**ATTENTION** debut du champ DESC peut contenir fin de CLMS **.
REVENDICATIONS
1. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre de substance active, un composé répondant à la formule générale (1):
EMI1.1
dans laquelle n est égal à zéro ou représente un nombre entier de 1 à 10, et m représente le nombre I ou 2, ou un sel d'un tel composé, acceptable du point de vue pharmacologique.
2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que la substance active est choisie parmi les suivantes: diamino-2,8 dithia-4,6 nonanediol-1,9, diamino-2,11 dithia-4,9 dodécanediol-1,12, diamino-2,13 dithia-4,11 tétradécanediol-1,14, diamino-2,15 dithia-4,13 hexadécanediol- 1,16, diamino-2,17 dithia-4,15 octadécanediol-1,18, diamino-2,7 dithia-4,5 octanediol-1,8, diamino-2, 15 dithia-5,12 hexadécanediol- 1,16, diamino-2, 17 dithia-5,14 octadécanediol-1,18, diamino-2,19 dithia-5,16 eicosanediol-1,20, ainsi que leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique.
3. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle est sous une forme administrable par voie orale.
4. Composition pharmaceutique selon la revendication 3, carac térisée en ce qu'elle est sous une forme permettant l'administration de doses allant de 5 à 30 mglkg/d.
5. Procédé de préparation des composés actifs répondant à la formule (I) indiquée dans la revendication 1, et dans laquelle n représente un nombre entier de 1 à 10 et m représente le nombre 1 ou 2, procédé caractérisé en ce que l'on fait réagir un dihalogénure de formule (II): X-(CH,),-X (11) avec un dérivé S-benzylé de formule III
EMI1.2
dans lesquelles X représente un atome d'halogène, n représente un nombre entier de 1 à 10 et m le nombre 1 ou 2, dans l'ammoniac liquide en présence d'un amidure alcalin, puis on sépare le produit obtenu.
6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que X désigne un atome de brome.
7. Procédé selon l'une des revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que le dihalogénure de formule (II) est utilisé en proportion stoechiométrique.
8. Procédé selon l'une des revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que le dihalogénure de formule II est utilisé avec un excès allant jusqu'à 100% de la proportion stoechiométrique.
9. Procédé de préparation des composés actifs répondant à la formule (I) indiquée dans la revendication 1, et dans laquelle n représente le nombre 0 et m représente le nombre 1 ou 2, procédé caractérisé en ce que l'on transforme en thiol un dérivé S-benzylé de formule III
EMI1.3
dans laquelle m représente le nombre 1 ou 2, puis on effectue une oxydation par l'air pour obtenir le disulfure de formule (I).
10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'on transforme en thiol un composé de formule (III) dans l'ammoniac liquide en présence d'amidure de sodium.
11. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'on oxyde le thiol, obtenu à partir du dérivé S-benzylé de formule (III), par un barbotage d'air dans une solution aqueuse dudit thiol, en présence de chlorure ferrique.
La présente invention concerne des compositions pharmaceutiques notamment à activité hypolipémiante, dont la substance active est un alkylènebiscystéinol ou un alkylènebishomocystéinol sous forme de base ou de sel, et des procédés de préparation desdites substances actives.
Les composés mis enjeu comme substance active dans les compositions selon l'invention répondent à la formule générale:
EMI1.4
dans laquelle n est égal à 0 ou représente un nombre entier de 1 à 10, et m représente le nombre 1 ou 2.
- On prépare les composés de formule I par action d'un dihalogénure d'alcane de formule: X-(CH2)11-x QI) dans laquelle X représente un atome d'halogène et n représente un nombre entier de 1 à 10, sur le S-benzylcystéinol ou le Sbenzylhomocystéinol, de formules respectives:
EMI1.5
dans l'ammoniac liquide en présence d'amidure alcalin tel que l'amidure de sodium. Le dihalogénure de formule aI) peut être utilisé pur ou en solution dans un solvant tel que l'éther diéthylique; il peut être utilisé en proportion stoechiométrique ou en excès, par exemple un excès allantjusqu'à 100%.
La séparation des produits de la réaction peut se faire de manière connue: évaporation de l'ammoniac, extraction de la phase organique, purifications.
Dans le cas des composés pour lesquels n=O, les dérivés S benzylés sont transformés en thiols, puis une oxydation par l'air fournit le disulfure correspondant.
Le S-benzylcystéinol de formule (IIIa), utilisé comme composé de départ, peut être obtenu de la façon suivante, en trois étapes:
1. Préparation de la S-benzylcystéine selon la méthode décrite par M. D. Armstrong, J. Org. Chem. , 16, 749-53 (1951).
2. Préparation du chlorhydrate et de la base de l'ester éthylique de la S-benzylcystéine selon J. C. Crawall, D. F. Elliott et K. C.
Hooper, J. Chem. Soc. , 4066-68 (1956).
3. Préparation du S-benzylcystéinol par saponification réductrice en présence d'hydrure d'aluminium et de lithium, ou de borohydrure de triéthyllithium; ce composé a été obtenu impur, sous forme d'oxalate, par J. C. Crawall, même référence que ci-dessus.
Le S-benzylhomocystéinol de formule (IIIb) peut être préparé selon des étapes analogues à celles décrites ci-dessus. La première, à savoir la préparation de la S-benzylcystéine, est décrite dans Biochem. prep. , 5, 87.
Les exemples ci-après illustrent la préparation de composés particuliers.
Exemple A
S-benzylcystéinol
EMI2.1
Dans un ballon tricol de 2000 ml muni d'un agitateur mécanique étanche, d'un réfrigérant avec garde à chlorure de calcium, d'une ampoule à brome protégée de l'humidité atmosphérique, on place:
350 ml d'éther anhydre rectifié sur LiAlH4,
15,8 g de LiAlH4 (soit 4 fois la quantité théorique qui est de 1/2 mol LiAlH4/mol d'esther).
La suspension est portée à reflux sous agitation. La solution d'ester base (50,3 g) dans l'éther anhydre est introduite à vitesse convenable pour maintenir le reflux.
L'ébullition du mélange réactionnel est continuée pendant 10 mi aprés la fin de l'addition de la solution d'ester base.
Après refroidissement, l'excès d'hydrure de lithium-aluminium est détruit par la quantité minimale d'eau ajoutée goutte à goutte.
L'alumine est essorée et lavée par de l'éther.
Les solutions éthérées sont distillées. Le résidu cristallise.
On obtient 29,5 g de cristaux blancs.
Rendement: 71,2%. PF: 38-40 (Tottoli).
Analyse pour C10H15O NS = 197,29
Calculé: C 60,87 H 7,66 N 7,09 S 16,25%
Trouvé: C61,19-61,27 H 7,81-7,80 N 7,01 S 16,16%
Le S-benzylcystéinol peut être purifié par distillation.
PE: 142-144 C sous 0,25 mm. PF: 44 (Tottoli).
Analyse pour C10H15ONS = 197,29
Calculé: C 60,87 H 7,66 N 7,09 S 16,25%
Trouvé: C60,78 H7,98 N7,10 S16,51%
Spectre IR: bande NH2 à 1600 cm-
bande CH2OH à 1050 cm-1
Spectre RMN: Référence TMS (tétraméthylsilane)
EMI2.2
2,5 ppm(m) 2,9 ppm(m) 3,48 ppm (m) 3,67 ppm (s) 7,3 ppm (s)
CCM (Chromatographie sur couche mince,
Fertigplatten Kieselgel 60F254, Merck; H = 8 cm)
Solvant:
PrOH (propanol) . . . . . . . . . . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
ED (éthylénediamine) . . . . . . . . . 10
Révélateurs: ninhydrine-12.
Exemple B
S-benzylhomocystéinol
a) Amino-2 benzylthio-4 butanoate d'éthyle.
EMI2.3
300 g de S-benzylhomocystéine sont mis en suspension sous agitation dans 3,900 1 d'éthanol absolu. Le mélange réactionnel est porté 5h à reflux en présence d'un rapide courant de HCI sec.
La solution est décolorée par du noir de carbone et le filtrat amené à sec. La masse reprise par 1200 ml d'éther et 135 g de triéthylamine est agitée 1 h à la température du laboratoire.
L'insoluble est lavé par Et2O sous agitation. Les filtrats éthérés sont mélangés et amenés à sec.
Le résidu, 315,4 g, est une huile jaune qui est rectifiée sous 0,8 mm
Hg. PE: 170-178 C. Rendement: 71,5% (226,2 g).
Analyse pour C13H10O2NS = 253,36
Calculé: C 61,63 H 7,56 N 5,53 S 12,66%
Trouvé: C 61,66-61,72 H 7,83 N 5,72-5,81 S 12,59%
Spectre IR: bande NH2 à 1580 cm-1
bande COO R à 1748 cm-1
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
BuOH (butanol) . . . . . . . . 40 AcOH (acide acétique) . . . . . 10
ED (éthylènediamine) . . . . . . . . . . 50
Révélateurs: ninhydrine-12.
Chlorhydrate (purifié dans EtOH/Et2O)
PF: 62,5-63,5 C (Tottoli).
Analyse pour C32H20O2NSCl = 289,82
Calculé: C 53,87 H 6,95 N4,83 S 11,06%
Trouvé: C 53,79-53,78 H 7,09 N 4,84-4,88 S 11,02%
Spectre RMN- Référence TMS
EMI2.4
<tb> -CrnH-CH3 <SEP> 4,3 <SEP> ppm <SEP> (m) <SEP> -S-CH2- <SEP> 2,6 <SEP> ppm <SEP> (m)
<tb> -CH3 <SEP> 1,3 <SEP> ppm <SEP> (t) <SEP> -S-CH2-CH2 <SEP> 2,3 <SEP> ppm <SEP> (m)
<tb> <SEP> 0 <SEP> 7,4 <SEP> ppm <SEP> (s) <SEP> Ces <SEP> deux <SEP> derniers <SEP> signaux
<tb> <SEP> forment <SEP> un <SEP> système <SEP> A2 <SEP> B2
<tb> <SEP> où <SEP> s'additionne <SEP> le <SEP> signal <SEP> de
<tb> H2-S- <SEP> - <SEP> - <SEP> 3,8 <SEP> ppm <SEP> (s) <SEP> I
<tb> <SEP> - <SEP> -C-H b) S-benzylhomocystéinol
EMI2.5
A une suspension de 43 g de LiAlH4 (4 fois la théorie) dans 1000 ml d'éther anhydre portée à reflux sous agitation mécanique,
on ajoute une solutin de 144 g d'ester éthylique de la S-benzylhomocystéine dans 600 ml d'éther anhydre, à une vitesse telle que le mélange réactionnel continue à bouillir. Après la fin de l'addition, le reflux est continué pendant 1 h.
L'excès de LiAlH4 est détruit par de l'eau.
Après essorage et lavages par Et2 O, les solutions éthérées sont amenées à sec.
Le résidu est rectifié sous pression réduite, à 170-1800C sous 0,6 mm Hg.
On recueille une huile incolore cristallisant en glacière.
Rendement: 73% (88 g). PF: 31-32 C (Tottoli).
Analyse pour C11H17ONS = 211,32
Calculé: C 62,52 H 8,11 N 6,63 S 15,17%
Trouvé: C 62,34 H 8,37 N 6,74 S 15,00%
Spectre IR: bande NH2 à 1585 cm-1
bande OH à 1053 cm- l
Spectre RMN- Référence TMS
Aromatiques 7,4 ppm (s)
EMI2.6
-S-CH2-CH2- 2,5 ppm (m)
Spectre RMN- Référence TMS (suite)
EMI3.1
3 ppm (massif) 3,4 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . . . . . . . . . . . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . 30
ED. . . . 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 1:
Diamino-2,8 dithia-4,6 nonanediol-1,9 (Djenkolol)
EMI3.2
500 ml d'ammoniac liquéfié sont mis dans un ballon de 1000 ml à 3 tubulures muni d'un agitateur mécanique étanche, d'une garde de potasse et d'une ampoule à brome. On ajoute 12 g de Sbenzylcystéinol et peu à peu 2,8 g (théorie) de sodium coupé en fines lamelles. On introduit alors goutte à goutte 6,2 g de dibromométhane (excès de 20% par rapport à la quantité théorique de 5,2 g). Le blocage du groupement - SH est pratiquement instantané (test au nitroprussiate de sodium).
L'excès d'amidure est détruit par la quantité théorique de chlorure d'ammonium. L'ammoniac est évaporé à la température du laboratoire sous faible courant d'azote. Le résidu est séché sous vide et extrait par 3 fois 200 ml de THF. Les extraits sont décolorés au noir et évaporés à sec.
Le résidu est recristallisé dans l'acétate d'éthyle.
Rendement pratique: 58,8% (4,0 g).
PF: 82-84 C (Tottoli).
Le composé est soluble à froid dans l'eau, l'alcool, l'éther.
Analyse pour C7H18O2N2S2 = 226,35
Calculé: C 37,14 H 8,01 N 12,37 S 28,33%
Trouvé: C 37,25-37,26 H 8,10 N 12,53-12,56 S 28,35%
Spectre IR: bande NH2 à 1600 cm-
bande OH à 1050 cm-'
Spectre RMN- Référence TMS
-S-CH2-S- 3,9 ppm (s)
-CH2OH 3,6 ppm(m)
EMI3.3
massif de 2,5 à 3,3 ppm
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH ... . . . . . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . . . . . . . 30
ED. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 2:
Diamino-2,11 dithia-4,9 dodécanediol-1,12
EMI3.4
On applique le mode opératoire décrit à l'exemple 1, en utilisant du dibromo-1 4 butane au lieu du dibromométhane. Le produit obtenu est extrait à l'éther et recristallisé dans l'acétate d'éthyle.
Rendement: 25%.
PF: 78-80 C C (Tottoli). Cristaux blancs solubles dans l'eau, les alcools, I'éther.
Analyse pour C10H24O2N2S2 = 268,44
Calculé: C 44,74 H 9,01 N 10,43 S 23,88%
Trouvé: C44,89 H 9,27 N 10,18 S 23,97%
Spectre IR: bande NH2 à 1600 cm-1
bandes OH à 1050 cm-l et 1350 cm-1
Spectre RMN- Référence TMS
EMI3.5
3,6 ppm (m) 3 ppm (m) 2,6 ppm (m) 1,7 ppm (m)
CCM(Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . 30
ED. . . . . . . . . . . . . . 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 3:
Diamino-2,13 dithia-4,1J tétradécanediol-1,14
EMI3.6
On applique le mode opératoire décrit à l'exemple 1, en utilisant du dibromo- 1,6 hexane au lieu du dibromométhane. Le produit obtenu est extrait au benzène et recristallisé dans l'acétate d'éthyle.
Rendement: 63%. PF: 83-84 C (Tottoli). Cristaux blancs solubles dans l'eau, les alcools, l'éther.
Analyse pour C12H28O2N2S2
Calculé: C48,61 H 9,52 N 9,44 S21,63%
Trouvé: C 48,91 H 9,71 N 10,67 S 21,78%
Spectre IR: bande NH2 à 1600 cm-1
bandes CH2OH à 1050cm-1 et 1350 cm-1
Spectre RMN- Référence TMS
EMI3.7
3,5 ppm (m) 2,9 ppm (m) 2,6 ppm (m) 1,5 ppm (m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH . . . . 60
NH4OH. . . . 30
ED. . 10
Révélateurs: ninhydrine-12.
Exemple 4:
Diamino-2,15 dithia-4,13 hexadécanediol-1,16
EMI3.8
On applique le mode opératoire décrit à l'exemple 1, en utilisant du dibromo-1,8 octane au lieu du dibromométhane. Le produit obtenu est extrait au benzène, puis recristallisé d'abord dans l'acétate d'éthyle et ensuite dans du dichlorométhane.
Rendement: 50%. PF: 92-94 C @ (Tottoli). Cristaux blancs solu- bles dans l'eau, les alcools, I'éther.
Analyse pour C14H32O2N2S2 = 324,54
Calculé: C51,81 H 9,93 N 8,63 S 19,75%
Trouvé: C 51,97 H 10,23 N 8,77 S 19,67%
Spectre IR: bande NH2 à 1580 cm-'
bandes OH à 1037 cm-1 et 1350 cm-1
Spectre RMN- Référence TMS
EMI4.1
3,55 ppm (m) 2,9 ppm (m) 2,55 ppm (m) 1,4 ppm(m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . 60
NH4OH. 30
ED. . . . . 10
Révélateurs: ninhydrine-12.
Exemple 5:
Diamino-2,17 dithia-4.15 octadécanediol-1,18
EMI4.2
On applique le mode opératoire de l'exemple 4.
PF: 102-104.-C (Tottoli). Rendement: 52%.
Analyse pour C16H36O2N2S2 = 352,60
Calculé: C 54,50 H 10,29 N 7,94 S 18,18%
Trouvé: C 54,57 H 10,65 N 8,20 S 18,21%
Spectre IR: bande NH2 à 1577 cm-1
bandes OH à 1040 cm-1 et 1550 cm-1
Spectre RMN- Référence TMS
EMI4.3
3,55 ppm (m) 2,9 ppm(m)2,55 ppm (m) 1,35 ppm (m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . 60
NH4OH. . . . . . 30
ED. . 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 6:
Diamino-2,7 dithia-4.5 octanediol-1,8 (cystinol)
EMI4.4
a) Cystéinol
500 cm3 de NH3 liquéfié sont introduits dans un ballon de 1000 cm3 à 3 tubulures muni d'un agitateur mécanique étanche et d'une garde de KOH.
On ajoute 15 g de S-benzylcystéinol et peu à peu 3,51 g de Na en fines lamelles (excès: 0,13 g pour que la coloration bleue persiste).
L'excès de Na et le mercaptide sodique du cystéinol sont détruits par 7,4 g de NH4CI.
L'ammoniac est chassé sous courant d'azote puis sous bon vide.
Le résidu blanc, solide, n'est pas isolé.
b) Cystinol [décrit sous forme de dichlorhydrate par J. C. Crawall et al., J. Chem. Soc. , 4066-68 (1956)]
Le résidu blanc précédent est repris par 400 cm3 d'eau distillée et 1,5 g FeCl3. Dans la solution obtenue, on fait barboter un courant d'air jusqu'à disparition du thiol (essai au nitroprussiate de Na), ce qui nécessite plusieurs heures. La solution est filtrée. Le filtrat incolore est concentré sous vide à 75 cm3 puis passé sur une colonne de Dowex 50 x 8 activé. Le produit est élué par NH4OH IN.
Les éluats ammoniacaux sont évaporés sous vide et le résidu repris par 100 cm3 d'éther à reflux. L'insoluble est séché sous vide.
Rendement: 83%. PF: 71-73 C (Tottoli). Cristaux blancs, solubles dans l'eau, le méthanol, l'éthanol.
Analyse pourC6H16O2N2S2 = 212,33
Calculé: C 33,94 H 7,59 N 13,19 S 30,20%
Trouvé: C 34,02-34,29 H 7,78 N 13,05 S 30,10%
Spectre IR: bande NH2 à 1605 cm -
bande OH à 1074-1053cm-'
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOHn . 60
NH4OH. 30 ED. 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Spectre RMN- Référence TMS
EMI4.5
3,55 ppm (m) 3,15 ppm (m) 2,8 ppm(m)
Exemple 7:
Oxalate neutre de diamino-2,9 dithia-5,6 décanediol-1,10
(homocystinol)
EMI4.6
A une solution de 5,3 g de S-benzylhomocystéinol dans 250 ml d'ammoniac liquifié, on ajoute sous agitation mécanique 1 g (théorie) de sodium en fines lamelles. L'ammoniac est évaporé à la température du laboratoire aux 3/3 et le mélange réactionnel est traité par 2,67 g de NH4CI ajouté par petites fractions, puis évaporé.
Le résidu est repris par 130 ml d'eau et 0,5 g de FeCI3. On fait barboter un bulle-Åa-bulle rapide d'air pendant 5 h. Le thiol est alors négatif (test au nitroprussiate).
La solution est passée sur une colonne de 100 ml de Dowex 50 x 8 activé (H = 70 cm, = 2 cm). Le produit est élué par de l'ammoniaque 2N et l'éluat amené à sec.
L'huile résiduelle est solidifiée dans l'acétate d'éthyle et la poudre résultante portée 15 min à reflux dans l'éther puis essorée. Rendement brut = 98%.
Le composé est salifié par la quantité théorique d'acide oxalique en milieu alcoolique.
Le sel est purifié par dissolution dans la quantité minimale d'eau additionnée d'éthanoljusqu'à début de précipitation.
Rendement: 35%. PF: 205-207 C (Tottoli).
Analyse pour C10H22O6N2S2 = 330,42
Calculé: C 36,35 H 6,71 N 8,48 S 19,41%
Trouvé: C 36,18 H 6,85 N8,47 S 19,72%
Spectre IR: bande - COO - à 1575 cm-1
bande OH à 1060 cm-1
Spectre RMS- Référence TMS
EMI4.7
2,1 ppm (massif) 2,8 ppm (massif) 3,3 à 3,9 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. 60
NH4OH. 30
ED. 10
Révélateurs: ninhydrine-l3.
Exemple 8:
Oxalate neutre de diamino-2,10 dithia-5,7 undécanediol-1,11
(homodjenkolol)
EMI5.1
A une solution de 10,5 g de S-benzylhomocystéinol dans 500 ml d'ammoniac liquéfié, on ajoute sous agitation 2,3 g de sodium en lamelles (théorie), puis la quantité théorique de dibromométhane (4,35 g). Le blocage du thiol est immédiat. L'excès d'amidure de sodium est détruit par 2,67 g de NH4CI et l'ammoniac évaporé.
Le résidu est repris par 200 ml d'éther. L'insoluble est extrait par 3 x 100 ml d'acétate d'éthyle à reflux sous agitation. Les solutions d'acétate d'éthyle abandonnent 3,8 g (R = 60%) de cristaux.
Le produit est salifié sous forme d'oxalate dans l'éthanol absolu.
11 est purifié par dissolution dans le minimum d'eau et reprécipitation par l'éthanol. Après 12h de glacière, on recueille 4,8 g de cristaux blancs.
Rendement: 56,8%.
PF: 189-190 C (Tottoli) soluble dans l'eau, les alcools.
Analyse pour C11H24O6N2S2 = 344,45
Calculé: C 38,36 H 7,02 N 8,13 S 18,62%
Trouvé: C 38,08 H 7,10 N 8,23 S 18,28%
Spectre IR: bande -COOH à 1580 cm -
bandes OH à 1073 cm-1 et 1300 cm
Spectre RMN- Référence TMS
EMI5.2
3,82 ppm (s) 3,2 à 3,8 ppm (massif) 2,8 ppm (m) 2 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . 60
NH4OH. . . . . . . 30
ED. . . . . . . . . . 10
Révélateurs: ninhydrine-12.
Exemple 9:
Oxalate neutre de diamino-2,11 dlilîia-5,8 dodécanediol-1,12
EMI5.3
On suit le mode opératoire de l'exemple 8, en utilisant le double de la quantité théorique de dibromoéthane. Le temps de blocage du thiol est de 7 h. Après un passage sur colonne de Dowex 50 x 8, le rendement brut est de 86%. Rendement en oxalate neutre purifié: 40%. Les cristaux blancs obtenus sont solubles dans l'eau et les alcools.
PF: 194-195,5 C (d) (Tottoli).
Analyse pour C12H26O6N2S2 = 358
Calculé: C 40,20 H 7,31 N 7,81 S 17,89%
Trouvé: C 39,94 H 7,52 N 8,15 S 17,71%
Spectre IR: bande - COOH à 1626 cm-1
bandes OH à 1060 cm- l et 1300 cm
Spectre RMN- Référence TMS
EMI5.4
3,4 à 3,9 ppm (massif)
Spectre RMN- Référence TMS (suite)
EMI5.5
2,83 ppm (s) 2,7 ppm (m) 2 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . 60
NH40H. . 30
ED. . ... 10
Révélateurs: ninhydrine-12.
Exemple 10:
Mandélate de diamino-2,13 dithia-5,10 tétradécanediol-1,14
EMI5.6
En suivant toujours le même mode opératoire, et en utilisant la quantité théorique de dibromo-1,4 butane, on atteint le blocage des groupes SH en 15 min. Après extraction par le dichlorométhane et recristallisation dans l'acétate d'éthyle, le rendement en base impure est de 45%.
On salifie dans l'éthanol et on lave le mandélate neutre obtenu par de l'éther. Les cristaux blancs obtenus sont solubles dans l'eau, les alcools, le diméthylformamide.
PF: 153 C (Tottoli). Rendement: 29%.
Analyse pour C28H44O3N2S2 = 600,79
Calculé: C 55,97 H 7,38 N 4,66 S 10,67%
Trouvé: C 56,26 H 7,66 N 4,58 S 10,93%
Spectre IR: bande -COOHà 1577 cm-1
bandes OH à 1064 cm-1 et 1355 cm
Spectre RMN- Référence TMS
EMI5.7
7,4 ppm (s) 4,95 ppm (s) 3,6 ppm(m) 3,3 ppm (massif) 2,5 ppm (massif) 1,5 à 2 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH . . . 60
NH4OH. 30
ED. 10
Révélateurs: ninhydrine-I2-
Exemple 11:
Mandélate de diamino-2, 14 dithia-5,11 pentadécanediol-1,15
EMI5.8
En suivant le mode opératoire de l'exemple 8, on utilise un excès de 5%, par rapport à la quantité théorique de dibromo-1,5 pentane.
Le temps de blocage de la fonction -SH@ est de 5 h. On extrait par du dichlorométhane et on recristallise dans l'acétate d'éthyle. Le rendement en base impure est de 63%. On prépare le mandélate dans de l'éthanol et on le lave avec de l'éther.
Rendement: 49,5%. PF: 131-132 C (Tottoli).
Soluble dans l'eau, les alcools, DMF.
Analyse pour C29H46O8N2S2 = 614,82
Calculé: C56,65 H7,54 N4,55 S 10,43%
Trouvé: C 56,81 H 7,75 N 4,64 S 10,38%
Spectre IR: bande - COOH à 1587 cm-1
bandes OH à 1064cm-1 et 1351 cm
Spectre RMN- Référence TMS
EMI6.1
7,4 ppm (s) 4,95 ppm (s) 3,6 ppm (massif) 3,3 ppm (massif) 2,5 ppm (massif) 1,3 à 2 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH . . . 60
NH4OH. . 30
ED. . 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 12:
Diamino-2,15 dithia-5,12 hexadécanediol-1,16
EMI6.2
En suivant le mode opératoire de l'exemple 8, on obtient, avec la quantité théorique de dibromo-1,6 hexane, un temps de blocage des thiols de 15 min. Après extraction par le dichlorométhane et recristallisation dans l'acétate d'éthyle, on recueille des cristaux blancs.
PF: 79-81 C (Kofler). Rendement: 61%.
Cristaux blancs solubles dans l'eau, les alcools.
Analyse pour C14H32O2N2S2 = 324,55
Calculé: C 51,81 H 9,44 N 8,63 S 19,76%
Trouvé: C 51,80-51,52 H 10,23-10,30 N 8,67 S 19,52%
Spectre IR: bande NH2 à 1550 cm-1
bandes OH à 1060 cm-1 et 1350 cm
Spectre RMN- Référence TMS
EMI6.3
1,6 ppm (massif) 3,5 ppm (m) 2,6 ppm (m) 3 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
BuOHn. 40
ED. . . 50
ACOH . 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 13:
Diamino-2,17 dithia-5,14 octadécanediol-1,18
EMI6.4
En suivant le mode opératoire de l'exemple 8, on obtient, avec la quantité théorique de dibromo-1,8 octane, le blocage des thiols en 1 h. On extrait par du dichlorométhane et on recristallise dans l'acétate d'éthyle.
PF: 84 C (Kofler). Rendement: 28%.
Cristaux blancs, solubles dans l'eau, les alcools.
Analyse pour C16H3602N2S2 = 352,6
Calculé: C 54,50 H 10,29 N 7,94 S 18,18%
Trouvé: C 54,42 H 10,42 N 7,87 S 17,95%
Spectre IR: bande NH2 à 1560 cm-1
bandes OH à 1064 cm-1 et 1345 cm
Spectre RMN
EMI6.5
1,6 ppm (massif) 3,5 ppm (m) 2,6 ppm (m) 3 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . 60
NH4OH. . 30
ED 10
Révélateurs: ninhydrine-I2.
Exemple 14:
Diamino-2,19 dithia-5,16 eicosanediol-1,20
EMI6.6
En suivant le mode opératoire. de l'exemple 8, et en utilisant un excès de 20% par rapport à la quantité théorique de dibromo-1,10 décane, on réalise le blocage des thiols en 21/2 h. On extrait par du dichlorométhane et on recristallise dans l'acétate d'éthyle.
Rendement: 27%.
Cristaux blancs, solubles dans l'eau, les alcools.
Analyse pour C18H40O2N2S2 = 380,59
Calculé: C 56,79 H 10,59 N 7,36 S 16,85%
Trouvé: C 56,87 H 10,71 N 7,07 S 16,76%
Spectre: bande NH2 à 1550cm-
bandes OH à 1060 cm-1 et 1350 cm-1
Spectre RMN
EMI6.7
1,5 ppm (massif) 2,6 ppm (m) 3,4 ppm (m) 2,9 ppm (massif)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH . . . . 60
NH4OH. . 30
ED. . . 10
Révélateurs: ninhydrine-12.
La présente invention a donc pour objet les compositions pharmaceutiques contenant, à titre de substance active, au moins l'un des composés de formule (I) dans laquelle n est égal à 0 ou représente un nombre entier de 1 à 10, et m est égal à 1 ou à 2, ledit composé étant sous forme de base ou de sel acceptable du point de
vue pharmacologique.
Etude pharmacologique
Les composés de formule I ont été soumis à divers essais en vue de la détermination de leur activité thérapeutique.
Toxicité
Les produits de formule (I) sont peu toxiques.
La dose létale 50 (DL50) par voie orale (voir le tableau cidessous) a été déterminée par la méthode de Karber et Behrens
( Arch. Exp. Pathol. Pharm. > > , 177, 1935, p. 379) sur des souris Evic
Ceba @ Swiss EOPS NMRI Han de 24 à 26 g.
Les résultats sont indiqués dans le tableau ci-après.
Activité hypolipémiante: hyperlipidémie expérimentale au Triton
Les produits de formule (I) possèdent d'intéressantes propriétés hypolipémiantes.
La technique utilisée pour mettre ces propriétés en évidence a été décrite par M. Friedman et S. O. Byers dans J. Exptl. Med. , 97, 117, 1953 et également par S. Garattini et coll. dans Arzneim.
Forsch. > > , 9, 206, 1959.
Les rats reçoivent par voie intraveineuse 0,3 ml/100 g de poids corporel d'une solution de Triton 13-39 à 10%. Les produits à tester sont administrés simultanément par voie orale à une dose correspondant au dixième de leur DL50, déterminée par voie orale chez la souris, sans que la dose utilisée dépasse 500 mg/kg.
18 h après l'injection de Triton, les animaux sont sacrifiés par section des carotides et le sang est recueilli pour la détermination des paramètres lipidiques: cholestérol (auto-analyseur Technicon AA II
Lieberman Burchard), ss-lipoprotéines (Burnstein), lipides totaux (Chabrol et Charonnat), triglycérides (Boehringer enzymatique).
La densité optique du sérum à 691 nm est mesurée dans chaque cas. Chaque produit a été testé sur dix animaux. Les calculs statistiques sont effectués sur les moyennes affectées de leur écart type à la moyenne par le test de Student.
Le produit de référence utilisé est le clofibrate.
Le tableau ci-dessous rassemble les résultats obtenus.
Tableau
EMI7.1
<tb> <SEP> Activitéhypolipémiante
<tb> <SEP> DL50 <SEP> Pourcentages <SEP> de <SEP> diminution
<tb> <SEP> Composé <SEP> g!kg <SEP> Doses
<tb> @@@@@
<tb> per <SEP> os
<tb> (mg/kg)p.o. <SEP> Densité <SEP> optique
<tb> <SEP> Cholestérol <SEP> ss-lipoprotéines <SEP> Lipides <SEP> totaux <SEP> Triglycérides
<tb> <SEP> du <SEP> sérum
<tb> 28 <SEP> 36 <SEP> 26 <SEP> 25
<tb> <SEP> Clofibrate <SEP> 2,3 <SEP> 225 <SEP>
<SEP> p#0,001 <SEP> <SEP> p#0,01 <SEP> p#0,001 <SEP> p#0,001
<tb> 10
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 1 <SEP> > 5 <SEP> 500 <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> p#0,05
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 2 <SEP> 5 <SEP> 500 <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> <RTI
ID=7.12> p#0,05
<tb> 4 <SEP> 39 <SEP> 27 <SEP> 28 <SEP> 53
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 3 <SEP> 2,7 <SEP> 270
<tb> <SEP> NS <SEP> p#0,01 <SEP> p#0,001 <SEP> p#0,001 <SEP> p#0,01
<tb> <SEP> 10 <SEP> 24 <SEP> 34 <SEP> 57
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 4 <SEP> 1,275 <SEP> 127 <SEP> NS
<tb> p#0,01 <SEP> p#0,01 <SEP> p#0,001 <SEP> p#0,001
<tb> <SEP> 8 <SEP> 30 <SEP> 56
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 5 <SEP> 1,75 <SEP> 175 <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> p#0,02 <SEP> p#0,01 <SEP> p#0,01
<tb> 40 <SEP> 46 <SEP> 38 <SEP> 42 <SEP> 78
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 6 <SEP> 3,1 <SEP> 310
<tb> <SEP> p#0,0001 <SEP> <SEP> p#0,0001 <SEP> <SEP> <RTI
ID=7.22> p#0,001 <SEP> <SEP> p#0,0001 <SEP> p#0,0001
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 12 <SEP> 2,5 <SEP> 250 <SEP> NS <SEP> ll <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP>
<tb> <SEP> Exemple <SEP>
<tb> <SEP> 13 <SEP> 23 <SEP> 27 <SEP> 33 <SEP> 48
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 13 <SEP> 1,4 <SEP> 140
<tb> <SEP> p#0,02 <SEP> <SEP> p#0,001 <SEP> <SEP> p#0,01 <SEP> <SEP> p#0,01 <SEP> <SEP> p#0,05
<tb> 15
<tb> <SEP> Exemple <SEP> 14 <SEP> 0,95 <SEP> 95 <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> p#0,001
<tb>
NS: résultat non significatif.
Ces produits, administrables par voie orale, sont indiqués dans le traitement des perturbations lipidiques isolées ou associées aux manifestations athéroscléreuses telles qu'hypercholestérolémies, hypertriglycéridémies, hyperlipidémies mixtes. Les indications thérapeutiques s'étendent aux coronarites, infarctus du myocarde, insuffisance vasculaire cérébrale, artérites des membres inférieurs, hypertension artérielle, etc.
La posologie des produits actifs est de 0,3 à 2 g de substance active parjour, soit 5 à 30 mg/kg/d.
Les compositions pharmaceutiques de l'invention peuvent prendre des formes variées telles que comprimés, comprimés dragéifiés, gélules, granulés, etc
Des exemples de compositions pharmaceutiques sont donnés comme suit:
EMI8.1
Gélules:
Composé de l'exemple 6 250 mg
Silice colloïdale 20 mg
Talc l5mg
Comprimés:
Composé de l'exemple 6 500 mg
Silice colloïdale 20 mg
Cellulose microcristalline 50 mg
Lactose 50mg
Stéarate de magnésium 10 mg
** ATTENTION ** start of the DESC field may contain end of CLMS **.
CLAIMS
1. Pharmaceutical composition, characterized in that it contains, as active substance, a compound corresponding to the general formula (1):
EMI1.1
wherein n is zero or represents an integer from 1 to 10, and m represents the number I or 2, or a salt of such a compound, acceptable from the pharmacological point of view.
2. Pharmaceutical composition according to claim 1, characterized in that the active substance is chosen from the following: diamino-2,8 dithia-4,6 nonanediol-1,9, diamino-2,11 dithia-4,9 dodecanediol- 1.12, diamino-2.13 dithia-4.11 tetradecanediol-1.14, diamino-2.15 dithia-4.13 hexadecanediol- 1.16, diamino-2.17 dithia-4.15 octadecanediol-1, 18, diamino-2,7 dithia-4,5 octanediol-1,8, diamino-2, 15 dithia-5,12 hexadecanediol-1,16, diamino-2, 17 dithia-5,14 octadécanediol-1,18, diamino-2,19 dithia-5,16 eicosanediol-1,20, as well as their pharmacologically acceptable salts.
3. Pharmaceutical composition according to one of claims 1 or 2, characterized in that it is in a form which can be administered orally.
4. Pharmaceutical composition according to claim 3, charac terized in that it is in a form allowing the administration of doses ranging from 5 to 30 mglkg / d.
5. Process for the preparation of the active compounds corresponding to the formula (I) indicated in claim 1, and in which n represents an integer from 1 to 10 and m represents the number 1 or 2, process characterized in that one reacts a dihalide of formula (II): X- (CH,), - X (11) with an S-benzylated derivative of formula III
EMI1.2
in which X represents a halogen atom, n represents an integer from 1 to 10 and m represents the number 1 or 2, in liquid ammonia in the presence of an alkaline amide, then the product obtained is separated.
6. Method according to claim 5, characterized in that X denotes a bromine atom.
7. Method according to one of claims 5 or 6, characterized in that the dihalide of formula (II) is used in stoichiometric proportion.
8. Method according to one of claims 5 or 6, characterized in that the dihalide of formula II is used with an excess of up to 100% of the stoichiometric proportion.
9. A process for preparing the active compounds corresponding to the formula (I) indicated in claim 1, and in which n represents the number 0 and m represents the number 1 or 2, process characterized in that a thiol is converted into a S-benzylated derivative of formula III
EMI1.3
in which m represents the number 1 or 2, then an oxidation by air is carried out to obtain the disulfide of formula (I).
10. Method according to claim 9, characterized in that a compound of formula (III) is transformed into thiol in liquid ammonia in the presence of sodium amide.
11. Method according to claim 9, characterized in that the thiol is obtained, obtained from the S-benzylated derivative of formula (III), by bubbling air through an aqueous solution of said thiol, in the presence of chloride. ferric.
The present invention relates to pharmaceutical compositions, in particular with lipid-lowering activity, the active substance of which is an alkylene biscysteinol or an alkylene bisomocysteinol in the form of a base or a salt, and methods for preparing said active substances.
The compounds used as active substance in the compositions according to the invention correspond to the general formula:
EMI1.4
where n is 0 or represents an integer from 1 to 10, and m represents the number 1 or 2.
The compounds of formula I are prepared by the action of an alkane dihalide of formula: X- (CH2) 11-x QI) in which X represents a halogen atom and n represents an integer from 1 to 10, on S-benzylcysteinol or Sbenzylhomocysteinol, of respective formulas:
EMI1.5
in liquid ammonia in the presence of alkaline amide such as sodium amide. The dihalide of formula aI) can be used pure or in solution in a solvent such as diethyl ether; it can be used in stoichiometric proportion or in excess, for example an excess ranging up to 100%.
The reaction products can be separated in a known manner: evaporation of the ammonia, extraction of the organic phase, purifications.
In the case of compounds for which n = O, the benzylated derivatives S are transformed into thiols, then an oxidation by air provides the corresponding disulfide.
The S-benzylcysteinol of formula (IIIa), used as starting compound, can be obtained in the following way, in three stages:
1. Preparation of S-benzylcysteine according to the method described by M. D. Armstrong, J. Org. Chem. , 16, 749-53 (1951).
2. Preparation of the hydrochloride and the base of the ethyl ester of S-benzylcysteine according to J. C. Crawall, D. F. Elliott and K. C.
Hooper, J. Chem. Soc. , 4066-68 (1956).
3. Preparation of S-benzylcysteinol by reductive saponification in the presence of aluminum hydride and lithium, or triethyllithium borohydride; this compound was obtained impure, in the form of oxalate, by J. C. Crawall, same reference as above.
The S-benzylhomocysteinol of formula (IIIb) can be prepared according to steps analogous to those described above. The first, namely the preparation of S-benzylcysteine, is described in Biochem. prep. , 5, 87.
The following examples illustrate the preparation of particular compounds.
Example A
S-benzylcysteinol
EMI2.1
In a 2000 ml three-necked flask fitted with a sealed mechanical stirrer, a condenser with calcium chloride guard, a bromine bulb protected from atmospheric humidity, we place:
350 ml of anhydrous ether rectified on LiAlH4,
15.8 g of LiAlH4 (ie 4 times the theoretical amount which is 1/2 mol LiAlH4 / mol of ester).
The suspension is brought to reflux with stirring. The solution of base ester (50.3 g) in anhydrous ether is introduced at a suitable speed to maintain the reflux.
The boiling of the reaction mixture is continued for 10 minutes after the end of the addition of the base ester solution.
After cooling, the excess lithium aluminum hydride is destroyed by the minimum amount of water added dropwise.
The alumina is drained and washed with ether.
The ethereal solutions are distilled. The residue crystallizes.
29.5 g of white crystals are obtained.
Yield: 71.2%. PF: 38-40 (Tottoli).
Analysis for C10H15O NS = 197.29
Calculated: C 60.87 H 7.66 N 7.09 S 16.25%
Found: C61.19-61.27 H 7.81-7.80 N 7.01 S 16.16%
S-benzylcysteinol can be purified by distillation.
PE: 142-144 C under 0.25 mm. PF: 44 (Tottoli).
Analysis for C10H15ONS = 197.29
Calculated: C 60.87 H 7.66 N 7.09 S 16.25%
Found: C60.78 H7.98 N7.10 S16.51%
IR spectrum: NH2 band at 1600 cm-
CH2OH strip at 1050 cm-1
NMR spectrum: Reference TMS (tetramethylsilane)
EMI2.2
2.5 ppm (m) 2.9 ppm (m) 3.48 ppm (m) 3.67 ppm (s) 7.3 ppm (s)
TLC (thin layer chromatography,
Fertigplatten Kieselgel 60F254, Merck; H = 8 cm)
Solvent:
PrOH (propanol). . . . . . . . . . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
ED (ethylenediamine). . . . . . . . . 10
Developers: ninhydrin-12.
Example B
S-benzylhomocysteinol
a) Ethyl 2-amino-4-benzylthio-butanoate.
EMI2.3
300 g of S-benzylhomocysteine are suspended with stirring in 3.900 1 of absolute ethanol. The reaction mixture is brought to reflux for 5 hours in the presence of a rapid stream of dry HCl.
The solution is discolored with carbon black and the filtrate brought to dryness. The mass taken up in 1200 ml of ether and 135 g of triethylamine is stirred for 1 h at laboratory temperature.
The insoluble material is washed with Et2O with stirring. The ethereal filtrates are mixed and brought to dryness.
The residue, 315.4 g, is a yellow oil which is rectified to 0.8 mm
Hg. PE: 170-178 C. Yield: 71.5% (226.2 g).
Analysis for C13H10O2NS = 253.36
Calculated: C 61.63 H 7.56 N 5.53 S 12.66%
Found: C 61.66-61.72 H 7.83 N 5.72-5.81 S 12.59%
IR spectrum: NH2 band at 1580 cm-1
COO R strip at 1748 cm-1
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
BuOH (butanol). . . . . . . . 40 AcOH (acetic acid). . . . . 10
ED (ethylenediamine). . . . . . . . . . 50
Developers: ninhydrin-12.
Hydrochloride (purified in EtOH / Et2O)
PF: 62.5-63.5 C (Tottoli).
Analysis for C32H20O2NSCl = 289.82
Calculated: C 53.87 H 6.95 N4.83 S 11.06%
Found: C 53.79-53.78 H 7.09 N 4.84-4.88 S 11.02%
NMR spectrum - TMS reference
EMI2.4
<tb> -CrnH-CH3 <SEP> 4.3 <SEP> ppm <SEP> (m) <SEP> -S-CH2- <SEP> 2.6 <SEP> ppm <SEP> (m)
<tb> -CH3 <SEP> 1.3 <SEP> ppm <SEP> (t) <SEP> -S-CH2-CH2 <SEP> 2.3 <SEP> ppm <SEP> (m)
<tb> <SEP> 0 <SEP> 7.4 <SEP> ppm <SEP> (s) <SEP> These <SEP> two <SEP> last <SEP> signals
<tb> <SEP> form <SEP> a <SEP> system <SEP> A2 <SEP> B2
<tb> <SEP> where <SEP> is added <SEP> the <SEP> signal <SEP> of
<tb> H2-S- <SEP> - <SEP> - <SEP> 3.8 <SEP> ppm <SEP> (s) <SEP> I
<tb> <SEP> - <SEP> -C-H b) S-benzylhomocysteinol
EMI2.5
To a suspension of 43 g of LiAlH4 (4 times the theory) in 1000 ml of anhydrous ether brought to reflux with mechanical stirring,
a solution of 144 g of ethyl ester of S-benzylhomocysteine in 600 ml of anhydrous ether is added at a speed such that the reaction mixture continues to boil. After the end of the addition, the reflux is continued for 1 hour.
The excess LiAlH4 is destroyed by water.
After spinning and washing with Et2 O, the ethereal solutions are brought to dryness.
The residue is rectified under reduced pressure, at 170-1800C under 0.6 mm Hg.
A colorless oil crystallizing in a cooler is collected.
Yield: 73% (88 g). PF: 31-32 C (Tottoli).
Analysis for C11H17ONS = 211.32
Calculated: C 62.52 H 8.11 N 6.63 S 15.17%
Found: C 62.34 H 8.37 N 6.74 S 15.00%
IR spectrum: NH2 band at 1585 cm-1
OH strip at 1053 cm- l
NMR spectrum - TMS reference
Aromatic 7.4 ppm (s)
EMI2.6
-S-CH2-CH2- 2.5 ppm (m)
NMR spectrum - TMS reference (continued)
EMI3.1
3 ppm (solid) 3.4 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . . . . . . . . . . . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . 30
ED. . . . 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 1:
Diamino-2,8 dithia-4,6 nonanediol-1,9 (Djenkolol)
EMI3.2
500 ml of liquefied ammonia are put in a 1000 ml balloon with 3 tubes fitted with a sealed mechanical stirrer, a potash guard and a dropping funnel. 12 g of Sbenzylcysteinol are added and little by little 2.8 g (theory) of sodium cut into thin strips. 6.2 g of dibromomethane are then introduced dropwise (excess of 20% relative to the theoretical amount of 5.2 g). The blocking of the - SH group is practically instantaneous (sodium nitroprusside test).
The excess amide is destroyed by the theoretical amount of ammonium chloride. The ammonia is evaporated at laboratory temperature under a weak stream of nitrogen. The residue is dried under vacuum and extracted with 3 times 200 ml of THF. The extracts are discolored in black and evaporated to dryness.
The residue is recrystallized from ethyl acetate.
Practical yield: 58.8% (4.0 g).
PF: 82-84 C (Tottoli).
The compound is soluble in cold water, alcohol, ether.
Analysis for C7H18O2N2S2 = 226.35
Calculated: C 37.14 H 8.01 N 12.37 S 28.33%
Found: C 37.25-37.26 H 8.10 N 12.53-12.56 S 28.35%
IR spectrum: NH2 band at 1600 cm-
OH strip at 1050 cm- '
NMR spectrum - TMS reference
-S-CH2-S- 3.9 ppm (s)
-CH2OH 3.6 ppm (m)
EMI3.3
massive from 2.5 to 3.3 ppm
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH .... . . . . . 60
NH4OH. . . . . . . . . . . . . . . . 30
ED. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 2:
Diamino-2.11 dithia-4.9 dodecanediol-1.12
EMI3.4
The procedure described in Example 1 is applied, using dibromo-1 4 butane instead of dibromomethane. The product obtained is extracted with ether and recrystallized from ethyl acetate.
Yield: 25%.
PF: 78-80 C C (Tottoli). White crystals soluble in water, alcohols, ether.
Analysis for C10H24O2N2S2 = 268.44
Calculated: C 44.74 H 9.01 N 10.43 S 23.88%
Found: C44.89 H 9.27 N 10.18 S 23.97%
IR spectrum: NH2 band at 1600 cm-1
OH bands at 1050 cm-l and 1350 cm-1
NMR spectrum - TMS reference
EMI3.5
3.6 ppm (m) 3 ppm (m) 2.6 ppm (m) 1.7 ppm (m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . 60
NH4OH. . . . . . . . . . 30
ED. . . . . . . . . . . . . . 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 3:
Diamino-2.13 dithia-4.1J tetradecanediol-1.14
EMI3.6
The procedure described in Example 1 is applied, using 1,6-dibromohexane instead of dibromomethane. The product obtained is extracted with benzene and recrystallized from ethyl acetate.
Yield: 63%. PF: 83-84 C (Tottoli). White crystals soluble in water, alcohols, ether.
Analysis for C12H28O2N2S2
Calculated: C48.61 H 9.52 N 9.44 S21.63%
Found: C 48.91 H 9.71 N 10.67 S 21.78%
IR spectrum: NH2 band at 1600 cm-1
CH2OH bands at 1050cm-1 and 1350 cm-1
NMR spectrum - TMS reference
EMI3.7
3.5 ppm (m) 2.9 ppm (m) 2.6 ppm (m) 1.5 ppm (m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . 60
NH4OH. . . . 30
ED. . 10
Developers: ninhydrin-12.
Example 4:
Diamino-2.15 dithia-4.13 hexadecanediol-1.16
EMI3.8
The procedure described in Example 1 is applied, using 1,8-dibromo-octane instead of dibromomethane. The product obtained is extracted with benzene, then recrystallized first from ethyl acetate and then from dichloromethane.
Yield: 50%. PF: 92-94 C @ (Tottoli). White crystals soluble in water, alcohols, ether.
Analysis for C14H32O2N2S2 = 324.54
Calculated: C51.81 H 9.93 N 8.63 S 19.75%
Found: C 51.97 H 10.23 N 8.77 S 19.67%
IR spectrum: NH2 band at 1580 cm- '
OH bands at 1037 cm-1 and 1350 cm-1
NMR spectrum - TMS reference
EMI4.1
3.55 ppm (m) 2.9 ppm (m) 2.55 ppm (m) 1.4 ppm (m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . 60
NH4OH. 30
ED. . . . . 10
Developers: ninhydrin-12.
Example 5:
Diamino-2.17 dithia-4.15 octadecanediol-1.18
EMI4.2
The procedure of Example 4 is applied.
PF: 102-104.-C (Tottoli). Yield: 52%.
Analysis for C16H36O2N2S2 = 352.60
Calculated: C 54.50 H 10.29 N 7.94 S 18.18%
Found: C 54.57 H 10.65 N 8.20 S 18.21%
IR spectrum: NH2 band at 1577 cm-1
OH bands at 1040 cm-1 and 1550 cm-1
NMR spectrum - TMS reference
EMI4.3
3.55 ppm (m) 2.9 ppm (m) 2.55 ppm (m) 1.35 ppm (m)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . 60
NH4OH. . . . . . 30
ED. . 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 6:
Diamino-2,7 dithia-4.5 octanediol-1,8 (cystinol)
EMI4.4
a) Cysteinol
500 cm3 of liquefied NH3 are introduced into a 1000 cm3 flask with 3 tubes fitted with a sealed mechanical stirrer and a KOH guard.
15 g of S-benzylcysteinol and little by little 3.51 g of Na are added in thin strips (excess: 0.13 g so that the blue coloring persists).
The excess Na and the sodium mercaptide of cysteinol are destroyed by 7.4 g of NH4Cl.
The ammonia is removed under a stream of nitrogen and then under good vacuum.
The solid white residue is not isolated.
b) Cystinol [described as dihydrochloride by J. C. Crawall et al., J. Chem. Soc. , 4066-68 (1956)]
The preceding white residue is taken up in 400 cm3 of distilled water and 1.5 g FeCl3. In the solution obtained, a stream of air is bubbled until the thiol disappears (test with Na nitroprusside), which requires several hours. The solution is filtered. The colorless filtrate is concentrated under vacuum to 75 cm3 and then passed over a column of activated Dowex 50 x 8. The product is eluted by NH4OH IN.
The ammoniacal eluates are evaporated under vacuum and the residue taken up in 100 cm3 of ether at reflux. The insoluble material is dried under vacuum.
Yield: 83%. PF: 71-73 C (Tottoli). White crystals, soluble in water, methanol, ethanol.
Analysis for C6H16O2N2S2 = 212.33
Calculated: C 33.94 H 7.59 N 13.19 S 30.20%
Found: C 34.02-34.29 H 7.78 N 13.05 S 30.10%
IR spectrum: NH2 band at 1605 cm -
OH strip at 1074-1053cm- '
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOHn. 60
NH4OH. 30 ED. 10
Developers: ninhydrin-I2.
NMR spectrum - TMS reference
EMI4.5
3.55 ppm (m) 3.15 ppm (m) 2.8 ppm (m)
Example 7:
Diamino-2,9 dithia-5,6 decanediol neutral oxalate-1,10
(homocystinol)
EMI4.6
To a solution of 5.3 g of S-benzylhomocysteinol in 250 ml of liquid ammonia, 1 g (theory) of sodium is added with mechanical stirring in thin strips. The ammonia is evaporated at laboratory temperature to 3/3 and the reaction mixture is treated with 2.67 g of NH4Cl added in small fractions, then evaporated.
The residue is taken up in 130 ml of water and 0.5 g of FeCl3. A rapid bubble-air bubble is bubbled for 5 h. The thiol is then negative (nitroprusside test).
The solution is passed through a column of 100 ml of activated Dowex 50 x 8 (H = 70 cm, = 2 cm). The product is eluted with 2N ammonia and the eluate brought to dryness.
The residual oil is solidified in ethyl acetate and the resulting powder brought to reflux in ether for 15 min and then wrung out. Gross yield = 98%.
The compound is salified by the theoretical amount of oxalic acid in an alcoholic medium.
The salt is purified by dissolving in the minimum amount of water added with ethanol until precipitation begins.
Yield: 35%. PF: 205-207 C (Tottoli).
Analysis for C10H22O6N2S2 = 330.42
Calculated: C 36.35 H 6.71 N 8.48 S 19.41%
Found: C 36.18 H 6.85 N 8.47 S 19.72%
IR spectrum: band - COO - at 1575 cm-1
OH strip at 1060 cm-1
RMS spectrum - TMS reference
EMI4.7
2.1 ppm (solid) 2.8 ppm (solid) 3.3 to 3.9 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. 60
NH4OH. 30
ED. 10
Developers: ninhydrin-13.
Example 8:
Diamino neutral 2.10 dithia-5.7 oxanate undecanediol-1.11
(homodjenkolol)
EMI5.1
To a solution of 10.5 g of S-benzylhomocysteinol in 500 ml of liquefied ammonia, 2.3 g of sodium in strips are added with stirring (theory), then the theoretical amount of dibromomethane (4.35 g). The blocking of thiol is immediate. The excess sodium amide is destroyed by 2.67 g of NH 4 Cl and the ammonia evaporated.
The residue is taken up in 200 ml of ether. The insoluble material is extracted with 3 x 100 ml of ethyl acetate at reflux with stirring. The ethyl acetate solutions leave 3.8 g (R = 60%) of crystals.
The product is salified as an oxalate in absolute ethanol.
It is purified by dissolving in the minimum amount of water and reprecipitation with ethanol. After 12 hours in the cooler, 4.8 g of white crystals are collected.
Yield: 56.8%.
PF: 189-190 C (Tottoli) soluble in water, alcohols.
Analysis for C11H24O6N2S2 = 344.45
Calculated: C 38.36 H 7.02 N 8.13 S 18.62%
Found: C 38.08 H 7.10 N 8.23 S 18.28%
IR spectrum: -COOH band at 1580 cm -
OH bands at 1073 cm-1 and 1300 cm
NMR spectrum - TMS reference
EMI5.2
3.82 ppm (s) 3.2 to 3.8 ppm (solid) 2.8 ppm (m) 2 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . 60
NH4OH. . . . . . . 30
ED. . . . . . . . . . 10
Developers: ninhydrin-12.
Example 9:
Diamino neutral oxalate-2.11 dlilîia-5.8 dodecanediol-1.12
EMI5.3
The procedure of Example 8 is followed, using double the theoretical amount of dibromoethane. The thiol blocking time is 7 h. After passing through a Dowex 50 × 8 column, the gross yield is 86%. Yield of purified neutral oxalate: 40%. The white crystals obtained are soluble in water and in alcohols.
PF: 194-195.5 C (d) (Tottoli).
Analysis for C12H26O6N2S2 = 358
Calculated: C 40.20 H 7.31 N 7.81 S 17.89%
Found: C 39.94 H 7.52 N 8.15 S 17.71%
IR spectrum: band - COOH at 1626 cm-1
OH bands at 1060 cm- l and 1300 cm
NMR spectrum - TMS reference
EMI5.4
3.4 to 3.9 ppm (solid)
NMR spectrum - TMS reference (continued)
EMI5.5
2.83 ppm (s) 2.7 ppm (m) 2 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . 60
NH40H. . 30
ED. . ... 10
Developers: ninhydrin-12.
Example 10:
Diamino-2.13 dithia-5.10 tetradecanediol-1.14 mandelate
EMI5.6
Always following the same procedure, and using the theoretical amount of 1,4-dibromo-butane, the blocking of the SH groups is achieved in 15 min. After extraction with dichloromethane and recrystallization from ethyl acetate, the yield of impure base is 45%.
Salified in ethanol and the neutral mandelate obtained is washed with ether. The white crystals obtained are soluble in water, alcohols, dimethylformamide.
PF: 153 C (Tottoli). Yield: 29%.
Analysis for C28H44O3N2S2 = 600.79
Calculated: C 55.97 H 7.38 N 4.66 S 10.67%
Found: C 56.26 H 7.66 N 4.58 S 10.93%
IR spectrum: band -COOH at 1577 cm-1
OH bands at 1064 cm-1 and 1355 cm
NMR spectrum - TMS reference
EMI5.7
7.4 ppm (s) 4.95 ppm (s) 3.6 ppm (m) 3.3 ppm (solid) 2.5 ppm (solid) 1.5 to 2 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . 60
NH4OH. 30
ED. 10
Developers: ninhydrin-I2-
Example 11:
Diamino-2, 14 dithia-5.11 pentadecanediol-1.15 mandelate
EMI5.8
Following the procedure of Example 8, a 5% excess is used, relative to the theoretical amount of 1,5-dibromo pentane.
The blocking time for the -SH @ function is 5 h. Extraction is carried out with dichloromethane and recrystallization from ethyl acetate. The impure base yield is 63%. The mandelate is prepared in ethanol and washed with ether.
Yield: 49.5%. PF: 131-132 C (Tottoli).
Soluble in water, alcohols, DMF.
Analysis for C29H46O8N2S2 = 614.82
Calculated: C56.65 H7.54 N4.55 S 10.43%
Found: C 56.81 H 7.75 N 4.64 S 10.38%
IR spectrum: band - COOH at 1587 cm-1
OH bands at 1064cm-1 and 1351 cm
NMR spectrum - TMS reference
EMI6.1
7.4 ppm (s) 4.95 ppm (s) 3.6 ppm (solid) 3.3 ppm (solid) 2.5 ppm (solid) 1.3 to 2 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . 60
NH4OH. . 30
ED. . 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 12:
Diamino-2.15 dithia-5.12 hexadecanediol-1.16
EMI6.2
By following the procedure of Example 8, the thiol blocking time of 15 min is obtained with the theoretical amount of 1,6-dibromo hexane. After extraction with dichloromethane and recrystallization from ethyl acetate, white crystals are collected.
PF: 79-81 C (Kofler). Yield: 61%.
White crystals soluble in water, alcohols.
Analysis for C14H32O2N2S2 = 324.55
Calculated: C 51.81 H 9.44 N 8.63 S 19.76%
Found: C 51.80-51.52 H 10.23-10.30 N 8.67 S 19.52%
IR spectrum: NH2 band at 1550 cm-1
OH bands at 1060 cm-1 and 1350 cm
NMR spectrum - TMS reference
EMI6.3
1.6 ppm (solid) 3.5 ppm (m) 2.6 ppm (m) 3 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
BuOHn. 40
ED. . . 50
ACOH. 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 13:
Diamino-2.17 dithia-5.14 octadecanediol-1.18
EMI6.4
By following the procedure of Example 8, the thiols are blocked in 1 hour with the theoretical amount of 1,8-dibromo-octane. Extraction is carried out with dichloromethane and recrystallization from ethyl acetate.
PF: 84 C (Kofler). Yield: 28%.
White crystals, soluble in water, alcohols.
Analysis for C16H3602N2S2 = 352.6
Calculated: C 54.50 H 10.29 N 7.94 S 18.18%
Found: C 54.42 H 10.42 N 7.87 S 17.95%
IR spectrum: NH2 band at 1560 cm-1
OH bands at 1064 cm-1 and 1345 cm
NMR spectrum
EMI6.5
1.6 ppm (solid) 3.5 ppm (m) 2.6 ppm (m) 3 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . 60
NH4OH. . 30
ED 10
Developers: ninhydrin-I2.
Example 14:
Diamino-2.19 dithia-5.16 eicosanediol-1.20
EMI6.6
Following the procedure. of Example 8, and using a 20% excess over the theoretical amount of 1,10 dibromo-decane, the thiols are blocked in 21/2 h. Extraction is carried out with dichloromethane and recrystallization from ethyl acetate.
Yield: 27%.
White crystals, soluble in water, alcohols.
Analysis for C18H40O2N2S2 = 380.59
Calculated: C 56.79 H 10.59 N 7.36 S 16.85%
Found: C 56.87 H 10.71 N 7.07 S 16.76%
Spectrum: NH2 band at 1550cm-
OH bands at 1060 cm-1 and 1350 cm-1
NMR spectrum
EMI6.7
1.5 ppm (solid) 2.6 ppm (m) 3.4 ppm (m) 2.9 ppm (solid)
CCM (Fertigplatten Kieselgel 60F254; H = 8 cm)
PrOH. . . . 60
NH4OH. . 30
ED. . . 10
Developers: ninhydrin-12.
The present invention therefore relates to pharmaceutical compositions containing, as active substance, at least one of the compounds of formula (I) in which n is equal to 0 or represents an integer from 1 to 10, and m is equal to 1 or 2, said compound being in the form of a base or an acceptable salt from the point of
pharmacological view.
Pharmacological study
The compounds of formula I have been subjected to various tests with a view to determining their therapeutic activity.
Toxicity
The products of formula (I) are not very toxic.
The oral lethal dose 50 (LD50) (see table below) was determined by the method of Karber and Behrens
(Arch. Exp. Pathol. Pharm.>>, 177, 1935, p. 379) on Evic mice
Ceba @ Swiss EOPS NMRI Han from 24 to 26 g.
The results are shown in the table below.
Lipid-lowering activity: experimental hyperlipidemia with Triton
The products of formula (I) have interesting lipid-lowering properties.
The technique used to demonstrate these properties has been described by M. Friedman and S.O. Byers in J. Exptl. Med. , 97, 117, 1953 and also by S. Garattini et al. in Arzneim.
Forsch. >>, 9, 206, 1959.
Rats are given 0.3 ml / 100 g body weight of 10% Triton 13-39 solution intravenously. The test products are administered simultaneously by the oral route at a dose corresponding to one tenth of their LD50, determined orally in the mouse, without the dose used exceeding 500 mg / kg.
18 h after the injection of Triton, the animals are sacrificed by section of the carotids and the blood is collected for the determination of the lipid parameters: cholesterol (Technicon AA II auto-analyzer
Lieberman Burchard), ss-lipoproteins (Burnstein), total lipids (Chabrol and Charonnat), triglycerides (enzymatic Boehringer).
The optical density of the serum at 691 nm is measured in each case. Each product has been tested on ten animals. Statistical calculations are performed on the means affected by their standard deviation from the mean by the Student test.
The reference product used is clofibrate.
The table below collates the results obtained.
Board
EMI7.1
<tb> <SEP> Lipid-lowering activity
<tb> <SEP> LD50 <SEP> Percentages <SEP> of <SEP> decrease
<tb> <SEP> Compound <SEP> g! kg <SEP> Doses
<tb> @@@@@
<tb> per <SEP> os
<tb> (mg / kg) p.o. <SEP> Optical density <SEP>
<tb> <SEP> Cholesterol <SEP> ss-lipoproteins <SEP> Total lipids <SEP> <SEP> Triglycerides
<tb> <SEP> of <SEP> serum
<tb> 28 <SEP> 36 <SEP> 26 <SEP> 25
<tb> <SEP> Clofibrate <SEP> 2,3 <SEP> 225 <SEP>
<SEP> p # 0.001 <SEP> <SEP> p # 0.01 <SEP> p # 0.001 <SEP> p # 0.001
<tb> 10
<tb> <SEP> Example <SEP> 1 <SEP>> 5 <SEP> 500 <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> p # 0.05
<tb> <SEP> Example <SEP> 2 <SEP> 5 <SEP> 500 <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> <RTI
ID = 7.12> p # 0.05
<tb> 4 <SEP> 39 <SEP> 27 <SEP> 28 <SEP> 53
<tb> <SEP> Example <SEP> 3 <SEP> 2.7 <SEP> 270
<tb> <SEP> NS <SEP> p # 0.01 <SEP> p # 0.001 <SEP> p # 0.001 <SEP> p # 0.01
<tb> <SEP> 10 <SEP> 24 <SEP> 34 <SEP> 57
<tb> <SEP> Example <SEP> 4 <SEP> 1,275 <SEP> 127 <SEP> NS
<tb> p # 0.01 <SEP> p # 0.01 <SEP> p # 0.001 <SEP> p # 0.001
<tb> <SEP> 8 <SEP> 30 <SEP> 56
<tb> <SEP> Example <SEP> 5 <SEP> 1.75 <SEP> 175 <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> p # 0.02 <SEP> p # 0.01 <SEP> p # 0.01
<tb> 40 <SEP> 46 <SEP> 38 <SEP> 42 <SEP> 78
<tb> <SEP> Example <SEP> 6 <SEP> 3,1 <SEP> 310
<tb> <SEP> p # 0,0001 <SEP> <SEP> p # 0,0001 <SEP> <SEP> <RTI
ID = 7.22> p # 0.001 <SEP> <SEP> p # 0.0001 <SEP> p # 0.0001
<tb> <SEP> Example <SEP> 12 <SEP> 2.5 <SEP> 250 <SEP> NS <SEP> ll <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP>
<tb> <SEP> Example <SEP>
<tb> <SEP> 13 <SEP> 23 <SEP> 27 <SEP> 33 <SEP> 48
<tb> <SEP> Example <SEP> 13 <SEP> 1,4 <SEP> 140
<tb> <SEP> p # 0.02 <SEP> <SEP> p # 0.001 <SEP> <SEP> p # 0.01 <SEP> <SEP> p # 0.01 <SEP> <SEP> p # 0.05
<tb> 15
<tb> <SEP> Example <SEP> 14 <SEP> 0.95 <SEP> 95 <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS <SEP> NS
<tb> <SEP> p # 0.001
<tb>
NS: result not significant.
These products, which can be administered orally, are indicated for the treatment of isolated lipid disturbances or associated with atherosclerotic manifestations such as hypercholesterolaemia, hypertriglyceridaemia, mixed hyperlipidaemia. The therapeutic indications extend to coronarites, myocardial infarction, cerebrovascular insufficiency, arteritis of the lower limbs, arterial hypertension, etc.
The dosage of active products is 0.3 to 2 g of active substance per day, or 5 to 30 mg / kg / d.
The pharmaceutical compositions of the invention can take various forms such as tablets, coated tablets, capsules, granules, etc.
Examples of pharmaceutical compositions are given as follows:
EMI8.1
Capsules:
Compound of Example 6 250 mg
Colloidal silica 20 mg
Talc l5mg
Tablets:
Compound of Example 6 500 mg
Colloidal silica 20 mg
Microcrystalline cellulose 50 mg
Lactose 50mg
Magnesium stearate 10 mg