃储藏10-15h后，再在12-18℃储藏10-15h，交替进行。采用变温培养发芽率可达到82.5％。再辅以赤霉素浸泡种子处理可进一步提高发芽率，使乌头繁殖有性化成为可能，该方法有利于提高繁殖系数，降低生产成本，更新和复壮乌头种源，增强抗性。而且采用本发明处理方法可明显缩短种胚发育时间；发明人肉眼观察，经过变温处理的乌头芽苗比室温及4℃低温处理的芽苗，要整齐和健壮得多，芽苗移栽后成活率也明显较高。

Description

乌头种子的处理方法
技术领域
本发明属于药材栽培领域，尤其是涉及一种乌头种子的处理方法。
背景技术
川乌和附子为常用中药材，川乌来源于毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliDebx.的母根，附子来源于乌头块根的加工品。乌头多生长于山地草坡或灌丛；分布于长江中、下游，北至秦岭和山东东部、南至广西北部；栽培于平地肥沃的沙质土壤，主要在四川江油、平武、青川、北川、安县、布拖等地进行栽培繁殖。
传统生产上长期采用高山无性繁殖，但易导致种源变异和种性退化。采用有性繁殖时主要的应用瓶颈在于种子的处理，以使其正常发芽。陈瑛在《实用中药种子技术手册》[人民卫生出版社1999：(31-32)(43)]中指出，乌头种子要求-3.4～4.2℃低温持续130d才能完成种胚发育，发芽率达76％。现有报道还提及赤霉素对种子发芽有利，但未明确哪种浓度的赤霉素有利于乌头种子发芽。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种乌头种子的处理方法，可提高种子的发芽率。
本发明乌头种子的处理方法是：将乌头种子置于3-7℃储藏10-15h后，再在12-18℃储藏10-15h，交替进行。采用变温培养发芽率可达到82.5％。
进一步地，可以于5℃储藏10-15h后，再在15℃储藏10-15h；也可以于3-7℃储藏12h后，再在12-18℃储藏12h；优选条件为于5℃储藏12h后，再在15℃储藏12h。
具体应用时是将乌头种子置于泥土或细沙中储藏，泥土优选过筛细土。
在乌头种子置于泥土或细沙前，施以多菌灵，干燥是种子培养中的常用灭菌手段，避免部分种子在发芽前因为带菌而发霉烂掉，影响发芽率，一般采用5-10mg·L-1的浓度。
为了进一步提高发芽率，可采用赤霉素浸泡种子，以100-400mg·L-1浸泡效果较好，浓度越高，发芽率越高，但赤霉素超过400mg·L-1发芽率较未添加赤霉素并未提高。采用变温处理及400mg·L-1赤霉素浸泡可实现发芽率达到84％。赤霉素浸泡时间一般为24h。；另浸泡赤霉素步骤应在喷多菌灵之前。
本发明处理方法使乌头繁殖有性化成为可能，该方法有利于提高繁殖系数，降低生产成本，更新和复壮乌头种源，增强抗性。而且采用本发明处理方法可明显缩短种胚发育时间；经发明人肉眼观察，经过变温处理的乌头芽苗比室温及4℃低温处理的芽苗，要整齐和健壮得多，芽苗移栽后成活率也明显较高。
具体实施方式
以下通过对本发明具体实施方式的描述说明但不限制本发明。
发明人于2008年11月收集四川青川大坝乌头繁殖基地，选取20株株型一致的主栽品种，混合采集成熟种子，经四川省中医药科学院舒光明研究员鉴定为南瓜叶乌头AconitumcarmichaeliDebx.发明人对种子储存的温度条件及赤霉素浓度进行考察。
首先，发明人对对赤霉素浓度进行考察，过程如下：
2008年12月中旬，配置0、300、400、500、600、700mg·L-16个质量浓度赤霉素水溶液，分别取500粒种子，分别浸泡24h，自来水冲洗后蒸馏水冲洗1次，晾干，5mg·L-1多菌灵喷雾，晾干后用瓷盘层积于湿沙中，存放于4℃冰箱，湿润沙以揉成团但不滴水为准。每个处理重复3次。2009年3月中旬取出统计发芽种子数，计算发芽率＝(各处理发芽种子数/各处理种子总数)×100％。[计算方法参见①陈瑛实用中药种子技术手册[M].北京：人民卫生出版社，1999：31～32.，②喻才员，孔迪红，万承永.不同催芽方法破除青榨槭种子休眠的影响分析[J].林业建设，2007，4：29～30]。试验数据用DPS9.5标准版软件进行方差分析和LSD法多重比较，发芽率及方差分析见表1。
表16个质量浓度赤霉素及方差分析结果
Figure B2009103114323D0000021
(A、B、C分别表示0.01水平上多重比较达显著水平)
6种质量浓度赤霉素处理间差异极显著(F＝18.56)，多重比较结果表明，400mg·L-1赤霉素质量浓度处理的种子发芽率最高(80.60％)，其次为300mg·L-1浓度，二者之间差异不显著，但极显著高于未添加赤霉素处理(65.83％)，且极显著高于其他更高浓度的赤霉素处理。500、600、700mg·L-1赤霉素浓度过高，不但未能提高发芽率，反而比未添加赤霉素的处理发芽率略降低。说明，添加适当浓度的赤霉素有利于提高乌头种子发芽率，浓度以不高于400mg·L-1为宜。
研究同期，发明人对种子储存的温度条件进行了考察，同时还对比了0mg·L-1、400mg·L-12个质量浓度的赤霉素水溶液的发芽率。实验方法及结果见下：
2008年12月中旬，取500粒种子，分别取500粒种子，在0mg·L-1、400mg·L-12个质量浓度的赤霉素水溶液浸泡24h，自来水冲洗后，蒸馏水冲洗1次，晾干，以5mg·L-1多菌灵喷雾，晾干后用瓷盘层积于湿沙中，分别存放于5℃12h、15℃12h培养箱中变温储存，4℃冰箱储存，室温储存3个培养条件下，润湿沙以揉成团但不滴水为准。每个处理重复3次。2009年3月中旬取出统计发芽种子数，计算发芽率＝(各处理发芽种子数/各处理种子总数)×100％。[计算方法参见①陈瑛实用中药种子技术手册[M].北京：人民卫生出版社，1999：31～32.，②喻才员，孔迪红，万承永.不同催芽方法破除青榨槭种子休眠的影响分析[J].林业建设，2007，4：29～30]。试验数据用DPS9.5标准版软件进行方差分析和LSD法多重比较，发芽率及方差分析结果分别见表2表3。
表2不同温度下2种赤霉素浓度处理发芽率均值
Figure B2009103114323D0000031
(A、B、C分别表示0.01水平上多重比较达显著水平)
表3不同温度下2种赤霉素浓度处理发芽率两因素方差分析结果
  变异来源   平方和   自由度   均方   F值   P值
  区组间   133.92   2   66.96   2.63   0.1212
  不同温度间   4752.12   2   2376.06   93.18   0.0000
  不同赤霉素浓度间   286.40   1   286.40   11.23   0.0073
  温度×赤霉素子   126.39   2   63.19   2.48   0.1336
  误差   255.01   10   25.50
  总变异   5553.85   17
由表2可见，3种温度之间差异达极显著水平(F＝93.18)，其中5～15℃处理的种子发芽率平均值为83.42％，极显著高于4℃处理的种子发芽率平均值73.22％，二者也极显著高于室温下种子发芽率(45.00％)，结果表明，5～15℃处理的种子发芽率最高，其次为4℃处理的种子，室温下种子发芽率较低。
400mg·L-1赤霉素浓度处理后，在5～15℃之间变温处理的种子与4℃处理的种子发芽率均大于80％，差异不显著，但都极显著高于室温下种子发芽率(48.67％)；0mg·L-1赤霉素浓度处理后，在5～15℃之间变温处理的种子发芽率平均值为82.50％，极显著高于4℃处理的种子发芽率平均值65.83％，二者极显著高于室温下种子发芽率41.33％。这一结果表明，经400mg·L-1赤霉素浸种的种子在5～15℃温度区间范围内受处理温度的影响明显小于未经赤霉素浸种处理，说明赤霉素浸种有利于减小种子受温度变化影响导致发芽率大幅度降低的风险。
由表3可见，2种赤霉素浓度下种子发芽率差异达显著水平(F＝11.23)，其中400mg·L-1赤霉素处理的种子发芽率平均值为71.20％，极显著高于0mg·L-1赤霉素处理的种子发芽率平均值63.22％。其中，5～15℃温度下400mg·L-1、0mg·L-1赤霉素处理发芽率均大于80％，差异不显著，室温下二者均低于50％，差异也不显著，而在4℃下，0mg·L-1赤霉素处理发芽率仅为65.83％，而经400mg·L-1赤霉素处理后，发芽率极显著提高至80.60％。这一结果表明，赤霉素浸种处理比不浸种处理的效果在4℃恒温条件下表现更加明显。
综上分析，据陈瑛报道，乌头种子要求-3.4～4.2℃低温持续130d才能完成种胚发育，发芽率可达76％。发明人研究地在成都，该地区海拔600m左右，12月至3月期间自然温度处理，气温低于4℃的时间较短，不利于乌头种胚发育，发芽率仅为41.33％；经冰箱4℃低温层积处理约90d，种子发芽率达65.83％。5～15℃变温条件下储存约90d，种子发芽率显著提高至82.50％。因此，乌头种子发芽所受长时期低温条件限制并不明显，反而可以在5℃、15℃的变温条件下得到较高的发芽率；而且采用本发明处理方法可明显缩短种胚发育时间。发明人肉眼观察，经过变温处理的乌头芽苗比室温及4℃低温处理的芽苗，要整齐和健壮得多，芽苗移栽后成活率也明显较高。
在5℃与15℃变温处理时，由于培养箱温度并不是随时、绝对保持在5℃和15℃，约有0.5-1℃温度浮动，即实际培养温度应该在3-6℃和14-16℃浮动。
由上述实例可以看出，本发明方法对储藏温度条件进行了改进，可在不添加赤霉素的情况下提高乌头种子的发芽率，同时结合赤霉素处理乌头种子可进一步提高其发芽率，节约了成本，提高了产量，具有极好的应用前景。

Claims (10)

1.乌头种子的处理方法，其特征在于：将乌头种子置于3-7℃储藏10-15h后，再在12-18℃储藏10-15h，交替进行。
2.根据权利要求1所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：将乌头种子置于5℃储藏10-15h后，再在15℃储藏10-15h，交替进行。
3.根据权利要求1所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：将乌头种子置于3-7℃储藏12h后，再在12-18℃储藏12h，交替进行。
4.根据权利要求1所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：将乌头种子置于5℃储藏12h后，再在15℃储藏12h，交替进行。
5.根据权利要求1-4任一项所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：将乌头种子置于泥土或细沙中储藏。
6.根据权利要求5所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：所述泥土采用过筛细土。
7.根据权利要求5所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：将乌头种子置于泥土或细沙前，施以多菌灵，干燥。
8.根据权利要求5所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：乌头种子置于泥土或细沙前采用浓度小于400mg·L-1的赤霉素水溶液浸泡。
9.根据权利要求8所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：乌头种子采用赤霉素浸泡后洗净、干燥。
10.根据权利要求9所述的乌头种子的处理方法，其特征在于：乌头种子干燥后施以多菌灵，干燥。
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