Verfahren zur Gewinnung eines als Schutz- und Heilmittel verwendbaren, Antigen enthaltenden, antituberkulösen Yaccins aus drüsigen Organen. Nach vorliegender Erfindung kann man ein wertvolles, als Schutz- und Heilmittel verwendbares, Antigen enthaltendes, anti tuberkulöses Vaccin aus drüsigen Organen erhalten.
Nach dem Verfahren gemäss der vorliegenden Erfindung wird dies dadurch erreicht, dass man eine in üblicher Weise aus solchen Organen gewonnene Zellaufschwem- mung stark einfrieren und nach genügender Kältewirkung wieder auftauen lässt, worauf man den Zellsaft filtriert und auf Tuberkel bazillen einwirken lässt.
Als geeignete Organe haben sich für die Herstellung dieses Vac. eins insbesondere Milz und Thymus erwiesen; auch Leber und andere Organe sind hierzu brauchbar, doch werden nach den bisher vor liegenden Erfahrungen -die besten Ergebnisse mit den Zellsäften aus Milz und Thymus er zielt. Die Präparate bewähren sich haupt- siichlich bei Infektionskrankheiten und kön nen sowohl zu Schutz- als auch zu Heil zwecken Verwendung finden.
Durch längere Einwirkung des Saftes auf die Bakterien können diese zur Abtötung gebracht werden; bei kürzerer Einwirkung werden sie avirulent.
Durch das Einfrierenlassen der Zellauf- schwemmung wird eine bessere Aufschliessung des Zellmaterials erreicht. <I>Beispiel:</I> Milz wird unter sterilen Bedingungen ent häutet, die Pulpa von den Trabekeln abge schabt und die zurückbleibende, weiche, brei artige Masse mit etwa der gleichen Menge sterilem Glassand verrieben.
Während des Verreibens gibt man nach und nach auf eine mittelgrosse Milz etwa 50 cms einer 1/2 %igen Carbol-Kochsalzlösung (physiologische Koch salzlösung + 1/2 % Ca_rbolsäure) hinzu, lösst das Extraktionsmittel im Eisschrank einige Stunden einwirken und :das Gemisch dann mindestens 24 Stunden lang stark einfrieren, so dass der Milzbrei fest gefroren ist. Hierauf lässt man auftauen und filtriert. Der klare Milz-Zellsaft ist fleischfarben bis dunkel braun.
In 10 cm' des so hergestellten Zellsaftes wird 1 mgr virulenter Tuberkelbazillen kultur eingesät. In gut verschlossenen Kölb- chen wird die Mischung im Schüttelapparat gut gesehüttelt, worauf sie vier Wochen lang bei 37 im Thermostaten verbleibt. Der Er reger ist dann sicher abgetötet (Meerschwein- chen-Kontrollversuch). Das antituberkulöse Vaocin ist damit fertig.
Vor der Anwendung beim Tier oder Menschen zu Schutz- oder Heilzwecken wird die Mischung von neuem im Schüttelapparat mindestens eine Stunde lang geschüttelt und dann in sterile Ampullen abgefüllt.
Der Impfstoff ist .eine milchig aussehende Emulsion, in der .die Tuberkelbazillen sehr fein verteilt sind. Die Struktur des Erregers hat sich erheblich geändert; seine Wachshülle ist zum Teil abgebaut, er ist nicht mehr so säurefest und hat vielfach die Granulaform angenommen.
Analog, wie oben beschrieben, kann das antituberkulöse Vaccin auch unter Verwen- dung von Thymus und andern drüsigen Or ganen gewonnen werden.
Process for obtaining from glandular organs an antigen-containing, antitubercular yaccine which can be used as a protective and medicinal agent. According to the present invention, a valuable antigen-containing anti-tuberculous vaccine which can be used as a protective and medicinal agent can be obtained from glandular organs.
According to the method according to the present invention, this is achieved by strongly freezing a cell suspension obtained from such organs in the usual way and then thawing it again after a sufficient cooling effect, whereupon the cell sap is filtered and allowed to act on tubercle bacilli.
Suitable organs for the production of this Vac. one in particular proved spleen and thymus; The liver and other organs can also be used for this purpose, but according to the experience available so far, the best results are obtained with the cell juices from the spleen and thymus. The preparations are mainly used for infectious diseases and can be used for both protective and curative purposes.
Long exposure of the juice to the bacteria can kill them; with shorter exposure they become avirulent.
By freezing the cell suspension, a better breakdown of the cell material is achieved. <I> Example: </I> The spleen is skinned under sterile conditions, the pulp is scraped off the trabeculae and the remaining, soft, mushy mass is rubbed with approximately the same amount of sterile glass sand.
During the trituration, about 50 cms of a 1/2% carbolic saline solution (physiological saline solution + 1/2% calcium carbolic acid) is gradually added to a medium-sized spleen, the extractant is allowed to act in the refrigerator for a few hours and then the mixture Freeze strongly for at least 24 hours so that the spleen pulp is solidly frozen. It is then allowed to thaw and filter. The clear spleen cell sap is flesh-colored to dark brown.
1 mgr of virulent tubercle bacilli culture is sown in 10 cm 'of the cell sap thus produced. The mixture is shaken well in well-closed flasks in the shaker, after which it remains in the thermostat for four weeks at 37. The pathogen is then safely killed (guinea pig control experiment). The anti-tubercular Vaocin is done with it.
Before using it on animals or humans for protective or healing purposes, the mixture is shaken again in the shaker for at least an hour and then filled into sterile ampoules.
The vaccine is a milky-looking emulsion in which the tubercle bacilli are very finely divided. The structure of the pathogen has changed significantly; its wax shell is partially broken down, it is no longer as acid-resistant and has often taken on the form of granules.
Analogously, as described above, the anti-tubercular vaccine can also be obtained using the thymus and other glandular organs.