CN101437517A - 提高共价结合的化合物的镇痛效果、减少其副作用和防止其滥用的组合物和方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及含有共价结合的化合物(例如与化学成分共价结合的管制药物)和鸦片受体拮抗剂或共价结合的鸦片受体拮抗剂的组合物和其使用方法，用于提高共价结合的化合物的镇痛效果和/或减少一或多种副作用，包括在人类中的副作用，例如恶心、呕吐、眩晕、头痛、镇静(嗜眠)、身体依赖或瘙痒。本发明涉及选择性提高共价结合的化合物的镇痛效果的组合物和方法，并同时减轻与共价结合的化合物的给药有关的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用。本发明方法包括给予患者镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的具有兴奋作用的鸦片受体拮抗剂，例如纳曲酮或纳美芬，所述量能够有效地提高共价结合的化合物的镇痛效果并减轻共价结合的化合物的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用。本发明也涉及向含有共价结合的化合物的组合物中添加共价结合的鸦片拮抗剂，从而使得如果该组合物被违法的药剂师使用时，鸦片拮抗剂的释放能够有效地降低或消除共价结合的化合物的欣快效应。

Description

提高共价结合的化合物的镇痛效果、减少其副作用和防止其滥用的组合物和方法

相关申请的交互参考

根据35 U.S.C.§119(e)，本申请要求提交于2006年5月1日的美国临时申请号60/796,352的权益；根据35 U.S.C.§119(e)，要求提交于2006年10月6日的美国临时申请60/849,776的权益；根据35 U.S.C.§119(e)，要求提交于2006年10月6日的美国临时申请60/849,775的权益；根据35U.S.C.§119(e)，要求提交于2006年10月6日的美国临时申请60/849,774权益；根据35 U.S.C.§119(e)，要求提交于2006年4月1日的美国临时申请60/791,892的权益，它们每一个均以其全部内容引入本文作为参考。

背景技术

可以通过给予吗啡或其它具有双重作用的鸦片激动剂以缓解严重的疼痛，这是因为它们具有通过其对伤害感受神经元上的抑制性鸦片受体的激活而介导镇痛作用这样一个事实(参见North，Trends Neurosci.，第9卷，第114-117页(1986)和Crain和Shen，Trends Pharmacol.Sci.，第11卷，第77-81页(1990))。然而，吗啡和其它具有双重作用的鸦片激动剂也能够激活伤害感受神经元上的鸦片兴奋性受体，它能够降低鸦片的镇痛作用，导致身体依赖的发展和耐受性增加(参见Shen和Crain，Brain Res.，第597卷，第74-83页(1992))，同时产生兴奋过度、痛觉过敏和其它不期望的(兴奋性)副作用。因此，长期以来一直需要发展一种方法，它既能够提高具有双重作用的鸦片激动剂的镇痛(抑制性)作用，同时又能够阻断或防止由此类鸦片激动剂导致的不需要的(兴奋性)副作用。

美国专利号5,472,943；5,512,578；5,580,876；5,767,125；6,096,756；6,362,194；以及美国专利申请公开2002/0094947 A1和2001/0006967 A1均公开了镇痛或亚镇痛量的鸦片激动剂和一定量的兴奋性鸦片受体拮抗剂，所述一定量能够有效地提高镇痛效果和降低抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用。然而，这些参考文献均没有公开或建议与可以共价结合的兴奋性鸦片受体拮抗剂结合的共价结合的管制药物(controlled substance)的存在。

另外，每一个人均可以容易地接触到大量的信息，这些信息指导人们如何自处方产品分离纯化形式的管制药物，从而导致这些管制药物的滥用。这些技术均非常简单并且在多个网址上均有详细描述。这些方法中的大多数均采用冷水，尽管也可以采用热水，改变pH和其它溶剂的方法也有记载。这些方法的实例描述如下。

这些方法的描述可以参见2003年2月的网页http://codeine.50g.com/info/extraction.htm # ex.coldw，下面进行解释。冷水提取方法用于自片剂中提取鸦片/鸦片类物质。该方法基于这样一个事实：鸦片通常在冷水中非常易溶，而扑热息痛、阿司匹林和布洛芬仅仅是微溶。这些技术很尖端，足可以认识到伪麻黄碱和咖啡因为水溶性的，因而将保持在溶液中，而分散的片剂使其很难提取第二种物质。对于所需要的设备的描述使其更清楚地看到这些方法很容易被滥用。所述设备至少包括两个玻璃杯、滤纸(原色的咖啡滤纸也可以)和量杯。所述方法的部分步骤描述如下：

1.将片剂压碎，将其溶于冷水(20℃)。

2.将溶液冷却至约5℃，并不时搅拌。

3.将溶液置于阴凉处约20分钟。

4.用冷水润湿滤纸以防止其吸附溶液，将其置于玻璃杯上。在容器周围用塑料/橡胶圈固定以放置滤纸。

5.将溶液通过滤纸倒入，将第二种物质自可待因中过滤出来。

6.将使用过的滤纸和第二种物质丢弃。

然而，当这些方法不能提供较好的收率时，可以采用改良方法以提取可待因，它只是需要加入氯仿或类似溶剂，例如二氯甲烷。该技术采用改变溶液的pH以改善提取的方法，它甚至提供了如何使得产物再次成盐的说明。该方法的部分步骤描述如下：

1.将未粉碎的T3或其它APAP/可待因产品置于小玻璃杯或烧杯中，加入足够量的蒸馏水将其覆盖，从而使得药丸分散为稀糊状

2.加入无水碳酸钠将磷酸可待因还原为可待因碱。该混合物的pH应为约11或以上

3.将混合物倒入硼硅盘(pyrex pan)中，用数毫升蒸馏水洗涤烧杯，将洗涤水倒入盘中的混合物中。

4.包裹在咖啡滤纸中得到的干燥物质，将其研磨粉碎。

5.将干燥粉碎的混合物倒入顶部有螺旋盖的玻璃瓶中，向其中倾入足够量的氯仿将其完全淹没。

6.震摇并过滤。

尽管已经付出了许多的努力以提供能够防止滥用的管制药物，然而目前的产品不能达到防止滥用所需要的稳定性。本发明提供了方法和组合物，它们在即使采用目前滥用方法的情况下也能够保持其稳定性，或者当管制药物经过上述方法处理时，能够释放有效阻断管制药物的欣快效应的鸦片拮抗剂，因此，能够满足需要但几乎无成瘾性和/或几乎不可能成为被滥用的产品。

除了其高效镇痛活性外，鸦片类例如吗啡通常会产生有害的并且有时是令人不安的副作用，这些副作用也是通过其对μ鸦片受体的激动活性而产生的。这些副作用包括在过量的情况下可能导致死亡的呼吸频率的抑制以及肠运动性的降低。通过对μ和其它亚型鸦片受体具有亲和性和内在活性的吗啡类似物的多年研究仍然无法解决这些问题。另外，用于治疗慢性疼痛症状例如癌症的鸦片的长期给药可能导致药物依赖、成瘾和耐药性。后一种作用导致需要提高药物的剂量，这就使得多种不良反应事件发生的频率有所提高。

US 2004/0024005 A1(以其全部内容引入本文作为参考)公开了一种组合物，其中镇痛药以亚镇痛量存在以降低、防止或延迟对靶向G-蛋白偶联受体(GPCRs)(包括μ鸦片受体)的特定激动剂的耐药性的发展/或对其的身体依赖。该组合物包括一种不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的靶向GPCR的激动剂和一种能够促进GPCR的内吞作用的激动剂的组合，后一种激动剂在组合物中存在的量足以促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用。该组合物包括鸦片激动剂(例如吗啡)和μ鸦片受体激动剂(包括美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、依托尼秦和埃托啡)。

在由于使用管制药物(例如鸦片类)而产生的多种不良反应事件的报道中，便秘是最常见和最使人衰弱的一种。因此，需要保持管制药物(例如鸦片类)的疼痛缓解作用，同时阻断管制药物(例如鸦片类)的致便秘作用。例如，通过向管制药物(例如鸦片类，如吗啡)中加入低剂量的外消旋美沙酮可以减轻便秘。已经发现，吗啡不同于其它激动剂例如美沙酮和芬太尼，它能够与受体结合并引发细胞响应，从而导致镇痛作用，但是它不会像其他激动剂一样诱导内吞作用。

附图说明

图1表示氢可酮的编号示意图。

图2表示在6位上共轭的氢可酮。

图3表示二氢吗啡酮的编号示意图。

图4表示在3位上轭合的二氢吗啡酮。

图5表示在3位和6位上轭合的二氢吗啡酮。

图6表示在6位上轭合的二氢吗啡酮。

图7表示羟考酮的编号示意图。

图8表示在6位上轭合的羟考酮。

图9表示在6位和14位上轭合的羟考酮。

图10表示在14位上轭合的羟考酮。

图11表示二取代的肽羟考酮化合物的口服生物利用度。

图12表示单取代的肽羟考酮化合物的口服生物利用度。

图13表示非天然单一氨基酸羟考酮化合物的口服生物利用度。

图14表示二取代的肽羟考酮化合物的鼻腔给药生物利用度。

图15表示二取代的肽羟考酮化合物的鼻腔给药生物利用度。

图16表示二取代的肽羟考酮化合物的鼻腔给药生物利用度。

图17表示二取代的肽羟考酮化合物的静脉内给药生物利用度。

发明内容

本文中所使用的术语“共价结合的化合物”是指与化学成分共价结合的管制药物。共价结合的化合物的实例包括描述于下列专利申请中的化合物：提交于2002年5月29日的美国专利申请号10/156,527，提交于2004年8月23日的美国专利申请号10/923,257，提交于2004年8月23日的美国专利申请号10/923,088，提交于2004年9月30日的美国专利申请号10/953,119和提交于2004年9月30日的美国专利申请号10/953,110，它们每一个均以其全部内容在此引入作为参考。

本文中所使用的术语“管制药物”是指包括下列药物在内的镇痛剂：阿芬太尼、烯丙罗定、阿法罗定、阿尼利定、苄吗啡、贝齐米特、丁丙诺啡、布托啡诺、氯尼他秦、可待因、去氧吗啡、右旋吗酰胺、地佐辛、地恩丙胺、二醋吗啡(diamorphone)、二氢可待因、二氢吗啡、地美沙多、美沙醇、二甲噻丁、吗苯丁酯、地匹哌酮、依地佐辛、依索庚嗪、乙甲噻丁、乙基吗啡、依托尼秦、埃托啡、二氢埃托啡、芬太尼、氢可酮、二氢吗啡酮、氢吗啡酮、羟哌替定、异美沙酮、凯托米酮、左啡诺、左芬啡烷、洛芬太尼、哌替啶、美普他酚、美他佐辛、美沙酮、甲氢吗啡酮、美托酮、吗啡、麦罗啡、那碎因、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲美沙酮、烯丙吗啡、纳布啡、去甲吗啡、诺匹哌酮、鸦片、羟考酮、羟吗啡酮、阿片全碱、复方樟脑酊、喷他佐辛、苯吗庚酮、苯二甲吗啉、苯甲曲秦(phendimetrazone)、非诺吗烷、非那佐辛、苯哌利定、匹米诺定、哌腈米特、propheptazine、二甲哌替啶、丙哌利定、丙氧芬、环已丙胺、舒芬太尼(sufentanil)、舒芬太尼(sufentanyl)、替利定、曲马多及其药学上可接受的盐和其混合物，还包括：哌醋甲酯、巴比妥酸盐类、苯并二氮杂

类、骨骼肌松弛剂(例如甲丙氨酯)和兴奋剂(包括哌醋甲酯、匹莫林等)。

本文中所使用的术语“靶向GPCR的激动剂”是指不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的药物，包括鸦片类，例如吗啡。

本文中所使用的术语“能够提高GPCR内吞作用的激动剂”是指其中药物存在的量足以提高被靶向的GPCR(μ鸦片受体动剂)的内吞作用和再敏化作用。优选的药物包括美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、依托尼秦和埃托啡。

本文中所使用的术语“化学成分(chemical moiety)”是指由化学元素组成的物质，其特征在于特定的分子组成。它可以是药物共轭物的一部分，并且可以自该共轭物中分离。实例包括氨基酸、寡肽或多肽，但可以是任何数目的其它物质。

本文中所使用的术语“鸦片”是指能够与特定鸦片受体结合并对这些受体具有激动(激活)或拮抗(失活)作用的化合物，例如鸦片生物碱类(包括激动剂吗啡和拮抗剂纳络酮)和鸦片肽类(包括脑啡肽类、强啡肽类和内啡肽类)。

“共价结合的鸦片”为与化学成分共价结合的“鸦片”。

术语“鸦片剂”是指衍生自鸦片或相关类似物的药物。

本文中所使用的术语“具有双重作用的鸦片激动剂”为能够与介导疼痛的伤害感受神经元上的抑制性和兴奋性鸦片受体结合并且能够同时激活它们两者的鸦片激动剂。所述激动剂激活抑制性受体产生镇痛作用。所述激动剂激活兴奋性受体产生抗痛觉丧失、兴奋过度、痛觉过敏作用以及抗身体依赖、耐药性及其它不期望的副作用。

术语“共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂”为与化学成分共价结合的“具有双重作用的鸦片激动剂”。

本文中所使用的术语“不良反应”包括但不限于眩晕、恶心、便秘、头痛、嗜眠(镇静)、呕吐、瘙痒、CNS兴奋、癫痫发作(seizures)、无力、消化不良、腹泻、身体依赖、口干和/或盗汗。

“兴奋性鸦片受体拮抗剂”为能够与介导疼痛的伤害感受神经元上的兴奋性而非抑制性鸦片受体结合并作为其拮抗剂的鸦片类。也就是说，兴奋性鸦片受体拮抗剂为能够与兴奋性鸦片受体结合并选择性阻断伤害感受类DRG神经元上的兴奋性鸦片受体功能的化合物，此时该化合物的浓度较阻断这些神经元上的抑制性鸦片受体功能所需要的浓度低1000至10000倍。

术语“共价结合的鸦片受体拮抗剂”为能够与化学成分共价结合的“鸦片受体拮抗剂。

本文中所使用的“镇痛”量为共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的量，当在患者中单独给予该共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)时产生镇痛作用，所述量包括该化合物或激动剂的标准剂量，通常通过给药而产生镇痛作用(例如，mg剂量)。

“亚镇痛”量为当在患者中单独给予该共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)时不会产生镇痛作用的量，但是当与兴奋性鸦片受体拮抗剂联合使用时能够产生镇痛作用。

在本申请中，术语“化学成分”(有时也成为“共轭物”或“载体”)包括任何天然存在或合成的化学物质，当活性被释放时它们能够降低药理学活性，至少包括载体肽类、糖肽类、碳水合物、脂类、核酸、核苷或维生素类。优选，化学成分通常应为安全的(“GRAS”)。

在本申请中，术语“载体肽”包括天然存在的氨基酸、合成氨基酸及其组合。特别的是，载体肽包括至少一个单一氨基酸、二肽、三肽、寡肽、多肽或核酸-氨基酸肽类。载体肽可以包括天然存在或合成的氨基酸的同聚物或杂聚物。

术语“直链载体肽”包括通过-C(O)-NH-连接基团(在本文中也称为“肽键”)而连接的氨基酸，但是载体肽的侧链可以被取代。没有通过肽键连接到一起的或者不是通过肽键专一地连接的氨基酸不包含在直链载体肽的定义范围内。

术语“未取代的载体肽”包括通过-C(O)-NH-连接基团而连接的氨基酸，但是在载体肽的侧链没有被取代。没有通过肽键连接到一起的或者不是通过肽键专一地连接的氨基酸不包含在未取代的载体肽的定义范围内。

“寡肽”包括2个氨基酸至10个氨基酸。“多肽”包括11-50个氨基酸。

“碳水合物”包括糖类、淀粉类、纤维素及相关化合物。更特别的实例包括例如果糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、甘油醛、二羟基丙酮、赤藓糖、核糖、核酮糖、木酮糖、半乳糖、甘露醇、景天庚酮糖(sedoheptulose)、甘露糖胺丙酮酸、糊精和糖原。

“糖蛋白类”为含有与蛋白质共价结合的碳水化合物(或多糖)的化合物。碳水化合物可以为单糖、二糖、寡糖、多糖或其衍生物(例如硫-或磷-取代的衍生物)的形式。

“糖肽”为由与寡肽链接的碳水化合物组成的化合物，所述寡肽由L-和/或D-氨基酸构成。糖-氨基-酸为通过任何种类的共价键与单一氨基酸连接的单糖。糖基-氨基-酸为由通过糖基连接基团(O-、N-或S-)与氨基酸连接的单糖组成的化合物。

“载体范围”或“载体大小”根据需要的作用而定。优选其在1-12个化学成分之间，更优选其具有1-8个化学成分，在另一个实施方案中，连接的化学成分的数目为特定的数目，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10等。或者，化学成分可以通过其分子量描述。优选共轭物的分子量低于约2,500kD，更优选低于约1,500kD。

从广义上讲，本文中所使用的术语“组合物”是指任何含有共轭物的组合物。“药用组合物”是指任何包含只含有可药用成分的共轭物的组合物，例如，所述共轭物不包含用于免疫目的的共轭物。

术语例如“降低”、“减少”、“缩小”或“减弱”包括至少10％的药理学活性的改变，所述药理学活性与至少一种ADME特性有关，或者与至少一种AUC、C_max、T_max、C_min和t_1\2参数有关，在滥用或过量使用的情况下，优选所述活性改变为降低的百分比较大。例如，改变可以大于25％、35％、45％、55％、65％、75％、85％、95％、96％、97％、98％、99％或其它增量。

术语“相似的药理学活性”是指两种化合物具有AUC、C_max、T_max、C_min和/或t_1/2参数基本相同的曲线，优选所述参数彼此之间在约30％的范围内，更优选在约25％、20％、10％、5％、2％、1％或其它增量。

“C_max”定义为在给药期间所获得的体内游离活性的最大浓度。

“T_max”定义为相应于最大浓度的时间。

“C_min”定义为给药后体内游离活性的最小浓度。

“t_1/2”定义为体内活性的量降低为其值的一半时所需要的时间。

本申请中，术语“增量”用于定义数值的精确程度的变化，例如最接近10、1、0.1、0.01等。增量可以接近任何可测量的精确程度，例如，范围为1-100，或者本文中的增量包括例如20-80、5-50、0.4-98和0.04-98.05的范围。

“急性疼痛”定义为短时间的尖锐(sharp)或严重的疼痛或不适。优选短时间为少于3个月的伤害性疼痛或神经性疼痛以及少于6个月的心理性疼痛。

“慢性疼痛”定义为长时间持续的中度至严重疼痛。优选长时间为超过3个月的伤害性疼痛或神经性疼痛以及超过6个月的心理性疼痛。

从广义上讲，本文中所使用的“患者”是指任何需要治疗的动物，最优选患有疼痛的动物。所述患者可以是临床患者，例如人类或兽医患者，例如宠物、驯化动物、家畜、外来动物或动物园动物。动物可以是哺乳动物、爬行类、鸟类、两栖类或无脊椎类动物。

从广义上讲，本文中所使用的“哺乳动物”是指任何和所有的哺乳动物类温血有脊椎动物，包括人类、非人类灵长类、猫科动物、犬科动物、猪、马、羊等。

从广义上讲，本文中所使用的术语“预处理”是指在接受二氢吗啡酮化合物或本发明组合物之前的任何和所有的药物制剂、治疗或方案。

从广义上讲，本文中所使用的“处理”或“治疗”是指：预防疾病，即使得患者的疾病的临床症状不再继续发展，所述患者有可能暴露于该疾病或患者有发病的趋势，但是还没有体验或显示该疾病的症状；抑制疾病，即终止或减轻疾病或其临床症状的发展；和/或缓解疾病，即使得疾病或其临床症状减退。治疗也包括指标和/或症状的缓解。

从广义上讲，本文中所使用的“治疗有效量”是指化合物的量，当给药于患者用于治疗疼痛时，所述量足以有效地进行此类疼痛治疗。“治疗有效量”取决于化合物、疾病及其严重性和待治疗患者的年龄、体重等。活性化合物或组合物的“有效剂量”或“有效量”为提供治疗或预防所必需的量。

从广义上讲，本文中所使用的“患者的选择”和“患者的筛选”是指对接受本文中所述治疗的适当的患者进行选择。各种因素包括但不限于年龄、体重、健康史、药物治疗、手术、损伤、身体状况、疾病、病症、感染、性别、种族、标记、多态性、肤色以及对二氢吗啡酮治疗的敏感性。其它因素还包括那些医师所使采用的用于判断患者是否需要接受本文中所述治疗的因素。

从广义上讲，本文中所使用的术语“诊断”是指实验、评估、分析、判断患者是否患有疼痛的实施行为。

本发明涉及组合物和方法，该方法通过至少一种管制药物、拮抗剂或激动剂的共价结合，提供控释的管制药物，从而提高管制药物的镇痛效能，降低管制药物被滥用的可能性和/或减弱(例如降低、阻断、抑制或防止)管制药物的副作用，特别是在人类中的副作用。无需增加或降低激动剂的累积剂量，激动剂的镇痛效能就可以得到维持，而一或多个副作用被减弱。因此，本发明的组合物和方法解决了与给予人类的共价结合的化合物有关的镇痛效能达不到需要的问题和/或副作用的问题。另外，当化合物被违法的药剂师采用技术处理时，通过防止共价结合的化合物和共价结合的鸦片拮抗剂的释放，降低了共价结合的化合物被滥用的可能。

当其通过违法使用者经常采用的胃肠外途径给药，特别是静脉内(“快速推注(shooting)”)、鼻腔内(“鼻吸(shooting)”)和/或吸入(“抽烟”)途径给药时，由于鸦片拮抗剂的存在而降低了生物利用度，从而可以防止鸦片前药组合物被滥用。因此，当鸦片前药根据生产者说明书的方法使用时，鸦片前药可以降低与鸦片滥用相关的欣快效应。

本发明涉及组合物，该组合物能够选择性增加与管制药物(例如具有双重作用的鸦片激动剂)的给药有关的镇痛效能，同时降低与其有关的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用。所述组合物含有镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的兴奋性鸦片受体拮抗剂，后者能够有效地提高共价结合的化合物的镇痛效能并且能够降低其抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用，其中所述拮抗剂可以共价结合，或者也可以没有共价结合。

本发明也提供镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂的组合物，其中如果组合物口服给予患者时，镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物被释放，而鸦片拮抗剂不被释放。然而，当镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂的组合物被违法的药剂师使用意图释放共价结合的化合物的情况下，共价结合的鸦片拮抗剂被释放，而共价结合的化合物不被释放。

本发明也提供了镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂的组合物，其中如果组合物被口服给予患者时，镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物被释放，而鸦片拮抗剂不被释放。然而，当镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂的组合物被违法的药剂师使用意图释放共价结合的化合物的情况下，共价结合的化合物和共价结合的鸦片拮抗剂两者均被释放。

本发明还提供了镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂的组合物，其中后者能够有效地降低共价结合的化合物的副作用，其中如果组合物被口服给药于患者时，镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和鸦片拮抗剂两者均被释放。然而，当组合物被违法的药剂师使用意图释放共价结合的化合物的情况下，只有共价结合的鸦片拮抗剂被释放。

本发明提供了镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂的组合物，后者能够有效地降低共价结合的化合物的副作用，其中该组合物被口服给药于患者时，镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和鸦片拮抗剂被释放。然而，当组合物被违法的药剂师使用意图释放共价结合的化合物的情况下，共价结合的化合物和共价结合的鸦片拮抗剂均不被释放。

本发明提供了镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和一定量的鸦片拮抗剂，后者能够有效地降低共价结合的化合物的副作用，其中如果组合物被口服给药于患者时，镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物和鸦片拮抗剂两者均被释放。然而，当组合物被违法的药剂师使用意图释放共价结合的化合物的情况下，共价结合的化合物不被释放，而共价结合的鸦片拮抗剂被释放。

本发明也涉及新的组合物，它包含靶向GPCR的共价结合的激动剂(其中药物不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用)和共价结合的激动剂(μ鸦片受体激动剂)，后者能够促进GPCR的内吞作用，并且在组合物中存在的量足以促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用。靶向GPCR的共价结合的激动剂(其中药物不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用)包括鸦片药物，例如吗啡。共价结合的μ鸦片受体激动剂包括美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、依托尼秦和埃托啡。

本发明也涉及新的组合物，它包含靶向GPCR的共价结合的激动剂(其中药物不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用)和共价结合的激动剂(它能够促进GPCR的内吞作用，并且在组合物中存在的量足以促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用)(μ鸦片受体激动剂)以及共价结合的鸦片拮抗剂。

本发明也提供组合物，除了共价结合的鸦片激动剂(例如吗啡)外，它还包含少量的共价结合的或非共价结合的外消旋美沙酮，从而刺激μ鸦片受体(MOR)的内吞作用，并且减轻当该激动剂长期使用时经常发生的便秘。

本发明也提供了通过口服给予人类患者上述任何组合物而治疗疼痛的方法。当被违法药剂师采用技术处理组合物时，上述这些含有能够有效阻断共价结合的化合物的欣快效应的组合物可以降低被滥用的可能性。

因此，本发明的含有共价结合的鸦片和共价结合的鸦片拮抗剂的组合物包括表1中所示的实施方案。包含其它激动剂的另外的实施方案可以根据说明书所述的方法制备。

表1-含有共价结合的鸦片和共价结合的或非共价结合的鸦片拮抗剂的组合物：

R＝释放，NR＝不释放

本发明的有代表性的组合物也描述于下面表2中。

表2-有代表性的组合物：

 

	管制药物1	管制药物2	拮抗剂
				组合物1	共价结合的管制药物	不存在	共价结合的拮抗剂
组合物2	共价结合的管制药物	不存在	非共价结合的拮抗剂
				组合物3	非共价结合的管制药物	不存在	共价结合的拮抗剂
组合物4	能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不存在
				组合物5	能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不能促进内吞作用、不结合的管制药物	不存在
组合物6	能促进内吞作用、不结合的管制药物	不能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不存在
				组合物7	能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不能促进内吞作用的共价结合的管制药物	非共价结合的拮抗剂
组合物8	能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不能促进内吞作用、不结合的管制药物	非共价结合的拮抗剂
				组合物9	能促进内吞作用、不结合的管制药物	不能促进内吞作用的共价结合的管制药物	非共价结合的拮抗剂
组合物10	能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不能促进内吞作用的共价结合的管制药物	共价结合的拮抗剂
				组合物11	能促进内吞作用的共价结合的管制药物	不能促进内吞作用、不结合的管制药物	共价结合的拮抗剂
组合物12	能促进内吞作用、不结合的管制药物	不能促进内吞作用的共价结合的管制药物	共价结合的拮抗剂

本发明涉及新的含有共价结合的管制药物和鸦片拮抗剂的组合物和方法。共价结合的管制药物和鸦片拮抗剂(例如纳曲酮)的组合可以有效地提高共价结合的管制药物的镇痛效能和/或减少其在人类中的副作用。例如，共价结合的化合物和鸦片拮抗剂的组合可以将效能提高至少约2倍，因此50mg剂量的共价结合的化合物和低剂量(例如，0.01mg)的拮抗剂(例如，纳曲酮)的效能相当于100mg剂量的单一共价结合的化合物的效能。

本发明所包含的化学成分可以为任何能够与管制药物连接的从而使其失去药理学活性的化学物质。镇痛药通过与特定受体或者摄取蛋白(uptakeproteins)结合而产生其药理学作用。因此某些化学成分的结合可以防止活性物质与其受体结合或者防止识别其摄取蛋白的位点。另外，尽管不希望受理论的约束，但是，该共价修饰被认为可以通过防止药物通过血脑屏障而阻止其药理学作用。优选，化学成分与管制药物的结合也可以防止或充分延缓化合物的吸收，特别是当该化合物通过非口服给药途径传递时。

共价结合的管制药物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)和兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)可以与药学上可接受的载体一起制备为组合物。该载体必须是“可接受的”，即其与该制剂的其它成分是相容的并对其接受者无害。该制剂可以方便地以单位剂量存在，可以根据药剂学领域中众所周知的方法，将活性化合物与载体或稀释剂混合而制备，对于混悬液或溶液而言，可以加入一或多种辅助成分，例如缓冲剂、矫味剂、表面活性剂等。载体的选择取决于给药的途径。

在另一个实施方案中，本发明提供了载体和管制药物，它们彼此结合但是在结构上没有改变。该实施方案也可以另外表述为具有游离羧基和/或胺末端和/或侧链基团而非管制药物结合位置的载体。在更优选的实施方案中，载体，无论是单一氨基酸、二肽、三肽、寡肽或多肽的载体，均只由天然存在的氨基酸组成。

结合的化学成分可以由其他天然存在的或合成的物质组成。管制药物例如也可以与脂类、碳水化合物、核酸或维生素连接。这些化学成分可以起与肽载体相同的功能，例如用于延缓其在胃肠道内的释放和/或防止管制药物的快速吸收。

本发明提供了含有肽以及与该肽共价结合的管制药物的组合物。在另一个实施方案中，本发明提供了含有肽以及与该肽共价结合的拮抗剂的组合物。

对于本文中所述的每一个实施方案，载体肽可以包含下列一或多种天然存在的(L-)氨基酸：丙氨酸、精氨酸、天门冬素、天冬氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、苯基丙氨酸、丝氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸和缬氨酸。其它优选的氨基酸包括β-丙氨酸、β-亮氨酸和叔亮氨酸(tertiary leucine)。在另一个实施方案中，所述氨基酸或肽包含一或多种天然存在的D-构型氨基酸。在另一个实施方案中，所述氨基酸或肽包含一或多种非天然、非标准或合成的氨基酸，例如氨基己酸、联苯基丙氨酸(biphenylalanine)、环己基丙氨酸、环己基甘氨酸、二乙基甘氨酸、二丙基甘氨酸、2，3-二氨基丙酸、高苯丙氨酸、高丝氨酸、高酪氨酸、萘丙氨酸、正亮氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸(4-氟)、苯丙氨酸(2，3，4，5，6-五氟)、苯丙氨酸(4-硝基)、苯基甘氨酸、哌啶甲酸、肌氨酸、四氢异喹啉-3-甲酸和叔-亮氨酸。在另一个实施方案中，所述氨基酸或肽包含一或多种氨基酸醇类。在另一个实施方案中，所述氨基酸或肽包含一或多种N-甲基氨基酸。

在另一个实施方案中，表中列出的特定的载体可以具有一或多个被20个天然存在的氨基酸之一取代的氨基酸。优选采用与氨基酸序列具有相似结构或电荷的氨基酸进行取代。例如异亮氨酸(Ile)[I]在结构上与亮氨酸(Leu)[L]相似，而酪氨酸(Tyr)[Y]与苯丙氨酸(Phe)[F]相似，丝氨酸(Ser)[S]与苏氨酸(Thr)[T]相似，半胱氨酸(Cys)[C]与蛋氨酸(Met)[M]相似，丙氨酸(Ala)[A]与缬氨酸(Val)[V]相似，赖氨酸(Lys)[K]与精氨酸(Arg)[R]相似，天门冬素(Asn)[N]与谷氨酰胺(Gln)[Q]相似，天冬氨酸(Asp)[D]与谷氨酸(Glu)[E]相似，组氨酸(His)[H]与脯氨酸(Pro)[P]相似，甘氨酸(Gly)[G]与色氨酸(Trp)[W]相似。或者，优选的氨基酸取代基可以根据与20个必需氨基酸相关的亲水性(即极性)或其它常规性质选择。尽管优选的实施方案根据其GRAS特性采用了20个天然氨基酸，但是，可以理解，也要求氨基酸链上取代基应较少从而不会影响氨基酸的必需特性。

化学成分与管制药物的共价结合可以改变氢可酮的下列一或多项特性：吸收速率、吸收程度、代谢、分布和排泄(ADME药代动力学特性)。因此，根据其治疗慢性或急性疼痛的需要，可以对一或多项这些特性的改变进行设计，获得速释或缓释。另外，一或多项这些特性的改变可以降低与服用的管制药物有关的副作用。

本发明一方面包括共轭物，当其以正常治疗剂量给药时，管制药物的生物利用度(时间-浓度曲线下的面积；AUC)能够提供药学上有效量的母体活性成分。但是，当剂量增加时，特别是对于口服剂型而言，与母体活性成分相关的共价修饰的管制药物的生物利用度降低。当采用药理学剂量以上的剂量时，管制药物共轭物的生物利用度与母体活性成分相比明显降低。高剂量时生物利用度的相对较低能够降低或减少当管制药物共轭物的剂量超过预定的处方剂量时所获得的欣快效应。因而它能够减少滥用的可能性，无论是无意还是有意的滥用。

本发明的组合物和方法提供了活性成分，当与化学成分结合时，通过改善的生物利用度曲线和/或更安全的C_max，该活性成分能够提供更安全和/或更有效的剂量，和/或降低生物利用度曲线下的面积，特别是对于滥用物质超过治疗水平的剂量服用时。结果，本发明的组合物和方法能够提供疼痛治疗的改良方法。

优选，与未结合的管制药物(即活性成分)相比，前药具有的管制药物的口服生物利用度至少约60％AUC(曲线下面积)，更优选至少约70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％。优选，与未结合的管制药物相比，管制药物前药的肠胃外生物利用度(例如鼻腔内给药的生物利用度)小于约70％AUC，更优选小于约50％、30％、20％、15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％。

在一个实施方案中，管制药物前药提供的未结合的氢可酮的药理学参数(AUC、C_max、T_max、C_min和/或t_1/2)范围在80％-125％、80％-120％、85％-125％、90％-110％之间或其中的增量。应该理解，所述范围可以是但不是必须对称的，例如85％-105％。

在另一个实施方案中，管制药物前药的毒性明显低于未结合的管制药物的毒性。例如，在优选的实施方案中，急性毒性较口服给予未结合的管制药物低1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍或其中的增量。

对于每一个描述的实施方案，可以了解本说明书中描述的一个或多个特性。也应该理解，本说明书中描述的化合物和组合物可以用于多种新的治疗方法，用于降低滥用的可能性、降低毒性、改善释放特征等。一个实施方案可以获得下列一或多个共轭物：毒性较未结合管制药物明显降低的共轭物；其中共价结合的化学成分能够降低或消除口服给药过量的可能性的共轭物；其中共价结合的化学成分能够降低或消除鼻腔给药过量的可能性的共轭物；和/或其中共价结合的化学成分能够降低或消除注射给药过量的可能性的共轭物。

所述共轭物也可以为盐的形式。药学上可接受的盐(例如无毒的无机和有机酸加成盐)在本领域中是已知的。具有代表性的盐包括但不限于2-羟基乙磺酸盐、2-萘磺酸盐、3-羟基-2-萘甲酸盐、3-苯基丙酸盐、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、amsonate、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、酸式酒石酸盐、硼酸盐、丁酸盐、依地酸钙、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、clavulariate、环戊丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐(esylate)、乙磺酸盐、finnarate、葡庚糖酸盐、glucoheptanoate、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、glycollylarsanilate、半硫酸盐、庚酸盐、六氟磷酸盐、己酸盐、hexylresorcinate、hydrabamine、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、羟基萘甲酸盐、异硫代羟酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、十二烷基磺酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、粘液酸盐、萘酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、N-甲基葡甲胺铵盐、油酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、泛酸盐、果胶酸盐、磷酸盐、phosphateldiphosphate、三甲基乙酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对-甲苯磺酸盐、糖酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、sulfosaliculate、suramate、丹宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、triethiodide、十一酸盐和戊酸盐等。

在本发明中，管制药物可以通过酮基和连接基团与肽共价结合。该连接基团可以是含有2-6个原子的小的线性或环状分子，其中含有一或多个杂原子(例如O、S、N)和一或多个官能团(例如胺、酰胺、醇或酸)，或者该连接基团可以由短链的氨基酸或碳水化合物组成。例如，葡萄糖就可以适当的作为连接基团。该连接基团可以具有官能的侧链基团，例如与载体肽共价结合的羧酸酯、醇、硫醇、肟、腙(hydraxone)、肼或胺基团。

本发明提供了管制药物或拮抗剂与肽的共价结合。优选除了载体肽的结合外，氢可酮不被另外取代或者另外被保护。在一个实施方案中，除了与氢可酮的结合位点外，化学成分还具有一或多个游离羧基和/或胺末端和/或侧链基团。化学成分可以为游离状态，或者为其酯或盐，

在本发明的另一个实施方案中，镇痛剂或拮抗剂与寡肽连接，优选含有1-5个氨基酸的寡肽。在本发明的另一个实施方案中，氨基酸为20个天然存在的氨基酸的不同种类的混合物。亲水性氨基酸可以防止镇痛剂肽共轭物在通过鼻黏膜时的被动吸收。因此，本发明的优选的实施方案为在寡肽中包含亲水性氨基酸。在本发明的另一个优选的实施方案中，亲脂性氨基酸与镇痛剂更紧密的结合从而使稳定性最佳。采用3-5个氨基酸可以满足既有亲脂性也有亲水性(即两亲性)的要求。因此，在更优选的本发明实施方案中，与镇痛剂或拮抗剂结合的寡肽为两亲性三肽。

优选的两亲性氨基酸/寡肽可以选自(i)疏水性氨基酸，优选其位于与管制药物相邻的位置以增加稳定性；(ii)能够被肠道内的酶(例如，胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶、羧肽酶A和B等)裂解的氨基酸序列，它使得生物利用度提高；(iii)长于3个氨基酸的肽，它能够增加稳定性、增强抗滥用能力(例如减少膜通透性)以及可能更有效地进行肠消化，例如主要肠道酶的靶蛋白和多肽；(iv)或其混合物。在一个优选的实施方案中，共轭物的载体部分在肠道内裂解。

适当的共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂包括但不限于吗啡、可待因、芬太尼类似物、喷他佐辛、丁丙诺啡、美沙酮、脑啡肽、强啡肽、内啡肽和具有相似作用的鸦片生物碱和鸦片肽，它们均与化学成分共价结合。为了疼痛治疗的需要，优选与化学成分共价结合的氢可酮、二氢吗啡酮、羟考酮、美沙酮、芬太尼、吗啡和可待因。

本发明的适当的兴奋性鸦片受体拮抗剂包括但不限于纳美芬、纳曲酮、纳络酮、埃托啡和二氢埃托啡以及具有相似作用的鸦片生物碱、鸦片肽及其混合物。优选的兴奋性鸦片受体拮抗剂为纳美芬和纳曲酮，因为与纳络酮相比，它们具有较长的作用时间，口服给药后其生物利用度较好。上述兴奋性鸦片受体拮抗剂也适合作为共价结合的鸦片受体拮抗剂中存在的拮抗剂。

本发明中所使用的共价结合的管制药物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)和兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)可以为游离碱的形式，或者为其药学上可接受的酸加成盐形式。用于形成盐的适当的酸包括但不限于甲磺酸、硫酸、盐酸、葡糖醛酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、乳酸、抗坏血酸、马来酸等。

当共价结合的鸦片受体拮抗剂用于阻断抑制性鸦片受体的功能并从而阻断共价结合的化合物的欣快效应时，可以采用本领域普通技术人员已知的常规剂量。例如，相当于每天50mg的剂量足以达到该目的。

兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)单独使用或者与共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)联合应用，可以通过已知的方法给药于人类或动物患者，例如，通过舌下、口服或透皮途径给药。当这些化合物联合给药时，它们可以在相同的组合物中一起给药，或者在不同的组合物中分别给药。如果共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)和兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)在不同的组合物中分别给药时，它们可以通过相似或不同的给药模式给药，可以与另外一种同时给药，或者在另外一种之前或之后给药。

当兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)与共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)联合应用时，共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的给药量可以是镇痛量或亚镇痛量。兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)的量应该能够有效地增强共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的镇痛效能并减弱共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用。兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)的给药量较共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的给药量小约1000至约10,000,000倍，优选小约10,000至约1,000,000倍。共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)和兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)的最佳给药量当然取决于所采用的特定激动剂和拮抗剂、选择的载体、给药的途径以及待治疗患者的药物动力学特性。

当兴奋性鸦片受体拮抗剂(或共价结合的鸦片受体拮抗剂)单独给药时(即用于治疗鸦片成瘾时)，兴奋性鸦片受体拮抗剂的给药量应该能够有效地减弱共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)例如吗啡(与化学成分结合)的身体依赖，并能够增强共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的镇痛效能。也就是说，兴奋性鸦片受体拮抗剂的量为能够阻断共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的兴奋作用(例如，身体依赖)而不阻断共价结合的化合物(或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂)的抑制作用(即镇痛作用)。本领域技术人员可以容易地确定该量。

当靶向GPCR的共价结合的激动剂(其中药物不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用)和共价结合的激动剂(它能够促进GPCR的内吞作用并且在组合物中存在的量足以促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用)(μ鸦片受体激动剂)共同存在时，除了促进该所述受体的内吞作用外，μ鸦片受体激动剂存在的量无需产生其自身的任何生理学或药理学作用。在此情况下，可以期望联合给药的该激动剂的量尽可能低，从而尽可能减少由于激动剂的活性所带来的任何副作用，同时激动剂的量又足以促进受体的内吞作用。通常，医药领域技术人员可以确定所述药物和激动剂的适当的给药方案，可以参考生产者或供应商的说明书或者医师案头手册。

当美沙酮与共价结合的鸦片联合使用以减少便秘时，美沙酮的给药量应该能够有效地完成该目的。该量通常较共价结合的鸦片小10-10⁸倍。优选美沙酮的量较共价结合的鸦片的量小10²-10⁶倍。更优选美沙酮的量较共价结合的鸦片的量小10³-10⁵倍。

在一个实施方案中，如果管制药物通过酸不稳定键结合，则共价结合的化学成分可以通过胃内的酸性成分除去。更优选共价结合的化学成分可以通过该复合物在胃和/或肠道内遇到的酶的裂解而除去。胃和肠道内充满降解酶。例如，胰腺释放到小肠内无数的水解酶(例如蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶)和核酸酶。另外，排列在胃肠道表面上的肠上皮细胞产生了各种表面和细胞内降解酶(例如刷状缘肽酶、酯酶)。这些酶能够降解被摄取的食物中所含有的蛋白质、脂类、碳水化合物和核酸。因此，可以期望，当在胃肠道内遭遇到适当的酶时，管制药物可以自结合的化学成分释放。

在本发明的另一个实施方案中，化学成分与管制药物(或激动剂)或鸦片受体拮抗剂结合的方式使其不易在口腔(唾液)、鼻腔、肺表面或血清环境中被释放。在人体的其它部位不存在胃中的极端酸性环境。因此，任何酸依赖性释放机制只存在于口服给药后。尽管在上述环境中存在降解酶，但是它们通常在肠道中存在的浓度不高。因此，当新的化合物通过非口服途径给药时，管制药物通过酶的裂解而释放不会很快发生。

在本发明的另一个实施方案中，镇痛剂(例如羟考酮、氢可酮等)或拮抗剂(例如纳曲酮)与丝氨酸(或其它含有羟基侧链的氨基酸，例如苏氨酸、酪氨酸)聚合体通过侧链羟基结合。或者，与谷氨酸聚合体通过谷氨酸δ碳上的羧基结合。获得的酯(碳酸酯)连接基团可以通过小肠中的脂肪酶(酯酶)水解。酯酶在唾液中或者在鼻腔、肺或口腔粘膜表面上存在的浓度不高。因此，通过该方法与聚谷氨酸结合的管制药物或拮抗剂不能通过唾液快速释放，或者当通过鼻腔或者通过吸入途径给药时也不能快速释放。

在另一个实施方案中，本发明也提供了将管制药物传递至患者的方法，所述患者为人类或非人类动物，所述方法包括给予患者含有肽以及与肽结合的管制药物的组合物。在优选的实施方案中，管制药物或拮抗剂通过酶的催化自组合物中释放。在另一个优选的实施方案中，管制药物或拮抗剂根据酶催化释放的药物动力学以时间-依赖模式释放。

本发明的一个实施方案涉及具有显著降低滥用可能性的长时间作用的管制药物。该管制药物与肽/寡肽或氨基酸共价结合，口服给药后，后者能够使得管制药物无药学活性直到其被释放。优选释放机制为酶的作用。当药物-肽共轭物通过吸入或者注射给药时，管制药物释放所必需的酶和/或化学环境不存在或者几乎无活性。因此，当药物-肽共轭物被吸入或者注射时，希望没有欣快效应产生。另外，延缓管制药物的释放可以防止药物浓度的峰谷现象，它能够提供需要的镇痛效果并降低欣快感或者使其不存在。由于减少了改良的管制药物的“高峰”效应(“rush”effect)，因此具有这些新特性的管制药物几乎不会被滥用。因此，降低欣快感同时延长了镇痛作用的时间并且减少了滥用的可能性，这些都提高了这些药物的治疗价值。本发明另外提供了给予患者镇痛量或亚镇痛量的药物-肽共轭物和一定量的兴奋性鸦片受体拮抗剂的方法，后者能够提高药物-肽共轭物的镇痛效能并减少共价结合的化合物的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用。本发明也提供了组合物的可重现的方法，该组合物使得管制药物免于滥用、在各种化学环境中保持稳定、降低欣快效应并延长了吸收进入血流的时间。

除了前药外，本发明的药用组合物可以另外含有一或多种药用添加剂。药用添加剂包括各种物质，包括但不限于稀释剂和填充剂、粘合剂和粘附剂、润滑剂、助流剂、增塑剂、崩解剂、载体溶剂、缓冲剂、着色剂、矫味剂、甜味剂、防腐剂和稳定剂、吸收剂和其它本领域中已知的药用添加剂。

润滑剂包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、粉末硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、硅胶、硅酸镁、胶体二氧化硅、二氧化钛、苯甲酸钠、十二烷基硫酸钠、硬脂酰富马酸钠、氢化植物油、滑石粉、聚乙二醇和矿物油。

用于制剂的表面活性剂包括但不限于十二烷基硫酸钠、二辛基琥珀酸磺酸钠、三乙醇胺、聚氧乙烯脱水山梨醇、普流罗尼克(poloxalkol)和季铵盐；赋形剂，例如乳糖、甘露醇、葡萄糖、果糖、木糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、木糖醇、山梨醇以及钾、钠和镁的氯化物、硫酸盐和磷酸盐；凝胶剂，例如胶质粘土；增稠剂，例如黄芪胶或藻酸钠，泡腾混合物；和润湿剂，例如卵磷脂、聚山梨醇酯或十二烷基硫酸盐类。

着色剂可以用于改善外观，或者由于识别药用组合物。参加21 C.F.R.，Part 74。典型的着色剂包括D&C Red No.28、D&C Yellow No.10、FD&CBlue No.1、FD&C Red No.40、FD&C Green #3、FD&C Yellow No.6和可食用色素。

在其中药用组合物压制成固体剂型(例如片剂)的实施方案中，粘合剂可以有助于将各个成分粘结在一起。粘合剂包括但不限于糖类，例如蔗糖、乳糖和葡萄糖；复合糖浆；大豆多糖；明胶；聚维酮(例如，

)；Pullulan；纤维素衍生物，例如微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素(例如，

)、羟丙基纤维素(例如，

)、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠和甲基纤维素；丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物；卡波姆(例如，

)；聚乙烯聚吡咯烷；聚乙二醇(

)；药用糖浆(pharmaceutical glaze)；藻酸盐，例如藻酸和藻酸钠；胶类，例如阿拉伯树胶、瓜耳胶和阿拉伯胶；黄芪胶；糊精和麦芽糊精；奶的衍生物，例如乳清；淀粉类，例如预胶化淀粉和淀粉浆；氢化植物油；硅酸铝镁，以及其它本领域技术人员已知的常规粘合剂。典型的非限定性填充物包括糖、乳糖、明胶、淀粉和二氧化硅。

助流剂可以改善非压制的固体剂型的流动性，可以提高定量投料的准确性。助流剂包括但不限于胶体二氧化硅、气相二氧化硅(fumed silicondioxide)、硅胶、滑石粉、三硅酸镁、硬脂酸镁或钙、微粉纤维素、淀粉和磷酸三钙。

增塑剂包括但不限于疏水性和/或亲水性增塑剂，例如邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸丁酯、癸二酸二乙酯、癸二酸二丁酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸乙酰三乙酯、檬酸乙酰三丁酯、巴豆酸(cronotic acid)、丙二醇、蓖麻油、乙酸甘油酯、聚乙二醇、丙二醇、甘油和山梨醇。增塑剂特别适用于含有聚合物的药用组合物以及在软胶囊中的药用组合物和薄膜-包衣片剂。

矫味剂改善适口性，特别适用于咀嚼片或液体剂型。矫味剂包括但不限于麦芽糖醇、香草醛、乙基香草醛、薄荷醇、柠檬酸、富马酸、乙基麦芽糖醇和酒石酸。甜味剂包括但不限于山梨醇、糖精、糖精钠、蔗糖、阿斯巴甜、果糖、甘露醇和转化糖。

防腐剂和/或稳定剂能够改善储存性，包括但不限于乙醇、苯甲酸钠、丁基化羟基甲苯、丁基化对羟基茴香醚和乙二胺四乙酸。

崩解剂可以提高药用组合物的溶出速率。崩解剂包括但不限于藻酸盐(例如藻酸和藻酸钠)、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠(例如，

)、胶体二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮(例如，

)、聚乙烯聚吡咯烷瓜尔胶、硅酸铝镁、甲基纤维素、微晶纤维素、波拉克林钾(polacrilin potassium)、粉末纤维素、淀粉、预胶化淀粉、羟乙酸淀粉钠(例如，

稀释剂能够增加剂型的体积，可以使得剂型更易于处理。用于固体剂型(例如片剂和胶囊)的典型的稀释剂包括但不限于乳糖、葡萄糖、蔗糖、纤维素、淀粉和磷酸钙；用于软胶囊的橄榄油和油酸乙酯；用于液体剂型(例如混悬液和乳剂)的水和植物油。其它适当的稀释剂包括但不限于蔗糖、葡聚糖、糊精、麦芽糊精、微晶纤维素(例如，微粉纤维素、粉末纤维素、预胶化淀粉(例如，Starch 

)、磷酸钙二水合物、大豆多糖(例如，

)、明胶、二氧化硅、硫酸钙、碳酸钙、碳酸镁、氧化镁、山梨醇、甘露醇、高岭土、聚甲基丙烯酸酯(例如，

)、氯化钾、氯化钠和滑石粉。

在其中药用组合物制成液体剂型的实施方案中，药用组合物可以包含一或多种溶剂。适当的溶剂包括但不限于水、醇类(例如乙醇和异丙醇)、植物油、聚乙二醇、丙二醇和甘油或其混合和组合。

药用组合物可以含有缓冲剂。缓冲剂包括但不限于乳酸、柠檬酸、乙酸、乳酸钠、柠檬酸钠和乙酸钠。

适用于缓释制剂的亲水性聚合物包括：一或多种天然或者部分或全部合成的亲水性胶类，例如阿拉伯胶、黄芪胶、刺槐豆胶、瓜尔胶或刺梧桐胶；改良的纤维素物质，例如甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素；蛋白类似物，例如琼脂、果胶、角叉菜胶和藻酸盐类；其它亲水性聚合物例如卡波姆(carboxypolymethylene)、明胶、酪蛋白、玉米蛋白、斑脱土(bentonite)、硅酸铝镁、多糖、改良淀粉衍生物和其它本领域技术人员已知的亲水性聚合物或此类聚合物的组合。

本领域技术人员可以了解用于获得特定释放模式的各种结构，例如小球结构和包衣。剂型也可以包含多种本领域技术人员已知的释放类型。这些包括速释、缓释、脉冲释放、可变释放、控释、控时释放、持续释放、延迟释放、长效作用及其组合。获得速释、缓释、脉冲释放、可变释放、控释、控时释放、持续释放、延迟释放、长效作用及其组合的技术在本领域中是已知的。参加，例如U.S.6,913,768。

然而，需要注意的是，鸦片共轭物可以在延长的时间范围内控制鸦片向消化道内的释放，因而与速释组合相比，它可以使得释放模式改善并且在没有加入上述添加剂的情况下降低和/或防止滥用。在优选的实施方案中，无需另外的缓释添加剂就可以获得不尖的或者降低的药物动力学曲线(例如欣快效应降低)，同时获得治疗有效量的鸦片释放。

成人的剂量范围取决于多种因素，包括患者的年龄、体重和身体状况以及给药的途径。以分散单位而提供的片剂和其它所述剂型可以方便地含有鸦片共轭物的日剂量或其适当的小份。该剂型可以含有约2.5mg至约500mg、约10mg至约250mg、约10mg至约100mg、约25mg至约75mg或增量的剂量。在优选的实施方案中，剂型可以含有5mg、7.5mg、10mg、12mg、18mg、24mg、30mg或50mg的鸦片前药。

以分散单位而提供的片剂和其它所述剂型可以含有鸦片前药的日剂量或其适当的小份。

本发明组合物可以分次给药，即分剂量给药，可以24小时内一或多次给药，24小时内单剂量给药，24小时内二倍剂量给药，24小时内二倍以上剂量给药。分剂量、二倍剂量或其它多倍剂量可以同时服用或者24小时内的不同时间服用。该剂量可以是彼此不同的剂量，或者在不同的给药时间给予不同的成分。优选一天给予一次单剂量。

同样，本发明组合物可以为水泡眼包装或其它此类药物包装。另外，本发明的组合物还可以包含或者伴有标记，它使得人们能够识别作为用于处方治疗产品的组合物。所述标记还可以另外包括上述给予组合物的特定时间周期的指示。例如，所述标记可以为指示每天给予组合物的特定时间或常规时间，或者所述标记可以是指示每周具体哪天给予组合物的日期标记。水泡眼包装或其它组合产品的包装也可以包括第二种药物产品。

本发明化合物可以通过各种剂型给药。本领域技术人员已知的任何生物学上可接受的剂型及其组合均包含在内。此类剂型的实例包括但不限于咀嚼片、速溶片、泡腾片、可重构粉末、酏剂、液体制剂、溶液剂、在水性或非水性液体中的混悬液、乳剂、片剂、注射剂、多层片、双层片、胶囊、软明胶胶囊、硬明胶胶囊、囊片、锭剂、咀嚼锭剂、微丸剂(beads)、粉剂、颗粒剂(granules)、颗粒剂(particles)、微粒剂、可分散颗粒剂、扁囊剂及其组合。优选所述组合物可以为下列各种已知的剂型：片剂(例如，咀嚼片、常规片剂、薄膜-包衣片剂、压制片剂)、胶囊、用于口服的液体分散制剂(例如，糖浆、乳剂、溶液剂或混悬液)。

然而，传递本发明的抗滥用的鸦片化合物的最有效的方法为口服给药，可以获得鸦片的最大释放从而提供治疗效果和/或缓释，并且保持了对滥用的抵抗。当通过口服途径传递将鸦片释放到循环中时，与单独给予活性成分相比，优选其在延长的时间内释放。

优选共轭物紧密压缩从而可以降低整体的给药体积。较小体积的前药剂型可以方便吞咽。

对于口服给药而言，含有稀释剂、分散剂和/或表面活性剂的微粉或颗粒剂可以存在于饮剂(draught)中、水或糖浆中、干燥状态下的胶囊或香囊剂中、非水性混悬液(其中可以含有悬浮剂)中或者存在于水或糖浆中的混悬液中。如果需要或者必须的话，可以含有矫味剂、防腐剂、悬浮剂、增稠剂或乳化剂。

因此，本发明也提供了包括提供、给予、处方或使用前药的方法。本发明还提供了含有前药的药用组合物。此类药用组合物的制剂可以任选提高或者达到需要的释放模式。

实施例

实施例证明了与管制药物共轭结合的化学成分的用途和有效性，所述与管制药物共轭结合的化学成分用于降低过量给药的可能性，同时保持其治疗价值，包括提供缓释和/或降低副作用。另外，这些化合物可以在上述组合物和方法中使用，其中管制药物与拮抗剂、第二种激动剂(管制药物)或其组合产品联合使用。然而，应该理解，下面的实施例仅仅用于说明，也可以使用其它管制药物或拮抗剂以达到本说明书中所述的本发明所期望的结果。本发明中所采用的氢可酮共轭物的其它实例可以例如参考US2005/0266070 A1(以其全部内容引入本文作为参考)。本发明中所采用的羟考酮共轭物的其它实例可以例如参考US 2005/0176644 A1(以其全部内容引入本文作为参考)。

表3.可以与鸦片类共价结合的优选的氨基酸和肽的名单

 

(Lys-Lys-Gly-Gly)2
	[(1)-Lys-(d)-Lys-Leu]2
Acetyl-Glu2-Pro2-Ile[SEQ ID NO：3]
	Ala
Ala-Pro
	氨基异丁酸
Arg
	Asn
Asp
	Asp2-Gly2-Ile[SEQ ID NO：4]
Asp2-Leu2-Ile[SEQ ID NO：5]
	Asp2-Leu2-Ile[SEQ ID NO：6]
Asp2-Lys(Asp2)[SEQ ID NO：29]
	Asp2-Pro2-Ile[SEQ ID NO：7]
Asp-Asp-Cha
	Asp-Asp-Ile
Asp-Asp-Nle
	Asp-Asp-Phe
Asp-Asp-Val
	Asp-d-Asp-Ile
Asp-Glu-Val
	Asp-Gly-Val

 

Asp-Ile-Val
	Asp-Leu-Val
Asp-Lys-Val
	Asp-Phe-Val
Asp-Pro-Val
	Asp-Ser-Val
Asp-Thr-Val
	Asp-Tyr-Val
Asp-Val-Val
	Cys
碳酸乙酯
	半乳糖-Gly-Gly-Ile
半乳糖-Gly-Gly-Leu
	半乳糖-Ile
Gln
	Gln-Gln-Ile
Gln-Gln-Val
	Gln-Gln-β-Ala
Gln-Pro-Val
	Glu
Glu2-Gly2-Phe[SEQ ID NO：8]
	Glu2-Leu3[SEQ ID NO：9]
Glu2-Lys(Glu2)[SEQ ID NO：30]
	Glu2-Phe2-Leu[SEQ ID NO：10]
Glu2-Phe-Pro-Ile[SEQ ID NO：11]
	Glu2-Pro2-Leu[SEQ ID NO：12]
Glu2-Pro-Phe-Ile[SEQ ID NO：13]
	Glu4-Ile[SEQ ID NO：14]
Glu5
	Glu-Glu
Glu-Glu-Cha
	Glu-Glu-Glu
Glu-Glu-Gly-Gly-Aib
	Glu-Glu-Gly-Gly-Ile
Glu-Glu-Gly-Gly-Leu
	Glu-Glu-hPhe
Glu-Glu-Ile
	Glu-Glu-Leu
Glu-Glu-Nle
	Glu-Glu-Phe
Glu-Glu-Phe-Phe-Ile
	Glu-Glu-Phe-Phe-Phe[SEQ ID NO：15]
Glu-Glu-Val
	Glu-Gly-Val
Glu-Leu-Val
	Glu-Lys-Val

 

Glu-Phe-Val
	Glu-Pro-Val
Glupyro-Glu
	Glu-Ser-Val
Glu-Thr-Val
	Glu-Tyr-Val
Glu-Val-Val
	Gly
Gly2-Glu2-Ile[SEQ ID NO：16]
	Gly2-Glu3
Gly4-Aib
	Gly4-Ile
Gly4-Leu
	Gly4-Phe
Gly-Asp-Val
	Gly-Gly-α氨基异丁酸
Gly-Gly-Cha
	Gly-Gly-Glu
Gly-Gly-hPhe
	Gly-Gly-Ile
Gly-Gly-Leu
	Gly-Gly-Nle
Gly-Gly-Phe
	Gly-Gly-Val
Gly-Ile-Ile
	Gly-Leu-Ile
Gly-Leu-Leu
	Gly-Lys-Val
Gly-Phe-Ile
	Gly-Phe-Leu
Gly-Pro-Val
	Gly-Ser-Val
Gly-Thr-Val
	Gly-Val-Val
His
	Ile
Ile-Asp-Val
	Ile-Glu-Val
Ile-Gly-Val
	Ile-Phe-Val
Ile-Ser-Val
	Ile-Thr-Val
Ile-Tyr-Val
	Leu
Leu-Asp-Val
	Leu-Glu-Val

 

Leu-Gly-Val
	Leu-Leu-Glu
Leu-Leu-Ile
	Leu-Leu-Leu
Leu-Lys-Val
	Leu-Phe-Val
Leu-Pro-Glu
	Leu-Pro-Ile
Leu-Pro-Leu
	Leu-Pro-Phe
Leu-Pro-Val
	Leu-Thr-Val
Leu-Tyr-Val
	Lys
Lys2-Leu2-Ile[SEQ ID NO：17]
	Lys2-Pro2-Ile[SEQ ID NO：18]
Lys-Asp-Val
	Lys-Glu-Val
Lys-Gly-Val
	Lys-Ile-Val
Lys-Leu-Val
	Lys-Lys
Lys-Lys-Ile
	Lys-Lys-Leu
Lys-Lys-Val
	Lys-Phe-Val
Lys-Pro-Val
	Lys-Thr-Val
Lys-Tyr-Val
	Lys-Tyr-Val-lle[SEQ ID NO：1]
Lys-Val-Val
	Met
Phe
	Phe2-Glu2-Ile[SEQ ID NO：19]
Phe2-Lys(Phe2)[SEQ ID NO：31]
	Phe5[SEQ ID NO：20]
Phe-Asp-Val
	Phe-Glu-Val
Phe-Gly-Val
	Phe-Ile-Val
Phe-Leu-Val
	Phe-Lys-Val
Phe-Phe-Cha
	Phe-Phe-hPhe
Phe-Phe-Ile
	Phe-Phe-Leu

 

Phe-Phe-Lys-Phe-Phe
	Phe-Phe-Nle
Phe-Phe-Phe
	Phe-Phe-Val
Phe-Pro-Val
	Phe-Ser-Val
Phe-Thr-Val
	Phe-Tyr-Val
Pro
	Pro2-Lys(Pro2)[SEQ ID NO：32]
Pro-Asp-Val
	Pro-Gly-Val
Pro-Ile-Ile
	Pro-Ile-Val
Pro-Leu-Ile
	Pro-Lys-Val
Pro-Phe-Ile
	Pro-Phe-Val
Pro-Pro-Cha
	Pro-Pro-Glu
Pro-Pro-Ile
	Pro-Pro-Leu
Pro-Pro-Nle
	Pro-Pro-Phe
Pro-Pro-Phe
	Pro-Pro-Val
Pro-Ser-Val
	Pro-Thr-Val
Pro-Tyr-Val
	Pro-Val-Val
焦谷氨酸-Glu
	Ser
Ser-Asp-Val
	Ser-Glu-Val
Ser-Gly-Val
	Ser-Ile-Val
Ser-Leu-Val
	Ser-Lys-Val
Ser-Phe-Val
	Ser-Pro-Val
Ser-Tyr-Val
	Ser-Val-Val
β-Leu
	Thr
Thr2-Gly2-Ile[SEQ ID NO：21]
	Thr2-Phe2-Ile[SEQ ID NO：22]

 

Thr-Asp-Val
	Thr-Glu-Val
Thr-Gly-Val
	Thr-Leu-Val
Thr-Lys-Val
	Thr-Phe-Val
Thr-Pro-Val
	Thr-Ser-Val
Thr-Thr-Ile
	Thr-Thr-Val
Thr-Tyr-Val
	Thr-Val-Val
t-Leu
	Trp
Tyr
	Tyr2-Leu2-Ile[SEQ ID NO：23]
Tyr2-Lys(Tyr2)[SEQ ID NO：33]
	Tyr2-Phe2-Ile[SEQ ID NO：24]
Tyr2-Pro2-Ile[SEQ ID NO：25]
	Tyr2-Pro-Phe-Ile[SEQ ID NO：26]
Tyr-Asp-Val
	Tyr-Glu-Val
Tyr-Gly-Val
	Tyr-Ile-Val
Tyr-Leu-Val
	Tyr-Lys-Val
Tyr-Phe-Val
	Tyr-Pro-Val
Tyr-Pro-Val-lle[SEQ ID NO：2]
	Tyr-Ser-Val
Tyr-Thr-Val
	Tyr-Tyr-Ala
Tyr-Tyr-Cha
	Tyr-Tyr-hPhe
Tyr-Tyr-Ile
	Tyr-Tyr-Leu
Tyr-Tyr-Lys-Tyr-Tyr
	Tyr-Tyr-Nle
Tyr-Tyr-Phe
	Tyr-Tyr-Phe
Tyr-Tyr-Phe-Phe-Ile[SEQ ID NO：27]
	Tyr-Tyr-Phe-Phe-Val[SEQ ID NO：28]
Tyr-Tyr-Val
	Tyr-Val-Val
Tyr-β-Ala
	Val

 

Val-Asp-Val
	Val-Gln-Val
Val-Glu-Gly
	Val-Glu-Leu
Val-Glu-Val
	Val-Gly-Glu
Val-Gly-Val
	Val-Phe-Val
Val-Pro-Tyr
	Val-Pro-Val
Val-Thr-Val
	Val-Tyr-Asp
Val-Tyr-Glu
	Val-Tyr-Gly
Val-Tyr-Ile
	Val-Tyr-Leu
Val-Tyr-Lys
	Val-Tyr-Phe
Val-Tyr-Pro
	Val-Tyr-Val
Val-Val
	β-Ala
β-Ala-β-Ala

氢可酮的实施例

氢可酮可以与一或多个命名为X和Z的化学成分结合。化学成分可以是任何能够降低与该化合物成分结合的氢可酮药理学活性的成分，所述降低是指与未结合(游离)氢可酮相比而言。结合的化学成分可以是天然存在的，也可以是合成的。在一个实施方案中，本发明提供了式IA或IB的氢可酮前药：

H-X_n-Z_m                   (IA)

H-Z_m-X_n                    (IB)

其中H为氢可酮；

每一个X均独立为化学成分；

每一个Z均独立为作为辅助成分的化学成分，它与至少一个X不同；

n为1-50的增量，优选1-10；

m为0-50的增量，优选0。

当m为0时，氢可酮前药为式(II)化合物：

H-X_n                       (II)

其中每一个X均独立为化学成分。

式(II)也可以书写为与氢可酮物理连接的化学成分：

H-X₁-(X)_n-1                        (III)

其中H为氢可酮；X₁为化学成分，优选为单一氨基酸；每一个X均独立为化学成分，它们与X₁可以相同或者不同；n为1-50的增量。

H为氢可酮并具有下列结构，其中氢可酮的6位上存在取代基，其中A代表X的连接位置。

在一个可选择的实施方案中，氢可酮的3位和/或N位置可以被有或无连接基团的化学成分取代。参见美国专利号5,610,283，它描述了在这些位置上取代鸦片类的方法。化学成分包括但不限于在下面表3中所列出的载体肽。

参考图2，该图显示了氢可酮的可能的连接位置。特别的是，氢可酮可以在6位上与化学成分连接。

下表列出了本发明制备的优选的氢可酮共轭物。

本发明的通过6位与氨基酸的C-末端连接的氢可酮(HC)的目录(为了清楚地说明，与-HC相邻的氨基酸即为与HC结合的氨基酸)。

 

Aib-HC	Phe-Phe-Ile-HC	Lys2-Gly2-Ile-HC
			Boc-Glu(OtBu)-HC	Phe-Phe-Leu-HC	Lys2-Leu2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Boc-Lys(Boc)-HG	Phe-Phe-Phe-HC	Lys2-Pro2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
			Glu-HC	Pro-Ile-Ile-HC	Phe2-Glu2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Gly-HC	Pro-Leu-Ile-HC	Phe5-HC[SEQ ID NO：XX]
			Ile-HC	Pro-Phe-Ile-HC	Thr2-Gly2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Leu-HC	Pro-Pro-Glu-HC	Thr2-Phe2-lle-HC[SEQ IDNO：XX]
			Lys-HC	Pro-Pro-Ile-HC	Tyr2-Glu2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Phe-HC	Pro-Pro-Leu-HC	Tyr2-Gly2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
			Pro-HC	Pro-Pro-Phe-HC	Tyr2-Leu2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Ser-HC	Thr-Thr-Ile-HC	Tyr2-Phe-Pro-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
			Ala-Pro-HC	Tyr-Tyr-Ile-HC	Tyr2-Pro2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Boc-Ala-Pro-HC	Gln-Gln-Ile-HC	Tyr2-Pro-Phe-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
			Boc-Glu(OtBu)-Leu-HC	Gly-Gly-Gly-Gly-HC[SEQ IDNO：XX]	Tyr-Tyr-Phe-Phe-[le-HC[SEQID NO：XX]
Boc-Glu(OtBu)-Pro-HC	Acetyl-Glu2-Pro2-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]	Glu-Glu-Phe-Phe-Phe-Ile-HC
			Glu-Glu-HC	Asp2-Gly2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	β-Ala-HC
Glu-Leu-HC	Asp2-Leu2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	β-Ala-β-Ala-HC
			Glu-Pro-HC	Asp2-Phe2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	EpE-HC
Glupyro-Glu-HC	Asp2-Pro2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	碳酸乙酯-HC
			Asp-Asp-Ile-HC	Asp4-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	半乳糖-CO-Leu-HC
Gln-Gln-Ile-HC	Glu2-AsP2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	半乳糖-CO-Pro2-Ile-HC
			Glu-Glu-Glu-HC	Glu2-Gly2-Aib-HC	半乳糖-CO-Pro2-Leu-HC
Glu-Glu-Ile-HC	Glu2-Gly2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]	半乳糖-Gly-Gly-Ile-HC
			Glu-Glu-Leu-HC	Glu2-Gly2-Leu-HC[SEQ ID NO：	半乳糖-Gly-Gly-Leu-HC

 

	XX]
			Gly-Gly-Aib-HC	Glu2-Gly2-Phe-HC[SEQ ID NO：XX]	半乳糖-Ile-HC
Gly-Gly-Glu-HC	Glu2-Leu3-HC[SEQ ID NO：XX]	古洛糖酸-Ile-HC
			Gly-Gly-Ile-HC	Glu2-Phe2-Leu-HC[SEQ ID NO：XX]
Gly-Gly-Leu-HC	Glu2-Phe-Pro-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
			Gly-Gly-Phe-HC	Glu2-Pro2-Leu-HC[SEQ ID NO：XX]
Gly-Ile-Ile-HC	Glu2-Pro-Phe-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
			Gly-Leu-Ile-HC	Glu4-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
Gly-Leu-Leu-HC	Glu5-HC[SEQ ID NO：XX]
			Gly-Phe-Ile-HC	Glu-Glu-Phe-Phe-Ile-HC[SEQ IDNO：XX]
Gly-Phe-Leu-HC	Glu-Glu-Phe-Phe-Phe-HC[SEQ IDNO：XX]
			Leu-Leu-Glu-HC	Gly2-Glu2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
Leu-Leu-Ile-HC	Gly2-Glu3-HC[SEQ ID NO：XX]
			Leu-Leu-Leu-HC	Gly2-Pro2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
Leu-Pro-Glu-HC	Gly4-Aib-HC[SEQ ID NO：XX]
			Leu-Pro-Ile-HC	Gly4-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
Leu-Pro-Leu-HC	GIy4-Leu-HC[SEQ ID NO：XX]
			Leu-Pro-Phe-HC	Gly4-Phe-HC[SEQ ID NO：XX]
(d)-Lys-(l)-Lys-Ile-HC	Lys2-Asp2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]
			Lys-Lys-Ile-HC	Lys2-Glu2-Ile-HC[SEQ ID NO：XX]

实施例说明了将各种成分与氢可酮结合从而降低滥用的可能并同时保持治疗价值的适用性。通过采用各种肽鸦片(例如氢可酮)共轭物进行的药物动力学研究阐明了本发明。在大鼠中测定母体鸦片(例如氢可酮)以及相等克分子数的肽-鸦片共轭物或母体药物口服、静脉内或鼻腔内给药后主要的活性代谢产物(例如二氢吗啡酮和羟吗啡酮)的药代动力学。

口服、鼻腔和静脉内给药的氢可酮和氢可酮共轭物的生物利用度研究在雄性Sprague-Dawley大鼠中进行。氢可酮二酒石酸盐和含有相同量氢可酮的氢可酮共轭物的剂量可以在去离子水中给予。通过灌胃针口服给予0.5ml，但是YYI-HC在明胶胶囊中以固体形式给药。采用异氟烷将大鼠麻醉后，鼻腔内剂量可以通过鼻翼给予20微升。通过尾静脉注射可以静脉内给药0.1ml。在异氟烷麻醉下，通过鼻腔蝶窦(retroorbital sinus)穿刺收集血浆。通过LC/MS/MS测定氢可酮和二氢吗啡酮(主要活性代谢产物)的浓度。

下面的实施例仅用于说明，下面的与氢可酮结合的氨基酸序列并非用于限定。因此，氢可酮的合成和结合可以例如根据下列具有代表性的方法进行。

通过下面所述的通用方法合成肽共轭物。

氢可酮游离碱采用碱(LHMTS，K-t-BuO，Li-t-BuO)处理，随后加入N-保护的活化的氨基酸。然后将获得的产物进行氮脱保护，得到氨基酸连接的氢可酮。

通过合成和测试单一氨基酸共轭物，然后每次增加一个氨基酸使得肽延伸得到二肽和三肽共轭物等，这种可重现的方法可以用于鉴别令人满意的共轭物。备选的母体单一氨基酸前药可以较其备选的后代二肽或三肽产物具有更需要或不需要的特性。

单-取代的氢可酮共轭物

单一氨基酸氢可酮共轭物

实施例1.Leu-氢可酮

 

试剂	MW	重量	mmol	摩尔当量
					1.氢可酮	299	1.00g	3.34	1.0
1.LiN(TMS)2，THF中	1M	10.5ml	10.5	3.15
					1.THF	-	25ml	-	-
2.Boc-Leu-OSu	328	3.28g	10.0	3.0

通过注射器向氢可酮的THF溶液中加入LiN(TMS)₂的THF溶液。将该溶液于室温下搅拌5分钟，然后加入Boc-Leu-OSu。将得到的反应混合物于室温下搅拌18小时。采用6M HCl将反应物中和至pH 7。除去溶剂。将粗品产物溶于CHCl₃(100ml)，采用饱和的碳酸氢钠洗涤(3×100mI)，经硫酸镁干燥，过滤并除去溶剂。收集为黄色粉末的固体(1.98g，95％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 0.86(dd，6H)，1.31(s，9H)，1.46(s，2H)，1.55(m，2H)，1.69(m，1H)，1.87(dt，1H)，2.07(dt，2H)，2.29(s，3H)，2.43(m，2H)，2.93(d，1H)，3.11(s，1H)，3.72(s，3H)，3.88(dt，1H)，4.03(dt，1H)，4.87(s，1H)，5.51(d，1H)，6.65(d，1H)，6.73(d，1H)，6.90(s，1H)。

向Boc-Leu-氢可酮中加入25ml的4N HCl的二氧六环溶液。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。除去溶剂，将终产物真空干燥。收集浅黄色固体(1.96g，97％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 0.94(d，6H)，1.52(m，1H)，1.75-1.90(m，4H)，2.22(dt，1H)，2.34(dt，1H)，2.64(q，1H)，2.75(s，3H)，2.95-3.23(m，4H)，3.74(s，3H)，3.91(d，1H)，4.07(s，1H)，5.10(s，1H)，5.72(d，1H)，6.76(d，1H)，6.86(d，1H)，8.73br s，3H)。

二肽氢可酮共轭物

实施例2.含有两个不同氨基酸的共轭物的实施例：Ala-Pro-氢可酮

 

试剂	MW	重量	mmol	摩尔当量
					Pro-氢可酮	468	0.25g	0.53	1.0
Boc-Leu-OSu	286	0.33g	1.2	2.26
					NMM	101	0.50ml	5.38	10.2
DMF	-	10ml	-	-

向Pro-氢可酮的DMF溶液中加入NMM，随后加入Boc-Ala-OSu。将溶液于室温下搅拌18小时。除去溶剂。粗品产物采用制备性HPLC纯化(Phenomenex Luna C18，30×250mm，5μM，100

；梯度洗脱：100水/00.1％TFA-MeCN→0/100；30ml/min.)。收集为浅黄色粉末的固体(0.307g，85％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 1.16(d，3H)，1.35(s，9H)，1.51(m，2H)，1.86-2.10(m，6H)，2.50(m，1H)，2.54(m，1H)，2.69(m，1H)，2.88(s，3H)，3.02(dd，1H)，3.26(d，1H)，3.55(m，1H)，3.67(m，1H)，3.72(s，3H)，3.80(s，1H)，4.25(m，1H)，4.43(d，1H)，5.01(s，1H)，5.59(d，1H)，6.75(d，1H)，6.88(d，1H)，6.99(t，1H)，9.91(br s，1H)。

向Boc-Ala-Pro-氢可酮(0.100g)中加入10ml的4N HCl的二氧六环溶液。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。除去溶剂，将终产物真空干燥。收集得到浅黄色固体(0.56g，71％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 1.38(s，3H)，1.48(t，1H)，1.80-2.29(m，8H)，2.65(m，1H)，2.80(s，3H)，2.96(m，3H)，3.23(m，2H)，3.76(s，3H)，3.92(s，lH)，4.22(s，1H)，4.53(s，1H)，5.00(s，1H)，5.84(d，1H)，6.77(d，1H)，6.86(d，1H)，8.25(br s，3H)。

实施例3.含有两个相同氨基酸的共轭物的实施例：Glu-Glu-氢可酮

根据实施例2的相似方法制备Glu-Glu-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Glu(OtBu)-OSu，共轭物原料采用Glu-氢可酮。

三肽氢可酮共轭物

实施例4.含有不同氨基酸的共轭物的实施例：Gly-Gly-Leu-氢可酮

 

试剂	MW	重量	mmol	摩尔当量
					Leu-氢可酮	468	2.21g	4.56	1.0
Boc-Gly-Gly-OSu	329	3.00g	9.12	2.0
					NMM	101	5.0ml	45.6	10
DMF	-	100ml	-	-

向Leu-氢可酮的DMF溶液中加入NMM，随后加入Boc-Gly-Gly-OSu。将溶液于室温下搅拌18小时。除去溶剂。粗品产物采用制备性HPLC纯化(Phenomenex Luna C 18，30×250mm，5μM，100

；梯度洗脱：90水/10 0.1％TFA-MeCN→0/100；30ml/min.)。收集为浅黄色粉末的固体(2.08g，73％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 0.88(dd，6H)，1.38(s，9H)，1.53-1.72(m，5H)，1.89(d，1H)，2.15(m，1H)，2.67(m，2H)，2.94(s，3H)，3.05(m，2H)，3.25(m，2H)，3.56(d，3H)，3.76(s，6H)，3.98(s，1H)，4.35(q，1H)，5.04(s，1H)，5.59(d，1H)，6.77(d，1H)，6.85(d，1H)，7.04(t，1H)，8.01(t，1H)，8.30(d，1H)，9.99(br s，1H)。

向Boc-Gly-Gly-Leu-氢可酮(2.08g)中加入50ml的4N HCl的二氧六环溶液。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。除去溶剂，将终产物真空干燥。收集浅黄色固体(1.72g，86％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 0.89(dd，6H)，1.50-1.87(m，5H)，2.26(m，2H)，2.66(m，2H)，2.82-2.97(m，5H)，3.21(m，2H)，3.60(m，4H)，3.88(m，5H)，4.37(m，1H)，5.04(s，1H)，5.60(s，1H)，6.79(d，2H)，8.07(br s，3H)，8.54(br s，1H)，8.66(br s，1H)，11.29(br s，1H)。

实施例5.含有三种相同氨基酸的共轭物的实施例：Glu-Glu-Glu-氢可酮

根据实施例4的相似方法制备Glu-Glu-Glu-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-OSu，共轭物原料采用Glu-氢可酮。

五肽氢可酮共轭物

实施例6.含有不同氨基酸的共轭物的实施例：Gly-Gly-Gly-Gly-Leu-氢可酮

 

试剂	MW	重量	mmol	摩尔当量
					Gly-Gly-Leu-氢可酮	599	0.580g	0.970	1.0
Boc-Gly-Gly-OSu	329	0.638g	1.94	2.0
					NMM	101	1.06ml	9.70	10
DMF	-	20ml	-	-

向Gly-Gly-Leu-氢可酮的DMF溶液中加入NMM，随后加入Boc-Gly-Gly-OSu。将溶液于室温下搅拌18小时。除去溶剂。粗品产物采用制备性HPLC纯化(Phenomenex Luna C 18，30×250mm，5μM，100

；梯度洗脱：85水/15 0.1％TFA-MeCN→50/50；30ml/min.)。收集为浅黄色粉末的固体(0.304g，37％收率)。

向Boc-Gly-Gly-Gly-Gly-Leu-氢可酮(0.304g)中加入25ml的4N HCl的二氧六环溶液。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。除去溶剂，将终产物真空干燥。收集浅黄色固体(0.247g，97％收率)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ0.87(m，6H)，1.23(s，1H)，1.51-1.86(m，4H)，2.18(m，1H)，2.71(m，2H)，2.77(s，3H)，2.96(m，2H)，3.17(m，2H)，3.61(s，3H)，3.81-3.84(m，10H)，4.22(m，1H)，4.36(m，1H)，5.09(m，1H)，5.59(d，1H)，6.74(dd，2H)，8.16(brs，4H)，8.38(br s，1H)，8.74(br s，1H)，11.42(br s，1H)。

实施例7.含有不同氨基酸的共轭物的实施例：Glu₂-Gly₂-Ile-氢可酮

根据实施例6相似的方法制备Glu₂-Gly₂-Ile-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-OSu，共轭物原料采用Gly₂-Ile-氢可酮。

实施例8.含有不同氨基酸的共轭物的实施例：Gly₄-Ile-氢可酮

根据实施例6的相似方法制备Gly₄-Ile-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Gly-Gly-OSu，共轭物原料采用Gly₂-Ile-氢可酮。

实施例9.含有不同氨基酸的共轭物的实施例：Glu₂-Phe₃-氢可酮

根据实施例6的相似方法制备Glu₂-Phe₃-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-OSu，共轭物原料采用Phe₃-氢可酮。

实施例10.含有不同氨基酸的共轭物的实施例：Tyr₂-Phe-Pro-Ile-氢可酮

根据实施例6的相似方法制备Tyr₂-Phe-Pro-Ile-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Tyr(tBu)-Tyr(tBu)-OSu，共轭物原料采用Phe-Pro-Ile-氢可酮。

实施例11.含有5个相同氨基酸的共轭物的实施例：Glu₅-氢可酮

根据实施例6的相似方法制备Glu₅-氢可酮，但是氨基酸原料采用Boc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-OSu，共轭物原料采用Glu₃-氢可酮。

糖肽氢可酮共轭物

 

试剂	MW	重量	mmol	摩尔当量
					1，2:3，4-二-O-亚异丙基-D-吡喃半乳糖	260	1.00g	3.85	1
20％光气甲苯溶液	-	20ml	-	-

实施例12.1，2:3，4-二-O-亚异丙基-D-吡喃半乳糖的氯代甲酸盐

在惰性气体环境中，通过注射器向搅拌的20％光气的甲苯溶液中加入1，2:3，4-二-亚异丙基-D-吡喃半乳糖。将得到的澄清、无色溶液于室温下搅拌30分钟。搅拌结束后，向溶液中通入Ar(g)约20分钟以除去所有的过量光气。然后除去溶剂，将产物真空干燥18小时。产物无需纯化或定性直接使用。

实施例13.半乳糖-CO-Leu-氢可酮

向半乳糖(1.5eq)的氯代甲酸盐的二甲基甲酰胺(DMF)(2ml/mmol)溶液中加入Leu-氢可酮(1eq)和4-甲基吗啉(NMM)(6eq)。将反应物于室温下搅拌18小时。反应物通过加入水淬灭，除去溶剂，粗品产物通过反相HPLC分离。

采用1:1 1M HCl:THF(1ml/0.1mmol)将产物脱保护3小时。产物通过反相HPLC再次纯化。

实施例14.半乳糖-CO-Pro₂-Ile-氢可酮

根据实施例13相似的方法制备半乳糖-CO-Pro₂-Ile-氢可酮，但是采用Pro₂-Ile-氢可酮作为共轭物的原料。

实施例15.古洛糖酸-Ile-氢可酮

根据实施例13相似的方法制备古洛糖酸-Ile-氢可酮，但是采用Ile-氢可酮作为共轭原料，古洛糖酸-OSu作为碳水化合物原料。

D-氨基酸氢可酮共轭物

实施例16.(d)-LyS-(l)-Lys-Ile-氢可酮

向Ile-氢可酮的DMF溶液中加入NMM，随后加入Boc-(d)-Lys(Boc)-(l)-Lys(Boc)-OSu。将溶液于室温下搅拌18小时。除去溶剂。粗品产物采用制备性HPLC纯化(Phenomenex Luna C18，30×250mm，5μM，100

；梯度洗脱：90水/10 0.1％TFA-MeCN→0/100；30ml/min)。收集为浅黄色粉末的固体。向Boc-(d)-Lys(Boc)-(l)-Lys(Boc)-氢可酮中加入4N HCl的二氧六环溶液。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。除去溶剂，将终产物真空干燥。收集浅黄色固体。

剂量(1mg/kg)为接近人类治疗剂量和提高剂量的肽-氢可酮共轭物的口服生物利用度

肽与活性成分氢可酮共轭后，当以1mg/kg的剂量给药时，其口服生物利用度维持或超过相同剂量氢可酮的生物利用度。根据Chou等的报道，该剂量相当于体重为70kg(148lbs)的人类的10-14mg的剂量。然而，当口服给予5mg/kg时，峰浓度和生物利用度均显著降低。大鼠的5mg/kg剂量约相当于80mg氢可酮二酒石酸盐的人类相同剂量(HED)；该剂量在速释情况下造成严重过量，有可能对患者造成伤害。人类相同剂量是指60kg的人根据动物模型的体表面积调整的相同剂量。大鼠的调整因子为6.2。例如，5mg/kg氢可酮碱的大鼠剂量的HED相当于48.39mg(5/6.2×60)氢可酮碱；当根据盐的含量进行调整后，它相当于79.98mg(48.39/.605)氢可酮二酒石酸盐。

因此肽-氢可酮共轭物在较低的剂量(1mg/kg)时可以维持其治疗效果，而当剂量超过安全水平(5mg/kg)时，生物利用度较氢可酮降低，因此口服可以减少过量的可能性。相对于氢可酮而言，肽氢可酮共轭物中氢可酮的生物利用度降低的范围在9-70％之间。

实施例17：通过鼻腔途径给药的肽-HC共轭物的生物利用度

肽与活性成分氢可酮共轭后，当药物通过鼻吸给药后，生物利用度显著降低，从而降低了过量使用的可能性。

实施例18：氢可酮共轭物

已经对各种肽-氢可酮共轭物相对于氢可酮二酒石酸盐的生物利用度(AUC和C_max)进行了研究。在相对较低的剂量1和2mg/kg(人类相同剂量(HEDs)为16和32mg的氢可酮二酒石酸盐)时，氢可酮共轭物的生物利用度与氢可酮二酒石酸盐的生物利用度相当。在较高的剂量5和25mg/kg时，氢可酮和二氢吗啡酮的生物利用度较氢可酮显著降低。这些剂量(HED分别为80和400mg氢可酮二酒石酸盐)远远高于氢可酮二酒石酸盐的可处方的剂量(范围为2.5-10mg)。当通过静脉内和鼻腔内给药的胃肠外途径传递时，可以观察到氢可酮共轭物中的氢可酮和二氢吗啡酮的生物利用度较氢可酮二酒石酸盐的生物利用度有显著的降低。这些实施例说明，当以接近常规处方剂量的剂量给药时，鸦片类(HC)通过与肽的结合而进行的共价修饰提供了传递生物等效剂量的方法。当通过胃肠外途径给药或者口服剂量超过预定的处方剂量时，生物利用度显著降低。总而言之，这些实施例清楚地说明了本发明在降低鸦片类滥用可能性方面的用途。

对抗滥用的氢可酮共轭物的体内实验概述

氢可酮共轭物的体内实验证明：例如，氢可酮共轭物的鼻腔内镇痛响应降低、静脉内镇痛响应降低、皮下镇痛响应降低、口服C_max降低、鼻腔内生物利用度(AUC和C_max)降低，这些均进一步描述于下。

实施例19.氢可酮共轭物降低鼻腔内镇痛响应

通过鼻翼给予雄性Sprague-Dawley大鼠含有氢可酮共轭物或氢可酮二酒石酸盐的0.02ml水。所有的给药剂量均含有等量的氢可酮碱。采用开始舔爪反应的时间(秒)作为镇痛效果的衡量标准。使大鼠适应后测定基线响应。热板实验于55℃进行。所有的实验均限定45秒内以避免组织损伤。所有的动物在实验结束时均人道处死。图61和63中所示的舔爪反应(镇痛效果)-时间曲线显示：与等克分子数(氢可酮碱)剂量的氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物使得镇痛效果降低。热板实验所测定的镇痛响应可以作为氢可酮药理学作用的药效学衡量方法。这些实施例说明，与氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物通过鼻腔途径给药降低了镇痛效果。

实施例20.氢可酮共轭物降低静脉内镇痛响应

通过尾静脉注射给予雄性Sprague-Dawley大鼠含有氢可酮共轭物或氢可酮二酒石酸盐的0.1ml水。所有的给药剂量均含有等量的氢可酮碱。采用开始舔爪反应的时间(秒)作为镇痛效果的衡量标准。使大鼠适应后测定基线响应。热板实验于55℃进行。所有的实验均限定45秒内以避免组织损伤。所有的动物在实验结束时均人道处死。图16中所示的舔爪反应(镇痛效果)-时间曲线显示：与等克分子数(氢可酮碱)剂量的氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物使得镇痛效果降低。热板实验所测定的镇痛响应可以作为氢可酮药理学作用的药效学衡量方法。该实施例说明，与氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物通过静脉内途径给药降低了镇痛效果。

实施例21.氢可酮共轭物降低皮下镇痛响应

通过皮下注射给予雄性Sprague-Dawley大鼠含有氢可酮共轭物或氢可酮二酒石酸盐的0.1ml水。所有的给药剂量均含有等量的氢可酮碱。采用开始舔爪反应的时间(秒)作为镇痛效果的衡量标准。使大鼠适应后测定基线响应。热板实验于55℃进行。所有的实验均限定45秒内以避免组织损伤。所有的动物在实验结束时均人道处死。舔爪反应(镇痛效果)-时间曲线显示：与等克分子数(氢可酮碱)剂量的氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物使得镇痛效果降低。热板实验所测定的镇痛响应可以作为氢可酮药理学作用的药效学衡量方法。该实施例说明，与氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物通过皮下途径给药降低了镇痛效果。

实施例22.氢可酮共轭物降低口服给药的C_max

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，禁食过夜，通过口服管饲法给予氢可酮共轭物或氢可酮二酒石酸盐。所有的给药剂量均含有等量的氢可酮碱。通过ELISA(二氢吗啡酮，106619-1，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆氢可酮浓度。该分析特别用于二氢吗啡酮(氢可酮的主要代谢产物，100％反应性)和氢可酮(62.5％反应性)。这些实施例显示，当通过口服途径给药时，与等克分子数(氢可酮碱)剂量的氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物降低了氢可酮以及二氢吗啡酮的峰浓度(C_max)。

实施例23.氢可酮共轭物降低鼻腔内给药的生物利用度(AUC和C_max)

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，通过鼻翼给予含有氢可酮共轭物或氢可酮二酒石酸盐的0.02ml水。所有的给药剂量均含有等量的氢可酮碱。通过ELISA(二氢吗啡酮，106619-1，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆氢可酮浓度。该分析特别用于二氢吗啡酮(氢可酮的主要代谢产物，100％反应性)和氢可酮(62.5％反应性)。这些实施例显示，当通过鼻腔途径给药时，与等克分子数(氢可酮碱)剂量的氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物降低了氢可酮以及二氢吗啡酮的峰浓度(C_max)和总吸收(AUC)。

实施例24.氢可酮共轭物降低静脉内给药的生物利用度(AUC和C_max)

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，通过尾静脉注射给予含有氢可酮共轭物或氢可酮二酒石酸盐的0.1ml水。所有的给药剂量均含有等量的d-苯丙胺碱。通过ELISA(二氢吗啡酮，106619-1，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆氢可酮浓度。该分析特别用于二氢吗啡酮(氢可酮的主要代谢产物，100％反应性)和氢可酮(62.5％反应性)。该实施例显示，当通过鼻腔途径给药时，与等克分子数(氢可酮碱)剂量的氢可酮二酒石酸盐相比，氢可酮共轭物的给药降低了氢可酮以及二氢吗啡酮的峰浓度(C_max)和总吸收(AUC)。

表.氢可酮共轭物的口服和鼻腔内给药的生物利用度

综上所述，这些实施例阐明了用于降低氢可酮过量使用可能性的本发明的应用。这些实施例显示，通过与化学成分结合可以共价修饰氢可酮，所述修饰可以在超过正常剂量的范围内保持治疗效果，同时显著降低(如果没有消除的话)通过口服、鼻腔内或静脉内途径给予氢可酮时过量使用的可能性。

二氢吗啡酮实施例

二氢吗啡酮可以与一或多个被命名为X和Z的化学成分结合。所述化学成分可以是能够降低与化学成分结合的二氢吗啡酮药理学活性的任何成分，该降低是与未结合的(游离)二氢吗啡酮相比而言。结合的化学成分可以是天然存在的，或者是合成的。在一个实施方案中，本发明提供了式IA或IB的二氢吗啡酮前药：

H-X_n-Z_m                     (IA)

H-Z_m-X_n                      (IB)

其中H为二氢吗啡酮；

X独立为化学成分；

每一个Z独立为作为辅助成分的化学成分，与至少一个X不同；

n为1-50的增量，优选1-10；

m为0-50的增量，优选0。

当m为0时，二氢吗啡酮前药为式(II)化合物：

H-X_n                        (II)

其中每一个X独立为化学成分。

式(II)也可以书写为与二氢吗啡酮物理结合的化学成分：

H-X₁-(X)_n-1                 (III)

其中H为二氢吗啡酮；X₁为化学成分，优选为单一氨基酸；每一个X均独立为化学成分，它们与X₁可以相同或者不同；n为1-50的增量。

H为二氢吗啡酮并具有下列结构(IV)、(V)或(VI)，其中A和B代表X的可能的连接位置。

在可选择的实施方案中，二氢吗啡酮的N位置可以被有或无连接基团存在的化学成分取代。参见美国专利号5,610,283，它公开了在N位置上取代鸦片类的方法。化学成分包括但不限于下面表3中所列出的所有的载体肽类。

下表列出了根据本发明制备的优选的二氢吗啡酮共轭物。本发明的通过6位与氨基酸的C-末端连接的二氢吗啡酮(HM)共轭物的目录如下(为了清楚地说明，与-HM相邻的氨基酸即为与HM结合的氨基酸)。

 

YYFFI-HM	KKI-HM
		EEFFF-HM	KKL-HM
YYI-HM	KKV-HM
		YYL-HM	EEI-HM
YYV-HM	EEL-HM
		GGI-HM	EEV-HM
GGL-HM	FFI-HM
		GGV-HM	FFL-HM
PPI-HM	FFV-HM
		PPL-HM	DDI-HM
PPV-HM

二氢吗啡酮共轭物也包括上述共轭物(于3位)的OAc和OEt衍生物。

肽二氢吗啡酮共轭物的通用合成方法

根据下面β-丙氨酸共轭物中所述方法，合成肽共轭物。

通过合成和测试单一氨基酸共轭物，然后每次增加一个氨基酸使得肽延伸得到二肽和三肽共轭物等，这种可重复的方法可以用于鉴别令人满意的共轭物。备选的母体单一氨基酸前药可以较其备选的后代二肽或三肽产物具有更需要或不需要的特性。

单一氨基酸二氢吗啡酮共轭物的通用合成方法

β-丙氨酸-二氢吗啡酮二盐酸盐的合成方法

在氩气环境中，于室温下向搅拌的二氢吗啡酮游离碱的二甲基甲酰胺(DMF)溶液中加入咪唑，随后加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物。将溶液搅拌6小时，反应物用水淬灭。减压除去溶剂，然后将粗品产物溶于乙酸乙酯，用盐水洗涤溶液，经硫酸钠干燥并浓缩，得到HM-TBDMS。

在氩气环境中，将二氢吗啡酮叔丁基二甲基甲硅烷基醚溶于四氢呋喃(THF)。将溶液冷却至0℃，然后加入LiN(TMS)₂，将溶液搅拌10分钟。然后向溶液中加入Boc-β-Ala-OSu，通过HPLC监测反应。通过加入氯化铵溶液使反应淬灭。减压除去溶剂，溶于乙酸乙酯，用饱和的碳酸氢钠溶液、盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到Boc-β-Ala-HM-TBDMS。粗品产物经制备性HPLC纯化。

为了除去TBDMS保护基团，在氩气环境中，于室温下，将Boc-β-Ala-HM-TBDMS溶于0.2M的NH₄F甲醇溶液中，将其搅拌8小时。减压除去溶剂得到Boc-β-Ala-HM。将产物在甲醇和叔丁基二甲醚中结晶纯化。

然后在氩气环境中、于0℃下，将Boc-β-Ala-HM溶于4N HCl的二氧六环溶液中，将其搅拌2小时。减压除去溶剂得到β-Ala-HM。

可以理解，6位上的合成也同样适用于3位上的合成。

实施例根据载体肽与二氢吗啡酮的结合而进一步分类。特别是，第一类涉及与单取代共轭物相关的实施例。

A.单-取代的二氢吗啡酮

除了上述实施例外，第一类提供了在二氢吗啡酮的6位上被三肽和五肽取代的实施例。另外，在二氢吗啡酮的3位上也可能被化学成分取代，但是这不是优选的取代位置。

二氢吗啡酮6位上的结合

实施例1.二氢吗啡酮在6位上与三肽结合的合成反应

向X-O⁶-二氢吗啡酮·2HCl(1mmol)的DMF溶液中加入NMM(10mmol)和Boc-Z-Y-OSu(1.2mmol)。将反应混合物于室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，向残留物中加入饱和的碳酸氢钠溶液并搅拌1h。过滤沉淀物，用水充分洗涤并干燥得到目标化合物。

Boc-Z-Y-X-O⁶-二氢吗啡酮的去保护

根据上述通用方法进行去保护，得到Z-Y-X-O⁶-二氢吗啡酮·2HCl。

实施例2.二氢吗啡酮在6位上与五肽结合的合成反应

Glu₂-Phe₃-二氢吗啡酮二盐酸盐的合成方法

在氩气环境中，于室温下向搅拌的二氢吗啡酮游离碱的二甲基甲酰胺(DMF)溶液中加入咪唑，随后加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物。将溶液搅拌6小时，然后将反应物用水淬灭，减压除去溶剂。将粗品产物溶于乙酸乙酯，用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到HM-TBDMS。

在氩气环境中，于室温下将二氢吗啡酮叔丁基二甲基甲硅烷基醚溶于THF。将溶液冷却至0℃，然后加入LiN(TMS)₂，将溶液搅拌10分钟。然后向溶液中加入Boc-Phe-OSu，通过HPLC监测反应。通过加入氯化铵溶液使反应淬灭。减压除去溶剂，溶于乙酸乙酯，用饱和的碳酸氢钠溶液、盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到Boc-Phe-HM-TBDMS。粗品产物经制备性HPLC纯化。

在氩气环境中，于0℃将Boc-Phe-HM-TBDMS溶于4N HCl的二氧六环溶液中，搅拌2小时。减压除去溶剂得到Phe-HM-TBDMS。

将H-Glu(OtBu)-OMe HCl于THF，然后加入N-甲基吗啉(NMM)和Boc-Glu(OtBu)-OSu，将溶液在氩气环境中于室温下搅拌18小时。减压除去溶剂，将产物溶于乙酸乙酯，用3％AcOH溶液、饱和的碳酸氢钠溶液、盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到Boc-(Glu(OtBu))₂-OMe。

于0℃将Boc-(Glu(OtBu))₂-OMe溶于THF。加入LiOH·H₂O的水溶液，搅拌3小时。反应物通过加入3％乙酸(pH 5.5)淬灭。产物用乙酸异丙基酯萃取，用盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥，减压除去溶剂得到Boc-(Glu(OtBu))₂-OH。

为了纯化产物，在加热条件下将Boc-(Glu(OtBu))₂-OH溶于乙腈。然后向溶液中加入二环己基胺(DCHA)，将其冷却至室温。过滤沉淀物，用乙腈洗涤，得到Boc-(Glu(OtBu))₂-OH DCHA。

将Boc-(Glu(OtBu))₂-OH DCHA溶于乙酸乙酯，加入5％KHSO₄溶液，于室温下搅拌20分钟。分离有机层，产物采用乙酸乙酯自水相再次萃取。合并有机萃取物，减压除去溶剂得到Boc-(Glu(OtBu))₂-OH。

在氩气环境中，将Boc-Glu(OtBu)₂-OH溶于THF，将溶液冷却至0℃。加入NHS，将溶液搅拌10分钟。然后加入二环己碳二亚胺(DCC)，将溶液温热至室温，搅拌18小时。过滤固体(DCU)，用THF洗涤，减压浓缩滤液，得到Boc-(Glu(OtBu))₂-OSu。

在氩气环境中，于10℃向H-Phe₂-OMe的THF溶液中加入N-甲基吗啉，将溶液搅拌30分钟。然后在氩气环境中，于10℃加入Boc-(Glu(OtBu))₂-OSu的THF溶液，将溶液搅拌4小时。反应物采用5％NaHCO₃溶液淬灭。产物用乙酸异丙基酯萃取，用盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥，减压除去溶剂得到Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₂-OMe。

于0℃将Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₂-OMe溶于THF。加入LiOH·H₂O的水溶液，搅拌3小时。反应物通过加入3％乙酸(pH 5.5)淬灭。产物用乙酸异丙基酯萃取，用盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥，减压除去溶剂得到Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₂-OH。

通过将Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₂-OH溶于THF并向溶液中加入NHS和DCC，进行Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₂-OH和Phe-HM-TBDMS偶合反应。将溶液于室温下搅拌18小时。过滤固体(DCU)，用THF洗涤，向滤液中加入冷却(0℃)的Phe-HM-TBDMS的THF溶液和NMM。通过HPLC分析监测反应进行，5小时后，将反应物通过加入0.5％NaHCO₃溶液淬灭。将溶液搅拌10分钟，然后向混合物中加入水。过滤沉淀物，用水洗涤并干燥，得到Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₃-HM-TBDMS。产物通过制备性HPLC纯化。

为了除去TBDMS保护基团，在氩气环境中、于室温下，将Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₃-HM-TBDMS溶于0.2M的NH₄F甲醇溶液中。当反应完成后，减压除去溶剂得到Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₃-HM。将产物在甲醇和叔丁基二甲基醚中结晶纯化。

然后在氩气环境中，于0℃将Boc-(Glu(OtBu))₂-Phe₃-HM溶于4N HCl的二氧六环溶液中，搅拌2小时。减压除去溶剂得到Glu₂-Phe₃-HM。

B.二-取代的二氢吗啡酮共轭物

第二类实施例涉及在3和6位上二取代的二氢吗啡酮共轭物。化学成分可以为例如二个载体肽类，它们在长度和构成上可以不同，或者可以是相同的。

二氢吗啡酮在3位和6位上的结合

实施例3.二氢吗啡酮在3位和6位上与氨基酸结合的通用合成方法：[Boc-X]₂-二氢吗啡酮

向二氢吗啡酮游离碱(2.04g，6.47mmol)的THF(约35ml)溶液中加入LiN(TMS)₂(19.41ml，19.41mmol)，搅拌约30分钟。向其中一次性加入固体Boc-X-OSu(X＝氨基酸，21mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。溶液采用1N HCl中和，减压除去THF，残留物用EtOAc(200ml)稀释，加入饱和的NaHCO₃(150ml)，搅拌1h。EtOAc部分用碳酸氢钠和盐水洗涤。硫酸钠干燥并蒸发至干。通过硅胶柱纯化(30％EtOAc/己烷)获得化合物。

[Boc-X]₂-二氢吗啡酮的去保护：

去保护的通用方法：于室温下，将上述化合物与4N HCl/二氧六环(25ml/gm)反应4小时。蒸发溶剂，真空干燥得到X₂-二氢吗啡酮·3HCl。

二氢吗啡酮共轭物的药物动力学数据

通过二氢吗啡酮的药物动力学研究阐明了本发明，所述二氢吗啡酮通过与各种成分(例如特殊的短链氨基酸序列，包括三肽和五肽)共价结合进行修饰。研究包括对通过口服和鼻腔内途径给药的各种药物共轭物进行的药物动力学评价。总而言之，复合物显示活性成分可以通过与各种成分共价结合而修饰并在正常剂量时保持它们的治疗效果，同时防止口服给药过量的可能性，防止通过鼻腔给药的滥用。

实施例说明将各种成分与二氢吗啡酮结合从而降低过量可能性并同时维持治疗效果的适用性。通过各种肽二氢吗啡酮共轭物的药物动力学研究说明了本发明。实施例阐明了用于降低过量和滥用的可能性并同时维持治疗价值的化合物和组合物，其中活性成分二氢吗啡酮(HM)与化学成分共价结合。

二氢吗啡酮和二氢吗啡酮共轭物的口服和鼻腔内给药的生物利用度研究在雄性Sprague-Dawley大鼠中进行。含有等量二氢吗啡酮的二氢吗啡酮盐酸盐和二氢吗啡酮共轭物的剂量在去离子水中给药。通过管饲针口服给予0.5ml剂量。采用异氟烷麻醉后，通过大鼠鼻翼鼻腔内给予20微升鼻腔内剂量。在异氟烷麻醉下，通过鼻腔蝶窦(retroorbital sinus)穿刺采集血浆，通过LC/MS/MS测定二氢吗啡酮。

实施例4.二氢吗啡酮共轭物降低口服给药的C_max

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，禁食过夜，通过口服管饲法给予羟考酮共轭物或羟考酮HCl。所有的给药剂量均含有等量的二氢吗啡酮碱。通过ELISA(102919，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆二氢吗啡酮浓度。这些实施例显示，当通过口服途径给药时，与等克分子数(二氢吗啡酮碱)剂量的二氢吗啡酮HCl相比，二氢吗啡酮共轭物降低了二氢吗啡酮的峰浓度(C_max)。

实施例5.二氢吗啡酮共轭物降低鼻腔内给药的生物利用度(AUC和C_max)

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，通过鼻翼给予含有二氢吗啡酮共轭物或二氢吗啡酮二酒石酸盐的0.02ml水。所有的给药剂量均含有等量的二氢吗啡酮碱。通过ELISA(二氢吗啡酮，102919，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆二氢吗啡酮浓度。该分析特别用于二氢吗啡酮。这些实施例显示，当通过鼻腔途径给药时，与等克分子数(二氢吗啡酮碱)剂量的二氢吗啡酮HCl相比，二氢吗啡酮共轭物降低了二氢吗啡酮的峰浓度(C_max)和总吸收(AUC)。

下表包括了二氢吗啡酮氨基酸和肽HCl盐共轭物的合成以及实验。对口服和鼻腔内给药的生物利用度进行了测定。粗体的数值为“校正值”，根据对照(HM)的生物利用度计算得到。

表A.二氢吗啡酮共轭物的口服生物利用度

 

口服	(Y2F2I)	(Y2F2I-HM-OAc)	(D2I)	(Y2I)	(E2F3)	(G2L)	(E2L)	(G2V)	(K2V)	(P2V)	(Y2V)	(Y2F2I-HM-OEt)
													AUC	74	54	46	52	128	41	51	86	78	40	53	149
％	40	29	25	32	79	22	27	53	43	24	30	71
													Cmax	39	30	36	43	60	34	42	47	54	40	47	65
％	52	40	49	66	78	43	49	63	60	55	53	77

表B.二氢吗啡酮三肽共轭物的口服生物利用度

 

口服	(E2I)	(F2I)	(G2I)	(K2I)	(P2I)	(Y2I-HM-OEt).	(E2V)	(F2V)	(P2L)	(Y2L)	(F2L)	(K2L)
													AUC	94	34	30	39	35	24	36	13	39	21	18	44
％	56	18	17	24	21	14	21	8	22	12	11	24
													Cmax	56	42	24	44	43	31	39	28	35	23	17	41
％	73	47	32	56	60	42	50	36	45	30	24	50

表C.二氢吗啡酮共轭物的鼻腔内给药生物利用度

 

鼻腔内	(Y2F2I-HM-OAc)	(Y2F2I-HM-OEt)	(Y2F2I)	(D2I)	(Y2I)	(P2L)	(Y2L)	(G2I)	(K21)	(E2F3)	(G2L)	(E2L)
													AUC	51	48	28	387	619	352	491	147	421	384	357	575
％	59	56	4	55	88	53	74	24	68	52	52	84
													Cmax	66	63	62	721	732	600	642	686	881	566	768	880
％	72	68	7	85	86	70	75	66	85	57	85	98

表D.二氢吗啡酮三肽共轭物的鼻腔内给药生物利用度

 

鼻腔内	(E2I)	(F2I)	(P2I)	(Y2I-HM-OEt)	(E2V)	(G2V)	(K2V)	(P2V)	(Y2V)	(F2L)	(K2L)	(F2V)
													AUC	517	695	535	717	211	385	560	479	492	679	648	658
％	59	79	77	103	31	51	75	71	73	92	87	98
													Cmax	875	916	888	845	629	760	931	938	686	945	949	920
％	88	92	95	90	70	73	89	101	73	96	96	103

表E.二氢吗啡酮共轭物的生物利用度

 

化合物种类	化合物	口服AUC	鼻腔内AUC	理论效能
					五肽	EEFFF-HM	79	52	27
三肽	DDI-HM	25	55	40
					三肽	EEI-HM	56	59	39
三肽	FFI-HM	18	79	37
					三肽	GGI-HM	17	24	48
三肽	KKI-HM	24	68	35
					三肽	PPI-KM	21	77	43
三肽	YYI-HM	32	88	28
					三肽	YYI-HM-OAc	29	73	34
三肽	YYI-HM-OEt	14	103	33
					五肽	YYFFI-HM	40	4	26
五肽	YYFFI-HM-OAc	nd	59	25
					五肽	YYFFI-HM-OEt	71	56	24
三肽	EEL-HM	27	84	39
					三肽	FFL-HM	11	92	37
三肽	GGL-HM	22	52	49
					三肽	KKL-HM	24	87	35
三肽	PPL-HM	22	53	43
					三肽	YYL-HM	12	74	36
三肽	EEV-HM	21	31	40
					三肽	FFV-HM	8	98	38
三肽	GGV-HM	53	51	50
					三肽	KKV-HM	43	75	36
三肽	PPV-HM	24	71	44
					三肽	YYV-HM	30	73	36

总而言之，实施例说明了本发明用于降低二氢吗啡酮过量使用可能的应用。这些实施例显示，二氢吗啡酮可以通过与化学成分的结合而进行共价修饰，该修饰能够在超过正常剂量范围时保持治疗效果，同时显著降低(如果没有消除的话)通过口服或鼻腔途径给予二氢吗啡酮的过量的可能性。

羟考酮实施例

羟考酮可以与一或多个被命名为X和Z的化学成分结合。所述化学成分可以是能够降低与化学成分结合的羟考酮药理学活性的任何成分，该降低是与未结合的(游离)羟考酮相比而言。结合的化学成分可以是天然存在的，或者是合成的。在一个实施方案中，本发明提供了式IA或IB的羟考酮前药：

O-X_n-Z_m                   (IA)

O-Z_m-X_n                   (IB)

其中O为羟考酮；

X独立为化学成分；

每一个Z独立为作为辅助成分的化学成分，与至少一个X不同；

n为1-50的增量，优选1-10；

m为0-50的增量，优选0。

当m为0时，则羟考酮前药为式(II)化合物：

O-X_n                    (II)

其中每一个X独立为化学成分。

式(II)也可以书写为与羟考酮物理结合的化学成分：

O-X₁-(X)_n-1             (III)

其中O为羟考酮；X₁为化学成分，优选为单一氨基酸；每一个X均独立为化学成分，它们与X₁可以相同或者不同；n为1-50的增量。

O为羟考酮，可以被X取代，它可以具有下列IV、V或VII结构，其中A和B代表X可能的结合位点：

在可选择的实施方案中，羟考酮的3位和/或N位可以被有或无连接基团的化学成分取代。参见美国专利号5,610,283，它公开了在这些位置取代鸦片类的方法。

对于二取代的共轭物而言，需要注意的是，上面所列出的每一个序列可以与任何其它序列共同存在形成二取代的羟考酮共轭物。另外，二取代的羟考酮共轭物可以在二个位置上采用任何一个序列进行取代而形成。

下表中列出了根据本发明制备的优选的羟考酮共轭物。指定的[肽]₂-OC是指上述结构(V)中的二取代的羟考酮共轭物。另外，指定的[肽]-OC-[肽]是指二取代的羟考酮共轭物，其中所述在OC前面的肽与羟考酮的6位相连，而OC后面的肽位于14位相连。

本发明的通过6位(对于二取代的OC共轭物，也可以通过14位)与氨基酸的C-末端结合的羟考酮(OC)共轭物的目录如下(为了清楚地说明，与-OC相邻的氨基酸为与OC相连的氨基酸)

 

β-丙氨酸-OC	[Asp-Lys-Val]2-OC	[Pro-Asp-Val]2-OC
			Glu-OC	[Asp-Phe-Val]2-OC	[Pro-Val-Val]2-OC
Ile-OC	[Asp-Pro-Val]2-OC	[Ser-Thr-Val]2-OC
			Leu-OC	[Asp-Ser-Val]2-OC	[Ser-Asp-Val]2-OC
Phe-OC	[Asp-Thr-Val]2-OC	[Ser-Glu-Val]2-OC
			β-Leu-OC	[Asp-Tyr-Val]2-OC	[Ser-Gly-Val]2-OC
Val-OC	[Asp-Val-Val]2-OC	[Ser-Ile-Val]2-OC

 

β-Ala-β-Ala-OC	[Bio-Gly2-Ile]2-OC	[Ser-Leu-Val]2-OC
			Tyr-β-Ala-OC	[Bio-Gly2-Leu]2-OC	[Ser-Lys-Val]2-OC
Asp-Asp-Ile-OC	[Gal-Gly2-Ile]2-OC	[Ser-Phe-Val]2-OC
			Asp-Asp-Val-OC	[Gal-Gly2-Leu]2-OC	[Ser-Pro-Val]2-OC
Ala-Ala-Val-OC	[Gal-Pro2-Ile]2-OC	[Ser-Tyr-Val]2-OC
			Gln-Gln-β-Ala-OC	[Gal-Pro2-Leu]2-OC	[Ser-Val-Val]2-OC
Gln-Gln-Ile-OC	[Gln-Gln-Val]2-OC
			Glu-Leu-Val-OC	[Gln-Pro-Val]2-OC
Glu-Tyr-Val-OC	[Glu-Asp-Val]2-OC	[Thr-Thr-Val]2-OC
			Glu-Glu-Ala-OC	[Glu-Glu-Cha]2-OC	[Thr-Asp·Val]2-OC
Glu-Glu-Ile-OC	[Glu-Glu-hPhe]2-OC	[Thr-Glu-Val]2-OC
			Glu-Glu-Leu-OC	[Glu-Glu-Nle]2-OC	[Thr-Gly-Val]2-OC
Glu-Glu-Phe-OC	[Glu-Glu-Phe]2-OC	[Thr-Leu-Val]2-OC
			Glu-Glu-Pro-OC	[Glu-Gly-Val]2-OC	[Thr-Lys-Val]2-OC
Glu-Glu-β-Ala-OC	[Glu-Leu-Val]2-OC	[Thr-Phe-Val]2-OC
			Glu-Glu-Val-OC	[Glu-Lys-Val]2-OC	[Thr-Pro-Val]2-OC
Glu-Tyr-Val-OC-OAc	[Glu-Phe-Val]2-OC	[Thr-Ser-Val]2-OC
			Glu-Tyr-Val-OC-OCOOEt	[Glu-Pro-Val]2-OC	[Thr-Tyr-Val]2-OC
Gly-Gly-Ile-OC	[Glu-Ser-Val]2-OC	[Thr-Val-Val]2-OC
			Gly-Gly-Leu-OC	[Glu-Thr-Val]2-OC	[Tyr-Pro-Val]2-OC
GIy-Gly-Phe-OC	[Glu-Tyr-Val]2-OC	[Tyr-Tyr-Cha]2-OC
			Gly-Gly-β-Ala-OC	[Glu-Val-Val]2-OC	[Tyr-Tyr-hPhe]2-OC
Gly-Gly-Val-OC	[Gly-Gly-Cha]2-OC	[Tyr-Tyr-Nle]2-OC
			Ile-Ile-Ile-OC	[Gly-Gly-hPhe]2-OC	[Tyr-Tyr-Phe]2-OC
Ile-Tyr-Val-OC	[Gly-Gly-Nle]2-OC	[Tyr-Asp-Val]2-OC
			Ile-Tyr-Val-OC-OAc	[Gly-Gly-Phe]2-OC	[Tyr-Glu-Val]2-OC
Ile-Tyr-Val-OC-OCOOEt	[Gly-Gly-Val]2-OC	[Tyr-Gly-Val]2-OC
			Leu-Leu-Ala-OC	[Gly-Leu-Val]2-OC	[Tyr-Ile-Val]2-OC
Leu-Leu-Ile-OC	[Gly-Asp-Val]2-OC	[Tyr-Leu-Val]2-OC
			Leu-Leu-Leu-OC	[Gly-Glu-Val]2-OC	[Tyr-Lys-Val]2-OC
Leu-Leu-Val-OC	[Gly-Lys-Val]2-OC	[Tyr-Phe-Val]2-OC
			Leu-Leu-β-Ala-OC	[Gly-Phe-Val]2-OC	[Tyr-Ser-Val]2-OC
Leu-Tyr-Val-OC	[Gly-Pro-Val]2-OC	[Tyr-Thr-Val]2-OC
			Lys-Lys-Ala-OC	[Gly-Ser-Val]2-OC	[Tyr-Tyr-Val]2-OC
Lys-Lys-Ile-OC	[Gly-Thr-Val]2-OC	[Tyr-Val-Val]2-OC
			Lys-Lys-Leu-OC	[Gly-Tyr-Val]2-OC	[Val-Glu-Val]2-OC
		[Val-Gln-Val]2-OC
			Lys-Lys-Phe-OC	[Gly-Val-Val]2-OC	[Val-Asp-Val]2-OC
Lys-Lys-Val-OC	[Ile-Tyr-Val]2-OC	[Val-Glu-Val]2-OC
			Lys-Lys-β-Ala-OC	[Ile-Asp-Val]2-OC	[Val-Gly-Val]2-OC
Lys-Tyr-Val-OC-OAc	[Ile-Glu-Val]2-OC	[Val-Phe-Val]2-OC
			Lys-Tyr-Val-OC-OCOOEt	[Ile-Gly-Val]2-OC	[Val-Pro-Val]2-OC
Phe-Phe-Leu-OC	[Ile-Phe-Val]2-OC	[Val-Thr-Val]2-OC
			Phe-Phe-Ile-OC	[Ile-Ser-Val]2-OC	[Val-Tyr-Val]2-OC
Phe-Phe-Val-OC	[Ile-Thr-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Val

 

Phe-Tyr-Val-OC	[Leu-Gly-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Gly-Glu
			Pro2-Ile-OC	[Leu-Lys-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Pro-Tyr
Pro2-Leu-OC	[Leu-Phe-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Asp
			Pro-Glu-Val-OC	[Leu-Pro-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Glu
Pro-Pro-Ala-OC	[Leu-Thr-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Gly
			Pro-Pro-Ile-OC	[Leu-Tyr-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Lys
Pro-Pro-Leu-OC	[Lys-Lys-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Pro
			Pro-Pro-Val-OC	[Lys-Ser-Val]2-OC	Leu-Tyr-Val-OC-Gly-Tyr-Leu
Pro-Tyr-Val-OC	[Lys-Asp-Val]2-OC	Leu-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Gly
			Ser-Ser-Ser-OC	[Lys-Glu-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Leu
Thr-Thr-Thr-OC	[Lys-Gly-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Gly-Tyr-Ile
			Thr-Thr-Val-OC	[Lys-Ile-Val]2-OC	Ile-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Gly
琥珀酸盐-OC	[Lys-Leu-Val]2-OC	Leu-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Leu
			Tyr-Tyr-Ala-OC	[Lys-Phe-Val]2-OC	Leu-Tyr-Val-OC-Val-Pro-Tyr
Tyr-Tyr-Ile-OC	[Lys-Pro-Val]2-OC	Leu-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Gly
			Tyr-Tyr-Leu-OC	[Lys-Thr-Val]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Val
Tyr-Tyr-Phe-OC	[Lys-Tyr-Val]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Gly-Glu
			Tyr-Tyr-Pro-OC	[Lys-Val-Val]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Asp
Tyr-Tyr-β-Ala-OC	[Nia-Gly2-Ile]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Glu
			Tyr-Tyr-Val-OC	[Nia-Gly2-Ile]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Ile
Val-Val-Leu-OC	[Nia-Gly2-Leu]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Leu
			Val-Val-Phe-OC	[Nia-Gly2-Leu]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Lys
Val-Val-Val-OC	[Phe-Phe-Cha]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Phe
			Lys-Tyr-Val-Ile-OC[SEQ IDNO：X]	[Phe-Phe-hPhe]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Pro
Tyr-Pro-Val-lle-OC[SEQ IDNO：X]	[Phe-Phe-Nle]2-OC	Lys-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Val
			Glu-Glu-Phe-Phe-Ile-OC[SEQ ID NO：X]	[Phe-Phe-Phe]2-OC	Phe-Tyr-Val-OC-Val-Glu-Gly
Glu-Glu-Phe-Phe-Phe-OC[SEQ ID NO：X]	[Phe-Phe-Val]2-OC	Phe-Tyr-Val-OC-Val-Gly-Glu
			Phe-Phe-Lys-Phe-Phe-OC[SEQ ID NO：X]	[Phe-Val-Val]2-OC	Phe-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Asp
Tyr-Tyr-Lys-Tyr-Tyr-OC[SEQ ID NO：X]	[Phe-Asp-Val]2-OC	Phe-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Glu
			Tyr-Tyr-Phe-Phe-Ile-OC[SEQID NO：X]	[Phe-Glu-Val]2-OC	Pro-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Glu
Tyr-Tyr-Phe-Phe-Val-OC[SEQ ID NO：X]	[Phe-Gly-Val]2-OC	Pro-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Ile
			[Boc-Cha]2-OC	[Phe-Ile-Val]2-OC	Pro-Tyr-Val-OC-Val-Tyr-Leu
[Boc-Dpg]2-OC	[Phe-Leu-Val]2-OC	Tyr-Pro-Val-OC-Val-Tyr-Glu
			[Boc-hPhe]2-OC	[Phe-Lys-Val]2-OC	Tyr-Pro-Val-OC-Val-Tyr-Ile
[Boc-Nle]2-OC	[Phe-Pro-Val]2-OC	Tyr-Pro-Val-OC-Val-Tyr-Leu
			[Boc-Tle]2-OC	[Phe-Ser-Val]2-OC	[Lys-Lys-Gly-Gly]2-OC[SEQ ID

 

		NO：X]
			[Boc-Val]2-OC	[Phe-Thr-Val]2-OC	[Asp2-Lys(Asp2)]2-OC[SEQ IDNO：X]
[Glu]2-OC	[Phe-Tyr-Val]2-OC	[Glu2-Lys(Glu2)]2-OC[SEQ IDNO：X]
			[Ile]2-OC	[Pro-Pro-Cha]2-OC	[Gly2-Lys(-Gly2)]2-OC[SEQ IDNO：X]
[Leu]2-OC	[Pro-Pro-Ile]2-OC	[Phe2-Lys(Phe2)]2-OC[SEQ IDNO：X]
			[Lys]2-OC	[Pro-Pro-Nle]2-OC	[Pro2-Lys(Pro2)]2-OC[SEQ IDNO：X]
[Phe]2-OC	[Pro-Pro-Phe]2-OC	[Tyr2-Lys(Tyr2)]2-OC[SEQ IDNO：X]
			[β-Ala]2-OC	[Leu-Asp-Val]2-OC
[Val]2-OC	[Leu-Glu-Val]2-OC
			Val-OC-Gly	[Pro-Pro-Leu]2-OC
[Asp-Asp-Cha]2-OC	[Pro-Glu-Val]2-OC
			[Asp-Asp-Nle]2-OC	[Pro-Gly-Val]2-OC
[Asp-Asp-Phe]2-OC	[Pro-Ile-Val]2-OC
			[Asp-Asp-Val]2-OC	[Pro-Lys-Val]2-OC
[Asp-d-Asp-Ile]2-OC	[Pro-Phe-Val]2-OC
			[Asp-Glu-Val]2-OC	[Pro-Ser-Val]2-OC
[Asp-Gly-Val]2-OC	[Pro-Thr-Val]2-OC
			[Asp-Ile-Val]2-OC	[Pro-Tyr-Val]2-OC
[Asp-Leu-Val]2-OC	[Pro-Pro-Val]2-OC

羟考酮共轭物也包括上述共轭物(在单-共轭物的情况下)的OAc和OEt衍生物。

通过下面所述的通用方法合成肽共轭物。

羟考酮衍生物的通用结构：

X＝Val；Ile；Pro；Phe；Leu；Ala；β-Ala

Y-Z＝Gly-Gly；Glu-Glu；Tyr-Tyr；Pro-Pro；Asp-Asp；Lys-Lys；Ala-Ala；Phe-Phe；Val-Val

羟考酮衍生物的合成流程：

采用上述通用合成流程得到表3中所示的与羟考酮结合的下列优选的氨基酸序列和生物利用度。

羟考酮化合物的具有代表性的生物利用度

 

编号	羟考酮化合物	口服(％AUC)
				OXY	100
			1	Gly-Gly-Val-OC	123
2	Ala-Ala-Val-OC	85
			3	Glu-Glu-Val-OC	55
4	Lys-Lys-Val-OC	108
			5	Leu-Leu-Val-OC	81
6	Tyr-Tyr-Val-OC	124
			7	Pro-Pro-Val-OC	152
8	Phe-Phe-Val-OC	32
			9	Asp-Asp-Val-OC	40
10	Val-Val-Val-OC
			*11	Gly-Gly-Ile-OC	224
12	Glu-Glu-Ile-OC	179
			13	Lys-Lys-Ile-OC	74
14	Tyr-Tyr-Ile-OC	85
			15	Ile-Ile-Ile-OC	83
16	Pro-Pro-Ile-OC	85
			17	Phe-Phe-Ile-OC	59
18	Glu-Glu-Pro-OC	71
			19	Tyr-Tyr-Pro-OC	59
20	Gly-Gly-Phe-OC	163
			21	Glu-Glu-Phe-OC	49
22	Lys-Lys-Phe-OC	37
			23	Val-Val-Phe-OC	120
24	Tyr-Tyr-Phe-OC	73
			25	Gly-Gly-Leu-OC
26	Glu-Glu-Leu-OC	80
			27	Val-Val-Leu-OC
28	Lys-Lys-Leu-OC	46
			29	Leu-Leu-Leu-OC
30	Tyr-Tyr-Leu-OC
			31	Pro-Pro-Leu-OC
32	Phe-Phe-Leu-OC
			33	Glu-Glu-Ala-OC
34	Leu-Leu-Ala-OC
			35	Lys-Lys-Ala-OC
36	Pro-Pro-Ala-OC
			37	Tyr-Tyr-Ala-OC
38	Gly-Gly-β-Ala-OC
			39	Glu-Glu-β-Ala-OC

 

40	Leu-Leu-β-Ala-OC
			41	Lys-Lys-β-Ala-OC
42	Tyr-Tyr-β-Ala-OC
			43	OC-琥珀酸盐	79
44	OC-β-丙氨酸	144

(^＊)给药剂量较计算值高40％

每一个实验采用n＝4只动物进行

通过LC-MS分析

通过合成和测试单一氨基酸共轭物，然后每次增加一个氨基酸或者通过与肽的结合，使得肽延伸得到二肽和三肽共轭物等，这种可重复的方法可以用于鉴别令人满意的共轭物。备选的母体单一氨基酸前药可以较其备选的后代二肽或三肽产物具有更需要或不需要的特性。

I.单-取代的羟考酮共轭物

单一氨基酸

实施例1.在6位上取代的Phe-羟考酮

向羟考酮游离碱(1.0q)的四氢呋喃(THF)(10ml/mmol)溶液中加入叔丁醇钾(K-O-t-butoxide)(1.1eq)或LiN(TMS)₂(1.1eq)。5分钟后，加入Boc-Phe-OSu(1.1eq)。将反应物于室温下搅拌18小时，用氯化铵淬灭，EtOAc萃取，除去溶剂。粗品保护产物采用色谱纯化。采用4N HCl的二氧六环(20ml/mmol)溶液去保护，获得Phe-羟考酮。下列共轭物可以根据上述方法制备：

实例：β-Leu-OC

三肽

实施例2：单-取代的三肽羟考酮共轭物Boc-Z-Y-X-O⁶-羟考酮的通用合成方法

向X-O⁶-羟考酮-2HCl(1mmol)的DMF溶液中加入NMM(10mmol)和Boc-Z-Y-OSu(1.2mmol)。将反应混合物于室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，向残留物中加入饱和的碳酸氢钠溶液并搅拌1h。过滤沉淀物，用水充分洗涤并干燥得到目标化合物。

Boc-Z-Y-X-O⁶-羟考酮的去保护：

根据上述通用方法进行去保护，获得Z-Y-X-O⁶-羟考酮·2HCl。

根据上述方法可以制备下列三肽共轭物：

实例：Phe-Tyr-Val-OC

      Leu-Tyr-Val-OC

II.二取代的羟考酮共轭物

二取代的单一氨基酸羟考酮共轭物

实施例3：含有相同氨基酸的二取代的羟考酮共轭物的通用合成方法：[Boc-X]₂-羟考酮

向羟考酮游离碱(2.04g，6.47mmol)的THF(约35ml)溶液中加入LiN(TMS)₂(19.41ml，19.41mmol)，搅拌约30分钟。向其中一次性加入固体Boc-X-OSu(X＝氨基酸，21mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。溶液采用1N HCl中和，减压除去THF。残留物用EtOAc(200ml)稀释，加入饱和的NaHCO₃(150ml)，搅拌1小时。EtOAc部分采用碳酸氢钠和盐水洗涤。硫酸钠干燥并蒸发至干。经过硅胶柱(30％EtOAc/己烷)纯化后获得化合物。

[Boc-X]₂-羟考酮的去保护：

去保护的通用方法：将上述化合物与4N HCl/二氧六环(25ml/gm)于室温下反应4小时。蒸发溶剂并真空干燥，得到X₂-羟考酮·3HCl。

实施例4：含有不同氨基酸的二取代的羟考酮共轭物的通用合成方法：Boc-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz：

于0℃，向Boc-X-羟考酮(1mmol)的THF(10ml)溶液中加入LiN(TMS)₂(1.1mmol)，将该溶液搅拌30分钟，然后加入Cbz-Y-OSu(1.25mmol)。将反应混合物于室温下搅拌过夜。将溶液冷却至0℃，用1N HCl中和，蒸发有机部分。向残留物中加入EtOAc(50ml)和饱和的NaHCO₃(50ml)，搅拌1小时。有机部分采用水、盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经硅胶纯化得到目标化合物。

Boc-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz·2HCl的去保护：

根据上述去保护的通用方法将Boc-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz脱保护，获得X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz·2HCl。

二取代的三肽羟考酮共轭物

实施例5.含有均具有相同氨基酸序列的两个三肽的三肽-OC-三肽共轭物的合成：

[Boc-Val]₂-OC的合成

向OC(2.04g，6.47mmol)的四氢呋喃(THF)(约35ml)溶液中加入LiN(TMS)₂(19.41ml，19.41mmol)，搅拌约30分钟。向其中一次性加入固体Boc-Val-OSu(6.72g，21mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。溶液采用1N HCl中和，减压除去THF。残留物采用乙酸乙酯(EtOAc)(200ml)稀释，加入饱和的NaHCO₃(150ml)，搅拌1小时。EtOAc部分采用碳酸氢钠和盐水洗涤。硫酸钠干燥并蒸发至干。粗品产物经硅胶柱(30％EtOAc/己烷)纯化。

去保护反应：采用75-80ml的4N HCl/二氧六环将2.5g的[BoC-Val]₂-OC去保护。反应在3-4小时完成。蒸发二氧六环并真空干燥。

偶合反应：向Val₂-OC·3HCl(250mg，0.4mmol)的DMF(10-12ml)溶液中加入NMM(10-12eqv)和Boc-X-Y-OSu(2.6eqv)。将反应混合物于室温下搅拌过夜。减压除去溶剂。向残留物中加入饱和的NaHCO₃(约30ml)并搅拌1小时。过滤白色/浅黄色残留物，用水充分洗涤，于室温下真空箱中干燥。

去保护：根据上述相同方法去保护。采用10-15ml的4N HCl/二氧六环将100-200mg的三肽衍生物去保护。

含有苏氨酸和丝氨酸的三肽衍生物的去保护：

将三肽衍生物溶于95％TFA(5％水)，于室温下搅拌4小时。蒸发溶剂，残留物与甲苯共同蒸发二次，真空干燥。加入4N HCl/二氧六环并搅拌过夜。将产物蒸发至干并真空干燥。

实施例6.含有每一个均具有不同氨基酸序列的两个三肽的三肽-OC-三肽共轭物的合成：

[Boc-Z-Y-X]₂羟考酮[X、Y和Z为氨基酸]的合成

向X₂-羟考酮3HCl(1mmol)的DMF(15-20ml)溶液中加入NMM(10-12eqv)和Boc-Z-Y-OSu(2.6eqv)。将反应混合物于室温下搅拌过夜。减压蒸发溶剂。向残留物中加入饱和的碳酸氢钠(～30ml)并搅拌1-2小时。过滤白色/浅黄色残留物，用水充分洗涤，于室温下真空箱中干燥。

[Boc-X-Y-Z]₂-羟考酮的去保护：

根据上述通用方法进行去保护。采用10-15ml的4N HCl/二氧六环将100-200mg三肽衍生物去保护。将去保护反应过夜进行后获得[X-Y-Z]₂-羟考酮·3HCl。

含有苏氨酸和丝氨酸的三肽衍生物的去保护：

先将三肽衍生物溶于95％TFA(5％水)中，于室温下搅拌4小时。蒸发溶剂，残留物与甲苯共同蒸发二次，真空干燥。加入4N HCl/二氧六环并搅拌过夜。将残留物蒸发至干并真空干燥。

Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-B-A-Boc(A、B、X、Y＝氨基酸)的合成：

向X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y·3HCl(1mmol)和NMM(10mmol)的DMF(10ml)溶液中加入Boc-A-B-OSu(2.5mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。减压蒸发溶剂，向残留物中加入饱和的NaHCO₃(15mL)并搅拌1小时。过滤沉淀物，残留物用水充分洗涤并干燥。

Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-B-A-Boc的去保护：

根据上述通用方法进行去保护。将去保护反应过夜进行后获得A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-B-A·3HCl。

Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-C-D-Boc(A、B、C、D、X、Y＝氨基酸)的合成：

向Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-NH₂(1mmol)的DMF(10ml)溶液中加入NMM(5mmol)和Boc-D-C-OSu(1.1mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。减压蒸发溶剂，向残留物中加入饱和的NaHCO₃并搅拌1小时。过滤白色沉淀物，用水洗涤并干燥。

Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-C-D-Boc的去保护：

根据上述通用方法进行去保护。将去保护反应过夜进行后获得A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-C-D·3HCl。

二取代的三肽-羟考酮-单一氨基酸共轭物

实施例7.含有具有不同氨基酸序列的三肽的三肽-OC-单一氨基酸共轭物的合成

Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz的合成：

向X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz·2HCl(1mmol)和NMM(10mmol)的DMF(10ml)的溶液中加入Boc-A-B-OSu(1.1mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。减压蒸发溶剂，向残留物中加入饱和的NaHCO₃(20ml)，剧烈搅拌2-3h。过滤沉淀物，残留物用水充分洗涤并干燥。

Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-NH₂的合成：

将Boc-A-B-X-O⁶-羟考酮-O¹⁴-Y-Cbz和Pd/C(25Wt％)的EtOH(20ml/gm)和环己烯(10ml/g)溶液于回流下加热30分钟。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液蒸发至干得到目标化合物。

二取代的五肽羟考酮共轭物

实施例8.含有每一个均具有不同氨基酸序列的两个五肽的五肽-OC-五肽共轭物的合成

[Gly₂-Lys(-Gly₂)[SEQ ID NO：36]]₂-羟考酮

向(Gly)₂-羟考酮(1.0eq)的二甲基甲酰胺(1ml/mmol)溶液中加入4-甲基吗啉(5.5eq)，随后加入Boc-Gly₂-Lys-Gly-OSu[SEQ ID NO：37](4.1)。将反应物于室温下搅拌24小时。除去溶剂，粗品产物经反相HPLC纯化，随后采用HCI去保护，获得目标化合物。

[(l)-Lys-(d)-Lys-Leu]₂-羟考酮

向(Leu)₂-羟考酮(1.0eq)的二甲基甲酰胺(1ml/mmol)溶液中加入4-甲基吗啉(10eq)，随后加入Boc-(l)-Lys(Boc)-(d)-Lys(Boc)-OSu(3eq)。将反应物于室温下搅拌24小时。除去溶剂，粗品产物经反相HPLC纯化。

羟考酮共轭物的生物利用度研究

通过羟考酮的药物动力学研究阐明本发明，上述羟考酮与各种成分结合进行共价修饰，上述成分为例如单个氨基酸(特别是短链氨基酸序列，例如二肽、三肽和五肽)或者为碳水化合物(例如核糖等)。研究包括通过口服、鼻腔和静脉内途径给药的各种药物共轭物的药物动力学评价。总而言之，化合物显示活性成分可以通过与各种成分共价结合而修饰并在正常剂量时保持它们的治疗效果，同时防止口服给药过量的可能性，防止通过鼻腔和静脉内给药的滥用的可能性。

实施例说明将各种成分与羟考酮结合从而降低过量可能性并同时维持治疗效果的应用。通过各种肽鸦片共轭物的药物动力学研究说明了本发明。实施例阐明了用于降低过量和滥用的可能性并同时维持治疗价值的化合物和组合物，其中活性成分羟考酮(OC)与化学成分共价结合。在羟考酮的6位和14位被二取代的化合物称为[PPL]₂-OC。

羟考酮和羟考酮共轭物的口服、鼻腔和静脉内给药的生物利用度研究在雄性Sprague-Dawley大鼠中进行。含有等量羟考酮的羟考酮盐酸盐和羟考酮共轭物的剂量在去离子水中给药。通过管饲针给予0.5ml口服剂量。采用异氟烷麻醉后，通过大鼠鼻翼给予20微升鼻腔内剂量。通过尾静脉注射静脉给药0.1ml。在异氟烷麻醉下，通过鼻腔蝶窦(retroorbital sinus)穿刺采集血浆，通过LC/MS/MS测定羟考酮和羟吗啡酮(主要活性代谢产物)的浓度。

实施例9.羟考酮共轭物降低口服给药的C_max

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，禁食过夜，通过口服管饲法给予羟考酮共轭物或羟考酮HCl。所有的给药剂量均含有等量的羟考酮碱。通过ELISA(羟吗啡酮，102919，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆羟考酮浓度。该分析特别用于羟吗啡酮(羟考酮的主要代谢产物)和羟考酮。这些实施例显示，当通过口服途径给药时，与等克分子数(羟考酮碱)剂量的羟考酮HCl相比，羟考酮共轭物降低了羟考酮以及羟吗啡酮的峰浓度(C_max)。

实施例10.肽-羟考酮共轭物在接近人类治疗剂量的剂量(2.5mg/kg)时的口服生物利用度

该实施例显示，当肽PPL与活性成分羟考酮共轭(在6和14位上二取代)后，当给药剂量为1mg/kg时，口服生物利用度与等克分子数的羟考酮相同。根据Chou等的报道，该剂量等于体重为70kg(148lbs)的25-35mg的人类剂量。

表F.羟考酮与[PPL]₂-OC(2.5mg/kg剂量)的口服药物动力学比较

羟考酮加上羟吗啡酮

实施例11.鼻腔途径给药的[PPL]₂-羟考酮的生物利用度

该实施例显示，当[PPL]₂与活性成分羟考酮共轭时，通过鼻腔途径给药的生物利用度显著降低，因而降低了过量使用的可能。

实施例12.静脉途径给药的[PPL]₂-羟考酮的生物利用度

该实施例显示，当[PPL]₂与活性成分羟考酮共轭时，通过静脉途径给药的生物利用度显著降低，因而降低了过量使用的可能。

羟考酮共轭物对抗滥用的体内实验概述

羟考酮共轭物的体内实验证明：例如，口服C_max降低、鼻腔给药生物利用度(AUC和C_max)降低，静脉给药生物利用度(AUC和C_max)降低，这些均进一步描述于下。

实施例13.羟考酮共轭物降低鼻腔给药生物利用度(AUC和C_max)

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，通过鼻翼给予含有羟考酮共轭物或羟考酮二酒石酸盐的0.02ml水的剂量。所有的给药剂量均含有等量的羟考酮碱。通过ELISA(羟吗啡酮，102919，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆羟考酮浓度。该分析特别用于羟吗啡酮(羟考酮的主要代谢产物)和羟考酮。这些实施例显示，当通过鼻腔途径给药时，与等克分子数(羟考酮碱)剂量的羟考酮HCl相比，羟考酮共轭物降低了羟考酮以及羟吗啡酮的峰浓度(C_max)和总吸收(AUC)。

实施例14.羟考酮共轭物降低静脉给药生物利用度(AUC和C_max)

使雄性Sprague-Dawley大鼠随意饮水，通过尾静脉注射给予含有羟考酮共轭物或羟考酮HCl的0.1ml水。所有的给药剂量均含有等量的羟考酮碱。通过ELISA(羟吗啡酮，102919，Neogen，Corporation，Lexington，KY)和/或LC/MS测定血浆羟考酮浓度。该分析特别用于羟吗啡酮(羟考酮的主要代谢产物)和羟考酮。该实施例显示，当通过静脉途径给药时，与等克分子数(羟考酮碱)剂量的羟考酮HCl相比，羟考酮共轭物的给药降低了羟考酮以及羟吗啡酮的峰浓度(C_max)和总吸收(AUC)。

表G-I提供了某些具有代表性的化合物的其它生物利用度数据

表G

羟考酮化合物(种类/口服生物利用度)

表H

羟考酮化合物鼻腔给药的生物利用度

表I

羟考酮化合物静脉给药的生物利用度

所有化合物的上述实施例说明了用于降低麻醉镇痛剂过量使用的可能性的本发明的应用。这些实施例显示，活性成分可以通过与化学成分结合而共价修饰，它可以在超过正常剂量时保持治疗效果，同时显著降低(如果没有消除的话)活性成分通过口服、鼻腔或静脉内途径给药时过量使用的可能性。

纳曲酮实施例

实施例1.纳曲酮-CDI加合物与Ser_n的反应

将得自步骤1的固体溶于无水N-甲基吡咯烷酮(NMP)中，向溶液中加入固体Ser_n(0.51g，5.9mmol)。然后将反应混合物在氩气环境中于60℃加热，并在氩气环境下于50-60℃搅拌过夜。然后将有机溶液用100mL水稀释。立即形成沉淀，离心收集固体(A)，然后将沉淀物在真空箱中干燥过夜。通过旋转蒸发除去上层中的水，剩余的NMP溶液采用乙醚(100ml)稀释。再次立即形成沉淀。过滤收集固体(B)，然后在真空箱中干燥过夜。两种固体均具有吸湿性，薄层色谱(3:1 CHCl₃/CH₃OH)显示它们的组成相似。因此，合并固体A和B，将其溶解/悬浮于～50mL水中。采用超滤(1000mw截留值)除去杂质，例如未反应的纳曲酮和咪唑，留下Ser_n和纳曲酮的共轭物，Ser_n-m[Ser(Nal)]_m。悬浮物采用5份水洗涤(每次10ml)，然后将其离心沉淀。将聚合的共轭物在真空箱中干燥过夜。获得80mg产物(～5％收率)，估计含有1:19的纳曲酮/丝氨酸(根据¹H-NMR测定的结果)。

¹H NMR(360MHz，DMSO-d₆)：δ 5.03(bs，～19H，α-Ser)；0.59(bs，2H，纳曲酮-环丙基)和0.34(bs，2H，纳曲酮-环丙基)。

实施例2.聚丝氨酸-纳曲酮

纳曲酮(鸦片拮抗剂)被选用为测试共轭物的典型化合物，前提是鸦片药物的共轭物能够提供延缓释放，同时也能够降低滥用的可能性。纳曲酮与可口服传递的镇痛剂例如羟考酮和二氢吗啡酮在化学行为上是相似的，因此可以作为合成的共轭物用于测试体外和体内性能。

合成

聚丝氨酸-纳曲酮(碳酸盐/酯-连接)共轭物根据下列方法合成

1)聚合物的活化。将N-乙酰基化的聚丝氨酸-甲酯(0.69g，7.9mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(15ml)，在氩气环境中于室温下搅拌。加入羰基二咪唑(CDI，1.93g，11.9mmol)，将反应物在氩气环境中搅拌过夜。然后加入100ml乙腈，将混合物于0℃搅拌2小时。离心收集形成的沉淀，然后将得到的沉淀悬浮于乙腈中。再次将悬浮液离心，将沉淀真空干燥过夜。

2)纳曲酮的四丁基铵盐。将纳曲酮盐酸盐(1.5g，3.979mmol)溶于水(～50ml)，将溶液采用1N LiOH滴定至pH为11-12。随后加入四丁基氯化铵(2.6g，4.0mmol)。然后水溶液用3份等体积的氯仿萃取(每次20ml)。收集有机溶液，硫酸镁干燥。然后用旋转蒸发仪除去溶剂，将得到的固体在真空箱中干燥过夜。

3)共轭反应。将得自步骤1的固体溶于/悬浮于15ml N-甲基吡咯烷酮中，将得到的溶液置于氩气环境中。然后加入得自步骤2的纳曲酮盐，随后将反应物温热至约50-60℃。将反应物在这些条件下搅拌2天，此时加入水(约200ml)。然后将水溶液通过超滤浓缩(1000mw截留值)。将浓缩的溶液(～5ml)用水稀释至体积为50ml。然后将水溶液用1N HCl滴定至pH为3，再次超滤浓缩。该过程重复两次以上。最后浓缩后，采用旋转蒸发仪和高真空除去水溶液(～5ml)中的溶剂。得到50mg棕色固体。通过核磁共振测定丝氨酸:纳曲酮的比例约为1:6(BB272)和1:10(BB301)。合成反应流程如图1所示。

实施例3.Boc-Ser(CO-甲基纳曲酮)-OtBu

于-78℃，向甲基纳曲酮(1.00g，2.82mmol)的THF溶液中通过注射器滴加LiN(SiMe₃)₂(1.0M的THF溶液，5.92mmol)。将溶液于-78℃搅拌1小时。在另一个单独的反应中，将Boc-Ser-OtBu(0.220g，0.84mmol)溶于THF(5ml)中，加入NMM(0.10ml，0.92mmol)和三光气(0.250g，0.84mmol)。将溶液于-78℃搅拌30分钟。于-78℃，将第一个反应的反应物缓慢加至第二个反应物中。将合并的反应物温热至室温，搅拌18小时。此时，加入水(10ml)。除去溶剂，将残留物在CHCl₃/水之间分配(每次50ml)，采用CHCl₃萃取2次(50ml)。合并的有机部分用盐水(50ml)、pH8的水(50ml)洗涤，硫酸镁干燥并除去溶剂。采用制备性薄层色谱处理(100％CHCl₃)。薄层色谱组分的NMR显示产物的存在。

该实施例的结果显示纳曲酮通过碳酸盐/酯连接基团与丝氨酸聚合物的共轭可以防止药物的尖峰(降低C_max)并提供了缓释(增加T_max，同时保持几乎相等的AUC)。

Claims (33)

1.口服给药于患者的组合物，该组合物含有镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和足以防止共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂的欣快效应的一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，其中当该组合物口服给药时，所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂被释放出来，而共价结合的鸦片拮抗剂不会被释放，但是如果该组合物被违法的药剂师使用时，则该共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂不会被释放。

2.口服给药于患者的组合物，该组合物含有镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和足以防止共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂的欣快效应的一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，其中当该组合物口服给药时，所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂被释放出来，而共价结合的鸦片拮抗剂不会被释放，但是如果该组合物被违法的药剂师使用时，则该鸦片拮抗剂和共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂均被释放。

3.口服给药于患者的组合物，该组合物含有镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，所述一定量能够有效地提高共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂的镇痛效果并减轻共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用，其中当该组合物口服给药时，所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片拮抗剂均被释放，但是当该组合物被违法的药剂师使用时，则鸦片拮抗剂和共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂均不会被释放。

4.口服给药于患者的组合物，该组合物含有镇痛量或亚镇痛量的共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，所述一定量能够有效地提高共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂的镇痛效果并减轻共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂的抗痛觉丧失、痛觉过敏、兴奋过度、身体依赖和/或耐药作用，其中当该组合物口服给药时，所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片拮抗剂均被释放，但是当该组合物被违法的药剂师使用时，则鸦片拮抗剂被释放，但是共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂不会被释放。

5.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述鸦片拮抗剂为纳曲酮、纳络酮或纳美芬。

6.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述鸦片拮抗剂为纳曲酮。

7.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述鸦片拮抗剂为纳美芬。

8.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物包括管制药物，其中所述管制药物为阿芬太尼、烯丙罗定、阿法罗定、阿尼利定、巴比妥酸盐类、苯并二氮杂

类、苄吗啡、贝齐米特、丁丙诺啡、布托啡诺、氯尼他秦、可待因、去氧吗啡、右旋吗酰胺、地佐辛、地恩丙胺、二醋吗啡、二氢可待因、二氢吗啡、地美沙多、美沙醇、二甲噻丁、吗苯丁酯、地匹哌酮、依地佐辛、依索庚嗪、乙甲噻丁、乙基吗啡、依托尼秦、埃托啡、二氢埃托啡、芬太尼、氢可酮、二氢吗啡酮、氢吗啡酮、羟哌替定、异美沙酮、凯托米酮、左啡诺、左芬啡烷、洛芬太尼、哌替啶、甲丙氨酯、美普他酚、美他佐辛、美沙酮、甲氢吗啡酮、美托酮、哌醋甲酯、吗啡、麦罗啡、那碎因、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲美沙酮、烯丙吗啡、纳布啡、去甲吗啡、诺匹哌酮、鸦片、羟考酮、羟吗啡酮、阿片全碱、复方樟脑酊、匹莫林、喷他佐辛、苯吗庚酮、苯二甲吗啉、苯甲曲秦、非诺吗烷、非那佐辛、苯哌利定、匹米诺定、哌腈米特、propheptazine、二甲哌替啶、丙哌利定、丙氧芬、环已丙胺、舒芬太尼、舒芬太尼、替利定、曲马多、其药学上可接受的盐或其混合物。

9.权利要求1-4中任一项的共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂，其中共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂为与化学成分共价结合的吗啡、可待因、芬太尼类似物、喷他佐辛、丁丙诺啡或美沙酮。

10.权利要求1-4中任一项的共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂，其中共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂为与化学成分共价结合的脑啡肽、强啡肽、内啡肽或具有相似作用的鸦片生物碱或鸦片肽。

11.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述鸦片激动剂为羟考酮、氢可酮、二氢吗啡酮、羟吗啡酮、可待因、吗啡、布托啡诺、二氢可待因、二氢吗啡、乙基吗啡或甲基二氢吗啡。

12.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片是与单个氨基酸共价结合的。

13.权利要求12的组合物，其中所述单个氨基酸为丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、苯基丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或α-氨基异丁酸。

14.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片是与二肽共价结合的。

15.权利要求13的组合物，其中所述二肽为丙氨酸-脯氨酸、焦谷氨酸-谷氨酸或谷氨酸-谷氨酸。

16.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片是与三肽共价结合的。

17.权利要求16的组合物，其中所述三肽为Gly-Gly-Leu、Gly-Gly-Glu、Gly-Gly-Ile、Gly-Gly-Phe、Gly-Gly-α-氨基异丁酸、Gly-Leu-Ile、Gly-Phe-Ile、Gly-Leu-Leu、Gly-Phe-Leu、Leu-Pro-Glu、Leu-Pro-Leu、Leu-Pro-Phe、Pro-Pro-Glu、Pro-Pro-Leu、Pro-Pro-Ile、Pro-Pro-Phe、Glu-Glu-Glu、Leu-Leu-Glu、Leu-Leu-Leu、Glu-Pro-Val、Glu-Tyr-Val或Ile-Tyr-Val。

18.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片是与四肽、六肽或七肽共价结合的。

19.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片是与八肽共价结合的。

20.权利要求19的组合物，其中所述八肽为Glu₅、Gly₄-Leu、Gly₄-Ile、Gly₄-Aib、Gly₄-Phe、Gly₂-Glu₃、Glu₂-Gly₂-Aib、Glu₂-Gly₂-Leu、Glu₂-Gly₂-He或Tyr-Tyr-Phe-Phe-Ile。

21.权利要求1-4中任一项的组合物，其中所述共价结合的化合物或共价结合的具有双重作用的鸦片激动剂和共价结合的鸦片是与选自下列的单个氨基酸或肽共价结合的：Lys、Ser、Ala、Phe、Ile、Pro-Pro-Leu、Pro-Pro-Ile、Val-Val、Lys-Lys、Gly-Gly-Ile、Phe-Phe-Ile、Phe-Phe-Leu、Thr-Thr-Val、Tyr-Tyr-Val、Tyr-Tyr-Phe、Glu-Glu-Val、Asp-Asp-Val、Lys-Lys-Val、Glu-Glu-Phe-Phe-Ile、Glu-Glu-Phe-Phe-Phe、Tyr-Tyr-Ile、Asp-Asp-Ile、Tyr-Tyr-Phe-Phe-Ile、Tyr-Tyr-Lys-Tyr-Tyr、Phe-Phe-Lys-Phe-Phe、Glu-Glu-Phe-Phe-Ile、(Lys-Lys-Gly-Gly)₂或[(l)-Lys-(d)-Lys-Leu]₂。

22.防止可能滥用鸦片组合物的方法，所述方法包括口服给予患者权利要求1-4中任一项的组合物。

23.治疗人类患者疼痛的方法，所述方法包括口服给予患者权利要求1-4中任一项的组合物。

24.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的激动剂和一定量的能够提高GPCR内吞作用的共价结合的μ鸦片受体激动剂，其中所述共价结合的μ鸦片受体激动剂降低、防止或延迟对靶向GPCRs包括μ鸦片受体的特定药物的抗性的发展和/或对该药物的身体依赖的进程。

25.权利要求24的组合物，其中所述μ鸦片受体激动剂为美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、依托尼秦或埃托啡。

26.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的鸦片激动剂和低剂量的共价结合的外消旋美沙酮，其中所述美沙酮降低或防止便秘。

27.权利要求26的组合物，其中所述鸦片激动剂为吗啡。

28.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的激动剂和一定量的能够提高GPCR内吞作用的共价结合的μ鸦片受体激动剂，其中所述共价结合的μ鸦片受体激动剂降低、防止或延迟对靶向GPCRs包括μ鸦片受体的特定药物的抗性的发展和/或对该药物的身体依赖的进程，所述药物还包括一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，该拮抗剂的量足以防止共价结合的激动剂和共价结合的μ鸦片受体激动剂的欣快效应，其中当该组合物被口服给予时，所述共价结合的激动剂和共价结合的μ鸦片受体激动剂被释放，所述共价结合的鸦片拮抗剂不被释放，但是如果该组合物被非法的药剂师使用时，所述鸦片拮抗剂被释放，而所述共价结合的激动剂和共价结合的μ鸦片受体激动剂不被释放。

29.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的鸦片激动剂和低剂量的共价结合的外消旋美沙酮，其中所述美沙酮降低或防止便秘，所述药物还包括一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，该拮抗剂的量足以防止共价结合的鸦片激动剂和所述美沙酮的欣快效应，其中当该组合物被口服给予时，所述共价结合的鸦片激动剂和共价结合的美沙酮被释放，所述共价结合的鸦片拮抗剂不被释放，但是如果该组合物被非法的药剂师使用时，所述鸦片拮抗剂被释放，而所述共价结合的激动剂和共价结合的美沙酮不被释放。

30.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的鸦片激动剂和低剂量的共价结合的外消旋美沙酮，其中所述美沙酮降低或防止便秘。

31.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的激动剂和一定量的能够提高GPCR内吞作用的共价结合的μ鸦片受体激动剂，其中所述共价结合的μ鸦片受体激动剂降低、防止或延迟对靶向GPCRs包括μ鸦片受体的特定药物的抗性的发展和/或对该药物的身体依赖的进程，所述药物还包括一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，该拮抗剂的量足以防止共价结合的激动剂和共价结合的μ鸦片受体激动剂的欣快效应，其中当该组合物被口服给予时，所述共价结合的激动剂和共价结合的μ鸦片受体激动剂被释放，所述共价结合的鸦片拮抗剂不被释放，但是如果该组合物被非法的药剂师使用时，所述鸦片拮抗剂、共价结合的激动剂和共价结合的μ鸦片受体激动剂均被释放。

32.含有药物的组合物，所述药物包括不能促进被靶向的GPCR的内吞作用和再敏化作用的镇痛量或亚镇痛量的靶向G-蛋白偶联受体(GPCR)的共价结合的鸦片激动剂和低剂量的共价结合的外消旋美沙酮，其中所述美沙酮降低或防止便秘，所述药物还包括一定量的共价结合的鸦片拮抗剂，该拮抗剂的量足以防止共价结合的鸦片激动剂和所述美沙酮的欣快效应，其中当该组合物被口服给予时，所述共价结合的鸦片激动剂和共价结合的美沙酮被释放，所述共价结合的鸦片拮抗剂不被释放，但是如果该组合物被非法的药剂师使用时，所述鸦片拮抗剂、共价结合的激动剂和共价结合的美沙酮均被释放

33.表2中所列出的组合物。

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