Claims (1)
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La présente invention a pour objet un procédé de préparation d'un aliment pour la volaille, dans lequel on cultive un microorganisme du genre Flavobacter producteur de zéaxanthine dans un milieu aqueux contenant au moins un hydrate de carbone à titre de source de carbone assimilable, au moins une source d'azote aminé assimilable comprenant des acides aminés libres, ainsi que des sels minéraux, des oligo-éléments et des vitamines.
The present invention relates to a process for preparing a feed for poultry, in which a microorganism of the genus Flavobacter, producing zeaxanthin is cultivated in an aqueous medium containing at least one carbohydrate as an assimilable carbon source, in minus a source of assimilable amino nitrogen comprising free amino acids, as well as mineral salts, trace elements and vitamins.
Il est connu d'utiliser dans l'alimentation de la volaille, notamment celle des poules, des pigments caroténoides d'origine bactérienne tels que la zéaxanthine dans le but de renforcer la teinte jaune de la peau de ces animaux ou d'accentuer la coloration des jaunes d'oeuf. Il est connu également d'utiliser directement la biomasse obtenue par culture d'un micro-organisme du genre
Flavobacter producteur de zéaxanthine comme aliment pour la volaille. Une telle biomasse réunit à la fois des qualités nutritives fondamentales et un pouvoir colorant dû à ses propres pigments.
It is known to use in the feed of poultry, in particular that of hens, carotenoids of bacterial origin such as zeaxanthin in order to reinforce the yellow tint of the skin of these animals or to accentuate the coloring. egg yolks. It is also known practice to directly use the biomass obtained by culturing a microorganism of the genus
Flavobacter zeaxanthin producer as feed for poultry. Such a biomass combines both fundamental nutritional qualities and a coloring power due to its own pigments.
On sait par ailleurs qu'il est avantageux d'ajouter à la nourriture de la volaille un facteur de croissance d'origine bactérienne et que ce facteur a été identifié comme étant la vitamine B12, à savoir la cyanocobalamine.
It is also known that it is advantageous to add a growth factor of bacterial origin to poultry feed and that this factor has been identified as being vitamin B12, namely cyanocobalamin.
La présente invention a pour origine le souci d'éviter de recourir à deux processus de fermentation distincts pour produire séparément les éléments que l'on réunira ensuite dans un même aliment.
The present invention originates from the desire to avoid having to resort to two distinct fermentation processes to produce separately the elements which will then be combined in the same food.
Le procédé selon la présente invention est caractérisé par le fait que l'on modifie la composition du milieu de culture d'un micro-organisme du genre Flavobacter producteur de zéaxanthine en lui ajoutant de 200 à 1000 ppm en poids de sel de fer et de 2 à 100 ppm en poids de sel de cobalt et que l'on recueille la masse cellulaire.
The process according to the present invention is characterized by the fact that the composition of the culture medium of a microorganism of the Flavobacter genus, producing zeaxanthin is modified by adding to it from 200 to 1000 ppm by weight of iron salt and of 2 to 100 ppm by weight of cobalt salt and the cell mass is collected.
On a remarqué en effet que, si l'adjonction unique de sel de cobalt au milieu ne produit qu'une faible augmentation, de l'ordre de 15%, de la production de vitamine B12 naturellement faible d'un micro-organisme du genre Flavobacter producteur de zéaxanthine, et que, si l'adjonction unique de sel de fer ne produit qu'une augmentation du même ordre de grandeur, I'adjonction combinée de sel de cobalt et de sel de fer, dans des proportions bien définies, a pour conséquence remarquable d'au moins environ doubler la production de vitamine B12 par ce micro-organisme.
It has in fact been observed that, although the single addition of cobalt salt to the medium produces only a slight increase, of the order of 15%, in the production of naturally low vitamin B12 of a microorganism of the genus Flavobacter zeaxanthin producer, and that, while the single addition of iron salt only produces an increase of the same order of magnitude, the combined addition of cobalt salt and iron salt, in well-defined proportions, has the remarkable consequence of at least about doubling the production of vitamin B12 by this microorganism.
Pour mettre en oeuvre le procédé, on peut choisir comme source de carbone assimilable le glucose ou le saccharose, dans une proportion de 0,1 à 15% en poids du milieu de culture, et comme source d'azote aminé assimilable un extrait de levure et/ou une liqueur de trempage de mais et/ou un hydrolysat de protéines, dans une proportion de 0,1 à 8% en poids du milieu. On peut également inclure dans ce milieu du sulfate de magnésium dans la proportion de 0,1 à 2% en poids. Toutes les substances précitées sont diluées dans de l'eau du robinet, par exemple, qui représente la différence aux 100% en poids.
To carry out the process, it is possible to choose as the assimilable carbon source glucose or sucrose, in a proportion of 0.1 to 15% by weight of the culture medium, and as a source of assimilable amino nitrogen, a yeast extract. and / or a corn steep liquor and / or a protein hydrolyzate, in a proportion of 0.1 to 8% by weight of the medium. Magnesium sulfate can also be included in this medium in the proportion of 0.1 to 2% by weight. All the above substances are diluted in tap water, for example, which is the difference to 100% by weight.
On peut ajouter alors au milieu le fer et le cobalt sous forme de sels bien solubles tels que, par exemple, des sulfates ou des chlorures. Les quantités respectives de sel de fer et de cobalt que l'on préfère ajouter au milieu sont d'environ 500 et 5 ppm en poids.
Iron and cobalt can then be added to the medium in the form of well soluble salts such as, for example, sulphates or chlorides. The respective amounts of iron and cobalt salt which is preferred to add to the medium are about 500 and 5 ppm by weight.
On peut alors ajouter à la solution nutritive ainsi préparée un inoculum d'un micro-organisme du genre Flavobacter producteur de zéaxanthine. Par l'expression micro-organisme du genre Flavobacter, on entend désigner, dans le présent exposé, un microorganisme choisi parmi les bactéries de ce genre ou un mutant d'un tel micro-organisme. Le processus de fermentation peut se dérouler sous agitation et aération permanentes, à pH et températures convenables, le temps nécessaire pour que soient produites des quantités substantielles de zéaxanthine et de cyanocobalamine intracellulaires. On peut alors séparer la biomasse du milieu de culture, par centrifugation, décantation ou filtration par exemple.
An inoculum of a zeaxanthin-producing microorganism of the Flavobacter genus can then be added to the nutrient solution thus prepared. The expression microorganism of the genus Flavobacter is intended to denote, in the present description, a microorganism chosen from bacteria of this genus or a mutant of such a microorganism. The fermentation process can take place with constant agitation and aeration, at the correct pH and temperature, the time necessary for the production of substantial amounts of intracellular zeaxanthin and cyanocobalamin. The biomass can then be separated from the culture medium, by centrifugation, decantation or filtration for example.
On peut ensuite la sécher, par exemple par congélation suivie d'une sublimation sous vide ou par pulvérisation.
It can then be dried, for example by freezing followed by sublimation under vacuum or by spraying.
L'exemple suivant est donné à titre de comparaison:
Exemple 1:
On prépare un milieu de culture qui présente la composition suivante:
Glucose 3%
Hydrolysat de caséine (tryptone) 1%
Extrait de levure 1%
Sulfate de magnésium 0,5%
Eau du robinet balance à 100%
Ce milieu est placé dans des flacons, il est stérilisé ensuite à
120 C durant 20 mn, puis refroidi à 25 C. Le pH du milieu après stérilisation est de 7,3. On introduit alors dans le milieu un inoculum d'un mutant, obtenu comme décrit dans le brevet suisse N" 537456, de la souche ATCC N" 21588 du genre Flavobacter.
The following example is given for comparison:
Example 1:
A culture medium is prepared which has the following composition:
Glucose 3%
Casein hydrolyzate (tryptone) 1%
Yeast extract 1%
Magnesium sulfate 0.5%
100% balance tap water
This medium is placed in vials, it is then sterilized at
120 ° C. for 20 min, then cooled to 25 ° C. The pH of the medium after sterilization is 7.3. An inoculum of a mutant, obtained as described in Swiss patent N "537456, of the ATCC N" 21588 strain of the genus Flavobacter is then introduced into the medium.
La culture de ce micro-organisme dans ledit milieu est poursuivie durant 48 h à une température de 25 C, le milieu étant constamment aéré par agitation des flacons sur des agitateurs à mouvements rotatifs effectués à 200 t/mn. Les flacons sont alors centrifugés et l'on recueille la masse cellulaire qui représente 10 g de matière sèche par litre de bouillon de culture. La teneur en zéaxanthine de cette biomasse est de 6,1 /00 en poids et sa teneur en cyanocobalamine ou vitamine B12 est de 12 ppm en poids.
The culture of this microorganism in said medium is continued for 48 h at a temperature of 25 ° C., the medium being constantly aerated by stirring the flasks on agitators with rotary movements carried out at 200 rpm. The flasks are then centrifuged and the cell mass is collected which represents 10 g of dry matter per liter of culture broth. The zeaxanthin content of this biomass is 6.1 / 00 by weight and its cyanocobalamin or vitamin B12 content is 12 ppm by weight.
Les exemples suivants sont donnés à titre d'illustration de l'objet de l'invention. Le déroulement des opérations est le même qu'à l'exemple 1, à l'exception du fait que l'on ajoute au milieu avant de l'inoculer une certaine quantité de sel de fer ou de cobalt. On indique donc uniquement dans chacun des exemples suivants, présentés sous forme de tableau, la nature et la quantité du ou des sels ajoutés au milieu, ainsi que la quantité de vitamine Bi2 contenue dans la biomasse obtenue.
The following examples are given by way of illustration of the subject of the invention. The procedure is the same as in Example 1, except for the fact that a certain quantity of iron or cobalt salt is added to the medium before inoculation. Only in each of the following examples, presented in table form, is therefore indicated the nature and amount of the salt (s) added to the medium, as well as the amount of vitamin Bi2 contained in the biomass obtained.
Les quantités sont indiquées en ppm en poids du milieu pour ce qui est des sels et en ppm en poids de la biomasse pour ce qui est de la vitamine B12:
Exemple FeSO4 CoCI2 Vitamine Bl2
N" (ppm du (ppm du (ppm de la
milieu) milieu) biomasse)
I (rappel) - - 12
2 500 - 14,5
3 - 5 13,8
4 500 0,5 16,2
5 500 5 23,8
6 500 50 21,9
The amounts are indicated in ppm by weight of the medium as regards salts and in ppm by weight of the biomass as regards vitamin B12:
Example FeSO4 CoCl2 Vitamin Bl2
N "(ppm of (ppm of (ppm of
medium) medium) biomass)
I (reminder) - - 12
2,500 - 14.5
3 - 5 13.8
4,500 0.5 16.2
5,500 5 23.8
6500 50 21.9
REVENDICATION
Procédé de préparation d'un aliment pour la volaille, dans lequel on cultive un micro-organisme du genre Flavobacter producteur de zéaxanthine dans un milieu aqueux contenant au moins un hydrate de carbone à titre de source de carbone assimilable, au moins une source d'azote aminé assimilable comprenant des acides aminés libres, ainsi que des sels minéraux, des oligoéléments et des vitamines, caractérisé par le fait que l'on modifie la composition du milieu en lui ajoutant de 200 à 1000 ppm en poids de sel de fer et de 2 à 100 ppm en poids de sel de cobalt et que l'on recueille la masse cellulaire.
CLAIM
Process for preparing a feed for poultry, in which a zeaxanthin-producing microorganism of the genus Flavobacter is cultivated in an aqueous medium containing at least one carbohydrate as an assimilable carbon source, at least one source of assimilable amino nitrogen comprising free amino acids, as well as mineral salts, trace elements and vitamins, characterized in that the composition of the medium is modified by adding to it 200 to 1000 ppm by weight of iron salt and 2 to 100 ppm by weight of cobalt salt and the cell mass is collected.
SOUS-REVENDICATIONS
1. Procédé selon la revendication, caractérisé par le fait que l'hydrate de carbone est le glucose ou le saccharose, dans une proportion de 0,1 à 15% en poids du milieu, que les acides aminés sont sous forme d'extrait de levure et/ou de liqueur de trempage de mais et/ou d'hydrolysat de protéines, dans une proportion de 0,1 à 8% en poids du milieu, et que le milieu contient du sulfate de magnésium dans la proportion de 0,1 à 2% en poids.
SUB-CLAIMS
1. Method according to claim, characterized in that the carbohydrate is glucose or sucrose, in a proportion of 0.1 to 15% by weight of the medium, that the amino acids are in the form of extract of yeast and / or corn steep liquor and / or protein hydrolyzate, in a proportion of 0.1 to 8% by weight of the medium, and that the medium contains magnesium sulfate in the proportion of 0.1 at 2% by weight.
2. Procédé selon la revendication, caractérisé par le fait que les quantités respectives de sel de fer et de cobalt ajoutés au milieu sont d'environ 500 et S ppm en poids.
2. Method according to claim, characterized in that the respective amounts of iron salt and cobalt added to the medium are about 500 and S ppm by weight.