CA1170596A - Algae growth system with dializying fibers - Google Patents

Algae growth system with dializying fibers

Info

Publication number
CA1170596A
CA1170596A CA000380125A CA380125A CA1170596A CA 1170596 A CA1170596 A CA 1170596A CA 000380125 A CA000380125 A CA 000380125A CA 380125 A CA380125 A CA 380125A CA 1170596 A CA1170596 A CA 1170596A
Authority
CA
Canada
Prior art keywords
culture
hemodialyzer
medium
algae
fibers
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
CA000380125A
Other languages
French (fr)
Inventor
Pierre Marsot
Real Fournier
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Centre de Recherche Industrielle du Quebec CRIQ
Original Assignee
Centre de Recherche Industrielle du Quebec CRIQ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre de Recherche Industrielle du Quebec CRIQ filed Critical Centre de Recherche Industrielle du Quebec CRIQ
Priority to CA000380125A priority Critical patent/CA1170596A/en
Priority to JP10522682A priority patent/JPS5851888A/en
Application granted granted Critical
Publication of CA1170596A publication Critical patent/CA1170596A/en
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12Unicellular algae; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • C12M23/08Flask, bottle or test tube
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M25/00Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
    • C12M25/10Hollow fibers or tubes
    • C12M25/12Hollow fibers or tubes the culture medium flowing outside the fiber or tube
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/02Percolation
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/16Hollow fibers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/34Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of gas
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/40Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of pressure

Abstract

: La présente invention a pour objet un nouveau système de culture d'algues unicellulaires à dialyse. Ce système est basé sur l'utilisation de fibres creuses dialysantes permettant les échanges osmotiques des nutrilites et des métabolites entre le milieu nourricier soit l'eau de mer ou les eaux usées domestiques et la culture d'algues, sans aucun risque de contamination pour la culture. Grâce à la surface d'échange importante du faisceau de fibres et son remplacement facile, cette méthode peut fournir durant un période prolongée une productivité biologique élevée.: The present invention relates to a new system for cultivating unicellular algae on dialysis. This system is based on the use of dialyzing hollow fibers allowing the osmotic exchanges of nutrilites and metabolites between the nourishing medium, either seawater or domestic wastewater and the culture of algae, without any risk of contamination for the culture. Thanks to the large exchange surface of the fiber bundle and its easy replacement, this method can provide high biological productivity for an extended period.

Description

5~i La presente invention a pour objet un nouveau système de culture d'algues unicellulaires à dialyse comprenant une enceinte fermee contenant les algues dans un milieu de cul-ture et des moyens pour assurer un echange des nutrilites et metabolites nécessaires à la croissance des algues depuis un milieu nourricier vers le milieu de culture.

L'invention concerne également une nouvelle méthode de culture d'algues unicellulaires ~ c1ialyse~ ~ar cette méthode, une culture volumineuse d'algues en dialyse est réalisée avec une productivité biologique élevée.

Depuis près de 50 ans, une panoplie de ~2thodes de culture d'algues unicellulaires a été developpee aussi bien dans le secteur de la recherche appliquee: recherche d'une source nouvelle de nourriture pour l'homme, en aquiculture, pour l'utilisation des eaux usees, que celui de la recherch~
fondamentale, où des appareils généralement plus sophistiqués, genre chimiostat, ont permis la réalisation de découvertes importantes sur la photosynthèse. Dans tous ces appareils, la croissance des algues est determinee par le renouvellement automatique ou manuel de l'echaMtillon d'algues préleve, par du milieu enrichi, et la culture atteint sa croissance maximale par l'epuisement de sels nutritifs du milieu.

Récemment, en s'inspirant des methodes de cul-tures dialysantes chez les microorganismes non-photosynthetiques, des cultures de ph~toplancton marin ou d'eau douce ont ete de veloppees avec succès dans des enceintes dialysantes (voir à ce sujet (1) PRATT, R, 1944. Am. J. Bot. 31: 418~421; ~2) JENSEN, A., B. RYSTAD and L. SKOG~UND, 1972. J. Exp. Mar. Biol.
Ecol. 8: 241-248; [3) JENSEN, A. and B. RYSTAD, 1973.

~ 7~55~

J. ~xp. Mar. Biol. Ecol. 11: 27S-2~5; (4) SKOGLUND, L. and A. JENSEN, 1976. J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 21: 169-178;
(5) SAKSHAUG, E. et A. JENSEN, 1978. Oceanogr. Mar. Biol.
Ann. Rev. 16: 81-106). Ce procedé est particulierement inté-ressant puisqu'il fait appel uniquement a des échanges osmoti-ques de substance de faible poids moléculaire (par exemple, les sels nutritifs) entre la culture et son milieu nutritif, tcut en protegeant les cellules vegetales des predateurs ou de la contamination par les bacteries. Plus tard, Dor (voir a ce sujet High density, dialysis culture of algal on sewage-, Water Research, 9: 251-254, 1975) utilise le meme procedé pour de-montrer les possibilités de récupération des eaux d'égouts domestiques dans le but de produire des protéines algales.

Cependant, cette méthode possede deux faiblesses techniques majeures. D'abord, la durabilité limitée de la mem-brane dialysante en cellulose, sensible aux bacteries cellulo-lytiques et aux diatomees epiphytiques, rend impossible le main-tien d'une culture sur une longue periode. En fait, le rempla-cement de cette membrane a dialyse est irrealisable sans risque de contamination ou de destruction de la culture car elle tient également lieu de paroi de l'enceinte. De plus, pour des en-ceintes très volumineuses, le taux d'échange osmotique devient in-suffisant en raison de la baisse du rapport surface de dialyse/
volume de la culture. Ceci expli~ue les concentrations cellu-laires supérieures obtenues par Sakshaug et Jensen voir référen-ce ~4) precitee avec des petits sacs a dialyse seulement. Le système de culture de phytoplancton selon la presente invention, basé sur l'emploi d'unités de fibres creuses dialysantes, rem-plaçables, isol~es de la chambre de croissance, permet de con-tourner ces difficultés, c'est-a-dire d'obtenir une culture aseptique volumineuseet durable, et une croissance cellulaire tres élevée.

~l7g,~

Le brevet des Etats-Unis No. 4.043.903 (Dor) a pour objet un procédé favorisant la culture d'algues dans un mllieu aqueux contaminé. Dans ce procédé, on utilise une mem-brane dialysante qui permet des échanges osmotiques entre les élements nutritiEs contenus dans le milieu contaminé et la cul-ture d'algues. Nulle part dans ce brevet, on ne parle de fibres creuses dialysantes. On ne mentionne pas non plus l'emploi combiné d'une arrivée externe de CO2 gazeux et un débit-mètre afin de régler le débit de la culture et de l'eau de mer dans l'échangeur dialysant comme il en est question dans la présente invention. Leur système ne peut également fonctionner en continu, avec un échantillonnage automatique.

Palotta, dans son brevet américain No. 2.715.795 délivré le 23 aout 1955, décrit une méthode de culture de micro-organismes photosynthétiques. Cette méthode utilise un appareil comprenant une membrane dialysante ayant la forme d'un tube hélicoidal, enroulé autour d'un cylindre rotatif. L'appareil de Palotta ne peut donc être compare a celui de la présente demande.

Enfin, le brevet des Etats-Unis No. 3.228.877 délivré le 11 janvier 1966 a pour objet un appareil a permeabi-lite sélective et un procédé utilisant des fibres creuses. Ce brevet démontre la grande possibilité d'u-tilisation de ces fibres dans de multiples domaines techniques o~ un filtrage selectif est necessaire.

L'appareil du demandeur fait plutôt appel a la comblnaison de nombreux détails de realisation qui ne sont pas suggeres dans le brevet No. 3.228.877, comme par exemple, l'uti-lisation d'un courant d'un melange d'air et de bioxyde de car-bone gazeux pour assurer la circulation de la culture au sein de l'échangeur dialysant, ou encore d'un débit-mètre pour régler 7 S~

l'arriuee du milieu nourricier dans l.'échangeur dialysant et ainsi ajuster le debit aisement. L'emploi. d'un manometre pour regler la pression intrafibrillaire et la diffusion hydraulique vers la culture et permettre la reali.sation d'un système de culture à dialyse continu distingue egalement l'appareil du demandeur.
Ce sytème base sur l'utilisation de fibres creuses dialysantes permet les echanges osmoti.ques des nutri.li.tes et des metabolites entre le milieu nourricier soi.t l'eau de mer ou des eaux usees domestiques et la culture d'algues, sans aucun rI.sque de contami-nation pour la culture. Grâce à la.surface d'echange importante du faisceau de fibres e-t son remplacement facile, cette methode peut foùrnir durant une periode prolongee une productivite biologique elevee.
La presente.invention a donc pour objet un système de culture d'algues unicellulaires à dialyse. Celui-ci est du type compre-nant: une enceinte fermee contenant les algues dans un milieu de culture et des moyens pour.assurer un echange des nutrilites et metabolites necessaires à la croissance des algues depuis~un milieu nourricier choisi dans le groupe comprenant l'eau de mer et lbs eaux usees domestiques vers le milieu de culture. Les moyens d'échange sont constitu8s par des faisceaux de fibres creuses de type hemodialyseur en contact avec le milieu -de culture.~s algues, le m~lieu nourriGier circulant à l'interieur des fibres. Les movens d'echange et l'enceinte contenant le milieu de culture sont des unites distinctes et fonctionnent de manière independante.
L'invention concerne également une nouvelle methode de cultu-re d'algues unicellulaires à dialyse. Elle est caracterisee par les étapes suivantes: on introduit une souche d'algues dans un milieu de culture contenu dans une enceinte pour favoriser la croissance de ladite culture, on fait circuler à contre-courant dans ùn hémodialyseur constitue d'un faisceau de fibres ~ ~7~

crellses dialysantes, le milieu de culture et un milieu nourricier, le ~ilieu de culture circulant à l'e~térieur desdites fibres par entraine-ment d'un courant yazeux en~e ladlte enceinte et l'h~ialyseur-tandis que le milieu ncurricier circule à l'interieur de ces dites fibres, afin d'as-surer une osmose vers lsdit milieu de culture et permettre une diffusion des nutrilites nécessaires à la croissance des algues.
Au stade de croissance voulu, on procède ensuite à sa recuperation.

Le milieu nourricier utilisé est de l'eau de mer ou des eaux usées domestiques alors que le courant gazeux servant à entralner le milieu de culture est un mélange air-CO2 (V:V, 98:2) ayant un débit maximum d'un litre/min.

L'enceinte est logee, de préférence, dans un bassin d'eau thermostatee sous le controle d'une unite refrige-rante (pas indiquee). La forme etroite de l'enceinte donne un meilleur rendement pour des cultures concentrees car elle dimi-nue le facteur d'extinction lumineuse ~-Self-Shading- des algues).
On peut egalement utiliser des enceintes de forme cylindrique.

L'echangeur dialysant, du type hémodialyseur, possede une surface d'echange de l.l m2. Il provient de la compagnie Hospal. Cet echangeur est constitué d'une cartouche de plastique contenant des milliers de fibres creuses de collo-dion (D.I. 200 ~m~ et laissent diffuser les molécules inferieures à 1,500 ~.M. L'eau de mer ou le milieu nourricier, circule a l'interieur de chacune de ces fibres du haut vers le bas tandis que la culture passe entre les fibres en sens inverse, afin de permettre un echange osmotique vers le milieu de culture.

L'echangeur dialysant s'installe à l'exterieur de l'enceinte de culture et il est relie à celle-ci par deux tubes flexibles Tygon ou de silicone, l'un de ces tubes etant dit supérieur et l'autre inferieur.
... .. .... ...
* Marque de co~rce d'un tube flexible transparent fait de plastique.

;

Le système comprend en outre un conduit d'entrée d'un courant gazeux monté sur le tube inférieur reliant l'hémo-dialyseur à l'enceinte. Ce courant gazeux avorise la circula-tion du milieu de culture à l'interieur de l'hemodialyseur.

Le dialyseur est egalement prolonge ~ sa sortie par un tube dont l'ouverture est réglable au moven d'une valve permettant ainsi d'ajuster la pression intrafibrillaire.
On peut installer plusieurs echangeurs par enceinte et les remplacer au besoin car ils sont jetables.

Dans un système de dialyse en continu, un reci-pient d'echantillonnage muni d'une sortie d'air et d'un tube de prelèvement est relie au h~ut de l'enceinte de culture par un tube de deversement., Afin de mieux comprendre l'invention sans tou-tefois vouloir la limiter, on se referera maintenant aux dessins annexes, dans lesquels:

Les figures 1, 2 et 3 representent une enceinte de culture selon l'invention de 10 litres de capacite, vue sous trois angles: vue de face, de haut et de profil; et la figure 4 represente, vue de profil, un cou-plage de l'echangeur dialysant au bassin de culture et illustre le fonctionnement du syst8me de culture en continu (echantillon-nage automatique) selon l'invention.

La figure 4 montre le système complet en ope-ration. Un mélange air-CO2 (V:V, 98:2) arrive en (F) au bas de l'enceinte (A) au niveau du tube inferieur (D) reliant l'echan-geur (C) a l'enceinte avec un débit maximum d'un litre/min. Ce flux de gaz entraine la culture de l'enceinte (A) vers le tube (D) jusqu'au dialyseur (C), dans la chambre d'échange (G), puis 1~ 7~5'~i revient dans l'enceinte (A) via le tube (E). L'enceinte est logée dans un bassin d'eau thermostatee (B). C~ debit gazeux fournit une rotation complète de la culture en une heure. De plus, ce melange gazeux, favorise la croissance des algues grâce a l'apport en CO2. L'echangeur utilise dans le syst~me selon l'invention est constitue d'un faisceau de ~ibres creuses dia-lysantes du type hemodialyseur.

La circulation des deux liquides à contre-cou-rant dans l'echangeur (la culture entre les fibres et le milieu nourricier à l'interieur de chaque fibre) favorise les echanges osmotiques qui se produisent dans la chambre d'echange (G).

Pour un debit constant, la pression intrafibril-laire du dialyseur determine le taux de passage du milieu nourri-cier de part et d'autre de la barrière dialysante (diffusion hy-draulique). Selon que cette pression est superieure ou égale à
celle de la chambre de croissance le disposit,if operera en con-tinu ou en equilibre de croissance. Ainsi, pour maintenir une culture à un stade de croissance donne, i.e. à une concentration cellulaire stable (habituellement en phase logarithmique o~ le rendement biologique est superieur), il suffit d'exercer une pression intrafibrillaire superieure au poids de 1~ colonne de culture (60 mm de Hg et plus), de fason a creer une dilution cellulaire equiva-lente au rythme de croissance de l'algue. L'excedent de culture ainsi obtenu sera chasse automatiquement vers un recipient d'e-chantillonnage (K~ via le tube de deversement (N) (diamètre in-terne: 1.5 mm) grace a la pression ga~eus~ s'exersant à la par-tie superieure de la chambre de croissance. La culture sera acheminee vers ledit recipient d'echantillonnage et le gaz sera libere au niveau du filtre à air (I). Le prelèvement de l'algue s'effectue par le tube ~L). Un manomètre (M) situe entre un debit-m~tre (H) et le dialyseur (C) nous indique la pression ,~7~t~s~j in-trafibrillaire qu'on peut ajuster en variant l'ouverture du tube (J~ a la sortie du dialyseur (C).

En maintenant, par ailleurs, la pression intra-fibrillaire du dialyseur d'un système non-continu egale au poids de la colonne de culture (entre 55 et 60 mm de Hg) on obtient un système en equilibre, sans excedent de culture, le preleve-ment se faisant au moyen du tube O. Le système opère exclu-sivement en dialyse et la culture passe par toutes les phases de croissance, soit logarithmique, lineaire et plateau. Elle at--teint un plafonnement de croissance (plateau) qui varie avec les conditions du milieu (lumiere, sels nutritifs, etc.~.

Des experiences recentes effectuees par le de-mandeur ont montrees que le debit d'eau de mer dans les fibres agissait de fa~on tras marquee sur la productivite. Ainsi, chez Phaeodactylum tricornutum près du double de cellules 18 à 31 x 106 cellules/ml est obtenu au plateau en augmentant le debit de 5.5 à 14.5 L/heure. Pour obtenir de forts rendements, il est donc souhaitable de maintenir un débit élevé dans le dialyseur.
Ce debit est réglé par le débit-mètre (H).

Les essais en laboratoire du syst8me de culture selon l'invention utilisant les fibres dialysantes ont éte con-cluants quant a la capacite de production du ph~vtoplancton marin (genres diatomees). Chez Phaeodactylum tricornutum les concen-trations cellulaires atteintes sont de l'ordre de 30 à 40 x 106 cellules/ml avec un poids sec correspondant à 500 mg à 1 g/L, ce qui représente une production lO ~ 20 fois superieure aux systèmes de culture traditionnels (statique ou semi-continue) que le demandeur a testes. Les cultures se sont maintenues steriles indefiniment avec un changement de dialyseur toutes les semaines environ, et ce, en dépit d'une forte contamination du 17~S9~i milieu utilise. D'autres especes d'algues Skeletonema costatum en chaine, et Dunaliella tertiolecta ont ete cultivees avec succes par cet-te methode.

L'appareil du demandeur peut egalement bien s'adapter a des cultures de phytoplanc-ton d'eau douce pour la production de proteines algales a partir d'eaux usees domestiques.
5 ~ i The subject of the present invention is a new single cell algae culture system with dialysis including a closed enclosure containing algae in a growing medium and means to ensure an exchange of nutrilites and metabolites necessary for algae growth from a feed medium to the culture medium.

The invention also relates to a new culture method of unicellular algae ~ c1ialyse ~ ~ ar method, a large culture of algae on dialysis is carried out with high biological productivity.

For almost 50 years, a panoply of ~ 2thodes of single cell algae culture has been developed as well in the applied research sector: search for a new source of food for humans, in aquaculture, for the use of wastewater, than that of research ~
fundamental, where generally more sophisticated devices, chemostat type, allowed the realization of discoveries important for photosynthesis. In all of these devices, algae growth is determined by renewal automatic or manual of the algae sample sampled, by enriched medium, and the culture reaches its maximum growth by the exhaustion of nutritive salts from the environment.

Recently, taking inspiration from culinary methods dialyzing tures in non-photosynthetic microorganisms, cultures of marine or freshwater phtoplankton have been successfully developed in dialyzing enclosures (see this subject (1) PRATT, R, 1944. Am. J. Bot. 31: 418 ~ 421; ~ 2) JENSEN, A., B. RYSTAD and L. SKOG ~ UND, 1972. J. Exp. Mar. Biol.
School. 8: 241-248; [3) JENSEN, A. and B. RYSTAD, 1973.

~ 7 ~ 55 ~

J. ~ xp. Mar. Biol. School. 11: 27S-2 ~ 5; (4) SKOGLUND, L. and A. JENSEN, 1976. J. Exp. Mar. Biol. School. 21: 169-178;
(5) SAKSHAUG, E. and A. JENSEN, 1978. Oceanogr. Mar. Biol.
Ann. Rev. 16: 81-106). This process is particularly integrated because it uses only osmotic exchanges of low molecular weight substance (for example, nutritive salts) between the culture and its nutritive medium, tcut by protecting plant cells from predators or contamination by bacteria. Later, Dor (see this subject High density, dialysis culture of algal on sewage-, Water Research, 9: 251-254, 1975) uses the same process to de-show the possibilities of sewage recovery domestic for the purpose of producing algal proteins.

However, this method has two weaknesses major techniques. First, the limited durability of the mem-dialyzing cellulose bran, sensitive to cellulo- bacteria lytics and epiphytic diatoms, makes it impossible to maintain of a culture over a long period. In fact, the replacement cement of this dialysis membrane is impracticable without risk contamination or destruction of the culture because it also place of wall of the enclosure. In addition, for children very large, the osmotic exchange rate becomes low sufficient due to lower dialysis area / ratio culture volume. This explains the cell concentrations.
superior laires obtained by Sakshaug and Jensen see referen-ce ~ 4) above with small dialysis bags only. The phytoplankton culture system according to the present invention, based on the use of dialyzing hollow fiber units, rem-placeable, isolated from the growth chamber, allows to overcome these difficulties, that is to say to obtain a culture bulky and long-lasting aseptic, and very high cell growth.

~ l7g, ~

U.S. Patent No. 4,043,903 (Dor) relates to a process promoting the cultivation of algae in a Contaminated aqueous medium. In this process, a mem-dialyzing brane which allows osmotic exchanges between nutrients contained in the contaminated medium and culture seaweed ture. Nowhere in this patent does it speak of fibers hollow dialyzing. No mention is made of employment either combined with an external supply of CO2 gas and a flow meter in order to regulate the flow of culture and sea water in the dialyzing exchanger as discussed in this invention. Their system also cannot operate continuously, with automatic sampling.

Palotta, in his U.S. Patent No. 2,715,795 issued August 23, 1955, describes a micro- culture method photosynthetic organisms. This method uses a device comprising a dialyzing membrane in the form of a tube helical, wrapped around a rotating cylinder. The device Palotta cannot therefore be compared to that of the present application.

Finally, U.S. Patent No. 3,228,877 issued on January 11, 1966 relates to a permeabi-selective lite and a process using hollow fibers. This patent demonstrates the great possibility of using these fibers in multiple technical fields where selective filtering is necessary.

The plaintiff's device instead uses the filling in many details of realization which are not suggested in patent No. 3,228,877, such as, for example, the use of flow of a mixture of air and carbon dioxide gaseous bone to ensure the circulation of the culture within the dialyzing exchanger, or a flow meter to adjust 7 S ~

the feeder environment in the dialyzing exchanger and thus adjust the flow easily. The job. a pressure gauge for adjust the intrafibrillary pressure and the hydraulic diffusion towards culture and allow the realization of a system of culture with continuous dialysis also distinguishes the device from applicant.
This system is based on the use of dialyzing hollow fibers allows osmotic exchanges of nutrients and metabolites between the feeder environment and seawater or wastewater domestic and algae culture, without any risk of contamination nation for culture. Thanks to the large exchange surface of the fiber bundle and its easy replacement, this method can provide during an extended period of productivity high organic.
The present.invention therefore relates to a culture system unicellular algae on dialysis. This is of the compression type.
nant: a closed enclosure containing algae in an environment of culture and means to ensure an exchange of nutrilites and metabolites necessary for algae growth since ~ a nourishing environment chosen from the group comprising sea water and lbs domestic waste water to the culture medium. The exchange means consist of bundles of fibers hollow hemodialyzer type in contact with the environment -of culture. ~ s algae, the nourishing place circulating inside the fibers. Exchange movens and the enclosure containing the culture medium are separate units and operate independently.
The invention also relates to a new method of cultivation.
re of unicellular algae on dialysis. It is characterized by the following stages: a strain of algae is introduced into a culture medium contained in an enclosure to promote growth of said culture, we circulate against the current in a hemodialyzer consists of a bundle of fibers ~ ~ 7 ~

dialysis crellses, the culture medium and a nourishing medium, the ~ culture area circulating e ~ térieur said fibers by entrain-ment of a gaseous current in ~ e pregnant ladlte and the h ~ ialyzer-while the ncurricier medium circulates inside these said fibers, in order to to secure an osmosis towards the said culture medium and allow a diffusion of nutrilites necessary for the growth of algae.
At the desired growth stage, it is then recovered.

The nourishing medium used is sea or domestic sewage while the gas stream used to drain the culture medium is an air-CO2 mixture (V: V, 98: 2) with a maximum flow of one liter / min.

The enclosure is preferably housed in a thermostated water basin under the control of a refrigerated unit rante (not indicated). The narrow shape of the speaker gives a better yield for concentrated crops because it reduces naked light extinction factor ~ -Self-Shading- algae).
It is also possible to use cylindrical enclosures.

The dialyzing exchanger, of the hemodialyzer type, has an exchange area of ll m2. It comes from the Hospal company. This exchanger consists of a cartridge of plastic containing thousands of hollow fibers of collo-dion (DI 200 ~ m ~ and let the lower molecules diffuse at 1,500 ~ .M. Sea water or the nourishing medium circulates a the interior of each of these fibers from top to bottom while that the culture passes between the fibers in the opposite direction, in order to allow an osmotic exchange towards the culture medium.

The dialysing exchanger is installed outside of the culture chamber and it is connected to it by two tubes flexible Tygon or silicone, one of these tubes being said upper and the other lower.
... .. .... ...
* Co ~ rce mark of a flexible tube transparent made of plastic.

;

The system further includes an inlet conduit a gas stream mounted on the lower tube connecting the hemo-dialyzer at the enclosure. This gaseous current promotes circulation.
tion of the culture medium inside the hemodialyzer.

The dialyzer is also extended to its outlet by a tube whose opening is adjustable at the moven of a valve allowing to adjust the intrafibrillary pressure.
Several exchangers can be installed per enclosure and the replace if necessary as they are disposable.

In a continuous dialysis system, a reci-sampling pient fitted with an air outlet and a sampling is connected to the h ~ ut of the culture chamber by a discharge tube., In order to better understand the invention without all however want to limit it, we will now refer to the drawings annexes, in which:

Figures 1, 2 and 3 show an enclosure container according to the invention with a capacity of 10 liters, view from three angles: front, top and side view; and figure 4 represents, side view, a range of the dialyzing exchanger to the culture basin and illustrates the operation of the continuous culture system (sample-automatic swimming) according to the invention.

Figure 4 shows the complete system in operation.
ration. An air-CO2 mixture (V: V, 98: 2) arrives at (F) at the bottom of the enclosure (A) at the level of the lower tube (D) connecting the geur (C) at the enclosure with a maximum flow of one liter / min. This gas flow causes the culture from the enclosure (A) to the tube (D) to the dialyzer (C), in the exchange chamber (G), then 1 ~ 7 ~ 5 '~ i returns to the enclosure (A) via the tube (E). The enclosure is housed in a pool of thermostated water (B). C ~ gas flow provides a full crop rotation in one hour. Of more, this gas mixture, promotes the growth of algae thanks has the CO2 contribution. The exchanger used in the system according to the invention is made up of a bundle of ~ hollow ibres dia-lysing of the hemodialyzer type.

The circulation of the two liquids against the neck rant in the exchanger (the culture between the fibers and the environment feeder inside each fiber) promotes exchanges osmotics that occur in the exchange chamber (G).

For a constant flow, the intrafibril pressure the area of the dialyzer determines the rate of passage of the nourished medium cier on both sides of the dialysis barrier (hy-hydraulics). Depending on whether this pressure is greater than or equal to that of the growth chamber disposes it, if will operate in cons continuous or in growth equilibrium. So to maintain a culture at a given growth stage, ie at a concentration stable cell (usually in log phase where ~
biological yield is superior), it suffices to exercise intrafibrillary pressure greater than the weight of 1 ~ culture column (60 mm Hg and above), to create an equivalent cell dilution slow at the rate of growth of the alga. The excess of culture thus obtained will be automatically chased towards a container of e-sampling (K ~ via the pouring tube (N) (diameter dull: 1.5 mm) thanks to the pressure ga ~ eus ~ exerted by the upper tie of the growth chamber. Culture will routed to said sampling container and the gas will released at the air filter (I). Seaweed removal is carried out by the tube ~ L). A pressure gauge (M) located between a flow meter (H) and the dialyzer (C) tells us the pressure , ~ 7 ~ t ~ s ~ j in-trafibrillary which can be adjusted by varying the opening of the tube (J ~ at the outlet of the dialyzer (C).

By maintaining, moreover, the intra-of the dialyzer of a non-continuous system equal to the weight from the culture column (between 55 and 60 mm Hg) we obtain a system in equilibrium, without excess culture, the sample this is done by means of tube O. The system operates exclusively dialysis and culture goes through all phases of growth, ie logarithmic, linear and plateau. Did she - reaches a growth plateau (plateau) which varies with environmental conditions (light, nutrient salts, etc. ~.

Recent experiments carried out by the de-principal have shown that the seawater flow in the fibers acted very markedly on productivity. So at Phaeodactylum tricornutum near double the number of cells 18 to 31 x 106 cells / ml is obtained on the plateau by increasing the flow rate 5.5 to 14.5 L / hour. To obtain high yields, it is therefore desirable to maintain a high flow rate in the dialyzer.
This flow is regulated by the flow meter (H).

Laboratory tests of the culture system according to the invention using the dialyzing fibers have been clutantes as for the production capacity of marine ph ~ vtoplankton (diatom genera). In Phaeodactylum tricornutum the concen-cellular trations affected are of the order of 30 to 40 x 106 cells / ml with a dry weight corresponding to 500 mg to 1 g / L, which represents a production lO ~ 20 times greater than traditional cropping systems (static or semi-continuous) that the applicant has tested. Cultures have held up sterile indefinitely with a change of dialyzer every weeks or so, despite heavy contamination of the 17 ~ S9 ~ i medium uses. Other species of Skeletonema costatum algae in chain, and Dunaliella tertiolecta were cultivated with success with this method.

Applicant's device may also adapt to freshwater phytoplankton crops for production of algal proteins from domestic wastewater.

Claims (15)

Les réalisations de l'invention,au sujet desquelles un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit The realizations of the invention, about which a right exclusive ownership or lien is claimed, are defined as follows 1. Un système de culture d'algues unicellulaires à dialyse comprenant une enceinte fermée contenant les algues dans un milieu de culture et des moyens pour assurer un échange des nutrilites et métabolites nécessaire à la croissance des algues depuis un milieu nourricier vers le milieu de culture, caracté-risé en ce que lesdit moyens d'échange sont constitués de faisceaux de fibres creuses dialysantes du type hémodialyseur en contact avec le milieu de culture des algues, le milieu nourricier circulant à l'intérieur desdites fibres; et en ce que lesdits moyens d'échange et l'enceinte contenant le milieu de culture sont des unités distinctes et fonctionnent de manière indépendante. 1. A system of cultivation of unicellular algae on dialysis comprising a closed enclosure containing algae in a culture medium and means to ensure an exchange of nutrilites and metabolites necessary for the growth of algae from a feeding medium to the culture medium, characteristic laughed at in that the said means of exchange consist of bundles of dialyzing hollow fibers of the hemodialyzer type in contact with the algae culture medium, the medium feeder circulating inside said fibers; and in that said exchange means and the enclosure containing the medium of culture are separate units and operate in a way independent. 2. Système défini selon la revendication. 1, caractérisé en ce que l'hémodialyseur est dispose à l'extérieur de l'enceinte et relié à celle-ci au moyen de deux tubes, dont l'un des tubes est dit supérieur et l'autre inférieur, ledit hémodialyseur étant monte de façon à ce que la circulation du milieu de culture et celle du milieu nourricier se fassent à contre-courant, afin de favoriser une osmose vers ledit milieu de culture. 2. System defined according to claim. 1, characterized by what the hemodialyzer is disposing of outside the enclosure and connected to it by means of two tubes, one of which is said upper and the other lower, said hemodialyzer being rises so that the circulation of the culture medium and that of the nourishing environment are done against the current, in order to promote osmosis towards said culture medium. 3. Système défini selon la revendication 2, caractérisé.
en ce qu'il comprend un conduit d'entrée d'un courant gazeux monté sur le tube inférieur reliant l'hémodialyseur à l'enceinte pour faire circuler le milieu de culture à l'intérieur de l'hémodialyseur et en ce que ledit hémodialyseur comprend en outre des moyens pour régler les débits de circulation du milieu nourricier à l'intérieur des fibres et du milieu de culture à
l'extérieur des fibres.
3. System defined according to claim 2, characterized.
in that it comprises a gas stream inlet duct mounted on the lower tube connecting the hemodialyzer to the enclosure to circulate the culture medium inside the hemodialyzer and in that said hemodialyzer comprises in in addition to means for regulating the circulation rates of the medium feeder inside the fibers and the culture medium to the outside of the fibers.
4. Système défini selon la revendication 3, caractérisé en ce que le conduit d'entrée du mélange gazeux ect monté sur le tube inférieur reliant l'hémodialyseur à l'en-ceinte de culture et des moyens pour régler le débit du mélange gazeux. 4. System defined according to claim 3, characterized in that the gas mixture inlet pipe ect mounted on the lower tube connecting the hemodialyzer to the culture girdle and means for regulating the flow rate of the mixture gaseous. 5. Système défini selon la revendication 3, caractérisé en ce que ledit moyen pour régler la pression intra-fibrillaire du milieu nourricier est une valve ajustable montée sur le tube situé à la sortie du dialyseur. 5. System defined according to claim 3, characterized in that said means for adjusting the intra-of the nourishing medium is an adjustable valve mounted on the tube located at the outlet of the dialyzer. 6. Système défini selon la revendication 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que l'hémodialyseur a une surface d'échange d'environ 1.1 m2, le milieu nourricier étant choisi dans le groupe comprenant de l'eau de mer et des eaux usées do-mestiques et le courant gazeux faisant circuler le milieu de culture à l'intérieur de l'hémodialyseur étant constitué d'un mélange air-CO2 (V:V, 98-2) avec un débit maximum d'un litre/min. 6. System defined according to claim 1, 2 or 3, characterized in that the hemodialyzer has a surface exchange area of approximately 1.1 m2, the feeding environment being chosen in the group comprising seawater and wastewater the gas stream circulating the medium of culture inside the hemodialyzer consisting of a air-CO2 mixture (V: V, 98-2) with a maximum flow of one liter / min. 7. Système défini selon la revendication 1, 2 ou 3, caractérisé en ce qu'il y a plusieurs hémodialyseurs par enceinte. 7. The system defined according to claim 1, 2 or 3, characterized in that there are several hemodialyzers per pregnant. 8. Système défini selon la revendication 1, 2 ou 3, caractérisé en ce qu'il comprend en outre un récipient d'échantillonnage muni d'une sortie d'air et d'un tube de prélè-vement, ledit récipient étant relié au haut de l'enceinte de culture par un tube de déversement. 8. System defined according to claim 1, 2 or 3, characterized in that it further comprises a container with an air outlet and a sample tube vement, said container being connected to the top of the enclosure culture by a discharge tube. 9. Méthode de culture d'algues unicellulaires à dialyse caractérisée en ce que l'on introduit une souche d'algues dans un milieu de culture contenu dans une enceinte pour favoriser la croissance de ladite culture, on fait circuler à contre-courant dasn un hémodialyseur constitué d'un faisceau de fibres creuses dialysantes, le milieu de culture et un milieu nourricier, ledit milieu de culture circulant à l'extérieur des-dites fibres par entraînement d'un courant gazeux entre ladite enceinte et l'hémodialyseur, tout en maintenant le milieu nour-ricier à une pression égale ou supérieure à celle du milieu de culture selon que l'on opère respectivement en équilibre de croissance ou en continu, et au stade de croissance voulue on procède ensuite à la récupération de la culture d'algues. 9. Method of culturing single-cell algae dialysis characterized in that a strain is introduced algae in a culture medium contained in an enclosure to promote the growth of said culture, we circulate against the current in a hemodialyzer consisting of a beam of dialyzing hollow fibers, the culture medium and a medium feeder, said culture medium circulating outside the said fibers by entrainment of a gas stream between said fibers pregnant and hemodialyzer, while maintaining the nourishing environment laugh at a pressure equal to or greater than that of the middle of culture according to whether one operates respectively in equilibrium of growth or continuously, and at the desired growth stage we then proceeds to recover the algae culture. 10. Méthode selon la revendication 9, caractérisée en ce que l'on introduit comme milieu nourricier de l'eau de mer ou des eaux usées domestiques dont le débit est maintenu élevé
dans l'hémodialyseur et comme courant gazeux, un mélangé air-CO2 (V:.V, 98:2) avec un débit maximum d'un litre/min.
10. Method according to claim 9, characterized in that that we introduce as nourishing medium of sea water or domestic wastewater whose flow is kept high in the hemodialyzer and as a gas stream, an air-CO2 mixture (V: .V, 98: 2) with a maximum flow of one liter / min.
11. Méthode selon la revendication 9, caractérisée en ce que la pression intrafibrillaire est >60 mm de Hg pour assurer une culture dialysante en continu avec récupération automatique des algues. 11. Method according to claim 9, characterized in that the intrafibrillary pressure is> 60 mm Hg to ensure a continuous dialysis culture with automatic recovery Algae. 12. Méthode selon la revendication 9, caractérisé en ce que la pression intrafibrillaire est maintenue entre 55 et 60 mm de Hg pour assurer une culture dialysante en équili-bre. 12. Method according to claim 9, characterized in that that the intrafibrillary pressure is maintained between 55 and 60 mm Hg to ensure a dialysing culture in equilibrium bre. 13. Méthode selon la revendication 9 ou 10, caractérisée en ce que l'on cultive le Phaeodactylum tricornutum. 13. Method according to claim 9 or 10, characterized in that we grow the Phaeodactylum tricornutum. 14. Méthode selon la revendication 9 ou 10, caractérisée en ce que l'on cultive les espèces d'algues Skeletonema costatum en chaîne et Dunaliella tertiolecta. 14. Method according to claim 9 or 10, characterized in that we cultivate Skeletonema algae species chain costatum and Dunaliella tertiolecta. 15. Méthode selon la revendication 9 ou 10, caractérisée en ce que l'on cultive le phytoplancton d'eau douce. 15. Method according to claim 9 or 10, characterized in that water phytoplankton are grown sweet.
CA000380125A 1981-06-18 1981-06-18 Algae growth system with dializying fibers Expired CA1170596A (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA000380125A CA1170596A (en) 1981-06-18 1981-06-18 Algae growth system with dializying fibers
JP10522682A JPS5851888A (en) 1981-06-18 1982-06-18 Method and apparatus for dialytically culturing algaes and non-photosynthetic microorganisms

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA000380125A CA1170596A (en) 1981-06-18 1981-06-18 Algae growth system with dializying fibers

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CA1170596A true CA1170596A (en) 1984-07-10

Family

ID=4120264

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CA000380125A Expired CA1170596A (en) 1981-06-18 1981-06-18 Algae growth system with dializying fibers

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JPS5851888A (en)
CA (1) CA1170596A (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0263634A2 (en) * 1986-09-29 1988-04-13 Suzuki Shokan Co. Ltd. Culture medium supplying method and culture system
EP3772536A1 (en) * 2019-08-07 2021-02-10 P3 B.V. Method and system for concentrating an algal suspension

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR860000697B1 (en) * 1984-06-22 1986-06-07 주식회사 럭키 Method for continuous producting of microorganism and apparatus thereof
JPH0728715B2 (en) * 1986-09-29 1995-04-05 株式会社鈴木商館 Culture liquid supply method and culture device
US5614378A (en) * 1990-06-28 1997-03-25 The Regents Of The University Of Michigan Photobioreactors and closed ecological life support systems and artifificial lungs containing the same
US5958761A (en) * 1994-01-12 1999-09-28 Yeda Research And Developement Co. Ltd. Bioreactor and system for improved productivity of photosynthetic algae
IL108321A (en) * 1994-01-12 1998-10-30 Yeda Res & Dev Bioreactor and system for improved productivity of photosynthetic algae
JP2004081157A (en) * 2002-08-28 2004-03-18 Electric Power Dev Co Ltd Method for culturing photosynthetic microorganism and device for the same

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0263634A2 (en) * 1986-09-29 1988-04-13 Suzuki Shokan Co. Ltd. Culture medium supplying method and culture system
EP0263634A3 (en) * 1986-09-29 1989-02-08 Suzuki Shokan Co. Ltd. Culture medium supplying method and culture system
EP3772536A1 (en) * 2019-08-07 2021-02-10 P3 B.V. Method and system for concentrating an algal suspension

Also Published As

Publication number Publication date
JPS5851888A (en) 1983-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1174497B1 (en) Culture chamber and bioreactor for the extracorporeal culture of animal cells
BE1016793A4 (en) CELL CULTURE METHOD AND DEVICE FOR CARRYING OUT SAME
EP0474847B1 (en) Cell culture device
KR101924218B1 (en) Equipment for plants cultivating and fish farming
EP0640124B1 (en) Variable volume reactor-type device and process for the culture of cellular material
US20080213868A1 (en) Concentrated aqueous suspensions of microalgae
US20020034817A1 (en) Process and apparatus for isolating and continuosly cultivating, harvesting, and processing of a substantially pure form of a desired species of algae
JPS5835676B2 (en) Shiyokubutsu Saibounozou Shiyokuhouhou
FR2476124A1 (en) CELL CULTURE METHOD, FLOATING ANIMAL CELL CULTURE UNIT, AND CELL CULTURE DEVICE
CA1170596A (en) Algae growth system with dializying fibers
FR2624022A1 (en) INFUSION APPARATUS CONTAINING HEPATOCYTES AND METHODS FOR ITS PREPARATION AND USE
WO2011099016A2 (en) System and plant for cultivation of aquatic organisms
WO2002003786A1 (en) Method of culturing zooplankton, apparatus for culturing by the same, and culture obtained by the same
CN109197709A (en) A kind of cultivating system and its cultural method of nautilus
CA2804965A1 (en) Method for recovering inert or living microparticles and use and installation of same
FR3065966A1 (en) MICROALGAE CULTIVATION AND COLLECTION SYSTEM
KR20020038764A (en) Method for cultivating cells, a membrane module, utilization of a membrane module and reaction system for cultivation of said cells
USRE24822E (en) Richard
EP1180134B1 (en) Multi- applicable cell-culture method and apparatus
JP2984749B2 (en) Algae cultivation method using silicon
WO2019025670A1 (en) System for harvesting microalgae and microalga exudates from culture water loaded with same, comprising tangential flow on a membrane filter
CN110257250A (en) The culture media composition and cultural method and bioreactor of Chaetoceros muelleri
JP7325220B2 (en) biological breeding device
CN215012720U (en) Water circulation aquarium based on fish-algae symbiosis
BE1004599A5 (en) Method and particle separation device from a fluid medium.

Legal Events

Date Code Title Description
MKEX Expiry