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30. Verbindung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 22 in Form eines hydrolysierbaren Esters.
31. Verbindung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 22 in Form eines hydrogenolysierbaren Esters.
32. Verbindung gemäss Anspruch 30, worin der Ester Methylester ist.
33. Verbindung gemäss Anspruch 31, worin der Ester der Benzylester ist.
34. Verbindung gemäss Anspruch 31, worin der Ester ein Methoxybenzylester ist.
35. Verbindung gemäss Anspruch 31, worin der Ester ein Nitrobenzylester ist.
36. Pharmazeutische Zusammensetzung, welche eine Verbindung gemäss Anspruch 1 und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
37. Zusammensetzung gemäss Anspruch 36, enthaltend ein pharmazeutisch annehmbares Salz einer Verbindung gemäss einem der Ansprüche 1 bis 22.
38. Zusammensetzung gemäss Anspruch 37, enthaltend das Salz gemäss Anspruch 27.
39. Zusammensetzung gemäss Anspruch 37, enthaltend das Salz gemäss Anspruch 28.
40. Zusammensetzung gemäss einem der Ansprüche 36 bis 39 in Form einer Einheitsdosis, welche 20 bis 250 mg einer Verbindung gemäss Anspruch 1 enthält.
41. Zusammensetzung gemäss einem der Ansprüche 36 bis 40, welche auch ein Penicillin enthält.
4i. Zusammensetzung gemäss einem der Ansprüche 36 bis 40. welche auch ein Cephalosporin enthält.
43. Zusammensetzung gemäss Anspruch 41 oder 42, worin das Verhältnis der Verbindung gemäss Anspruch 1 zu Penicillin oder Cephalosporin 1:10 bis 10:1 beträgt.
44. Zusammensetzung gemäss Anspruch 43, worin das Verhältnis 2:1 bis 1:5 beträgt.
45. Zusammensetzung gemäss Anspruch 43, worin das Verhältnis 1:1 bis 1:3 beträgt.
46. Zusammensetzung gemäss einem der Ansprüche 41 oder 43 bis 45 worin das Penicillin Ampicillin, Amoxycillin oder ein Derivat davon ist.
47. Zusammensetzung gemäss einem der Ansprüche 41 oder 43 bis 45, worin das Penicillin das Ampicillintrihydrat ist.
48. Zusammensetzung gemäss einem der Ansprüche 41 oder 43 bis 45, worin das Penicillin Amoxycillintrihydrat ist.
Die Erfindung betrifft Äther der Clavulansäure und deren Salze und Ester. Diese neuen Verbindungen erhöhen die antibakterielle Wirkung von Penicillinen und Cephalosporinen und sind als Wirkstoffe für Arzneipräparate geeignet.
In der BE-PS 847 045 ist offenbart, das Clavulansäure äther durch Umsetzen eines entsprechenden Calvulansäureesters mit einem veräthernden Mittel, wie einer Diazoverbindung, hergestellt werden können.
Es wurde nun festgestellt, das einige Clavulansäure-äther in guter Ausbeute durch eine einfache Reaktion herzustellen sind.
Gegenstand der Erfindung sind Verbindungen der Formel 1, deren Salze und Ester
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in der X ein Sauerstoff- oder Schwefelatom bedeutet, R' und R2 Wasserstoffatome oder niedere Alkylreste sind, die gegebenenfalls miteinander verbunden sind, R3 ein gegebenenfalls inert substituierter niederer Alkylrest ist oder mit dem Rest R2 einen gegebenenfalls inert substituierten 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet.
Der Ausdruck nieder bedeutet, dass der Rest nicht über 6 Kohlenstoffatome, insbesondere nicht über 4 Kohlenstoffatome, hat.
Inert substituiert bedeutet hier, dass der Rest mit einem oder mehreren Resten der Formeln CH2OR4 oder OR4 substituiert ist, in denen R4 ein Wasserstoffatom, ein niederer Alkyl- oder Acylrest oder ein Benzylrest ist.
Für X in Formel I bevorzugt ist das Sauerstoffatom.
Für R' geeignet ist das Wasserstoffatom, der Methyl- und Äthylrest. Für R' bevorzugt ist das Wasserstoffatom.
Bevorzugte erfindungsgemässe Verbindungen sind Verbindungen der Formel II, deren Salze und Ester
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in der R2 und R3 wie in Formel I definiert sind.
In Verbindungen der Formeln I und II, in denen R2 nicht an R' oder R3 gebunden ist, ist für R2 das Wasserstoffatom, der Methyl- und Äthylrest geeignet. Bevorzugt ist das Wasserstoffatom und der Methylrest, insbesondere das Wasserstoffatom.
Für Verbindungen der Formeln I und II, in denen R2 und R3 nicht verbunden sind, sind für R3 der Methyl-, Äthyl-, n-Propyl-, Isopropyl-, n-Butyl-, Isobutyl-, sek.-Butyl- und tert.-Butylrest geeignet. Für R3 besonders geeignet ist der Methyl-, Äthyl- oder Propylrest, insbesondere der Methylund Äthylrest, vorzugsweise der Methylrest.
In Verbindungen der Formeln I und II, in denen R2 und R3 verbunden sind, bedeutet der Rest -CR'R2-XR3, besonders zweckmässig einen Rest der Formeln a oder b
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in denen Ra, Rb, Re, Rd, Re und Rrje ein Rest R4 oder OR4 und Rg ein Rest R4 oder CH2R4 ist, wobei R4 ein Wasserstoffatom, ein niederer Alkyl- oder Acylrest oder ein Benzylrest ist, vorzugsweise ein Alkyl- oder Acylrest mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen.
Für R" bis Rf besonders geeignet ist das Wasserstoffatom, der niedere Alkylrest oder ein Rest der Formel OR5, in der R5 ein Wasserstoffatom, ein Acetyl-, Benzoyl- oder Benzylrest ist. Für Rg besonders geeignet ist das Wasserstoffatom, ein niederer Alkylrest oder ein Rest der Formel CH2OR5. Für R
bis Rf bevorzugt sind Wasserstoffatome oder niedere Alkylreste, wie der Methylrest. Besonders bevorzugt ist das Wasserstoffatom.
In Verbindungen der Formel I, in der R' und R2 verbunden sind, bedeutet der Rest -CR' R2 beispielsweise einen Cyclopentyl- oder Cyclohexylrest, der gegebenenfalls mit einem Rest R4 oder OR4 substituiert ist.
Geeignete Salze der erfindungsgemässen Verbindungen der Formel I sind Lithium-, Natrium-, Kalium-, Calciumund Magnesiumsalze sowie Ammonium- und substituierte Ammoniumsalze, wie Methylamin-, Dimethylamin-, Trimethylamin-, Pyrrolidin-Salze und andere niedere Alkylaminsalze, wie Di-alkyl-, Tri-alkylamin- und heterocyclische Aminsalze. Besonders geeignet sind Lithium-, Natrium-, Kalium- und Calciumsalze, bevorzugt sind Lithium-, Natrium- und Kaliumsalze.
Geeignete Ester der Verbindungen der Formel I sind Verbindungen der Formeln III und IV
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in denen Rl, R2, X und R3 wie in Formel I definiert sind und A' ein Alkylrest mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen ist, der gegebenenfalls mit Halogenatomen oder einem Rest der Formeln OA4, OCOA4, SA4 oder SO2A4 substituiert ist, in denen A4 ein Kohlenwasserstoffrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen ist, A2 ein Wasserstoffatom, ein Alkylrest mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen oder ein Phenylrest ist, der gegebenenfalls mit Halogenatomen oder einem Alkyl- oder Alkoxyrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen substituiert ist, und A3 ein Phenylrest ist, der gegebenenfalls mit Halogenatomen oder einem Alkyloder Alkoxyrest substituiert ist.
Für den Rest O-CR'R2-XR3 in Formel I besonders geeignet sind Reste der Formeln a bis f -CH2OCH3 (a) -CH(CH3)0CH3 (b) -CH2OC2Hs (c) -CH(CH3)0C2Hs (d) -CH(C2H5)OC2Hs (e) -c 112-O-R3 (f) In Formel f ist R3 wie in Formeln I und II definiert und bedeutet insbesondere einen niederen Alkylrest, wie den Methyl- oder Äthylrest. Bevorzugt ist der Rest a.
Besonders interessante erfindungsgemässe Verbindungen sind 9-O-Methoxymethylclavulansäure und deren Lithium-, Natrium-, Kalium-, Calcium- und Magnesiumsalz, sowie deren Salze mit Ammoniak und pharmakologisch verträglichen Aminen.
Verbindungen der Formel I, deren Salze oder Ester, können erhalten werden, indem man einen Clavulansäureester mit einer Verbindung der Formel V umsetzt Y-CR'R2-XR3 (V) in der X, R', R2 und R3 wie in Formel I definiert sind und Y ein leicht verdrängbarer Rest ist, und gegebenenfalls den entstandenen Ester in die freien Säuren oder deren Salze oder in einen anderen Ester umwandelt.
Für Y in Formel V geeignet ist das Jod-, Brom- oder Chloratom, die Methansulfonyl- oder Toluolsulfonylgruppe sowie andere Reste, die durch einen nucleophilen Rest leicht verdrängbar sind. Für Y besonders geeignet ist das Brom- oder Chloratom.
Die Reaktion erfolgt im allgemeinen in Gegenwart einer Base mit niederiger Nucleophilität, wie 2,4,6-Collidin, Kaliumcarbonat, Natriumcarbonat oder 2,6-Lutidin, bei nicht extremen Temperaturen, wie -20 bis +30"C, z.B. etwa 0 bis 20"C.
Als Lösungsmittel für diese Reaktion geeignet sind Dichlor methan, Chloroform, Dimethylformamid und Tetrahydrofuran.
In einem andern Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel I, in der X ein Sauerstoffatom, R' ein Wasserstoffatom und R2 eine Niederalkylgruppe -CHRhRi ist, worin Rh und R' Wasserstoff oder einen entsprechenden Alkylrest bedeutet und R mit R3 zu einem gegebenenfalls inert substituiertem Tetrahydrofuran- oder Tetrahydropyranring verbunden ist und R3 eine gegebenenfalls inert substituierte Niederalkylgruppe ist, setzt man einen Clavulansäureester mit einer Verbindung der Formel VI um RhRiC=CH-O-R3 (VI) in der Rh, Ri und R3 wie oben definiert sind, und wandelt gegebenenfalls den entstandenen Ester in die freie Carbonsäure oder deren Salz oder in einen andern Ester um.
Für Rh besonders geeignet ist das Wasserstoffatom.
Für R' in Formel VI besonders geeignet ist das Wasserstoffatom oder ein mit R3 verbundener Rest.
Besonders geeignete Verbindungen der Formel VI sind Verbindungen der Formel VII und Vlll.
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in denen Rb, Rc, Rd, R' und Rg wie in Formeln a und b definiert sind.
Im allgemeinen erfolgt diese Reaktion in Gegenwart einer Säure oder einer Säurevorstufe als Katalysator, z.B. Salzsäure, Phosphoroxychlorid, p-Toluolsulfonsäure oder Bortrifluorid.
Erfindungsgemässe Verbindungen der Formel 1, deren Salze oder Ester kann man auch dadurch herstellen, dass man ein Clavulansäure-ester mit einer Verbindung der Formel IX umsetzt R5-O-CHR2-OR3 (IX) in der R2 und R3 wie in Formel I definiert sind und Rs ein ter tiärer Alkylrest mit 4 bis 6 Kohlenstoffatomen ist und gegebe.
nenfalls entstandene Ester in die freie Säure oder deren Salz oder in einen anderen Ester umwandelt.
Für Rs in Formel IX besonders geeignet ist der tert.-Butylrest.
R2 und R3 in Formel IX sind vorzugsweise miteinander verbunden, so dass der Rest -CHR2OR3 einen heterocyclischen Ring bildet.
Sind R2 oder R3 nicht verbunden, so haben die Reste R2 und R3 zweckmässigerweise die gleiche Bedeutung, z.B. bedeuten beide je den Methyl- oder Äthylrest.
Für diese Reaktion verwendet man zweckmässigerweise einen Überschuss an Verbindung der Formel IX, im allgemeinen mindestens 1 Mol, vorzugsweise 2 bis 5 Mol Überschuss. Ist die Verbindung der Formel IX eine flüchtige Flüssigkeit, so kann man sie als Lösungsmittel verwenden.
Die erfindungsgemässen Verbindungen der Formel I oder deren Salz kann man auch dadurch herstellen, dass man einen entsprechenden Ester einer Verbindung der Formel I verseift.
Diese Verseifung kann entweder durch Hydrolyse oder Hydrierung erfolgen, z.B. kann man einen Ester einer milden basischen Hydrolyse unterwerfen, man erhält dann ein Salz einer Verbindung der Formel 1. Man kann einen Ester aber auch katalytisch hydrieren, wobei man die freie Säure oder, bei Gegenwart einer Base, das Salz erhält. Insbesondere kann man einen niederen Alkylester, wie den Methylester, bei einem pH-Wert von 7 bis 10 durch langsame Zugabe einer entsprechenden Base hydrolysieren. Den Benzyl-, Methoxy benzyl- oder Nitrobenzylester kann man in Gegenwart eines Ubergangsmetallkatalysators, wie Palladium auf Kohle, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base, wie Natrium-, Kalium- oder Lithiumcarbonat oder Natrium- oder Kaliumbicarbonat, hydrieren.
Erfindungsgemässe Verbindungen der Formel I können aber auch mit einer Diazoverbindung oder ein Salz einer erfindungsgemässen Verbindung der Formel I kann mit einer reaktiven Halogenverbindung umgesetzt werden.
Die Erfindung betrifft ferner Arzneipräparate, die durch einen Gehalt an einer Verbindung der Formel I, deren Salz oder Ester in Kombination mit üblichen pharmakologisch verträglichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln gekennzeichnet sind.
Die Verbindungen der Formel I liegen in den erfindungsgemässen Arzneipräparaten vorzugsweise in Form eines pharmakologisch verträglichen Salzes oder eines in vivo verseifbaren Esters vor.
Die ertindungsgemässen Arzneipräparate können oral oder parenteral verabreicht werden und sind für die Behandlung von Menschen und Tieren geeignet.
Im allgemeinen liegen die erfindungsgemässen Arzneipräparate in Form von Einzeldosen mit etwa 20 bis 250 mg, insbesondere etwa 50 bis 100 mg, Wirkstoff vor. Diese Präparate werden zwei- bis sechsmal täglich, z.B. drei- bis viermal täglich, verabreicht, so dass eine tägliche Dosis etwa 60 bis
1000 mg, insbesondere etwa 200 bis etwa 1000 mg, beträgt.
Die erfindungsgemässen Arzneipräparate enthalten zweckmässigerweise noch ein Penicillin oder Cephalosporin, vorzugsweise in einem Gewichtsverhältnis von Verbindung der Formel I, deren Salz oder Ester zu Penicillin oder Cepha losporin von 1:10 bis 10:1, insbesondere 2:1 bis 1:5, z.B. 1:1 bis 1:3.
Für diese synergistischen Präparate geeignete Penicilline und Cephalosporine sind in der BE-PS 827926 beschrieben.
Besonders geeignete Penicilline sind Ampicillin, Amoxycillin und deren Vorstufen, wie deren in vivo verseifbare Ester, Ampicillin-trihydrat und Amoxycillin-trihydrat, sowie die pharmakologisch verträglichen Salze von Amoxycillin.
Für oral verabreichbare erfindungsgemässe Arzneipräparate geeignet sind Benzylpenicillin; Phenoxymethylpenicillin, Propicillin, Amoxycillin, Ampicillin, Epidllin, Cyclacillin und andere oral aktive Penicilline, deren Salze und in vivo hydrolysierbare Ester, und Aldehyd- und Ketonaddukte von Penicillinen mit 6-a-Aminoacylamido-Seitenketten sowie deren Salze. Geeignete in vivo hydrolysierbare Ester von Penicillinen sind der Acetoxymethyl-, Pivaloyloxymethyl-, a-Äthoxycarbonyloxyäthyl- und Phthalidylester von Ampicillin oder Amoxycillin und der Phenyl-, Tolylund Indanyl-a-ester von Carbenicillin und Ticarcillin sowie deren Salze.
Geeignete Aldehyd- und Ketonaddukte von Penicillinen mit einer 6-a-Aminoacylamido-Seitenkette sind die Formaldehyd- und Acetonaddukte von Metampicillin und Hetacillin sowie deren Salze.
Geeignete Ester für Infusionen und Injektionen sind die Salze von Benzylpenicillin, Phenoxymethylpenicillin, Carbenicillin, Propicillin, Ampicillin, Amoxycillin, Epicillin, Ticarcillin, Cyclacillin und von anderen bekannten Penicillinen.
Geeignete Cephalosporine für oral verabreichbare erfindungsgemässe Arzneipräparate sind Cephalexin, Cephradin, Cephaloglycin und deren Salze sowie andere bekannte Cephalosporine, deren Salze und in vivo verseifbare Ester, sowie Aldehyd- und Ketonaddukte von Cephalosporinen mit einer 7-o-Aminoacylamido-Seitenkette und deren Salze.
Geeignete Cephalosporine für Infusionen und Injektionen sind die Salze von Cephaloridin, Cephalothin, Cefazolin, Cephalexin, Cephacetril, Cephamandol, Cephapirin, Cephradin, Cephaloglycin und von anderen bekannten Cephalosporinen.
Die Beispiele erläutern die Erfindung.
Beispiel 1 9-O-Methoxymethylclavulansäure-benzylester
EMI4.1
2,89 g (0,01 Mol) Clavulansäure-benzylester (eI), 1,6 ml (1,7 g) Chlordimethylätherund 1,3 ml 2,4,6-Collidin werden bei 5"C unter Rühren in 20 ml Dichlormethan gelöst. Nach 1 Stunde bei 10"C zeigt die Dünnschichtchromatographie, dass der Clavulansäure-Benzylester fast vollständig verschwunden ist. Das Gemisch wird mit 50 ml Wasser versetzt und geschüttelt, dann getrennt (die wässrige Lösung ist stark sauer). Die Dichlormethanphase wird mit 50 ml 3prozentiger Natriumbicarbonatlösung versetzt.
Die organische Phase wird abgetrennt, über Natriumsuflat getrocknet, filtriert, ein geengt und an einer Kieselgelsäule mit Äthylacetat und Cyclohexan als Eluiermittel chromatographiert. Man erhält 1 g eines schwach gelben Öls.
γmax(Film): 1803, 1753, 1700cm-1 (C=C).
#(CDCl3): 3,01(1 H, breit, J = 17Hz, 6-ss-CH),3,33 (3 H, s, OCH3),3,50(1H,doppeltes Dublette,J =3 und 17Hz, (6α-CH),4,14 (2H, breites Dublett, J=7Hz, CHCH2O),4,57 (3H, Singulette, CH3O), 4,86(1H, breites Triplett, J =7 und 1,5Hz, CH=),5,10(1H, Dublett, J= 1,5Hz),5,69 (1H,breites Dublett, J=3Hz,5-CH),7,36 (5H,Singulett, C6H5).
Beispiel2
9-O-Methoxymethylclavulansäure-lithiumsalz
EMI5.1
0,7 g O-Methoxymethylclavulansäure-benzylester (e2) in 7 ml Tetrahydrofuran, das 0,5 ml Wasser enthält, werden über 0,2 g 1 Oprozentigem Palladium auf Kohle 1 Stunde hydriert. Aus der Lösung von e3 wird der Katalysator abfiltriert, das Filtrat wird mit 10 ml Wasser versetzt, mit Im Lithiumhydroxidlösung auf pH 7,0 neutralisiert und zur Trockene eingedampft. Man erhält farblose Kristalle, die mit Aceton behandelt, filtriert, mit Äther gewaschen und an der Luft getrocknet werden. Ausbeute: 0,45 g der Verbindung e4.
vmax (Nujol mull): 1785, 1705, 1617cm-'.
#(D2O):2,98(1H,Dublett,J= 17Hz, 6ss-CH),3,43 (1H,dop- peltes Dublett, J=17 und 3Hz, 6o-CH), 4,07 (2H, Dublett, J=8Hz, 9-CH2), ¯4,5 (unter HOD, OCH2O), 4,79(1H, Triplett, J=8Hz, 8-CH=), 4,83 (1 E, Singulett, 3-CH), 5,61(1 H, d, J=3Hz, 5-Cl:l).
Beispiel 3
9-O-Athoxymethylclavulansäure-benzylester
EMI5.2
Ein Gemisch von 5,78 g Clavulansäure-benzylester (el), 5,8 ml 2,4,6-Coliidin und 3,7 ml Chlormethyläthyläther in 100 ml Dichlormethan wird bei Raumtemperatur 2 Stunden gerührt. Das Gemisch wird mit 100 ml 2m Salzsäure gewaschen, über wasserfreiem Natriumcarbonat/Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Man erhält ein Öl, das über 50 g Kieselgel mit Cyclohexan/Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert wird. Man erhält 6,15 g der gewünschten Verbindung e5 als Öl.
[α]D20 +45,2 (c, 1,0; CHCl3).
γmax(CHCl3):1810,1755,1705,1310,1190 und 1030 cm-1.
#(CDCl3):7,28(5H, ArH), 5,61(1H, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH), 5,13 (2H,Singulett,-CH2Ar),5,03 (1H,breites Singulett, 3-CH) 4,78 (1H, breites Triplett, J=8Hz,8-CH),4,56 (2H, Singulett, -OCH2O-), 4,09 (2H, breites Dublett, J=8Hz, 9-CH2),3,52 (2H, q, J=7,5Hz, -OCH2CH3), 3,41(1 H, doppeltes Dublett, J=17Hz, J=2,5Hz,6α-CH),2,99 (1 H, Dublett, J=17Hz, 6ss-CH) und 1,18 (3H, Triplett, J=7,5Hz, OCH2CH3).
Cí8H2íNO6 Ber.: C 62,25 H 6,1 N 4,05 Gef.: C 62,2 H 6,15 N 3,8
Beispiel 4
9-O-Äthoxymethylclavulansäure-lithiumsalz
EMI5.3
Eine Lösung von 5,95 g 9-O-Äthoxymethylclavulansäurebenzylester (e5) in 80 ml Tetrahydrofuran, das 2 Tropfen Wasser enthält, wird bei Raumtemperatur und Atmosphärendruck in Gegenwart von 3,35 g 10prozentigem Palladium auf Kohle 30 Minuten hydriert. Das Gemisch wird filtriert, das Filtrat wird mit 250 ml Wasser verdünnt und mit 1 m wässriger Lithiumhydroxidlösung auf pH 7,2 neutralisiert.
Das Gemisch wird zur Trockne eingedampft, aus dem Rückstand erhält man nach dem Behandeln mit Äther 4,4 g der gewünschten Verbindung e6.
[α]D20 +34,8 (c,1,0;H2O).
γmax(KBr): 1780, 1700, 1620, 1320 und 1030cm-'.
#(D2O): 5,70(1H, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH), 4,90 (1H, Singu lett, 3-CH), 4,88 (1 H, breites Triplett, J=8Hz,8-CH),4,68 (2H,Singulett,-OCH2O-),4,17(2H, Dublett, J=8Hz, 9-CH2),3,58(2H,q,J=8Hz,-OCH2CH3), 3,52 (lH, doppeltes Dublett, J=17Hz, J'=2,5Hz,6α-CH), 3,04(1 H, Dublett, J=17Hz, 17Hz,6ss-CH) und 1,13 (3 H, Triplett, J= 8Hz, -OCH2CH3).
Beispiel 5
9-O-Methylthiomethylclavulansäure-benzylester
EMI5.4
Eine Lösung von 2,89 g (0,1 Mol) Clavulansäure-benzylester (el) und 2 ml (0,015 Mol) 2,4,6-Collidin in 10 ml Dimethoxyäthan wird mit einem Gemisch von 1,5 g Natriumjodid und 0,97 g (0,01 Mol) Chlormethylmethylsulfid in 20 ml Dimethoxyäthan bei 0 C unter Argonschutz versetzt.
Das Gemisch wird 3 Stunden bei 50 C, dann 66 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, anschliessend in 40 ml Eiswasser gegossen und dreimal mit je 40 ml Äthylacetat extrahiert. Der organische Extrakt wird mit 100 ml 5m Salzsäure und 100 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Man erhält ein Öl, das an 30 g Kieselgel mit Cyclohexan/Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert wird. Man erhält 0,4 g der Verbindung e8 als farbloses Ö1.
[α]D20 +38,3 (c,2,0;CHCL3).
#max(flüssiger Film): 1805,1750,1695,1300,1180 und 1035 cm-'.
#(CDCl3): 7,28 (5H, Singulett, ArH), 5,61 (lH, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH),5,12(2H,Singulett -CH2Ar), 5,03(1H,Sin gulett, 3-CH), 4,75 (1 H, breites Triplett, J=8Hz, 8-CH), 4,49 (2H, Singulett, -OCH2SMe),4,10 (2H, Dublett, J=8Hz, 9-CH2), 3,42(1H,doppeltes Dublett, J=17Hz, J' =2,5Hz, 6α-CH),2,99(1H,Dublett, J=17Hz, 6-CH) und 2,09 (3H, Singulett, -SCH3).
m/e (relative Intensität): 301,0968 (25, M+-MeSH), 288,0849 (10,M+-C2H5S),272,0903(5,M+-C2H5OS),230(30,M+ -C2-H5OS-C2H5OS-C2H2O) und 91(100).
Beispiel 6 9-O-Methylthiomethylclavulansäure-lithiumsalz
EMI6.1
Ein Gemisch von 0,35 g 9-O-Methylthiomethylclavulansäure-benzylester, 15 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Wasser wird in einem pH-Stat bei 24 C mit Im Lithiumhydroxidlösung auf einen konstanten pH-Wert von 10 titriert. Nach 2 Stunden wird die Zugabe von Lithiumhydroxid unterbrochen. Die Lösung wird unter vermindertem Druck auf 10 ml eingeengt, dann mit 10 ml Wasser verdünnt. Dieses wässrige Gemisch wird zweimal mit je 20 ml Äthylacetat extrahiert und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an einer Säule mit 10 g Cellulose mit Butanol/Wasser/ Äthanol im Verhältnis 5:5:1 (Oberphase) chromatographiert.
Man erhält 0,04 g der gewünschten Verbindung e9.
vmax(NujOI): 1780, 1695, 1620, 1300 und 1020 cm-'.
o(D-O): 5,80(1 H, Dublett, 3=2,5Hz, 5-CH), 5,05 (1H, Singu- lett,3-CH),4,97(1H, breites Triplett,J=8Hz,8-CH),4,73 (2H, Singulett, -OCH2SMe), 4,27 (2H, Dublett, J=8Hz, 9-CH2),3,63(1H, doppeltes Dublett,J=18Hz,J'=2,5Hz, 6α-CH),3,14(1H,Dublett,J=18Hz,6ss-CH)und 2,19 (3H, Singulett, -SCH3).
Beispiel 7 9-O-(1-Butoxy)-äthylclavulansäure-4-methoxybenzylester
EMI6.2
Eine Lösung von 1 g Clavulansäure-p-methoxybenzylester (e 10) und 1 ml Vinyl-n-butyläther in 10 ml Äthylacetat wird mit 50 mg p-Toluolsulfonsäure versetzt und 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird dann durch eine kurze Kieselgelsäule mit Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert. Das Lösungsmittel wird abgedampft, das Produkt wird durch Säulenchromatographie an Kieselgel mit Äthylacetat/Cyclohexan im Verhältnis 1:1 isoliert. Man erhält 0,848 g der gewünschten Verbindung e 11.
vmax(Film): 1805,1750,1700cm-1.
#(CDCl3): 8,0 bis 9,0 (3H, Triplett, J=7Hz),1,26 (3H, Dublett, J=6Hz), 1,10 bis 1,70 (4H, Multiplett), 2,97 (1H, Dublett, J=17Hz), 3,20 bis 2,55 (3H, Multiplett), 3,74 (3H, Singulett), 4,0 bis 4,2 (2H, Multiplett), 4,45 bis 4,75 (1 H, Mul tiplett), 4,75 (1 H, Triplett),4,99(1H,Singulett), 5,07 (2H, Singulett), 5,59(1H,Dublett,J=3Hz),6,80 (2H, Dublett, J=8Hz),7,20 (2H, Dublett, J=8Hz).
Beispiel 8 9-O-Tetrahydropyran-2' -yl-clavulansäure-benzylester
EMI6.3
1,0 g Clavulansäure-benzylester (e in 5 ml Benzol und 4 ml Dihydropyran wird mit 1 Tropfen Bortrifluorid-ätheratkomplex versetzt und über Nacht gerührt. Die Lösungsmittel werden unter vermindertem Druck abgedampft, der Rück stand wird an einer Kieselgelsäule mit Äthylacetat und Cyclohexan als Eluiermittel chromatographiert. Nach dem Abdampfen der Lösungsmittel erhält man 1,63 g der gewünschten Verbindung e12 als Öl. Dieses Öl hat eine Reinheit von etwa 80 , die Verunreinigungen sind vermutlich Polymere, die sich von dem Pyran ableiten.
vmax (flüssiger Film):1805,1755,1700cm-1.
#(CDCl3): 1,0 bis 2,1 (überschüssiges H, breites Multiplett, 3',4',5'-CH2),2,97(1H,Dublett, J=17Hz,6ss-CH),3,41 (1H, doppeltes Dublett, J=2,5 und 17Hz,6α-CH),3,6 bis 3,95 (überschüssiges H, Multiplett, 6'-CH2), 3,95 bis 4,4 (2H, Multiplett,9-CH2),4,52(1H,breites Singulett,2'-CH),4,79 (1H, breites Triplett, J=7,5Hz,8-CH),5,03(1H,Singulett, 3-CH), 5,12 (2H, Singulett, PhCH2), 5,60 (lH, Dublett, J=2,5Hz,5-CH), und 7,27 (5H, Singulett, C6Hs).
Beispiel 9
9-O-Tetrahydropyran-2' -yl-clavulansäure-lithiumsalz
EMI7.1
1,0 g 9-O-Tetrahydropyran-2-yl-clavulansäure-benzylester (el2) wird in 1 ml Tetrahydrofuran und 0,05 ml Wasser gelöst und 45 Minuten über 0,3 g 10prozentigem Palladium auf Kohle hydriert. Man erhält eine Lösung der entsprechenden Säure e13, aus der der Katalysator entfernt wird. Das Filtrat wird mit einem entsprechenden Volumen Wasser verdünnt und mit lm Lithiumhydroxidlösung auf pH 7,0 titriert. Die Lösung wird zu einem Sirup eingedampft, mit 50 ml Aceton versetzt, wieder eingedampft, mit 30 ml Aceton behandelt, abfiltriert, mit Aceton und Äther gewaschen und an der Luft getrocknet. Ausbeute: 0,46 g der gewünschten Verbindung e14.
Vmax (Nujol mull): 1783, 1790, 1700, 1620, 1625cm-1.
#(D2O): 1,16 bis 1,6 (6H, breites Multiplett,3',4',5'-CH2), 2,89(1H, Dublett, J=17Hz,6ss-CH),3,39(1H, doppeltes Dublett, J=17 und 3Hz,6α-CH),3,55 bis 3,91 (2H, Multi plett, 6'-CH2), 4,6 (2H, Dublett, J=8Hz, 9-CH2), 4,5 bis 4,9 (3H, Multiplett,2'-CH,8-CH,3-CH),5,55(1H, Dublett, J=3Hz,5-CH).
Beispiel 10
9-O-Tetrahydrofuran-2' -yl-clavulansäure-4-methoxyben- zylester
EMI7.2
Eine Lösung von 3,19 g (0,1 Mol) Clavulansäure-4-methoxybenzylester (e 10) und 4,32 g (0,3 Mol) 2-tert.-Butoxytetrahydrofuran in 30 ml trockenem Dichlormethan wird mit 1 Kristall p-Toluolsulfonsäure versetzt und 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird mit 50 ml wässriger Natriumbicarbonatlösung gewaschen und getrocknet.
Nach dem Eindampfen erhält man 3,8 g der gewünschten Verbindung eI 5.
#max (flüssiger Film): 1805, 1750, 1700, 1250, 1180 und 1025 cm-'.
#(CDCl3): 7,20 (2H, Dublett, J=9Hz, ArH), 6,80 (2H, J=9Hz, ArH), 5,59(111, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH), 5,08 (2H, Singulett, CH2Ar),5,00(1H, Singulett, 3-CH), 5,10 bis 5,00(1H, m, 2-CH), 4,65 (lH, Triplett, J=7Hz, 8-CH), 3,75 (3H, Singulett, OCH3),3,40 (2H, doppeltes Dublett, J=17Hz, J'=2,5Hz, 6o-CH), 2,99(111, Dublett, J=17Hz, 6-CH) und 1,6 bis 2,0 (4H, Multiplett, 3' und 4'-CH2).
Beispielll
9-O-Tetrahydrofuran-2-yl-clavulansäure-natriumsalz
EMI7.3
1,46 g 9-O-Tetrahydrofuran-2-yl-clavulansäure-p-meth- oxybenzylester (e 15) und 0,315 g Natriumbicarbonat in 30 ml
Tetrahydrofuran/Wasser im Verhältnis 5:1 werden bei
Raumtemperatur und Atmosphärendruck in Gegenwart von
0,5 g 10prozentigem Palladium auf Kohle 30 Minuten hydriert. Das Gemisch wird filtriert, der Feststoff wird mit wenig Wasser gewaschen. Die vereinigten Lösungen werden zur Entfernung des Tetrahydrofurans eingedampft. Die wäss rige Lösung wird mit 20 ml Äthylacetat extrahiert und gefriergetrocknet. Man erhält 0,9 g der gewünschten Verbindung e16.
#max (Nujol mull): 1785,1695,1615 (breit) cm-1.
#max(KBr): 1785,1693,1615 (sehr breit) cm-1.
#(D2O): 1,86 (4H, Multiplett, 3' und 4'-CH2), 3,02 (1H, Dublett, J=17Hz, 6p-CH), 3,51(111, doppeltes Dublett, 5=17 und 2,5Hz, 6a-CH), 3,83 (2H, Multiplett,5'-CH2), 4,11(2H, Dublett, J=8Hz,9-CH2),4,82(1H, Triplett, J=8 Hz,5-CH),4,90(1H, Singulett, 3-CH), 5,20(1H, Multi plett, 2'-CH) und 5,66(1H, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH).
Beispiel 12 9-O-( 1 -Äthoxy)-prop-1 -yl-clavulansäure-benzylester
EMI8.1
Eine gerührte Lösung von 578 mg Clavulansäure-benzylester (e 1) und 0,3 ml Äthylpropenyläther in 10 ml Äthylacetat wird mit 5 mg p-Toluolsulfonsäure versetzt, 75 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann an einer kurzen Kieselgelsäule mit Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert.
Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels wird das Produkt durch Säulenchromatographie an Kieselgel mit einem Gradienten von Cyclohexan/Äthylacetat im Verhältnis 3:1 bis auf 1:1 eluiert. Man erhält 601 mg der gewünschten Verbindung e17.
#max(Film):1805,1750 und 1700cm-1.
6(CDCl3): 0,88 (3H, Triplett, J=7Hz),1,17 (3H, Triplett, J=7Hz),1,60 (2H, breites Quintett, J=7Hz),2,99(1H, Dublett, J= 17Hz), 3,44(1H, doppeltes Dublett, J=3 und 17Hz),3,54(2H,q,J=7Hz),4,0 bis 4,2 (2H, Multiplett), 4,36 (1H,Triplett, J =6Hz),4,79(1H, breites Triplett, J=7Hz), 5,05(1H, Singulett), 5,15(211, Singulett), 5,63(1H, Dublett, J=3Hz), 7,29(5H, Singulett).
Beispiel 13
9-O-( 1 -Äthoxy)-prop- 1 -yl-clavulansäure-natriumsalz
EMI8.2
Eine Lösung von 572 mg 9-O-( 1 -Äthoxy)-prop- 1 -yl-clavulansäure-benzylester (e 17) und 128 mg Natriumbicarbonat in 22,5 ml Tetrahydrofuran und 7,5 ml Wasser wird 1 Stunde über 250 mg 10prozentigem Palladium auf Kohle hydriert.
Die Lösung wird durch Diatomeenerde filtriert und mit Wasser verdünnt. Das Tetrahydrofuran wird in einem Drehverdampfer entfernt. Die wässrige Lösung wird mit Äthylacetat extrahiert und gefriergetrocknet. Man erhält 370 mg der gewünschten Verbindung es 8.
#max(KBr): 1785 und 1615 cm-'.
#(D2O): 0,85 (3H, Triplett, J=7Hz), 1,16 (3H, Triplett, J=7Hz), 1,59 (2H, breites Quintett, J=7Hz),3,05 (1H, Dublett, J=17Hz),3,4 bis 3,85 (4H, Multiplett), 4,19 (2H, Dublett, J=7Hz),4,90(1H, breites Triplett,J=7Hz),4,93 (1H, Singulett),5,71(1H, Dublett,J=3Hz).
Beispiel 14 9-O-(2-Äthoxy)-prop-2-yl-clavulansäure-benzylester
EMI8.3
Eine gerührte Lösung von 1 g Clavulansäure-benzylester (el) und 0,5 ml Äthylisopropenyläther in 10 ml Äthylacetat wird mit 5 mg p-Toluolsulfonsäure versetzt und 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird durch eine kurze Kieselgelsäule mit Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert. Das Lösungsmittel wird abgedampft, das Produkt wird an einer Kieselgelsäule mit Cyclohexan/Äthylacetat im Verhältnis 3:1 chromatographiert. Man erhält 743 mg der gewünschten Verbindung e19.
#max(Film): 1805, 1750 und 1700 cm-'.
#(CDCl3): 1,12(3H, Triplett, J=7Hz), 1,31(6H, Singulett), 2,96(1H, Dublett, J=17Hz),3,37(2H,q,J=7Hz),3,39(1H, doppeltes Dublett, 5=3 und 17Hz), 3,9 bis 4,1(2H, Multiplett),4,73(1H,breites Triplett, J=7Hz),5,01(1H,breites Singulett),5,13(2H, Singulett), 5,60(111, Dublett, J=3Hz), 7,26 (5H, Singulett).
Beispiel 15 9-O-( 1 -Äthoxy)-cyclohexylclavulansäure-benzylester
EMI8.4
Ein gerührtes Gemisch von 578 mg Clavulansäure-benzylester (el) und 2 ml Äthylcyclohexenyläther wird mit 20 mg Quecksilbertrifluoracetat versetzt. Das Gemisch wird 90 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Die Hauptmenge des Lösungsmittels wird in einem Drehverdampfer entfernt, das Produkt wird durch Chromatographie an Kieselgel mit Cyclohexan/Äthylacetat im Verhältnis 4:1 isoliert. Man erhält 767 mg der gewünschten Verbindung e20.
#max(Film): 1805,1750,1700cm-1.
#(CDCl3): 1,14(3H, Triplett, J=7Hz), 1,2 bis 1,8(10H,Multi- plett),2,96(1H,Dublett,J=17Hz),3,37(2H,q,J=7Hz),3,43 (1H, doppeltes Dublett, J=3 und 17Hz), 3,9 bis 4,15 (2H, Multiplett),4,76(1H, breites Triplett, J=7Hz), 5,04(1H,singulett), 5,14(2H,Singulett),5,60(1H,Dublett,J=3Hz),7,27 (5H,Singulett).
Beispiel 16 9-O-Methoxymethylclavulansäure-natriumsalz
EMI9.1
6,0 g 9-O-Methoxymethylclavulansäure-p-methoxybenzylester (e7) werden in einer Druckflasche in 60 ml Äthanol gelöst und mit 1,39 g Natriumbicarbonat in 8 ml Wasser versetzt. Die Flasche wird mit Stickstoff gespült, dann werden 0,75 g I Oprozentiges Palladium auf Kohle zugesetzt. Das Gemisch wird bei einem Druck von 1,75 kg/cm2 1 Stunde hydriert. Die Dünnschichtchromatographie an Kieselgel mit Äthylacetat/Chloroform im Verhältnis 50:50 zeigt, dass die Hydrierung vollständig ist. Das Gemisch wird durch Diato meenerde filtriert, die Diatomeenerde wird mit 10 ml Wasser gewaschen Das Filtrat wird in einem Drehverdampfer zu einem gummiartigen Produkt eingedampft.
Dieses Produkt wird in 10 ml Aceton gelöst und unter starkem Schütteln mit 900 ml trockenem Diäthyläther versetzt. Man erhält einen feinen weissen Niederschlag. Die Suspension wird 2 Stunden auf 4 C gekühlt und dann filtriert. Der Feststoff wird zweimal mitje 100 ml Äther gewaschen und sofort in einem Exsiccator bei niedrigem Druck getrocknet. Man erhält 2,1 g der gewünschten Verbindung e21 als hydroskopisches schwach gelbes Pulver.
Beispiel 17
9-0-(2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-a-D-glukopyranosyl)-clavulansäure-p-methoxybenzylester
EMI9.2
Eine Lösungvon 6,38 g Clavulansäure-p-methoxybenzyl ester (el 10) in 10 ml trockenem Dimethylformamid wird trop fenweise im Verlauf von einigen Minuten zu einer gerührten
Lösung von 16,78 g a-Acetobromglukose und 5,3 ml Collidin in 50 ml trockenem Dimethylformamid bei 0 C unter Stick- stoffschutz gegeben. Das Gemisch wird über Nacht bei
Raumtemperatur gerührt, dann in 100 ml Eiswasser gegossen. Das Eiswasser wird dreimal mit je 100 ml Methyl acetat extrahiert. Der organische Extrakt wird mit 200 ml 5m
Salzsäure gewaschen, über wasserfreiem Natriumcarbonat/ Magnesiumsu'.fat getrocknet und eingedampft.
Man erhält ein Öl, das an einer Säule mit 100 g Kieselgel mit Cyclo hexan/Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert wird.
Man erhält 5,7 g der gewünschten Verbindung e22 als Öl, anschliessend 7,8 g eines Gemisches der gewünschten Verbin dung e22 und einer geringen Menge Ausgangsmaterial.
Eigenschaften des Öls: [a]D 45,8 (c 1,7, CHCl3).
vmax(CHCl3): 1805, 1745, 1700, 1230, 1175,1040 und 980 cm-'.
#(CDCl3): 7,22(211, Dublett, J=9Hz, ArH), 6,83 (2H, Dublett, J=9Hz, ArH), 5,64(1H, Dublett, J=4Hz,1-CH), 5,61(1H, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH), 5,08 (2H,s,-CH2Ar), 3,76 (3H, Singulett, -OCH3), 2,06 (9H, Singulett, CH3CO2-), und 1,68 (3H, Singulett, CH3CO2-).
m/e: 649 (M+), 621, 607, 594, 549, 403, 331, 289, 288, 271, 259,200 und 169.
C301135N015
Ber.: C 55,45 H 5,45 N 2,15
Gef.: C 55,1 H 5,4 N 1,95
Beispiel 18
9-0-(2,3 ,4,6-Tetra-O-acetyl-a-D-glukopyranosyl)-clavu- lansäure-natriumsalz
EMI10.1
Ein Gemisch von 1,3 g 9-0-(2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-a-Dglukopyranosyl)-clavulansäure-p-methoxybenzylester (e22) und 0,168 g Natriumbicarbonat in 24 ml Tetrahydrofuran/ Wasser im Verhältnis 5:1 wird bei Raumtemperatur und Atmosphärendruck in Gegenwart von 0,4 g 10prozentigem Palladium auf Kohle 15 Minuten hydriert. Das Gemisch wird filtriert, das Filtrat wird eingedampft. Man erhält 0,96 g der gewünschten Verbindung e23.
[α]D +27,7 (C,2,3,H2O).
vmax(KBr): 1785, 1740, 1690, 1615 cm-'.
#(D2O):5,83(1H,Dublett,J=5Hz,1'-CH),5,75(1H, Dublett, J=2,5Hz, 5-CH), 3,60(1H, doppeltes Dublett, J=18Hz, J'=2,5Hz, 6α-CH),3,07(1H, Dublett,J=18Hz, 6ss-CH), 2,15(911, Singulett, CH3CO2-) und 1,79 (3H, Singulett, CH3CO2-).
Beispiel 19 9-0-(2,3 ,5-Tri-O-benzyl-D-arabinofuranosyl)-clavulan- säure-p-methoxybenzylester
EMI10.2
Eine Lösung von 1,68 g 2,3,5-Tri-O-benzyl-ss-D-arabinofu- ranose, 1,06 ml Collidin und 1,29 g Tetrabutylammoniumbromid in 5 ml trockenem Dichlormethan wird mit 1,13 g Trifluormethansulfonsäure-anhydrid bei -70 C versetzt. Das Gemisch wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, dann mit einer Lösung von 0,96 g Clavulansäure-p-methoxybenzylester(el0) in 5 ml Dichlormethan versetzt. Das Gemisch wird bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, dann bei 0 C mit 10 ml 5m Salzsäure gewaschen, über wasserfreiem Natriumcarbonat/Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft.
Man erhält ein Öl, das an einer Säule mit 20 g Kieselgel und Cyclohexan-äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert wird. Man erhält 0,7 g der gewünschten Verbindung e24.
#max(CHCl3): 1805,1745 und 1700 cm-'.
#(CDCl3): 7,20 (17H, Singulett, ArH), 6,80(2H, Dublett, J=9Hz, ArH), 5,51(1H, Dublett, J=2,5Hz,5-CH), 5,30(1H, Multiplett, 1'-CH),5,05 5,05(2H, Singulett, CH2Ar), 4,98(1H, Multiplett, 3-CH), 4,48 (6H, Singulett, CH2Ar), 3,70(3H, Singulett, OCH3) und 2,90(1H, Dublett, J=17Hz, 6ss-CH).
Beispiel 20 9-O-( 1 -Butoxy)-äthylclavulansäure-natriumsalz
EMI10.3
Eine Lösung von 800 mg 9-O-(I-Butoxy)-äthylolavulan- säure-4-methoxybenzylester (el 1) und 160 mg Natriumbicarbonat in einer Lösung von 5 ml Wasser und 25 ml Tetrahydrofuran wird 20 Minuten über 400 mg I Oprozentigem Palladium auf Kohle hydriert. Die Lösung wird filtriert, die Hauptmenge des Tetrahydrofurans wird unter vermindertem Druck entfernt. Die wässrige Lösung wird zweimal mit Äthylacetat extrahiert und gefriergetrocknet. Man erhält 447 mg der gewünschten Verbindung e25.
vmax(KBr-Scheibe): 1780, 1690, 1610cm-'.
#(D2O): 0,84 (3H, Triplett, J=8Hz), 1,20(3H, Dublett, J=5Hz),1,15 bis 1,65 (4H, Multiplett), 3,01(1H,Dublett, J=18Hz), 3,45 bis 3,7(3H, Multiplett),4,15(2H,Dublett, J=8Hz), 4,65 bis 4,95 (3H, Multiplett), 5,68(1H,Dublett, J=3Hz).
Beispiel 21
9-O-(1-Äthoxy)-äthylclavulansäure-4-methoxybenzylester
EMI11.1
Eine Lösung von 1,5 g Clavulansäure-p-methoxybenzylester (e 10) und 1 ml Vinyläthyläther in 15 ml Äthylacetat wird mit 25 mg p-Toluolsulfonsäure versetzt und 15 Minuten gerührt. Das Gemisch wird durch eine kurze Kolonne mit Kieselgel mit Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert.
Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt, das Produkt wird an einer Kieselgelsäule mit Cyclohexan/ Äthylacetat im Verhältnis 3:1 als Eluiermittel chromatographiert. Man erhält 1,26 g der gewünschten Verbindung e26.
vmax(Film): 1805,1750,1700cm-1.
#(CDCl3): 1,16(3H, Triplett, J=8Hz), 1,27(3H, Dublett, J=SHz), 2,97(1H, Dublett, J= 17Hz), 3,25 bis 3,7(3H, Multi- plett), 3,75 (3H, Singulett), 4,0 bis 4,15 (2H,Multiplett),4,5 bis 4,85 (2H, Multiplett), 5,0 (lH, Singulett), 5,07(2H, Singu lett), 5,60(1H, Dublett, J=3Hz), 6,80(2H, Dublett, J=9Hz), 7,21(2H, Dublett, J=9Hz).
Beispiel 22 9-O-( 1 -Äthoxy)-äthylclavulansäure-natriumsalz
EMI11.2
Eine Lösung von 1,185 g 9-O-(1-Äthoxy)-äthylclavulansäure-4-methoxybenzylester (e26) und 254 mg Natriumbicarbonat in einem Gemisch von 5 ml Wasser und 25 ml Tetrahydrofuran wird über 400 mg lOprozentigem Palladium auf Kohle 25 Minuten hydriert. Die Lösung wird durch Diatomeenerde filtriert und dann unter vermindertem Druck eingedampft, bis die Hauptmenge des Tetrahydrofurans entfernt ist. Die wässrige Lösung wird dreimal mit Äthylacetat extrahiert und gefriergetrocknet. Das Produkt wird durch Chromatographie an einer Kieselgelsäule mit n-Butanol/ Äthanol/Wasser im Verhältnis 4:1:1 gereinigt. Nach Abdampfen der Lösungsmittel erhält man 5,89 mg der gewünschten Verbindung e27.
vmax (KBr): 1795,1695,1615 cm-1.
#(D2O): 1,23 (3H, Triplett, J=8Hz), 1,34(3H, Dublett, J=6Hz),3,11(1H, Dublett,J = 18Hz),3,45 bis 4,0(3H,Multi plett), 4,25 (2H, Dublett, J=8Hz),4,75 bis 5,1 (3H, Multiplett),5,77(1H, Dublett, 3=3Hz).
Beispiel 23 9-O-Methoxymethylclavulansäure
EMI11.3
Eine Lösung von 0,43 g 9-O-Methoxymethylclavulansäure-lithiumsalz in 25 ml Wasser wird mit 50 ml Äthylacetat überschichtet, gerührt und mit einem stark sauren lonenaustauscherharz in der H+-Form versetzt, bis der pH-Wert der wässrigen Phase unter 2,0 liegt (etwa 20 ml nasses Harz). Das Gemisch wird filtriert, das Fitlrat wird abgetrennt. Die wäss rige Phase wird dreimal mitje 30 ml Äthylacetat extrahiert.
Die Äthylacetat-Extrakte werden vereinigt, schnell über 30 g eines Molekularsiebes (Typ 3A) getrocknet, filtriert und in einem Drehverdampfer unter vermindertem Druck zu einem Öl eingedampft. Man erhält 0,3 g der gewünschten Verbindung.
#max(Film): 2500 bis 3600 (sehr breit), 1805, 1750, 1695 cm-1.
#(CDCl3): 3,00(1H, Dublett, J=l7Hz, 6ss-CH), 3,33(311, Singulett, OCH3), 3,45(1H, doppeltes Dublett, J=2,5 und 17Hz,6a-CH),4,13 (2H, Dublett, J=7Hz,9-CH2),4,58 (2H, Singulett, OCH2O), 4,88(1H, Triplett, J=7Hz, 8-CH), 5,01 (1H, Singulett, 3-C11), 5,63(1H, Dublett,J=2,511z, 5-C11).
Beispiel 24
Unter Verwendung von trockenen Bestandteilen werden in herkömmlicher Weise in einer trockenen Atmosphäre folgende Präparate hergestllt: a) Tabletten mg Methoxymethylclavulansäure-natriumsalz 150 wasserfreies Ampicillin 300 mikrokristalline Cellulose 600
Magnesiumstearat 15 b) Kapseln mg Methoxymethylclavulansäure-natriumsalz 250
Magnesiumstearat 2,5
Stärke-glycollat-natriumsalz 5,0 c) Ampullen für die Wiederaufnahme in sterilem Wasser für die sofortige Injektion mg Methoxymethylclavulansäure-natriumsalz 50
Natriumampicillin 250 Pharmakologie
Unter Verwendung von herkömmlichen Verfahren wird die Mindesthemmkonzentration von Ampicillin bei Zusatz von erfindungsgemässen Verbindungen als Inhibitor bestimmt.
a) Verbindung des Beispiels 16
Mindesthemmkonzentration von Ampicillin (pg/ml) Inhihitorkonzen- Staph. Prot. Kleb. E. coli tration( g ml) Russell C889 E70 JT39 20 - 1,0 - - 5 - 2,0 1,6 4
0,3 - 1,6 125 0 125 > 2000 1000 > 2000 b) Verbindung des Beispiels 7
Mindesthemmkonzentration von Ampicillin ( g/ml) Inhibitorkonzen- Staph. Kleb. Proteus E. coli E. coli tration(ug ml) Russell E70 C889 JT39 JT410 20 - - 15,6 > 500 62,5 5 0,15 12,5 125 500 62,5
1,25 25 - - 0 500 1000 > 2000 2000 62,5 c) Verbindung des Beispiels 20
Mindesthemmkonzentration von Ampicillin ( g/ml)
Inhibitorkon- Staph. Kleb.
Proteus E. coli zcntration(ug/ml) Russell E70 C 889 JT410 20 - - - 2000
5 (0,04) 1,6-3,1 15 > 2000
1 0,08 6-12 62,5 0 > 500 2000 > 2000 62,5 d) Verbindung des Beispiels 4
Mindesthemmkonzentration von Ampicillin (ug/ml)
Inhibitorkonzen- Staph. Kleb. Proteus E.coli E. coli tration(,ug/ml) Russell E70 C889 JT39 JT410 20 - - - - - 5 0,04 3,12 1,0 2,0 125
1 0,6 3,12 15,6 4,0 0 250 500 > 2000 1000 250 e) Blutspiegel
Nach der subkutanen Verabreichung von Methoxymethylclavulansäure-natriumsalz in einer Dosis von 10 mg/kg an Mäuse erhält man folgende Blutspiegelwerte.
Die Werte für Clavulansäure-natriumsalz sind zum Vergleich angegeben: Zeit (Minuten) 20 30 45 60 Fg/ml Methoxymethylclavulan- 3,1 3,4 1,3 0,8 säure-natriumsalz Fg/ml Clavulansäure-natrium- 4,2 2,2 0,8 0,5 salz
Nach einer oralen Verabreichung an Mäuse von Methoxymethylclavulansäure-natriumsalz in einer Dosis von 20 mg/kg erhält man folgende Blutspiegelwerte. Die Werte für Clavulansäure-natriumsalz sind zum Vergleich angegeben: Zeit (Minuten) 15 30 45 60 g/ml Methoxymethylclavulan- 10,8 7,4 2,1 1,4 säure-natriumsalz Fg/ml Clavulansäure-natrium- 3,5 2,6 1,5 0,6 salz f) Heilende Wirkung von Methoxymethylclavulansäurenatriumsalz und Amoxycillin
Die folgenden CDso-Werte werden bei intraperitonealen Infektionen mit Escherichia coli JT 39 erhalten.
Die Testverbindungen werden entweder subkutan 1 und 5 Stunden nach der Infektion oder oral 1,3 und 5 Stunden nach der Infektion verabreicht: Testverbindungen CD50(mg/kg)
Amoxycillin (subkutan) 2,5 mg/kg Methoxymethylclavulansäurenatriumsalz + Amoxycillin 6,8 Testverbindungen CDss (mg/kg)
Amoxycillin (subkutan) 2,5 mg/kg
Clavulansäure-natriumsalz +
Amoxycillin 14 1 mg/kg
Methoxymethylclavulansäure natriumsalz + Amoxycillin 23,4 1 mg/kg
Clavulansäure-natriumsalz +
Amoxycillin 40
CD50(3x mg/kg)
Amoxycillin (oral) 20 mg/kg Methoxymethylclavulansäurenatriumsalz + Amoxycillin 11 20 mg/kg Clavulansäure-natriumsalz + Amoxycillin 9
** WARNING ** beginning of DESC field could overlap end of CLMS **.
30th A compound according to any one of claims 1 to 22 in the form of a hydrolyzable ester.
31 A compound according to any one of claims 1 to 22 in the form of a hydrogenolyzable ester.
32. A compound according to claim 30, wherein the ester is methyl ester.
33. A compound according to claim 31, wherein the ester is the benzyl ester.
34. A compound according to claim 31, wherein the ester is a methoxybenzyl ester.
35. A compound according to claim 31, wherein the ester is a nitrobenzyl ester.
36. A pharmaceutical composition containing a compound according to claim 1 and a pharmaceutically acceptable carrier.
37. A composition according to claim 36 containing a pharmaceutically acceptable salt of a compound according to any one of claims 1 to 22.
38. A composition according to claim 37, containing the salt according to claim 27.
39. A composition according to claim 37, containing the salt according to claim 28.
40. Composition according to one of claims 36 to 39 in the form of a unit dose which contains 20 to 250 mg of a compound according to claim 1.
41. Composition according to one of claims 36 to 40, which also contains a penicillin.
4i. Composition according to one of Claims 36 to 40. which also contains a cephalosporin.
43. A composition according to claim 41 or 42, wherein the ratio of the compound according to claim 1 to penicillin or cephalosporin is 1:10 to 10: 1.
44. The composition of claim 43, wherein the ratio is 2: 1 to 1: 5.
45. The composition of claim 43, wherein the ratio is 1: 1 to 1: 3.
46. A composition according to any one of claims 41 or 43 to 45 wherein the penicillin is ampicillin, amoxycillin or a derivative thereof.
47. A composition according to any one of claims 41 or 43 to 45, wherein the penicillin is the ampicillin trihydrate.
48. A composition according to any one of claims 41 or 43 to 45, wherein the penicillin is amoxycillin trihydrate.
The invention relates to ether of clavulanic acid and its salts and esters. These new compounds increase the antibacterial effect of penicillins and cephalosporins and are suitable as active ingredients for medicinal products.
In BE-PS 847 045 it is disclosed that clavulanic acid ether can be prepared by reacting a corresponding calvulanic acid ester with an etherifying agent, such as a diazo compound.
It has now been found that some clavulanic acid ethers can be prepared in good yield by a simple reaction.
The invention relates to compounds of formula 1, their salts and esters
EMI2. 1
in which X represents an oxygen or sulfur atom, R 'and R2 are hydrogen atoms or lower alkyl radicals which are optionally linked to one another, R3 is an optionally inertly substituted lower alkyl radical or with the radical R2 is an optionally inertly substituted 5- or 6-membered heterocyclic radical Ring forms.
The term lower means that the remainder does not have more than 6 carbon atoms, especially not more than 4 carbon atoms.
Inertly substituted here means that the radical is substituted by one or more radicals of the formulas CH2OR4 or OR4 in which R4 is a hydrogen atom, a lower alkyl or acyl radical or a benzyl radical.
The oxygen atom is preferred for X in formula I.
The hydrogen atom, the methyl and ethyl radical are suitable for R '. The hydrogen atom is preferred for R '.
Preferred compounds according to the invention are compounds of the formula II, their salts and esters
EMI2. 2nd
in which R2 and R3 are as defined in formula I.
In compounds of the formulas I and II, in which R2 is not bonded to R 'or R3, the hydrogen atom, the methyl and ethyl radical are suitable for R2. The hydrogen atom and the methyl radical, in particular the hydrogen atom, are preferred.
For compounds of the formulas I and II in which R2 and R3 are not connected, the methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec. -Butyl and tert. -Butyl residue suitable. The methyl, ethyl or propyl radical, in particular the methyl and ethyl radical, preferably the methyl radical, is particularly suitable for R3.
In compounds of the formulas I and II in which R2 and R3 are linked, the radical -CR'R2-XR3, particularly advantageously a radical of the formulas a or b
EMI2. 3rd
in which Ra, Rb, Re, Rd, Re and Rrje is a radical R4 or OR4 and Rg is a radical R4 or CH2R4, where R4 is a hydrogen atom, a lower alkyl or acyl radical or a benzyl radical, preferably an alkyl or acyl radical up to 4 carbon atoms.
The hydrogen atom, the lower alkyl radical or a radical of the formula OR5 in which R5 is a hydrogen atom, an acetyl, benzoyl or benzyl radical is particularly suitable for R "to Rf. The hydrogen atom, a lower alkyl radical or a radical of the formula CH2OR5 is particularly suitable for Rg. For R
to Rf are preferred hydrogen atoms or lower alkyl radicals, such as the methyl radical. The hydrogen atom is particularly preferred.
In compounds of the formula I in which R 'and R2 are linked, the radical -CR' R2 means, for example, a cyclopentyl or cyclohexyl radical which is optionally substituted by a radical R4 or OR4.
Suitable salts of the compounds of the formula I according to the invention are lithium, sodium, potassium, calcium and magnesium salts and also ammonium and substituted ammonium salts, such as methylamine, dimethylamine, trimethylamine, pyrrolidine salts and other lower alkylamine salts, such as di-alkyl , Tri-alkylamine and heterocyclic amine salts. Lithium, sodium, potassium and calcium salts are particularly suitable; lithium, sodium and potassium salts are preferred.
Suitable esters of the compounds of the formula I are compounds of the formulas III and IV
EMI3. 1
in which Rl, R2, X and R3 are as defined in formula I and A 'is an alkyl radical having 1 to 8 carbon atoms, which is optionally substituted by halogen atoms or a radical of the formulas OA4, OCOA4, SA4 or SO2A4 in which A4 is a Is a hydrocarbon radical of up to 6 carbon atoms, A2 is a hydrogen atom, an alkyl radical of up to 4 carbon atoms or a phenyl radical which is optionally substituted by halogen atoms or an alkyl or alkoxy radical of up to 6 carbon atoms, and A3 is a phenyl radical which is optionally is substituted with halogen atoms or an alkyl or alkoxy radical.
Particularly suitable for the radical O-CR'R2-XR3 in formula I are radicals of the formulas a to f -CH2OCH3 (a) -CH (CH3) 0CH3 (b) -CH2OC2Hs (c) -CH (CH3) 0C2Hs (d) -CH (C2H5) OC2Hs (e) -c 112-O-R3 (f) In formula f, R3 is as defined in formulas I and II and in particular means a lower alkyl radical, such as the methyl or ethyl radical. The remainder is preferably a.
Particularly interesting compounds according to the invention are 9-O-methoxymethylclavulanic acid and its lithium, sodium, potassium, calcium and magnesium salt, and also their salts with ammonia and pharmacologically acceptable amines.
Compounds of formula I, their salts or esters, can be obtained by reacting a clavulanic acid ester with a compound of formula V Y-CR'R2-XR3 (V) in which X, R ', R2 and R3 are as defined in formula I. are and Y is an easily displaceable residue, and optionally converting the ester formed into the free acids or their salts or into another ester.
Suitable for Y in formula V are the iodine, bromine or chlorine atom, the methanesulfonyl or toluenesulfonyl group and other radicals which are easily displaceable by a nucleophilic radical. The bromine or chlorine atom is particularly suitable for Y.
The reaction is generally carried out in the presence of a base with low nucleophilicity, such as 2,4,6-collidine, potassium carbonate, sodium carbonate or 2,6-lutidine, at non-extreme temperatures, such as -20 to +30 "C, e.g. B. about 0 to 20 "C.
Dichloromethane, chloroform, dimethylformamide and tetrahydrofuran are suitable as solvents for this reaction.
In another process for the preparation of compounds of the formula I in which X is an oxygen atom, R 'is a hydrogen atom and R2 is a lower alkyl group -CHRhRi, in which Rh and R' are hydrogen or a corresponding alkyl radical and R is an optionally inertly substituted R3 Tetrahydrofuran or tetrahydropyran ring is connected and R3 is an optionally inertly substituted lower alkyl group, a clavulanic acid ester is reacted with a compound of the formula VI to RhRiC = CH-O-R3 (VI) in which Rh, Ri and R3 are as defined above, and converted if necessary, the resulting ester into the free carboxylic acid or its salt or into another ester.
The hydrogen atom is particularly suitable for Rh.
Particularly suitable for R 'in formula VI is the hydrogen atom or a radical linked to R3.
Particularly suitable compounds of the formula VI are compounds of the formula VII and VIII.
EMI3. 2nd
in which Rb, Rc, Rd, R 'and Rg are as defined in formulas a and b.
In general, this reaction takes place in the presence of an acid or an acid precursor as a catalyst, e.g. B. Hydrochloric acid, phosphorus oxychloride, p-toluenesulfonic acid or boron trifluoride.
Compounds of formula 1 according to the invention, their salts or esters can also be prepared by reacting a clavulanic acid ester with a compound of formula IX R5-O-CHR2-OR3 (IX) in which R2 and R3 are as defined in formula I. and Rs is and is a tertiary alkyl group of 4 to 6 carbon atoms.
any esters formed are converted into the free acid or its salt or into another ester.
The tert is particularly suitable for Rs in formula IX. Butyl residue.
R2 and R3 in formula IX are preferably connected to one another so that the radical -CHR2OR3 forms a heterocyclic ring.
If R2 or R3 are not connected, the radicals R2 and R3 expediently have the same meaning, for. B. both mean the methyl or ethyl radical.
An excess of the compound of the formula IX, generally at least 1 mol, preferably 2 to 5 mol, of excess is advantageously used for this reaction. If the compound of formula IX is a volatile liquid, it can be used as a solvent.
The compounds of the formula I according to the invention or their salt can also be prepared by saponifying a corresponding ester of a compound of the formula I.
This saponification can be done either by hydrolysis or hydrogenation, e.g. B. an ester can be subjected to mild basic hydrolysis, a salt of a compound of the formula 1 is then obtained. However, an ester can also be catalytically hydrogenated, giving the free acid or, in the presence of a base, the salt. In particular, a lower alkyl ester, such as the methyl ester, can be hydrolyzed at a pH of 7 to 10 by slowly adding an appropriate base. The benzyl, methoxy, benzyl or nitrobenzyl ester can be hydrogenated in the presence of a transition metal catalyst, such as palladium on carbon, optionally in the presence of a base, such as sodium, potassium or lithium carbonate or sodium or potassium bicarbonate.
However, compounds of the formula I according to the invention can also be reacted with a diazo compound or a salt of a compound of the formula I according to the invention can be reacted with a reactive halogen compound.
The invention further relates to pharmaceutical preparations which are characterized by a content of a compound of the formula I, the salt or ester thereof in combination with customary pharmacologically acceptable carriers and / or diluents.
The compounds of the formula I are preferably present in the pharmaceutical preparations according to the invention in the form of a pharmacologically acceptable salt or an ester which can be saponified in vivo.
The medicinal preparations according to the invention can be administered orally or parenterally and are suitable for the treatment of humans and animals.
In general, the medicinal products according to the invention are in the form of single doses with about 20 to 250 mg, in particular about 50 to 100 mg, of active ingredient. These preparations are taken two to six times a day, e.g. B. administered three to four times a day, making a daily dose about 60 to
1000 mg, in particular about 200 to about 1000 mg.
The medicinal products according to the invention expediently also contain a penicillin or cephalosporin, preferably in a weight ratio of compound of the formula I, the salt or ester of which to penicillin or cepha losporin of 1:10 to 10: 1, in particular 2: 1 to 1: 5, for. B. 1: 1 to 1: 3.
Penicillins and cephalosporins suitable for these synergistic preparations are described in BE-PS 827926.
Particularly suitable penicillins are ampicillin, amoxycillin and their precursors, such as their in vivo saponifiable esters, ampicillin trihydrate and amoxycillin trihydrate, and the pharmacologically acceptable salts of amoxycillin.
Suitable for orally administrable medicinal products according to the invention are benzylpenicillin; Phenoxymethylpenicillin, propicillin, amoxycillin, ampicillin, epidllin, cyclacillin and other orally active penicillins, their salts and in vivo hydrolysable esters, and aldehyde and ketone adducts of penicillins with 6-a-aminoacylamido side chains and their salts. Suitable in vivo hydrolysable esters of penicillins are the acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, a-ethoxycarbonyloxyethyl and phthalidyl esters of ampicillin or amoxycillin and the phenyl, tolyl and indanyl a-esters of carbenicillin and ticarcillin and their salts.
Suitable aldehyde and ketone adducts of penicillins with a 6-a-aminoacylamido side chain are the formaldehyde and acetone adducts of metampicillin and hetacillin and their salts.
Suitable esters for infusions and injections are the salts of benzylpenicillin, phenoxymethylpenicillin, carbenicillin, propicillin, ampicillin, amoxycillin, epicillin, ticarcillin, cyclacillin and other known penicillins.
Suitable cephalosporins for orally administrable medicinal products according to the invention are cephalexin, cephradin, cephaloglycine and their salts, as well as other known cephalosporins, their salts and in vivo saponifiable esters, as well as aldehyde and ketone adducts of cephalosporins with a 7-o-aminoacylamido.
Suitable cephalosporins for infusions and injections are the salts of cephaloridine, cephalothin, cefazolin, cephalexin, cephacetril, cephamandol, cephapirin, cephradin, cephaloglycin and other known cephalosporins.
The examples illustrate the invention.
Example 1 Benzyl 9-O-methoxymethylclavulanate
EMI4. 1
2.89 g (0.01 mol) of benzyl clavulanate (eI), 1.6 ml (1.7 g) of chlorodimethyl ether and 1.3 ml of 2,4,6-collidine are stirred at 5 ° C. in 20 ml of dichloromethane solved. After 1 hour at 10 "C, thin layer chromatography shows that the benzyl clavulanate has almost completely disappeared. The mixture is mixed with 50 ml of water and shaken, then separated (the aqueous solution is very acidic). The dichloromethane phase is mixed with 50 ml of 3 percent sodium bicarbonate solution.
The organic phase is separated off, dried over sodium sulfate, filtered, concentrated and chromatographed on a silica gel column using ethyl acetate and cyclohexane as the eluent. 1 g of a pale yellow oil is obtained.
γmax (film): 1803, 1753, 1700cm-1 (C = C).
# (CDCl3): 3.01 (1 H, broad, J = 17Hz, 6-ss-CH), 3.33 (3 H, s, OCH3), 3.50 (1H, double doublet, J = 3 and 17Hz, (6α-CH), 4.14 (2H, broad doublet, J = 7Hz, CHCH2O), 4.57 (3H, singlet, CH3O), 4.86 (1H, broad triplet, J = 7 and 1 , 5Hz, CH =), 5.10 (1H, doublet, J = 1.5Hz), 5.69 (1H, broad doublet, J = 3Hz, 5-CH), 7.36 (5H, singlet, C6H5) .
Example2
9-O-methoxymethylclavulanic acid lithium salt
EMI5. 1
0.7 g of O-methoxymethylclavulanic acid benzyl ester (e2) in 7 ml of tetrahydrofuran containing 0.5 ml of water are hydrogenated over 0.2 g of 1% palladium on carbon for 1 hour. The catalyst is filtered off from the solution of e3, the filtrate is mixed with 10 ml of water, neutralized to pH 7.0 with lithium hydroxide solution and evaporated to dryness. Colorless crystals are obtained, which are treated with acetone, filtered, washed with ether and dried in air. Yield: 0.45 g of compound e4.
vmax (Nujol mull): 1785, 1705, 1617cm- '.
# (D2O): 2.98 (1H, doublet, J = 17Hz, 6ss-CH), 3.43 (1H, double doublet, J = 17 and 3Hz, 6o-CH), 4.07 (2H, Doublet, J = 8Hz, 9-CH2), ¯4.5 (under HOD, OCH2O), 4.79 (1H, triplet, J = 8Hz, 8-CH =), 4.83 (1 E, singlet, 3 -CH), 5.61 (1 H, d, J = 3Hz, 5-Cl: 1).
Example 3
9-O-Athoxymethylclavulanic acid benzyl ester
EMI5. 2nd
A mixture of 5.78 g of benzyl clavulanate (el), 5.8 ml of 2,4,6-coliidine and 3.7 ml of chloromethyl ethyl ether in 100 ml of dichloromethane is stirred at room temperature for 2 hours. The mixture is washed with 100 ml of 2M hydrochloric acid, dried over anhydrous sodium carbonate / magnesium sulfate and evaporated to dryness. An oil is obtained which is chromatographed over 50 g of silica gel with cyclohexane / ethyl acetate as the eluent. 6.15 g of the desired compound e5 are obtained as an oil.
[α] D20 +45.2 (c, 1.0; CHCl3).
γmax (CHCl3): 1810.1755, 1705, 1310, 1190 and 1030 cm-1.
# (CDCl3): 7.28 (5H, ArH), 5.61 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), 5.13 (2H, singlet, -CH2Ar), 5.03 (1H , broad singlet, 3-CH) 4.78 (1H, broad triplet, J = 8Hz, 8-CH), 4.56 (2H, singlet, -OCH2O-), 4.09 (2H, broad doublet, J = 8Hz, 9-CH2), 3.52 (2H, q, J = 7.5Hz, -OCH2CH3), 3.41 (1H, double doublet, J = 17Hz, J = 2.5Hz, 6α-CH) , 2.99 (1H, doublet, J = 17Hz, 6ss-CH) and 1.18 (3H, triplet, J = 7.5Hz, OCH2CH3).
Cí8H2íNO6 Ber. : C 62.25 H 6.1 N 4.05 found. : C 62.2 H 6.15 N 3.8
Example 4
9-O-Ethoxymethylclavulanic acid lithium salt
EMI5. 3rd
A solution of 5.95 g of 9-O-ethoxymethylclavulanic acid benzyl ester (e5) in 80 ml of tetrahydrofuran, which contains 2 drops of water, is hydrogenated at room temperature and atmospheric pressure in the presence of 3.35 g of 10 percent palladium on carbon for 30 minutes. The mixture is filtered, the filtrate is diluted with 250 ml of water and neutralized to pH 7.2 with 1 M aqueous lithium hydroxide solution.
The mixture is evaporated to dryness. After treatment with ether, 4.4 g of the desired compound e6 are obtained from the residue.
[α] D20 +34.8 (c, 1.0; H2O).
γmax (KBr): 1780, 1700, 1620, 1320 and 1030cm- '.
# (D2O): 5.70 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), 4.90 (1H, singlet, 3-CH), 4.88 (1 H, broad triplet, J = 8Hz, 8-CH), 4.68 (2H, singlet, -OCH2O -), 4.17 (2H, doublet, J = 8Hz, 9-CH2), 3.58 (2H, q, J = 8Hz, - OCH2CH3), 3.52 (1H, double doublet, J = 17Hz, J '= 2.5Hz, 6α-CH), 3.04 (1H, doublet, J = 17Hz, 17Hz, 6ss-CH) and 1 , 13 (3H, triplet, J = 8Hz, -OCH2CH3).
Example 5
9-O-methylthiomethylclavulanic acid benzyl ester
EMI5. 4th
A solution of 2.89 g (0.1 mol) of benzyl clavulanate (el) and 2 ml (0.015 mol) of 2,4,6-collidine in 10 ml of dimethoxyethane is mixed with a mixture of 1.5 g of sodium iodide and 97 g (0.01 mol) of chloromethyl methyl sulfide in 20 ml of dimethoxyethane were added at 0 ° C. under argon protection.
The mixture is stirred at 50 ° C. for 3 hours, then at room temperature for 66 hours, then poured into 40 ml of ice water and extracted three times with 40 ml of ethyl acetate each time. The organic extract is washed with 100 ml of 5M hydrochloric acid and 100 ml of saturated sodium chloride solution, dried and evaporated. An oil is obtained which is chromatographed on 30 g of silica gel with cyclohexane / ethyl acetate as the eluent. 0.4 g of compound e8 is obtained as a colorless oil.
[α] D20 +38.3 (c, 2.0; CHCL3).
#max (liquid film): 1805.1750.1695.1300.1180 and 1035 cm- '.
# (CDCl3): 7.28 (5H, singlet, ArH), 5.61 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), 5.12 (2H, singlet -CH2Ar), 5.03 ( 1H, Sin gulet, 3-CH), 4.75 (1H, broad triplet, J = 8Hz, 8-CH), 4.49 (2H, singlet, -OCH2SMe), 4.10 (2H, doublet, J = 8Hz, 9-CH2), 3.42 (1H, double doublet, J = 17Hz, J '= 2.5Hz, 6α-CH), 2.99 (1H, doublet, J = 17Hz, 6-CH) and 2.09 (3H, singlet, -SCH3).
m / e (relative intensity): 301.0968 (25, M + -MeSH), 288.0849 (10, M + -C2H5S), 272.0903 (5, M + -C2H5OS), 230 (30, M + -C2-H5OS -C2H5OS-C2H2O) and 91 (100).
Example 6 9-O-Methylthiomethylclavulanic acid lithium salt
EMI6. 1
A mixture of 0.35 g of 9-O-methylthiomethylclavulanic acid benzyl ester, 15 ml of tetrahydrofuran and 15 ml of water is titrated in a pH stat at 24 C with a lithium hydroxide solution to a constant pH of 10. After 2 hours, the addition of lithium hydroxide is interrupted. The solution is concentrated to 10 ml under reduced pressure, then diluted with 10 ml of water. This aqueous mixture is extracted twice with 20 ml of ethyl acetate and evaporated to dryness. The residue is chromatographed on a column with 10 g cellulose with butanol / water / ethanol in a ratio of 5: 5: 1 (upper phase).
0.04 g of the desired compound e9 is obtained.
vmax (NujOI): 1780, 1695, 1620, 1300 and 1020 cm- '.
o (DO): 5.80 (1H, doublet, 3 = 2.5Hz, 5-CH), 5.05 (1H, singlet, 3-CH), 4.97 (1H, broad triplet, J = 8Hz, 8-CH), 4.73 (2H, singlet, -OCH2SMe), 4.27 (2H, doublet, J = 8Hz, 9-CH2), 3.63 (1H, double doublet, J = 18Hz, J '= 2.5Hz, 6α-CH), 3.14 (1H, doublet, J = 18Hz, 6ss-CH) and 2.19 (3H, singlet, -SCH3).
Example 7 4-methoxybenzyl 9-O- (1-butoxy) ethyl clavulanate
EMI6. 2nd
A solution of 1 g of clavulanic acid p-methoxybenzyl ester (e 10) and 1 ml of vinyl n-butyl ether in 10 ml of ethyl acetate is mixed with 50 mg of p-toluenesulfonic acid and stirred for 30 minutes at room temperature. The mixture is then chromatographed through a short silica gel column using ethyl acetate as the eluent. The solvent is evaporated off and the product is isolated by column chromatography on silica gel with ethyl acetate / cyclohexane in a ratio of 1: 1. 0.848 g of the desired compound e 11 are obtained.
vmax (film): 1805.1750.1700cm-1.
# (CDCl3): 8.0 to 9.0 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.26 (3H, doublet, J = 6Hz), 1.10 to 1.70 (4H, multiplet), 2, 97 (1H, doublet, J = 17Hz), 3.20 to 2.55 (3H, multiplet), 3.74 (3H, singlet), 4.0 to 4.2 (2H, multiplet), 4.45 to 4.75 (1H, multiplet), 4.75 (1H, triplet), 4.99 (1H, singlet), 5.07 (2H, singlet), 5.59 (1H, doublet, J = 3Hz ), 6.80 (2H, doublet, J = 8Hz), 7.20 (2H, doublet, J = 8Hz).
Example 8 Benzyl 9-O-tetrahydropyran-2 '-yl-clavulanate
EMI6. 3rd
1.0 g of benzyl ester of clavulanate (e in 5 ml of benzene and 4 ml of dihydropyran is mixed with 1 drop of boron trifluoride etherate complex and stirred overnight. The solvents are evaporated under reduced pressure, the residue is chromatographed on a silica gel column using ethyl acetate and cyclohexane as the eluent. After evaporation of the solvents, 1.63 g of the desired compound e12 are obtained as an oil. This oil has a purity of around 80, the impurities are presumably polymers that are derived from the pyran.
vmax (liquid film): 1805.1755.1700cm-1.
# (CDCl3): 1.0 to 2.1 (excess H, broad multiplet, 3 ', 4', 5'-CH2), 2.97 (1H, doublet, J = 17Hz, 6ss-CH), 3, 41 (1H, double doublet, J = 2.5 and 17Hz, 6α-CH), 3.6 to 3.95 (excess H, multiplet, 6'-CH2), 3.95 to 4.4 (2H, Multiplet, 9-CH2), 4.52 (1H, broad singlet, 2'-CH), 4.79 (1H, broad triplet, J = 7.5Hz, 8-CH), 5.03 (1H, singlet, 3-CH), 5.12 (2H, singlet, PhCH2), 5.60 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), and 7.27 (5H, singlet, C6Hs).
Example 9
9-O-tetrahydropyran-2'-yl-clavulanic acid lithium salt
EMI7. 1
1.0 g of 9-O-tetrahydropyran-2-yl-clavulanic acid benzyl ester (el2) is dissolved in 1 ml of tetrahydrofuran and 0.05 ml of water and hydrogenated over 0.3 g of 10 percent palladium on carbon for 45 minutes. A solution of the corresponding acid e13 is obtained, from which the catalyst is removed. The filtrate is diluted with an appropriate volume of water and titrated to pH 7.0 with lithium hydroxide solution. The solution is evaporated to a syrup, mixed with 50 ml of acetone, evaporated again, treated with 30 ml of acetone, filtered off, washed with acetone and ether and air-dried. Yield: 0.46 g of the desired compound e14.
Vmax (Nujol mull): 1783, 1790, 1700, 1620, 1625cm-1.
# (D2O): 1.16 to 1.6 (6H, broad multiplet, 3 ', 4', 5'-CH2), 2.89 (1H, doublet, J = 17Hz, 6ss-CH), 3.39 (1H, double doublet, J = 17 and 3Hz, 6α-CH), 3.55 to 3.91 (2H, multiplet, 6'-CH2), 4.6 (2H, doublet, J = 8Hz, 9 -CH2), 4.5 to 4.9 (3H, multiplet, 2'-CH, 8-CH, 3-CH), 5.55 (1H, doublet, J = 3Hz, 5-CH).
Example 10
4-methoxybenzyl 9-O-tetrahydrofuran-2 '-yl-clavulanate
EMI7. 2nd
A solution of 3.19 g (0.1 mol) of 4-methoxybenzyl clavulanate (e 10) and 4.32 g (0.3 mol) of 2-tert. -Butoxytetrahydrofuran in 30 ml dry dichloromethane is mixed with 1 crystal of p-toluenesulfonic acid and stirred for 15 minutes at room temperature. The mixture is washed with 50 ml of aqueous sodium bicarbonate solution and dried.
After evaporation, 3.8 g of the desired compound eI 5 are obtained.
#max (liquid film): 1805, 1750, 1700, 1250, 1180 and 1025 cm- '.
# (CDCl3): 7.20 (2H, doublet, J = 9Hz, ArH), 6.80 (2H, J = 9Hz, ArH), 5.59 (111, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH ), 5.08 (2H, singlet, CH2Ar), 5.00 (1H, singlet, 3-CH), 5.10 to 5.00 (1H, m, 2-CH), 4.65 (1H, triplet , J = 7Hz, 8-CH), 3.75 (3H, singlet, OCH3), 3.40 (2H, double doublet, J = 17Hz, J '= 2.5Hz, 6o-CH), 2.99 ( 111, doublet, J = 17Hz, 6-CH) and 1.6 to 2.0 (4H, multiplet, 3 'and 4'-CH2).
Example
9-O-tetrahydrofuran-2-yl clavulanic acid sodium salt
EMI7. 3rd
1.46 g of 9-O-tetrahydrofuran-2-yl-clavulanic acid p-meth-oxybenzyl ester (e 15) and 0.315 g of sodium bicarbonate in 30 ml
Tetrahydrofuran / water in a 5: 1 ratio
Room temperature and atmospheric pressure in the presence of
0.5 g of 10 percent palladium on carbon hydrogenated for 30 minutes. The mixture is filtered, the solid is washed with a little water. The combined solutions are evaporated to remove the tetrahydrofuran. The aqueous solution is extracted with 20 ml of ethyl acetate and freeze-dried. 0.9 g of the desired compound e16 are obtained.
#max (Nujol mull): 1785.1695.1615 (broad) cm-1.
#max (KBr): 1785,1693,1615 (very wide) cm-1.
# (D2O): 1.86 (4H, multiplet, 3 'and 4'-CH2), 3.02 (1H, doublet, J = 17Hz, 6p-CH), 3.51 (111, double doublet, 5 = 17 and 2.5Hz, 6a-CH), 3.83 (2H, multiplet, 5'-CH2), 4.11 (2H, doublet, J = 8Hz, 9-CH2), 4.82 (1H, triplet, J = 8 Hz, 5-CH), 4.90 (1H, singlet, 3-CH), 5.20 (1H, multi plett, 2'-CH) and 5.66 (1H, doublet, J = 2, 5Hz, 5-CH).
Example 12 Benzyl 9-O- (1-ethoxy) prop-1-yl-clavulanate
EMI8. 1
5 mg of p-toluenesulfonic acid are added to a stirred solution of 578 mg of benzyl clavulanate (e 1) and 0.3 ml of ethyl propenyl ether in 10 ml of ethyl acetate, the mixture is stirred at room temperature for 75 minutes and then chromatographed on a short silica gel column using ethyl acetate as the eluent.
After evaporation of the solvent, the product is eluted by column chromatography on silica gel with a gradient of cyclohexane / ethyl acetate in a ratio of 3: 1 to 1: 1. 601 mg of the desired compound e17 are obtained.
#max (film): 1805, 1750 and 1700cm-1.
6 (CDCl3): 0.88 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.17 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.60 (2H, broad quintet, J = 7Hz), 2.99 (1H , Doublet, J = 17Hz), 3.44 (1H, double doublet, J = 3 and 17Hz), 3.54 (2H, q, J = 7Hz), 4.0 to 4.2 (2H, multiplet), 4.36 (1H, triplet, J = 6Hz), 4.79 (1H, broad triplet, J = 7Hz), 5.05 (1H, singlet), 5.15 (211, singlet), 5.63 (1H , Doublet, J = 3Hz), 7.29 (5H, singlet).
Example 13
9-O- (1-ethoxy) prop-1-yl-clavulanic acid sodium salt
EMI8. 2nd
A solution of 572 mg of 9-O- (1-ethoxy) prop-1-yl-clavulanic acid benzyl ester (e 17) and 128 mg of sodium bicarbonate in 22.5 ml of tetrahydrofuran and 7.5 ml of water is over 250 mg for 1 hour 10 percent palladium hydrogenated on carbon.
The solution is filtered through diatomaceous earth and diluted with water. The tetrahydrofuran is removed in a rotary evaporator. The aqueous solution is extracted with ethyl acetate and freeze-dried. 370 mg of the desired compound 8 are obtained.
#max (KBr): 1785 and 1615 cm- '.
# (D2O): 0.85 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.16 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.59 (2H, broad quintet, J = 7Hz), 3.05 (1H , Doublet, J = 17Hz), 3.4 to 3.85 (4H, multiplet), 4.19 (2H, doublet, J = 7Hz), 4.90 (1H, broad triplet, J = 7Hz), 4, 93 (1H, singlet), 5.71 (1H, doublet, J = 3Hz).
Example 14 Benzyl 9-O- (2-ethoxy) prop-2-yl clavulanate
EMI8. 3rd
5 mg of p-toluenesulfonic acid are added to a stirred solution of 1 g of benzyl clavulanate (el) and 0.5 ml of ethyl isopropenyl ether in 10 ml of ethyl acetate, and the mixture is stirred at room temperature for 20 minutes. The mixture is chromatographed through a short silica gel column using ethyl acetate as the eluent. The solvent is evaporated off and the product is chromatographed on a silica gel column using cyclohexane / ethyl acetate in a ratio of 3: 1. 743 mg of the desired compound e19 are obtained.
#max (film): 1805, 1750 and 1700 cm- '.
# (CDCl3): 1.12 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.31 (6H, singlet), 2.96 (1H, doublet, J = 17Hz), 3.37 (2H, q, J = 7Hz), 3.39 (1H, double doublet, 5 = 3 and 17Hz), 3.9 to 4.1 (2H, multiplet), 4.73 (1H, broad triplet, J = 7Hz), 5.01 ( 1H, broad singlet), 5.13 (2H, singlet), 5.60 (111, doublet, J = 3Hz), 7.26 (5H, singlet).
Example 15 Benzyl 9-O- (1-ethoxy) cyclohexylclavulanate
EMI8. 4th
A stirred mixture of 578 mg of benzyl ester of clavulanate (el) and 2 ml of ethylcyclohexenyl ether is mixed with 20 mg of mercury trifluoroacetate. The mixture is stirred for 90 minutes at room temperature. The majority of the solvent is removed in a rotary evaporator, the product is isolated by chromatography on silica gel with cyclohexane / ethyl acetate in a ratio of 4: 1. 767 mg of the desired compound e20 are obtained.
#max (film): 1805.1750.1700cm-1.
# (CDCl3): 1.14 (3H, triplet, J = 7Hz), 1.2 to 1.8 (10H, multiplet), 2.96 (1H, doublet, J = 17Hz), 3.37 ( 2H, q, J = 7Hz), 3.43 (1H, double doublet, J = 3 and 17Hz), 3.9 to 4.15 (2H, multiplet), 4.76 (1H, broad triplet, J = 7Hz ), 5.04 (1H, singlet), 5.14 (2H, singlet), 5.60 (1H, doublet, J = 3Hz), 7.27 (5H, singlet).
Example 16 9-O-methoxymethylclavulanic acid sodium salt
EMI9. 1
6.0 g of 9-O-methoxymethylclavulanoic acid p-methoxybenzyl ester (e7) are dissolved in 60 ml of ethanol in a pressure bottle and 1.39 g of sodium bicarbonate in 8 ml of water are added. The bottle is flushed with nitrogen, then 0.75 g of 10% palladium on carbon is added. The mixture is hydrogenated at a pressure of 1.75 kg / cm 2 for 1 hour. Thin layer chromatography on silica gel with ethyl acetate / chloroform in a ratio of 50:50 shows that the hydrogenation is complete. The mixture is filtered through diatomaceous earth, the diatomaceous earth is washed with 10 ml of water. The filtrate is evaporated in a rotary evaporator to give a gummy product.
This product is dissolved in 10 ml of acetone and 900 ml of dry diethyl ether are added while shaking vigorously. A fine white precipitate is obtained. The suspension is cooled to 4 C for 2 hours and then filtered. The solid is washed twice with 100 ml ether and immediately dried in a desiccator at low pressure. 2.1 g of the desired compound e21 are obtained as a hydroscopic pale yellow powder.
Example 17
9-0- (2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-a-D-glucopyranosyl) -clavulanic acid p-methoxybenzyl ester
EMI9. 2nd
A solution of 6.38 g of clavulanic acid p-methoxybenzyl ester (el 10) in 10 ml of dry dimethylformamide is added dropwise over a few minutes to a stirred
Solution of 16.78 g of a-acetobromoglucose and 5.3 ml of collidine in 50 ml of dry dimethylformamide at 0 C under nitrogen protection. The mixture is left overnight
Stirred at room temperature, then poured into 100 ml of ice water. The ice water is extracted three times with 100 ml of methyl acetate each. The organic extract is 5m with 200 ml
Washed hydrochloric acid over anhydrous sodium carbonate / magnesium sulfate. fat dried and evaporated.
An oil is obtained which is chromatographed on a column with 100 g of silica gel with cyclohexane / ethyl acetate as the eluent.
5.7 g of the desired compound e22 are obtained as an oil, then 7.8 g of a mixture of the desired compound e22 and a small amount of starting material.
Properties of the oil: [a] D 45.8 (c 1.7, CHCl3).
vmax (CHCl3): 1805, 1745, 1700, 1230, 1175, 1040 and 980 cm- '.
# (CDCl3): 7.22 (211, doublet, J = 9Hz, ArH), 6.83 (2H, doublet, J = 9Hz, ArH), 5.64 (1H, doublet, J = 4Hz, 1-CH ), 5.61 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), 5.08 (2H, s, -CH2Ar), 3.76 (3H, singlet, -OCH3), 2.06 (9H , Singlet, CH3CO2-), and 1.68 (3H, singlet, CH3CO2-).
m / e: 649 (M +), 621, 607, 594, 549, 403, 331, 289, 288, 271, 259,200 and 169.
C301135N015
Ber. : C 55.45 H 5.45 N 2.15
Gef. : C 55.1 H 5.4 N 1.95
Example 18
9-0- (2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-a-D-glucopyranosyl) -clavulanic acid sodium salt
EMI10. 1
A mixture of 1.3 g of 9-0- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-dglucopyranosyl) -clavulanoic acid p-methoxybenzyl ester (e22) and 0.168 g of sodium bicarbonate in 24 ml of tetrahydrofuran / water in Ratio 5: 1 is hydrogenated for 15 minutes at room temperature and atmospheric pressure in the presence of 0.4 g of 10 percent palladium on carbon. The mixture is filtered, the filtrate is evaporated. 0.96 g of the desired compound e23 is obtained.
[α] D +27.7 (C, 2.3, H2O).
vmax (KBr): 1785, 1740, 1690, 1615 cm- '.
# (D2O): 5.83 (1H, doublet, J = 5Hz, 1'-CH), 5.75 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), 3.60 (1H, double doublet , J = 18Hz, J '= 2.5Hz, 6α-CH), 3.07 (1H, doublet, J = 18Hz, 6ss-CH), 2.15 (911, singlet, CH3CO2-) and 1.79 (3H, singlet, CH3CO2-).
Example 19 9-0- (2,3,5-Tri-O-benzyl-D-arabinofuranosyl) -clavulanic acid p-methoxybenzyl ester
EMI10. 2nd
A solution of 1.68 g of 2,3,5-tri-O-benzyl-ss-D-arabinofuranose, 1.06 ml of collidine and 1.29 g of tetrabutylammonium bromide in 5 ml of dry dichloromethane is mixed with 1.13 g of trifluoromethanesulfonic acid anhydride at -70 C. The mixture is stirred at room temperature for 1 hour, then a solution of 0.96 g of p-methoxybenzyl clavulanate (el0) in 5 ml of dichloromethane is added. The mixture is stirred at room temperature overnight, then washed at 0 C with 10 ml of 5M hydrochloric acid, dried over anhydrous sodium carbonate / magnesium sulfate and evaporated.
An oil is obtained which is chromatographed on a column with 20 g of silica gel and cyclohexane-ethyl acetate as the eluent. 0.7 g of the desired compound e24 are obtained.
#max (CHCl3): 1805, 1745 and 1700 cm- '.
# (CDCl3): 7.20 (17H, singlet, ArH), 6.80 (2H, doublet, J = 9Hz, ArH), 5.51 (1H, doublet, J = 2.5Hz, 5-CH), 5.30 (1H, multiplet, 1'-CH), 5.05 5.05 (2H, singlet, CH2Ar), 4.98 (1H, multiplet, 3-CH), 4.48 (6H, singlet, CH2Ar) ), 3.70 (3H, singlet, OCH3) and 2.90 (1H, doublet, J = 17Hz, 6ss-CH).
Example 20 9-O- (1-butoxy) ethylclavulanic acid sodium salt
EMI10. 3rd
A solution of 800 mg of 9-O- (I-butoxy) -ethylolavulanic acid 4-methoxybenzyl ester (el 1) and 160 mg of sodium bicarbonate in a solution of 5 ml of water and 25 ml of tetrahydrofuran is over 20 mg of I 0% palladium for 20 minutes hydrogenated on coal. The solution is filtered, most of the tetrahydrofuran is removed under reduced pressure. The aqueous solution is extracted twice with ethyl acetate and freeze-dried. 447 mg of the desired compound e25 are obtained.
vmax (KBr disc): 1780, 1690, 1610cm- '.
# (D2O): 0.84 (3H, triplet, J = 8Hz), 1.20 (3H, doublet, J = 5Hz), 1.15 to 1.65 (4H, multiplet), 3.01 (1H, Doublet, J = 18Hz), 3.45 to 3.7 (3H, multiplet), 4.15 (2H, doublet, J = 8Hz), 4.65 to 4.95 (3H, multiplet), 5.68 ( 1H, doublet, J = 3Hz).
Example 21
4-methoxybenzyl 9-O- (1-ethoxy) ethyl clavulanate
EMI11. 1
A solution of 1.5 g of p-methoxybenzyl clavulanate (e 10) and 1 ml of vinyl ethyl ether in 15 ml of ethyl acetate is mixed with 25 mg of p-toluenesulfonic acid and stirred for 15 minutes. The mixture is chromatographed through a short column of silica gel with ethyl acetate as the eluent.
The solvent is removed under reduced pressure, the product is chromatographed on a silica gel column using cyclohexane / ethyl acetate in a ratio of 3: 1 as the eluent. 1.26 g of the desired compound e26 are obtained.
vmax (film): 1805.1750.1700cm-1.
# (CDCl3): 1.16 (3H, triplet, J = 8Hz), 1.27 (3H, doublet, J = SHz), 2.97 (1H, doublet, J = 17Hz), 3.25 to 3, 7 (3H, multiplet), 3.75 (3H, singlet), 4.0 to 4.15 (2H, multiplet), 4.5 to 4.85 (2H, multiplet), 5.0 (lH, Singlet), 5.07 (2H, singlet), 5.60 (1H, doublet, J = 3Hz), 6.80 (2H, doublet, J = 9Hz), 7.21 (2H, doublet, J = 9Hz ).
Example 22 9-O- (1-ethoxy) ethyl clavulanic acid sodium salt
EMI11. 2nd
A solution of 1.185 g of 9-O- (1-ethoxy) ethylclavulanoic acid 4-methoxybenzyl ester (e26) and 254 mg of sodium bicarbonate in a mixture of 5 ml of water and 25 ml of tetrahydrofuran is hydrogenated over 400 mg of 10% palladium on carbon for 25 minutes. The solution is filtered through diatomaceous earth and then evaporated under reduced pressure until most of the tetrahydrofuran is removed. The aqueous solution is extracted three times with ethyl acetate and freeze-dried. The product is purified by chromatography on a silica gel column with n-butanol / ethanol / water in a ratio of 4: 1: 1. After evaporation of the solvents, 5.89 mg of the desired compound e27 are obtained.
vmax (KBr): 1795.1695.1615 cm-1.
# (D2O): 1.23 (3H, triplet, J = 8Hz), 1.34 (3H, doublet, J = 6Hz), 3.11 (1H, doublet, J = 18Hz), 3.45 to 4, 0 (3H, multi plett), 4.25 (2H, doublet, J = 8Hz), 4.75 to 5.1 (3H, multiplet), 5.77 (1H, doublet, 3 = 3Hz).
Example 23 9-O-methoxymethylclavulanic acid
EMI11. 3rd
A solution of 0.43 g of 9-O-methoxymethylclavulanic acid lithium salt in 25 ml of water is covered with 50 ml of ethyl acetate, stirred and mixed with a strongly acidic ion exchange resin in the H + form until the pH of the aqueous phase is below 2. 0 (about 20 ml wet resin). The mixture is filtered, the Fitlrat is separated. The aqueous phase is extracted three times with 30 ml of ethyl acetate.
The ethyl acetate extracts are combined, quickly dried over 30 g of a molecular sieve (type 3A), filtered and evaporated to an oil in a rotary evaporator under reduced pressure. 0.3 g of the desired compound are obtained.
#max (film): 2500 to 3600 (very wide), 1805, 1750, 1695 cm-1.
# (CDCl3): 3.00 (1H, doublet, J = l7Hz, 6ss-CH), 3.33 (311, singlet, OCH3), 3.45 (1H, double doublet, J = 2.5 and 17Hz, 6a-CH), 4.13 (2H, doublet, J = 7Hz, 9-CH2), 4.58 (2H, singlet, OCH2O), 4.88 (1H, triplet, J = 7Hz, 8-CH), 5.01 (1H, singlet, 3-C11), 5.63 (1H, doublet, J = 2.511z, 5-C11).
Example 24
Using dry ingredients, the following preparations are produced in a conventional manner in a dry atmosphere: a) tablets mg sodium methoxymethylclavulanic acid 150 anhydrous ampicillin 300 microcrystalline cellulose 600
Magnesium stearate 15 b) capsules mg methoxymethylclavulanic acid sodium salt 250
Magnesium stearate 2.5
Starch glycollate sodium salt 5.0 c) Ampoules for re-uptake in sterile water for immediate injection mg sodium methoxymethylclavulanic acid 50
Sodium ampicillin 250 pharmacology
The minimum inhibitory concentration of ampicillin when adding compounds according to the invention as an inhibitor is determined using conventional methods.
a) Connection of example 16
Minimum inhibitory concentration of ampicillin (pg / ml) Inhihitorkonzen- Staph. Prot. Glue E. coli tration (g ml) Russell C889 E70 JT39 20 - 1.0 - - 5 - 2.0 1.6 4
0.3 - 1.6 125 0 125> 2000 1000> 2000 b) Compound of Example 7
Minimum inhibitory concentration of ampicillin (g / ml) inhibitor concentration- Staph. Glue Proteus E. coli E. coliation (µg ml) Russell E70 C889 JT39 JT410 20 - - 15.6> 500 62.5 5 0.15 12.5 125 500 62.5
1.25 25 - - 0 500 1000> 2000 2000 62.5 c) Compound of example 20
Minimum inhibitory concentration of ampicillin (g / ml)
Inhibitor con Staph. Glue
Proteus E. coli filtration (µg / ml) Russell E70 C 889 JT410 20 - - - 2000
5 (0.04) 1.6-3.1 15> 2000
1 0.08 6-12 62.5 0> 500 2000> 2000 62.5 d) Compound of Example 4
Minimum inhibitory concentration of ampicillin (µg / ml)
Inhibitor Concentrate Staph. Glue Proteus E. coli E. coli tration (, µg / ml) Russell E70 C889 JT39 JT410 20 - - - - - 5 0.04 3.12 1.0 2.0 125
1 0.6 3.12 15.6 4.0 0 250 500> 2000 1000 250 e) blood levels
After subcutaneous administration of sodium methoxymethylclavulanic acid in a dose of 10 mg / kg to mice, the following blood level values are obtained.
The values for clavulanic acid sodium salt are given for comparison: time (minutes) 20 30 45 60 Fg / ml methoxymethylclavulan 3.1 3.4 1.3 0.8 0.8 acidic sodium salt Fg / ml clavulanic acid sodium 4.2 2 , 2 0.8 0.5 salt
Following oral administration to sodium methoxymethylclavulanic acid at a dose of 20 mg / kg, the following blood level values are obtained. The values for clavulanic acid sodium salt are given for comparison: time (minutes) 15 30 45 60 g / ml methoxymethylclavulan 10.8 7.4 2.1 1.4 acid sodium salt Fg / ml clavulanic acid sodium 3.5 2 , 6 1.5 0.6 salt f) Healing effects of sodium methoxymethylclavulanate and amoxycillin
The following CDSO values are obtained for intraperitoneal infections with Escherichia coli JT 39.
The test compounds are administered either subcutaneously 1 and 5 hours after infection or orally 1.3 and 5 hours after infection: Test compounds CD50 (mg / kg)
Amoxycillin (subcutaneous) 2.5 mg / kg methoxymethylclavulanic acid sodium salt + amoxycillin 6.8 test compounds CDss (mg / kg)
Amoxycillin (subcutaneous) 2.5 mg / kg
Clavulanic acid sodium salt +
Amoxycillin 14 1 mg / kg
Methoxymethylclavulanic acid sodium salt + amoxycillin 23.4 1 mg / kg
Clavulanic acid sodium salt +
Amoxycillin 40
CD50 (3x mg / kg)
Amoxycillin (oral) 20 mg / kg methoxymethylclavulanic acid sodium salt + amoxycillin 11 20 mg / kg clavulanic acid sodium salt + amoxycillin 9