CN102078621B - 调控浆细胞样树突状细胞i型干扰素表达的方法和组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及调控浆细胞样树突状细胞I型干扰素表达的方法和组合物，以及miR-155^*在制备调节pDC细胞生产INF-α用的药物中的用途。本发明还涉及miR-155^*在制备治疗或预防INF-α介导的疾病用的药物中的用途。

Description

调控浆细胞样树突状细胞I型干扰素表达的方法和组合物

技术领域

本发明涉及调控浆细胞样树突状细胞I型干扰素表达的方法和组合物。

背景技术

pDC是一类在免疫应答与免疫耐受中发挥重要作用的免疫细胞，其最突出的功能特点是在病毒刺激下产生大量的I型干扰素，因此又被称为是天然I型干扰素产生细胞(Natural interferon producing cell，IPC)。它在抗病毒、抗HIV感染以及自身免疫反应等方面均发挥十分重要的作用[1]。

通过大量产生I型干扰素、细胞因子、趋化因子以及与其它细胞之间的相互作用等途径，pDC广泛地参与到机体的固有免疫和适应性免疫应答过程中。它可以调控NK、T、B等细胞参与免疫反应的强度、持续时间以及应答方式，从而在肿瘤、感染和自身免疫性疾病过程中均发挥十分重要的功能[6]。研究表明：不同的病毒在初次感染机体时，一般都可诱导pDC产生I型干扰素来抵抗病毒感染，并递呈抗原给T细胞和B细胞诱导特异性的免疫应答。持续性病毒感染患者当再次感染时，pDC的免疫刺激功能降低，从这些病人体内分离的pDC表现出很弱的T细胞刺激增殖作用[7-9]。病毒可通过直接感染[10]或是某种机制使pDC失能[11，12]。HIV感染者和艾滋病人外周血中pDC数目减少，功能降低，而在长时间存活的HIV阳性病人，其外周血pDC的数目与HIV感染者、艾滋病人，甚至正常人相比并未减少反而增多，并有活性的增强。pDC高的HIV感染者其外周血HIV RNA检测到低丰度，甚至检测不到。体内研究证实pDC及其分泌的IFN-α可抑制HIV的复制。进一步的研究发现艾滋病病人外周血pDC低下与巨细胞病毒感染、进展性多灶性淋巴细胞浸润性脑炎和卡氏肺囊虫的发生有关[13，14]。因此，增强pDC分泌IFN-α的试剂可以为有效治疗免疫功能低下所导致的病毒长期感染及HIV感染提供新的途径。

肿瘤引流淋巴结内的pDC促使肿瘤的机体免疫逃逸，而CpG-ODN诱导刺激外周血中的pDC产生的IFN-α可诱导PBMC中的单核细胞、NK细胞和T细胞表达TRAIL/Apo-2L，而且它还可以促进单核细胞、NK细胞和T细胞对肿瘤细胞的杀伤效应[15]。因此，pDC功能的增强也可以用来抗肿瘤。

不同分化阶段和不同刺激诱导的pDC表现出不同的免疫调节功能，pDC功能的异常可引起自身免疫性疾病。许多研究表明pDC在SLE的发病中起了重要的作用。在活动期SLE病人的外周血中发现了可诱导pDC产生IFN-α的诱导因子。在SLE的发病机制中，pDC及其分泌的IFN-α起了关键作用。SLE病人组织损伤产生的凋亡细胞和血清中的自身抗体结合后，形成免疫复合物，刺激pDC产生大量的IFN-α，而分泌的IFN-α可诱导单核细胞向MoDC分化，MoDC摄取凋亡细胞后递呈自身抗原给自身反应性T细胞，并促进自身反应性B细胞的增殖，大量产生自身抗体，自身抗体的产生又加剧了组织的损伤，形成了一个恶性的循环[16]。因此抑制pDC产生过多的IFN-α，可以有效治疗和缓解SLE疾病的发生和进行。此外，机体接触异体抗原后其血循环中pDC可抑制Th1型细胞介导的免疫应答，这使pDC在移植物斥、GVHD等Th1型疾病中同样发挥重要作用[17-19]。

miRNA是一类19-22nt长的不编码蛋白质的单链小分子RNA，广泛存在于真核生物中，主要对靶基因起负调控作用。它通过核酸序列互补结合到靶mRNA的3’UTR区来抑制翻译或促进靶mRNA的降解[2]。随着研究的深入，人们发现miRNA在不同的生物学过程中都发挥着重要的作用。已有的研究表明，在免疫系统中，miRNA参与了包括造血细胞的分化、免疫细胞内的信号传导、免疫细胞抗病毒功能的发挥等一系列免疫学过程[3]，但是miRNA在pDC干扰素产生过程中的功能未有报道。因此，该方向的深入研究将为我们进行相关疾病的预防、诊断和治疗提供新的途径。

发明内容

本申请发现miR-155^*可以显著调控pDC IFN-α的产生水平。因此miR-155^*可能作为一个新的药物干预靶点。特异性的调控miR-155^*的表达水平，可以调节pDC IFN-α的表达，进而调节机体免疫反应，为治疗包括病毒感染、HIV感染、肿瘤、免疫排斥、系统性红斑狼疮等疾病带来新的希望。

本申请的一个目的是提供miR-155^*、其成熟体或抑制体在制备调节pDC细胞生产INF-α用的药物中的用途。

所述药物可含有miR-155^*抑制体，用于负调节pDC细胞生产INF-α。

所述药物也可含有miR-155^*和/或其成熟体，用于正调节pDC细胞生产INF-α。

miR-155^*的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其成熟体单链的序列如SEQ ID NO：2所示。

miR-155^*抑制体可选自合成的经过修饰的miR-155^*的反义链。

所述药物还可还有药学上可接受的载体和/或赋形剂。

所述调节包括促进pDC细胞生产INF-α，也包括抑制pDC细胞生产INF-α。

本申请的另一目的是提供miR-155^*、其成熟体或抑制体在制备治疗或预防INF-α介导的疾病用的药物中的用途。

所述疾病可选自病毒感染；肿瘤；和自身免疫性疾病。

所述药物可含有miR-155^*和/或其成熟体，用于治疗病毒感染或肿瘤。

所述药物可含有miR-155^*抑制体，用于治疗自身免疫性疾病。

miR-155^*的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其成熟体单链的序列如SEQ ID NO：2所示。

miR-155^*抑制体可选自合成的经过修饰的miR-155^*的反义链。

所述药物还可还有药学上可接受的载体和/或赋形剂。

所述病毒感染可选自HIV感染或艾滋病。

所述INF-α介导的疾病还可选自移植排斥和移植物抗宿主病。

所述自身免疫性疾病可选自系统性红斑狼疮。

本申请再一目的是提供一种筛选治疗或预防INF-α介导的疾病用的药物的方法，所述方法包括：

(1)将待测物质加入含有pDC细胞的体系中；和

(2)检测体系中miR-155^*和/或INF-α的表达；

其中，将能使miR-155^*和/或INF-α的表达升高或降低的待测物质作为治疗或预防INF-α介导的疾病用的候选药物。

该方法还包括将候选药物给予患病的动物模型，例如小鼠，以测定该候选药物能否治疗或预防INF-α介导的疾病。

附图说明

图1显示miR-155^*在pDC TLR7通路活化中增加显著。A：分选人外周血pDC，R837刺激4小时后，与不刺激相比，miRNA表达的变化情况；B：在R837刺激pDC过程中，miR-155^*随时间变化情况。以上数据代表三次实验重复。

图2显示miR-155^*能显著促进pDC IFN-α的表达。A：人原代pDC转染抑制体对照和miR-155^*抑制体，R837刺激24小时，miR-155^*及miR-155的表达情况。B：人原代pDC分别转染抑制体对照和miR-155^*抑制体之后，R837刺激24小时，上清中IFN-α的表达情况。该数据代表三次实验重复。

图3显示miR-155^*通过IRAKM的3’UTR端抑制IRAKM基因的表达。A：生物信息学(Targetscan 5.1)预测miR-155^*能够靶向IRAKM的3’UTR端。B：将IRAKM 3’UTR端+36-+1048片段连接到报告基因载体中，与miRNA共转到Hela细胞中，miRNA转染浓度分别为50nM和100nM。24小时后，检测荧光素酶的值。该数据代表三次实验重复。

图4显示报告基因载体和突变质粒构建。

图5显示在pDC中过表达mir-155^*mimic，可以促进pDC产生IFN-α。

具体实施方式

本申请涉及miR-155^*、其成熟体或抑制体在制备调节pDC细胞生产INF-α用的药物中的用途。

本申请涉及miR-155^*、其成熟体或抑制体在制备治疗或预防INF-α介导的疾病用的药物中的用途。

本申请中，miR-155^*的核苷酸序列为UUACGAUUAUACAUCCUC(SEQID NO：1)。miR-155^*的成熟体单链的序列为：5’-CUCCUACAUAUUAGCAUUAACA-3’(SEQ ID NO：2)。miR-155^*的抑制体可选自合成的经过修饰的miR-155^*的反义链。

本文所述术语“调节”包括正调节和负调节，即包括促进pDC细胞生产INF-α，也包括抑制pDC细胞生产INF-α。

本文所用术语“INF-α介导的疾病”包括在疾病的发生、发展、治疗和/或预防过程中INF-α参与其中的疾病。例如，所述疾病包括但不限于各种病毒感染，包括HIV感染或艾滋病；各种肿瘤；移植排斥和GVHD(移植物抗宿主病)；自身免疫性疾病，例如系统性红斑狼疮等。

本文中，通过正调节pDC细胞生产INF-α来实现病毒感染和肿瘤等的预防和治疗。通过负调节pDC细胞产生INF-α来实现移植排斥、GVHD、和自身免疫性疾病的治疗和预防。

本文中的“药物”可包括含有miR-155^*、其成熟体或抑制体的药物组合物，和可包括含有其它miR-155^*抑制剂或激动剂的药物组合物，还可包括也包括含有能够刺激对象体内miR-155^*过表达或抑制其表达的药物组合物。

本申请包括含有含有miR-155^*、其成熟体或抑制体的药物组合物，含有其它miR-155^*抑制剂或激动剂的药物组合物，也包括含有能够刺激对象体内miR-155^*过表达或抑制其表达的药物组合物。

本文中，所述抑制剂可包括miR-155^*抑制体，例如合成的经过修饰的miR-155^*的反义链；所述激动剂可选自合成的经过修饰的miR-155^*模拟类似物。修饰的方式是本领域常规的，修饰方式可以选择不同的方式。本申请中选择的是2′-O-Methylribothymidine修饰。也可从试剂公司购得不同的稳定性修饰。

本发明药物组合物中还含有溶于或分散于药学上可接受的运载体或赋形剂中的一种或多种其它制剂。短语“药学上可接受的”是指当用于动物时，例如人，不会产生副作用、过敏或其它不良反应的分子实体和组合物。通过本文所公开的内容，本领域技术人员将会知道含有至少一种多肽、在某些实施方式中还含有一种或多种其它活性成分的药物组合物的制备，例如见《雷明顿药物科学》第18版，Mack Printing Company，1990(纳入本文参考文献)。另外，对动物(如人)给药，可以理解的是制品应符合无菌、无致热原，总体安全和纯度标准。

本文使用的“药学上可接受的运载体”包括任何和所有的溶剂、分散介质、包衣剂、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(如抗菌剂，抗真菌剂)、等渗剂、吸收延缓剂、盐类、防腐剂、药物、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、增甜剂、调味剂、染料等物质和它们的组合，这是本领域普通技术人员知道的(见例如，《雷明顿药物科学》第18版，Mack Printing Company，1990，1289-1329页，纳入本文参考文献)。除了与活性成分不相容的常规运载体外，认为均可用于治疗或药物组合物中。

给予患病对象本发明组合物的实际剂量由物理和生理因素，如体重、疾病严重性、待治疗疾病的类型、原有和共同的治疗措施、受试者的特发病和给药途径所决定。负责给药的医生将决定组合物中活性成分的浓度和受试者个体的合适剂量。本发明中，所述对象包括哺乳动物，例如人。

某些实施方式中，药物组合物可含有，例如至少约0.001重量％的活性成分。在其它实施方式中，药物组合物可含有例如0.01-99.9重量％、0.01-50重量％、0.01-10重量％等的活性成分。在一个具体实施方式中，给予的药物组合物中活性成分的浓度可为0.01-5mM，例如0.01-3mM、0.05-1mM。给药的方式是常规的，例如，注射等，可由临床医师根据患者的具体情况来确定。

本发明药物组合物可含有各种抗氧化剂以防止一种或多种组分的氧化。此外可用防腐剂来预防微生物的作用，如各种抗菌和抗真菌剂，包括但不限于对羟基苯丙酸酯(如甲基对羟基苯丙酸酯、丙基对羟基苯丙酸酯)、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞或其组合。

在该组合物是液体形式的实施方式中，运载体可以是溶剂或分散介质，包括但不限于：水、多元醇(如甘油、丙烯二醇、液态聚乙二醇等)、脂质(如甘油三酯、植物油、脂质体)和它们的组合。例如，可通过采用包衣如卵磷酯；通过用运载体如液体多元醇或脂分散维持所需颗粒大小；用表面活性剂如羟丙基纤维素；或这些方法的组合来维持适当的流动性。许多情况下，优选包含等渗剂如糖、氯化钠或其组合。

可采用本领域常规的方法配置本发明的药物组合物。

该组合物在制备和贮存条件下必须稳定，防止微生物如细菌和真菌的污染。需知应将内毒素的污染控制到最低，处在安全水平内，例如低于0.5ng/mg蛋白质。

适合于miR-155^*表达的表达载体也可包含于本申请的药物组合物中。构建表达载体的方法是现有技术已知的。

本申请也涉及miR-155^*抑制剂或激动剂在制备用于治疗或预防INF-α介导的疾病用的药物中的用途。

本申请还包括治疗或预防有此需要的对象的INF-α介导的疾病的方法，该方法包括调节对象pDC细胞中INF-α的生产。调节pDC细胞生产INF-α的方法包括给予对象有效量的本申请的药物组合物。本文所用的术语“治疗有效量”指试剂或药物组合物治疗、缓解或预防目标疾病或状况的量，或是表现出可检测的治疗或预防效果的量。本领域技术人员能够采用常规的方法评估一治疗是否达到所需的治疗目的。

可通过正调节pDC细胞生产INF-α来实现病毒感染和肿瘤等的预防和治疗。可通过负调节pDC细胞产生INF-α来实现移植排斥、GVHD和自身免疫性疾病的治疗和预防。正调节包括给予含有miR-155^*或或其激动剂或能够刺激对象体内miR-155^*过表达的药物组合物，负调节包括给予能够抑制对象体内miR-155^*表达的药物组合物。

本申请还涉及一种筛选治疗或预防INF-α介导的疾病用的药物的方法，所述方法包括：

(1)将待测物质加入含有pDC细胞的体系中；和

(2)检测体系中miR-155^*和/或INF-α的表达；

其中，将能使miR-155^*和/或INF-α的表达升高或降低的待测物质作为治疗或预防INF-α介导的疾病用的候选药物。

所述方法还包括提供阴性对照的步骤。

所述方法还包括，进一步将测得的候选药物进行体内实验。

下文将以具体实施例的方式阐述本发明。应理解，下述实施例仅仅是阐述性的，而非限制本发明的范围。当没有具体描述其来源时，所用的试剂为市场上购得的常规试剂。

实施例1

1.MiRNA芯片检测

收集10份健康人的外周血来源的pDC(200ml/份)，作为一个库。分成两份，每份为1×10⁶个。一份不予刺激，另一份R837(咪喹莫特，TLR7配体，TLR7通路的特异性激活剂，invivogen公司)刺激4小时。收集样本，并抽提总RNA。所得RNA用Megaplex RT and preamp human pools set(ABI公司)进行逆转录及预扩增。然后采用Taqman human microRNA array A & B(ABI公司)进行miRNA的定量检测。ABI7900荧光定量PCR仪采集待测miRNA及内参基因扩增各循环荧光信号，以SDS2.1软件(Applied Biosystems)进行荧光收集和资料分析。检测模式选择绝对定量(Absolute Quantification)，Sequence Detector 1.7软件分析其CT值，CT阈值(阈值＝基线信号的标准偏差×10)。CT值反映了模板扩增到一定量拷贝数时(处于指数上升期)所需反应循环数大小。CT值越大，参与反应的起始模板量就越小，反之则起始模板量越大。根据SDS导出的所要检测的miRNA的CT值(所有miRNA以U48作为内参，刺激和非刺激样本中CT＞33的miRNA则认为表达量很低，不予考虑)，计算待测miRNA与内参基因U48的CT差值ΔCT，以非刺激样本中相应miRNAΔCT的值作为对照ΔCT，用对照ΔCT减去刺激样本待测miRNA的ΔCT值求得-ΔΔCT值。

2.报告基因载体和突变质粒构建

IRAKM基因3′UTR区由基因组DNA扩增。酶切位点Not I和Xho I插入psi-check质粒(promega公司)并经测序鉴定。用到以下引物：

上游引物5′CCGCTCGAGCATAGGCACCTGAGCATAG 3′(SEQ IDNO：3)；

下游引物5′ATAGTTTAGCGGCCGCCGAGATTGTGCCACTG 3′(SEQ ID NO：4)。

构建的质粒图谱如图4所示。

3.实时荧光定量PCR

应用酚氯仿法抽提Trizol(Invitrogen公司产品)总RNA，得到的RNA用毛细管电泳(NanoDrop Specthophotometer)鉴定其完整性，紫外分光光度计测定其浓度。然后，经miRNAs特异性引物(ABI公司)逆转录，加样体系为dNTP 0.03ul、MMLV 0.2ul、10×缓冲液0.3ul、RNase抑制剂0.02ul、ddH2O(无RNase)0.45ul、引物〔该逆转录所用为ABI公司的microRNA TaqmanAssay kit〕。1ul和RNA 1ul，逆转录反应条件为16℃*30min，42℃*30min，85℃*5min。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)在ABI Prism7900测序仪(Applied B iosystems公司)上进行。

4.细胞分选和培养

人原代单个核细胞(PBMC)来自上海市血液中心健康献血者。人外周血pDC分选采用Miltenyi biotech公司的Diamond Plasmacytoid Dendritic CellIsolation Kit，经流式检测纯度达95％以上。铺在96孔板中，5×10⁴个/孔，用含10％小牛血清的1640培养基培养。刺激用10ug/ml R837(invivogen公司)。Hela细胞来源于来源于美国菌种保藏中心(ATCC)，购至中国科学院上海生命科学研究院细胞所。培养于10％小牛血清的DMEM加100U/ml青霉素-链霉素培养基中，37℃5％CO₂。

5.荧光素酶报告基因实验

Hela细胞培养于96孔板，细胞80％融合时，用LipofectamineaTM2000脂质体转染方法共转染IRAKM 3′UTR报告基因载体和miR-155^*的成熟体，转染24小时后用双荧光酶报告基因分析系统检测荧光素酶活性。

6.转染人原代pDC

按照LipofectamineaTM2000说明书转染，250ng RNA/孔，0.5ul脂质体/孔，6小时后，加刺激。用作转染的pDC在基本培养基中添加人的IL-3(10ng/ml，Prospec公司)。miR-155^*、成熟体(mimic)及抑制体(inhibitor)及相应阴性对照(control)来自Genepharma公司。

7.酶联免疫吸附实验(ELISA)

分别转染miR-155^*和对照miRNA抑制体的pDC细胞，R837刺激24小时之后，用人的IFN-αELISA kit(PBL InterferonSource)检测细胞上清IFN-α水平。

结果

1.miR-155^*在人pDC TLR7通路活化过程中显著增加

我们用TLR7特异性配体R837刺激pDC，4小时后，芯片检测miRNA的表达情况。我们发现：在pDC中有表达的248个miRNA中，26个miRNA表达明显上调，132个miRNA表达明显下调(差异两倍以上)，其中miR-155^*的增加幅度最高(图1A)。进一步，我们检测了miR-155^*在刺激过程中随时间变化情况，发现它先迅速增加，在刺激8小时后达到高峰，接着开始降低，到24小时降到起始水平(图1B)。

2.miR-155^*能显著促进pDC IFN-α的表达

有文章报道pDC在接受TLR7配体刺激4小时后，所有IFN-α亚型的mRNA水平达到最高峰，之后会持续一段时间，而且pDC接受长时间刺激后则会分化成熟，失去大量产生干扰素的能力[4]。对应于miR-155^*在刺激过程中的变化情况，我们推测它在pDC TLR7刺激产生IFN-α过程中可能发挥重要的作用。我们将合成的miR-155^*抑制体(Genepharma公司)转染到原代pDC中，以抑制其功能的发挥。R837刺激24小时。检测miR-155^*的表达，与对照相比，miR-155^*抑制体可以使miR-155^*的表达降低到1/6，而对miR-155的表达则没有任何影响，这说明miR-155^*抑制体可以很特异的抑制miR-155^*的功能(图2A)。刺激后检测上清中IFN-α的表达水平，结果显示miR-155^*抑制体能显著抑制pDC IFN-α的表达，降低了60％左右(p＝0.0026)(图2B)。

3.miR-155^*负向调控IRAKM的表达

IRAKM是一种在TLR信号通路中起负向调控作用的分子，它通过阻止IRAK1、IRAK4和Myd88的解离以及IRAK1与TRAF6复合体的形成而发挥抑制作用[20，21]。

生物信息学分析显示miR-155^*可能靶向IRAKM，在IRAKM的+423-+430位置预测有miR-155^*的结合位点(图3A)。将IRAKM 3’UTR端+36-+1048片段连接到报告基因载体中，与miRNA(指miR-155^*、miR-155和mimiccontrol，它们各自分别与报告基因载体共转)共转到Hela细胞中，miRNA转染浓度分别为50nM和100nM。24小时后，检测荧光素酶的值。图3B中的mimic control是非相关microRNA对照，它和mir-155^*mimic一样，都是合成的稳定化修饰的双链，只不过它所产生的microRNA在人和鼠里面都没有的，其序列为：有义链：5’UUCUCCGAACGUGUCACGUTT 3’(SEQ ID NO：5)和反义链：5’ACGUGACACGUUCGGAGAATT 3’(SEQ ID NO：6)。

结果显示：过表达miR-155^*能抑制荧光素酶的表达，而且这种抑制呈现浓度梯度依赖性(p＜0.01)。而非相关对照则没有差异(图3B)。该结果表明miR-155^*可以通过IRAKM的3’UTR端抑制IRAKM基因的表达。

实施例2

分选人的外周血pDC，1*10⁵个细胞每孔，铺到96孔板中，三个复孔。恢复两小时后，用lipofectamin 2000试剂分别转染250ng mimic control，mir-155^*mimic到pDC中。转染6小时后，一组不予刺激，另一组用10ug/ml的R837刺激。24小时后收集上清。ELISA检测IFN-α的表达水平。该结果代表三次实验重复。结果见图5。

结果显示，在pDC中过表达mir-155^*mimic，可以促进pDC产生IFN-α。

实施例3

1.细胞水平筛选

测试组：用候选物质处理的pDC细胞；

对照组：不用候选物质处理pDC细胞。

在处理后适当时间，采用常规方法测定所述细胞的IFN-α的表达、活性、存在量或分泌情况。如果与对照组相比，测试组中的IFN-α的表达、活性、存在量或分泌显著上升或下降(统计学分析P＞0.05％，有显著性差异)，则说明该候选物质是潜在的促进INF-α产生的物质。

2.动物水平筛选

以正常小鼠作为动物模型。

测试组：用候选物质腹腔注射给予(还可通过灌胃、静脉注射、肌肉注射、皮下注射的方式给予)小鼠；

对照组：不用候选物质给予小鼠。

在处理后适当时间，采用常规方法测定小鼠pDC细胞中IFN-α蛋白的表达、活性、存在量或分泌情况。如果与对照组相比，测试组中的IFN-α蛋白的表达、活性、存在量或分泌显著上升或下降(统计学分析P＞0.05％，有显著性差异)，则说明该候选物质是潜在的促进INF-α产生的物质。

实施例4

我们用Pristane(0.5ml)腹腔注射正常小鼠C57BL/6J，以诱导其产生干扰素。之后，将合成的mimic control和mir-155^*mimic分别注射到小鼠体内，抑制体对照和mir-155^*抑制体分别注射到小鼠体内。两周后，从小鼠尾静脉取血，检测血清中INF-α水平。

预计mir-155^*mimic处理的小鼠的血清中INF-α水平提高，而mir-155^*抑制体处理的小鼠的血清中INF-α水平降低。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

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序列表

<110>中国科学院上海生命科学研究院

<120>调控浆细胞样树突状细胞I型干扰素表达的方法和组合物

<130>095102

<160>6

<170>PatentIn version 3.3

<210>1

<211>18

<212>RNA

<213>miR-155*

<400>1

uuacgauuau acauccuc                18

<210>2

<211>22

<212>RNA

<213>miR-155*成熟体单链

<400>2

cuccuacaua uuagcauuaa ca           22

<210>3

<211>28

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>3

ccgctcgagc ataggcacct  gagcatag    28

<210>4

<211>32

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>4

atagtttagc ggccgccgag attgtgccac tg    32

<210>5

<211>21

<212>RNA

<213>人工序列

<220>

<223>非相关microRNA对照有义链

<220>

<221>misc_feature

<222>(20)..(20)

<223>n是t

<220>

<221>misc_feature

<222>(21)..(21)

<223>n是t

<400>5

uucuccgaac gugucacgun n                21

<210>6

<211>21

<212>RNA

<213>人工序列

<220>

<223>非相关microRNA对照有义链

<220>

<221>misc_feature

<222>(20)..(20)

<223>n是t

<220>

<221>misc_feature

<222>(21)..(21)

<223>n是t

<400>6

acgugacacg uucggagaan n    21

Claims (3)

1.人源的miR-155*、其成熟体或抑制体在制备调节pDC细胞生产IFN-α用的药物中的用途，其中，miR-155*的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其成熟体单链的序列如SEQ ID NO:2所示，所述抑制体为合成的经过修饰的miR-155*的反义链。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物含有miR-155*抑制体，用于负调节pDC细胞生产IFN-α。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物含有miR-155*和/或其成熟体，用于正调节pDC细胞生产IFN-α。

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