Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung neuer 22-Amino-23,24-bisnorcholanderivate der Formel
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und deren Säureadditionssalzen, worin Z die Gruppe = CH2, ¯-CH(OH) oder = O = 0 und C1, C2, C2, - -C3, C*,' ' C4, .... C5 und C5 -C6 gesättigte oder ungesät- tigte Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindungen, wobei aber bei Abwesenheit mehrerer Doppelbindungen keine kumulierten Doppelbindungen vorhanden sein sollen, bedeuten, und für den Fall, dass C4-Cg-C6 gesättigte und eine der C1, oder C2- C ungesättigten Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindungen darstellen. das 5-ständige Wasserstoffatom a- oder ss-konfiguriert sein kann, und für den Fall, dass Ring A und B gesättigt ist. das Wasserstoffatom in 5-Stellung a-ständig ist.
Das erfindungsgemässe Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass man in 22-Azidoverbindungen der Formel
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worin St das in Formel I definierte Steroidgerüst darstellt, die Azidogruppe zur 22-Aminogruppe reduziert.
Die erfindungsgemäss erhältlichen Verbindungen der Formel I können dazu verwendet werden, um durch N-Alkylierung bzw. N-Cycloalkylierung der 22-Aminogruppe die entsprechenden Mono- oder Dialkylaminoverbindungen der Formel
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herzustellen. in welcher Formel R1 ein Alkylrest ist, R2 einen Alkylrest oder den 5,5-Dimethyl-3-oxo-eyclo-1-hexenylrest bedeutet. oder einer der Reste R1 oder R2 auch Wasserstoff sein kann. oder R1 und R2 zusammen mit dem N-Atom einen gesättigten heterocyclischen Ring darstellen.
Ausserdem ist es möglich, erhaltene Verbindungen der Formel I zu acylieren.
Die nach dem erfindungsgemässen Verfahren erhaltenen Basen können anschliessend in ihre entsprechenden Säureadditionssalze überführt werden.
Als Acylreste kommen vor allem alle Säurereste von solchen Säuren in Frage, mit denen man bekanntermassen eine Aminogruppe acylieren kann. Bevorzugt geeignet sind Reste aliphatischer Carbonsäuren mit insbesondere 1 bis 12 Kohlenstoffatomen im Säurerest. wie beispielsweise Ameisensäure, Essigsäure. Propionsäure. Önanthsäure. Capronsäure, Undecylsäure u. a. Selbstverständlich können diese Säuren auch ungesättigt, verzweigt. mehrbasisch oder in üblicher Weise substituiert sein; beispielsweise genannt seien Tri methylessigsäure, t-Butylessigsäure, Phenylessigsäure, Cyclo- pentylpropionsäure, Halogenessigsäure, Aminoessigsäure, Oxypropionsäure, Benzoesäure, Bernsteinsäure. Adipinsäure u. a.
Als Alkylreste kommen bevorzugt in Frage: gesättigte oder ungesättigte, gerad- oder verzweigtkettige niedere Alkylreste, wie z. B. der Methyl-, Äthyl-, Butyl-, Isopropyl-, tert. Butyl-, Vinyl-, Äthinylrest u. ä.
Die zusätzlich eingeführten Alkylgruppen können in üblicher Weise substituiert sein. Als Substituenten kommen insbesondere Alkyl-, Alkoxy-, Hydroxyl-, Acyloxy-, Nitro-, Keto-, freie oder veresterte Carboxyl-, freie oder substituierte Aminogruppen und Halogenatome in Frage.
Die nach erfindungsgemässer Aminbildung gewünschtenfalls durchgeführte N-Alkylierung erfolgt ebenfalls in der Regel nach den dafür bekannten Alkylierungsmethoden. vorzugsweise unter Verwendung der entsprechenden Mono Halogenalkyle oder Dihalogenalkyle.
Zur Herstellung der neuen Verbindungen nach dem erfindungsgemässen Verfahren erfolgt die Reduktion der 22 Azidogruppe in der Regel nach den Methoden und mit den Reduktionsmitteln, wie sie dem Fachmann für die Reduktion von Aziden zu den entsprechenden Aminen bekannt sind. Bevorzugt geeignete Reduktionsmittel sind insbesondere Lithiumaluminiumhydrid. Hierbei wird die als Ausgangsprodukt verwandte Azidoverbindung im allgemeinen in einem geeigneten inerten Lösungsmittel, wie z. B. Äther, Tetrahydrofuran, Dioxan, Benzol, bei vorzugsweise erhöhter Reaktionstemperatur und gewünschtenfalls bei Ausschluss von Luftsauerstoff mit dem Reduktionsmittel, das ebenfalls in einem inerten Lösungsmittel gelöst bzw. suspendiert sein kann, umgesetzt.
Sollen die primär entstandenen freien Basen in die Säureadditionssalze überführt werden, so kann diese Salzbildung ebenfalls nach den dafür gebräuchlichen Methoden erfolgen.
Zweckmässigerweise wird die Base in einem organischen Lösungsmittel, wie z. B. in Diäthyläther, Diisopropyläther oder Tetrahydrofuran oder Gemischen davon, gelöst und mit der letztlich gewünschten Säure, z. B. durch Einleiten von Chlorwasserstoffgas, behandelt.
Die erfindungsgemäss herstellbaren Verbindungen sind therapeutisch wertvolle Wirkstoffe gegen pathogene Mikroorganismen. Im Vergleich zu bekannten antimikrobiell wirksamen Stoffen, wie z. B. Fucidin oder Nystatin, zeichnen sich die erfindungsgemässen Verbindungen insbesondere durch ihr breiteres Wirkungsspektrum aus. Sie wirken nicht nur, wie z. B. das Fucidin, gegen Staphylokokkus-Stämme, wie Staphylokokkus pyogenes aureus oder Mycoplasma-Stämme, wie Mocoplasma gallisepticum, sondern auch gegen Dermatophyten, wie z. B. Trichophyton mentagrophytes, Epidermatophyton floccosum und Micosporum gypseum, gegen Trichomonaden, wie z. B. Trichomonas vaginalis und Trichomonas foetus, gegen Protozoen, wie z. B. Entamoeba histolytica, gegen Schimmelpilze, Mocobakterien, wie z. B.
Staphylokokkus aureus, und gegen Candida Stämme, wie Candida albicans.
Für die medizinische Praxis sind solche Wirkstoffe mit einem breiten Wirkungsspektrum von besonderem Interesse, weil sie zur Bekämpfung von häufig auftretenden Mischinfektionen besonders vorteilhaft geeignet sind.
Die hervorragende fungizide Wirkung sei am Beispiel des 22-(N-Piperidyl) - 3-5ss -bisnorcholen-hydrochlorid (II) im Vergleich zu dem bekannten Nystatin (I), wobei die angegebene Konzentration diejenige Dosis ist, bei der totale Wachstumshemmung in vitro (Plattentest) eintritt, wiedergegeben.
Candida albicans Lfd. Verbindung (ATCC 10231) Nr. Konzentration y/ml
I. Nystatin 10
II. 22-(N-Piperidyl)-d 3-5ss-bis norcholen-hydrochlorid < 5 III. 22-Amino-Z1 3-5ss-bisnorcholen hydrochlorid < 10 IV. 22-Amino-d 3,5-bisnorcholadien- hydrochlorid < 10
V. 22-N-Methylamino-d 3-5ss-bis norcholen-hydrochlorid < 5
Für den medizinischen Gebrauch können die erfindungsgemäss herstellbaren Verbindungen je nach dem speziellen Verwendungszweck äusserlich, z. B. als Salbe, oral, z. B.
als Tablette, Dragee, Pulver oder Kapsel, oder parenteral als Injektionspräparat verabfolgt werden.
Die Herstellung der Arzneimittel auf Basis der neuen Verbindungen erfolgt in der Regel in an sich bekannter Weise, indem man den Wirkstoff mit den in der galenischen Pharmazie üblichen Zusätzen, Trägersubstanzen, Geschmackskorrigentien und ähnlichen verarbeitet und dann in die letztlich gewünschte Darreichungsform überführt.
Sollen die Wirkstoffe in Form ihrer Säureadditionssalze angewandt werden, kann die Überführung der primär erhaltenen freien Base in das letztlich gewünschte Salz in an sich bekannter Weise erfolgen. Geeignete Salze sind beispielsweise die Hydrochloride, Sulfate, Gluconate, Citronate und auch die Salze mit organischen Säuren, wie Essigsäure, Bernsteinsäure oder Benzoesäure oder Salicylsäure.
Quaternäre Ammoniumsalze kann man ebenfalls in üblicher Weise herstellen, indem man z. B. die entsprechende freie Base mit einem Alkylhalogenid, vorzugsweise bei erhöhter Temperatur in Gegenwart von Alkohol als Lösungsmittel, umsetzt.
Die nachfolgenden Beispiele dienen der weiteren Erläuterung des erfindungsgemässen Verfahrens.
Beispiel 1
In eine Lösung von 10 g 22-Hydroxy-zl3,5-bisnorcho- ladien (hergestellt aus 214-Bisnorcholen-3-on-22-al durch Reduktion der Aldehydfunktion mit Natriumborhydrid bei -20" C und darauffolgender Reduktion der 3-Keto-Gruppe mit Lithiumaluminiumhydrid zu 3 ,22-Dihydroxy-zl 4-bis- norcholen, das in Aceton und in Gegenwart von p-Toluolsulfonsäure erwärmt wird), in 200 ml abs. Pyridin gelöst, werden unter Eiskühlung 10 g p-Toluolsulfochlorid eingetragen. Die Lösung wird über Nacht bei Raumtemperatur stehengelassen und dann in 1,5 1 Eiswasser eingerührt. Den entstandenen Niederschlag extrahiert man mit Chloroform und die vereinigten Chloroformlösungen werden nacheinander mit Wasser, verd. Schwefelsäure und Bicarbonatlösung gewaschen.
Nach Trocknen über Natriumsulfat und Verdampfen des Lösungsmittels werden 12,0 g 22-Tosyloxy zl3,5-bisnorcholadien erhalten, das zur Überführung in das 22 Azid in 11 Methanol und 300 ml Isopropyläther gelöst und mit 200 ml Lithinmazid-Lösung 5 Stunden unter Rückfluss erhitzt wird (Herstellung der Lithiumazid-Lösung: 8,5 g Lithiumchlorid werden in 200 ml wasserfreiem Methanol gelöst und mit 15 g gepulvertem Natriumazid 5 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Darauf wird über Nacht unter Kühlung stehengelassen und abfiltriert). Das Lösungsmittel wird im Vakuum eingedampft, und der Rückstand wird zwischen Wasser und Äther verteilt.
Die Ätherlösung wird abgetrennt, und nach Vertreiben des Lösungsmittels im Vakuum bleiben
10 g eines farblosen Öls zurück. das im IR eine starke Bande bei 2120/cm, dagegen keine v-SO2-Banden mehr aufweist.
Dieses Öl wird in 300 ml abs. Äther gelöst und zu einer Aufschlämmung von 1,5 g Lithiumaluminiumhydrid in 200 ml abs. Äther unter Rühren und Rückfluss zugetropft. Nach fünfstündigem Erhitzen unter Rückfluss werden 20 ml Wasser langsam zugetropft und dann 150 ml 10%ige Natronlauge zufliessen gelassen. Die ätherische Schicht wird abgetrennt und die wässrige mehrmals ausgeäthert. Die vereinigten ätherischen Lösungen werden über Natriumsulfat getrocknet, und das Lösungsmittel wird im Vakuum verdampft. Der Rückstand wird im Hochvakuum getrocknet und in abs.
Äther gelöst und Chlorwasserstoff eingeleitet. Nach dem Absaugen wird das Hydrochlorid in Essigester ausgerührt und bei 1000 C im Vakuum getrocknet. 6 g farblose Kristalle werden erhalten, die nicht unter 3000 C schmelzen.
Beispiel 2
20 gil4-Bisnorcholen-22-ol-3-on werden in 600 ml abs.
Tetrahydrofuran gelöst und zu einer Suspension von 3,5 g Lithiumaluminiumhydrid in 100 ml abs. Tetrahydrofuran zugetropft. Nach 3 Stunden wird mit wässrigem Tetrahydrofuran hydrolysiert und mit 10%aber Salzsäure versetzt. Das Lösungsmittel wird im Vakuum verdampft, und die zurückbleibende Suspension wird mit Äther extrahiert. Das als farbloses Öl anfallende zl 3,5-Bisnorcholadien-22-ol wird in Pyridin gelöst und mit 20 g p-Toluolsulfochlorid versetzt.
Nach etwa 16stündigem Stehen wird in Eiswasser gegossen und mit Chloroform extrahiert. Aus dem Extrakt werden 16,5 g 22-Tosyloxy-d Js-bisnorcholadien vom Schmelzpunkt 149-152 C isoliert, die mit 200 ml einer 1n methanolischen Lösung von Lithiumazid 5 Stunden am Rückfluss erhitzt werden. Das Lösungsmittel wird im Vakuum verdampft und der Rückstand zwischen Wasser und Äther verteilt und die Ätherschicht abgetrennt. Nach Verdampfen des Lösungsmittels erhält man 11 g22-Azido-zl 3,5-bisnorcholadien als farbloses Öl, das in 200 ml abs. Äther gelöst und zu einer Aufschlämmung von 1.5 g Lithiumaluminiumhydrid in 200 ml abs. Äther zugetropft wird.
Es wird 3 Stunden unter Rückfluss erhitzt, darauf wird mit wässrigem Äther hydrolysiert und mit 10%der Natronlauge versetzt. Die ätherische Schicht wird abgetrennt und die wässrige Phase mehrmals ausge äthert. In die getrocknete Ätherlösung wird Chlorwasserstoff eingeleitet. 7,0 g 22-Amino-zl 3,5-bisnorcholadien-hydro- chlorid werden erhalten; F. über 300 C (Zers.); UV: E235 17 100.
Beispiel 3
2,6 g 3ss-Hydroxy-Sa-bisnorcholansäuremethylester (aus der Säure durch Umsetzung mit Diazomethan erhalten) werden in trockenem Pyridin gelöst und mit 3 g p-Toluolsulfonsäurechlorid versetzt. Nach etwa zweitägigem Stehen bei 5 C wird das Reaktionsgemisch in Eiswasser eingerührt und mit Chloroform extrahiert. Aus der Chloroformlösung werden 3,0 g 3ss-Tosyloxy-5a-bisnorcholen-säuremethylester vom Schmelzpunkt 143-145" C isoliert, die unter Stickstoffatmosphäre mit 30 ml frisch destilliertem Collidin 3 Stunden unter Rückfluss erhitzt werden. Das Reaktionsgemisch wird in kalte verdünnte Salzsäure eingetragen und mit Chloroform extrahiert. Der Chloroformextrakt wird im Vakuum bis zur Trockne eingedampft, der Rückstand in Benzol aufgenommen und über 50 g Silicagel filtriert.
Das Benzol wird im Vakuum verdampft. Man erhält 2,1 g d 2-Sa-Bisnorcholen- säuremethylester vom Schmelzpunkt 110-112 C, die mit 400 mg Lithiumaluminiumhydrid in abs. Äther 3 Stunden unter Rückfluss reduziert werden. Danach wird hydrolysiert und mit 10 %aber Natronlauge versetzt.
Nach Extraktion erhält man 1,5 g zl2-Sa-Bisnorcholen-22-ol, Schmelzpunkt 137-138 C, die mit 2g p-Toluolsulfochlorid in 50 ml trokkenem Pyridin gleich in das als farbloses Öl anfallende 22 Tosyloxy-2-5a-bisnorcholen übergeführt werden (Dünnschichtchromatogramm einheitlich in Cyclohexan-Essigester 7:3). Fünfstündiges Erhitzen mit 60 ml einer 1n methanolischen Lithiumazidlösung liefert 22-Azido-Z12-5a-bis- norcholen mit Lithiumaluminiumhydrid. und die Überführung in das Hydrochlorid erfolgt wie in Beispiel 8. 750 mg 22-Amino-2-5a-bisnorcholen-hydrochlorid werden erhalten; F. über 300 C (Zers.).
Beispiel 4
200 mg 22-Amino-3-5ss-bisnorcholen werden in 5 ml Äthanol gelöst und dazu 166 mg 1,5-Dibrompentan und 140 mg Natriumcarbonat wasserfrei gegeben. Das Reaktionsgemisch wird unter Rühren 16 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Man lässt abkühlen. fügt 20 ml Äthanol hinzu und saugt die anorganischen Bestandteile ab. Das Filtrat wird bis zur Trockne eingeengt und der erhaltene Rückstand in Äther gelöst. Der unlösliche Rückstand wird abgesaugt und die ätherische Lösung zur Trockne eingeengt. Das zurückbleibende rohe 22-(N-Piperidyl)-u3-5ss-bisnorcholen wird aus Aceton umkristallisiert; Ausbeute 120 mg; F. 154 bis 156o C.
Beispiel 5
5 gd3-5ss-Norcholensäurechlorid (hergestellt aus Norlithocholsäure-methylester durch Tosylierung, Erhitzen in Collidin, Verseifen mit alkoholischer Kalilauge und Umsetzung mit Thionylchlorid) wird in 100 ml Aceton gelöst und auf 10 C abgekühlt. Eine Lösung von 2 g Natriumazid in 7 ml Wasser wird bei dieser Temperatur zugetropft. Nach 15 Minuten wird mit Eiswasser ausgefällt und abfiltriert. Der noch feuchte Filterkuchen wird in eine Mischung von 100 ml Eisessig und 10 ml Wasser eingetragen. Danach wird 3 Stunden auf 60-70 C erhitzt und eine Wasserdampfdestillation angeschlossen. Das freie Amin wird durch Zugabe von Natronlauge erhalten und mit Äther extrahiert.
Mit ätherischer Salzsäure erhält man daraus 22-Amino-J 3-5ss-bisnorcholen- hydrochlorid (3,5 g) mit dem im Beispiel 1 angegebenen Schmelzpunkt.
Beispiel 6
50 g Lithiumaluminiumhydrid werden in 1,3 1 Diglyme gelöst, und während 21/2 Stunden werden 320 ml Bortri fluoridätherat in 1 1 Diglyme zugetropft. Nach einer weiteren Stunde bei 0 C wird eine Lösung von 4-Bisnorcholen-22- ol-3-on in Diglyme zugefügt. Nach einer Stunde bei Raumtemperatur wird mit 1 1 Acetanhydrid versetzt und 1 Stunde unter Rückfiuss erhitzt. Darauf wird der Ansatz in Wasser eingetragen und mit Äther ausgeschüttelt. Das so erhaltene 22-Acetat (35 g) wird in 20%igem Äthanol gelöst und mit 20 g KOH 1 Stunde unter Rückfluss erhitzt. Darauf wird das Lösungsmittel im Vakuum verdampft und der Rückstand zwischen Wasser und Äther verteilt.
Nach dem Trocknen und Einengen im Vakuum werden 28 g zl 3-Sa-Bisnorcholen22-ol vom Schmelzpunkt 126 bis 1280 C erhalten (aus Hexan). Analog Beispiel 3 wird nun ausJ3-Sa-Bisnorcholen- 22-ol über das 22-Tosylat und 22-Azid zl 3-Sa-Bisnorcholen- 22-amin-hydrochlorid erhalten. (Ausbeute 16 g vom Schmelzpunkt > 300 C).
Beispiel 7
2,0 g 23,24-Dinor-5a-cholan-22-amin werden in 7 ml Ameisensäure und 6,5 ml Acetanhydrid gelöst und in Gegenwart einer Stickstoffatmosphäre unter Rückfluss 5 Stunden erhitzt. Nach dem Erkalten wird in Eiswasser eingerührt und mit Chloroform extrahiert. Die neutral gewaschene Chloroformlösung wird nach dem Trocknen mit Natriumsulfat im Vakuum eingeengt. 1,6 g rohes N-(23,24-Dinor-5a-cholan22-yl)-formamid werden so erhalten, das nach zweimaligem Umkristallisieren aus Aceton bei 186 bis 188 C schmilzt.
Beispiel 8
2,0 g 23,24-Dinor-5a-cholan-22-amin werden in 20 ml Acetanhydrid 8 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Dann wird das überschüssige Acetanhydrid im Vakuum abdestilliert und der Rückstand aus Methanol umkristallisiert. Man erhält so 1,1 g N,N-Diacetoxy-23,24-dinor-5a-cholan-22-amin vom Schmelzpunkt 126-127" C.
Beispiel 9
1,73 g 23,24-Dinor-Sa-cholan-22-amin werden in absol.
Äther gelöst, und eine Lösung von 540 mg Maleinsäurehydrid in absol. Äther wird in einem Guss zugegeben. Der sofort ausfallende weisse Brei wird abgesaugt und mit Äther mehrmals gewaschen. Man erhält so 1,5 g N-(23,24-Dinor5a-cholan-22-yl)-maleinamidsäure vom Schmelzpunkt 225 bis 227 C.
Beispiel 10
2,5 gzl3,5-Bisnorcholadien-22-amin wird in 400 ml Benzol gelöst und mit 1,2 g Dimedon und 250 mg Toluolsulfonsäure am Wasserabscheider unter Rückfluss erhitzt. Die wässrige Phase wird so abgetrennt und etwa 200 ml Benzol ex extrahiert Die vereinigten Benzollösungen werden mit 5 %iger Biscarbonatlösung gewaschen, mit Natriumsulfat getrocknet und nach dem Filtrieren im Vakuum zur Trockne eingedampft. Man erhält so 700 mg Dimedon-Kondensationsprodukt; F. 227 bis 229 C, nämlich N-(5,5-Dimethyl-3-oxo cyclohex- 1-enyl)-zl 3,5-bisnorcholadien-22-amin.
PATENTANSPRUCH 1
Verfahren zur Herstellung von 22-Amino-23,24-bisnorcholanderivaten der Formel
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und deren Säureadditionssalzen, worin Z die Gruppe CH2, CH(OH) oder DC =0 und C1-'--C2, C2-'--Q, Q----C4, C4----C5 zuCs und C5...C6 gesättigte oder ungesättigte Koh- lenstoff-Kohlenstoff-Bindungen, wobei aber bei Anwesenheit mehrerer Doppelbindungen keine kumulierten Doppelbin dungen vorhanden sind, bedeuten und für den Fall, dass C4 C-C6 gesättigte und eine der C, C2 oder C2' ''C3 ungesättigte Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindungen darstellen, das 5-ständige Wasserstoffatom a- oder ss-konfiguriert sein kann, und für den Fall, dass Ring A und B gesättigt ist, das Wasserstoffatom in 5-Stellung a-ständig ist, dadurch gekennzeichnet,
dass man in 22-Azidoverbindungen der Formel
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worin St das in Formel I definierte Steroidgerüst darstellt, die Azidogruppe zur 22-Aminogruppe reduziert.
UNTERANSPRÜCHE
1. Verfahren nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass man Säureadditionssalze der erhaltenen Verbindungen herstellt.
2. Verfahren nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass man erhaltene Verbindungen N-acyliert.
3. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man 22-Amino-X3-5ss- bisnorcholen und sein Hydrochlorid herstellt.
4. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man 22-Amino-zl 2-5a- bisnorcholen und sein Hydrochlorid herstellt.
5. Verfahren nach Unteranspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass man N-(23,24-Dinor-5a-cholan-22-yl)- formamid herstellt.
6. Verfahren nach Unteranspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass man N,N-Diacetoxy-23,24-dinor-5a-cholan22-amin herstellt.
7. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man ein 22-Amino-5abisnorcholen und sein Hydrochlorid herstellt.
8. Verfahren nach Unteranspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass man N-(23,24-Dinor-5a-cholan-22-yl)- maleinamidsäure herstellt.
9. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man 22-Amino-5a-23,24dinorcholane der Formel
**WARNUNG** Ende DESC Feld konnte Anfang CLMS uberlappen**.
The invention relates to a process for the preparation of new 22-amino-23,24-bisnorcholane derivatives of the formula
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and their acid addition salts, in which Z is the group = CH2, ¯-CH (OH) or = O = 0 and saturated C1, C2, C2, -C3, C *, ″ C4, .... C5 and C5 -C6 or unsaturated carbon-carbon bonds, but in the absence of several double bonds no cumulative double bonds should be present, and in the event that C4-Cg-C6 are saturated and one of the C1 or C2-C unsaturated carbon-carbon - represent bonds. the 5-position hydrogen atom can have a- or ss-configuration, and in the event that ring A and B are saturated. the hydrogen atom in the 5-position is a-position.
The process according to the invention is characterized in that 22-azido compounds of the formula
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wherein St represents the steroid structure defined in formula I, which reduces the azido group to the 22-amino group.
The compounds of the formula I obtainable according to the invention can be used to convert the corresponding mono- or dialkylamino compounds of the formula by N-alkylation or N-cycloalkylation of the 22-amino group
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to manufacture. in which formula R1 is an alkyl radical, R2 is an alkyl radical or the 5,5-dimethyl-3-oxo-cyclo-1-hexenyl radical. or one of the radicals R1 or R2 can also be hydrogen. or R1 and R2 together with the N atom represent a saturated heterocyclic ring.
It is also possible to acylate compounds of the formula I obtained.
The bases obtained by the process according to the invention can then be converted into their corresponding acid addition salts.
Possible acyl radicals are above all all acid radicals of acids with which it is known that an amino group can be acylated. Residues of aliphatic carboxylic acids with, in particular, 1 to 12 carbon atoms in the acid radical are particularly suitable. such as formic acid, acetic acid. Propionic acid. Enanthic acid. Caproic acid, undecylic acid and the like a. Of course, these acids can also be unsaturated, branched. polybasic or substituted in the usual way; Examples include tri methyl acetic acid, t-butylacetic acid, phenylacetic acid, cyclopentyl propionic acid, haloacetic acid, aminoacetic acid, oxypropionic acid, benzoic acid, succinic acid. Adipic acid and the like a.
Preferred alkyl radicals are: saturated or unsaturated, straight or branched-chain lower alkyl radicals, such as. B. the methyl, ethyl, butyl, isopropyl, tert. Butyl, vinyl, ethynyl radical and the like Ä.
The additionally introduced alkyl groups can be substituted in the usual way. Particularly suitable substituents are alkyl, alkoxy, hydroxyl, acyloxy, nitro, keto, free or esterified carboxyl, free or substituted amino groups and halogen atoms.
The N-alkylation, if desired carried out after the amine formation according to the invention, is likewise generally carried out by the alkylation methods known for this purpose. preferably using the corresponding mono haloalkyls or dihaloalkyls.
To prepare the new compounds by the process according to the invention, the azido group is generally reduced by the methods and with the reducing agents known to those skilled in the art for the reduction of azides to the corresponding amines. Preferred suitable reducing agents are, in particular, lithium aluminum hydride. Here, the azido compound used as the starting product is generally in a suitable inert solvent, such as. B. ether, tetrahydrofuran, dioxane, benzene, at a preferably elevated reaction temperature and, if desired, with the exclusion of atmospheric oxygen with the reducing agent, which can also be dissolved or suspended in an inert solvent, reacted.
If the primarily formed free bases are to be converted into the acid addition salts, this salt formation can also take place according to the methods customary for this purpose.
Conveniently, the base in an organic solvent, such as. B. in diethyl ether, diisopropyl ether or tetrahydrofuran or mixtures thereof, dissolved and with the ultimately desired acid, for. B. by introducing hydrogen chloride gas treated.
The compounds which can be prepared according to the invention are therapeutically valuable active substances against pathogenic microorganisms. Compared to known antimicrobial substances, such as. B. fucidin or nystatin, the compounds according to the invention are distinguished in particular by their broader spectrum of activity. They not only act like z. B. the fucidin, against Staphylococcus strains such as Staphylococcus pyogenes aureus or Mycoplasma strains such as Mocoplasma gallisepticum, but also against dermatophytes such. B. Trichophyton mentagrophytes, Epidermatophyton floccosum and Micosporum gypseum, against trichomonads such. B. Trichomonas vaginalis and Trichomonas fetus, against protozoa such. B. Entamoeba histolytica, against molds, mocobacteria, such as. B.
Staphylococcus aureus, and against Candida strains such as Candida albicans.
For medical practice, such active ingredients with a broad spectrum of activity are of particular interest because they are particularly advantageously suitable for combating frequently occurring mixed infections.
The excellent fungicidal effect is the example of 22- (N-piperidyl) - 3-5ss -bisnorcholene hydrochloride (II) in comparison to the known nystatin (I), the concentration given being the dose at which total growth inhibition in vitro (Plate test) occurs.
Candida albicans Cons. Compound (ATCC 10231) No. Concentration y / ml
I. Nystatin 10
II. 22- (N-piperidyl) -d 3-5ss-bis norcholene hydrochloride <5 III. 22-Amino-Z1 3-5ss-bisnorcholene hydrochloride <10 IV. 22-Amino-d 3,5-bisnorcholadiene hydrochloride <10
V. 22-N-methylamino-d 3-5ss-bis norcholen hydrochloride <5
For medical use, the compounds that can be prepared according to the invention can be used externally, depending on the specific application, e.g. B. as an ointment, orally, e.g. B.
be administered as a tablet, coated tablet, powder or capsule, or parenterally as an injection preparation.
The pharmaceuticals on the basis of the new compounds are generally produced in a manner known per se, by processing the active ingredient with the additives, carrier substances, flavor corrections and the like customary in galenical pharmacy and then converting it into the ultimately desired dosage form.
If the active ingredients are to be used in the form of their acid addition salts, the primarily obtained free base can be converted into the ultimately desired salt in a manner known per se. Suitable salts are, for example, the hydrochlorides, sulfates, gluconates, citronates and also the salts with organic acids, such as acetic acid, succinic acid or benzoic acid or salicylic acid.
Quaternary ammonium salts can also be prepared in a conventional manner by z. B. the corresponding free base with an alkyl halide, preferably at elevated temperature in the presence of alcohol as a solvent, is reacted.
The following examples serve to further explain the process according to the invention.
example 1
In a solution of 10 g of 22-hydroxy-zl3,5-bisnorcholadiene (made from 214-bisnorcholen-3-one-22-al by reducing the aldehyde function with sodium borohydride at -20 "C and subsequent reduction of the 3-keto- Group with lithium aluminum hydride to give 3,22-dihydroxy-zl 4-bis-norcholen, which is heated in acetone and in the presence of p-toluenesulfonic acid), dissolved in 200 ml of absolute pyridine, 10 g of p-toluenesulfonyl chloride are added with ice cooling The solution is left to stand overnight at room temperature and then stirred into 1.5 l of ice water, the precipitate formed is extracted with chloroform and the combined chloroform solutions are washed successively with water, dilute sulfuric acid and bicarbonate solution.
After drying over sodium sulfate and evaporation of the solvent, 12.0 g of 22-tosyloxy zl3,5-bisnorcholadiene are obtained, which is dissolved in 11% of methanol and 300 ml of isopropyl ether for conversion into the 22 azide and refluxed with 200 ml of lithium azide solution for 5 hours (Preparation of the lithium azide solution: 8.5 g of lithium chloride are dissolved in 200 ml of anhydrous methanol and refluxed with 15 g of powdered sodium azide for 5 hours. The mixture is then left to stand under cooling and filtered off). The solvent is evaporated in vacuo and the residue is partitioned between water and ether.
The ethereal solution is separated off and, after the solvent has been driven off, remain in vacuo
10 g of a colorless oil. which in the IR shows a strong band at 2120 / cm, but no more v-SO2 bands.
This oil is in 300 ml abs. Ether dissolved and a suspension of 1.5 g of lithium aluminum hydride in 200 ml of abs. Ether was added dropwise with stirring and reflux. After heating under reflux for five hours, 20 ml of water are slowly added dropwise and 150 ml of 10% sodium hydroxide solution are then allowed to flow in. The ethereal layer is separated and the aqueous layer is extracted with ether several times. The combined ethereal solutions are dried over sodium sulfate and the solvent is evaporated in vacuo. The residue is dried in a high vacuum and in abs.
Dissolved ether and introduced hydrogen chloride. After suction, the hydrochloride is stirred in ethyl acetate and dried at 1000 C in a vacuum. 6 g of colorless crystals which do not melt below 3000 ° C. are obtained.
Example 2
20 gil4-bisnorcholen-22-ol-3-one are in 600 ml abs.
Dissolved tetrahydrofuran and added to a suspension of 3.5 g of lithium aluminum hydride in 100 ml of abs. Tetrahydrofuran was added dropwise. After 3 hours, it is hydrolyzed with aqueous tetrahydrofuran and mixed with 10% hydrochloric acid. The solvent is evaporated in vacuo and the remaining suspension is extracted with ether. The 3,5-bisnorcholadien-22-ol obtained as a colorless oil is dissolved in pyridine and treated with 20 g of p-toluenesulfonyl chloride.
After standing for about 16 hours, it is poured into ice water and extracted with chloroform. 16.5 g of 22-tosyloxy-α-bisnorcholadiene with a melting point of 149-152 ° C. are isolated from the extract, and are refluxed with 200 ml of a 1N methanolic solution of lithium azide for 5 hours. The solvent is evaporated in vacuo and the residue is distributed between water and ether and the ether layer is separated off. After evaporation of the solvent, 11 g of 22-azido-zl 3,5-bisnorcholadiene are obtained as a colorless oil, which is dissolved in 200 ml of abs. Ether dissolved and to a suspension of 1.5 g of lithium aluminum hydride in 200 ml of abs. Ether is added dropwise.
It is refluxed for 3 hours, then hydrolyzed with aqueous ether and treated with 10% of the sodium hydroxide solution. The ethereal layer is separated and the aqueous phase is etherified several times. Hydrogen chloride is passed into the dried ethereal solution. 7.0 g of 22-amino-zl 3,5-bisnorcholadiene hydrochloride are obtained; F. over 300 C (dec.); UV: E235 17 100.
Example 3
2.6 g of methyl 3ss-hydroxy-Sa-bisnorcholanoate (obtained from the acid by reaction with diazomethane) are dissolved in dry pyridine, and 3 g of p-toluenesulphonic acid chloride are added. After standing for about two days at 5 ° C., the reaction mixture is stirred into ice water and extracted with chloroform. 3.0 g of methyl 3ss-tosyloxy-5a-bisnorcholenic acid with a melting point of 143-145 ° C. are isolated from the chloroform solution, and are refluxed for 3 hours with 30 ml of freshly distilled collidine under a nitrogen atmosphere. The reaction mixture is poured into cold, dilute hydrochloric acid and extracted with chloroform The chloroform extract is evaporated to dryness in vacuo, the residue is taken up in benzene and filtered through 50 g of silica gel.
The benzene is evaporated in vacuo. 2.1 g of d 2-Sa-bisnorcholenic acid methyl ester with a melting point of 110-112 ° C. are obtained, which with 400 mg of lithium aluminum hydride in abs. Ether can be reduced under reflux for 3 hours. Then it is hydrolyzed and 10% sodium hydroxide solution is added.
After extraction, 1.5 g of z12-Sa-bisnorcholen-22-ol, melting point 137-138 ° C., are obtained with 2 g of p-toluenesulfochloride in 50 ml of dry pyridine into the 22 tosyloxy-2-5a-bisnorchols, which is obtained as a colorless oil be converted (thin-layer chromatogram uniformly in cyclohexane-ethyl acetate 7: 3). Heating for five hours with 60 ml of a 1N methanolic lithium azide solution yields 22-azido-Z12-5a-bis-norcholen with lithium aluminum hydride. and the conversion into the hydrochloride takes place as in Example 8. 750 mg of 22-amino-2-5a-bisnorcholene hydrochloride are obtained; F. over 300 C (decomp.).
Example 4
200 mg of 22-amino-3-5ss-bisnorcholen are dissolved in 5 ml of ethanol and 166 mg of 1,5-dibromopentane and 140 mg of sodium carbonate are added anhydrous. The reaction mixture is refluxed with stirring for 16 hours. Let it cool down. adds 20 ml of ethanol and sucks off the inorganic components. The filtrate is concentrated to dryness and the residue obtained is dissolved in ether. The insoluble residue is filtered off with suction and the ethereal solution is concentrated to dryness. The remaining crude 22- (N-piperidyl) -u3-5ss-bisnorcholen is recrystallized from acetone; Yield 120 mg; F. 154 to 156o C.
Example 5
5 gd3-5ss-norcholenic acid chloride (prepared from norlithocholic acid methyl ester by tosylation, heating in collidine, saponification with alcoholic potassium hydroxide solution and reaction with thionyl chloride) is dissolved in 100 ml of acetone and cooled to 10 ° C. A solution of 2 g of sodium azide in 7 ml of water is added dropwise at this temperature. After 15 minutes, it is precipitated with ice water and filtered off. The still moist filter cake is added to a mixture of 100 ml of glacial acetic acid and 10 ml of water. Thereafter, the mixture is heated to 60-70 ° C. for 3 hours and steam distillation is connected. The free amine is obtained by adding sodium hydroxide solution and extracted with ether.
22-Amino-J 3-5ss-bisnorcholene hydrochloride (3.5 g) with the melting point given in Example 1 is obtained therefrom with ethereal hydrochloric acid.
Example 6
50 g of lithium aluminum hydride are dissolved in 1.3 l of diglyme, and 320 ml of boron tri fluoride etherate in 1 l of diglyme are added dropwise over 21/2 hours. After a further hour at 0 ° C., a solution of 4-bisnorcholen-22-ol-3-one in diglyme is added. After one hour at room temperature, 1 l of acetic anhydride is added and the mixture is heated under reflux for 1 hour. The batch is then added to water and shaken out with ether. The 22-acetate obtained in this way (35 g) is dissolved in 20% strength ethanol and refluxed with 20 g of KOH for 1 hour. The solvent is then evaporated in vacuo and the residue is partitioned between water and ether.
After drying and concentrating in vacuo, 28 g of 3-Sa-bisnorcholen22-ol with a melting point of 126 ° to 1280 ° C. are obtained (from hexane). Analogously to example 3, 3-Sa-bisnorcholen-22-amine hydrochloride is now obtained from J3-Sa-bisnorcholen-22-ol via 22-tosylate and 22-azide. (Yield 16 g with a melting point> 300 ° C.).
Example 7
2.0 g of 23,24-dinor-5a-cholan-22-amine are dissolved in 7 ml of formic acid and 6.5 ml of acetic anhydride and heated under reflux for 5 hours in the presence of a nitrogen atmosphere. After cooling, it is stirred into ice water and extracted with chloroform. The chloroform solution, washed neutral, is concentrated in vacuo after drying with sodium sulfate. 1.6 g of crude N- (23,24-dinor-5a-cholan22-yl) formamide are obtained in this way, which melts at 186 to 188 ° C. after being recrystallized twice from acetone.
Example 8
2.0 g of 23,24-dinor-5a-cholan-22-amine are refluxed for 8 hours in 20 ml of acetic anhydride. The excess acetic anhydride is then distilled off in vacuo and the residue is recrystallized from methanol. This gives 1.1 g of N, N-diacetoxy-23,24-dinor-5a-cholan-22-amine with a melting point of 126-127 "C.
Example 9
1.73 g of 23,24-Dinor-Sa-cholan-22-amine are in absol.
Ether dissolved, and a solution of 540 mg maleic acid hydride in absol. Ether is added in one pour. The immediately precipitating white pulp is sucked off and washed several times with ether. 1.5 g of N- (23,24-Dinor5a-cholan-22-yl) -maleamic acid with a melting point of 225 to 227 ° C. are obtained in this way.
Example 10
2.5 gzl3,5-bisnorcholadien-22-amine is dissolved in 400 ml of benzene and heated under reflux with 1.2 g of dimedone and 250 mg of toluenesulfonic acid on a water separator. The aqueous phase is separated off in this way and about 200 ml of benzene ex extracted. The combined benzene solutions are washed with 5% strength bicarbonate solution, dried with sodium sulfate and, after filtration, evaporated to dryness in vacuo. 700 mg of dimedone condensation product are obtained in this way; F. 227 to 229 C, namely N- (5,5-dimethyl-3-oxo cyclohex-1-enyl) -zl 3,5-bisnorcholadien-22-amine.
PATENT CLAIM 1
Process for the preparation of 22-amino-23,24-bisnorcholane derivatives of the formula
EMI4.1
and their acid addition salts, in which Z is the group CH2, CH (OH) or DC = 0 and C1 - '- C2, C2 -' - Q, Q ---- C4, C4 ---- C5 to Cs and C5. ..C6 means saturated or unsaturated carbon-carbon bonds, but if several double bonds are present there are no accumulated double bonds, and in the event that C4 C-C6 are saturated and one of the C, C2 or C2 '' ' C3 represent unsaturated carbon-carbon bonds, the 5-position hydrogen atom can be a- or s-configuration, and in the event that ring A and B is saturated, the hydrogen atom in the 5-position is a-position, characterized in that,
that in 22-azido compounds of the formula
EMI4.2
wherein St represents the steroid structure defined in formula I, which reduces the azido group to the 22-amino group.
SUBCLAIMS
1. The method according to claim I, characterized in that acid addition salts of the compounds obtained are prepared.
2. The method according to claim I, characterized in that the compounds obtained are N-acylated.
3. The method according to claim I or dependent claim 1, characterized in that 22-amino-X3-5ss- bisnorcholen and its hydrochloride are prepared.
4. The method according to claim I or dependent claim 1, characterized in that 22-amino-zl 2-5a- bisnorcholen and its hydrochloride are prepared.
5. The method according to dependent claim 2, characterized in that N- (23,24-dinor-5a-cholan-22-yl) - formamide is produced.
6. The method according to dependent claim 2, characterized in that N, N-diacetoxy-23,24-dinor-5a-cholan22-amine is prepared.
7. The method according to claim I or dependent claim 1, characterized in that a 22-amino-5abisnorcholene and its hydrochloride are prepared.
8. The method according to dependent claim 2, characterized in that N- (23,24-dinor-5a-cholan-22-yl) - maleic acid is prepared.
9. The method according to claim I or dependent claim 1, characterized in that 22-amino-5a-23,24dinorcholane of the formula
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