CH667648A5

CH667648A5 - N-nikotinoylaminosaeuren.

Info

Publication number: CH667648A5
Application number: CH2923/86A
Authority: CH
Inventors: Leonid Dmitrievich Smirnov; Tatyana Alexandrovna Voronina; Larisa Grigorievna Stolyarova; Taisia Leonovna Garibova; Ramiz Atallaevich Akhundov; Elena Alexandrovna Kuznetsova; Kirill Mikhailovich Djumaev; Artur Viktorovich Valdman; Georgy Mikhailovich Rudenko
Original assignee: Ni Institutfarmakologii Akadem
Priority date: 1986-07-16
Filing date: 1986-07-22
Publication date: 1988-10-31
Also published as: SE8603135L; FR2602232A1; BE905154A; SE455093B; FR2602232B1; SE8603135D0; JPS6344565A

Description

667 648 667 648

PATENTANSPRUCH N-Nikotinoylaminosäuren der allgemeinen Formel PATENT CLAIM N-nicotinoylamino acids of the general formula

Bekannt ist ein Präparat Pyritinol (Encephabol der Firma Merck Bundesrepublik Deutschland) (Bis-(3-hydroxy-4-hydro-xymethyl-2-methylpyridyl-5-methyl-disulfiddihydrochloridmo-nohydrat mit folgender Struktur A preparation known as pyritinol (Encephabol from Merck, Federal Republic of Germany) (bis (3-hydroxy-4-hydro-xymethyl-2-methylpyridyl-5-methyl-disulfide dihydrochloride monohydrate) has the following structure

COR' COR '

ch2oh ch2oh

H0 Yrvi -GH„-S-S-CH„- H0 Yrvi -GH "-S-S-CH" -

10 10th

ch2oh ch2oh

KS / KS /

h3c "N' h3c "N '

.2HC1-H20 .2HC1-H20

worin bei R' = where at R '=

L-NH-CH(CH2)2COOH, L-NH-CH (CH2) 2COOH,

COOH COOH

R"für OH, Br steht; R "represents OH, Br;

bei R' = at R '=

DL-NH-CH(CH2)2COOH, DL-NH-CH (CH2) 2COOH,

COOH R"für OH steht; COOH R "represents OH;

bei R' = NH(CH2)3COOH, R" für OH steht. at R '= NH (CH2) 3COOH, R "stands for OH.

15 Pyritinol wird bei der Störung der Blutversorgung und des Metabolismus im Gehirn verwendet. 15 Pyritinol is used in disorders of blood supply and metabolism in the brain.

Beanspruchte Verbindungen sind neu dargestellt und in der Fachliteratur nicht beschrieben. Stressed connections are shown anew and are not described in the specialist literature.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Verbindun-20 gen herzustellen, die eine antihypoxische und antiamnestische Aktivität besitzen und schwach toxisch sind. The object of the invention is to produce new compounds which have antihypoxic and antiamnestic activity and are weakly toxic.

Die Aufgabe wurde dadurch gelöst, dass die erfindungsge-mässen Verbindungen N-Nikotinoylaminosäuren die allgemeine 25 Formel haben The object was achieved in that the compounds N-nicotinoylamino acids according to the invention have the general formula

R" cos* R "cos *

BESCHREIBUNG DESCRIPTION

Die vorliegende Erfindung betrifft neue N-Nikotinoylamino-säuren, welche eine antihypoxische und antiamnestische Wirkung aufweisen und in der Medizin als Mittel mit nootropem Wirkungstyp zur Behandlung von mit der Störung des Gedächtnisses und der Hirndurchblutung verbundenen pathologischen Zuständen, Folgeerscheinungen von Schädelhirntraumen sowie in geriatrischer Praxis angewendet werden können. The present invention relates to new N-nicotinoylamino acids which have an antihypoxic and antiamnestic activity and which are used in medicine as an agent with nootropic activity type for the treatment of pathological conditions associated with memory disorders and cerebral perfusion, sequelae of cranial brain traumas and in geriatric practice can be.

In klinischer Praxis verwendet man heute zur Therapie von Folgeerscheinungen des Sauerstoffdefizits, zur Verbesserung von Gedächtnisprozessen bei verschiedenen Gedächtnisstörungen Präparate mit nootropem Wirkungstyp. Als am meisten verbreitetes Präparat mit derartiger Wirkung gilt Nootropyl (2-Oxo- 1-pyrrolidinylessigsäureamid), das die geistige Leistungsfähigkeit erhöht und antihypoxisch wirksam ist. (C. Giurgea und andere. Klinische Bedeutung von Präparat Nootropyl. Kliniches-koe znachenie preparata nootropil. Moskau, 1976, S. 9-20. M.D. Mashkovsky. Fortschritte der gegenwärtigen Neurophar-makologie. Dostizheniasovremennoineirofarmakologii. Leningrad, 1982, S. 107-111). In clinical practice, preparations with nootropic effect types are used today for the therapy of sequelae of the oxygen deficit, for the improvement of memory processes in various memory disorders. The most widespread preparation with such an effect is Nootropyl (2-oxo-1-pyrrolidinylacetic acid amide), which increases mental performance and has an antihypoxic effect. (C. Giurgea and others. Clinical significance of preparation nootropyl. Kliniches-koe znachenie preparata nootropil. Moscow, 1976, pp. 9-20. MD Mashkovsky. Advances in current neurophar macology. Dostizheniasovremennoineirofarmakologii. Leningrad, 1982, pp. 107- 111).

Nootropyl ist jedoch in hoher Dosierung (300 bis 600 mg/kg) wirksam, und die Wirkung tritt nur nach der langen Kur auf. However, Nootropyl is effective in high doses (300 to 600 mg / kg), and the effect only occurs after a long course of treatment.

Bekannt sind weiterhin Psychoenergetika, die eine nootrope Komponente enthalten. Zu solchen Präparaten gehören Centro-fenoxine (p-Chlorphenoxyessigsäure-ß-dimethylaminoäthyl-ester) und Clérégil (N-Acetyl-L-glutaminsäure-dimethylamino-äthanol) (O. Benesova. Pharmacology of nootropic drugs. 21 Annual Czechoslovapsychpharmacological meeting. Nootropic drugs, Jesenic Spa, January, 914,1979, p. 20-32; Tischer H.D. Schmidt I., Wustmann Ch. Biomed. biochem. acta, 1984, 43, Nr. 4, p. 541-543; Hoffmann W., Rostock A. Pharmazie, 1983, 38, Nr. 12, p. 869-871). Psychoenergetics that contain a nootropic component are also known. Such preparations include Centro-fenoxine (p-chlorophenoxyacetic acid-ß-dimethylamino-ethyl ester) and Clérégil (N-acetyl-L-glutamic acid-dimethylamino-ethanol) (O. Benesova. Pharmacology of nootropic drugs. 21 Annual Czechoslovapsychpharmacological meeting. Nootropic drugs , Jesenic Spa, January, 914, 1979, p. 20-32; Tischer HD Schmidt I., Wustmann Ch. Biomed. Biochem. Acta, 1984, 43, No. 4, p. 541-543; Hoffmann W., Rostock A. Pharmazie, 1983, 38, No. 12, p. 869-871).

35 worin bei R' = L-NH-CH(CH2)2COOH, COOH 35 wherein at R '= L-NH-CH (CH2) 2COOH, COOH

40 40

45 45

R"für OH, Br steht; R "represents OH, Br;

bei R' = at R '=

DL-NH-CH(CH2)2COOH, COOH DL-NH-CH (CH2) 2COOH, COOH

R" für OH steht; R "represents OH;

bei R' = NH(CH2)3COOH, so R" für OH steht. with R '= NH (CH2) 3COOH, so R "stands for OH.

Die erfindungsgemässen Verbindungen stellen kristalline Substanzen dar, die wenig kaltwasser- und mässig heisswasserlös-55( lieh, schwer methanol-, äthylalkohol- und isopropylalkohollös-' lieh, in Benzol, Chloroform, Äthylazetat und anderen organischen Lösungsmitteln praktisch unlöslich, in Dimethylsulfoxid und Dimethylformamid und in verdünnten Säure- und Alkalilösungen löslich sind. Der Aufbau der Substanzen ist durch Anga-60 ben von IR-, UV- und EPR-Spektren nachgewiesen, die Indivi-, dualität der Substanzen ist durch Elementaranalyse und Dünn-schichtchromatografie mit Silufol (im System Chloroform-MeOH-NH4OH = 2,5:7,5:0,01) bestimmt. The compounds according to the invention are crystalline substances which are poorly soluble in cold water and moderately hot water (borrowed, heavily methanol, ethyl alcohol and isopropyl alcohol), practically insoluble in benzene, chloroform, ethyl acetate and other organic solvents, in dimethyl sulfoxide and dimethylformamide and The structure of the substances is proven by the indication of IR, UV and EPR spectra, the individuality and duality of the substances is determined by elemental analysis and thin layer chromatography with Silufol (in the system Chloroform-MeOH-NH4OH = 2.5: 7.5: 0.01).

Die erfindungsgemässen Verbindungen weisen einen ausge-65 prägten antihypoxischen und antiamnestischen Effekt mit minimaler Nebenwirkung auf. The compounds according to the invention have a pronounced antihypoxic and antiamnestic effect with minimal side effects.

Im Tierversuch wurde die Aktivität der erfindungsgemässen Verbindungen, nämlich N-(5-Hydroxynikotinoyl)-L-glutamin- In animal experiments, the activity of the compounds according to the invention, namely N- (5-hydroxynicotinoyl) -L-glutamine-

667 648 667 648

säure (Verbindung I), N-(5-Hydroxynikotinoyl)-DL-glutamin-säure (Verbindung II), N-(5-Hydroxynikotinoyl)-y-aminobut-tersäure (Verbindung III), N-(5-Bromnikotinoyl)-L-glutamin-säure (Verbindung IV) untersucht. acid (Compound I), N- (5-hydroxynicotinoyl) -DL-glutamic acid (Compound II), N- (5-hydroxynicotinoyl) -y-aminobutyric acid (Compound III), N- (5-bromnikotinoyl) - L-glutamic acid (compound IV) examined.

Man untersuchte die antihypoxische Aktivität der erfindungsgemässen Verbindungen gegenüber Pyritinol an 2 Modellen der Hypoxie und zwar der hyperkapnischen und der hemischen Hypoxie, wie dies gewöhnlich bei der Einschätzung von Antihy-poxanzien der Fall ist (E. von Lir, K. Stiknei. Gipoksia, Moskau, Verlag «Meditsina», 1967). Die Untersuchungen wurden an nicht reinrassigen männlichen Weissmäusen mit 18 bis 20 g Masse (bei der hypobarischen Hypoxie mit 25 bis 28 g Masse) durchgeführt. Jede Substanzdosis untersuchte man an 10 Tieren; die The antihypoxic activity of the compounds according to the invention against pyritinol was investigated on two models of hypoxia, namely hypercapnic and hemic hypoxia, as is usually the case with the assessment of antihypoxants (E. von Lir, K. Stiknei. Gipoksia, Moscow , Publisher «Meditsina», 1967). The investigations were carried out on non-purebred male white mice with 18 to 20 g mass (in hypobaric hypoxia with 25 to 28 g mass). Each substance dose was examined in 10 animals; the

Substanzen wurden 40 min vor dem Versuchsbeginn intraperitoneal injiziert. Substances were injected intraperitoneally 40 min before the start of the experiment.

Die hyperkapnische Hypoxie wurde in sich hermetisch schliessenden Gläsern von 200 cm3 Fassungsvermögen wiedergegeben. Die hemische Hypoxie untersuchte man bei subkutaner Einführung der Natriumnitratlösung in einer Dosis von 200 bis 300 mg/kg. The hypercapnic hypoxia was portrayed in hermetically sealed 200 cm3 glasses. Hemic hypoxia was investigated when the sodium nitrate solution was introduced subcutaneously at a dose of 200 to 300 mg / kg.

Die Untersuchung der antihypoxischen Aktivität hat erge-s ben, dass alle erfindungsgemässen Verbindungen eine Fähigkeit aufweisen, die Lebensdauer von Mäusen unter Bedingungen des akuten Sauerstoffmangels zu verlängern. The investigation of the antihypoxic activity has shown that all of the compounds according to the invention have an ability to prolong the lifespan of mice under conditions of acute lack of oxygen.

Die Injektion der erfindungsgemässen Verbindungen in einer Dosis von 100 mg/kg führte zur Verlängerung der Lebensdauer io von Mäusen unter Bedingungen der hyperkapnischen Hypoxie in einem hermetischen Raum um 20 bis 70% gegenüber Kontrolle. Nootropyl zeigte bei dieser Hypoxieart einen ähnlichen Effekt in einer bedeutend grösseren Dosis (500 mg/kg). Injection of the compounds according to the invention in a dose of 100 mg / kg led to the prolongation of the life span of mice under conditions of hypercapnic hypoxia in a hermetic space by 20 to 70% compared to control. Nootropyl had a similar effect in this hypoxia type in a significantly larger dose (500 mg / kg).

Unter Bedingungen einer «harten» hemischen Hypoxie 15 (Methämoglobinhypoxie) erwiesen sich die erfindungsgemässen Substanzen ebenfalls als wirksam, Nootropyl zeigte unabhängig von der Dosisvariation bei dieser Hypoxieart keine Aktivität. Under conditions of “hard” hemic hypoxia 15 (methaemoglobin hypoxia), the substances according to the invention also proved to be effective; nootropyl showed no activity regardless of the dose variation in this type of hypoxia.

Die Versuchsergebnisse sind in der Tabelle 1 dargestellt. The test results are shown in Table 1.

Tabelle 1 Antihypoxische Aktivität Table 1 Antihypoxic activity

Lfd. Nr. Current No.

Verbindung connection

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Überlebensdauer von Mäusen in 9 Survival of mice in 9

'o gegenüber Kontrolle = 100% 'o versus control = 100%

Hypoxie mit Hypekapnie Hypoxia with hypecapnia

Hemische Hypoxie Hemic hypoxia

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Nootropyl Nootropyl

250 250

— -

98,0±7,8 98.0 ± 7.8

2 2nd

Nootropyl Nootropyl

500 500

130±30,2 130 ± 30.2

103,0±9,6 103.0 ± 9.6

3 3rd

Erfindungs- Invention

50 50

105,0±11,8 105.0 ± 11.8

120,0±21,6 120.0 ± 21.6

4 4th

gemässe Ver according to Ver

100 100

121,0±6,6 121.0 ± 6.6

127,0±16,1 127.0 ± 16.1

5 5

bindung I bond I

200 200

134,0±13,6 134.0 ± 13.6

142,0± 14,7 142.0 ± 14.7

Erfindungs- Invention

6 6

gemässe Ver according to Ver

100 100

130,0±18,1 130.0 ± 18.1

bindung n binding n

7 7

Erfindungs- Invention

50 50

127,5±17,7 127.5 ± 17.7

8 8th

gemässe Ver according to Ver

100 100

125,0±10,9 125.0 ± 10.9

134,0±19,9 134.0 ± 19.9

bindung m binding m

Erfindungs- Invention

9 9

gemässe Ver according to Ver

50 50

114,0±8,4 114.0 ± 8.4

bindung IV binding IV

Die Untersuchung der antiamnestischen Wirkung der erfindungsgemässen Verbindungen erfolgte an nicht reinrassigen männlichen Weissmäusen mit 17 bis 20 g Masse im Verfahren einer passiven Vermeidungsreaktion nach Bures und Mitarbeitern in einer modifizierten Ausführungsform, welches gewöhnlich für die Untersuchung der Wirkung von Nootropika verwendet wird (Bures I., Buresova O., Huston G. Techniques and Basic Experiments for the Study of Brain and Behavior. Elsevier/ Worth-Holland Biomëdicàl Press, 1976). The antiamnestic activity of the compounds according to the invention was investigated on non-purebred male white mice with a weight of 17 to 20 g in the process of a passive avoidance reaction according to Bures and co-workers in a modified embodiment, which is usually used for the study of the effects of nootropics (Bures I., Buresova O., Huston G. Techniques and Basic Experiments for the Study of Brain and Behavior. Elsevier / Worth-Holland Biomëdicàl Press, 1976).

Die Versuchsanlage bestand aus 3 Kammern: Dunkelkammer (Kleinkammer) mit einem Elektrodenboden und Hellkammer (Grosskammer), worin das Tier eingebracht wurde. Innerhalb von 2 Minuten registrierte man die Verweildauer des Tiers in der Hell- und Dunkelkammer. Das Tier erhielt dann in der Dunkelkammer einen einmaligen Stromschlag (0,4 mA) über den Elektrodenboden (Lernen). Zur Erzeugung der Amnesie benutzte man den maximalen elektrokonvulsiven Anfall (maximaler Elektroschock, 50 Hz, 0,2s). Das Verabreichendes Elektroschocks immittelbar nach dem Lernen führte zum Löschen einer Gedächtnisspur. Der Test auf die Wiedergabe wurde 24 Stunden nach dem Lernen vorgenommen : Man brachte das The test facility consisted of 3 chambers: dark chamber (small chamber) with an electrode bottom and light chamber (large chamber), in which the animal was placed. The dwell time of the animal in the light and dark room was recorded within 2 minutes. The animal then received a single electric shock (0.4 mA) over the electrode base (learning) in the dark room. The maximum electroconvulsive attack (maximum electric shock, 50 Hz, 0.2s) was used to produce the amnesia. The administration of electroshocks immediately after learning led to the erasure of a memory trace. The playback test was done 24 hours after learning: they brought that up

55 Tier in die Hellkammer ein und registrierte wie vor die Verweilzeit in der Dunkel- und Hellkammer innerhalb von 2 Minuten. Bei der Wiedergabe von Reflex der passiven Vermeidung ohne Einsetzen des Elektroschocks bevorzugten die Kontrolltiere, sich in der Hellkammer den grössten Teil der Zeitperiode von 2 55 animals in the light room and, as before, registered the dwell time in the dark and light room within 2 minutes. When reproducing passive avoidance reflex without the onset of electric shock, the control animals preferred to spend most of the time period of 2 in the light room

60 Minuten zu befinden. Der Elektroschock bewirkte bei Tieren die Amnesie von bedingtem Reflex, wodurch die Tiere, gekennzeichnet durch eine kurze Latenzzeit, in die Dunkelkammer eintraten und den grössten Teil der Zeit dort verblieben. 60 minutes to be. The electric shock caused the amnesia of conditional reflex in animals, whereby the animals, characterized by a short latency period, entered the dark room and remained there for most of the time.

«s Die Substanzen wurden 40 Minuten vor dem Beginn des Lernens intraperitoneal gegeben, jede Dosis wurde an 6 Tieren getestet. Die Angaben für den antiamnestischen Effekt zeigt die Tabelle 2. The substances were given intraperitoneally 40 minutes before the start of learning, each dose was tested on 6 animals. Table 2 shows the data for the anti-amnestic effect.

667 648 4 667 648 4

Tabelle 2 Table 2

Wirkung der erfindungsgemässen Verbindungen I-IV und des Nootropyls auf die Amnesie, ausgelöst durch den Elektroschock bei der Wiedergabe von Gedächtnisspuren bei Mäusen nach 24 Stunden. Effect of the compounds I-IV and nootropyl according to the invention on amnesia, triggered by the electroshock when playing back memory traces in mice after 24 hours.

Lfd. Nr. Current No.

Verbindung connection

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Verweilzeit von Mäusen bei der Wiedergabe in sek in der Dwell time of mice during playback in seconds in the

Hellkammer Light room

Dunkelkammer Darkroom

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Kontrolle ohne Amnesie Control without amnesia

112,8(108-120) 112.8 (108-120)

7,2(5-12) 7.2 (5-12)

2 2nd

Kontrolle mit Amnesie Control with amnesia

74,3(55-85) 74.3 (55-85)

45,7(30-75) 45.7 (30-75)

3 3rd

Nootropyl Nootropyl

300 300

81,8(61-93) 81.8 (61-93)

38,2(27-49) 38.2 (27-49)

4 4th

Erfindungs Invention

25 25th

94,4(75-100) 94.4 (75-100)

25,6(15-36) 25.6 (15-36)

5 5

gemässe Verbindung I according to connection I

50 50

106,6(95-120) 106.6 (95-120)

13,4(5-25) 13.4 (5-25)

6 6

Erfindungsgemässe Verbindung II Compound II according to the invention

50 50

101,4(93,8-109) 101.4 (93.8-109)

18,6(10,6-28,6) 18.6 (10.6-28.6)

7 7

Erfindungsgemässe Verbindung III Compound III according to the invention

25 25th

82,3(63,5-101,1) 82.3 (63.5-101.1)

37,7(18,9-56,5) 37.7 (18.9-56.5)

8 8th

Erfindungsgemässe Verbindung IV Compound IV according to the invention

50 50

91,3(80,1-102,5) 91.3 (80.1-102.5)

28,7(16,7-40,7) 28.7 (16.7-40.7)

Wie die Tabelle 2 zeigt, weisen die erfindungsgemässen Verbindungen einen antiamnestischen Effekt auf, was durch ihre Fähigkeit, die ungünstige Einwirkung des Elektroschocks auf das Gedächtnis zu vermeiden, gekennzeichnet wird, wodurch die Verweilzeit von Tieren gegenüber Kontrolle in der Hellkammer wesentlich zunahm und in der Dunkelkammer umgekehrt abnahm. Dieser Effekt der Substanzen hatte einen dosisabhängigen Charakter. Beim Vergleich der Wirkung der erfindungsgemässen Verbindungen mit Nootropyl im Test auf Eintreten und Verweilen der Tiere in der Dunkelkammer (das Hauptkriterium des Versuchs) wurde nachgewiesen, dass die Gedächtnisspur durch Applikation der erfindungsgemässen Verbindungen besser als im Falle von Nootropyl aufbewahrt wird. As Table 2 shows, the compounds according to the invention have an anti-amnestic effect, which is characterized by their ability to avoid the unfavorable effect of electroshock on the memory, as a result of which the dwell time of animals compared to control in the light chamber and in the dark room increased considerably conversely decreased. This effect of the substances was dose-dependent. When comparing the effect of the compounds according to the invention with nootropyl in the test for the entry and dwelling of the animals in the darkroom (the main criterion of the experiment), it was demonstrated that the memory trace is better preserved than in the case of nootropropyl by application of the compounds according to the invention.

Ein positives Merkmal der erfindungsgemässen Verbindungen besteht ebenfalls in ihrer höheren dosismässigen Aktivität, d. h. der antiamnestische Effekt dieser Verbindungen zeigt sich in sechsfach kleineren Dosen als bei Nootropyl. A positive feature of the compounds according to the invention is also their higher dose-related activity, i.e. H. the antiamnestic effect of these compounds is shown in six times smaller doses than with nootropyl.

Man untersuchte die Nebenwirkungen und die akute Toxizität der erfindungsgemässen Verbindungen an nicht reinrassigen männlichen Weissmäusen (Masse 17 bis 20 g) bei intraperitonealer Gabe von Substanzen in zunehmenden Dosen von 25-100-400-800-1200 mg/kg. Zur Bewertung kamen die Myore-laxationswirkung an der Störung der Bewegungskoordination auf einem Drehstab und der Tod von Tieren. Die akute Toxizität untersuchte man bei einer konstanten Umgebungstemperatur (22 °C) an Tieren unter Einzelhaltung derselben, wobei Wasser und Nahrung ständig zugänglich waren. Zu diesem Zweck wurden die Mäuse in Käfige als Boxen mit 8 X 8 X 8 cm Abmessungen je 1 Tier in jede Box untergebracht. Man registrierte den Tod von Tieren 24 Stunden nach der Substanzgabe, berücksichtigte die Anzahl von gestorbenen und am Leben gebliebenen Mäusen. Die Untersuchungsbefunde sind in der Tabelle 3 angegeben. The side effects and the acute toxicity of the compounds according to the invention on non-purebred male white mice (mass 17 to 20 g) were investigated with intraperitoneal administration of substances in increasing doses of 25-100-400-800-1200 mg / kg. The Myore laxation effect on the disturbance of the coordination of movement on a torsion bar and the death of animals were evaluated. The acute toxicity was investigated at a constant ambient temperature (22 ° C) in animals while keeping them individually, whereby water and food were always accessible. For this purpose, the mice were housed in cages as boxes with 8 x 8 x 8 cm dimensions, 1 animal in each box. The death of animals was recorded 24 hours after the substance was given, taking into account the number of dead and alive mice. The test results are shown in Table 3.

Tabelle 3 Nebenwirkungen und Toxizität Table 3 Side effects and toxicity

Koordinations- Tägliche Toxizität Störung Coordinating Daily Toxicity Disorder

Substanzen ED50 in mg/kg LD50 in mg/kg Substances ED50 in mg / kg LD50 in mg / kg

30 30th

Koordinations Coordination

Tägliche Toxizität Daily toxicity

störung disorder

LDW in mg/kg LDW in mg / kg

Substanzen Substances

EDW in mg/kg EDW in mg / kg

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung III Compound III

500 500

1500 1500

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung IV Compound IV

500 500

1500 1500

Erfindungsgemässe Verbindung I 800 Compound I 800 according to the invention

Erfindungsgemässe Verbindung II 700 Compound II 700 according to the invention

2200(2000-2420) 2000 2200 (2000-2420) 2000

Die Versuche haben ergeben, dass die Gabe der erfindungsgemässen Substanzen an Tiere in einer Dosis von 25 bis 200 mg/ kg zu keinen sichtbaren Änderungen im Zustand und Verhalten 35 derselben führt. Die in diesen und grösseren Dosen verabreichten erfindungsgemässen Verbindungen blieben ohne Myorelaxa-tionswirkung, bewirkten die Störung der Bewegungskoordination nicht. Toxische Effekte traten bei Tieren beginnend von 800 bis 900 mg/kg Dosis auf, und nach der Gabe von 1000 bis 1300 mg/ 40 kg kam ein Teil von Mäusen um. The tests have shown that the administration of the substances according to the invention to animals in a dose of 25 to 200 mg / kg does not lead to any visible changes in the state and behavior of the same. The compounds according to the invention administered in these and larger doses remained without myorelaxation effect and did not cause the movement coordination to be disturbed. Toxic effects occurred in animals starting from 800 to 900 mg / kg dose, and after the administration of 1000 to 1300 mg / 40 kg, some of the mice were killed.

Somit weisen die erfindungsgemässen Verbindungen im Tierversuch eine Fähigkeit auf, die Mäuse vor Tod im Falle von akutem Sauerstoffmangel, partiellem Sauerstoffdefizit und Methämoglobinhypoxie zu schützen. Die erfindungsgemässen 45 Substanzen sind im Sinne der Unversehrtheit des Kurzzeitgedächtnisses gleichfalls wirksam, d. h. sie verfügen über den antiamnestischen Effekt. Im Vergleich zum bekannten Präparat Nootropyl haben sie den wesentlichen Vorteil, weil sie ihm sowohl an Arten und quantitativen Angaben der antihypoxi-50 sehen Wirkung als auch an der Tiefe des antiamnestischen Effekts überlegen sind. Thus, the compounds according to the invention have an ability in animal experiments to protect the mice from death in the event of acute oxygen deficiency, partial oxygen deficiency and methaemoglobin hypoxia. The 45 substances according to the invention are likewise effective in the sense of the integrity of the short-term memory; H. they have the anti-amnestic effect. Compared to the well-known preparation nootroprop, they have the main advantage because they are superior to the antihypoxi-50 effect and the depth of the antiamnestic effect.

Von den erfindungsgemässen Verbindungen ist N-(5-Hydro-xynikotinoyl)-L-glutaminsäure (Verbindung I) die wirksamste. Of the compounds according to the invention, N- (5-hydro-xynikotinoyl) -L-glutamic acid (compound I) is the most effective.

Die antiamnestische Wirkung der angegebenen Verbindung I 55 untersuchte man an unterschiedlichen Modellen der Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung unter Anwendung einiger Arten von Tieren und verschiedener Einführungsverfahren gegenüber Standardpräparaten Nootropyl, Pyritinol, Centrofenoxine, Clérégil. The antiamnestic activity of the compound I 55 given was investigated on different models of amnesia from a conditional reflex of passive avoidance using some types of animals and different introductory procedures compared to standard preparations nootropyl, pyritinol, centrofenoxine, Clérégil.

60, Die an Ratten durchgeführten Versuche zeigen, dass bei der Kontrollgruppe von Tieren, ausgebildet im bedingten Reflex der passiven Vermeidung (Erhalten eines schmerzhaften Reizes in der Dunkelkammer) der maximale Elektroschock die Amnesie der Fertigkeit bewirkt und dass bei Tieren die Verweilzeit in der 65 Dunkelkammer bedeutend länger wird. Auf dem Hintergrund der erfindungsgemässen Verbindung I, die in den Körper oder intraperitoneal vor oder nach dem maximalen Elektroschock eingeführt wird, kommt es zum Auslöschen der Gedächtnisspur 60. The experiments carried out on rats show that in the control group of animals, trained in the conditional reflex of passive avoidance (receiving a painful stimulus in the dark room), the maximum electroshock causes the amnesia of the skill and that in animals the dwell time in the 65 dark room becomes significantly longer. Against the background of the compound I according to the invention, which is introduced into the body or intraperitoneally before or after the maximum electroshock, the memory trace is erased

nicht. Die Tiere behalten die Fertigkeit in der passiven Vermei-dungsreaktion. In bedeutendem Masse vergrössert sich die Latenzzeit von Reflex des Eintretens in die Dunkelkammer. Die Wirksamkeit der erfindungsgemässen Verbindung I tritt in einer Dosis von 10,20,50 mg/kg auf. Die Prüfergebnisse sind in der Tabelle 4 dargestellt. Not. The animals keep the skill in the passive avoidance reaction. Significantly, the latency of reflex entering the darkroom increases. The effectiveness of the compound I according to the invention occurs in a dose of 10.20.50 mg / kg. The test results are shown in Table 4.

Nootropyl besitzt eine Fähigkeit, die Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung nur in einer Dosis von 300 mg/ kg zu verhüten. Die Versuchsergebnisse zeigt die Tabelle 5. Nootropyl has the ability to prevent amnesia from a passive avoidance reflex only at a dose of 300 mg / kg. The test results are shown in Table 5.

5 667 648 5 667 648

Die erfindungsgemässe Verbindung I beseitigte auch die Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung, der durch den maximalen Elektroschock bei Mäusen ausgelöst wurde. Compound I according to the invention also eliminated the amnesia from conditional passive avoidance reflex, which was triggered by the maximum electroshock in mice.

s Nootropyl war nach diesem Test nur unter Applikation in einer Dosis von 300 mg/kg wirksam. Centrofenoxine zeigte den antiamnestischen Effekt in einer Dosis von 50 mg/kg, und Pyritinol auch in einer Dosis von 50 mg/kg. Die Versuchsergebnisse gibt die Tabelle 6 an. s Nootropyl was only effective after application of this test at a dose of 300 mg / kg. Centrofenoxine showed the antiamnestic effect at a dose of 50 mg / kg, and pyritinol also at a dose of 50 mg / kg. The test results are given in Table 6.

Tabelle 4 Table 4

Antiamnestische Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I an einem Modell der durch den maximalen Elektroschock bei Ratten ausgelösten Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung Lernen, maximaler Elektroschock Antiamnestic effect of the compound I according to the invention on a model of the amnesia triggered by the maximum electroshock in rats from a conditioned reflex of passive avoidance learning, maximum electroshock

Verfahrensbedingungen Procedural conditions

Lfd. Nr. Current No.

Substanzen Substances

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Einführungsverfahren Introductory procedure

Zeitraum zwischen Einführung und Lernen in min Period between introduction and learning in min

Einfüh- Einführung vor rung sofort Lernen nach Lernen und Schock Introductory introduction before learning immediately after learning and shock

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

6 7 6 7

1 1

Kontrolle ohne Amnesie Control without amnesia

Physiologische Lösung intraperitoneal Physiological solution intraperitoneally

2 2nd

Kontrolle mit der Amnesie, ausgelöst durch den maximalen Elektroschock Control with amnesia triggered by the maximum electric shock

Physiologische Lösimg intraperitoneal Physiological solution intraperitoneally

3 3rd

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

10 10th

intraperitoneal intraperitoneally

30 30th

+ +

4 4th

Kontrolle ohne Amnesie Control without amnesia

Physiologische Lösung in den Körper Physiological solution in the body

5 5

Kontrolle mit Amnesie, ausgelöst durch den maximalen Elektroschock Control with amnesia triggered by the maximum electric shock

Physiologische Lösung in den Körper Physiological solution in the body

6 6

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

20 20th

intraperitoneal intraperitoneally

+ +

7 7

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

20 20th

in den Körper in the body

30 30th

+ +

8 8th

Kontrolle ohne Amnesie Control without amnesia

Physiologische Lösung intraperitoneal Physiological solution intraperitoneally

9 9

Physiologische Lösung intraperitoneal Physiological solution intraperitoneally

10 10th

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

50 50

intraperitoneal intraperitoneally

45 45

+ +

Lfd. Nr. Intakte Tiere vor Lernen Reproduzieren nach 24 Stunden Current No intact animals before learning reproduce after 24 hours

Latenzzeit Verweilzeit in sek Latenzzeit von Verweilzeit in sek von Rindenreflex in bedingtem Reflex der Latency dwell time in sec Latency time of dwell time in sec of bark reflex in conditional reflex

sek in der Hellkammer in der Dunkelkammer passiven Vermeidung in der Hellkammer in der Dunkelkammer sec in the light room in the dark room passive avoidance in the light room in the dark room

18 9 10 11 12 13 18 9 10 11 12 13

1 1

4,8±1,9 4.8 ± 1.9

20±3,6 20 ± 3.6

100±3,6 100 ± 3.6

82,5±28,4 82.5 ± 28.4

94,0±23,8 94.0 ± 23.8

26,0±23,8 26.0 ± 23.8

2 2nd

1,8±0,56 1.8 ± 0.56

14,2±5,04 14.2 ± 5.04

105,8±5,0 105.8 ± 5.0

1,8±0,56 1.8 ± 0.56

11,5±5,3 11.5 ± 5.3

108,5±5,3 108.5 ± 5.3

3 3rd

2,5±0,3 2.5 ± 0.3

22,8±5,8 22.8 ± 5.8

97,2±5,8 97.2 ± 5.8

39,6±9,1 39.6 ± 9.1

64,0±2,0 64.0 ± 2.0

56±20,8 56 ± 20.8

4 4th

9,6±6,4 9.6 ± 6.4

21 ±1 21 ± 1

93 ±7 93 ± 7

120 120

0 0

5 5

4,8±19,5 4.8 ± 19.5

19,5±8,7 19.5 ± 8.7

100,5±8,7 100.5 ± 8.7

5,7±1,9 5.7 ± 1.9

■114,2± 1,9 ■ 114.2 ± 1.9

6 6

11+4,38 11 + 4.38

21,2±5,1 21.2 ± 5.1

98,8±5,1 98.8 ± 5.1

37,7±17,8 37.7 ± 17.8

49,5± 17,8 49.5 ± 17.8

70,5±17,8 70.5 ± 17.8

7 7

10±6,3 10 ± 6.3

26,1 ±1,2 26.1 ± 1.2

93,3±7,2 93.3 ± 7.2

49,2±15,3 49.2 ± 15.3

53,0±15,3 53.0 ± 15.3

67,0±15,3 67.0 ± 15.3

8 8th

6,8±2,4 6.8 ± 2.4

40,2±6,5 40.2 ± 6.5

79,8±6,5 79.8 ± 6.5

83,8±19,4 83.8 ± 19.4

83,3±19,4 83.3 ± 19.4

36,7+19,4 36.7 + 19.4

9 9

2,0±0,5 2.0 ± 0.5

26,3±4,2 26.3 ± 4.2

93,7±4,2 93.7 ± 4.2

28,1±20,6 28.1 ± 20.6

29,1±20,6 29.1 ± 20.6

90,9±20,6 90.9 ± 20.6

10 10th

7,7±10,9 7.7 ± 10.9

12,7±10,9 12.7 ± 10.9

107,3+10,9 107.3 + 10.9

58,7±30,8 58.7 ± 30.8

86,3+30 86.3 + 30

667 648 6 667 648 6

Tabelle 5 Table 5

Antiamnestische Wirkung von Nootropyl an einem Modell der durch den maximalen Elektroschock bei Ratten ausgelösten Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung Lernen, maximaler Elektroschock Antiamnestic effect of nootropic on a model of amnesia triggered by the maximum electroshock in rats with a conditioned reflex of passive avoidance learning, maximum electroshock

Verfahrensbedingungen Procedural conditions

Lfd. Nr. Current No.

Substanzen Substances

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Einführungsverfahren Introductory procedure

Zeit time

Einfüh Introduct

raum rung vor rung sofort clearing immediately

zwischen between

Lernen nach Ler Learn according to Ler

Einfüh Introduct

nen und nen and

rung und tion and

Schock shock

Lernen Learn

in min in min

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

6 6

7 7

1 1

Kontrolle mit Amnesie Control with amnesia

2 2nd

Kontrolle mit Amnesie, ausgelöst durch den ma Control with amnesia triggered by the ma

ximalen Elektroschock ximal electric shock

3 3rd

Nootropyl Nootropyl

200 200

Intraperitoneal Intraperitoneally

50 50

+ +

4 4th

Kontrolle mit Amnesie Control with amnesia

5 5

ximalen Elektroschock ximal electric shock

6 6

Nootropyl Nootropyl

300 300

Intraperitoneal Intraperitoneally

50 50

+ +

7 7

Kontrolle mit Amnesie Control with amnesia

8 8th

ximalen Elektroschock ximal electric shock

9 9

Nootropyl Nootropyl

300 300

Intraperitoneal Intraperitoneally

10 10th

Kontrolle mit Amnesie Control with amnesia

11 11

ximalen Elektroschock ximal electric shock

12 12

Nootropyl Nootropyl

400 400

Intraperitoneal Intraperitoneally

60 60

+ +

Lfd. Nr. - Intakte Tiere vor Lernen Reproduzieren nach 24 Stunden Current No - intact animals before learning reproduce after 24 hours

Latenzzeit von Rindenreflex in sek Bark reflex latency in sec

Verweilzeit in sek Dwell time in sec

Latenzzeit von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung in sek Latency of conditional reflex of passive avoidance in sec

Verweilzeit in sek Dwell time in sec

in der Hellkammer in der Dunkelkammer in der Hellkammer in der Dunkelkammer in the light room in the dark room in the light room in the dark room

1 1

8 8th

9 9

10 10th

11 11

12 12

13 13

1 1

8,0±4,48 8.0 ± 4.48

14,7±1,9 14.7 ± 1.9

105,3 ±1,9 105.3 ± 1.9

105,3±16,8 105.3 ± 16.8

105,0±16,8 105.0 ± 16.8

85±16,8 85 ± 16.8

2 2nd

11,0±5,0 11.0 ± 5.0

17,6±5,0 17.6 ± 5.0

102,4±5,0 102.4 ± 5.0

7,6±5,0 7.6 ± 5.0

19,3±5,0 19.3 ± 5.0

100,7±5,0 100.7 ± 5.0

3 3rd

9,4±5,1 9.4 ± 5.1

14,6±4,7 14.6 ± 4.7

105,4±4,7 105.4 ± 4.7

20,8± 12,6 20.8 ± 12.6

23,8±11,1 23.8 ± 11.1

96,2±11,1 96.2 ± 11.1

4 4th

4,8±1,9 4.8 ± 1.9

20,0±3,6 20.0 ± 3.6

100,0±3,6 100.0 ± 3.6

82,5±28,4 82.5 ± 28.4

94,0±23,8 94.0 ± 23.8

26,0±23,8 26.0 ± 23.8

5 5

1,8+0,6 1.8 + 0.6

14,2±5,0 14.2 ± 5.0

105,8±5,0 105.8 ± 5.0

1,8±0,6 1.8 ± 0.6

11,5±5,3 11.5 ± 5.3

108,5±5,3 108.5 ± 5.3

6 6

3,2±0,7 3.2 ± 0.7

15±0,9 15 ± 0.9

105±0,9 105 ± 0.9

26,6±20,8 26.6 ± 20.8

34,4±19,9 34.4 ± 19.9

85,6+19,9 85.6 + 19.9

7 7

8,5±5,0 8.5 ± 5.0

24,2±7,0 24.2 ± 7.0

95,8±7,0 95.8 ± 7.0

120 120

0 0

8 8th

5,6±5,4 5.6 ± 5.4

30,3±10,0 30.3 ± 10.0

89,7± 10,0 89.7 ± 10.0

23,3±21,3 23.3 ± 21.3

28,0±21,3 28.0 ± 21.3

92±21,3 92 ± 21.3

9 9

10,3±7,8 10.3 ± 7.8

22,6±7,8 22.6 ± 7.8

97,4±7,8 97.4 ± 7.8

60,7± 17,3 60.7 ± 17.3

85,0±17,3 85.0 ± 17.3

35,0+17,3 35.0 + 17.3

10 10th

6,8±2,4 6.8 ± 2.4

40,2±6,5 40.2 ± 6.5

79,8±6,5 79.8 ± 6.5

83,3 ±19,4 83.3 ± 19.4

83,3±19,4 83.3 ± 19.4

36,7+19,4 36.7 + 19.4

11 11

2,0±0,5 2.0 ± 0.5

26,3±4,2 26.3 ± 4.2

93,7±4,2 93.7 ± 4.2

28,1±20,6 28.1 ± 20.6

29,1±20,6 29.1 ± 20.6

90,9±20,6 90.9 ± 20.6

12 12

8±3,3 8 ± 3.3

21,2±6,3 21.2 ± 6.3

98,8±6,3 98.8 ± 6.3

28,2±7,6 28.2 ± 7.6

28,6±7,9 28.6 ± 7.9

91,4±7,9 91.4 ± 7.9

Tabelle 6 Table 6

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf die durch den maximalen Elektroschock bei Mäusen ausgelöste Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung Influence of the compound I according to the invention on the amnesia of the conditional reflex of passive avoidance triggered by the maximum electric shock in mice

Lfd. Nr. Substanzen Dosis in mg/kg intraperitoneal Reproduzieren von bedingtem Current No substances dose in mg / kg intraperitoneal reproducing from conditional

Reflex der passiven Vermeidung Latenzzeit von Reflex in sek Passive avoidance reflex Latency of reflex in sec

1 Kontrolle ohne Amnesie Physiologische Lösung 87,08±10,5 1 control without amnesia Physiological solution 87.08 ± 10.5

2 Kontrolle mit Amnesie, ausgelöst durch den maxi- Physiologische Lösung 17,5±6,9 malen Elektroschock 2 Control with amnesia, triggered by the maxi-physiological solution 17.5 ± 6.9 times electric shock

7 7

667 648 667 648

Lfd. Nr. Substanzen Current No substances

Dosis in rag/kg intraperitoneal Dose in rag / kg intraperitoneally

Reproduzieren von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung Latenzzeit von Reflex in sek Reproduce conditional reflex of passive avoidance latency of reflex in sec

3 3rd

Erfindungsgemässe According to the invention

25 25th

70,0±20,2 70.0 ± 20.2

4 4th

Verbindung I Compound I

50 50

78,5±25,7 78.5 ± 25.7

5 5

Nootropyl Nootropyl

100 100

26,3±3,1 26.3 ± 3.1

6 6

300 300

80,0±13,9 80.0 ± 13.9

7 7

Centrofenoxine Centrofenoxine

25 25th

39,0±3,4 39.0 ± 3.4

8 8th

50 50

68,4±8,4 68.4 ± 8.4

9 9

Pyritinol Pyritinol

25 25th

31,0±5,4 31.0 ± 5.4

10 10th

50 50

98,0±7,7 98.0 ± 7.7

Die erfindungsgemässe Verbindung I in einer Dosis von 100 mg/kg verhindert ebenso wie Nootropyl in einer Dosis von 800 mg/kg die Ausbildung der Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung, ausgelöst durch intraperitoneale Injektion von 2,5 mg/kg Skopolamin vor Lernen. Die Versuchsergebnisse zeigt die Tabelle 7. Compound I according to the invention in a dose of 100 mg / kg, like nootropyl in a dose of 800 mg / kg, prevents the development of amnesia from a conditional reflex of passive avoidance, triggered by intraperitoneal injection of 2.5 mg / kg of skopolamine before learning. The test results are shown in Table 7.

Tabelle 7 Table 7

Einfluss der Substanzen auf die durch Skopolamin erzeugte Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung bei Mäusen Influence of the substances on the amnesia caused by skopolamine from a conditional reflex of passive avoidance in mice

(2,5 mg/kg Skopolamin intraperitoneal vor Lernen) (2.5 mg / kg skopolamine intraperitoneally before learning)

Lfd. Nr. Current No.

Substanzen Substances

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Reproduzieren von bedingtem Reflex der passiven Ver Reproduce conditional reflex of passive ver

intraperitoneal meidung intraperitoneal avoidance

Latenzzeit Latency

Verweilzeit Dwell time

von Relfex in der Hellkammer in sek of Relfex in the light room in sec

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Kontrolle ohne Amnesie Control without amnesia

_ _

91,5±12,4 91.5 ± 12.4

110,0±5,2 110.0 ± 5.2

2 2nd

Kontrolle mit Amnesie (Skopolamin) Control with amnesia (skopolamine)

- -

17,2±1,6 17.2 ± 1.6

27,2±4,3 27.2 ± 4.3

3 3rd

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

100 100

51,9±11,4 51.9 ± 11.4

56,9± 10,8 56.9 ± 10.8

4 4th

Nootropyl Nootropyl

400 400

26,0±9,2 26.0 ± 9.2

35,0±9,7 35.0 ± 9.7

5 5

Nootropyl Nootropyl

800 800

60,5±11,0 60.5 ± 11.0

69,5±11,4 69.5 ± 11.4

Die Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung wurde auch durch Deprivation der paradoxen Phase des Schlafs nach Jouvet erzeugt (Jouvet M. Physiol. Revs, 1967, v. 47, Nr. 2, p. 117). Zu diesem Zweck wurden die Ratten unmittelbar nach dem Lernen in der Ausbildung von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung für 24 Stunden in ein Wasserbecken auf 4,5x4,5 cm grosse Platten, die in 1 cm Höhe über Wasser hinaustreten, untergebracht. Wie die elektrophysiologische Kontrolle ergeben hat, nimmt der Anteil der paradoxen Phase des Schlafs unter diesen Bedingungen von 13 (normal) auf 1 % The amnesia from conditional reflex of passive avoidance was also created by deprivation of the paradoxical phase of sleep according to Jouvet (Jouvet M. Physiol. Revs, 1967, v. 47, No. 2, p. 117). For this purpose, the rats were placed in a water basin on 4.5x4.5 cm plates, which protrude 1 cm above water, for 24 hours immediately after learning in the formation of conditional reflex of passive avoidance. As the electrophysiological control showed, the proportion of the paradoxical phase of sleep under these conditions increases from 13 (normal) to 1%

ab. from.

Die Unversehrtheit von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung wurde nach der Latenzzeit des Eintretens von Ratten in die dunkle Abteilung der Kammer, wo ihnen der Stromschlag verabreichtwurde, eingeschätzt. Die Ergebnisse des Reproduzierens von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung nach der Deprivation der paradoxen Phase des Schlafs haben ergeben, dass die Ratten die erworbene Fertigkeit praktisch völlig verlieren. The integrity of the passive avoidance reflex was assessed after the latency of rats entering the dark compartment of the chamber where they were electrocuted. The results of reproducing the conditional reflex of passive avoidance after deprivation of the paradoxical phase of sleep have shown that the rats practically completely lose the acquired skill.

Die 40 Minuten vor dem Lernen in einer Dosis von 25 mg/kg intraperitoneal eingeführte erfindungsgëmâsse Verbindung I rief die gestörte Reaktion im Gedächtnis zu 40% zurück, war für die amnestische Wirkung der Verbindung an diesem Modell spricht. Unter ähnlichen Bedingungen wurde die Reaktion durch Nootropyl (400 mg/kg) nur zu 10% und durch Centrofenoxine zu 74% wiederhergestellt. Die Versuchsergebnisse sind in der Tabelle 8 dargestellt. The compound I according to the invention, introduced intraperitoneally 40 minutes before learning at a dose of 25 mg / kg, recalled the disturbed reaction to the memory by 40% and spoke for the amnestic effect of the compound on this model. Under similar conditions, only 10% of the reaction was restored by nootropyl (400 mg / kg) and 74% by centrofenoxine. The test results are shown in Table 8.

45 45

Tabelle 8 Table 8

Antiamnestische Wirkung von Nootropika am Modell der Amnesie von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung, aus-■ gelöst durch Deprivation der paradoxen Phase des Schlafs Antiamnestic effect of nootropics on the model of amnesia from a conditional reflex of passive avoidance, triggered by deprivation of the paradoxical phase of sleep

Substanzen Substances

Latenzzeit des Eintretens in die dunkle Abteilung der Kammer in sek Latency of entering the dark compartment of the chamber in sec

50 50

Kontrolle ohne Deprivation Control without deprivation

der paradoxen Phase des Schlafs the paradoxical phase of sleep

102,4±34,25 102.4 ± 34.25

Kontrolle mit Deprivation Control with deprivation

der paradoxen Phase des Schlafs the paradoxical phase of sleep

2,6±0,70 2.6 ± 0.70

55 Erfindungsgemässe Verbindung I 55 Compound I according to the invention

(25 mg/kg) (25 mg / kg)

42,0±15,20 42.0 ± 15.20

Nootropyl (400 mg/kg) Nootropyl (400 mg / kg)

10,6±2,65 10.6 ± 2.65

Centrofenoxine (50 mg/kg) Centrofenoxine (50 mg / kg)

74,3±15,42 74.3 ± 15.42

60 60

65 65

Die antihypoxische Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I untersuchte man in Mäuseversuchen an drei Modellen der Hypoxie und zwar der hypobarischen, hemischen und in einem hermetischen Raum. The antihypoxic effect of the compound I according to the invention was investigated in mouse experiments on three models of hypoxia, namely the hypobaric, hemic and in a hermetic room.

Zur Beurteilung der akuten hypobarischen Hypoxie verwendete man eine Unterdruckkammer mit Durchlauf und Entlüftung, registrierte den Druck und die Steiggeschwindigkeit. Die Tiere stiegen bedingt mit einer Geschwindigkeit von 50 m/s auf To assess acute hypobaric hypoxia, a negative pressure chamber with passage and ventilation was used, the pressure and the rate of climb recorded. The animals climbed conditionally at a speed of 50 m / s

667 648 667 648

eine «Höhe» von 10,5 bis 11 km. Man fixierte die Überlebensdauer (Reservezeit) und den Prozentsatz der am Leben gebliebenen Tiere. a «height» of 10.5 to 11 km. The survival time (reserve time) and the percentage of animals that remained alive were fixed.

Die erfindungsgemässe Verbindung I in einer Dosis von 50 und besonders von 100 und 400 mg/kg zeigte einen ausgesprochenen antihypoxischen Effekt, indem sie die Reservezeit und den Prozentsatz der am Leben gebliebenen Tiere nennenswert ver-grösserte, während keines der bekannten nootropen Präparate Nootropyl, Centrofenoxine, Pyritinol den gleichen Effekt nicht aufwies. Die Versuchsergebnisse sind in der Tabelle 9 angegeben. Compound I according to the invention in a dose of 50 and especially 100 and 400 mg / kg showed a pronounced antihypoxic effect by increasing the reserve time and the percentage of animals that remained alive, while none of the known nootropic preparations nootropyl, centrofenoxine , Pyritinol did not have the same effect. The test results are given in Table 9.

Die Wirksamkeit der erfindungsgemässen Verbindung I wurde auch am Modell der Hypoxie unter Hyperkapnie in einem hermetischen Raum nachgewiesen, wobei Mäuse in Gläser von 200 cm3 Fassungsvermögen mit hermetischem Deckel unterge8 The effectiveness of the compound I according to the invention was also demonstrated on the model of hypoxia under hypercapnia in a hermetic room, mice being sealed in glasses of 200 cm 3 capacity with a hermetic lid

bracht wurden. Zuverlässige Unterschiede in der Überlebensdauer bei Versuchs- und Kontrollgruppen von Tieren traten im Falle der Applikation der erfindungsgemässen Verbindung I in Dosen von 100 bis 200 mg/kg auf. Pyritinol, Centrofenoxine, 5 Clérégil, Nootropyl in einer Dosis von 50 bis 500 mg/kg zeigten den ähnlichen Effekt nicht. Die Versuchsergebnisse sind in der Tabelle 10 dargestellt. were brought. Reliable differences in the survival time in experimental and control groups of animals occurred when the compound I according to the invention was applied in doses of 100 to 200 mg / kg. Pyritinol, centrofenoxine, 5 clérégil, nootropin in a dose of 50 to 500 mg / kg did not show the similar effect. The test results are shown in Table 10.

Die durch Natriumnitrit (300 mg/kg subkutan) bei Mäusen ausgelöste hemische Hypoxie wurde durch Anwendung der io erfindungsgemässen Verbindung 1 in Dosen von 100 und 200 mg/ kg zur Regression gebracht, die Lebensdauer von Tieren verlängerte sich dabei auf das 1,38- bzw. l,48fache. Ähnlich wirksam waren Pyritinol in einer Dosis von 200 mg/kg und Nootropyl in einer Dosis von 1000 mg/kg. Die Versuchsergebnisse sind in der 15 Tabelle 11 dargestellt. The hemic hypoxia caused by sodium nitrite (300 mg / kg subcutaneously) in mice was brought to regression by using the compound 1 according to the invention in doses of 100 and 200 mg / kg . l, 48 times. Pyritinol at a dose of 200 mg / kg and nootropyl at a dose of 1000 mg / kg were similarly effective. The test results are shown in Table 15.

Tabelle 9 Table 9

Antihypoxische Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I gegenüber Substanzen mit nootroper Komponente der Wirkung am Antihypoxic effect of the compound I according to the invention on substances with a nootropic component of the action on

Modell der hypobarischen Hypoxie in Mäuseversuchen Model of hypobaric hypoxia in mouse experiments

Lfd. Nr. Substanz Dosis in mg/kg Reservezeit in min Anzahl von am Leben geblie benen Tieren in % Current No. substance dose in mg / kg reserve time in min number of animals left alive in%

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Kontrolle (physiologische Lösung) Control (physiological solution)

— -

9,4±1,0 9.4 ± 1.0

22 22

2 2nd

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

50 50

12,6+4,3 12.6 + 4.3

33 33

3 3rd

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

100 100

15,7+5,6 15.7 + 5.6

50 50

4 4th

Kontrolle control

- -

11,2±5,3 11.2 ± 5.3

16,6 16.6

5 5

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

400 400

20,9±5,12 20.9 ± 5.12

66,6 66.6

6 6

Kontrolle control

- -

9,7±1,0 9.7 ± 1.0

22 22

7 7

Nootropyl Nootropyl

300 300

10,1±1,2 10.1 ± 1.2

22 22

8 8th

Kontrolle control

- -

9,7+1,0 9.7 + 1.0

22 22

9 9

Centrofenoxine Centrofenoxine

100 100

9,6+3,5 9.6 + 3.5

22 22

10 10th

Kontrolle control

- -

6,05±2,7 6.05 ± 2.7

16,6 16.6

11 11

Centrofenoxine Centrofenoxine

200 200

11,1±3,4 11.1 ± 3.4

33,3 33.3

12 12

Kontrolle control

- -

9,7±1,0 9.7 ± 1.0

22 22

13 13

Pyritinol Pyritinol

100 100

6,3±3,5 6.3 ± 3.5

0 0

14 14

Kontrolle control

- -

5,75±2,7 5.75 ± 2.7

11,1 11.1

15 15

Pyritinol Pyritinol

200 200

8,9±3,5 8.9 ± 3.5

22,2 22.2

Tabelle 10 Table 10

Antihypoxische Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I gegenüber bekannten Nootropika am Modell der Hypoxie unter Antihypoxic effect of the compound I according to the invention on known nootropics using the hypoxia model

Hyperkapnie in einem hermetischen Raum Hypercapnia in a hermetic room

Lfd. Nr. Current No.

Substanz substance

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Lebensdauer in min Service life in min

Effekt in % Effect in%

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Kontrolle (physiologische Lösung) Control (physiological solution)

— -

25,1+1,2 25.1 + 1.2

100 100

2 2nd

Verbindung I Compound I

50 50

26,6±2,7 26.6 ± 2.7

105 105

3 3rd

Kontrolle control

- -

20,3±2,7 20.3 ± 2.7

100 100

4 4th

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

100 100

24,5±3,2 24.5 ± 3.2

120,7 120.7

5 5

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

200 200

27,1±5,4 27.1 ± 5.4

133,5 133.5

6 6

Kontrolle control

- -

29,3±3,6 29.3 ± 3.6

100 100

7 7

Nootropyl Nootropyl

500 500

29,2±5,9 29.2 ± 5.9

93 93

8 8th

Kontrolle control

- -

30,2±3,18 30.2 ± 3.18

100 100

9 9

Centrofenoxine Centrofenoxine

50 50

32,7±2,2 32.7 ± 2.2

108 108

10 10th

Kontrolle control

- -

30,2+3,18 30.2 + 3.18

100 100

11 11

Clérégil Clérégil

200 200

35,7±4,5 35.7 ± 4.5

111 111

12 12

Kontrolle control

- -

25,9±4,1 25.9 ± 4.1

100 100

13 13

Pyritinol Pyritinol

100 100

29,5±5,5 29.5 ± 5.5

114 114

14 14

Kontrolle control

- -

26,22±4,3 26.22 ± 4.3

100 100

15 15

Pyritinol Pyritinol

200 200

30,96±4,5 30.96 ± 4.5

118 118

9 9

667 648 667 648

Tabelle 11 Table 11

Antihypoxische Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I am Modell der hemischen Hypoxie (NaN02 300 mg/kg subkutan) Antihypoxic effect of the compound I according to the invention on the model of hemic hypoxia (NaN02 300 mg / kg subcutaneously)

Lfd. Nr. Substanz Dosis in mg/kg Lebensdauer in min Änderung des Effekts in % Current No. substance dose in mg / kg lifespan in min change in effect in%

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Kontrolle (physiologische Lösung) Control (physiological solution)

— -

14,5±2,7 14.5 ± 2.7

100 100

2 2nd

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

50 50

16,5±3,2 16.5 ± 3.2

113,8 113.8

3 3rd

Kontrolle control

- -

13,2±2,7 13.2 ± 2.7

100 100

4 4th

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

100 100

17,5±4,5 17.5 ± 4.5

132,6 132.6

5 5

Erfindungsgemässe Verbindung I Compound I according to the invention

200 200

19,6+7,3 19.6 + 7.3

148,5 148.5

6 6

Kontrolle control

20,4±2,2 20.4 ± 2.2

100 100

7 7

Nootropyl Nootropyl

501) 501)

23,5±2,8 23.5 ± 2.8

115 115

8 8th

Kontrolle control

18,2±4,4 18.2 ± 4.4

100 100

9 9

Nootropyl Nootropyl

1000 1000

26,1±4,7 26.1 ± 4.7

143 143

10 10th

Kontrolle control

17,6±2,2 17.6 ± 2.2

100 100

11 11

Pyritinol Pyritinol

100 100

19,6±2,2 19.6 ± 2.2

111 111

12 12

Kontrolle control

- -

16,53±2,0 16.53 ± 2.0

100 100

13 13

Pyritinol Pyritinol

200 200

24,04±6 24.04 ± 6

144 144

Zum Unterschied von Nootropyl, Pyritinol, Centrofenoxine und anderen nootropen Präparaten, bei denen der antihypoxische Effekt nur an einigen Modellen der Hypoxie und durch bedeutende Dosissteigerung nachgewiesen wird, verlängert die erfindungsgemässe Verbindung I die Lebensdauer von Tieren unter Bedingungen aller anwendbaren Modelle der Hypoxie, d.h. der hemischen, hypobarischen und in einem hermetischen Raum. In contrast to nootropyl, pyritinol, centrofenoxine and other nootropic preparations, in which the antihypoxic effect is only demonstrated on some models of hypoxia and by a significant increase in dose, the compound I according to the invention extends the life of animals under conditions of all applicable models of hypoxia, i.e. the hemic, hypobarian and in a hermetic space.

Zur Untersuchung kam der Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf das Lernen in der Ausbildung der bedingten Reflexe. Die erfindungsgemässe Verbindung I in einer Dosis von 10,20,50,100 und 200 mg/kg blieb ohne Wirkung auf die Ausbildung von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung bei Mäusen und Ratten. Bei längerer Gabe in einer Dosis von 70 mg/ kg veränderte die erfindungsgemässe Verbindung I die Geschwindigkeit der Ausbildung des bedingten Trinkreflexes im T-Labyrinth nicht. Die Versuchsergebnisse sind in der Tabelle 4 und 12 angegeben. The influence of compound I according to the invention on learning in the formation of the conditioned reflexes was examined. The compound I according to the invention in a dose of 10, 20, 50, 100 and 200 mg / kg had no effect on the formation of a conditioned reflex of passive avoidance in mice and rats. After prolonged administration in a dose of 70 mg / kg, the compound I according to the invention did not change the rate at which the conditional drinking reflex developed in the T-labyrinth. The test results are given in Tables 4 and 12.

Die Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I auf das Reproduzieren des Reflexes bei Mäusen erfolgte am Modell von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung 24 Stunden, 7 und 14 Tage nach dem Lernen. Während nach 2 Wochen die meisten Tiere (58%) der Kontrollgruppe die Situation vergassen und die Reflexbewegung nicht ausführte, so betrug die Anzahl der Tiere mit dem gestörten bedingten Reflex der passiven Vermeidung nur 15% bei der zweiwöchigen Gabe der erfindungsgemässen Verbindung I. Die anderen 85 % Mäuse dachten an der Situation und verbrachten eine lange Zeit in der Hellkammer. The effect of compound I according to the invention on the reproduction of the reflex in mice was carried out on the model of conditional reflex of passive avoidance 24 hours, 7 and 14 days after learning. While after 2 weeks most of the animals (58%) in the control group forgot the situation and did not perform the reflex movement, the number of animals with the disturbed conditioned reflex of passive avoidance was only 15% when the compound I according to the invention was given for two weeks. The others 85% of mice thought about the situation and spent a long time in the light room.

Tabelle 12 Table 12

Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I auf das Lernen der Ratten in der Ausbildung des bedingten Reflexes im T-Labyrinth Effect of the compound I according to the invention on the learning of the rats in the formation of the conditioned reflex in the T-labyrinth

Lernsit- Reflexzeit in sek zungen Learning session reflex time in seconds

Kontrolle control

Erfindungsgemässe Verbin Verbin according to the invention

dung 150 mg/kg intraperito dung 150 mg / kg intraperito

neal neal

Vor Gabe 54,61(48,42-60,8) Before dose 54.61 (48.42-60.8)

48,57(42,5-54,57) 48.57 (42.5-54.57)

derSub stanzen dieSub die

1 79,2(68,72-89,68) 1 79.2 (68.72-89.68)

2 53,4(42,92-63,88) 2 53.4 (42.92-63.88)

3 74,0(63,52-84,48) 3 74.0 (63.52-84.48)

53,7(43,5-63,9) 53.7 (43.5-63.9)

71,2(60,4-82) 71.2 (60.4-82)

65,0(54,8-75,2) 65.0 (54.8-75.2)

Lernsit- Reflexzeit in sek zungen Learning session reflex time in seconds

25 Kontrolle 25 control

Erfindungsgemässe Verbin Verbin according to the invention

dung 150 mg/kg intraperito dung 150 mg / kg intraperito

neal neal

VorGabe 54,61(48,42-60,8) Default 54.61 (48.42-60.8)

48,57(42,5-54,57) 48.57 (42.5-54.57)

derSub- the sub

30 stanzen 30 punch

35 35

40 40

45 45

4 4th

59,4(48,92-69,88) 59.4 (48.92-69.88)

74,5(63,8-85,2) 74.5 (63.8-85.2)

5 5

79,7(68,74-90,66) 79.7 (68.74-90.66)

62,6(52,4-72,8) 62.6 (52.4-72.8)

6 6

68,0(57,04-78,96) 68.0 (57.04-78.96)

49,06(38,8-59,2) 49.06 (38.8-59.2)

7 7

77,7(67,22-88,18) 77.7 (67.22-88.18)

54,3(42,1-64,5) 54.3 (42.1-64.5)

8 8th

52,7(42,22-63,18) 52.7 (42.22-63.18)

70,3(61,0-79,6) 70.3 (61.0-79.6)

9 9

62,9(51,94-73,86) 62.9 (51.94-73.86)

66,4(57,1-75,7) 66.4 (57.1-75.7)

10 10th

76,9(66,42-87,38) 76.9 (66.42-87.38)

34,0(23,3-44,7) 34.0 (23.3-44.7)

11 11

49,1(40,05-58,15) 49.1 (40.05-58.15)

24,0(13,1-34,9) 24.0 (13.1-34.9)

12 12

37,4(28,16-46,64) 37.4 (28.16-46.64)

24,5(13,6-35,4) 24.5 (13.6-35.4)

13 13

29,4(24,16-34,64) 29.4 (24.16-34.64)

18,4(12,2-24,6) 18.4 (12.2-24.6)

14 14

30,0(23,71-36,29) 30.0 (23.71-36.29)

31,8(20,9-42,7) 31.8 (20.9-42.7)

15 15

31,1(24,81-37,39) 31.1 (24.81-37.39)

23,8(16,7-30,9) 23.8 (16.7-30.9)

16 16

18,5(15,07-21,93) 18.5 (15.07-21.93)

19,9(11,8-28,0) 19.9 (11.8-28.0)

17 17th

47,3(39,7-54,9) 47.3 (39.7-54.9)

22,2(16,9-28,1) 22.2 (16.9-28.1)

18 18th

36,0(30,29-41,71) 36.0 (30.29-41.71)

26,9(21,6-32,2) 26.9 (21.6-32.2)

19 19th

40,2(31,44-48,96) 40.2 (31.44-48.96)

17,7(13,3-22,1) 17.7 (13.3-22.1)

20 20th

12,9(8,52-17,28) 12.9 (8.52-17.28)

10,7(7,3-14,1) 10.7 (7.3-14.1)

21 21st

18,6(12,22-24,98) 18.6 (12.22-24.98)

6,4(4,8-8,0) 6.4 (4.8-8.0)

50 50

Reproduzieren und Auslöschen von Reflex der passiven Vermeidung wurde an Ratten nach einem Verfahren der Konfliktsituation untersucht (T.A. Klygul, V.A. Krivopalov. Farmakologiai 55 toksikologia, 1966, Nr. 2, S. 241). Der Konflikt wurde durch Zusammenstoss der Trink- und Abwehrmotivationen in der Zeit erzeugt, wo das Tier einer Tränke Wasser entnahm und ihm der Stromschlag verabreicht wurde. Man registrierte dabei die Zeit des ersten Herangehens und der ersten Wasserentnahme. 60 Beim Reproduzieren von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung 24 Stunden nach dem Lernen erinnerten sich die Kontrollratten an die Situation und entnahmen Wasser nicht, und beim Reproduzieren nach 2 Wochen löschte der Reflex allmählich aus und die Tiere verwirklichten die Wasserent-65 nähme. Eine längere Applikation der erfindungsgemässen Verbindung I und anderer Präparate (Nootropyl, Clérégil) blieb ohne Wirkung auf Lernen und Reproduzieren von bedingtem Reflex der passiven Vermeidung unter Bedingungen der Kon Reproduction and extinction of the passive avoidance reflex was investigated in rats using a conflict method (T.A. Klygul, V.A. Krivopalov. Farmakologiai 55 toksikologia, 1966, No. 2, p. 241). The conflict was created by the clash of drinking and defense motivations at the time when the animal was drawing water from a drinking trough and being electrocuted. The time of the first approach and the first water withdrawal was registered. 60 When the conditional reflex of passive avoidance was reproduced 24 hours after learning, the control rats remembered the situation and did not draw water, and when reproduced after 2 weeks the reflex gradually extinguished and the animals realized the water removal. A prolonged application of compound I according to the invention and other preparations (nootropyl, clérégil) had no effect on learning and reproducing the conditional reflex of passive avoidance under conditions of con

667 648 667 648

10 10th

fliktsituation nach 24 Stunden. Aber nach zwei Wochen Lernen, als die meisten Tiere in der Kontrollgruppe die Situation vergessen hatten und die Reflexzeit (Wasserentnahme) bei ihnen mehr als auf die Hälfte zurückgegangen war, wurde die Gedächtnisspur bei Ratten, die die erfindungsgemässe Verbindung I erhielten, fast vollständig nicht ausgelöscht, und die Reflexzeit (Wasserentnahme) blieb praktisch unverändert. Der ähnliche Effekt trat bei Nootropyl in einer Dosis von 300 mg/kg auf, Clérégil begünstigte das Reproduzieren der Gedächtnisspur in kleinerem Masse. Die Versuchsergebnisse sind in der Tabelle 13 dargestellt. Flict situation after 24 hours. But after two weeks of learning, when most of the animals in the control group had forgotten the situation and the reflex time (water withdrawal) had decreased by more than half, the memory trace in rats which received the compound I according to the invention was almost not erased , and the reflex time (water withdrawal) remained practically unchanged. The similar effect occurred with nootropyl at a dose of 300 mg / kg, Clérégil favored the reproduction of the memory trace to a lesser extent. The test results are shown in Table 13.

Bei der Untersuchung der Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I auf das Erlöschen von Reflex der passiven Vermeidung ohne Bekräftigung unter Bedingungen der Konfliktsituation wurde festgestellt, dass alle Tiere in der Kontrollgruppe von Ratten 12 Minuten nach derTestung die Wasserentnahme verwirklicht hatten. Durch Wirkung der erfindungsgemässen 5 Verbindung I löschte die Gedächtnisspur nach und nach aus, und 12 Minuten nach dem Unterbringen der Tiere in eine Anlage zur Verwirklichung des Reflexes entnahm das Wasser einer Tränke nur die Hälfte von Tieren. Es kam dabei zu einer signifikanten Verlängerung der Zeit für das erste Herangehen und insbeson-lo dere für die erste Wasserentnahme gegenüber Kontrolle. Es sei auch eine wesentliche Zeitdifferenzierung zwischen Herangehen und Wasserentnahme bei Versuchstieren zu vermerken. Die Versuchsergebnisse zeigen Tabellen 14,15. When examining the effect of the compound I according to the invention on the extinction of the passive avoidance reflex without confirmation under conditions of the conflict situation, it was found that all the animals in the control group of rats had taken the water 12 minutes after the test. Through the action of compound 5 according to the invention, the memory trace was gradually erased, and 12 minutes after the animals were placed in a system for realizing the reflex, the water from a drinking trough only removed half of the animals. There was a significant increase in the time for the first approach and in particular for the first water withdrawal compared to the control. There is also a significant time difference between approaching and taking water from experimental animals. The test results are shown in Tables 14.15.

Tabelle 13 Table 13

Wirkung von Präparaten bei längerer Gabe auf das Reproduzieren von Reflex der passiven Vermeidung bei Ratten nach dem Effect of prolonged-dose preparations on the reproductive reflex of passive avoidance in rats after the

Verfahren der Konfliktsituation. Procedure of the conflict situation.

Lfd. Nr. Current No.

Präparat preparation

Versuchsbedingungen Test conditions

Zeit des ersten Herangehens in sek Zeit des ersten Stromschlags in sek Time of first approach in sec time of first electric shock in sec

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

1 1

Kontrolle control

Physiologische Lösung Physiological solution

50,0±41,5 50.0 ± 41.5

50,0141,5 50.0141.5

2 2nd

Kontrolle control

Reproduzieren Reproduce

24 h nach dem Lernen 24 hours after learning

181,0±0,06 181.0 ± 0.06

300 300

3 3rd

Kontrolle control

Reproduzieren von Reflex Reproduce reflex

14 Tage nach dem Lernen 14 days after learning

149,29±44,4 149.29 ± 44.4

149,57144,5 149.57144.5

4 4th

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung 150 mg/kg Compound 150 mg / kg

Einmalige Gabe Single gift

31,5±14,3 31.5 ± 14.3

31,5114,3 31.5114.3

5 5

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung 150 mg/kg Compound 150 mg / kg

18tätige Gabe 18-day gift

35,29±12,2 35.29 ± 12.2

35,29110,2 35.29110.2

6 6

Erfindungsgemässe According to the invention

Reproduzieren 24 h Reproduce 24 h

Verbindung 150 mg/kg nach dem Lernen Compound 150 mg / kg after learning

300 300

7 7

Erfindungsgemässe Verbindung 150 mg/kg Compound according to the invention 150 mg / kg

Reproduzieren 14 Tage nach dem Lernen Reproduce 14 days after learning

(32tägige Gabe) (32-day gift)

209,29±43,5 209.29 ± 43.5

273,57144,5 273.57144.5

8 8th

Nootropyl 300 mg/kg Nootropyl 300 mg / kg

Einmalige Gabe Single gift

13,0±4,29 13.0 ± 4.29

13,014,29 13,014.29

9 9

Nootropyl 300 mg/kg Nootropyl 300 mg / kg

21tägige Gabe Gift for 21 days

38,0±20,4 38.0 ± 20.4

38,0120,4 38.0120.4

10 10th

Nootropyl 300 mg/kg Nootropyl 300 mg / kg

Reproduzieren nach 24 h Reproduce after 24 h

282153,6 282153.6

11 11

Nootropyl 300 mg/kg Nootropyl 300 mg / kg

Reproduzieren 14 Tage nach dem Lernen Reproduce 14 days after learning

(35tägige Gabe) (35-day gift)

191,8±71,3 191.8 ± 71.3

251,0168,3 251.0168.3

12 12

Clérégil 150 mg/kg Clérégil 150 mg / kg

Einmalige Gabe Single gift

30±24,2 30 ± 24.2

30124,2 30124.2

13 13

Clérégil 150 mg/kg Clérégil 150 mg / kg

Reproduzieren Reproduce

24 h nach dem Lernen 24 hours after learning

300 300

14 14

Clérégil 150 mg/kg Clérégil 150 mg / kg

Reproduzieren 14 Tage nach dem Lernen Reproduce 14 days after learning

(35tägige Gabe) (35-day gift)

1431116,5 1431116.5

200194,8 200194.8

Tabelle 14 Table 14

Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I (50 mg/kg intraperitoneal bei 14tägiger Gabe) auf das Auslöschen von Reflex der passiven Vermeidung bei Ratten nach dem Verfahren der Konfliktsituation Effect of compound I according to the invention (50 mg / kg intraperitoneally when administered for 14 days) on the extinction of the passive avoidance reflex in rats according to the conflict situation method

Lfd. Current

Substanzen Substances

Anzahl von Tieren in 9 Number of animals in 9

ro, die sich an die Situation erinnerten und an die Tränke ro who remembered the situation and the potions

Mittlere Zeit des Herange Middle time of the Herange

Nr. No.

innerhalb von 12 min nicht herangingen did not approach within 12 min

hens an die Tränke to the potions

Zeitintervalle in min Time intervals in min

in sek in sec

1-2 1-2

3-4 3-4

5-6 5-6

7-8 7-8

9-10 9-10

11-12 11-12

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

6 6

7 7

8 8th

9 9

1 1

Kontrolle control

(physiologische Lösung) (physiological solution)

42,6 42.6

28,4 28.4

14,2 14.2

0 0

231,3164,5 231.3164.5

2 2nd

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

71,0 71.0

42,6 42.6

28,4 28.4

340,71277,5 340.71277.5

11 11

Tabelle 15 Table 15

667648 667648

Lfd. Substanzen Anzahl von Tieren in %, die der Tränke Wasser innerhalb von 12 min nicht Mittlere Reflexzeit (Wasser- Current Substances Number of animals in% that do not drink the water within 12 min Average reflex time (water

Nr. entnommen hatten entnähme) Had taken number)

Zeitintervalle in min Time intervals in min

1-2 3-4 5-6 7-8 9-10 11-12 1-2 3-4 5-6 7-8 9-10 11-12

l l

12 345 .67 8 9 12 345 .67 8 9

1 Kontrolle 1 control

(physiologische Lösung) 42,6 42,6 28,4 28,4 14,2 0 235,3±79,0 (physiological solution) 42.6 42.6 28.4 28.4 14.2 0 235.3 ± 79.0

2 Erfindungsgemässe 2 According to the invention

Verbindung I 100 85,2 56,8 56,8 56,8 56,8 513,6±189,8 Compound I 100 85.2 56.8 56.8 56.8 56.8 513.6 ± 189.8

Man untersuchte die Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I auf das transkallosale generierte Potential. The effect of the compound I according to the invention on the transcallosal generated potential was investigated.

Die Versuche wurden an durch Myorelaxanzien nicht narkotisierten und nicht bewegungsunfähigen Kaninchen durchgeführt. Das transkallosale generierte Potential wurde mit Hilfe eines rechnergestützten Neuroanalysators (Reizparameter: 25 bis 35 V, 0,1 bis 1,0 msek) registriert, aus je 20 Realisationen gemittelt und innerhalb von 200 msek nach dem Einsetzen eines Reizes analysiert. Im Laufe der Untersuchungen der Wirkung von Stoffen mit nootropem Wirkungstyp wurde gezeigt, dass die . erfindungsgemässe Verbindung I ebenso wie Nootropyl, Pyritinol und Clérégil auf das transkallosale generierte Potential des Gehirns wirkt. Die erfindungsgemässe Verbindung I ruft die Amplitudensteigerung der primären positiven PrKomponente und der primären negativen NrKomponente des transkallosalen generierten Potentials hervor, ohne dabei die Latenzzeiten dieser Komponenten zu ändern. Die Besonderheit der Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I auf das transkallosale generierte Potential gegenüber Präparaten mit nootropem Wirkungstyp besteht darin, dass ohne Wirkung die sekundäre positive P2-Komponente bleibt, welche durch Erregungsleitung nicht über den Gehirnbalken, sondern über Formatio reticularis im Mesen-zephalon bedingt ist. The experiments were carried out on rabbits not anesthetized by myorelaxaxia and not immobile. The transcallosal generated potential was registered with the help of a computer-assisted neuroanalyser (stimulus parameters: 25 to 35 V, 0.1 to 1.0 msec), averaged from 20 realizations and analyzed within 200 msec after the onset of a stimulus. In the course of the investigation of the effects of substances with a nootropic action type it was shown that the. Compound I according to the invention, as well as nootropyl, pyritinol and clérégil, acts on the transcallosal generated potential of the brain. The compound I according to the invention causes the increase in the amplitude of the primary positive component and the primary negative component of the transcallosed generated potential without changing the latency times of these components. The peculiarity of the effect of the compound I according to the invention on the transcallosal generated potential compared to preparations with nootropic action type is that the secondary positive P2 component remains which has no effect and is not caused by conduction of excitation via the brain bar, but via formatio reticularis in the mesencephalphalon .

Somit bewirkt die erfindungsgemässe Verbindung I ebenso wie andere nootrope Präparate eine leichtere Übertragung zwischen den Grosshirnhemisphären. Die Versuchsergebnisse gibt die Tabelle 16 an. Thus, the compound I according to the invention, like other nootropic preparations, causes easier transmission between the cerebral hemispheres. The test results are given in Table 16.

Tabelle 16 Table 16

Einfluss von Präparaten mit nootropem Wirkungstyp auf ver-25 schiedene Komponenten des transkallosalen generierten Potentials Influence of preparations with a nootropic action type on different components of the transcallosal generated potential

30 30th

Lfd. Current

Substanz Dosis in mg/kg Substance dose in mg / kg

Positive Negati- Pi+Nj Positive negative Pi + Nj

Positive Positives

Nr. No.

Kompo- ve Compoe

Kom Com

nente Pi Kom ponente nente Pi component

ponente component

P2 P2

Nx Nx

1 1

2 2nd

3 4 5 3 4 5

6 6

35 1 35 1

Nootropyl (300-500) Nootropyl (300-500)

++ ++

2 2nd

Pyritinol (100-150) Pyritinol (100-150)

+ +

3 3rd

Clérégil (25-50) Clérégil (25-50)

++ ++

- -

+ +

± ±

4 4th

Erfindungsgemässe According to the invention

ui ui

Verbindung I (25-50) Compound I (25-50)

+ +

0 0

++ Erhöhung über 50% + Erhöhung auf 50% - Verminderung 0 kein Effekt ++ increase over 50% + increase to 50% - decrease 0 no effect

45 ' 45 '

Tabelle 17 Table 17

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf Krämpfe, so ausgelöst durch Pentylentetrazol (140 mg/kg subkutan) in Mäuseversuchen Influence of the compound I according to the invention on convulsions, triggered by pentylenetetrazole (140 mg / kg subcutaneously) in mouse experiments

Präparat preparation

Die antikonvulsive Wirkung der erfindungsgemässen Verbindung I schätzte man nach der Fähigkeit der Substanz ein, Krämpfe und Tod von Mäusen, ausgelöst durch Krampfgifte Pentylentetrazol (140 mg/kg subkutan), Thiosemikarbazid (28 mg/kg intraperitoneal), Bikukoline (2 mg/kg subkutan) und durch maximalen Elektroschock, zu verhindern. Der antikonvulsive Effekt der erfindungsgemässen Verbindung I nach allen angewendeten Testen kam nur in einer Dosis von 200 mg/kg zum Ausdruck und trat bei 30% der Tiere auf. Die erfindungsgemässe Verbindung I verlängerte ausserdem in einer Dosis von 100 mg/ kg die Latenzzeit der durch Bikukoline hervorgerufenen Krämpfe. Mit der Steigerung der Dosis auf400 mg/kg verschwand der antikonvulsive Effekt der Substanz (Versuchsergebnisse sind in Tabellen 17,18,19, 20 dargestellt). The anticonvulsant activity of the compound I according to the invention was estimated based on the ability of the substance to cause cramps and death in mice, triggered by convulsive poisons pentylene tetrazole (140 mg / kg subcutaneously), thiosemicarbazide (28 mg / kg intraperitoneally), bikukolines (2 mg / kg subcutaneously) ) and by maximum electric shock. The anticonvulsive effect of the compound I according to the invention after all the tests used was only expressed in a dose of 200 mg / kg and occurred in 30% of the animals. Compound I according to the invention also prolonged the latency of the cramps caused by bikukolins in a dose of 100 mg / kg. As the dose increased to 400 mg / kg, the anticonvulsant effect of the substance disappeared (test results are shown in Tables 17, 18, 19, 20).

55 55

Dosis in mg/kg tonische Extension der erfindungs- und Tod von Tieren gemässenVer- Dose in mg / kg tonic extension of the invention and death of animals according to the

bindungl(peri- absolute in % binding (peri-absolute in%

toneal) Angaben toneal) information

Pentylentetrazol 60 Erfindungsgemässe Verbindung+ Pentylenetetrazole 60 Compound + according to the invention

Pentylentetrazol 50 Pentylene tetrazole 50

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung+ Connection +

Pentylentetrazol 200 Pentylene tetrazole 200

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung+ Connection +

Pentylentetrazol 400 Pentylene tetrazole 400

65 65

9/10 90 9/10 90

5/6 83 5/6 83

4/6 66 4/6 66

6/6 100 6/6 100

667648 667648

12 12

Tabelle 18 Table 18

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf Krämpfe, ausgelöst durch maximalen Elektroschock bei Mäusen Influence of the compound I according to the invention on cramps, triggered by maximum electric shock in mice

Präparat Dosis in Schutzeffekt mg/kg (peritoneal) Preparation dose in protective effect mg / kg (peritoneal)

Tonische Extension absolute in % Angaben Tonic extension absolute in%

Tod von Mäusen absolute in % Angaben Death of mice absolute in%

Erfindungsgemässe Verbin Verbin according to the invention

dung 1+maximaler Elektro- dung 1 + maximum electrical

schock 50 Erfindungsgemässe Verbin schock 50 Verbin according to the invention

0/6 0/6

0 0

0/6 0/6

0 0

dung I+maxi-maler Elektro dung I + maxi-painter Elektro

schock 200 shock 200

2/6 2/6

33 33

4/6 4/6

66 66

Erfindungsgemässe Verbin Verbin according to the invention

dung 1+maximaler Elektro- dung 1 + maximum electrical

schock 400 shock 400

0/6 0/6

0 0

2/6 2/6

33 33

Tabelle 19 Table 19

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf Krämpfe, ausgelöst durch Thiosemikarbazid (28 mg/kg intraperintoneal) in Mäuseversuchen Influence of the compound I according to the invention on convulsions, triggered by thiosemicarbazide (28 mg / kg intraperintoneal) in mouse experiments

Präparat preparation

Dosis in mg/kg derTod von Mäusen erfindungsgemäs-'senVerbindung! absolute in% (intraperitoneal) Angaben Dose in mg / kg of the death of mice according to the invention! absolute in% (intraperitoneal) data

Thiosemikarbazid Thiosemicarbazide

10/10 10/10

100 100

Erfindungsgemässe Verbindung 1+ Thiosemikarbazid Compound 1+ thiosemicarbazide according to the invention

25 25th

7/10 7/10

70 70

50 50

7/10 7/10

70 70

100 100

7/10 7/10

70 70

Tabelle 20 Table 20

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf Krämpfe, Präparat ausgelöst durch Bikukoline (2 mg/kg subkutan) in Mäuseversuchen 55 Influence of the compound I according to the invention on convulsions, preparation triggered by bikukolines (2 mg / kg subcutaneously) in mouse experiments 55

Im Falle der erfindungsgemässenVerbindung I in Dosen von 25,50,100 mg/kg wurde der Einfluss auf den arekolinbedingten Tremor (26 mg/kg subkutan) nicht nachgewiesen. Die Applikation der erfindungsgemässen Verbindung I in Dosen von 100, 5 200 mg/kg führte in hohem Masse dazu, dass die durch 5-Hydroxytryptophan (200 mg/kg intraperitoneal) hervorgerufene Hyperkinese von Mäusen (Kopfschütteln) vermieden wurde. Die Versuchsergebnisse zeigen Tabellen 21,22. In the case of compound I according to the invention in doses of 25.50, 100 mg / kg, the influence on the tremor-related tremor (26 mg / kg subcutaneously) was not demonstrated. The application of the compound I according to the invention in doses of 100.5 200 mg / kg to a large extent prevented the hyperkinesis caused by 5-hydroxytryptophan (200 mg / kg intraperitoneally) in mice (shaking the head). The test results are shown in Tables 21, 22.

io Der antiaggressive Effekt der erfindungsgemässen Verbindung an einem Modell, erzeugt experimentell durch elektrischen Schmerzreiz (Stromstärke 0,45 mA) über Elektrodenboden bei einem Paar Mäuse, trat im Falle der Gabe der Substanz in einer Dosis von 200 und 400 mg/kg auf. Es kam dabei zur Verminde-15 rung der Anzahl von Anfällen bei Paar Mäuse um das 1,5- bis 2fache. Die Versuchsergebnisse zeigt die Tabelle 23. The anti-aggressive effect of the compound according to the invention on a model, experimentally generated by electrical pain stimulation (current strength 0.45 mA) via the electrode base in a pair of mice, occurred when the substance was administered in a dose of 200 and 400 mg / kg. The number of seizures in pairs of mice was reduced by 1.5 to 2 times. The test results are shown in Table 23.

Die erfindungsgemässe Verbindung I in der Dosis von 50 bis 400 mg/kg übte auf das Orientierungs- und Forschungsverhalten 20 im Test auf das Klettern auf ein Netz einen wesentlichen Einfluss nicht aus und rief keine Störung der Bewegungskoordination im Test eines Drehstabs hervor. Die Versuchsergebnisse sind in Tabellen 24 und 25 angegeben. The compound I according to the invention in the dose of 50 to 400 mg / kg did not have a significant influence on the orientation and research behavior 20 in the test on climbing onto a net and did not cause any disturbance of the movement coordination in the test of a torsion bar. The test results are given in Tables 24 and 25.

25 Gegenüber dem nootropen Präparat Nootropyl, welches als antiamnestisches und antihypoxisches Mittel zur Verwendung kommt, besitzt also die erfindungsgemässe Verbindung I im Tierexperiment eine Reihe von Vorteilen. Die erfindungsgemässe Verbindung I ist dem Nootropyl an Wirksamkeit bedeu-30 tend überlegen und als Therapeutikum weitverbreitet. An ihrer antiamnestischen Wirkung abhängig von der Amnesieart (Amnesie, hervorgerufen durch Schock, Skopolamin, Deprivation der paradoxen Phase des Schlafs und Isolation) übertrifft sie Nootropyl dosismässig um das 6- bis lOfache und begünstigt eine 35 längere Aufrechterhaltung der Gedächtnisspur. Compared to the nootropic preparation nootropyl, which is used as an anti-amnestic and anti-hypoxic agent, compound I according to the invention therefore has a number of advantages in animal experiments. Compound I according to the invention is significantly more effective than nootropyl and is widely used as a therapeutic agent. In terms of its antiamnestic effect, depending on the type of amnesia (amnesia caused by shock, skopolamine, deprivation of the paradoxical phase of sleep and isolation), it exceeds Nootropyl dose-wise by six to tenfold and favors a longer maintenance of the memory trace.

Was den antihypoxischen Effekt anbetrifft, so ist die erfindungsgemässe Verbindung I dem Nootropyl nicht nur an der Wirksamkeit (um das 5- bis lOfache) überlegen, sondern besitzt 40 auch ein breiteres Wirkungsspektrum, indem sie die Überlebensdauer unter Bedingungen der hypobarischen Hypoxie (bei der Nootropyl schwach wirksam ist), der Hypoxie unter Hyperkapnie, der hemischen Hypoxie verlängern kann. Die erfindungsgemässe Verbindung I ist schwach toxisch und weist keine Neben-45 Wirkungen von Myorelaxationscharakter auf. As far as the antihypoxic effect is concerned, the compound I according to the invention is not only superior to the nootropic in terms of activity (by 5 to 10 times), but also has a broader spectrum of activity by increasing the survival time under conditions of hypobaric hypoxia (in the case of nootropic is weakly effective), hypoxia under hypercapnia, prolonging hemic hypoxia. Compound I according to the invention is slightly toxic and has no side effects of myorelaxation character.

Tabelle 21 Table 21

50 Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf den arekolinbedingten Tremor (26 mg/kg subkutan) bei Mäusen 50 Influence of the compound I according to the invention on the tremor-related tremor (26 mg / kg subcutaneously) in mice

Dosis in mg/kg der Tremordauer erfindungsgemässen in min Verbindung I (intraperitoneal) Dose in mg / kg of the tremor duration according to the invention in minutes of compound I (intraperitoneal)

Präparat Dosis in mg/kg Latenzzeit von Tod von Mäusen der erfin- Krampfanfall Arekolin dungsgemäs- Erfindungsgemässe sen Verbin- 60 Verbindung 1+ Preparation dose in mg / kg latency period of death of mice the invented seizure arekolin according to the invention- according to the connection 60 compound 1+

dung (intra- absolute in % Arekolin 25 dung (intra-absolute in% Arekolin 25

Per'tonea0 Angaben Erfindungsgemässe Per'tonea0 information according to the invention

Bikukoline 2,6±0,97 10/11 90,9 Verbindung 1+ Bikukoline 2.6 ± 0.97 10/11 90.9 connection 1+

Erfindungs- ^°ln ^0 Invention ^ ° ln ^ 0

gemässe 65 Erfindungsgemässe according to 65 according to the invention

Verbindung Verbindung 1+ Connection connection 1+

I+Bikukoline 100 11,9±2,93 7/10 70 I + Bikukoline 100 11.9 ± 2.93 7/10 70

Arekolin Arekolin

100 100

12,33+5,0 15,77±5,0 9,4±4,1 13,04±3,18 12.33 + 5.0 15.77 ± 5.0 9.4 ± 4.1 13.04 ± 3.18

13 13

667648 667648

Tabelle 22 Table 22

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf den Effekt von 5-Hydroxytriptophan (200 mg/kg intraperitoneal) (Test des Kopfschütteins) in Mäuseversuchen Influence of the compound I according to the invention on the effect of 5-hydroxytriptophan (200 mg / kg intraperitoneally) (test of head shaking) in mouse experiments

Präparat preparation

Dosis in mg/ Dose in mg /

Anzahl number

Verände Changes

kg der erfin von Schüt rungsgrad kg the inventor of the degree of protection

dungsgemäs telbewe des Effekts according to the effect

sen Verbin- connection

gungen gung

dungl (in dungl (in

traperito traperito

neal) neal)

5-Hydroxytriptophan 5-hydroxytripophane

26 26

1 1

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung 1+ Connection 1+

5-Hydroxytriptophan 5-hydroxytripophane

50 50

28 28

1,07 1.07

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung 1+ Connection 1+

5-Hydroxytriptophan 5-hydroxytripophane

100 100

16 16

0,57 0.57

5-Hydroxytriptophan 5-hydroxytripophane

28 28

1 1

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung 1+ Connection 1+

5-Hydroxytriptophan 5-hydroxytripophane

200 200

11 11

0,39 0.39

Tabelle 23 Table 23

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf die experimentell hervorgerufene Aggressivität von Mäusen Influence of the compound I according to the invention on the experimentally induced aggressiveness of mice

Präparat preparation

Dosis in mg/kg Dose in mg / kg

Anzahl von Anfällen bei einem Paar Mäuse innerhalb von 2 min Number of seizures in a pair of mice within 2 min

Kontrolle control

_ _

11,6±3,2 11.6 ± 3.2

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

50 50

10,8±4,2 10.8 ± 4.2

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

100 100

9,6±3,4 9.6 ± 3.4

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

200 200

7,4±3,4 7.4 ± 3.4

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

400 400

5,0±1,5 5.0 ± 1.5

Tabelle 24 Table 24

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf das Orientie-rungs- und Forschungsverhalten von Mäusen (Netz) Influence of the compound I according to the invention on the orientation and research behavior of mice (network)

Substanz substance

Effekt effect

Dosis in mg/kg absolute Angaben in % Dose in mg / kg absolute data in%

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

50 50

0,10 0.10

0 0

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

100 100

2/10 2/10

20 20th

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

200 200

2/16 2/16

12,6 12.6

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

400 400

3/16 3/16

18,9 18.9

Tabelle 25 Table 25

Einfluss der erfindungsgemässen Verbindung I auf die Bewegungskoordination im Test eines Drehstabs bei Mäusen Influence of the compound I according to the invention on the coordination of movements in the test of a torsion bar in mice

Substanz substance

Effekt effect

Dosis in mg/kg absolute Angaben in % Dose in mg / kg absolute data in%

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

50 50

0,10 0.10

0 0

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

100 100

0/10 0/10

0 0

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

200 200

0/10 0/10

0 0

Erfindungsgemässe According to the invention

Verbindung I Compound I

400 400

0/10 0/10

0 0

Die erfindungsgemässen Verbindungen N-Nikotinoylaminosäuren erhält man nach folgendem Schema: The compounds N-nicotinoylamino acids according to the invention are obtained according to the following scheme:

MHgCHCCH^COOH N B*" MHgCHCCH ^ COOH N B * "

CONHCHCHgCHgCOOH CONHCHCHgCHgCOOH

N R" NO"

worin R" = OH, Br, R = H, COOH bedeutet. where R "= OH, Br, R = H, COOH.

Rohe 5-Bromnikotinsäureäthylester bzw. rohe 5-Hydroxyni-kotinsäureäthylester werden mit Hydrazinhydrat in einem wäss-rigen oder alkoholischen Medium umgesetzt. Die gewonnenen Hydrazide der 5-Bromnikotinsäure bzw. der 5-Hydroxynikotin-säure werden durch Umsetzung mit Natriumnitrit in Gegenwart von wässriger Salzsäure zu Säureaziden umgewandelt, aus welchen dann durch Umsetzung mit L- und DL-Glutaminsäuren und y-Aminobuttersäure in einem wässrig-alkalischen Medium (pH = 8 bis 10) Endprodukte hergestellt werden. Raw 5-bromo nicotinic acid ethyl ester or raw 5-hydroxyni-cotinic acid ethyl ester are reacted with hydrazine hydrate in an aqueous or alcoholic medium. The hydrazides obtained from 5-bromo-nicotinic acid or 5-hydroxynicotinic acid are converted into acid azides by reaction with sodium nitrite in the presence of aqueous hydrochloric acid, from which acid azides are then converted into an aqueous alkaline mixture by reaction with L- and DL-glutamic acids and y-aminobutyric acid Medium (pH = 8 to 10) end products are produced.

Zum besseren Verstehen der vorliegenden Erfindung werden folgende Beispiele zur Herstellung von neuen Verbindungen N-Nikotinoylaminosäuren angeführt. For a better understanding of the present invention, the following examples are given for the preparation of new compounds N-nicotinoylamino acids.

Beispiel 1 example 1

16,7 g (0,1 Mol) 5-Hydroxynikotinsäureäthylester vermischt man mit 100 ml 50%igem wässrigem Hydrazinhydrat und siedet innerhalb von 1 Stunde. Man dampft die dunkle Lösung zur Trockne ein und kristallisiert einen festen Rückstand aus Dime-thylformamid um. Die Ausbeute an Hydrazid der 5-Hydroxyni-kotinsäure beträgt 11 g (72%), Zersetzungspunkt 261 °C. Gef. in %: C 46,91; H 4,50; N 27,67; C6H7N302 Ber. in %: C 47,06; H 4,57; N 27,45 11g (0,072 Mol 5-Hydroxynikotinsäurehydrazid löst man in einem Gemisch von 17 ml konzentrierter Salzsäure (a = 1,19) und 20 ml Wassr auf, kühlt auf eine Temperatur von 0 bis minus 5 °C ab und tropft sehr langsam unter Umrühren bei dieser Temperatur 11,7 g (0,18 Mol) Natriumnitritlösung in 20 ml Wasser zu. Bei der Reaktion beginnt in dem Masse, wie die Natriumnitritlösung zugegeben wird, ein weisser voluminöser Niederschlag auszufallen. Nach der vollendeten Zugabe der 16.7 g (0.1 mol) of 5-hydroxynicotinic acid ethyl ester are mixed with 100 ml of 50% aqueous hydrazine hydrate and boiled within 1 hour. The dark solution is evaporated to dryness and a solid residue is recrystallized from dimethylformamide. The yield of hydrazide of 5-hydroxyni-cotinic acid is 11 g (72%), decomposition point 261 ° C. Found in%: C 46.91; H 4.50; N 27.67; C6H7N302 calc. in%: C 47.06; H 4.57; N 27.45 11 g (0.072 mol of 5-hydroxynicotinic hydrazide is dissolved in a mixture of 17 ml of concentrated hydrochloric acid (a = 1.19) and 20 ml of water, cooled to a temperature of 0 to minus 5 ° C. and dripped very slowly with stirring at this temperature, 11.7 g (0.18 mol) of sodium nitrite solution in 20 ml of water. In the course of the reaction, a white, voluminous precipitate begins to precipitate out as the sodium nitrite solution is added

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

667648 ] 667648]

Natriumnitritlösung wird das Gemisch noch 30 min bei 0 °C umgerührt und der Niederschlag abfiltriert. Man gibt der Mutterlauge die kalte gesättigte Natriumhydrogenkarbonatlösung zu, bis das Ausfallen vollendet wird. Niederschläge werden vereinigt und an der Luft getrocknet. Die Ausbeute an 5-Hydroxynikotin-säureazid beträgt 11,5 g (97%), Zersetzungspunkt etwa 138 °C. Sodium nitrite solution, the mixture is stirred for a further 30 min at 0 ° C. and the precipitate is filtered off. The cold saturated sodium bicarbonate solution is added to the mother liquor until the precipitation is complete. Precipitation is combined and air dried. The yield of 5-hydroxynicotinic acid azide is 11.5 g (97%), decomposition point about 138 ° C.

1,47 g (0,01 Mol) L-Glutaminsäure löst man in 10 ml In-Ätznatronlösung auf und setzt unter Umrühren portionsweise 1,64 g (0,01 Mol) 5-Hydroxynikotinsäureazid zu, indem man den pH-Wert zwischen 9 und 9,5 durch periodische Zugabe der 5n-Ätznatronlösung hält. Nach der vollständigen Auflösung von Azid wird die Lösung noch innerhalb von 1 h bei Raumtemperatur vermischt. Dann wird die Lösung auf einen pH-Wert von 4 bis 4,5 mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Man filtriert das ausgefallene Produkt ab und kristallisiert aus Wasser um. Man erhält 1,83 bis 2 gN-(5-Hydroxynikotinoyl)-L-glutaminsäure (Verbindung I) (68 bis 75%), Zersetzungspunkt 222 bis 223 °C, [a]n = 14,8° (Konz. 5; 8%ige Salzsäure). 1.47 g (0.01 mol) of L-glutamic acid is dissolved in 10 ml of caustic soda solution and, with stirring, 1.64 g (0.01 mol) of 5-hydroxynicotinic acid azide are added by changing the pH between 9 and 9.5 by periodically adding the 5n caustic soda solution. After the azide has completely dissolved, the solution is mixed within 1 h at room temperature. Then the solution is acidified to pH 4 to 4.5 with concentrated hydrochloric acid. The precipitated product is filtered off and recrystallized from water. 1.83 to 2 g of N- (5-hydroxynicotinoyl) -L-glutamic acid (compound I) (68 to 75%) are obtained, decomposition point 222 to 223 ° C., [a] n = 14.8 ° (conc. 5; 8% hydrochloric acid).

Gef. in %: C 49,37; H 4,59; N 10,25; C„H12N206 Found in%: C 49.37; H 4.59; N 10.25; C "H12N206

Ber. in %: C 49,20; H 4,48; N 10,48 Ber. in%: C 49.20; H 4.48; N 10.48

IR-Spektrum (KBr) cm'1:3278 (OH, NH), 1719 (COOH), 1655 (CONH). IR spectrum (KBr) cm'1: 3278 (OH, NH), 1719 (COOH), 1655 (CONH).

UV-Spektrum (Wasser): Xmax = 289 nm. UV spectrum (water): Xmax = 289 nm.

EPR-Spektrum (in CD3OD - D2S04, das innere Standard Hexamethyldisilazan): ô: 2,0bis2,7 (4H, Multiple«, CH2CH2COOH), 4,60 (1H, Multiple«, NCH(COOH), 8,52 (1 H, Duplett, 2-H Pyridin), 8,40 (1 H, Quartet, 4-H Pyridin), 8,80 (1 H, Duplett, (6-H, Pyridin). EPR spectrum (in CD3OD - D2S04, the internal standard hexamethyldisilazane): ô: 2.0 to 2.7 (4H, multiple «, CH2CH2COOH), 4.60 (1H, multiple«, NCH (COOH), 8.52 (1 H, doublet, 2-H pyridine), 8.40 (1 H, quartet, 4-H pyridine), 8.80 (1 H, doublet, (6-H, pyridine).

Beispiel 2 Example 2

Analog zu Beispiel 1 wird das 5-Hydroxynikotinsäureazid hergestellt. Aus 1,47 g (0,01 Mol) DL-Glutaminsäure in 10 ml 1 n-Ätznatronlösungund 1,64g (0,01 Mol) 5-Hydroxynikotinsäureazid erhält man dann unter Bedingungen, die den in Beispiel 1 beschriebenen Bedingungen ähneln, N-(5-Hydroxyni-kotinoyl)-DL-glutaminsäure (Verbindung II) in einer Ausbeute von 2 g (75%), Zersetzungspunkt 219 bis 220 °C (aus Wasser). The 5-hydroxynicotinic acid azide is prepared analogously to Example 1. 1.47 g (0.01 mol) of DL-glutamic acid in 10 ml of 1N caustic soda solution and 1.64 g (0.01 mol) of 5-hydroxynicotinic acid azide are then used to obtain N- under conditions similar to those described in Example 1. (5-hydroxyni-cotinoyl) -DL-glutamic acid (compound II) in a yield of 2 g (75%), decomposition point 219 to 220 ° C (from water).

Gef. in %: C 49,28; H 4,36; N 10,19. Found in%: C 49.28; H 4.36; N 10.19.

Beispiel 3 Example 3

Analog zu Beispiel 1 wird das 5-Hydroxynikotinsäureazid hergestellt. Aus 1,03 g (0,01 Mol) y-Aminobuttersäure in 10 ml 1 n-Ätznatronlösungund 1,64 g (0,01 Mol) 5-Hydroxynikotinsäureazid erhält man dann analog zum in Beispiel 1 beschriebenen N-(5-Hydroxynikotinoyl-y-aminobuttersäure (Verbindung III), die Ausbeute beträgt 1,98 g (89%), Schmelzpunkt 220 bis 221 °C (aus Wasser). The 5-hydroxynicotinic acid azide is prepared analogously to Example 1. From 1.03 g (0.01 mol) of y-aminobutyric acid in 10 ml of 1N caustic soda solution and 1.64 g (0.01 mol) of 5-hydroxynicotinic acid azide are then obtained analogously to the N- (5-hydroxynicotinoyl- y-aminobutyric acid (compound III), the yield is 1.98 g (89%), melting point 220 to 221 ° C (from water).

Gef. in %: C 53,56; H 5,39; N 12,18; C10H12N2O4. Found in%: C 53.56; H 5.39; N 12.18; C10H12N2O4.

Ber. in %: C 53,57; H 5,36; N 12,50. Ber. in%: C 53.57; H 5.36; N 12.50.

IR-Spektrum (KBr), cm"1: 3304 (OH, NH), 1639 (CONH). IR spectrum (KBr), cm "1: 3304 (OH, NH), 1639 (CONH).

UV-Spektrum (Wasser): Xmax = 288 nm. 5 EPR-Spektrum (in CD3OD - D2S04, das innere Standard Hexamethyldisilazan): ô 1,95 (2H,Multiplett, ß-CH2), 2,40 (2 H, Multiple«, NCH2(y-CH2), 3,43 (2 H, Multiple«, CH2COOH), 8,52 (1H, Duplett, 2-H Pyridin), 8,40 (1H, Quartet, 4-H Pyridin), 8,78 (1H, Duplett, 6-H Pyridin). UV spectrum (water): Xmax = 288 nm. 5 EPR spectrum (in CD3OD - D2S04, the internal standard hexamethyldisilazane): ô 1.95 (2H, multiplet, ß-CH2), 2.40 (2 H, multiple «, NCH2 (y-CH2), 3.43 (2 H, multiple«, CH2COOH), 8.52 (1H, doublet, 2-H pyridine), 8.40 (1H, quartet, 4-H pyridine), 8.78 (1H, doublet, 6-H pyridine).

10 10th

Beispiel 4 Example 4

5 g 5-Bromnikotinsäureäthylester vermischt man mit 50 mg Hydrazinhydrat und siedet innerhalb von 1 h. Der nach der Abkühlung ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert und aus 15 Wasser umkristallisiert. Man erhält 4,05 g (90%) 5-Bromnikotin-säurehydrazid mit Schmelzpunkt von 183 bis 184 °C. 5 g of 5-bromo-nicotinic acid ethyl ester are mixed with 50 mg of hydrazine hydrate and boiled within 1 h. The precipitate which has precipitated after cooling is filtered off and recrystallized from 15 water. 4.05 g (90%) of 5-bromo-nicotinic acid hydrazide with a melting point of 183 to 184 ° C. are obtained.

Gef. in %: N 19,23; Br 37,41; C6H6BrN30 Found in%: N 19.23; Br 37.41; C6H6BrN30

Ber. in %: N 19,44; Br 37,00. Ber. in%: N 19.44; Br 37.00.

4,5 g (0,021 Mol) 5-Bromnikotinsäurehydrazid löst man in 20 einem Gemisch von 7 ml konzentrierter Saizsäure und 3 ml Wasser auf, kühlt auf eine Temperatur von 0 bis minus 5 °C ab und tropft dieser Lösung 5,3 g (0,077 Mol) Natriumnitritlösungin 7 ml Wasser zu. Nach der vollendeten Zutropfung von Natrium-25 nitrit wird das Reaktionsgut innerhalb von 0,5 h bei 0 °C gehalten. Man filtriert den ausgefallenen voluminösen Niederschlag ab und behandelt die Mutterlauge mit einer kalten gesättigten Lösung von Natriumhydrogenkarbonat, bis das Niederschlagen vollendet wird. Niederschläge werden vereinigt, mit 30 Eiswasser gewaschen und an der Luft getrocknet. Die Ausbeute an 5-Bromnikotinsäureazid beträgt 4,1 g (88%), Zersetzungspunkt etwa 87 °C. 4.5 g (0.021 mol) of 5-bromo nicotinic acid hydrazide are dissolved in a mixture of 7 ml of concentrated acidic acid and 3 ml of water, cooled to a temperature of 0 to minus 5 ° C. and 5.3 g (0.077 Mol) of sodium nitrite solution in 7 ml of water. After the dropwise addition of sodium 25 nitrite, the reaction mixture is kept at 0 ° C. within 0.5 h. The voluminous precipitate which has precipitated is filtered off and the mother liquor is treated with a cold saturated solution of sodium hydrogen carbonate until the precipitation is complete. Precipitation is combined, washed with 30 ice water and air dried. The yield of 5-bromo nicotinic acid azide is 4.1 g (88%), decomposition point about 87 ° C.

Die Lösung von 1,47 g (0,01 Mol) L-Glutaminsäure in 10 ml 1 n-Ätznatronlösung behandelt man mit kleinen Portionen von 35 2,27 g (0,01 Mol) 5-Bromnikotinsäureazid bei einem pH-Wert von 9 bis 9,5. Das Isolieren erfolgt analog zum Beispiel 1. Man erhält 2,42 g (73 % ) (Verbindung IV) mit einem Schmelzpunkt von 185 bis 186 °C (aus Wasser), [a]p=8,6°(5,8%igeSalzsäure). The solution of 1.47 g (0.01 mol) of L-glutamic acid in 10 ml of 1N caustic soda solution is treated with small portions of 35 2.27 g (0.01 mol) of 5-bromo nicotinic acid azide at a pH of 9 to 9.5. Isolation is carried out analogously to Example 1. 2.42 g (73%) (compound IV) with a melting point of 185 to 186 ° C. (from water) are obtained, [a] p = 8.6 ° (5.8% hydrochloric acid).

Gef. in %: C 39,71; H 3,11; N8,23; Br 24,36, CnHnBrN205- Found in%: C 39.71; H 3.11; N8.23; Br 24.36, CnHnBrN205-

Ber. in %: C 39,89; H 3,32; N 8,46; Br 24,15. Ber. in%: C 39.89; H 3.32; N 8.46; Br 24.15.

IR-Spektrum (KBr), cm1:3372 (NH), 1714(COOH), 1646 (CONH). IR spectrum (KBr), cm1: 3372 (NH), 1714 (COOH), 1646 (CONH).

UV-Spektrum (Wasser): ^ = 276 nm. UV spectrum (water): ^ = 276 nm.

EPR-Spektrum (in CD3OD - D2S04, das innere Standard Hexamethyldisilazan): 62,0 bis 2,7 (4 H, Multiple«, CH2CH2COOH), 4,60 [1H, Multiple«, NCH(COOH)], 9,04 (1H, Duplett, 2-H Pyridin), 8,78 (1H, Quartet, 4-HPyridin), 9,00 (1 H, Duplett, 6-H Pyridin). EPR spectrum (in CD3OD - D2S04, the internal standard hexamethyldisilazane): 62.0 to 2.7 (4 H, multiple ", CH2CH2COOH), 4.60 [1H, multiple", NCH (COOH)], 9.04 (1H, doublet, 2-H pyridine), 8.78 (1H, quartet, 4-HPyridine), 9.00 (1 H, doublet, 6-H pyridine).

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