BRPI0811416B1 - Compostos extraídos dos efluentes de usinas de óleo de palmeira usados no tratamento de câncer, suas combinações e métodos de uso - Google Patents

Compostos extraídos dos efluentes de usinas de óleo de palmeira usados no tratamento de câncer, suas combinações e métodos de uso Download PDF

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Abstract

COMPOSTOS EXTRAÍDOS DOS EFLUENTES DE USINAS DE ÓLEO DE PALMEIRA USADOS NO TRATAMENTO DE CÂNCER, SUAS COMBINAÇÕES E MÉTODOS DE USO descreve a composição e métodos de prevenção e tratamento do câncer compreendendo os compostos extraídos dos efluentes de usinas de óleo de palmeira. Além disso, a invenção descreve dosagens terapêuticas eficazes dos compostos e suas combinações. A presente invenção pode ser preparada separadamente ou como um produto de combinação.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO
[001] A presente invenção envolve composições e métodos de prevenção e tratamento do câncer com compostos fenólicos, inclusive, mas não limitados a ácidos fenólicos e compostos flavonóides derivados do material vegetal. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a composições que compreendem compostos derivados dos efluentes de usinas de óleo de palmeira.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[002] Na arte anterior, em certos casos, o tratamento do câncer envolve a quimioterapia que, normalmente, é eficiente na destruição de ou danos a células malignas.
[003] Atualmente, existem vários métodos empregados no combate ao câncer, a maioria dos quais envolvem a terapia convencional ou radioterapia ou cirurgia. No entanto, tais tratamentos também danificam as células normais.
[004] Ao identificar a maior desvantagem, conforme mencionada no parágrafo anterior, os cientistas e inventores da indústria correspondente vêm desenvolvendo técnicas e métodos menos danosos de prevenção e, consequentemente, tratamento do câncer, inclusive, mediante o uso de compostos derivados de plantas que também podem ter efeitos farmacológicos positivos por meio de sua capacidade de servir como antioxidantes. Geralmente, os antioxidantes têm vários usos médicos benéficos, inclusive, o de combater as células cancerosas. Os compostos fenólicos são antioxidantes poderosos que proporcionam um mecanismo de defesa eficaz contra os radicais livres. A vitamina E funciona como um antioxidante e protege as células destruindo ou "neutralizando" as moléculas potencialmente danosas chamadas de radicais livres que são subprodutos da atividade normal das células.
[005] O óleo cru de palmeira contém tais componentes como carotenóides, tocoferóis, tocotrienóis, esteróis, álcoois triterpênicos, fosfolipídios, glicolipídios e hidrocarbonetos terpênicos e parafinados. Os tocoferóis e tocotrienóis, componentes nutricionalmente significantes da Vitamina E, desempenham um papel principal na proteção dos componentes das células contra os danos oxidantes.
[006] O exemplo de tal composição foi revelado na patente US20040023894, “Tratamento de Distúrbios Inflamatórios, Cancerígenos e Trombóticos” (El- Naggar et al.) que propõe as composições que compreendem Tocotrienol, um antioxidante da família da vitamina E, a fração rica do óleo de palmeira e cítricos, para o tratamento de câncer. Neste documento, a invenção refere-se a uma composição para o tratamento de distúrbios inflamatórios, cancerígenos e trombóticos, mais especificamente, a combinação de um inibidor de COX-2, aspirina em dosagem baixa e antioxidante ou isoflavonas, em que tal combinação proporciona a eficácia anti-cancerígena. No entanto, esta combinação funciona favoravelmente com a combinação que compreende basicamente o inibidor COX-2 e aspirina em baixa dosagem em que a aspirina pode agir como o agente antiinflamatório.
[007] A presente invenção é diferente da descrita na patente US20040023894, visto que ela proporciona o método de prevenção e tratamento do câncer, o qual envolve o uso de uma dose eficaz da combinação dos compostos fenólicos, inclusive, ácidos fenólicos e flavonóides, extraídos dos efluentes de usinas de óleo de palmeira, com ou sem a adição da vitamina E, acompanhados ou não de quimioterapia ou radioterapia ou cirurgia convencionais. O teor do complexo antioxidante rico em flavonóides e compostos fenólicos desempenha o papel principal na proporção dos benefícios potenciais contra o câncer.
[008] Portanto, o objetivo da presente invenção é proporcionar um a composição que compreende os compostos fenólicos, inclusive ácidos fenólicos e flavonóides, extraídos dos efluentes de usinas de óleo de palmeira ou individualmente ou em combinação dos dois, ou em combinação com a vitamina E, a fim de prevenir e tratar células cancerígenas.
[009] O outro objetivo da presente invenção é proporcionar um método para administrar a composição descrita acima a um mamífero que precise dela.
[010] Além disso, o objetivo da presente invenção é proporcionar uma composição de fonte natural para ser administrada a um mamífero, que precise dela, que seja eficaz em termos de custos e simples na preparação.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[011] Esta invenção refere-se a uma composição que compreende os compostos fenólicos com ou sem adição da vitamina E, na preparação de um medicamento, a fim de prevenir ou inibir o crescimento de um câncer, em que os ditos compostos fenólicos são obtidos dos efluentes de usinas de óleo de palmeira.
[012] Além disso, a presente invenção proporciona o uso da quantidade terapeuticamente eficaz da composição, conforme descrito acima, com ou sem a vitamina E, na preparação do medicamento, a fim de prevenir ou inibir o crescimento cancerígeno em um indivíduo mediante a sua administração ao indivíduo que precise dele.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA PRESENTE INVENÇÃO
[013] A presente invenção envolve a composição que compreende os compostos fenólicos, inclusive ácidos fenólicos e flavonóides, e o uso da dita composição no medicamento que previne e trata câncer.
[014] O termo "compostos fenólicos" refere-se a uma classe de compostos produzidos por plantas, agrupados juntos devido à sua estrutura química.
[015] Consequentemente, o método da presente invenção envolve a administração de uma dose eficaz de compostos fenólicos com ou sem a vitamina. E em um indivíduo identificado como tendo alto risco de desenvolver câncer ou diagnosticado com câncer, a fim de prevenir e/ou tratar câncer. Os compostos fenólicos, inclusive ácidos fenólicos e flavonóides, permanecem nos efluentes de usinas de óleo de palmeira resultantes da inativação pelo calor da enzima polifenol oxidase durante o processo de usinagem. A vitamina E pode compreender tocotrienóis e tocoferóis, em que os tocotrienóis ou tocoferóis podem ser isômeros alfa, beta, gama ou delta.
[016] Os exemplos específicos a seguir proporcionarão as ilustrações detalhadas dos métodos de produção das drogas e das unidades farmacêuticas dosadas conforme a presente invenção.
[017] A administração dos compostos fenólicos de palmeira protege contra o melanoma. As administrações possíveis incluem a ingestão oral dos compostos fenólicos do óleo de palmeira, formas farmacêuticas dosadas ou mediante suas aplicações tópicas.
[018] O extrato dos compostos fenólicos substancialmente puros pode ser feito de qualquer forma adequada para ingestão oral, formas farmacêuticas dosadas ou aplicação tópica. Tais formas incluem soluções, dispersões coloidais, suspensões de óleo em água ou água em óleo, cremes, géis, loções, pós, etc. A metodologia para formulação de diferentes tipos de veículos é bem conhecida na arte e pode ser encontrada em qualquer literatura padrão relevante.
[019] Os compostos fenólicos do óleo de palmeira protegem contra o câncer de mama humano.
[020] As células do câncer de mama humano foram cultivadas in vitro ou na presença ou ausência de várias doses (wt %) dos compostos fenólicos de palmeira. Os compostos fenólicos do óleo de palmeira inibiram o crescimento das células do câncer de mama humano de uma maneira dependente da dose enquanto as células do câncer de mama que não foram suplementados com os compostos fenólicos do óleo de palmeira continuaram proliferando.
[021] Os compostos fenólicos do óleo de palmeira protegem contra o câncer de próstata humano.
[022] As células do câncer de próstata humano foram cultivadas in vitro ou na presença ou na ausência de várias doses (wt %) dos compostos fenólicos do óleo de palmeira. Os compostos fenólicos do óleo de palmeira inibiram o crescimento das células do câncer de próstata de uma maneira dependente da dose enquanto as células do câncer de próstata que não foram suplementadas com os compostos fenólicos do óleo de palmeira continuaram proliferando.
[023] Compostos fenólicos do óleo de palmeira protegem contra o câncer de cólon.
[024] Usando o modelo animal (ratos) e a dimetil hidrazina (DMH) como o causador químico, a carcinogênese do cólon foi induzida nos ratos mediante as doses múltiplas de DMH por via intragástrica. Os animais do grupo experimental foram suplementados com os compostos fenólicos do óleo de palmeira em sua água de beber, enquanto os animais do grupo controle receberam água e não foram suplementados com os compostos fenólicos do óleo de palmeira alguns. Todos os ratos foram mantidos ad libitum com ração normal de ratos durante todo o ensaio. Os ratos suplementados com os compostos fenólicos do óleo de palmeira demonstraram a quantidade significativamente mais baixa de tumores e pólipos do colón, se comparados com os animais controle não suplementados com esses compostos fenólicos do óleo de palmeira.
[025] Os estudos de microarranjo em camundongos com tumores e suplementados com os compostos fenólicos do óleo de palmeira sugerem um efeito citoestático.
[026] Os camundongos balb/c, machos, criados em cativeiro, com cerca de 6 semanas de idade receberam cada um uma injeção subcutânea de 200 μl de células de mieloma J558 (2-3 x 106 células/200 μl) no dorso do pescoço após serem aclimatizados por 1 semana. Então, os camundongos foram divididos em dois grupos, um que recebeu água destilada (n = 6) e o outro que recebeu os compostos fenólicos do óleo de palmeira (1500 ppm de equivalente do ácido gálico) 20 (n = 6). Os camundongos foram sacrificados 4 semanas depois quando a presença dos tumores foi observada mediante a palpação no pescoço. Os tumores foram extirpados, submetidos ao congelamento instantâneo no nitrogênio líquido e armazenados a -80° C até o término do processo de isolação de RNA total. Após determinar a quantidade produzida, pureza e integridade do RNA isolado, 4 amostras de RNA total com a integridade mais alta dentro de cada condição foram selecionadas para os estudos de microarranjo, usando o IIlumina MouseRef-8 Expression Beadchip (IIlumina, ln.c, San Diego, CA), conforme as instruções do fabricante.
[027] O controle de qualidade da hibridização, a extração dos dados de microarranjo e a análise inicial foram realizados utilizando o programa de IIlumina BeadStudio (!Ilumina, lnc., San Diego, CA). As amostras atípicas foram removidas mediante a análise de agrupamentos hierárquicos proporcionada pelo programa da IIlumina BeadStudio e também utilizando o programa TIGR Me V [1], por meio das medições de diferentes distâncias. Então, um mínimo de 3 replicações por condição (com as amostras atípicas removidas) foi considerado para a análise. Os valores da expressão gênica foram normalizados usando o método de sinais invariáveis e os genes, cujo Nível de Detecção foi maior do que 0,99 nas amostras teste ou controle, foram considerados como significantemente detectados. Para filtrar os dados para os genes que mudaram significativamente em termos estatísticos, o modelo de erro do IIlumina Custem foi usado e os genes foram considerados como significativamente alterados com a Pontuação Diferencial de mais de 13, o que era equivalente a o valor P de menos de 0,05. Então, os genes e seus dados correspondentes foram exportados para o programa Microsoft Excel para sua análise. Para calcular as alterações de divisibilidade, um valor arbitrário de 10 foi atribuído aos valores da expressão que eram menores do que 10. Então, as alterações de divisibilidade foram calculadas dividindo os valores médios do Sinal Y (tratamento) pelos valores médios do Sinal X (controle) se os genes foram regulados positivamente e vice-versa se os genes foram regulados negativamente. Então, o agrupamento hierárquico de duas vias (gene e amostra) dos genes significantes foi realizado usando o programa TIGR Me V [1] para garantir que as replicações de cada condição foram agrupadas uma com a outra. O método de ligação média e a medição euclidiana de distâncias foram usados para realizar a análise de agrupamento hierárquico.
[028] As alterações de vias biológicas e ontologias gênicas foram avaliadas mediante a análise funcional, usando os programas GenMAPP [2] e MAPPFinder [3]. O programa MAPPFinder classifica GenMAPP (vias) e ontologias gênicas à base da distribuição hipergeométrica. Os leitores podem consultar [3] para obter as explicações dos termos usados no programa MAPPFinder. Os GenMAPPs e ontologias gênicas que tiveram os valores permutados de P menores do que 0,05, os números de Genes Alterados acima de ou iguais a 2, e as Pontuações Z maiores do que de 2 foram considerados como significantes. Os quadrados coloridos pela cor amarela indicam os genes que foram regulados positivamente, enquanto os quadrados coloridos pela cor azul indicam os genes que foram regulados negativamente. Os quadros individuais que tem as variações diferentes de cores indicam a presença de representações múltiplas (transcrições de emenda) dentro de um único gene.
[029] Usando o valor P menor do que 0,05, nós descobrimos que 815 genes foram expressos diferencialmente nos tumores dos camundongos suplementados com os compostos fenólicos do óleo de palmeira, sendo que 391 foram regulados positivamente e 424 negativamente. A análise funcional desses genes revelou que os genes envolvidos no ciclo da célula (Figura 1) foram expressos diferencialmente. Tais genes como Ccnd2, Ccne2, Cdk4 e Cdk2 foram regulados positivamente, enquanto os Ccna2, Ccnb1, Plk1, Mad211, Cdc20, Hdac6 e Mcm6 foram regulados negativamente. Assim, a regulação desses genes sugere que os fenólicos do óleo de palmeira podem inibir o crescimento de tumores induzindo o impedimento da fase G1/S do ciclo da célula. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO E DAS FIGURAS Figura 1: Genes significativamente alterados na via do ciclo da célula do tumor
DOSAGEM E FORMULAÇÃO
[030] Além do uso direto do extrato, também é possível usar as frações diferentes dos compostos fenólicos do óleo de palmeira. O que constitui a quantidade eficaz do extrato ou de sua porção ativa dependerá da pureza do extrato. Por exemplo, se o extrato que contém os compostos fenólicos crus de cerca de 10% de pureza, for usado, normalmente, o extrato será usado em uma concentração mais alta. Em um nível mais alto de pureza, a percentagem menor será necessária para alcançar o mesmo efeito.
[031] De acordo com a presente invenção, os compostos fenólicos ou a Vitamina E podem ser formulados em composições farmacêuticas e/ou nutracêuticas para administração nos mamíferos. Além disso, eles podem ser supridos como compostos com portadores farmaceuticamente aceitáveis. Os compostos terapêuticos de composições farmacêuticas e/ou nutracêuticas podem ser administrados via oral ou podem ser introduzidos como suplemento alimentar. Neste contexto, de preferência, seleciona-se uma quantidade que produza o resultado mais eficaz sem interferir no sabor original do alimento.
[032] As formulações que são adequadas para administração oral incluem soluções líquidas do composto ativo dissolvido em um solvente adequado tal como solução salina, água; cápsulas ou comprimidos, sendo que cada um contém a quantidade pré-determinada do agente ativo em forma de grânulos sólidos ou gelatina; suspensões em um meio adequado e emulsões.
[033] As doses para administração oral dos compostos fenólicos em pacientes, normalmente, variam de 15 mg/dia até 1000mg/dia, e, tipicamente, 200 mg/dia. Em termos do peso corporal do paciente, as doses comuns para um ser humano com peso médio de 60kg, na média, são 3,4 mg/kg/dia.
[034] As doses para administração oral dos flavonóides em pacientes, normalmente, variam de 15 mg/dia até 1000mg/dia, e, tipicamente, 200 mg/dia. Em termos do peso corporal do paciente, as doses comuns para um ser humano com peso médio de 60kg, na média, são 3,4-6,7 mg/kg/dia.
[035] As doses para administração oral dos tocotrienóis em pacientes, normalmente, variam de 20 mg/dia até 1000mg/dia, e, tipicamente, 200-400 mg/dia. Em termos do peso corporal do paciente, as doses comuns para um ser humano com peso médio de 60kg, na média, são 3,4-6,7 mg/kg/dia.
[036] O composto da presente invenção pode ser preparado separadamente nas dosagens descritas acima, e também pode ser preparado como um produto de combinação.
[037] O termo "dosagens farmaceuticamente e/ou nutraceuticamente aceitáveis", conforme usado aqui acima inclui qualquer veículo adequado para a administração de medicações conhecidas na arte farmacêutica e/ou nutracêutica, inclusive, por via de exemplo, cápsulas, comprimidos, xaropes, elixires e soluções para injeção parenteral com as faixas especificadas de concentrações do fármaco.
[038] Conforme utilizado aqui, o termo "quantidade eficaz" inclui a quantidade da dose farmaceuticamente aceitável suficiente para destruir, modificar, controlar ou remover a célula ou tecido canceroso primário, regional ou metastático; atrasar ou minimizar a propagação do câncer. No entanto, estes exemplos não pretendem limitar ou restringir o escopo da invenção de maneira alguma e não devem ser considerados como os que estabelecem condições, parâmetros, reagentes ou materiais iniciais que devem ser exclusivamente utilizados para praticar a presente invenção.

Claims (5)

1. Composição compreendendo fenólicos, caracterizada por incluir ácidos fenólicos, flavonoides e vitamina E, obtidos de efluentes de moinhos de óleo de palma para uso no tratamento de câncer, a fim de prevenir ou inibir a proliferação de células cancerígenas, em que o câncer é câncer de cólon ou de próstata e em que os componentes estão presentes em quantidades terapêuticas efetivas variáveis de 15 mg/dia a 1000 mg/dia de fenólicos, de 15 mg/dia a 1000 mg/dia de flavonóides e de 20 mg/ dia a 1000 mg /dia de vitamina E.
2. Composição para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o referido tratamento de câncer compreende ainda quimioterapia convencional ou radioterapia ou cirurgia.
3. Composição para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o referido tratamento compreende a administração da composição por via oral ou como um complemento alimentar.
4. Composição para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o câncer é o câncer de próstata.
5. Composição para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o câncer é um câncer de cólon.
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