CN102048525A - 一种生物体荧光三维成像系统及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种生物荧光三维成像系统,有暗箱、光照模块、旋转平台装置、CCD成像系统、计算机、麻醉器;光照模块有激光器、分束光纤、照明LED和光照模块控制器;旋转平台装置有麻醉装置、温控装置、旋转电机及旋转平台控制器;CCD成像系统有CCD器件、电动聚焦镜头、带通滤光片轮及CCD成像系统控制器;分束光纤的总束端与激光器输出端相连,分束光纤的分束端位于旋转平台上方,照明LED位于生物旋转平台上方,CCD成像系统的接收光路的光轴与生物旋转平台的圆心相交。本发明采取分束光纤对生物整体进行均匀激发光照,实现高通量数据采集的连续性和实时性,消除了悬挂式旋转造成的生物体器官移位,灵敏度高、图像数据采集精确。
Description
技术领域
本发明属于荧光三维成像技术领域,涉及一种生物体荧光三维成像系统及应用。
背景技术
随着分子影像学领域的各种技术在现代生命科学研究中的应用,生物体成像技术得到了越来越多的关注。生物体成像技术是指应用影像学方法,对体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究,这使得生命过程的研究可以在生物体体内进行。我们可以利用各种能穿透生物体又能与某些特定生物组分相作用的超声波(超声影像技术)或者电磁波(CT)或者电磁场(MRI)或者高能粒子(PET)等在不损伤动物的前提下对其进行长期的纵向研究。
但是,当现代生命科学研究进入细胞和分子层次时,这些影像学方法都遇到了不同程度的困难。一些重大疾病的真正早期诊断必需在分子和细胞水平上进行才能实现。生物芯片等离体检测方法有可能做到这点,但是难以确定病变部位。现有成像方法(如CT、MRI)虽有可能确定病变部位却又难以在分子水平上进行早期检测。荧光分子成像(FMI)技术是一种可在分子水平早期探测分子变异和细胞癌变的方法。它利用激发光使得荧光基团达到较高的能量水平,然后发射出较长波长的光这一原理进行检测,而且具有非侵入、无创伤、特异(利用靶向基团)、精细(分子水平)并实时观测病变部位及其大小的优点。
荧光平面成像是通过CCD相机采集单一投影方向的信号,得到的数据是多个深度信号的叠加,再加上信号在透过动物体内时,又有不可避免的折射和散射,难以精确的定量分析,因此荧光三维成像在在靶点的空间定位及绝对定量方面都有很大的优势。目前主流的成像方法为荧光分子断层成像(FMT),其实施方法为将生物沿身体的长轴旋转360°,用激发光源在其横断面上进行扫描,计算机处理CCD相机采集到的信号,进行三维重建和显示。早期的荧光分子断层成像系统一般采用圆柱成像腔,实验时把生物泡在匹配液中,使用光纤引出不同位置的检测信号,而最近的一些荧光分子断层成像系统是把生物沿身体的长轴悬挂,为了减小惯性带来的器官移位和歪斜,生物的旋转速度必须严格控制。再加上扫描式的点激发光源大大降低了数据获取的效率,因此采集360°的全景图像需要花费很长时间,严重影响了检测的实时性。
发明内容
针对上述问题,本发明的目的是提供一种生物荧光三维成像系统,在实现三维成像的同时,实现测量的精确性和实时性。
本发明提供的一种生物荧光三维成像系统,包括暗箱、光照模块、旋转平台装置、CCD成像系统、计算机、麻醉器;其中光照模块包括激光器、分束光纤、照明LED和光照模块控制器;旋转平台装置包括麻醉装置、温控装置、旋转电机及旋转平台控制器;CCD成像系统包括CCD器件、电动聚焦镜头、带通滤光片轮及CCD成像系统控制器;计算机有三个输出信号和一个输入信号,第一输出信号是光照模块控制器的输入信号,该信号用于控制激光器和照明LED的开关,第二输出信号是旋转平台控制器的输入信号,该信号用于设定温控装置的温度及旋转电机的转动状态,第三输出信号是CCD成像系统控制器的输入信号,该信号用于控制电动聚焦镜头的聚焦、带通滤光片轮的旋转、以及CCD器件的信号采集过程,输入信号是CCD器件采集到的图像信号,通过计算机进行处理以及显示。
在暗箱外部,分束光纤的总束端与激光器的输出端相连,在暗箱内部,分束光纤的分束端位于旋转平台上方,当激光器开启时,从四个角度形成对该平台的均匀光照。照明LED位于所述生物旋转平台上方,当其开启时,形成对该平台的明场光照。CCD成像系统的接收光路的光轴与生物旋转平台的圆心相交,CCD器件4接收的发射光光路与旋转平台装置3平面成45°角。CCD器件采用高灵敏度冷CCD。
本发明的另一个目的是提供一种生物体荧光三维成像系统在生物体图像数据采集中的应用。
本发明采取分束光纤对生物整体进行均匀激发光照,可以实现高通量的数据采集;生物旋转平台以及斜45°采集光路,实现了数据采集的连续性和实时性,同时在麻醉系统辅助下,生物体在平台上的匀速旋转在很大程度上消除了悬挂式旋转造成的器官移位。高灵敏度冷CCD保证了图像数据采集的精确性。
附图说明
图1是本发明的结构示意图。
图2是本发明的结构框图。
图3 是本发明的具体实施结果图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。
参见图1和图2,本发明的一种生物体荧光三维成像系统,包括暗箱1、光照模块2、旋转平台装置3、CCD成像系统4、计算机5、麻醉器6;其中光照模块2包括激光器21、分束光纤22、照明LED 23和光照模块控制器24;旋转平台装置3包括麻醉装置31、温控装置32、旋转电机33及旋转平台控制器34;CCD成像系统4包括CCD器件41、电动聚焦镜头42、带通滤光片轮43及CCD成像系统控制器44;计算机5有三个输出信号和一个输入信号,第一输出信号(a)是光照模块控制器24的输入信号,该信号用于控制激光器和照明LED的开关,第二输出信号(b)是旋转平台控制器的输入信号,该信号用于设定温控装置的温度及旋转电机的转动状态,第三输出信号(c)是CCD成像系统控制器的输入信号,该信号用于控制电动聚焦镜头的聚焦、带通滤光片轮的旋转、以及CCD器件的信号采集过程,输入信号(d)是CCD器件41采集到的图像信号,通过计算机进行处理以及显示。
在暗箱1外部,分束光纤22的总束端与激光器21的输出端相连,在暗箱1内部,分束光纤22的分束端位于旋转平台装置3上方,当激光器21开启时,从四个角度形成对该平台的均匀光照。照明LED 23位于所述旋转平台装置3上方,当其开启时,形成对该平台的明场光照。CCD成像系统4的接收光路的光轴与旋转平台装置3的圆心相交,且CCD器件41接收的发射光光路与旋转平台装置3平面成45°角。CCD器件41采用高灵敏度冷CCD。
本发明中,明场条件下,照明LED 23对旋转平台装置3实现白光照明;暗场条件下,激光器21用作激发光源,由分束光纤22(图中以1分4光纤为例)把激光器21输出的光引入暗箱1,并在合适的角度对旋转平台装置3实现均匀激发光照,生物体内靶点产生的发射光先后经过电动聚焦镜头42、滤光片轮43,由高灵敏度冷CCD器件41接收,该CCD成像系统4的接收光路的光轴与生物旋转平台装置3的圆心相交,且CCD器件41接收的发射光光路与旋转平台装置3平面成45°角。以上为本发明中成像系统的光路部分,可参见图2的空心粗箭头所表示的光信号传输。旋转平台装置3包括温控装置32和麻醉装置31,其中麻醉装置31的一端连接麻醉器6,为旋转平台3上的生物提供麻醉气体,可参见图2的实心粗箭头所表示的麻醉气体的传输。计算机5的三个输出信号,第一输出信号(a)是光照模块控制器24的输入信号,控制激光器21及照明LED 23的开关,第二输出信号(b)是旋转平台控制器34的输入信号,该信号用于设定温控装置32的温度及旋转电机33的转动状态,第三输出信号(c)是CCD成像系统控制器44的输入信号,该信号用于控制电动聚焦镜头42的聚焦、带通滤光片轮43的旋转、以及CCD器件41的信号采集过程,输入信号(d)是CCD器件41采集到的图像信号,旋转电机33的旋转状态以及温控装置32的温度设定,计算机5的输入信号(d)为CCD器件41的输出信号,通过计算机进行处理以及显示。以上可参见图2的细箭头所表示的电信号的传输。
实施例2 本发明的具体操作
1.准备阶段:将带有荧光标记物的生物体放入暗箱1中的旋转平台3,其头部放入麻醉装置31,开启麻醉器6使其进入麻醉状态。
2.明场图像采集:开启照明LED23,旋转带通滤光片轮43以选择合适的滤光片,调整电动聚焦镜头42的视野,将旋转平台3匀速旋转360°,由CCD器件41采集平台旋转过程中多个角度的明场条件下的生物体图像,传输到计算机5完成生物的轮廓重建。
3.暗场图像采集:关闭照明LED23,开启激光器21,激发生物体内的荧光标记物发光,将生物旋转平台3匀速旋转360°,由CCD器件41采集平台旋转过程中多个角度的暗场条件下的图像,传输到计算机5完成荧光标记物的位置分析过程。
4.数据处理:由计算机5完成荧光标记物在生物体内的三维建模和结果显示,参见图3,箭头所指为荧光标记物的重建结果。
Claims (4)
1.一种生物体荧光三维成像系统,其特征在于,由暗箱(1)、光照模块(2)、旋转平台装置(3)、CCD成像系统(4)、计算机(5)、麻醉器(6)组成,其中光照模块(2)有激光器(21)、分束光纤(22)、照明LED (23)和光照模块控制器(24),旋转平台装置(3)有麻醉装置(31)、温控装置(32)、旋转电机(33)及旋转平台控制器(34),麻醉装置31的一端连接麻醉器6,CCD成像系统(4)有CCD器件(41)、电动聚焦镜头(42)、带通滤光片轮(43)及CCD成像系统控制器(44),在暗箱(1)外部,分束光纤(22)的总束端与激光器(21)的输出端相连,在暗箱(1)内部,分束光纤(22)的分束端位于旋转平台装置(3)上方,照明LED(23)位于旋转平台装置(3)上方, CCD成像系统(4)的接收光路的光轴与旋转平台装置(3)的圆心相交,并与平台装置(3)平面成45°角。
2.根据权利要求1所述的一种生物体荧光三维成像系统,其特征在于,CCD器件(41)采用高灵敏度冷CCD。
3.根据权利要求1所述的一种生物体荧光三维成像系统,其特征在于,计算机(5)有三个输出信号和一个输入信号,第一输出信号(a)是光照模块控制器(24)的输入信号,用于控制激光器(21)和照明LED(23)的开关,第二输出信号(b)是旋转平台控制器(34)的输入信号,用于设定温控装置(32)的温度及旋转电机的转动状态,第三输出信号(c)是CCD成像系统控制器(44)的输入信号,用于控制电动聚焦镜头(42)的聚焦、带通滤光片轮(43)的旋转、以及CCD器件(41)的信号采集过程,输入信号(d)是CCD器件(41)采集到的图像信号,通过计算机(5)进行处理以及显示。
4. 权利要求1所述的一种生物体荧光三维成像系统在生物体图像数据采集中的应用。
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GR01 | Patent grant | ||
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Granted publication date: 20120530 Termination date: 20220126 |
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