CN101686643A - 抗空茎病/裂茎病的花椰菜植物 - Google Patents

抗空茎病/裂茎病的花椰菜植物 Download PDF

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Abstract

本发明提供同时具有高产量和高质量及空茎病/裂茎病抗性的花椰菜种子或植物。本发明进一步提供被命名为BRM53－3915和BRM53－3916的花椰菜品系的种子或植物以及由这些植物中的至少一种作为亲本产生的后代。本发明还涉及杂交花椰菜品种RX05951180的植物、种子和组织培养物。

Description

抗空茎病/裂茎病的花椰菜植物
发明背景
本申请要求2007年5月14日提交的美国临时申请60/917,872的优先权，该临时申请的全部公开内容在此引入作为参考。
1.发明领域
本发明涉及植物育种领域，更具体地，涉及同时显示高产量和高质量以及空茎病/裂茎病(hollow/split stem disorder)抗性的花椰菜植物的开发。
2.相关技术描述
大田作物培育的目的是将多种希望的性状组合在一个品种/杂种中。这些希望的性状可包括较高的产量、对昆虫或害虫的抗性、对热和干旱的耐受性、较好的农艺学质量、较高的营养价值、生长速度和果实性质。
育种技术利用植物传粉方法。有两种常用的传粉方法：如果来自一种花的花粉转移给相同植物或植物品种的相同的花或另一种花，则为植物自花传粉。如果花粉来自不同植物的花，则为植物异花传粉。
已经自花传粉并且对类型进行多代筛选的植物在几乎全部基因座处成为纯合的，并且产生真实遗传后代(true breeding progeny)-一种纯合植物-的均一群体。两个不同品种的这样的纯合植物之间的杂交产生均一的杂种植物的群体，它们对于许多基因座是杂合的。相反，在许多基因座处均为杂合的两种植物的杂交产生遗传学上不同并且不均一的杂种植物群体。产生的不均一性使得其表现不可预测。
均一品种的开发需要开发纯合的近交植物、杂交这些近交植物、和评价这些杂交。谱系育种和轮回选择是已经用于从育种群体开发近交植物的育种方法的例子。这些育种方法将来自两种或多种植物或各种其它广泛来源的遗传背景组合为育种池(breeding pool)，从该育种池通过自交和选择希望的表型来开发新品系。评价新品系以确定哪些具有商业潜力。
已经经历这样的育种计划并且特别有价值的一种作物种是花椰菜。花椰菜具有被小茎连接的密集的小花的头，这些小茎从可食用的粗柄(stalk)长出。它的颜色根据品种不同可以从深鼠尾草绿到深绿到紫绿色变化。
花椰菜已经成为世界上越来越受欢迎的作物，特别是在注重健康的消费者中。平均一个花椰菜柄可能只含有30卡路里，而提供每日营养推荐量(recommended daily allowance，RDA)的240％的维生素C加10％的RDA的维生素A。花椰菜也被公认为是饮食纤维、如钙和镁的矿物质和某些在食用时可能具有化学保护效果的芥子油苷(glucosinolates)的有价值的来源。
目前，美国是世界上最大的花椰菜生产国。排名前列的花椰菜生产州是加利福尼亚州、亚利桑那州、德克萨斯州和俄勒冈州。花椰菜也在西班牙、北欧、中美洲和澳大利亚大规模地种植。在美国每年销售的估计30亿磅花椰菜中，大约10亿磅是最低程度地加工的、新鲜运输的、准备好食用的。美国销售的新鲜花椰菜由两个主要部分组成：(1)整个花椰菜冠和花椰菜束，和(2)花椰菜小花。例如Marathon品种的花椰菜的冠一般是一个修剪除去侧茎的4或5英寸的柄。花椰菜束是一组已经除去侧柄的花椰菜柄，它们用橡皮圈绑扎在一起，或者打结。小花是从柄上修剪下来的花椰菜的芽。
花椰菜是十字花科(Brassicaceae)(以前称为Cruciferae)的一种植物。它一般分类为甘蓝(Brassica oleracea)种的Italica品种群。甘蓝的其它品种群包括卷心菜、菜花、羽衣甘蓝、绿色芥蓝菜、苤蓝和球芽甘蓝。北美洲销售的一种流行的花椰菜品种被称为意大利绿(Italian green)或花茎甘蓝(Calabrese)，它是以其最早生长地——意大利Calabria省命名的。其它常见的花椰菜品种包括Pixel——日本和澳大利亚的标准品种、Marathon——世界范围的crowns的标准、和Heritage——美国和墨西哥的Crowns和freezers的标准。
花椰菜是一种具有2N＝18条染色体的二倍体物种，并且是为了抑制野生芥类植物的花发育而多年培育的结果。大多数花椰菜品种是异花授粉。许多经济作物从F1杂种种子生长而成。
尽管迄今为止的育种工作已经提供了大量有用的具有有益性状的花椰菜品系，但是本领域中仍然非常需要具有进一步改良的性状的新品系。这些植物将通过提高作物产量和/或质量有益于农民和消费者。
发明内容
本发明通过提供抗空茎病或裂茎病的花椰菜品系和品种的种子和植物克服了现有技术中的限制。该病害影响到许多商业上重要的花椰菜品种。
在某些实施方案中，本发明提供对空茎病/裂茎病具有完全的、基本的、显著的或中度的抗性的花椰菜品系和品种。在一些实施方案中，这种抗性使得当本发明的花椰菜植物培育成熟时，少于大约0.1％的所述植物具有空茎或裂茎。在进一步的实施方案中，在成熟时不显示这种病害的植物的百分比小于大约1％、3％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％或50％。
在进一步的实施方案中，本发明的花椰菜植物部分或完全地抵抗空茎或裂茎的形成，甚至当在致使该病特别普遍的气候条件下生长时，例如在对该病没有抗性的花椰菜类型如Marathon中。这些气候条件可以包括例如温暖的夏季、温暖的秋季和/或丰富的降水。在本发明的某些方面，所述气候条件是那些对于普通花椰菜植物或者特别对于Marathon品种的花椰菜植物导致高平均生长速度的条件。
在特定实施方案中，本发明提供一种显示性状组合的花椰菜品种的植物，该性状组合包括在成熟时重约400克至约600克的单头以及对空茎病/裂茎病的抗性。在某些实施方案中，成熟时的单头重量落入例如下限值为大约400、410、425、440、455或475克、上限值为大约530、545、560、575、590或600克的范围内，包括可由其衍生的所有范围。术语“单头”被定义为花椰菜的头，包括与头连接的茎部分，其中从头的顶部到相连的茎的末端的总长度为大约16cm。在某些实施方案中，性状的组合可以定义为受用于表达这种性状组合的遗传工具控制，该遗传工具存在于花椰菜品系BRM53-3915中(该品系的种子已经以ATCC保藏号PTA-9181保藏)，或者花椰菜品系BRM53-3916中(该品系的种子已经以ATCC保藏号PTA-8175保藏)，或其杂交种中。在其它实施方案中，性状组合可以被定义为受杂交花椰菜品种RX05951180或其后代中发现的用于表达这种性状组合的遗传工具控制，该品系的种子已经以ATCC保藏号PTA-8072保藏。
在进一步的实施方案中，本发明提供一种证明具有空茎或裂茎抗性的植物的花椰菜头，以及产生这种性状的植物。
本发明还提供包含花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的至少第一套染色体的花椰菜植物。一方面，本发明提供所述品系的花椰菜植物、其后代、杂交花椰菜品种RX05951180或其后代。还提供具有被命名为BRM53-3915的花椰菜品系或被命名为BRM53-3916的花椰菜品系或杂交花椰菜品种RX05951180的所有生理学和形态学特征的花椰菜植物。还提供了本发明的花椰菜植物的部分，包括该植物的胚珠、果实、小花、细胞或花粉。
本发明还涉及花椰菜品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的种子。本发明的花椰菜种子可以作为基本同源的花椰菜种子群体提供。基本同源的种子群体通常不含显著数目的其它种子。因此，品系BRM53-3915、BRM53-3916和/或杂交花椰菜品种RX05951180的种子可以被定义为形成全部种子的至少约97％，包括至少约98％、99％或更多的种子。在某些实施方案中，花椰菜种子群体可以被特别定义为基本不含杂种种子。种子群体可以分别生长，以提供被称为BRM53-3915、BRM53-3916和/或杂交花椰菜品种RX05951180的基本同源的花椰菜植物群体。
在本发明的另一方面，提供了包含增加的遗传性状的花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916的植物。遗传性状可以包括例如为显性或隐性等位基因的基因座。在本发明的某些实施方案中，花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916的植物被定义为包含单基因座转换。在本发明的特定实施方案中，增加的基因座赋予一种或多种性状，例如除草剂耐受性、昆虫抗性、抗病性和改变的碳水化合物代谢。在进一步的实施方案中，性状可由通过回交引入品系基因组中的天然存在的基因、天然或诱导的突变或通过遗传转化技术引入植物或其任何前代祖先中的转基因提供。当通过转化引入时，基因座可以包含在单染色体位置处整合的一个或多个基因。
在本发明的另一方面，提供了品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物的可再生细胞的组织培养物。组织培养物优选地能够再生为能够表达该品系的所有生理学和形态学特征的植物，以及能够再生为与该品系的其它植物具有基本相同的基因型的植物。BRM53-3915、BRM53-3916或RX05951180的一些生理学和形态学特征的例子包括在本文的表中分别说明的性状。这些组织培养物中的可再生细胞可以来源于例如胚、分生组织、子叶、花粉、叶、花药、根、根尖、雌蕊、花、小花、种子和柄。更进一步地，本发明提供了由本发明的组织培养物再生的花椰菜植物、具有品系BRM53-3915、BRM53-3916和/或杂交花椰菜品种RX05951180的所有生理学和形态学特征的植物。
在本发明的另一方面，提供了产生花椰菜种子、植物和果实的方法，该方法通常包括使第一亲本花椰菜植物与第二亲本花椰菜植物杂交，其中第一或第二亲本花椰菜植物中的至少一个是品系BRM53-3915、BRM53-3916或品种RX05951180的植物。这些方法可以进一步示例为制备杂种花椰菜种子或植物的方法，其中第一花椰菜植物与明显不同品系的第二花椰菜植物杂交，以产生杂种，该杂种以花椰菜植物品系BRM53-3915或BRM53-3916作为其亲本之一。例如，在某些实施方案中，杂种的父本是品系BRM53-3915或BRM53-3916的植物。在进一步的实施方案中，来源于品系BRM53-3916父本的杂种是被命名为RX05951180的杂交花椰菜品种。在上述方法中，杂交将导致种子的产生。无论是否收集种子，都产生种子群体。
在本发明的一个实施方案中，“杂交”的第一步包括通常近距离地种植第一和第二亲本花椰菜植物的种子，使得将会发生例如由昆虫载体介导的授粉。或者，花粉可以人工转移。
第二步可以包括栽培或生长第一和第二亲本花椰菜植物的种子成为开花的植物。第三步可以包括防止植物的自花传粉，例如，通过切去花的雄性部分(即，对花进行处理或操作，以产生去雄的(emasculated)亲本花椰菜植物)。为了相同的目的，在某些杂种作物中也可以使用自交不亲和性系统。自交不亲和性植物仍然释放活的花粉，并且能够授粉给其它品种的植物，但是不能授粉给它们自己或同一品系的其它植物。
杂种杂交的第四步可以包括第一和第二亲本花椰菜植物之间的异花传粉。再另一步包括从至少一个亲本花椰菜植物上收获种子。收获的种子可以生长，以产生花椰菜植物或杂种花椰菜植物。
本发明还提供了通过包括使第一亲本花椰菜植物与第二亲本花椰菜植物杂交的方法产生的花椰菜种子和植物，其中第一或第二亲本花椰菜植物中的至少一个是品系BRM53-3916或品种RX05951180的植物。在本发明的一个实施方案中，通过该方法产生的花椰菜种子和植物是通过使本发明的植物与另一种不同的植物杂交产生的第一代(F1)杂种花椰菜种子和植物。在一个这样的实施方案中，产生的第一代(F1)杂种花椰菜种子和植物是被命名为RX05951180的杂交花椰菜品种的种子和植物。本发明进一步涉及这种F1杂种花椰菜植物的植物部分及其使用方法。因此，本发明的某些示例性实施方案提供F1杂种花椰菜植物及其种子。
在本发明的又另一方面，提供了花椰菜品系BRM53-3915、BRM53-3916和/或杂交花椰菜品种RX05951180的遗传互补物。术语“遗传互补物”用来指核苷酸序列的集合体，在本例中，这些序列的表达确定了花椰菜植物或该植物的细胞或组织的表型。因此遗传互补物代表细胞、组织或植物的基因构成，杂种遗传互补物代表杂种细胞、组织或植物的基因构成。因此本发明提供具有与此处公开的花椰菜植物细胞一致的遗传互补物的花椰菜植物细胞，和植物、种子和含有这些细胞的植物。
植物的遗传互补物可以根据遗传标记谱以及根据作为遗传互补物表达特征的表型性状的表达例如同工酶分型谱来评价。应当理解，品系BRM53-3915、BRM53-3916或其第一代后代，例如杂交花椰菜品种RX05951180，可以通过许多公知技术中的任一种来确认，例如简单序列长度多态性(SSLPs)(Williams等人，1990)、随机扩增多态性DNAs(RAPDs)、DNA扩增指纹分析(DAF)、序列特征性扩增区(SCARs)、任意引物聚合酶链式反应(AP-PCR)、扩增片段长度多态性(AFLPs)(EP 534858，特别在此全文引入作为参考)和单核苷酸多态性(SNPs)(Wang等人，1998)。
在另一方面，本发明提供了杂种遗传互补物，它由花椰菜植物细胞、组织、植物和种子代表，是通过本发明的花椰菜植物的单倍体遗传互补物与第二花椰菜植物(优选另一不同的花椰菜植物)的单倍体遗传互补物组合而形成的。另一方面，本发明提供从包含本发明的杂种遗传互补物的组织培养物再生的花椰菜植物。
在另一方面，本发明提供一种确定花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物的基因型的方法，包括检测该植物基因组中的至少第一多态性。在某些实施方案中，该方法可以包括检测植物基因组中的多个多态性。该方法可以进一步包括在计算机可读介质上存储检测多个多态性的步骤的结果。本发明进一步提供了通过这种方法产生的计算机可读介质。
在某些实施方案中，本发明提供一种产生花椰菜的方法，包括：(a)获得花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物，其中该植物被栽培至成熟，以及(b)从植物上收集花椰菜。
再另一方面，本发明提供一种产生来源于品系BRM53-3915或BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物的方法，该方法包括以下步骤：(a)产生来源于品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的后代植物，其中所述产生包括使品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物与第二植物杂交；和(b)使该后代植物与它自己或第二植物杂交，以产生下一代的后代植物的种子。在特定实施方案中，品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的花椰菜植物是母本。在其它实施方案中，品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的花椰菜植物是父本。在一个实施方案中，产生的植物是被命名为RX05951180的杂交花椰菜品种。
在进一步的实施方案中，该方法可以额外包括：(c)由所述下一代的后代植物的种子生长出下一代的后代植物，并且使该下一代的后代植物与它自己或第二植物杂交；并且重复该步骤另外3-10代，以产生来源于品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物。来源于品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物可以是近交系，并且上述重复的杂交步骤可以被定义为包括足以产生近交系的近交。在该方法中，可能希望选择步骤(c)产生的特定植物，以按照步骤(b)和(c)继续杂交。通过选择具有一个或多个希望的性状的植物，获得来源于品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂交花椰菜品种RX05951180的植物，它具有该品系的一些希望的性状，以及可能的其它选择的性状。
在本发明的另一方面，提供了包含增加的遗传性状的杂交花椰菜品种RX05951180的植物。该遗传性状可以包括为显性或隐性等位基因的基因座。在本发明的特定实施方案中，增加的基因座赋予一种或多种性状，例如除草剂耐受性、昆虫抗性、抗病性和改变的碳水化合物代谢。例如，转基因可以通过遗传转化技术导入植物中。
除非特别指出，此处所述的关于本发明一方面的任何实施方案也适用于本发明的其它方面。
用语“大约”用来表示一个数值包括用来确定该数值的装置或方法的标准误差。权利要求书中使用的词语“或”表示“和/或”，除非明确指出只是替代方案，或者替代方案互相排斥，尽管公开内容支持只表示替代方案和“和/或”的定义。当在权利要求书中与词语“包含”或其它开放式语言一起使用时，用语“一个”和“一种”表示“一种或多种”，除非具体指出。用语“包含”、“具有”和“包括”是开放式的连系动词。一个或多个这种动词的任何形式或时态，例如“包含”、“具有”、“包括”，也是开放式的。例如，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个步骤的任何方法不限于只具有这一个或多个步骤，还包括其它未列出的步骤。同样，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个性状的任何植物不限于只具有这一个或多个性状，还包括其它未列出的性状。
本发明的其它目的、特征和优点通过以下详细描述将是明显的。但是应当理解，提供的详述和任何具体实施例，尽管说明本发明的具体实施方案，但只是举例说明，因为基于该详述，本发明的精神和范围内的各种改变和修改对于本领域技术人员将是明显的。
附图说明
图1显示一组花椰菜测试杂交种的茎的垂直截面，以证明“裂茎”或“空茎”的表达的变化。这些品种在夏季/初秋条件下以50×50cm的间隔生长。将特征评分为存在/不存在，即，所有茎都被评分为存在，只有右下方的一个被评分为不存在。
图2显示杂交花椰菜品种Monaco、Legacy、Ironman和RX05951180(在图中称为SVR 1180)的茎的水平截面。这些品种在夏季/初秋以50×50cm的间隔生长。在这个具体的试验中，Ironman和RX05951180表现出对空茎的抗性。
发明详述
本发明提供同时具有空茎/裂茎抗性和其它希望的性状如高产量和高质量的花椰菜植物。在以前的品系中观察到，尽管某些个体近交亲本系可以显示空茎/裂茎病抗性，但是一旦亲本系组合为产生足够的杂种优势的杂种，以能够产生400-600g高质量的冠(产量的量度)，抗性就丧失。缺乏的是能够产生表现出基本的空茎/裂茎抗性以及其它希望的性状如高产量和高质量的杂种的近交亲本。对空茎和/或裂茎形成的抗性是一个重要的进步，因为空茎或裂茎可损害产物或使之降级，茎倾向于在收获后变为褐色或者开始腐烂。裂茎或空茎主要发生在支持花椰菜作物快速生长和发育的气候条件下；即，温暖的夏季/秋季和充足的降水。有些加工者也使用花椰菜的茎与花椰菜的小花混合，裂茎或空茎需要额外的劳动来从茎中清除褐色的或腐烂的组织。
杂种RX05951180是结合了全气候条件下的空茎或裂茎病抗性和良好的冠质量和高产量的第一个冠(crown)花椰菜杂种。RX05951180按照欧洲、中东和非洲(EMEA)规格可以被分类为“Crown”花椰菜，这种规格需要圆顶形的、密集的具有均匀小球的块，成熟时的单头重量大约为400-600克。术语“单头”被定义为花椰菜的头，包括与所述头相连的茎部分，其中从头顶部到相连的茎的末端的总长度大约为16cm。
杂交花椰菜品种RX05951180是对遗传学上基本无关并且不显示这种生理病害的类型进行18年轮回选择的结果。该品种对于下文所述的性状在环境影响的限度内显示均匀性和稳定性。该品种的足够的种子产量通过近交亲本系的杂交提供。品种RX05951180表现出许多以下描述的改良的性状，包括以上所述的产量、成熟时的头重量和对空茎和/或裂茎的抗性。
A.来源和育种历史
亲本系BRM53-3916通过微孢子培养从品系F2DCNK2/398-1596-1产生。品系F2DCNK2/398-1596-1通过谱系选择法从F1[DCNK2]F10×[MARATHON]DH中选择。杂种RX05951180是亲本系BRM53-3915与亲本系BRM53-3916的组合产物。
B.生理学和形态学特征
根据本发明的一个方面，提供了具有花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的生理学和形态学特征的植物。花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的生理学和形态学特征的说明在表1中列出。
表1：品系BRM53-3915和BRM53-3916的生理学和形态学特征*
  表型：   BRM53-3915  BRM53-3916
  植物大小：   中  中
  柄直径：   中  中
  叶子的姿态   半直立  半直立
  发芽的突出：   发芽(腋生+基生)  发芽(腋生+基生)
  叶子的形状：   伸长的  伸长的
  叶缘：   波浪形(波状)  波状
  叶柄翼：   存在  存在
  叶子的颜色：   蓝绿  灰绿
  叶子颜色强度：   中  中
  起泡：   弱  非常弱
  纵截面的头形状：   圆形  圆形
  头的拱起：   圆顶  圆顶
  头的突出(HEX)：   叶子内  叶子内
  头的颜色：   蓝绿  灰绿
  头的颜色强度：   中  中
  小球大小   细  中
  特定生长季节的早熟   中晚  中晚
*这些是典型的值。这些值可能由于环境而变化。基本相当的其它值也在本发明的范围内。
花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916可以如下繁殖：使用本领域技术人员熟悉的技术，种植该品系的种子，在近缘授粉条件下培育得到的花椰菜植物，并收获得到的种子。
同样根据本发明，也提供了具有杂交花椰菜品种RX05951180的生理学和形态学特征的植物。杂交花椰菜品种RX05951180的生理学和形态学特征的说明在表2中列出。
表2：品种RX05951180的生理学和形态学特征*
  植物大小：   大
  柄直径：   中/大
  叶子的姿态：   半直立
  发芽的突出：   发芽(腋生+基生)
  叶子的形状：   伸长(中)
  叶缘：   波形
  叶柄翼：   存在
  叶子的颜色：   蓝绿
  叶子颜色强度：   暗
  起泡：   弱
  纵截面的头形状：   圆形
  头的拱起：   高圆顶
  头的突出(HEX)：   叶子内
  头的颜色：   绿色
  头的颜色强度：   中暗
  小球大小   细
  特定生长季节的早熟   晚
*这些是典型的值。这些值可能由于环境而变化。基本相当的其它值也在本发明的范围内。
杂交花椰菜品种RX05951180植物可以通过培育该品种的种子(如ATCC保藏的种子)稳定地产生。
D.培育花椰菜品系BRM53-3915、BRM53-3916和RX05951180
本发明的一个方面涉及使本发明的植物与它本身或第二植物杂交的方法以及通过这些方法产生的种子和植物。这些方法可以用于繁殖花椰菜品系，如BRM53-3915或BRM53-3916，或者可以用来产生杂种花椰菜种子和由其生长成的植物。例如，杂种种子通过品系BRM53-3916与第二花椰菜亲本系杂交产生。杂交花椰菜品种RX05951180的种子和植物是其非限定性的例子。
使用一个或多个起始品种开发进一步的品种是本领域中公知的。根据本发明，新型品种的产生可以通过杂交本发明的近交系例如BRM53-3915或BRM53-3916或杂种品种例如RX05951180，然后根据这些众所周知的方法进行多代培育。新品种可以通过与任何第二植物杂交而产生。在为了开发新品系而选择这种第二植物杂交时，可能希望选择那些本身表现出一种或多种选择的所需特征或者在杂种组合时表现出所需特征的植物。一旦进行最初的杂交，就进行近交和选择以产生新品种。为了开发均一的品系，通常涉及五代或更多代的自交和选择。
新品种的均一品系也可以通过倍增单倍体开发。该技术允许产生纯育品系(true breeding line)，而不需要多代自交和选择。以这种方式，纯育品系可以在少至一代内产生。单倍体胚可以从小孢子、花粉、花药培养物或子房培养物产生。单倍体胚然后可以自发倍增，或者通过化学处理(例如秋水仙碱处理)倍增。或者，单倍体胚可以生长为单倍体植物，并且进行处理以诱导染色体倍增。在任一情况下，获得可育的纯合植物。根据本发明，这些技术中的任一种可以对品系BRM53-3916及其后代使用，以获得纯合品系。
新品种可以如下产生，例如，使品系BRM53-3915、BRM53-3916或杂种品种RX05951180与任何第二植物杂交，在各代和/或通过倍增单倍体技术选择后代。在为了开发新品系而选择第二植物杂交时，可能希望选择那些本身表现出一种或多种选择的所需特征或者在后代中表现出所需特征的植物。在一个或多个品系杂交后，可以开发出纯育品系。
回交也可以用来改良近交植物。回交将所需的特定性状从一个近交或非近交来源转移给缺乏该性状的近交株。这可以通过以下步骤完成：例如，首先使优良的近交株(A)(回归亲本)与携带所述性状的一个或多个适当基因座的供体近交株(非回归亲本)杂交。该杂交的后代然后与优良回归亲本(A)回交，然后在得到的后代中针对从非回归亲本转移的所需的性状进行选择。在五代或更多代回交以及对所需性状的选择后，后代对于控制所转移的特征的基因座而言是杂合的，但是大多数或几乎全部其它基因座类似于优良亲本。最后一代回交是自交，得到所转移的性状的纯育后代。
本发明的品系特别适合于基于该品系的遗传背景的优良性质开发新的品系。在为了开发新花椰菜品系而选择与BRM53-3915、BRM53-3916或RX05951180杂交的第二植物时，一般优选地选择那些本身显示一种或多种选择的希望的特征或者在杂种组合时显示希望的特征的植物。希望的特征的一个例子是具有均匀的深绿色并且没有任何变黄的头。希望的特征的其它例子可以包括，例如：种子产量、大小、形状和均匀性、小花大小、形状、颜色和均匀性、小细头大小、高圆顶形头、密集的头、光滑的头、大的头、早期成熟、抗病性、除草剂耐受性、幼苗活力、对土壤条件的适应性、对气候条件的适应性、例如耐热性和/或耐寒性、以及均匀的植物高度。
E.杂交花椰菜品种RX05951180的性能特征
如上所述，品种RX05951180显示出希望的农艺学性状，包括高产量和高质量以及对空茎病/裂茎病的抗性。杂种RX05951180首先在夏季和秋季进行试验。注意到RX05951180没有形成空茎，而其它标准品种形成空茎。在两个地点(Enkhuizen和Wageningen)使用两个密度(75×50cm和50×50cm)进行2年多的重复试验，采用裂区设计，每个样地24株植物，当头的直径达到大约16cm时收获中心的10株植物并在距头的顶部大约16cm处切开，该试验证实了以前的发现，重复4次。参照品种是Pixel——日本和澳大利亚的标准品种、Marathon——世界范围的crowns的标准、和Heritage——一个Seminis品种，它是美国和墨西哥的Crowns和freezers的标准。结果显示在以下表4中。下一年，在试验中增加了一个新品种Parthenon。Parthenon已经在南欧发展为crown花椰菜的新标准。重复的试验证实了先前的发现，如表5所示。
表3和表4的说明：收获是从种植到收获(头的直径为16cm)的平均天数；重量是直径大约16cm、长度大约16cm的一个头的以克为单位的平均重量；空茎是具有空茎或裂茎的植物的百分比(通过观察每个样地的10个植物的茎的水平截面来确定，在距植物的头的顶部16cm处形成贯穿茎的水平切口)；形状：1为扁平，3为半/中圆顶形/扁平，5为圆顶形；小球：1为非常粗糙/大，3为中度，5为非常细；猫眼(cateyes)：1为非常多，3为中度，5为没有；GI(总体印象)：1为非常差，9为非常好；“av.”为平均值；“RX1180”指杂交花椰菜品种RX05951180。
Figure G2008800159612D00161
Figure G2008800159612D00171
Figure G2008800159612D00181
如上所示，品种RX05951180表现出优良的性状，可包括一个或多个以下性状：与其它品系或品种相比的产量(头的重量)、提高的空茎抗性、头的形状和小球的大小。本发明的一个重要方面因此提供了商业应用的品种的种子。
G.本发明的其它实施方案
当术语花椰菜植物在本发明的上下文中使用时，也包括改良后至少包含第一所需遗传性状的植物。在一个实施方案中，这些植物可以通过被称为回交的植物育种技术开发，其中除通过回交技术转移到植物内的基因座以外，品种的基本上全部所需形态学和生理学特性也都被恢复。此处使用的术语单基因座转换的植物是指通过被称为回交的植物育种技术开发的花椰菜植物，其中除通过回交技术转移到品种内的单基因座以外，品种的基本上全部所需形态学和生理学特性也都被恢复。
本发明可以使用回交方法以改善或向本发明品种内引入特征。为所需的特征贡献了基因座的亲本花椰菜植物被称为非回归亲本或供体亲本。该术语是指非回归亲本在回交方案中使用一次，因此不再重现的事实。来自非回归亲本的一个或多个基因座所转移到的亲本花椰菜植物被称为回归亲本，因为它在回交方案中使用几轮。
在典型的回交方案中，感兴趣的原始品种(回归亲本)与携带将要转移的感兴趣的单基因座的第二品种(非回归亲本)杂交。该杂交产生的后代然后再次与回归亲本杂交，重复该过程直到获得花椰菜植物，其中除来自非回归亲本的单个转移基因座以外，回归亲本的基本上全部所需形态学和生理学特性也都在转换的植物中恢复。
合适的回归亲本的选择是成功的回交方法的重要的一步。回交方案的目的是改变或替换原始品种中的单个性状或特征。为了实现这一点，用来自非回归亲本的所需的基因座修饰或替代回归品种的单基因座，同时保留原始品种的基本上所有其余的所需遗传构成，因此保留所需的生理学和形态学结构。特定非回归亲本的选择将取决于回交的目的；一个主要的目的是向植物中增加一些商业上希望的性状。确切的回交方案取决于为了确定合适的测试方案而改变的特征或性状。尽管在被转移的特征是显性等位基因时回交方法被简化，但是也可以转移隐性等位基因。在这种情况下，有必要引入后代测试来确定所需的特征是否被成功转移。
在一个实施方案中，以BRM53-3915或BRM53-3916作为回归亲本的回交的后代花椰菜植物包含(i)来自非回归亲本的所需性状，和(ii)花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916的所有生理学和形态学特征，这在相同环境条件下生长时以5％的显著性水平确定。
花椰菜品种也可以由两个以上的亲本发展而成。被称为改良回交的技术在回交过程中使用不同的回归亲本。改良回交可以用来将原始回归亲本替换为具有某些更希望的特征的品种，或者可以使用多个亲本从每一个中获得不同的希望的特征。
已经鉴定了多个单基因座，它们在新近交系的开发中没有定期选择，但是能够通过回交技术改良。单基因座性状可以是转基因的也可以不是转基因的；这些性状的例子包括但不限于雄性不育、除草剂耐受性、细菌、真菌或病毒病抗性、昆虫抗性、雄性生育力的恢复、改变的脂肪酸或碳水化合物代谢、和提高的营养质量。其中包括通常通过核遗传的基因。
可以使用直接选择，其中单基因座作为显性性状。显性性状的一个例子是炭疽病抗性性状。对于这个选择方法，初始杂交的后代在回交前用炭疽孢子喷洒。喷洒消灭了所有不具有所需的炭疽病抗性特征的植物，而只有那些具有炭疽病抗性基因的植物用于随后的回交。该过程然后在全部其它回交代中重复。
用于育种的花椰菜植物的选择不一定依赖于植物的表型，而是可以基于遗传学调查。例如，人们可以使用与感兴趣的性状密切遗传相关的合适的遗传标记。可以使用这些标记之一确定特定杂交的后代中是否存在一种性状，并且可以在后代选择中使用该标记进行连续育种。该技术通常被称为标记辅助的选择。任何其它类型的遗传标记或其它能够确定植物中感兴趣的性状的相对存在或不存在的试验也可以用于育种目的。适用于花椰菜育种的标记辅助的选择的程序是本领域公知的。这些方法尤其用于隐性性状和可变表型的情况中，或者常规试验可能更昂贵、耗时或有其它缺点的情况。可以根据本发明使用的遗传标记的类型包括但不必然限于简单序列长度多态性(SSLPs)(Williams等人，1990)、随机扩增多态性DNAs(RAPDs)、DNA扩增指纹分析(DAF)、序列特征性扩增区(SCARs)、任意引物聚合酶链式反应(AP-PCR)、扩增片段长度多态性(AFLPs)(EP 534858，特别引入本文作为参考)和单核苷酸多态性(SNPs)(Wang等人，1998)。
H.通过基因工程产生的植物
可以通过回交引入以及直接引入植物中的许多有用的性状是通过遗传转化技术引入的那些性状。遗传转化因此可以用来将选择的转基因插入到本发明的杂交花椰菜品种中，和/或本发明的杂交花椰菜品系的亲本中，或者可以用于制备可通过回交引入的转基因。包括花椰菜在内的植物的转化方法是本领域技术人员公知的。例如，Cao等人(1999)公开了一种产生转基因花椰菜的方法。
如Puddephat等人(1996)所述，向如花椰菜的甘蓝栽培形式中转移基因需要可重复的、有效的遗传转化和植物再生方法。大多数研究针对发展土壤杆菌介导的转化方法，而较少强调直接基因转移技术。甘蓝转化的常用技术尚未出现，在很大程度上是由于基因型之间固有的变异性。主要的困难是有效的植物再生与基因转移的结合。低效的选择可能导致在根癌土壤杆菌介导的转化后再生为嵌合植物。使用毛根土壤杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的转化已经获得有希望的结果。几乎没有引入农学上有用的特征，大多数研究仅局限于引入标记和报道基因。
一般而言，可以用于花椰菜的遗传转化的技术包括但不限于电穿孔、微粒轰击、土壤杆菌介导的转化和原生质体的直接DNA摄取。关于涉及花椰菜的转化技术的综述，参见，例如Earle等人(1996)；Puddephat等人(1996)。
为了通过电穿孔实现转化，人们可以使用易碎的组织，如细胞或胚发生愈伤组织的悬浮培养物，或者人们可以直接转化未成熟的胚或其它组织化的组织。在该技术中，人们通过使其接触果胶降解酶(果胶酶)部分降解所选择的细胞的细胞壁或者以控制的方式机械创伤组织。
一种特别有效的将转化DNA片段递送到植物细胞的方法是微粒轰击。在该方法中，颗粒用核酸包被并且通过推进力递送到细胞内。颗粒的例子包括那些由钨、铂和优选地由金组成的颗粒。为了轰击，将悬浮液中的细胞浓缩到滤纸或固体培养基上。或者，未成熟的胚或其它靶细胞可以排列在固体培养基上。将要轰击的细胞置于微粒挡板(macroprojectile stopping plate)下方的适当距离处。该技术已经用于转化花椰菜，例如用于β-葡糖醛酸糖苷酶基因的瞬时表达(Puddephat等人，1999)。
通过加速将DNA递送到植物细胞内的方法的一个说明性的实施方案是生物弹道颗粒递送系统(Biolistics Particle Delivery System)，它可以用来推动涂覆DNA的颗粒或细胞通过网筛，如不锈钢或或Nytex筛，到达被目标花椰菜细胞覆盖的表面上。网筛将颗粒分散开，使得它们不会以大的聚集体的形式被递送到接受细胞中。相信置于发射装置与待轰击细胞之间的网筛可减小发射聚集物的大小，并且可以通过减少过大发射物对接受细胞的损害导致较高的转化频率。
微粒轰击技术广泛适用，并且可以用于转化实际上任何植物种。美国专利No.6,297,056中提出了对花椰菜使用该技术的一个例子。
土壤杆菌介导的转移是另一种广泛适用的将基因座导入植物细胞中的系统。该技术的一个优点是可以将DNA导入整个植物组织中，从而不再需要从原生质体再生出整个植物。现代土壤杆菌转化载体能够在大肠杆菌以及土壤杆菌中复制，允许方便的操作(Klee等人，1985)。而且，用于土壤杆菌介导的基因转移的载体的最新技术进步改善了载体中基因和限制位点的排列，从而有利于能够表达多种多肽编码基因的载体的构建。所述的载体具有方便的多接头区域，该区域的侧翼为用于直接表达插入的多肽编码基因的启动子和多腺苷酸化位点。另外，含有武装的和卸甲的Ti基因的土壤杆菌可以用于转化。
在土壤杆菌介导的转化有效的植物株中，这是选择的方法，因为基因座转移具有易于实现和已有规定的性质。使用土壤杆菌介导的植物整合载体将DNA导入植物细胞中是本领域公知的(Fraley等人，1985；美国专利No.5,563,055)。使用土壤杆菌介导的花椰菜转化的例子包括在美国专利Nos.6,043,409和5,998,702中发现的那些。
植物原生质体的转化也可以使用基于磷酸钙沉淀、聚乙二醇处理、电穿孔和这些处理的组合的方法来实现(参见，例如，Potrykus等人，1985；Omirulleh等人，1993；Fromm等人，1986；Uchimiya等人，1986；Marcotte等人，1988)。Choi等人(1994)和Ellul等人(2003)举例说明了植物的转化和外源遗传元件的表达。
大量启动子可用于任何感兴趣的基因的植物基因表达，包括但不限于选择性标记、可评分的标记、害虫抗性基因、抗病性、营养增强和其它任何在农学上有意义的基因。可用于花椰菜植物基因表达的组成型启动子的例子包括但不限于：花椰菜花叶病毒(CaMV)P-35S启动子，它在大多数植物组织中引起组成型、高水平的表达(参见，例如，Odel等人，1985)，包括单子叶植物(参见，例如，Dekeyser等人，1990；Terada和Shimamoto，1990)；串联重复形式的CaMV 35S启动子，增强的35S启动子(P-e35S)、胭脂氨酸合酶启动子(An等人，1988)、章鱼氨酸合酶启动子(Fromm等人)；和如美国专利No.5,378,619所述的玄参花叶病毒(P-FMV)启动子，和增强形式的FMV启动子(P-eFMV)，其中P-FMV的启动子序列串联复制，花椰菜花叶病毒19S启动子，甘蔗杆状病毒启动子，鸭跖草黄斑驳病毒启动子，和已知在植物细胞中表达的其它植物DNA病毒启动子。
响应环境、激素、化学和/或发育信号而调节的多种植物基因启动子可用于在植物细胞中表达可操作连接的基因，包括被以下因素调节的启动子：(1)热(Callis等人，1988)，(2)光(例如，豌豆rbcS-3A启动子，Kuhlemeier等人，1989；玉米rbcS启动子，Schaffner和Sheen，1991；或叶绿素a/b-结合蛋白启动子，Simpson等人，1985)，(3)激素，如脱落酸(Marcotte等人，1989)，(4)创伤(例如，wunl，Siebertz等人，1989)；或(5)化学物质，如茉莉酮酸甲酯、水杨酸或安全剂。也可以有利地使用器官特异性启动子(例如，Roshal等人，1987；Schernthaner等人，1988；Bustos等人，1989)。
可以引入本发明的花椰菜品系或品种中的示例性的核酸包括，例如，来自另一个种的DNA序列或基因，乃至来源于或存在于相同的种中，但是通过基因工程方法而不是经典繁殖或育种技术掺入受体细胞中的基因或序列。但是，术语“外源的”也用来指正常情况下不存在于所转化的细胞中，或者也许只是不以转化DNA区段或基因中发现的形式、结构等存在的基因，或者正常情况下存在但是希望以不同于天然表达模式的方式表达(例如过量表达)的基因。因此，术语“外源”基因或DNA意在指任何引入接受细胞中的基因或DNA区段，无论这种细胞中是否可能已经存在类似的基因。外源DNA中包含的DNA类型可以包括在该植物细胞中已经存在的DNA、来自另一植物的DNA、来自不同生物体的DNA、或外部产生的DNA，如包含基因的反义信息的DNA序列，或编码一种基因的合成或修改形式的DNA序列。
成百个或者上千个不同的基因是已知的，并且可能能够导入本发明的花椰菜植物中。人们可以选择导入花椰菜植物中的特定基因和相应表型的非限制性例子包括一种或多种昆虫抗性基因，如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)(Bt)基因、害虫抗性，如真菌病控制基因、除草剂耐受性，如赋予草甘膦抗性的基因，和质量改进基因，如产量、营养增强、环境或应激耐受性，或植物生理学的任何希望的变化，生长、发育、形态学或植物产物。例如，结构基因包括任何赋予昆虫抗性的基因，包括但不限于芽孢杆菌昆虫控制蛋白基因，如WO 99/31248(在此全文引入作为参考)、美国专利No.5,689,052(在此全文引入作为参考)、美国专利Nos.5,500,365和5,880275(在此全文引入作为参考)所述。在另一个实施方案中，结构基因可以赋予对除草剂草甘膦的抗性，如包括但不限于如美国专利No.5,633,435(在此全文引入作为参考)所述的土壤杆菌菌株CP4草甘膦抗性EPSPS基因(aroA:CP4)或如美国专利No.5,463,175(在此全文引入作为参考)所述的草甘膦氧化还原酶基因(GOX)的基因所赋予的抗性。
此外，DNA编码序列可能通过编码非翻译RNA分子影响这些表型，该非翻译RNA分子引起内源基因表达的靶向抑制，例如，通过反义或共抑制介导的机制(参见，例如，Bird等人，1991)。RNA也可以是工程化为切割所需内源性mRNA产物的催化RNA分子(即核酶)(参见，例如，Gibson和Shillito，1997)。因此，任何产生表达感兴趣的表型或形态学变化的蛋白质或mRNA的基因可用于实施本发明。
I.定义
在说明书和表格中使用了大量的术语。为了提供对说明书和权利要求书的清楚、一致的理解，提供了下列定义：
等位基因：基因座的一个或多个替代形式中的任一种，其中所有等位基因涉及一种性状或特征。在二倍体细胞或生物体中，给定基因的两个等位基因占据一对同源染色体上的相应基因座。
回交：育种者将杂种后代例如第一代杂种(F1)与该杂种后代的亲本之一重复杂交的过程。回交可以用来将一个或多个单基因座转换从一个遗传背景导入另一个中。
杂交：两个亲本植物的杂交。
异花传粉：通过来自不同植物的两个配子的结合而受精。
二倍体：具有两套染色体的细胞或生物体。
去雄(Emasculate)：除去植物的雄性器官或者使用导致雄性不育的细胞质或核遗传因子或化学试剂灭活该器官。
酶：可以作为生物反应中的催化剂的分子。
F1杂种：两个非等基因植物杂交的第一代后代。
基因型：细胞或生物体的遗传组成。
单倍体：具有二倍体中两套染色体中的一套的细胞或生物体。
连锁：同一染色体上的等位基因比独立传递时的预期值更经常地倾向于一起分离的现象。
标记：易于检测的表型，优选地以共显性方式遗传(二倍体杂合子中一个基因座处的两个等位基因易于检测)，不含环境变异成分，即可遗传性为1。
表型：细胞或生物体的可检测的特征，该特征是基因表达的表现。
数量性状基因座(QTL)：数量性状基因座(QTL)是指通常连续分布的、一定程度地控制可用数字代表的性状的基因座。
再生：从组织培养物发育为植物。
抗性：如此处所用的术语“抗性”和“耐受性”可交换使用，用来描述对于特定的生物害虫、病原体、非生物影响或环境条件不显示症状的植物。这些术语也用来描述显示一定的症状但是仍然能够以可以接受的产量产生可销售的产品的植物。被称为抗性或耐受性的一些植物只是甚至在植物矮化和产量降低时，它们仍然可以产生作物。
自花传粉：花粉从花药向相同植物的柱头的转移。
单基因座转换的(转换)植物：通过植物育种技术开发的植物被称为回交，其中除了通过回交技术和/或通过遗传转化转移到品种中的单基因座的特征以外，花椰菜品种的基本上所有希望的形态学和生理学特性也都得到恢复。
基本相当：当比较时显示与平均值没有统计学显著性差异(例如，p＝0.05)的特征。
四倍体：具有四套染色体的细胞或生物体。
组织培养物：包含相同或不同类型的分离的细胞或组织为植物部分的这些细胞集合的组合物。
转基因：包含已经通过转化导入花椰菜植物的基因组内的序列的基因座。
三倍体：具有三套染色体的细胞或生物体。
J.保藏信息
以上公开的并且在权利要求中提到的花椰菜品系BRM53-3915、BRM53-3916和杂交花椰菜品种RX05951180已经在美国典型培养物保藏中心(ATCC)，10801 University Blvd.，Manassas，VA 20110-2209保藏。花椰菜品系BRM53-3915的保藏日是2008年5月2日，花椰菜品系BRM53-3916为2007年1月24日，杂交花椰菜品种RX05951180为2006年12月11日。保藏的花椰菜品系BRM53-3916的种子的保藏号为ATCC保藏号PTA-8175。保藏的花椰菜品系BRM53-3915的种子的保藏号为ATCC保藏号PTA-9181。保藏的花椰菜品系RX05951180的种子的保藏号为ATCC保藏号PTA-8072。在授予专利时，对保藏的所有限制都将解除，并且保藏的目的是满足37C.F.R.§1.801-1.809的所有要求。保藏物将在保藏机构维持30年的时间，或者在最后一次请求后5年，或者专利的有效期，取较长的那个期限，在此期间必要时会进行替换。
尽管为了清楚和便于理解，已经通过举例说明和实施例详细描述了上述发明，但是应当明白某些改变和变化可以在本发明的范围内实施，只受所附权利要求的范围限制。
此处引用的所有参考文献都在此引入作为参考。
参考文献
下列参考文献特别引入本文作为参考，它们提供对本文所述作出补充的示例性的程序上或其它方面的细节：
美国专利5,378,619
美国专利5,463,175
美国专利5,500,365
美国专利5,563,055
美国专利5,633,435
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美国专利5,880,275
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WO 99/31248

Claims (45)

1.一种同时显示空茎病抗性和高产量和高头质量的花椰菜植物。
2.权利要求1的花椰菜植物，其中当两种植物在致使品种Marathon发生空茎病的环境生长条件下生长时，所述植物表现空茎病的发病率低于品种Marathon的空茎病发病率的大约10％。
3.权利要求1的花椰菜植物，其中所述植物在标准生长条件下产生大约400克至大约600克的平均成熟单头重量。
4.权利要求1的花椰菜植物，其中所述植物表达杂交花椰菜品种RX05951180的所有生理学和形态学特征，所述品种的种子样品已经以ATCC保藏号PTA-8072保藏。
5.权利要求1的花椰菜植物，其包含花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的至少第一套染色体，所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏。
6.一种花椰菜植物，其含有花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的至少第一套染色体，所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏。
7.花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916的种子，所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏。
8.由权利要求7的种子生长成的植物。
9.权利要求8的植物的植物部分。
10.权利要求9的植物部分，进一步限定为花椰菜的叶、小花、胚珠、花粉、细胞或头。
11.一种花椰菜植物或其部分，其具有权利要求8的花椰菜植物的所有生理学和形态学特征。
12.花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的可再生细胞的组织培养物，所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏。
13.权利要求12的组织培养物，其包含来自选自胚、分生组织、子叶、花粉、叶、花药、根、根尖、雌蕊、花、小花、种子和柄的植物部分的细胞或原生质体。
14.由权利要求12的组织培养物再生的花椰菜植物，其中所述再生的植物表达花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的所有生理学和形态学特征，所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏。
15.一种无性繁殖花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的植物的方法，包括以下步骤：
(a)从花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的植物上收集能够繁殖的组织，所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏；
(b)培育所述组织以获得增殖的芽；和
(c)使所述增殖的芽生根，以获得生根的小植物。
16.权利要求15的方法，进一步包括由所述生根的小植物生长为植物。
17.一种将希望的性状导入花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的方法，包括：
(a)使品系BRM53-3915或BRM53-3916的植物与包含希望的性状的第二花椰菜植物杂交，产生F1后代，其中所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏；
(b)选择包含希望的性状的F1后代；
(c)使选择的F1后代与品系BRM53-3915或BRM53-3916的植物杂交，产生回交后代；
(d)选择包含希望的性状和花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916的生理学和形态学特征的回交后代；和
(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或三次以上，以产生选择的包含希望的性状的第四代或第四代以上的回交后代。
18.通过权利要求17的方法产生的花椰菜植物。
19.一种产生包含添加的所需性状的花椰菜品系BRM53-3915或花椰菜品系BRM53-3916的植物的方法，该方法包括向花椰菜品系BRM53-3915或BRM53-3916的植物中导入赋予所需性状的转基因，其中所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏。
20.一种确定权利要求8的植物或其第一代后代的基因型的方法，包括从所述植物获得核酸样品，以及检测所述核酸中的多个多态性。
21.权利要求20的方法，进一步包括在计算机可读介质上存储检测多个多态性的结果的步骤。
22.通过权利要求21的方法产生的计算机可读介质。
23.一种产生来源于品系BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜植物的种子的方法，包括以下步骤：
(a)使品系BRM53-3915或BRM53-3916的花椰菜植物与第二花椰菜植物杂交，其中所述花椰菜品系BRM53-3915和BRM53-3916的种子样品已经分别以ATCC保藏号PTA-9181和PTA-8175保藏；和
(b)使来源于BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜植物结出种子。
24.权利要求23的方法，进一步包括以下步骤：
(c)使由所述来源于BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜种子生长成的植物与它自己杂交或与第二花椰菜植物杂交，产生另外的来源于BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜种子；
(d)培育步骤(c)的所述另外的来源于BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜种子，以产生另外的来源于BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜植物；和
(e)重复(c)和(d)的杂交和培育步骤，以产生进一步的来源于BRM53-3915的或来源于BRM53-3916的花椰菜植物。
25.权利要求23的方法，其中所述第二花椰菜植物是近交花椰菜品系的植物。
26.以品系BRM53-3915或品系BRM53-3916的植物作为一个亲本的F1杂种种子。
27.权利要求26的F1杂种种子，其中品系BRM53-3915或品系BRM53-3916是父本。
28.权利要求26的F1杂种种子，其中品系BRM53-3915或品系BRM53-3916是母本。
29.权利要求27的F1杂种种子，其中F1杂种种子是通过作为母本的所述品系BRM53-3915或品系BRM53-3916的植物与作为雄性不育的母本的第二花椰菜植物杂交产生的。
30.权利要求26的种子，其中所述种子是杂交花椰菜品种RX05951180的种子，所述品种的种子样品已经以ATCC保藏号PTA-8072保藏。
31.通过培育权利要求26的种子产生的植物。
32.权利要求31的植物，其中所述植物是杂交花椰菜品种RX05951180的植物，所述品种的种子样品已经以ATCC保藏号PTA-8072保藏。
33.权利要求32的植物的植物部分。
34.权利要求33的植物部分，进一步限定为花椰菜的叶、小花、胚珠、花粉、细胞或头。
35.权利要求32的植物的细胞的组织培养物。
36.权利要求35的组织培养物，其中所述组织培养物的细胞来自选自胚、分生组织、子叶、花粉、叶、花药、根、根尖、雌蕊、花、小花、种子和柄的组织。
37.由权利要求35的组织培养物再生的花椰菜植物，其中所述再生的植物表达杂交花椰菜品种RX05951180的所有生理学和形态学特征，所述品种的种子样品已经以ATCC保藏号PTA-8072保藏。
38.权利要求31的种子，其中品系BRM53-3915或品系BRM53-3916的植物和第二植物中的一个或两个进一步包含转基因。
39.权利要求31的种子，其中品系BRM53-3915或品系BRM53-3916的植物和第二植物中的一个或两个包含单基因座转换。
40.一种无性繁殖杂交花椰菜品种RX05951180的植物的方法，包括以下步骤：
(a)从权利要求32的植物上收集能够繁殖的组织；
(b)培育所述组织以获得增殖的芽；和
(c)使所述增殖的芽生根以获得生根的小植物。
41.权利要求40的方法，进一步包括从所述生根的小植物生长成植物。
42.一种确定权利要求32的植物的基因型的方法，包括从所述植物获得核酸样品，以及检测所述核酸中的多个多态性。
43.权利要求42的方法，进一步包括在计算机可读介质上存储检测多个多态性的结果。
44.通过权利要求43的方法产生的计算机可读介质。
45.一种产生花椰菜的方法，包括：
(a)获得权利要求32的植物，其中所述植物已栽培至成熟；和
(b)从该植物收集花椰菜。
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