CN101671658A - 生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，该工艺的具体步骤为：a、在温度为8～10℃，阳光照度为3500～4000LUX的环境中，选取厚度为8～15公分的富硒苔藓作为培养基质；富硒苔藓所生长的土壤含水量保证在50％～65％。b、将蓬虆的种子按照株距10～15cm，行距为10～15cm的距离埋进a步骤的富硒苔藓中；c、3个月至3个半月以后，采摘蓬虆的叶片备用；d、用水、食盐和硒精按照质量比为100∶2∶1配置成溶液；e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡10～20分钟，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可。该方法为纯生物提取法，较之化学的提取方法，简洁易操作，节省人力和物力，且效果很好。

Description

生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺

技术领域：

本发明属于生物提取领域，尤其涉及一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺。

背景技术：

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。而硒是谷胱甘肽过氧化物酶系的组成成分，它能催化谷胱甘肽(GSH)变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，同时促进过氧化氢(H2O2)的分解，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映机体硒水平。

GSH-Px酶系主要包括4种不同的GSH-Px，分别为胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。胞浆GSH-Px由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体，每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸，广泛存在于机体内各个组织，以肝脏红细胞为最多。它的生理功能主要是催化GSH参与过氧化反应，清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基，从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。血浆GSH-Px的构成与胞浆GSH-Px相同，主要分布于血浆中，其功能目前还不是很清楚，但已经证实与清除细胞外的过氧化氢和参与GSH的运输有关。磷脂过氧化氢GSH-Px是分子量为20kDa的单体，含有1个分子硒半胱氨酸。最初从猪的心脏和肝脏中分离得到，主要存在于睾丸中，其它组织中也有少量分布。其生物学功能是可抑制膜磷脂过氧化。胃肠道专属性GSH-Px是由4个分子量为22kDa的亚基构成的四聚体，只存在于啮齿类动物的胃肠道中，其功能是保护动物免受摄入脂质过氧化物的损害。

以上说明谷胱甘肽过氧化物酶是机体内不可缺少的成分，而以往的提取方法比较困难，也比较繁琐，且效果不佳。

发明内容：

发明目的：本发明提供一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其目的是为了解决以往的提取谷胱甘肽过氧化物酶的方法困难、繁琐和效果不佳的问题。

技术方案：本发明是通过以下技术方案实现的：

一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其特征在于：该工艺采用蓬虆在富硒的苔藓中培养来进行生物提取。

该工艺的具体步骤为：

a、在温度为8～10℃，阳光照度为3500～4000LUX的环境中，选取厚度为8～15公分的富硒苔藓作为培养基质；富硒苔藓所生长的土壤含水量保证在50％～65％。

b、将蓬虆的种子按照株距10～15cm，行距为10～15cm的距离埋进a步骤的富硒苔藓中；

c、3个月至3个半月以后，采摘蓬虆的叶片备用；

d、用水、食盐和硒精按照质量比为100∶2∶1配置成溶液；

e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡10～20分钟，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可。

a步骤中的环境选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬的清明节前后。

b步骤中埋种结束后再覆盖一层草莲子，待种子出芽后撤除。

a步骤中的温度为10℃，阳光照度为4000LUX，富硒苔藓的厚度为10公分，富硒苔藓所生长的土壤含水量在55％；c步骤中的采摘时间为100天。

优点效果：本发明提供一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，该工艺主要是通过蓬虆在富硒的苔藓中生长，从而形成富含谷胱甘肽过氧化物酶的植被，该工艺的具体步骤为：a、在温度为8～10℃，阳光照度为3500～4000LUX的环境中，选取厚度为8～15公分的富硒苔藓作为培养基质；富硒苔藓所生长的土壤含水量保证在50％～65％。b、将蓬虆的种子按照株距10～15cm，行距为10～15cm的距离埋进a步骤的富硒苔藓中；c、3个月至3个半月以后，采摘蓬虆的叶片备用；d、用水、食盐和硒精按照质量比为100∶2∶1配置成溶液；e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡10～20分钟，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可；而上述a步骤中的地点，可以是在农用大棚里模拟出来的环境也可以具体选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬的清明节前后，因为秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中年平均降雨量在600～800mm之间，可以很好的保证植物赖以生长的土壤的湿度，且农历4月上旬的温度和照度也恰好满足上述条件；而且该地区靠近我国的硒都陕西紫阳，所以该地区的硒含量也相当丰富；所以选择该地区的苔藓作为培养基础非常合适，且该地区的苔藓面积较大，比较利于大面积的培养种植，以进行重复生产。

该方法为纯生物的原生态提取法，较之化学的提取方法，简洁易操作，节省人力和物力，且效果很好，经过直接比色法检测所采摘的叶片中谷胱甘肽过氧化物酶的含量在155.6u～192.5u/100克左右，基本达到了一个很好的效果。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明做进一步的说明：

本发明提供一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺。

实施例1：

a、选择温度在8℃，阳光照度为3500LUX的环境中，土壤含水率为50％的环境中，选取厚度为8公分的富硒苔藓作为培养基质；该环境可以在大棚中模拟，也可以直接选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬，也就是清明节前后，因为该时段，该地区的环境与本发明所要求的环境比较接近，且该地区的年平均降雨量在600～800mm之间，所以湿度可以满足要求，且距离我国的硒都陕西紫阳比较近，所以该地区的硒含量也相当丰富，所以该地区的苔藓也就含有大量的硒，所以选择该地区的苔藓作为培养基础非常合适；而该地区的苔藓覆盖面积又相当大，很适合大面积的推广作业；如果是在大棚中进行实施的，那么就需要经常的对播种后的富硒苔藓进行定期的洒水，以保证土壤的含水量，进而保证植物有足够的水分吸收。

b、将蓬虆的种子按照株间距为10cm，行距为10cm的距离埋进a步骤的苔藓中；保证行距和株距是为了可以满足种子生长过程对养分的吸收，以及谷胱甘肽过氧化物酶的充分提取；

c、3个月以后，采摘蓬虆的叶片备用；这时，该叶片中即已经含有足量的谷胱甘肽过氧化物酶；

d、用水50kg、食盐1000g和硒精500g配置成溶液；

e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡十分钟，这样做是为了在彻底清洗叶片的同时，保证叶片内的营养元素不至于流失，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可；

另外，在b步骤中播种结束后，可以覆盖一层草莲子，以便为种子进行保温，待出芽后撤去草莲子即可。

这时，经直接比色法检测粉碎后的叶片中含谷胱甘肽过氧化物酶的量为155.6u/100克。

实施例2：

a、选择温度在9℃，阳光照度为3500LUX的环境中，土壤含水率为55％的环境中，选取厚度为10公分的富硒苔藓作为培养基质；该环境可以在大棚中模拟，也可以直接选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬，也就是清明节前后，因为该时段，该地区的环境与本发明所要求的环境比较接近，且该地区的年平均降雨量在600～800mm之间，所以湿度可以满足要求，且距离我国的硒都陕西紫阳比较近，所以该地区的硒含量也相当丰富，所以该地区的苔藓也就含有大量的硒，所以选择该地区的苔藓作为培养基础非常合适；而该地区的苔藓覆盖面积又相当大，很适合大面积的推广作业；如果是在大棚中进行实施的，那么就需要经常的对播种后的富硒苔藓进行定期的洒水，以保证土壤的含水量，进而保证植物有足够的水分吸收。

b、将蓬虆的种子按照间距为10cm、行距为15cm的距离埋进a步骤的苔藓中；保证行距和株距可以满足种子生长过程对养分的吸收，以及谷胱甘肽过氧化物酶的充分提取；

c、100天以后，采摘蓬虆的叶片备用；这时，该叶片中即已经含有足量的谷胱甘肽过氧化物酶；该叶片的采摘可以一直持续到12月末；

d、用水50kg、食盐1000g和硒精500g配置成溶液；

e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡15分钟，这样做是为了在彻底清洗叶片的同时，保证叶片内的营养元素不至于流失，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可；

另外，在b步骤中播种结束后，可以覆盖一层草莲子，以便为种子进行保温，待出芽后撤去草莲子即可。

这时，经直接比色法检测粉碎后的叶片中含谷胱甘肽过氧化物酶的量为180.5u/100克。

实施例3：

a、选择温度在10℃，阳光照度为4000LUX的环境中，土壤含水率为60％的环境中，选取厚度为15公分的富硒苔藓作为培养基质；该环境可以在大棚中模拟，也可以直接选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬，也就是清明节前后，因为该时段，该地区的环境与本发明所要求的环境比较接近，且该地区的年平均降雨量在600～800mm之间，所以湿度可以满足要求，且距离我国的硒都陕西紫阳比较近，所以该地区的硒含量也相当丰富，所以该地区的苔藓也就含有大量的硒，所以选择该地区的苔藓作为培养基础非常合适；而该地区的苔藓覆盖面积又相当大，很适合大面积的推广作业；如果是在大棚中进行实施的，那么就需要经常的对播种后的富硒苔藓进行定期的洒水，以保证土壤的含水量，进而保证植物有足够的水分吸收。

b、将蓬虆的种子按照间距为10cm的距离埋进a步骤的苔藓中，行距为10cm；保证行距和株距可以满足种子生长过程对养分的吸收，以及谷胱甘肽过氧化物酶的充分提取；

c、3个半月以后，采摘蓬虆的叶片备用；这时，该叶片中即已经含有足量的谷胱甘肽过氧化物酶；该叶片的采摘可以一直持续到12月末；

d、用水50kg、食盐1000g和硒精500g配置成溶液；

e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡20分钟，这样做是为了在彻底清洗叶片的同时，保证叶片内的营养元素不至于流失，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可；

另外，如果选择在野外作业，在b步骤中播种结束后，可以覆盖一层草莲子，以便为种子进行保温，待出芽后撤去草莲子即可。

这时，经直接比色法检测粉碎后的叶片中含谷胱甘肽过氧化物酶的量为192.5u/100克。

实施例4：

a、选择温度在10℃，阳光照度为4000LUX的环境中，土壤含水率为55％的环境中，选取厚度为10公分的富硒苔藓作为培养基质；该环境可以在大棚中模拟，也可以直接选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬，也就是清明节前后，因为该时段，该地区的环境与本发明所要求的环境比较接近，且该地区的年平均降雨量在600～800mm之间，所以湿度可以满足要求，且距离我国的硒都陕西紫阳比较近，所以该地区的硒含量也相当丰富，所以该地区的苔藓也就含有大量的硒，所以选择该地区的苔藓作为培养基础非常合适；而该地区的苔藓覆盖面积又相当大，很适合大面积的推广作业；如果是在大棚中进行实施的，那么就需要经常的对播种后的富硒苔藓进行定期的洒水，以保证土壤的含水量，进而保证植物有足够的水分吸收。

b、将蓬虆的种子按照间距为15cm、行距为10cm的距离埋进a步骤的苔藓中；保证行距和株距可以满足种子生长过程对养分的吸收，以及谷胱甘肽过氧化物酶的充分提取；

c、3个半月以后，采摘蓬虆的叶片备用；这时，该叶片中即已经含有足量的谷胱甘肽过氧化物酶；该叶片的采摘可以一直持续到12月末；

d、用水50kg、食盐1000g和硒精500g配置成溶液；

e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡20分钟，这样做是为了在彻底清洗叶片的同时，保证叶片内的营养元素不至于流失，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可；

另外，在b步骤中播种结束后，可以覆盖一层草莲子，以便为种子进行保温，待出芽后撤去草莲子即可。

这时，经直接比色法检测粉碎后的叶片中含谷胱甘肽过氧化物酶的量为182.7u/100克。

该方法为纯生物提取法，较之化学的提取方法，简洁易操作，节省人力和物力，且效果很好，经过检测所采摘的叶片中谷胱甘肽过氧化物酶的含量在155.6u～192.5u/100克左右，基本达到了一个很好的效果。

Claims (5)

1、一种生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其特征在于：该工艺采用蓬虆在富硒的苔藓中培养来进行生物提取。

2、根据权利要求1所述的生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其特征在于：该工艺的具体步骤为：

a、在温度为8～10℃，阳光照度为3500～4000LUX的环境中，选取厚度为8～15公分的富硒苔藓作为培养基质；富硒苔藓所生长的土壤含水量保证在50％～65％。

b、将蓬虆的种子按照株距10～15cm，行距为10～15cm的距离埋进a步骤的富硒苔藓中；

c、3个月至3个半月以后，采摘蓬虆的叶片备用；

d、用水、食盐和硒精按照质量比为100∶2∶1配置成溶液；

e、用d步骤中的溶液将c步骤中的叶片在常温下浸泡10～20分钟，然后清洗掉叶片上的杂质，烘干，粉碎即可。

3、根据权利要求2所述的生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其特征在于：a步骤中的环境选择在秦岭海拔2700公尺的秦岭镇巴县的山谷中，播种时间选择在农历4月上旬的清明节前后。

4、根据权利要求2所述的生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其特征在于：b步骤中埋种结束后再覆盖一层草莲子，待种子出芽后撤除。

5、根据权利要求2或3所述的生物法提取谷胱甘肽过氧化物酶的工艺，其特征在于：a步骤中的温度为10℃，阳光照度为4000LUX，富硒苔藓的厚度为10公分，富硒苔藓所生长的土壤含水量在55％；c步骤中的采摘时间为100天。