CH654840A5

CH654840A5 - Compound having an antibiotic activity

Info

Publication number: CH654840A5
Application number: CH546683A
Authority: CH
Inventors: Alberto Bertelli
Original assignee: Schering Spa
Priority date: 1983-10-07
Filing date: 1983-10-07
Publication date: 1986-03-14

Abstract

A novel salt of the macrolide antibiotic iosamycin with (-)-cis-1,4-epoxypropionyl-phosphonic acid is described, of the formula (I) <IMAGE> The salt I prepared from iosomycin base and phosphomycin possesses advantageous microbiological and pharmacokinetic properties.

Description

La presente invenzione si riferisce a un sale dell'antibiotico macrolidico Josamicina con acido (—)-cis-l,4-epossipropioniI-fosfonico, altresì noto come fosfomicina. The present invention relates to a salt of the macrolide antibiotic Josamicin with (-) - cis-1, 4-epoxypropionI-phosphonic acid, also known as fosfomycin.

La Josamicina, da tempo nota e impiegata largamente in terapia, è stata descritta nella domanda di brevetto tedesca pubblicata n. 1 492 035. Le sue proprietà farmacologiche sono state riassunte su Drugs of Today Voi. 13, 8, (1977). Anche la fosfomicina è da tempo impiegata come agente antibatterico: essa viene prodotta per sintesi (Brevetti belgi n. 723 072 e 723 073) o per fermentazione da un ceppo di Streptomyces fradiae (Brevetto belga n. 718 507). Josamicin, long known and widely used in therapy, has been described in the published German patent application no. 1 492 035. Its pharmacological properties have been summarized in Drugs of Today Vol. 13, 8, (1977). Phosphomycin has also been used for some time as an antibacterial agent: it is produced by synthesis (Belgian patents No. 723 072 and 723 073) or by fermentation from a strain of Streptomyces fradiae (Belgian patent No. 718 507).

Si è ora trovato che il sale della Josamicina con la fosfomicina, avente la formula (I) seguente: Josamicin salt with phosphomycin has now been found to have the following formula (I):

CH3—CH CH--P03H: Jos® (I) CH3 — CH CH - P03H: Jos® (I)

in cui, per brevità, la formula di struttura della Josamicina non è riportata per esteso ma è abbreviata con la sigla Jos, è dotato di sorprendenti e favorevoli caratteristiche farmacocinetiche. in which, for brevity, the structural formula of Josamicin is not reported in full but is abbreviated with the abbreviation Jos, it has surprising and favorable pharmacokinetic characteristics.

In particolare, il sale I è dotato di elevato assorbimento per via orale e consente il raggiungimento di livelli ematici e tessutali di Josamicina prolungati nel tempo e pressoché doppi rispetto a quelli ottenibili dalla somministrazione di equivalenti quantità di Josamicina base o propionato. Inoltre il prodotto presenta un'elevata solubilità in acqua, tale da consentire la somministrazione anche per via parenterale. In particular, the salt I has high oral absorption and allows the achievement of blood and tissue levels of Josamicina prolonged over time and almost double compared to those obtainable by the administration of equivalent quantities of Josamicina base or propionate. Furthermore, the product has a high solubility in water, such as to allow administration also by parenteral route.

II composto oggetto dell'invenzione è inoltre dotato di bassa tossicità mentre lo spettro antibatterico è sovrapponibile a quello della Josamicina. The compound object of the invention is also endowed with low toxicity while the antibacterial spectrum is superimposable to that of Josamycin.

Ne consegue una notevole efficacia terapeutica nelle infezioni sostenute da germi sensibili alla Josamicina. The result is a remarkable therapeutic efficacy in infections sustained by germs sensitive to Josamicin.

Costituiscono pertanto oggetto dell'invenzione anche composizioni farmaceutiche contenenti come principio attivo il sale di formula I oltre ad eventuali eccipienti di impiego convenzionale in tecnica farmaceutica. Therefore, pharmaceutical compositions containing the salt of formula I as well as any excipients of conventional use in the pharmaceutical technique are also the object of the invention.

Il composto dell'invenzione può essere formulato sotto forma di compresse, di capsule o di granulato per somministrazione orale, di supposte per la somministrazione rettale, sotto forma di pomata par uso topico o di soluzione estemporanea per uso parenterale. Il nuovo sale può variare nelle precedenti formulazioni in quantità comprese fra 10 mg e 1500 mg. The compound of the invention can be formulated in the form of tablets, capsules or granules for oral administration, suppositories for rectal administration, in the form of ointment for topical use or of extemporaneous solution for parenteral use. The new salt can vary in the previous formulations in quantities ranging from 10 mg to 1500 mg.

Esempi non limitativi delle formulazioni secondo l'invenzione sono costituiti da: Non-limiting examples of the formulations according to the invention consist of:

capsule, compresse, confetti contenenti 125-500-1000 mg di prodotto attivo; supposte contenenti 0,25-0,5-1-2 g di prodotto attivo; pomata, crema, lozione contenente 10-25% di prodotto attivo; fiale per uso parenterale contenenti 500-2000 mg di prodotto attivo. capsules, tablets, sugared almonds containing 125-500-1000 mg of active product; suppositories containing 0.25-0.5-1-2 g of active product; ointment, cream, lotion containing 10-25% of active product; vials for parenteral use containing 500-2000 mg of active product.

Le dosi di prodotto somministrabile giornalmente variano secondo le necessità terapeutiche da 1-2 capsule, confetti, compresse 3-4 volte al giorno; 1-3 supposte al giorno; 3-6 cucchiaini di granulato al giorno; 1-2 o più fiale al giorno da 2-5-10 cc per via intramuscolare, endovenosa o per perfusione lenta due o più volte al giorno. The doses of product that can be administered daily vary according to the therapeutic needs from 1-2 capsules, sugared almonds, tablets 3-4 times a day; 1-3 suppositories per day; 3-6 teaspoons of granules per day; 1-2 or more 2-5-10 cc ampoules per day intramuscularly, intravenously or by slow perfusion two or more times a day.

II composto dell'invenzione è preparato convenientemente da Josamicina base e fosfomicina acido (ottenibile dalla fosfomicina sodica per trattamento con resine a scambio ionico) in acetone. The compound of the invention is conveniently prepared from Josamicin base and phosphomycin acid (obtainable from sodium phosphomycin by treatment with ion exchange resins) in acetone.

L'esempio seguente illustra il metodo di preparazione secondo l'invenzione, senza peraltro limitarla in alcun modo. The following example illustrates the preparation method according to the invention, without however limiting it in any way.

Esempio a) Grammi 1,1 (mol. 0,006) di fosfomicina disodica, vengono sciolti in 50 mi di metanolo; si aggiungono 10 g di Amberlite 200 e si lascia sotto agitazione per circa 10 minuti. Example a) 1.1 grams (0.006 mol) of disodium phosphomycin are dissolved in 50 ml of methanol; 10 g of Amberlite 200 are added and it is left under stirring for about 10 minutes.

Si filtra ed il filtrato è evaporato a pressione ridotta. Si ottiene così la fosfomicina acido come residuo oleoso. It is filtered and the filtrate is evaporated under reduced pressure. The acid phosphomycin is thus obtained as an oily residue.

b) Il residuo oleoso ottenuto in a) è sciolto in 10 mi di acetone; a tale soluzione si aggiunge una soluzione in 50 mi di acetone di Josamicina base (5,0 g; mol. 0,006). Si lascia sotto agitazione per circa 10 minuti e quindi si evapora il solvente a pressione ridotta. b) The oily residue obtained in a) is dissolved in 10 ml of acetone; to this solution is added a solution in 50 ml of Josamicin acetone base (5.0 g; 0.006 mol). The mixture is left under stirring for about 10 minutes and then the solvent is evaporated under reduced pressure.

Si ottiene un residuo cristallino che viene lavato con etere etilico anidro. A crystalline residue is obtained which is washed with anhydrous ethyl ether.

Si filtra e si ottiene un prodotto cristallino bianco (6 g). P.f. = 149-158°C; IR (nujol muli): 3450, 1730, 1600, 1510, 1460 cm-1; NMR (DMSO-d6; 60 MHz, standard interno TMS): 0,99 (m), 2,01 (s), 2,4 (s), 3,4 (s), 4,15 (s), 5 (s), 9,6 (s) 8. It is filtered and a white crystalline product (6 g) is obtained. M.P. = 149-158 ° C; IR (nujol muli): 3450, 1730, 1600, 1510, 1460 cm-1; NMR (DMSO-d6; 60 MHz, internal TMS standard): 0.99 (m), 2.01 (s), 2.4 (s), 3.4 (s), 4.15 (s), 5 (s), 9,6 (s) 8.

Sul prodotto così ottenuto sono state condotte prove di tossicità acuta, cronica, teratogenesi, farmacocinetica e di attività antibatterica. Acute, chronic toxicity, teratogenesis, pharmacokinetics and antibacterial activity tests were carried out on the product thus obtained.

PROVE TOSSICOLOGICHE Prove di tossicità acuta TOXICOLOGICAL TESTS Acute toxicity tests

È stata determinata la DL50 del prodotto sia nel topo che nel ratto (topi di ambedue i sessi, ceppo Swiss e ratti di ambedue i sessi, ceppo Wistar) dopo sua somministrazione per via orale oppure per via endovenosa. The LD50 of the product was determined both in the mouse and in the rat (mice of both sexes, Swiss strain and rats of both sexes, Wistar strain) after its administration orally or intravenously.

Per somministrazione endovenosa la DL50 calcolata secondo il metodo di Litchfield e Wilcoxon è risultata essere pari a 418 mg/kg nel ratto e pari a 386 mg/kg nel topo. For intravenous administration the LD50 calculated according to the Litchfield and Wilcoxon method was found to be equal to 418 mg / kg in the rat and equal to 386 mg / kg in the mouse.

Per via orale non si è potuto invece determinare la DL50 sopportando gli animali senza venire a morte fino ad oltre 5000 mg/kg. Orally, it was not possible to determine the LD50 bearing the animals without coming to death up to over 5000 mg / kg.

PROVE DI TOSSICITÀ CRONICA CHRONIC TOXICITY TESTS

È stato somministrato il prodotto sia per via orale che per via sottocutanea ogni giorno per tre mesi consecutivi in tre gruppi di ratti maschi del ceppo Wistar e del peso medio di 155 g di cui un gruppo serviva come controllo e gli altri due ricevevano 250 mg/kg del prodotto per via orale oppure 50 mg/kg per via sottocutanea. The product was administered both orally and subcutaneously every day for three consecutive months in three groups of male rats of the Wistar strain and the average weight of 155 g of which one group served as a control and the other two received 250 mg / kg of the product orally or 50 mg / kg subcutaneously.

Sia prima che durante e dopo questo trattamento tutti i ratti venivano sottoposti ad una serie di esami riguardanti l'accresci5 Both before and during and after this treatment all rats underwent a series of tests concerning growth 5

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mento ponderale, la crasi ematica, l'eliminazione urinaria ed i diversi parametri biochimici. Alla fine del trattamento poi tutti gli animali venivano uccisi e sottoposti ad esame anatomopato-logico. weight chin, blood crasis, urinary elimination and various biochemical parameters. At the end of the treatment then all the animals were killed and subjected to an anatomopathological-logical examination.

I risultati di tutti questi esami non hanno rivelato alcuna alterazione di carattere tossico riferibile alla somministrazione del prodotto esaminato. The results of all these tests did not reveal any toxic alterations related to the administration of the product examined.

PROVE TERATOLOGICHE E NEONATALI TERATOLOGICAL AND NEWBORN TESTS

La somministrazione del prodotto nella ratta gravida (50 mg/kg se. oppure 300 mg/kg per os nella ratta del primo al quindicesimo giorno di gravidanza) oppure nella coniglia gravida (50 mg/kg se. oppure 300 mg/kg per os dal settimo al quindicesimo giorno di gravidanza) non ha portato nelle condizioni sperimentali adottate ad alcuna alterazione del normale sviluppo embrionale o fetale. The administration of the product in the pregnant rat (50 mg / kg if or 300 mg / kg per os in the rat of the first to the fifteenth day of pregnancy) or in the pregnant rabbit (50 mg / kg if or 300 mg / kg per os from seventh to fifteenth day of pregnancy) did not lead in the experimental conditions adopted to any alteration of normal embryonic or fetal development.

Anche la crescita e !a sopravvivenza dei neonati osservata dopo trenta giorni dalla nascita appare equiparabile a quella dei controlli. The growth and survival of newborns observed thirty days after birth also appears comparable to that of controls.

PROVE DI ASSORBIMENTO E LIVELLI EMATICI ABSORPTION TESTS AND BLOOD LEVELS

Una delle caratteristiche del nuovo sale di Josamicina è quella di provocare delle concentrazioni ematiche di Josamicina all'incirca doppie di quelle ottenibili con la somministrazione di dosi equivalenti di Josamicina base o di Josamicina propionato. One of the characteristics of the new Josamicina salt is that of causing blood concentrations of Josamicina approximately double those obtainable with the administration of equivalent doses of Josamicina base or Josamicina propionate.

In prove eseguite su conigli New Zealand è stato possibile osservare che la somministrazione per via orale del nuovo sale 5 di Josamicina (dosi equivalenti a 20 e a 75 mg/kg di Josamicina base) si ottengono picchi ematici più elevati di Josamicina (0,794 mcg/ml per il composto della invenzione rispetto a 0,407 mcg/ml per la Josamicina base, in identiche condizioni sperimentali). In tests carried out on New Zealand rabbits it was possible to observe that the oral administration of the new salt 5 of Josamicina (doses equivalent to 20 and 75 mg / kg of Josamicina base) higher blood peaks of Josamicina are obtained (0.794 mcg / ml for the compound of the invention compared to 0.407 mcg / ml for Josamicin base, under identical experimental conditions).

io II nuovo sale si presenta anche capace di indurre concentrazioni ematiche di Josamicina, oltre che più elevate, anche più prolungate nel tempo, rilevabili anche dopo sei ore dalla somministrazione (0,297 mcg/ml per il composto di formula I e 0,139 mcg/ml per la Josamicina base). Il dosaggio della Josa-15 micina è stato eseguito sia con metodo biologico (metodo di Grove D.C. e Randall W.A., 1955) che con metodo cromatografico (HPLC). io The new salt is also capable of inducing blood concentrations of Josamicin, as well as higher, even more prolonged over time, detectable even after six hours from administration (0.297 mcg / ml for the compound of formula I and 0.139 mcg / ml for Josamicina base). The dosage of Josa-15 mycin was performed both with biological method (Grove D.C. and Randall W.A. method, 1955) and with chromatographic method (HPLC).

PROVE MICROBIOLOGICHE MICROBIOLOGICAL TESTS

20 20

Prove eseguite «in vitro» con il metodo della diluizione in agar ed «in vivo» nel topo infettato hanno dimostrato l'analogo spettro antibatterico del nuovo sale con quello riconosciuto per la Josamicina. Tests performed "in vitro" with the method of dilution in agar and "in vivo" in the infected mouse have demonstrated the analogous antibacterial spectrum of the new salt with that recognized for Josamicin.

v v

Claims

654 840

2. Process for preparing the compound of claim 1, characterized in that acid is reacted

(-) - cis-1, 4-epoxypropiones Iphosphonic with Josamycin base.

2

CLAIMS 1. (-) - Josamicin cis-1, 4-Epoxypropionylphosphonate of formula (I)

3. Process according to claim 2, characterized in that it operates in acetone.

Pharmaceutical compositions with antibacterial activity containing the compound of claim 1 as the active principle.

Pharmaceutical compositions according to claim 4, suitable for the administration of 10 mg / day to 10 g / day of active principle.

Pharmaceutical compositions according to claims 4 and 5, to be administered orally, rectally, topically or parenterally in the form of tablets, capsules, granules, suppositories, ointment or ampoules.