CN100591360C - 肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞的新用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞的新用途，尤其是其用于治疗和/或缓解因吸毒成瘾或药物滥用产生的戒断综合症的用途。

Description

肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞的新用途

发明领域

本发明涉及肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞的新用途，尤其是其用于治疗和/或缓解因吸毒成瘾或药物滥用产生的戒断综合症的用途。

背景技术

吸毒和药物滥用所致的药物依赖和成瘾，已成为日益严重的社会问题。常用治疗方法有：替代及递减疗法(如美沙酮，二氢埃多啡等)、亚冬眠疗法、中医疗法等，但至今尚无公认理想的方法。

目前认为阿片类药物的成瘾机制是与阿片受体的功能有关。在正常生理情况下，阿片受体受到一定基础水平的内源性阿片样多肽(EOP)的作用，当给予外源性阿片样化合物(EOC)如吗啡时，吗啡占领了其余的阿片受体，增强了内源性阿片样多肽的镇痛效应。当连续、多量地给予外源性吗啡时，通过反馈调节引起EOP神经元释放EOP的量锐减，需要更多的外源性吗啡才能维持镇痛等效应。因此，一旦停用吗啡类药物，机体在缺少内源性阿片样肽、又无外源性吗啡作用于阿片受体时，将引起一系列其他神经递质分泌增多的异常症状，即临床上出现的戒断症状。

正常机体存在着能分泌内源性阿片肽的细胞，如肾上腺髓质嗜铬细胞(MCC)等。MCC可以分泌三类物质：单胺类，如去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺等；内源性阿片肽类，如亮啡肽、甲啡肽、强啡肽等；以及多种生长因子，如神经生长因子、表皮生长因子等。MCC在受到相关的刺激时，可分泌相应的物质，产生应激、镇痛等效应。在上世纪八十年代初，美国和瑞士的两个研究组尝试用同种(人、鼠)的肾上腺髓质组织和嗜铬细胞(chromaffin cell)移植入脊髓蛛网膜下内治疗疼痛，取得了满意的效果。但由于人类的肾上腺髓质组织和嗜铬细胞来源稀少，故在九十年代美国的研究组尝试用异种的牛肾上腺髓质嗜铬细胞(以下简称BCC)植入癌症病人的脊髓蛛网膜下以治疗癌痛。为了克服免疫排斥反应，他们采用长度为5cm、直径1mm的聚丙烯酰胺中空纤维管包裹BCC。由于中空纤维管壁膜孔只允许小分子的物质通过，所以BCC的分泌物可缓慢而且均匀地扩散出纤维管，发挥止痛作用，而宿主体内的大分子免疫球蛋白不能穿透管壁膜孔，因此使细胞能较长时间(一年左右)在宿主体内存活并不断地分泌止痛物质，从而对疼痛患者产生治疗作用。但是，中空纤维管的体积较大，一方面，由于其管内死腔大，因此影响了营养物和代谢物的扩散，使得管内细胞不易长期存活；另一方面，大体积的纤维管植入脊髓蛛网膜下易对脊髓神经产生刺激和压迫，从而产生许多对人体不利的副作用；此外，由于中空纤维管的体积大，植入脊髓蛛网膜下时必须采用外科手术的方法植入，给病人带来一定的损伤。同时，用脱乙酰几丁质、聚丙烯酰胺及羧甲基纤维素钠等材料(美国等使用)制作的中空纤维管的生物相容性较差，容易引起宿主体的组织反应。另一方面，采用藻酸钠—聚赖氨酸--藻酸钠制作的三层结构膜微胶囊(以下简称APA微胶囊)，其体积小(直径为200-1000μm)、生物相容性高，利于微囊在动物体内长时间完好存在和囊内细胞较长期存活。实验已证明，APA微胶囊的囊膜可截割大于11万Kd(道尔顿)的分子，使免疫球蛋白和免疫活性细胞不能穿过该膜而进入囊内破坏其中的动物细胞，因而具有较好的免疫保护作用。实验亦显示出APA微胶囊具有较好的生物相容性，在小、大动物体内可较长时间(约1年半)完好存在。在胰岛、肝细胞、甲状旁腺和基因重组人生长激素分泌细胞移植治疗疾病模型动物的研究中，已证明具有保护异种移植物免受宿主免疫系统破坏的作用。但是，迄今为止，国内外尚未发现采用APA微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞用于治疗和/或缓解戒断综合症的报道。

发明内容

本发明的目的是要提供一种生物相容性高、作用时间长、毒副作用小、操作简便的适用于治疗或缓解因成瘾产生的戒断综合症的产品。

本发明人经研究，现已发现肾上腺髓质嗜铬细胞或通过基因工程等方法获得的阿片肽能细胞，尤其是APA微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞对成瘾造成的戒断综合症具有良好的治疗或缓解效果，本发明基于上述发现现已完成。

因此，本发明第一方面涉及肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞在制备用于治疗和/或缓解因药物成瘾或滥用产生的戒断综合症的产品中用途。

本发明再一方面涉及治疗和/或缓解因药物成瘾或滥用产生戒断综合症的方法，其包括给药物成瘾或滥用者注射肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞。

本发明再一方面涉及用于治疗或缓解式断综合症的产品，其包括肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞尤其是APA微囊化肾上腺髓质嗜铬细胞。

本发明再一方面涉及用于治疗或缓解戒断综合症的微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞药物，其特征在于，该药物按下列步骤制成：

(1)将牛肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞与一种浓度为10-20g/L的藻酸钠溶液混合，制成悬浮液，使每升悬浮液中含0.1-1×10¹⁰个细胞；

(2)利用喷雾装置将步骤(1)获得的悬浮液以150-1000μm直径的微滴状态分散于一种浓度为80-120mmol/L的氯化钙或乳酸钙溶液中，两种液体的比例为保证每升混合液含0.1-1×10⁸个细胞，放置5-20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得含牛肾上腺髓质嗜铬细胞的藻酸钙珠沉淀；

(3)将步骤(2)获得的沉淀物加入到一种浓度为0.3-0.7g/L的聚赖氨酸溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.2-2×10⁸个细胞，混合均匀，放置5-20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得沉淀物；

(4)将步骤(3)获得的沉淀物加入到一种浓度为1.0-2.0g/L的藻酸钠溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.2-2×10⁸个细胞，混合均匀，放置3-15分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得沉淀物；

(5)将步骤(4)获得的沉淀物加入到一种浓度为40-70mmol/L的柠檬酸钠溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.2-2×10⁸个细胞，混合均匀，放置5-20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞沉淀物；

(6)将步骤(5)获得的沉淀物加入到一种浓度为9g/L的氯化钠溶液清洗，最后将沉淀物转移入细胞培养液中培养并作为治疗疼痛的微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞药物保存。

根据本发明，本发明中肾上腺髓质嗜铬细胞可来自哺乳动物如人、牛、羊、猪或鼠的肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程细胞，优选牛肾上腺髓质嗜铬细胞。

根据本发明，本发明的肾上腺髓质嗜铬细胞或阿片肽能细胞是以微囊化形式使用的，优选APA微囊化的牛肾上腺髓质嗜铬细胞。

进一步讲，本发明中的微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞优选具有80％以上的纯度。

根据本发明，本发明的阿片肽能细胞举例讲是通过对哺乳动物如人或牛肾上腺髓质细胞进行基因工程修饰而得到的具有阿片肽能力的细胞。

根据本发明的微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞药物，在其步骤(2)中优选是将步骤(1)获得的悬浮液以180-500μm直径的微滴状态分散。

在使用时，只要将本发明APA微囊化BCC(2-9×10⁶个细胞)注入具有戒断综合症患者的脊髓蛛网膜下，即可在4-24小时内产生治疗作用，而且一次注射可以维持治疗作用9个月以上。

更进一步讲，在本发明中所述的牛肾上腺髓质嗜铬细胞(BCC)是指在牛肾上腺髓质中能被含铬染料染色的细胞或通过基因工程修饰得到的阿片肽能细胞，它可分泌单胺类、脑啡肽类(包括甲啡肽、亮啡肽)及神经营养因子等物质。

BCC的获得与纯化可用本领域已知方法进行。例如，可以使用胶原酶(Collagenase)与牛的肾上腺作用，使其中胶原组织分解，然后配合机械方法将牛肾上腺组织分离成单个细胞，接着使用170目(88μm)网孔的筛网过滤，牛肾上腺髓质细胞(含嗜铬细胞、内皮细胞、成纤维细胞和血细胞)穿过滤网，将网下液离心，弃去上清液，即获得了上述各种牛肾上腺髓质细胞的沉淀物，其中，嗜铬细胞约占细胞总数的50-60％，内皮细胞和成纤维细胞二者共约占细胞总数的40-50％，由于血细胞的形态很小，因此通常都不将其计算在总细胞内。应予指出，由于BCC在牛肾上腺髓质细胞总数中约占50-60％，因此即使不进行纯化也能应用于本发明中。但是为了提高治疗效果，优选将其纯化至BCC约占细胞总数的80％以上。作为BCC的纯化方法，例如可以采用常规的贴壁纯化法，其原理是根据不同种类的细胞具有不同程度的贴壁倾向来进行分离。例如对于含有嗜铬细胞、内皮细胞、成纤维细胞和血细胞的混合液来说，在培养瓶中在数小时内，大部分成纤维细胞贴壁，而大部分嗜铬细胞、内皮细胞和血细胞不贴壁，因此换瓶时可除去大部分成纤维细胞。又因血细胞不贴壁生长，故可以通过培养较长时间(例如24-48小时)，待嗜铬细胞及内皮细胞贴壁后再次换瓶即可除去大部分血细胞。如此经过两次换瓶即可使BCC的纯度达到细胞总数(血细胞除外)的80％以上。

关于细胞的计数方法，可以采用常规的染色后显微镜下观察计数的方法。例如可以采用胎盘蓝染色法(Trypan blue stain)，见于“组织培养溶剂和试剂”(Tissue Culture Media and Reagents)，第1566页。

在本发明的微囊化肾上腺髓质嗜铬细胞或通过基因工程等方法得到的阿片肽能细胞药物的制备中，各个步骤所用的溶液量可以根据限定的细胞数目来掌握。例如，在上述本发明药物制备的步骤(1)所获得的悬浮液中每升含有0.1-1×10¹⁰个细胞，而在步骤(2)的混合液中每升含有0.1-1×10⁸个细胞，也就是步骤(1)的悬浮液中的细胞浓度相当于步骤(2)的混合液中细胞浓度的约100倍，因此，如果从步骤(1)的悬浮液中取出1ml，则在步骤(2)中最好将其分散到100ml的氯化钙溶液中。余此类推。

在步骤(2)中形成藻酸钙珠的作用是为了在步骤(5)中获得含牛肾上腺髓质嗜铬细胞的微囊创造条件。在步骤(5)中，柠檬酸钠的钠离子将藻酸钙珠中的钙离子置换之后便形成了具有许多小孔隙的微囊。在这些微囊中含有许多BCC，而在BCC的周围又包裹着藻酸钠。

对藻酸钙珠的形成方法没有特殊限定，只要是能将含有BCC的藻酸钠悬浮液以足够微小的液滴分散于氯化钙溶液中既可。该藻酸钠悬浮液微滴的直径通常应在150-1000μm的范围内，优选在180-500μm的范围内。如果微滴直径在1000μm以上，则最后获得的微囊过大，在注射入人或动物的机体时容易引起破裂，因此不好。通常使用的液滴分散方法有针头注射法、喷雾法等，优选是喷雾法，最优选的是利用加拿大多伦多大学制造的静电微囊发生器(见《酶学方法》“微囊化胰岛细胞：一种生物内分泌胰”SUN，A.M.Micro-encapsulation ofpancreatic islet cell：a bio-artificial endocrine pancreas.In：Methodsin Enzymology，第137卷，第575-580页，1988年)进行的喷雾的方法。

上面对本发明的技术方案进行了较详细的解释，本领域的技术人员在阅读了上文及下文所附的实施例之后将能很容易地理解本发明。

与本领域的现有同类技术相比，本发明具有如下的积极效果：

通过动物实验证实，使用本发明的APA微囊化肾上腺髓质嗜铬细胞或通过基因工程等方法得到的阿片肽能细胞可以少量地较长时间地分泌的内源性阿片肽类物质，作用于患者的阿片受体。植入的细胞发挥“微型生物泵”的持续、小量分泌效应，在一段时间内，在使临床戒断症状减轻的同时，可减少对患者自身内源性阿片能细胞分泌的负反馈抑制作用，使得其分泌EOP的能力逐渐得以恢复，从而达到戒毒的目的。

与现有技术相比，本发明具有下列特点：

1、按本发明制作的APA微囊体积小(直径180-500um)，因而至少具有3个优点，即(1)利于营养物和代谢物的扩散，使囊内细胞易于较长期的存活；(2)不需以手术的方法将中空纤维管植入，仅需以简单的腰穿方法即可将微囊注入脊髓蛛网膜下腔内，对组织损伤小；(3)在脊髓蛛网膜下腔内不易对脊髓神经产生刺激和压迫的副作用；

2、与其它材料的免疫隔离膜相比，APA微囊具有很好的生物相容性；

3、大量实验已证实，本发明的APA微囊具有很好的免疫保护作用；

4、BCC在宿主体内可持续地(3个月以上)分泌拮抗戒断综合症的物质，产生持续的治疗和/或缓解戒断综合症的作用；

5、微囊化BCC可在宿主体内较长期地发挥治疗和/或缓解戒断综合症的作用；

6、与采用人肾上腺髓质嗜铬细胞相比，牛肾上腺髓质嗜铬细胞可大批量获得；

7、可采用低温技术保存微囊化BCC，便于长距离运输和批量供应。

具体实施方式

下面举出实施例、实验例和应用例来进一步解释本发明，但本发明不受这些具体例的限定。

实施例1：BCC的分离与纯化

1、从屠宰场取到12个新鲜的牛肾上腺(在室温下的缺血时间不超过1小时)，在冷藏条件下迅速运回实验室备用。

2、从肾上腺的静脉注入浓度为1g/L的胶原酶I(collagenase I)溶液，每个肾上腺注入胶原酶I溶液5ml，然后在37℃下放置30分钟，以便让胶原酶与牛肾上腺细胞周围的胶质充分反应。

3、沿肾上腺纵轴切开皮质，分离出髓质并将其剪碎。

4、向全部已剪碎的髓质组织中加入60ml浓度为1g/L的胶原酶I溶液，再放置30分钟。

5、用一个网孔为170目(88μm)的钢网过滤，收集网下液。

6、将网下液离心分离，弃去上清液，获得含牛肾上腺髓质细胞(包括BCC、内皮细胞、成纤维细胞和血细胞)的沉淀物。

7、用台盘蓝染色法进行计数，获得的细胞总数(血细胞除外)为5.8X10⁷，细胞存活率为90％。

8、将细胞转移入2个培养瓶中，每瓶加入DMEM(Dulbeco’sModified Eagle Medium)培养液(其中还含有青霉素100单位/ml、链霉素100μg/ml、小牛血清10体积％)20ml，置于一台温度为37℃，含5体积％CO₂孵箱内培养，5小时后换瓶，继续培养，使BCC绝大部分贴于瓶壁上，待用。

通常至少需要培养24小时以上，在用于制备微囊化动物细胞药物时，只需将培养瓶中的溶液去除，用常规胰酶消化法将BCC从培养瓶中收集下来即可作进一步的处理。

应予说明，实施例1的方法属于常规技术，它对本发明不起任何限定作用。

实施例2：微囊化动物细胞药物的制备

1、使用按实施例1的方法获得的BCC，离心分离，获得BCC的沉淀物，用生理盐水洗涤并稀释至1ml，将其移至离心管内。

2、用台盘蓝染色法计数，所获得细胞总数为3X10⁶个细胞，其中BCC的纯度为82％。

3、向其中加入1ml浓度为15g/L的藻酸钠溶液，用搅拌法将其制成悬浮液。

4、用静电微囊发生器(electrostatic droplet generator，加拿大多伦多大学制造)将悬浮液喷入到100ml浓度为100mmol/L的氯化钙溶液中，在10分钟后获得了一种直径在180-500μm范围内的含细胞的藻酸钙珠沉淀，待沉淀完全后除去上清液。

5、将藻酸钙珠加入到50ml浓度为0.5g/L的聚赖氨酸溶液中，混合均匀，在室温下放置10分钟，待沉淀完全后除去上清液。

6、将步骤5获得的沉淀物加入到60ml浓度为1.5g/L的藻酸钠溶液中，混合均匀，在室温下放置10分钟，待沉淀完全后除去上清液。

7、将步骤6获得的沉淀物加入到60ml浓度为55mmol/L的柠檬酸钠溶液中，在室温下放置10分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得含BCC的微囊化动物细胞沉淀物。

8、用浓度为9g/L的氯化钠溶液洗涤沉淀物，然后将此沉淀物转移入实施例1的步骤8所述的DMEM培养液中培养，作为注射用微囊化BCC药物待用。

实验例1：微囊化BCC对大鼠产生的戒断综合症的影响

实验材料

1实验药品：盐酸吗啡、美沙酮、盐酸纳络酮、生理盐水、NO试剂盒、SOD试剂盒、前列腺素E₂放射免疫药盒、肝素钠注射液、消炎痛注射液、水合氯醛注射液。

2微囊化嗜铬细胞。

3实验动物：Wistar大鼠，250g左右。

实验方法

1大鼠吗啡依赖模型的建立(参考Ling GSF等的方法)：取体重为250g左右的Wistar大鼠共150只，雌雄各半，随机分为5组，每组备30只。第1-4组为吗啡依赖模型组，每天2次皮下注射吗啡(早8:00及下午6:00)，剂量从每天20mg/kg体重开始，每天增加20mg/kg体重，给药5天，最终剂量达每天100mg/kg体重。于末次注射吗啡后4h，腹腔注射盐酸纳洛酮4mg/kg体重，观察1h，记录各组各项戒断症状并评分，积分在5分以上者模型建立成功。

3各组的处理模型建立成功后16h(6天)开始对各组进行不同处理。

微囊组：每只大鼠蛛网膜下腔植入2*10⁵APA-BCC，停止注射吗啡；

自身脱瘾组：每只大鼠将20ul生理盐水注入脊髓蛛网膜下腔，停止注射吗啡；

4实验观察及数据采集

第1次催瘾实验：自移植次日(7天)，在最后1次吗啡注射后3h-4h进行以下实验：腹腔注射盐酸纳洛酮4mg/kg体重，观察1h，记录各项戒断症状并评分，测量体重、血液中NO、SOD、前列腺素E₂含量。

第2次催瘾实验：以上实验4天后，腹腔注射纳洛酮4mg/kg体重，第2次催瘾，观察各组戒断症状。

附1：戒断症状评分标准(参考Ling GSF等的方法)制定

(1)异常姿势2分，高度激惹，触碰激惹1分，靠近激惹2分。

(2)咬牙：间断性0.5分，连续性1分。

异常行为1h记分一次。

(3)流泪4分。

(4)腹泻：软便4分，不成形8分。

(5)流涎：轻度1分，明显2分。

植物神经系统症状每15min记分1次。

4数据收集：

分别采集各组大鼠第一次催瘾、第二次催瘾时戒断症状的评分；催瘾后不同时间内各组大鼠体重减轻比较；催瘾后不同时间内各组大鼠血液中NO、SOD、PGE₂含量变化。

5行统计学处理。

实验结果

微囊化牛嗜铬细胞蛛网膜下腔移植对吗啡依赖大鼠的影响

取15体重为240g左右Wistar大鼠共10只，均雄性，以5天成功制成吗啡依赖模型，戒断症状评分平均为24分。随机分为2组，每组5只。第1组为微囊组，第2组为自身脱瘾组。

实验结果如下：

表1各组大鼠戒断症状评分比较

注与微囊组比较^**P＜0.01^*P＜0.05

表2各组大鼠不同时间体重减轻比较

注与微囊组比较^**P＜0.01^*P＜0.05

表3催瘾后不同时间内各组大鼠血液中NO  SOD含量测定结果

注与微囊组比较^**P＜0.01^*P＜0.05

从以上各表可以看出在戒断症状评分值、体重及NO水平方面微囊组与自身脱瘾组间存在显著的差别(具有统计学意义)。结果表明：微囊化牛嗜铬细胞蛛网膜下腔植入可明显减轻吗啡依赖大鼠的戒断症状。

实施例3：永生化人肾上腺髓质嗜铬细胞系的建立

人肾上腺髓质嗜铬细胞的原代培养：取无肾上腺疾病的新鲜成人或胎儿肾上腺，采用机械和化学法获取人肾上腺髓质嗜铬细胞(HCC)并培养；检测HCC的生物学特征，证明具备分泌儿茶酚胺和脑啡肽的能力。

人肾上腺髓质嗜铬细胞系的建立：采用脂质体转染法，将编码hTERT和neo基因的真核表达质粒PCIneo-hTERT导入原代培养的HCC，用G418筛选阳性细胞克隆，采用RT-PCR方法检测阳性克隆端粒酶活性，验证外源hTERT激活目的细胞端粒酶活性的能力；选择在G418环境下长期长生良好的克隆，分别通过RT-PCR和WesternBlot检测阳性细胞克隆hTERT的mRNA和蛋白的表达。

应予说明，实施例3的方法属于常规技术，它对本发明不起任何限定作用。

实施例4：微囊化基因工程细胞药物的制备

1.使用按实施例3的方法获得的HCC，胰酶分离，获得HCC的沉淀物，用生理盐水洗涤。

2.向其中加入1ml浓度为15g/L的海藻酸钠溶液，其制成悬浮液。

3.用静电微囊发生器(electrostatic droplet generator)将悬浮液喷入到100ml浓度为100mmol/L的氯化钙溶液中，获得一种直径在180-500μm范围内的含细胞的藻酸钙珠沉淀，待沉淀完全后除去上清液。

4.将海藻酸钙珠加入到50ml浓度为0.5g/L的聚赖氨酸溶液中，混合均匀，在室温下放置5-10分钟，待沉淀完全后除去上清液。

5.将步骤4获得的沉淀物加入到60ml浓度为1.5g/L的藻酸钠溶液中，混合均匀，在室温下放置5-10分钟，待沉淀完全后除去上清液。

6.将步骤5获得的沉淀物加入到60ml浓度为55mmol/L的柠檬酸钠溶液中，在室温下放置5-10分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得微囊化HCC沉淀物。

7.用浓度为9g/L的氯化钠溶液洗涤沉淀物，然后将此沉淀物转移入DMEM培养液中培养，作为注射用微囊化HCC药物待用。

实施例5：微囊化HCC蛛网膜下腔移植对吗啡依赖大鼠戒断综合症的影响

实验材料与方法：与实验例微囊化BCC对大鼠产生的戒断综合症的影响相同，但实验药品为微囊化HCC(APA-HCC)。

取体重为240g左右Wistar大鼠共10只，均雄性，以5天成功制成吗啡依赖模型，戒断症状评分平均为24分。随机分为2组，每组5只。第1组为微囊组，第2组为自身脱瘾组。

实验结果表明第二次催瘾后微囊组大鼠戒断症状评分较自身脱瘾组评分明显降低(P＜0.01)；移植后1天开始，微囊组大鼠体重减轻程度明显低于自身脱瘾组(P＜0.01)。提示微囊化HCC蛛网膜下腔植入可明显减轻吗啡依赖大鼠的戒断症状。

Claims (10)

1.肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞在制备用于治疗和/或缓解因药物成瘾或滥用产生的戒断综合症的产品中用途。

2.用于治疗或缓解戒断综合症的产品，其包括肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞。

3.根据权利要求2的产品，其中所述的肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞是APA微囊化肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞。

4.用于治疗或缓解戒断综合症的微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞药物，其特征在于，该药物按下列步骤制成：

(1)将牛肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞与一种浓度为10-20g/L的藻酸钠溶液混合，制成悬浮液，使每升悬浮液中含0.1-1×10¹⁰个细胞；

(2)利用喷雾装置将步骤(1)获得的悬浮液以150-1000μm直径的微滴状态分散于一种浓度为80-120mmol/L的氯化钙或乳酸钙溶液中，两种液体的比例为保证每升混合液含0.1-1×10⁸个细胞，放置5-20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得含牛肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞的藻酸钙珠沉淀；

(3)将步骤(2)获得的沉淀物加入到一种浓度为0.3-0.7g/L的聚赖氨酸溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.2-2×10⁸个细胞，混合均匀，放置5-20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得沉淀物；

(4)将步骤(3)获得的沉淀物加入到一种浓度为1.0-2.0g/L的藻酸钠溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.2-2×10⁸个细胞，混合均匀，放置3-15分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得沉淀物；

(5)将步骤(4)获得的沉淀物加入到一种浓度为40-70mmol/L的柠檬酸钠溶液中，二者的比例为保证每升液体含0.2-2×10⁸个细胞，混合均匀，放置5-20分钟，待沉淀完全后除去上清液，获得微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞沉淀物；

(6)将步骤(5)获得的沉淀物加入到一种浓度为9g/L的氯化钠溶液清洗，最后将沉淀物转移入细胞培养液中培养并作为治疗疼痛的微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞药物保存。

5.根据权利要求1的用途，其中肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程方法得到的阿片肽能细胞可来自哺乳动物的肾上腺髓质嗜铬细胞或基因工程细胞。

6.根据权利要求5的用途，其中所述的哺乳动物是人、牛、羊、猪或鼠。

7.根据权利要求5或6的用途，其中肾上腺髓质嗜铬细胞为牛肾上腺髓质嗜铬细胞。

8.根据权利要求1的用途，其中肾上腺髓质嗜铬细胞是以微囊化形式使用的。

9.根据权利要求8的用途，其中肾上腺髓质嗜铬细胞是以APA微囊化的牛肾上腺髓质嗜铬细胞。

10.根据权利要求1的用途，其中微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞具有80％以上的纯度。