发明内容
本发明的目的就是要提供一种养份组配合理、可吸收性好、适合于老年人生理特点、能够有效调节机体代谢平衡、提高机体免疫力的具有延缓衰老作用的沙棘营养复合剂及其制备工艺。
为实现上述目的,本发明所设计的具有延缓衰老作用的沙棘营养复合剂,它以药食同源的沙棘提取物为主导原料、辅以其他保健组份、经混合组配而成。该营养复合剂中各有效原料的重量配比为:沙棘多肽500~700g、沙棘黄酮25~75g、胶原多肽100~200g、葡萄籽提取物50~150g。
该营养复合剂中各有效原料较佳的重量配比为:沙棘多肽500~600g、沙棘黄酮50~75g、胶原多肽100~150g、葡萄籽提取物100~150g。
该营养复合剂中各有效原料最佳的重量配比为:沙棘多肽500g、沙棘黄酮75g、胶原多肽100g、葡萄籽提取物100g。
该营养复合剂中可以添加其他常规辅料如调味剂、赋形剂等,制成胶囊剂、片剂、散剂、颗粒剂、丸剂或膏剂。
本发明所提出的具有延缓衰老作用的沙棘营养复合剂的制备工艺,包括以下步骤:
1)取沙棘果1000g,加入水400~600ml,捣碎成沙棘浆液;然后将沙棘浆液升温至40~60℃,调节其pH值至7.0~8.5,再加入占所取沙棘果重量1~3%的中性蛋白酶进行酶解,酶解过程中维持其温度为40~60℃、pH值为7.0~8.5、持续时间2~6h,得到沙棘酶解浆液;最后对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,取其上清液,浓缩和真空干燥,获得沙棘多肽,其得率约为50~70%;
2)取沙棘叶500g,加入石油醚400~500ml,浸泡1~3h,进行第一次过滤;然后将经过第一次过滤的沙棘叶渣投入到原来的石油醚中,继续浸泡1~3h,进行第二次过滤;再将两次滤液合并,冷却至室温,得到脱脂处理的沙棘叶滤液;最后将沙棘叶滤液的pH值调节至3~5,浓缩和真空干燥,获得沙棘黄酮,其得率约为5~15%;
3)取步骤1)所得沙棘多肽500~700g、步骤2)所得沙棘黄酮25~75g,再取胶原多肽100~200g、葡萄籽提取物50~150g,充分混合均匀,并在100~110℃的温度条件下干燥和灭菌处理10~30min,即可获得沙棘营养复合剂。
进一步地,上述步骤1)中,优选氢氧化钠试剂调节沙棘浆液的pH值至7.5~8.0,并在酶解过程中维持其pH值为7.5~8.0。如果采用氢氧化钾试剂调节pH值会使沙棘浆液的颜色发生变化,采用氢氧化钙试剂调节pH值会使沙棘浆液中的蛋白质变性,而采用氢氧化钠试剂调节pH值则不会影响沙棘浆液的颜色及其蛋白质的稳定性。
进一步地,上述步骤1)中,采用离心机以3000~4000r/min的速率对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,处理时间为10~20min,以充分分离沙棘酶解浆液中的沙棘多肽和杂质,尽可能多地提高沙棘多肽的提取率。
进一步地,上述步骤2)中,优选草酸试剂调节沙棘叶滤液的pH值至3.5~4.5。如果采用柠檬酸试剂或苹果酸试剂调节pH值,不仅用量大,而且酸味较重,而采用草酸试剂调节pH值,则其用量小,见效速度快。
本发明针对衰老发生的机制和老年人的生理特点,运用现代生物技术从沙棘原料中提取有效组份,结合实践证实保健功效明显的功能食品胶原多肽和葡萄籽提取物,组配成沙棘营养复合剂。其所选用的原料均为国家允许使用的食品级或药品级营养强化剂,各种原料的功效确切,组合科学,其协同作用抗衰老的机理分析如下:沙棘多肽和沙棘黄酮的主要作用在于提高人体机体的抗氧化、消除自由基能力,进而提高机体的免疫能力;胶原多肽的主要功效在于改善人体皮肤中胶原蛋白的合成能力,并能促进皮肤角质层代谢,具有良好的美容效果;而葡萄籽提取物的主要作用更是直接的抗氧化和清除自由基能力,并可增强细胞内抗氧化防御系统的功能。多种具有丰富营养成份和抗氧化功能的组份协同作用,能有效刺激人体胸腺发育和清除体内的自由基,调节机体代谢平衡,增强人体的免疫功能,对延缓机体衰老作用显著。同时,本沙棘营养复合剂的各种组份均为天然物质,其搭配合理、生物活性强、可吸收性良好,且无抗原性、无毒副作用,能有效降低血脂、增强机体运动能力,可广泛适于所有年龄段的人群食用。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例进一步详细描述本发明的具有延缓衰老作用的沙棘营养复合剂及其制备工艺:
实施例1:
1)提取沙棘多肽:首先称取沙棘果1000g,放入捣碎机中,加入清水500ml,捣碎成沙棘浆液。然后将沙棘浆液装入规格为2000ml的烧杯中,把烧杯放入水浴锅中,升温至50℃,用氢氧化钠调节其pH值至7.5,再加入占所取沙棘果重量1%的中性蛋白酶进行酶解,中性蛋白酶可选用丹麦诺维信公司的产品,酶活力单位为20万U/g,其专一性高,性能稳定,酶解产物稳定。在酶解过程中维持其温度为50℃、pH值为7.5、持续时间2h,得到沙棘酶解浆液。最后采用离心机以3000r/min的速率对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,处理时间为20min。固液分离后取其上清液,常规浓缩和真空干燥,获得重量为503g的沙棘多肽,得率约为50%。
2)提取沙棘黄酮:首先称取沙棘叶500g置于容器中,加入石油醚450ml,浸泡1h,进行第一次过滤。然后将经过第一次过滤的沙棘叶渣投入到原来的石油醚中,继续浸泡1h,进行第二次过滤。再将两次滤液合并,冷却至室温,得到脱脂处理的沙棘叶滤液。最后采用草酸试剂将沙棘叶滤液的pH值调节至3,常规浓缩和真空干燥,获得重量为25.7g的沙棘黄酮,得率约为5%。
3)原料混合组配:称取胶原多肽100g、葡萄籽提取物100g,与步骤1)所得沙棘多肽503g和步骤2)所得沙棘黄酮25.7g进行充分的混合,并在100℃的温度条件下干燥、灭菌处理10min,最后将干燥和灭菌处理好的混合粉剂用胶囊自动充填机灌装,即可获得沙棘营养复合剂胶囊。产品规格为400mg/粒,用法为每日两次,每次二至三粒。
实施例2:
1)提取沙棘多肽:首先称取沙棘果1000g,放入捣碎机中,加入清水400ml,捣碎成沙棘浆液。然后将沙棘浆液装入规格为2000ml的烧杯中,把烧杯放入水浴锅中,升温至45℃,用氢氧化钠调节其pH值至8.0,再加入占所取沙棘果重量2%的中性蛋白酶进行酶解,在酶解过程中维持其温度为45℃、pH值为8.0、持续时间4h,得到沙棘酶解浆液。最后采用离心机以3500r/min的速率对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,处理时间为15min。固液分离后取其上清液,常规浓缩和真空干燥,获得重量为596g的沙棘多肽,得率约为60%。
2)提取沙棘黄酮:首先称取沙棘叶500g置于容器中,加入石油醚400ml,浸泡2h,进行第一次过滤。然后将经过第一次过滤的沙棘叶渣投入到原来的石油醚中,继续浸泡2h,进行第二次过滤。再将两次滤液合并,冷却至室温,得到脱脂处理的沙棘叶滤液。最后采用草酸试剂将沙棘叶滤液的pH值调节至4,常规浓缩和真空干燥,获得重量为51.6g的沙棘黄酮,得率约为10%。
3)原料混合组配:称取胶原多肽150g、葡萄籽提取物100g,与步骤1)所得沙棘多肽596g和步骤2)所得沙棘黄酮51.6g进行充分的混合,并在105℃的温度条件下干燥、灭菌处理20min,最后将干燥和灭菌处理好的混合粉剂用胶囊自动充填机灌装,即可获得沙棘营养复合剂胶囊。
实施例3:
1)提取沙棘多肽:首先称取沙棘果1000g,放入捣碎机中,加入清水600ml,捣碎成沙棘浆液。然后将沙棘浆液装入规格为2000ml的烧杯中,把烧杯放入水浴锅中,升温至60℃,用氢氧化钠调节其pH值至8.0,再加入占所取沙棘果重量3%的中性蛋白酶进行酶解,在酶解过程中维持其温度为60℃、pH值为8.0、持续时间6h,得到沙棘酶解浆液。最后采用离心机以4000r/min的速率对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,处理时间为20min。固液分离后取其上清液,常规浓缩和真空干燥,获得重量为695g的沙棘多肽,得率约为70%。
2)提取沙棘黄酮:首先称取沙棘叶500g置于容器中,加入石油醚500ml,浸泡3h,进行第一次过滤。然后将经过第一次过滤的沙棘叶渣投入到原来的石油醚中,继续浸泡3h,进行第二次过滤。再将两次滤液合并,冷却至室温,得到脱脂处理的沙棘叶滤液。最后采用草酸试剂将沙棘叶滤液的pH值调节至5,常规浓缩和真空干燥,获得重量为74.6g的沙棘黄酮,得率约为15%。
3)原料混合组配:称取胶原多肽200g、葡萄籽提取物150g,与步骤1)所得沙棘多肽695g和步骤2)所得沙棘黄酮74.6g进行充分的混合,并在110℃的温度条件下干燥、灭菌处理30min,最后将干燥和灭菌处理好的混合粉剂用胶囊自动充填机灌装,即可获得沙棘营养复合剂胶囊。
实施例4:
1)提取沙棘多肽:首先称取沙棘果1000g,放入捣碎机中,加入清水500ml,捣碎成沙棘浆液。然后将沙棘浆液装入规格为2000ml的烧杯中,把烧杯放入水浴锅中,升温至40℃,用氢氧化钠调节其pH值至7.0,再加入占所取沙棘果重量2%的中性蛋白酶进行酶解,在酶解过程中维持其温度为40℃、pH值为7.0、持续时间3h,得到沙棘酶解浆液。最后采用离心机以3500r/min的速率对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,处理时间为15min。固液分离后取其上清液,常规浓缩和真空干燥,获得重量为512g的沙棘多肽。
2)提取沙棘黄酮:首先称取沙棘叶500g置于容器中,加入石油醚450ml,浸泡3h,进行第一次过滤。然后将经过第一次过滤的沙棘叶渣投入到原来的石油醚中,继续浸泡2h,进行第二次过滤。再将两次滤液合并,冷却至室温,得到脱脂处理的沙棘叶滤液。最后采用草酸试剂将沙棘叶滤液的pH值调节至4,常规浓缩和真空干燥,获得重量为73.2g的沙棘黄酮。
3)原料混合组配:称取胶原多肽100g、葡萄籽提取物100g,与步骤1)所得沙棘多肽512g和步骤2)所得沙棘黄酮73.2g进行充分的混合,并在110℃的温度条件下干燥、灭菌处理15min,最后将干燥和灭菌处理好的混合粉剂用胶囊自动充填机灌装,即可获得沙棘营养复合剂胶囊。
实施例5:
1)提取沙棘多肽:首先称取沙棘果1000g,放入捣碎机中,加入清水500ml,捣碎成沙棘浆液。然后将沙棘浆液装入规格为2000ml的烧杯中,把烧杯放入水浴锅中,升温至55℃,用氢氧化钠调节其pH值至8.5,再加入占所取沙棘果重量2%的中性蛋白酶进行酶解,在酶解过程中维持其温度为55℃、pH值为8.5、持续时间5h,得到沙棘酶解浆液。最后采用离心机以3500r/min的速率对沙棘酶解浆液进行固液分离处理,处理时间为15min。固液分离后取其上清液,常规浓缩和真空干燥,获得重量为582g的沙棘多肽。
2)提取沙棘黄酮:首先称取沙棘叶500g置于容器中,加入石油醚450ml,浸泡2h,进行第一次过滤。然后将经过第一次过滤的沙棘叶渣投入到原来的石油醚中,继续浸泡2h,进行第二次过滤。再将两次滤液合并,冷却至室温,得到脱脂处理的沙棘叶滤液。最后采用草酸试剂将沙棘叶滤液的pH值调节至4,常规浓缩和真空干燥,获得重量为63.1g的沙棘黄酮。
3)原料混合组配:称取胶原多肽100g、葡萄籽提取物50g,与步骤1)所得沙棘多肽582g和步骤2)所得沙棘黄酮63.1g进行充分的混合,并在110℃的温度条件下干燥、灭菌处理15min,最后将干燥和灭菌处理好的混合粉剂用胶囊自动充填机灌装,即可获得沙棘营养复合剂胶囊。
本发明具有延缓衰老作用的沙棘营养复合剂的功能实验等基础研究结果如下:
1.沙棘营养复合剂对提高机体运动能力的影响
将小鼠分为对照组(灌生理盐水)、沙棘营养复合剂低剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂10mg/kg)、中剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂20mg/kg)和高剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂30mg/kg)。各组动物20只,饲养30天。各组取10只动物分别测定小鼠肝脏中糖原的含量,另外10只动物在其尾部绑上铅丝(按体重的5%计算),进行负重游泳试验,观察各组动物进行游泳而不溺毙的时间,其结果如图1、图2所示。图1为沙棘营养复合剂对小鼠肝糖原含量的影响效果示意图(**与对照组比较,P<0.01),由图1可知,服用沙棘营养复合剂小鼠的肝糖原含量增加,且剂量越大,肝糖原的含量越多,运动时肝糖原分解产生的能量也越多,证明沙棘营养复合剂可显著增强动物的运动耐力。图2为沙棘营养复合剂对小鼠负重游泳时间的维持效果示意图(**与对照组比较,P<0.01),由图2可知,服用沙棘营养复合剂小鼠进行负重游泳的时间延长,且剂量越大,负重游泳维持的时间越长,证明沙棘营养复合剂能有效提高机体抗疲劳能力。
2.沙棘营养复合剂对提高机体免疫力的影响
(1)对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响
将小鼠分为对照组(灌生理盐水)、沙棘营养复合剂低剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂10mg/kg)、中剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂20mg/kg)和高剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂30mg/kg),饲养30天。检查小鼠腹腔巨噬细胞对异物的吞噬能力(以对照组的数值为100%),其结果如图3所示。图3为沙棘营养复合剂对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响效果示意图(**与对照组比较,P<0.01),由图3可知,服用沙棘营养复合剂小鼠的吞噬能力明显增强,且剂量越大,效果越好。
(2)对小鼠自然条件细胞自然杀伤率的影响
将小鼠分为对照组(灌生理盐水)、沙棘营养复合剂低剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂10mg/kg)、中剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂20mg/kg)和高剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂30mg/kg),饲养30天。分别检测脾脏自然杀伤细胞的自然杀伤力(以对照组的数值为100%),其结果如图4所示。图4为沙棘营养复合剂对小鼠脾脏自然杀伤细胞自然杀伤率的影响效果示意图(*与对照组比较,P<0.05;**与对照组比较,P<0.01),由图4可知,服用沙棘营养复合剂组小鼠均能显著增加脾脏自然杀伤细胞的自然杀伤力。
(3)对小鼠胸腺T淋巴细胞增殖能力的影响
将小鼠分为对照组(灌生理盐水)、沙棘营养复合剂低剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂10mg/kg)、中剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂20mg/kg)和高剂量组(每天灌服沙棘营养复合剂30mg/kg),饲养30天。分别检测小鼠胸腺T淋巴细胞增殖能力(以对照组的数值为100%),其结果如图5所示。图5为沙棘营养复合剂对小鼠胸腺T淋巴细胞增殖能力的影响效果示意图(*与对照组比较,P<0.05;**与对照组比较,P<0.01),由图5可知,沙棘营养复合剂能增强小鼠胸腺T淋巴细胞的增殖能力。通过以上三组实验表明,沙棘营养复合剂能有效增强小鼠的机体免疫能力。
3.沙棘营养复合剂对提高机体抗氧化能力的影响
采用先进的高压液相色谱技术,测定沙棘营养复合剂在体外的抗氧化作用,分别以还原能力、捕捉过氧化氢能力和抗油脂氧化能力为指标,进行实验和检测,其结果如图6、图7所示。图6为不同浓度的沙棘营养复合剂的还原能力效果示意图,由图6可见,随着沙棘营养复合剂浓度的升高,沙棘营养复合剂在700nm处的吸光值越来越大,即表明沙棘营养复合剂的还原能力逐渐增强。同时,2.5mg/ml维生素C与5mg/ml的沙棘营养复合剂有相同的吸光值,说明沙棘营养复合剂的还原能力为同样剂量维生素C的一半。图7为不同浓度沙棘营养复合剂的捕捉过氧化氢能力效果示意图,由图7的实验结果显示,维生素C具有相当大的捕捉过氧化氢的能力,与之相对照,沙棘营养复合剂也有相当强大的捕捉过氧化氢的能力。以上实验证实沙棘营养复合剂具有相当强大的抗氧化能力。
4.沙棘营养复合剂的降血脂作用
将SD大鼠分为沙棘营养复合剂高剂量组、低剂量组、及对照组和模型组,每组动物10只。除对照组为基础饲料外,另外三组均给予自行配制的造型饲料(2%的胆固醇、10%的猪油、0.2%的甲基硫氧嘧啶、87.8%的基础饲料),分组试验如下:低剂量组:200mg/kg每日,灌胃连续两周。高剂量组:500mg/kg每日,灌胃连续两周。对照组:进食基础饲料、生理盐水等体积灌胃。模型组:进食高脂饲料、生理盐水等体积灌胃。两周后抽血检查血脂,其结果如下表1所示:
表1沙棘营养复合剂对高脂模型大鼠血脂的影响(X±S)
注:与模型组比较*P<0.05;**P<0.01
从表1的结果可知:模型组动物血液中总胆固醇和甘油三酯明显高于对照组,高密度脂蛋白则低于对照组。应用沙棘营养复合剂灌胃后,高、低剂量组对血清总胆固醇和甘油三酯均有明显降低作用,并可使高密度脂蛋白升高。
通过上述一系列实验表明:沙棘营养复合剂具有强大的抗氧化清除自由基和降低血脂作用,能明显提高机体免疫力,因而能够发挥良好的抗衰老作用。