BRPI0515717B1 - APPARATUS TO BE USED WITH A CENTRIFUGE - Google Patents
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Abstract
instrumentação para sequestrar líquidos com base em densidade: método e aparelho. compreendendo um aparelho e um método para coletar sangue integral e depois separá-lo em componentes, para uso ou armazenagem subsequente. um conjunto de bolsas independente é utilizado para coletar a amostra, a qual pode ser depois colocada em um dispositivo, adaptado para encaixar em uma centrífuga para a separação dos componentes. cada componente é então extraído sequencialmente de acordo com a densidade, com um sensor presente no dispositivo para controlar a operação de válvulas, que dirigem a coleta de cada componente. o sensor pode ser para a leitura de uma ou mais das seguintes características: radiação infravermelha, óptica, densidade, peso, radioatividade, fluorescência, cor, magnetismo, ultra-som e capacitância, em que a característica é inerente no sangue e no componente de sangue, ou é um aditivo. cada componente pode ser então separado para o seu próprio recipiente de armazenagem. os sensores preferidos incluem os sensores ópticos e de peso. além da separação por densidade do sangue, o dispositivo pode conter uma solução, incluindo células, proteínas, partículas subcelulares ou vírus, que podem ser misturados com meios de afinidade ou anticorpos, antes da separação.instrumentation for sequestering liquids based on density: method and apparatus. comprising an apparatus and a method for collecting whole blood and then separating it into components for subsequent use or storage. a set of independent bags is used to collect the sample, which can then be placed in a device, adapted to fit into a centrifuge for component separation. each component is then sequentially extracted according to density, with a sensor present in the device to control the operation of valves, which direct the collection of each component. the sensor can be for reading one or more of the following characteristics: infrared radiation, optics, density, weight, radioactivity, fluorescence, color, magnetism, ultrasound and capacitance, where the characteristic is inherent in the blood and in the blood, or is it an additive. each component can then be separated into its own storage container. preferred sensors include optical and weight sensors. in addition to blood density separation, the device may contain a solution, including cells, proteins, subcellular particles, or viruses, which may be mixed with affinity media or antibodies, prior to separation.
Description
[001] A invenção apresentada a seguir refere-se, de uma maneira geral, a instrumentações e metodologias em separação de componentes de sangue. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a um método e a um aparelho para coletar uma amostra de sangue e, subsequentemente, para separar a amostra coletada em componentes do sangue constituintes para armazenagem ou uso individual.[001] The invention presented below refers, in general, to instrumentation and methodologies in separation of blood components. More specifically, the present invention relates to a method and apparatus for collecting a blood sample and subsequently for separating the collected sample into constituent blood components for individual storage or use.
[002] A coleta de sangue é sempre importante, particularmente em ocasiões de emergência (uso imediato), mas o sangue integral pode ser apenas armazenado por cerca de trinta dias, antes que fique "obsoleto". Para a armazenagem de longo prazo, a capacidade em separar o sangue integral nos seus componentes principais (células sanguíneas brancas, plaquetas, células sanguíneas vermelhas e plasma) é de uma importância suprema, porque a condição de armazenagem de longo prazo para cada componente é diferente, em termos de temperatura e meios de armazenagem. As separações dos componentes mais importantes, que ocorre após a coleta, é a separação das células sanguíneas vermelhas (RBC), células sanguíneas brancas (WBC), plaquetas e plasma entre eles. Dentro das WBC, é algumas vezes importante separar os granulócitos dos linfócitos e monócitos. Após a separação e a extração dos componentes particulares, uma fração do sangue pode ser retornada para o paciente.[002] Blood collection is always important, particularly in emergencies (immediate use), but whole blood can only be stored for about thirty days before it becomes "stale". For long-term storage, the ability to separate whole blood into its major components (white blood cells, platelets, red blood cells and plasma) is of paramount importance, because the long-term storage condition for each component is different. , in terms of temperature and storage media. The most important component separations, which occurs after collection, is the separation of red blood cells (RBC), white blood cells (WBC), platelets and plasma among them. Within WBC, it is sometimes important to separate granulocytes from lymphocytes and monocytes. After separation and extraction of the particular components, a fraction of the blood can be returned to the patient.
[003] É possível separar os vários componentes de sangue integral, durante ou após a centrifugação, devido às suas diferentes densidades. Alguns métodos da técnica anterior, tal como aquele descrito na patente U.S. n°. 4.120.448, utilizam uma câmara ligada a uma centrifuga. O sangue centrifugado é separado na câmara, e uma pluralidade de meios de coleta é posicionada em vários locais na câmara, correspondentes às áreas nas quais cada componente se reúne, o que é dependente da densidade.[003] It is possible to separate the various components of whole blood, during or after centrifugation, due to their different densities. Some prior art methods, such as that described in U.S. patent no. 4,120,448 use a chamber connected to a centrifuge. Centrifuged blood is separated in the chamber, and a plurality of collection means are positioned at various locations in the chamber corresponding to the areas in which each component gathers, which is density dependent.
[004] A presente técnica (técnica anterior) para sequestrar células sanguíneas brancas de sangue integral requer técnicos habilitados, é demorada, pelo fato de que requer dezesseis etapas executadas por um período de uma hora, e produz resultados inconsistentes, por causa dos requisitos impostos ao técnico no exercício da técnica. Mais significativamente, no entanto, a presente técnica de dezesseis etapas é "aberta", isto é, o produto de sangue é processado de uma maneira que não mantém a esterilidade do produto, por causa da necessidade de obtenção de amostras, ou de adicionar agentes de sedimentação ou crioprotetores, nos vários estágios de produção, que não pode ser feito sem permitir o acesso do meio ambiente externo à parte interna, o que significa a contaminação potencial do produto:[004] The present technique (prior technique) for sequestering white blood cells from whole blood requires skilled technicians, is time-consuming, in that it requires sixteen steps performed for a period of one hour, and produces inconsistent results, because of the imposed requirements to the technician in the exercise of technique. More significantly, however, the present sixteen-step technique is "open", that is, the blood product is processed in a way that does not maintain the sterility of the product, because of the need to obtain samples, or to add agents of sedimentation or cryoprotectants, in the various stages of production, which cannot be done without allowing access from the external environment to the internal part, which means the potential contamination of the product:
[005] As dezesseis etapas são: 1. coleta do sangue placentário na bolsa de coleta (faixa de 60 - 200 ml); 2. adição de HES aa bolsa de coleta (20% em v/v); 3. Colocação da bolsa de coleta em suportes especiais de copos de centrífugas; 4. centrifugação a 50 g por 13 minutos, para promover a separação das WBC das RBC (até seis unidades de cada vez); 5. perfuração ou corte estéril da bolsa de coleta, para o dispositivo de extração e o conjunto de bolsas de processamento para a balança; 6. transferência cuidadosa da bolsa para o dispositivo de extração e o conjunto de bolsas de processamento para a balança; 7. extração do plasma rico em WBC e 10 - 15 ml da camada de topo das RBC na bolsa de processamento, deixando o excesso das RBC; 8. remoção da bolsa de coleta com excesso de RBC; 9. colocação do conjunto de bolsas em suportes especiais de copos de centrífuga; 10. centrifugação do conjunto de bolsas de processamento a 400 g por 10 minutos (até seis unidades de cada vez); 11. transferência cuidadosa da bolsa de processamento para o dispositivo de extração; 12. extração do excesso de plasma, deixando 20 ml de concentrado de WBC; 13. remoção do excesso da bolsa de plasma do conjunto de processamento; 14. adição de 5 ml de crioprotetor às WBC na bolsa de processamento a 4°C; 15. transferência de WBC crioprotegidos para a bolsa de congelamento; e 16. vedação do tubo e separação da bolsa de congelamento da bolsa de processamento.[005] The sixteen steps are: 1. collection of placental blood in the collection bag (range 60 - 200 ml); 2. addition of HES to the collection bag (20% in v/v); 3. Placement of the collection bag in special centrifuge cup holders; 4. centrifugation at 50 g for 13 minutes to separate the WBC from the RBC (up to six units at a time); 5. sterile drilling or cutting of the collection bag for the extraction device and the processing bag set for the scale; 6. Carefully transfer the bag to the extraction device and the processing bag assembly to the balance; 7. Extraction of the WBC rich plasma and 10 - 15 ml of the top layer of the RBC in the processing bag, leaving the excess of the RBC; 8. removal of the collection bag with excess RBC; 9. placing the bag set on special centrifuge cup holders; 10. centrifuge the processing bag set at 400 g for 10 minutes (up to six units at a time); 11. careful transfer from the processing bag to the extraction device; 12. extraction of excess plasma, leaving 20 ml of WBC concentrate; 13. removing excess plasma bag from processing assembly; 14. adding 5 ml of cryoprotectant to WBC in the 4°C processing bag; 15. transfer of cryoprotected WBC to the freezing bag; and 16. sealing the tube and separating the freezing bag from the processing bag.
[006] A técnica anterior apresentada a seguir reflete o estado da técnica, do qual o requerente está ciente e que está incluído conjuntamente com a mesma, para apresentar o trabalho feito pelo requerente para descrever a técnica anterior correspondente. Considera-se, no entanto, que nenhuma dessas técnicas descreve por ela mesma de uma maneira singular, nem fica óbvio, quando considerada em qualquer combinação concebível, o sentido da presente invenção, tal como descrita em detalhes a seguir e tal como particularmente reivindicada. [006] The prior art presented below reflects the state of the art, of which the applicant is aware and which is included together with the same, to present the work done by the applicant to describe the corresponding prior art. It is considered, however, that none of these techniques by itself uniquely describes, nor is it obvious, when considered in any conceivable combination, the meaning of the present invention, as described in detail below and as particularly claimed.
[007] As referências da técnica anterior listadas acima, mas não descritas especificamente, descrevem outros dispositivos para o processamento de sangue e, além disso, catalogam a técnica anterior, da qual o requerente está ciente. Essas referências divergem ainda mais acentuadamente da referência distinguida especificamente acima.[007] The prior art references listed above, but not specifically described, describe other devices for processing blood and, in addition, catalog the prior art of which the applicant is aware. These references diverge even more sharply from the reference specifically distinguished above.
[008] A presente invenção compreende um conjunto de bolsas, que pode ser utilizado para coletar uma amostra de sangue integral de uma fonte. De forma especialmente significativa, o conjunto de bolsas define um sistema fechado, pelo fato de que uma vez que o sangue é introduzido, o processamento pode ocorrer fora de um ambiente limpo ou longe de urna capota estéril, uma vez que o acesso a quaisquer patógenos no meio físico externo é impedido. O conjunto de bolsas é em seguida colocado em uma centrifuga para a separação dos componentes. A bolsa de processamento de sangue integral, a qual pode conter um anticoagulante, tal como CPD, ACD ou CPD-A, contém pelo menos um orifício de entrada e um orifício de saída, conectados a uma pluralidade de bolsas de componentes. A bolsa de processamento pode conter, opcionalmente, um auxiliar de sedimentação, tal como HES, mas, diferentemente da técnica anterior, esse auxiliar de sedimentação não é necessário. Cada bolsa de componente tem uma linha separada, oriunda da bolsa de processamento de sangue integral, e cada linha pode ser grampeada, vedada com tubo e separada da bolsa de processamento de sangue integral, uma vez que uma bolsa de componente particular tenha sido preenchida.[008] The present invention comprises a set of bags, which can be used to collect a whole blood sample from a source. Especially significantly, the bag set defines a closed system, in that once blood is introduced, processing can take place outside a clean environment or away from a sterile hood, since access to any pathogens in the external physical environment it is impeded. The set of bags is then placed in a centrifuge to separate the components. The whole blood processing bag, which may contain an anticoagulant, such as CPD, ACD or CPD-A, contains at least one inlet port and one outlet port, connected to a plurality of component bags. The processing bag can optionally contain a settling aid such as HES, but unlike the prior art, such a settling aid is not required. Each component pouch has a separate line from the whole blood processing pouch, and each line can be stapled, tube-sealed and separated from the whole blood processing pouch once a particular component pouch has been filled.
[009] Na prática, o sangue é coletado e dirigido a um orifício de entrada, na bolsa de processamento de sangue integral, e a linha de entrada é grampeada, vedada e separada da bolsa de processamento de sangue integral. A bolsa de processamento de sangue integral, que tem um formato assimétrico, é pendurada em um retentor de conjunto de bolsas, que tem uma abertura de formato complementar, que entra em contato íntimo na extremidade do fundo, e urna parte externa do retentor de conjunto de bolsas é adaptada para se ajustar a um copo ou soquete de centrífuga convencional. A centrifuga é operada a forças G variáveis, para separar, de maneira ideal, os componentes. Uma vez que os componentes são separados por densidade na bolsa de processamento de sangue integral, um servomotor é acoplado para abrir uma válvula de aferição, em linha levando da bolsa de processamento para uma bolsa, que vai conter o componente mais denso. Isso permite que o componente mais denso preencha a sua bolsa de armazenagem particular, normalmente em centrifugação.[009] In practice, blood is collected and directed to an inlet port in the whole blood processing bag, and the inlet line is stapled, sealed and separated from the whole blood processing bag. The whole blood processing bag, which is asymmetrically shaped, hangs from a bag set retainer, which has a complementary shaped opening that makes intimate contact at the bottom end, and an outside of the set retainer of bags is adapted to fit a conventional centrifuge cup or socket. The centrifuge is operated at varying G forces to optimally separate the components. Once the components are density separated in the whole blood processing bag, a servo motor is coupled to open a gauging valve, in-line leading from the processing bag to a bag, which will contain the denser component. This allows the denser component to fill your particular storage bag, usually in a centrifugation.
[0010] O processo do requerente pode ser resumido nas sete ou oito etapas apresentadas a seguir, as quais são executadas em um período de 25 minutos, resultando em rendimentos repetíveis superiores a 90% dos linfócitos e monócitos.[0010] The applicant's process can be summarized in the seven or eight steps presented below, which are performed in a period of 25 minutes, resulting in repeatable yields greater than 90% of lymphocytes and monocytes.
[0011] 1. Coleta do sangue placentário em urna bolsa de coleta (faixa de 60 - 200 ml).[0011] 1. Collection of placental blood in a collection bag (range 60 - 200 ml).
[0012] 2. Perfuração ou corte forma estéril da bolsa de coleta para o conjunto de bolsas de processamento, e transferência do sangue para a bolsa de processamento.[0012] 2. Puncture or cut sterile form from the collection bag to the set of processing bags, and transfer the blood to the processing bag.
[0013] 3. Adição de HES à bolsa de processamento (20% em v/v) (opcional).[0013] 3. Addition of HES to the processing bag (20% in v/v) (optional).
[0014] 4. Colocação do conjunto de bolsas de processamento em um dispositivo de extração automático.[0014] 4. Placing the set of processing bags in an automatic extraction device.
[0015] 5. Centrifugação, a um fluxo ininterrupto, a duas diferentes velocidades: 1.400 g por 20 minutos, para segregar WBC na interface RBC / plasma e 85 g por 5 minutos, para extrair as RBC na bolsa de RBC e WBC na bolsa de congelamento.[0015] 5. Centrifugation, at an uninterrupted flow, at two different speeds: 1,400 g for 20 minutes, to segregate WBC at the RBC / plasma interface and 85 g for 5 minutes, to extract the RBC in the bag from RBC and WBC in the bag of freezing.
[0016] 6. Vedação do tubo e separação do excesso de bolsas de RBC e plasma do conjunto de processamento.[0016] 6. Tube sealing and separation of excess RBC and plasma bags from the processing set.
[0017] 7. Adição de 5 ml de crioprotetor às WBC na bolsa de congelamento a 4°C.[0017] 7. Addition of 5 ml of cryoprotectant to the WBC in the freezing bag at 4°C.
[0018] 8. Vedação do tubo e separação da bolsa de congelamento da linha de crioprotetor.[0018] 8. Sealing the tube and separating the freezing bag from the cryoprotectant line.
[0019] A coleta completa do primeiro componente é indicada preferivelmente por um sensor óptico, que está presente no dispositivo retentor do conjunto de bolsas. O servomotor, dirigido pelo sensor, fecha automaticamente a válvula de aferição na linha, terminando a coleta desse componente particular. O servomotor em seguida acopla a válvula de aferição, para propiciar a coleta do componente seguinte, por uma segunda linha de saída, conectando a válvula de aferição e a segunda bolsa de armazenagem. O processo pode continuar, sequencialmente, até que todos os componentes desejados sejam coletados em bolsas de armazenagem separados: células sanguíneas vermelhas, células sangüíneas brancas (linfócitos e granulócitos), plaquetas e plasma. Se for assim desejado, os componentes múltiplos, tais como as células sanguíneas brancas e as plaquetas, podem ser dirigidos para a mesma bolsa de armazenagem. O sensor pode ser diferente de um sensor óptico. Por exemplo, o sensor pode monitorar as variações nas características elétricas inerentes nas diferentes densidades, tal como a capacitância, considerando o fluido como um dielétrico. Marcadores disponíveis comercialmente (por exemplo, anticorpos monoclonais, partículas polarizadas, densidade magnética, ou marcadores de fluorescência, etc.) podem ser introduzidos no sangue e monitorados.[0019] The complete collection of the first component is indicated preferably by an optical sensor, which is present in the retaining device of the set of bags. The servo motor, driven by the sensor, automatically closes the in-line gauging valve, ending pickup of that particular component. The servomotor then couples the gauging valve, to provide collection of the next component, through a second output line, connecting the gauging valve and the second storage bag. The process can continue sequentially until all the desired components are collected in separate storage bags: red blood cells, white blood cells (lymphocytes and granulocytes), platelets and plasma. If so desired, multiple components, such as white blood cells and platelets, can be directed into the same storage bag. The sensor may be different from an optical sensor. For example, the sensor can monitor variations in electrical characteristics inherent in different densities, such as capacitance, considering the fluid as a dielectric. Commercially available markers (eg, monoclonal antibodies, polarized particles, magnetic density, or fluorescence markers, etc.) can be introduced into the blood and monitored.
[0020] As bolsas, que recebem os componentes fluidos, também podem ser suportadas para pesagem durante a centrifugação e quando em repouso. Ocorre uma separação precisa.[0020] The bags, which receive the fluid components, can also be supported for weighing during centrifugation and when at rest. A precise separation takes place.
[0021] Uma vez feita a coleta, cada bolsa de armazenagem pode ser vedada e separada da bolsa de processamento de sangue integral. Quando necessário, conservantes ou aditivos podem ser introduzidos pelas linhas de coleta, antes de processamento ou armazenagem.[0021] Once collection is made, each storage bag can be sealed and separated from the whole blood processing bag. When necessary, preservatives or additives can be introduced through the collection lines, prior to processing or storage.
[0022] Consequentemente, um objetivo preponderante da presente invenção consiste na apresentação de um dispositivo e um método para a separação dos componentes de sangue integral, para uso ou armazenagem subsequente.[0022] Consequently, a preponderant objective of the present invention is the presentation of a device and a method for the separation of whole blood components, for use or subsequent storage.
[0023] Um outro objetivo da presente invenção consiste na apresentação de um dispositivo e um método, conforme caracterizados acima, nos quais a separação pode ser feita inteiramente por máquina, durante uma única corrida de centrifugação ininterrupta, sem um manuseio considerável entre as múltiplas corridas de centrifugação, praticadas tipicamente em um banco de sangue com meios convencionais para a separação de componentes sanguíneos.[0023] Another objective of the present invention is to present a device and a method, as characterized above, in which the separation can be done entirely by machine, during a single uninterrupted centrifugation run, without considerable handling between multiple runs centrifugation techniques, typically practiced in a blood bank with conventional means for separating blood components.
[0024] Um outro objetivo consiste em sequestrar precisamente as células sanguíneas vermelhas, plaquetas e células sanguíneas brancas, as quais são separadas ainda dentro das populações de células sanguíneas brancas.[0024] Another objective is to precisely sequester red blood cells, platelets and white blood cells, which are further separated within white blood cell populations.
[0025] Um outro objetivo da presente invenção consiste na apresentação de um dispositivo e um método, conforme caracterizados acima, nos quais o aparelho de separação é independente, para simplificar a operação.[0025] Another objective of the present invention is to present a device and a method, as characterized above, in which the separation apparatus is independent, to simplify the operation.
[0026] Visto de um primeiro ponto vantajoso, um objetivo da presente invenção consiste na apresentação de um dispositivo para sequestrar componentes de sangue integral, o qual compreende, em combinação: um conjunto de bolsas, em que o dito conjunto de bolsas incluindo uma primeira bolsa e várias outras bolsas; um retentor de conjunto de bolsas, no qual a primeira bolsa fica contida dentro de uma parte interna do retentor de conjunto de bolsas, e as várias outras bolsas são posicionadas a uma altura inferior àquela da dita primeira bolsa; e uma centrifuga que tem pelo menos dois soquetes receptores diametralmente opostos, com pelo menos um soquete dimensionado para receber o retentor de conjunto de bolsas.[0026] Seen from a first vantage point, an object of the present invention is to present a device for sequestering whole blood components, which comprises, in combination: a set of bags, wherein said set of bags including a first purse and various other purses; a pouch assembly retainer, in which the first pouch is contained within an inner portion of the pouch assembly retainer, and the various other pouches are positioned at a height less than that of said first pouch; and a centrifuge having at least two diametrically opposed receiving sockets, with at least one socket sized to receive the pouch assembly retainer.
[0027] Visto de um segundo ponto vantajoso, um objetivo da presente invenção consiste na apresentação de um aparelho para ser utilizado com uma centrifuga convencional e um conjunto de bolsas de processamento de sangue, que compreende, em combinação: uma primeira bolsa que tem uma parte de topo não fechada, em que a primeira bolsa é dimensionada para receber uma bolsa de processamento de sangue, um meio para suportar a bolsa de processamento de sangue na primeira bolsa, com o meio de suporte localizado adjacente à parte de topo não fechada da primeira bolsa; uma parte de fundo móvel abaixo da primeira bolsa, em que a parte de fundo móvel tem urna posição aberta e uma posição fechada; uma parte articulada localizada ao longo de um eixo da primeira bolsa, em que a parte articulada se abre para permitir acesso à primeira bolsa quando a parte de fundo móvel está na posição aberta; e uma segunda bolsa, na qual o acesso à segunda bolsa é apenas possível quando a parte de fundo móvel está na posição aberta.[0027] Seen from a second vantage point, an objective of the present invention is to present an apparatus to be used with a conventional centrifuge and a set of blood processing bags, comprising, in combination: a first bag having a unclosed top portion, wherein the first pouch is sized to receive a blood processing bag, means for supporting the blood processing bag in the first pouch, with the support means located adjacent to the unclosed top portion of the first scholarship; a movable bottom part below the first pocket, wherein the movable bottom part has an open position and a closed position; a hinged part located along an axis of the first pouch, the hinged part opening to allow access to the first pouch when the movable bottom part is in the open position; and a second pocket, in which access to the second pocket is only possible when the movable bottom part is in the open position.
[0028] Visto de um terceiro ponto vantajoso, um objetivo da presente invenção consiste na apresentação de um método para separar os componentes de sangue integral, no qual as etapas incluem: a preparação de um conjunto de bolsas de processamento de sangue, que tem uma bolsa de processamento, pelo menos urna bolsa auxiliar, um local de amostragem adjacente à bolsa de processamento, e um local de amostragem adjacente a cada bolsa auxiliar; a introdução de sangue integral na bolsa de processamento; a amostragem do sangue integral para análise posterior; a centrifugação do sangue integral, em que os componentes são separados na bolsa de processamento; o direcionamento de cada componente para pelo menos uma bolsa auxiliar do conjunto de bolsas de processamento de sangue; a remoção de uma amostra de cada componente para análise posterior; e a armazenagem de cada componente para uso posterior.[0028] Seen from a third vantage point, an object of the present invention is to present a method for separating whole blood components, in which the steps include: the preparation of a set of blood processing bags, which has a processing bag, at least one auxiliary bag, a sampling location adjacent to the processing bag, and a sampling location adjacent to each auxiliary bag; the introduction of whole blood into the processing bag; sampling whole blood for further analysis; the centrifugation of whole blood, in which the components are separated in the processing bag; directing each component to at least one auxiliary bag of the set of blood processing bags; removing a sample of each component for further analysis; and storing each component for later use.
[0029] Visto de um quarto ponto vantajoso, um objetivo da presente invenção consiste na apresentação de um conjunto de bolsas, que compreende, em combinação: uma primeira bolsa que tem uma entrada e uma saída; várias bolsas auxiliares, sendo que cada bolsa auxiliar tem pelo menos um orifício para admitir ou expelir o conteúdo das bolsas auxiliares; meios de condutos para cada bolsa auxiliar; meios de válvulas nos meios de condutos, em que os meios de válvulas são ajustáveis para permitir o acesso seletivo entre a primeira bolsa e as várias bolsas auxiliares.[0029] Seen from a fourth vantage point, an object of the present invention is to present a set of bags, comprising, in combination: a first bag that has an entrance and an exit; several auxiliary bags, each auxiliary bag having at least one hole for admitting or expelling the contents of the auxiliary bags; conduit means for each auxiliary bag; valve means in the conduit means, wherein the valve means is adjustable to allow selective access between the first bag and the plurality of auxiliary bags.
[0030] Esses e outros objetivos vão ficar visíveis, quando for levado em consideração do relatório descritivo detalhado apresentado a seguir, considerado em conjunto com as figuras dos desenhos em anexo.[0030] These and other objectives will become visible, when taking into account the detailed descriptive report presented below, considered in conjunction with the figures of the attached drawings.
[0031] A Figura 1 mostra o retentor de conjunto de bolsas da presente invenção na posição aberta.[0031] Figure 1 shows the pouch assembly retainer of the present invention in the open position.
[0032] A Figura 2 mostra o retentor de conjunto de bolsas da presente invenção na posição fechada.[0032] Figure 2 shows the pouch assembly retainer of the present invention in the closed position.
[0033] A Figura 3 mostra o conjunto de bolsas da presente invenção.[0033] Figure 3 shows the set of bags of the present invention.
[0034] A Figura 4 mostra o conjunto de bolsas na posição do retentor de conjunto de bolsas na posição aberta.[0034] Figure 4 shows the set of pockets in the position of the pocket set retainer in the open position.
[0035] A Figura 5 mostra o conjunto de bolsas na posição do retentor de conjunto de bolsas na posição fechada.[0035] Figure 5 shows the pouch assembly in the position of the pouch assembly retainer in the closed position.
[0036] A Figura 6 mostra o posicionamento de dois retentores de bolsas em uma centrifuga convencional.[0036] Figure 6 shows the positioning of two bag retainers in a conventional centrifuge.
[0037] A Figura 7 mostra o conjunto de bolsas no retentor de conjunto de bolsas, antes da separação dos componentes.[0037] Figure 7 shows the set of bags in the bag set retainer, before the separation of the components.
[0038] As Figuras 8A, 8B, 8C mostram os estágios de coleta de componentes da bolsa de processamento.[0038] Figures 8A, 8B, 8C show the stages of collection of components from the processing bag.
[0039] A Figura 9 mostra o conjunto de bolsas no retentor de conjunto de bolsas, após a separação dos componentes.[0039] Figure 9 shows the set of bags in the bag set retainer, after separation of the components.
[0040] A Figura 10 mostra o conjunto de bolsas, após a coleta de uma amostra de sangue, antes de os componentes serem separados.[0040] Figure 10 shows the set of bags, after collecting a blood sample, before the components are separated.
[0041] A Figura 10a representa o mesmo estágio da Figura 10, mas sem a bolsa com depósito de coágulo intermediário.[0041] Figure 10a represents the same stage as Figure 10, but without the pouch with intermediate clot deposit.
[0042] A Figura 11 mostra o conjunto de bolsas, após o componente de células sanguíneas vermelhas ter sido separado.[0042] Figure 11 shows the set of pouches, after the red blood cell component has been separated.
[0043] A Figura 11a representa o mesmo estado da Figura 10, mas sem a bolsa com depósito de coágulo intermediário.[0043] Figure 11a represents the same state as Figure 10, but without the pouch with intermediate clot deposit.
[0044] A Figura 12 é um fluxograma do processo preferido.[0044] Figure 12 is a flowchart of the preferred process.
[0045] A Figura 13 ilustra a separação de componentes de sangue integral em forma gráfica.[0045] Figure 13 illustrates the separation of whole blood components in graphical form.
[0046] As Figuras 14A, 14B, 14C mostram as posições operacionais da válvula de aferição.[0046] Figures 14A, 14B, 14C show the operating positions of the gauge valve.
[0047] A Figura 15 mostra uma realização alternativa do conjunto de bolsas.[0047] Figure 15 shows an alternative embodiment of the set of pouches.
[0048] A Figura 16 mostra a fixação de uma bolsa de coleta no conjunto de bolsas.[0048] Figure 16 shows the attachment of a collection bag in the set of bags.
[0049] A Figura 17 mostra a operação de drenagem do conteúdo da bolsa de coleta para a bolsa de processamento do conjunto de bolsas.[0049] Figure 17 shows the operation of draining the contents of the collection bag to the bag set processing bag.
[0050] A Figura 18 mostra a desconexão da bolsa de conexão e do filtro de coágulos do conjunto de bolsas.[0050] Figure 18 shows the disconnection of the connection bag and the clot filter from the bag set.
[0051] A Figura 19 representa o processo de enchimento da almofada de amostragem com sangue da bolsa de processamento.[0051] Figure 19 represents the process of filling the sampling pad with blood from the processing bag.
[0052] A Figura 20 mostra a desconexão da almofada de amostragem e do seu orifício de amostragem associado do conjunto de bolsas.[0052] Figure 20 shows the disconnection of the sampling pad and its associated sampling hole from the set of bags.
[0053] A Figura 21 representa a adição de um agente de sedimentação opcional à bolsa de processamento.[0053] Figure 21 represents the addition of an optional sedimentation agent to the processing bag.
[0054] A Figura 22 ilustra a inserção do conjunto de bolsas no retentor de conjunto de bolsas.[0054] Figure 22 illustrates the insertion of the pouch set into the pouch set retainer.
[0055] A Figura 23 é uma representação da transferência de componentes de sangue, que ocorre na centrífuga, enquanto o conjunto de bolsas está no retentor de conjunto de bolsas.[0055] Figure 23 is a representation of the transfer of blood components, which occurs in the centrifuge, while the bag set is in the bag set retainer.
[0056] A Figura 24 mostra a desconexão da bolsa de células sanguíneas vermelhas do conjunto de bolsas.[0056] Figure 24 shows the disconnection of the red blood cell pouch from the set of pouches.
[0057] A Figura 25 ilustra a maneira na qual o conteúdo da bolsa de congelamento é misturado.[0057] Figure 25 illustrates the manner in which the contents of the freezing bag are mixed.
[0058] A Figura 26 representa o processo de enchimento do rabicho de amostragem, com o conteúdo da bolsa de congelamento.[0058] Figure 26 represents the filling process of the sampling pigtail, with the contents of the freezing bag.
[0059] A Figura 27 mostra a desconexão do rabicho de amostragem, e do seu orifício de amostragem associado, do conjunto de bolsas.[0059] Figure 27 shows the disconnection of the sampling tail, and its associated sampling hole, from the set of bags.
[0060] A Figura 28 ilustra a adição de DMSO na bolsa de congelamento e a sua mistura subsequente.[0060] Figure 28 illustrates the addition of DMSO to the freezing bag and its subsequent mixing.
[0061] A Figura 29 ilustra a maneira na qual o DMSO residual e o ar são retirados do sistema.[0061] Figure 29 illustrates the way in which residual DMSO and air are removed from the system.
[0062] A Figura 30 mostra a desconexão da bolsa de congelamento do conjunto de bolsas.[0062] Figure 30 shows the disconnection of the freezing bag from the set of bags.
[0063] A Figura 31 ilustra a maneira na qual as amostras da parte bolsa de congelamento são criadas para preservação.[0063] Figure 31 illustrates the way in which samples from the freezing bag part are created for preservation.
[0064] A Figura 32 mostra a extração do material da bolsa de processamento e da pequena quantidade de material da bolsa de congelamento, deixado na tubulação da Figura 31, para análise subsequente.[0064] Figure 32 shows the extraction of material from the processing bag and the small amount of material from the freezing bag, left in the tubing of Figure 31, for subsequent analysis.
[0065] A Figura 33 mostra a desconexão da linha de entrada de DMSO e das suas junções associadas da bolsa de processamento.[0065] Figure 33 shows the disconnection of the DMSO input line and its associated junctions from the processing exchange.
[0066] A Figura 34 ilustra a maneira na qual as amostras são tiradas da bolsa de processamento, para análise subsequente.[0066] Figure 34 illustrates the manner in which samples are taken from the processing bag for subsequent analysis.
[0067] A Figura 35 é uma representação esquemática das conexões do servomotor e do sistema de válvulas.[0067] Figure 35 is a schematic representation of the connections of the servomotor and valve system.
[0068] A Figura 36 mostra o gráfico, como uma função do tempo durante a centrifugação, dos níveis de massa e de líquido monitorados pelos sensores. Também é mostrada a série de rotações da válvula para abrir / fechar, provocando aumentos de peso incrementais da solução de WBC colhida, resultando em uma bolsa de congelamento de WBC cheia.[0068] Figure 36 shows the graph, as a function of time during centrifugation, of the mass and liquid levels monitored by the sensors. Also shown is the series of rotations of the valve to open / close, causing incremental weight increases of the harvested WBC solution, resulting in a full WBC freezing bag.
[0069] A Figura 37 é uma outra iteração de um conjunto de bolsas, mostrando esquematicamente a pesagem de células sanguíneas brancas (células sanguíneas brancas) durante a centrifugação.[0069] Figure 37 is another iteration of a set of bags, schematically showing the weighing of white blood cells (white blood cells) during centrifugation.
[0070] A Figura 38 reflete um dispositivo de processamento alternativo 50.[0070] Figure 38 reflects an
[0071] A Figura 39 é outra vista da Figura 38.[0071] Figure 39 is another view of Figure 38.
[0072] Considerando os desenhos, nos quais as mesmas referências numéricas denotam as mesmas partes, ao longo das várias figuras dos desenhos, a referência numérica 10, conforme mostrado na Figura 3, refere-se ao conjunto de bolsas de acordo com a presente invenção.[0072] Considering the drawings, in which the same numerical references denote the same parts, throughout the various figures of the drawings, the
[0073] Na sua essência, o conjunto de bolsas 10 inclui uma bolsa de processamento de sangue integral 2, uma bolsa de células sanguíneas vermelhas (RBC) 4 que tem um prendedor 16, e uma bolsa de congelamento 6 para a coleta e armazenagem de células sanguíneas brancas. A bolsa de congelamento 2 é suprida por uma linha de entrada 12, ou por uma agulha de flebotomia 8 (Figura 10) ou por ser furada, ou cortada estéril, a outra bolsa contendo o sangue com anticoagulante. A bolsa de processamento 2 tem uma forma assimétrica, incluindo uma borda de topo 11a, uma borda lateral curta 11b, uma borda lateral longa 11c e uma borda de fundo inclinada 11d, entre as bordas laterais, de modo que a parte de fundo é afunilada para um ponto assimétrico 14, que leva a uma saída 26.[0073] In essence, the bag set 10 includes a whole
[0074] A bolsa de processamento assimétrico propicia a concentração de uma fração celular mononuclear de urna população de células brancas, em um período de tempo que exclui 30 - 50% das células brancas de granulócitos. Os granulócitos não desempenham nenhum papel na reconstituição hematopoiética e, desse modo, a sua eliminação resulta em uma seleção mais purificada de células brancas para transplante.[0074] The asymmetric processing bag provides the concentration of a mononuclear cell fraction of a population of white cells, in a period of time that excludes 30 - 50% of the white cells of granulocytes. Granulocytes play no role in hematopoietic reconstitution and thus their elimination results in a more purified selection of white cells for transplantation.
[0075] Além disso, o conjunto de bolsas assimétricas permite que essa purificação ocorra sem a necessidade de um agente de sedimentação - que é demasiado viscoso para esterilizar por meio de um filtro - permitindo, desse modo, que o MNC seja concentrado em um conjunto de bolsas estéreis "fechados, pois o DMSO pode ser esterilizado mediante a passagem por um filtro de 0,2 μ, na entrada crioprotetora para o conjunto de bolsas.[0075] In addition, the set of asymmetric bags allows this purification to occur without the need for a sedimentation agent - which is too viscous to sterilize through a filter - thereby allowing the MNC to be concentrated in a set of closed sterile bags, as the DMSO can be sterilized by passing through a 0.2 μ filter, at the cryoprotective inlet for the set of bags.
[0076] A saída 26 dirige a descarga da bolsa de processamento 2 para urna válvula de aferição de três vias 20. As posições operacionais da válvula de aferição 20 são mostradas nas Figuras 14A - 14C. Duas linhas de suprimento 24a, 24b seguem da válvula de aferição 20 para a bolsa de RBC 4 e a bolsa de congelamento 6, respectivamente. As linhas de suprimento 24a, 24b e a linha de entrada 12 podem ser todas vedadas termicamente e separadas do conjunto de bolsas 10. Todas as linhas são equipadas com grampos de linha 22, que podem ser fechados para impedir a passagem de fluido, quando desejado. Se outros componentes vão ser separados, o conjunto de bolsas 10 pode incluir bolsas adicionais, com um ajuste correspondente com a válvula de aferição 20, para acomodar as bolsas adicionais.The
[0077] Várias linhas de suprimento também podem estar presentes no conjunto de bolsas 10. Por exemplo, a linha de suprimento da bolsa de congelamento 24b pode ter uma entrada 16 para a introdução de crioprotetor no sistema. Essas entradas podem ser equipadas com filtros 30 (consultar, por exemplo, a Figura 10), de preferência, filtros de 0,2 μ, para, entre outras coisas, impedir a contaminação de patógenos no ar externo e permitir ventilação de ar da bolsa de congelamento e tubagem. Uma bolsa para depósito de coágulo intermediário 40 (Figura 10) pode estar presente na linha de suprimento da bolsa de congelamento 24b. A bolsa para depósito de coágulo 40 coleta uma fração de células brancas separada, que inclui plaquetas e células brancas e inclui um pequeno volume de plasma ou células sanguíneas vermelhas. As Figuras 10a e 11a mostram o conjunto de bolsas sem a bolsa para depósito de coágulo intermediário 40.[0077] Several supply lines may also be present in the
[0078] Inicialmente, a bolsa de processamento 2 é preenchida com um anticoagulante, tal como CPD (citrato, fosfato e dextrose), e o sangue é retirado por uma agulha de flebetomia para a bolsa, ou a linha de entrada é furada ou cortada estéril para outra bolsa contendo sangue com anticoagulante. A válvula de aferição 20 começa na posição fechada (Figura 8A). Todos os grampos 22 são fechados, com exceção do grampo 22 na linha de entrada 12. O sangue, de preferência o sangue do cordão umbilical placentário, periférico, ou da medula do osso, é obtido de uma fonte pela agulha de flebetomia 8 ou outra entrada adequada, que alimenta a bolsa de processamento 2 pela linha de entrada 12. A linha de entrada 12 é então grampeada, vedada termicamente e separada da carga 10. Opcionalmente, HES pode ser introduzido na bolsa de RBC 4 por uma entrada opcional, antes ou depois da coleta de sangue.[0078] Initially, processing
[0079] Nesse ponto, o conjunto de bolsas é colocado em um retentor de bolsa 50, mostrado nas Figuras 1, 2. 0 retentor de bolsa 50 é mais ou menos cilíndrico, com um formato substancialmente elíptico, que tem duas extremidades redondas conectadas por lados substancialmente retos. O compartimento principal 70 tem um formato oval alongado, dimensionado para receber a bolsa de processamento 2. 0 compartimento principal 70 é acessível através de deslizamento por uma parte de fundo 162 do retentor de bolsa 50 (ao longo da seta Z), e a seguir pela abertura de uma cobertura 72 em torno de uma articulação 71 (ao longo da seta X), presente em uma das extremidades redondas do retentor de bolsa 50. A bolsa de processamento 2 é orientada no retentor de bolsa 50, de modo que a cobertura articulada 72 é fechada na borda 11c, coincidindo com o ponto 14 que segue para a válvula de aferição 20. A válvula de aferição 20 é recebida em um orifício 74a, localizado na parte grande do retentor de bolsa 50. Um orifício complementar 74b, localizado na cobertura articulada 72, recebe a extremidade saliente da válvula de aferição 20. A cobertura articulada 72 vai fechar apenas quando a parte de fundo 162 estiver na posição fechada. Quando a parte de fundo está fechada, um entalhe 164 na parte de fundo 162 encaixa com uma lingueta de retenção 166, presente no corpo principal do retentor de bolsa 50.[0079] At this point, the set of pouches is placed in a
[0080] Com referência à Figura 1, o retentor de bolsa 50 inclui um prendedor de bolsa 76, que tem ganchos 60 que acoplam os laços 28 na bolsa de processamento 2, mantendo a bolsa em posição durante o processo de centrifugação. O compartimento principal 70 do retentor de bolsa 50 é moldado para receber a bolsa de processamento 2, com uma parede lateral 156, que é complementar à forma assimétrica da bolsa de processamento 2, que termina em um posto avançado 160, dimensionado para receber a ponta assimétrica 14 e a saída 26 da bolsa de processamento 2. As paredes laterais 156 envolvem a bolsa de processamento 2 com folga em torno da parte intermediária e com mais firmeza no fundo (próximo da saída 26). Uma tolerância mais estreita próxima ao fundo da bolsa 2 é desejada, para minimizar a perturbação do conteúdo da bolsa, após a sedimentação. Desse modo, o topo do compartimento 70 reflete a forma elíptica externa, mas é afunilado para o posto avançado 160, enquanto mantém as bordas da bolsa 11b, 11c, 11d em relação de suporte.[0080] Referring to Figure 1, the
[0081] Um entalhe 78 está presente ao longo dos lados substancialmente retos do retentor de bolsa 50. 0 entalhe 78 recebe o fixador 16 na bolsa de RBC 4. A bolsa de RBC 4 é pendurada ao longo da parte externa do retentor de bolsa 50, em um recesso curvo 80 seguindo para uma prateleira de suporte inferior 83, por meio da transição 81. A bolsa de congelamento 6 é envolvida em um receptáculo 82, localizado abaixo do compartimento principal 70 do retentor de bolsa 50, acessível por deslizamento da parte de fundo 162 para baixo, para abertura ao longo da seta Z. As Figuras 4 e 5 mostram todo o conjunto de bolsas 10, colocado no retentor de conjunto de bolsas 50, antes da ocorrência de separação dos componentes. A Figura 37 mostra uma outra iteração de um conjunto de bolsas, mostrando esquematicamente que a bolsa de congelamento é pesada durante o processo de separação. A Figura 38 mostra a bolsa de congelamento encapsulada em um invólucro 501, que pende da plataforma 503, que suporta, no seu lado de topo, um módulo de circuito integrado de controle 57, e, no seu lado de fundo, o invólucro e a bolsa de congelamento por meio de uma célula de carga de pesagem 505. 0 invólucro 501 flutua em um espaço aéreo 508, protegido por um braço em forma de "U" 509.A
[0082] A válvula de aferição 20 é conectada a um acionador motorizado 56 no retentor de bolsa 50. O servomotor 56 é conectado a um módulo de circuito integrado controlado por software 57, energizado por uma bateria recarregável B. O módulo 57 pode requerer a compensação de temperatura, devido à geração de calor durante a centrifugação. Um orifício P é empregado para utilizar um carregador de bateria C (Figura 35). 0 servomotor 56 controla a operação da válvula de aferição 20, enquanto que o conjunto deThe
[0083] bolsas 10 é montado no retentor de bolsa 50. Um ou mais sensores ópticos 58 acionam no tempo adequado o servomotor 56, para fechar a válvula de aferição 20, após a coleta de cada uma das frações. O sensor pode estar presente na posição mostrada na Figura 1 ou mais baixa, mais próxima do posto avançado 160 (Figura 8C) adjacente ao ponto assimétrico 14 da bolsa de processamento 2. Os sensores 58 podem, por exemplo, monitorar todas as ramificações em torno da válvula 20 e as entradas das bolsas 4 e 6. 0 sensor 58 mostrado é óptico, mas ele pode ser baseado em densidade, peso, radiação infravermelha, radioatividade, fluorescência, cor, magnetismo, ultra-som, capacitância, em que a medida característica pode ser um aditivo.[0083]
[0084] O retentor de bolsa 50, quando fechado, é adaptado para encaixar em um copo de centrífuga 66, dimensionado para ser acomodado dentro de uma centrifuga convencional 100. De preferência, pelo menos dois retentores de conjuntos de bolsas 50 são colocados em copos de centrifuga diametralmente opostos 66, tal como mostrado na Figura 6, para equilíbrio. Um conjunto de bolsas 10 no copo de centrífuga 66 pode ser submetido a mais do que a força de 1 G, para obter a estratificação ótima dos componentes (Figuras 8A - 8C). O servomotor 56 opera então a válvula de aferição 20, para abrir e permitir acesso à linha de suprimento 24a para a coleta de células sanguíneas vermelhas, a uma força G ideal, para a bolsa 4. O servomotor 56 fecha a válvula de aferição 20 quando o sensor óptico 58 indica que as células sanguíneas vermelhas foram coletadas (Figuras 8A, 8B). O sensor óptico 58 monitora o limite entre a fração de células brancas e a fração de plasma.[0084] The
[0085] A fração seguinte, que inclui células brancas e/ou plaquetas, é então colhida da bolsa de processamento 2; o servomotor 56 abre a válvula de aferição 20, para permitir o acesso à linha de suprimento 24b (Figura 8C), levando à bolsa 6 para a coleta seguinte. Conforme mostrado na Figura 9, durante a coleta (WBC) para a bolsa de congelamento 6, o ar na linha de suprimento se incorpora ao ar já na bolsa de congelamento 6, produzindo uma bolha de ar 70, a qual é útil para auxiliar a misturação adequada das WBC e/ou plaquetas com o crioprotetor. O servomotor 56 fecha então a válvula de aferição 20, conforme mostrado na Figura 8A, e a centrífuga 100 é desativada. A Figura 9 mostra o conjunto de bolsas 10 no retentor de conjunto de bolsas 50, após a ocorrência da separação de fases.[0085] The next fraction, which includes white cells and/or platelets, is then collected from processing
[0086] A bolsa com depósito de coágulo 40, se estiver presente, tem de preferência uma capacidade de 25 ml. 20 ml de depósito de coágulo são introduzidos na bolsa de depósito de coágulo 40, e 5 ml de solução de DMSO são introduzidos subsequentemente. A bolsa de depósito de coágulo é colocada entre dois estratos frios e a bolsa de depósito de coágulo 40 é girada ou amassada, para que ocorra a misturação do crioprotetor e da solução de WBC.[0086] The clot deposit bag 40, if present, preferably has a capacity of 25 ml. 20 ml of clot deposit is introduced into
[0087] O retentor de bolsa 50 é removido do copo da centrifuga 66 e aberto, e o conjunto de bolsas 10 é removido, com o servomotor 56 desconectado da válvula de aferição 20. Cada linha de suprimento 24a, 24b é grampeada, vedada termicamente e removida da bolsa de processamento 2. Quaisquer bolsas adicionais podem ser removidas do mesmo modo.[0087] The
[0088] Depois que a linha de suprimento 24b conectada à bolsa de congelamento 6 é desconectada, um crioprotetor pode ser introduzido no componente coletado na bolsa de congelamento 6, por uma entrada. A bolha de ar 70 na bolsa de congelamento 6 permite que o crioprotetor seja intensamente misturado com o componente coletado. Após a misturação, a bolha de ar 70 é expelida, talvez por uma entrada de crioprotetor protegida por filtro 16 (Figura 10). 0 componente é então preparado para a armazenagem por vedação térmica da tubagem e remoção da bolsa 6, a jusante da entrada de crioprotetor 16.[0088] After the
[0089] De preferência, cada linha (a linha de entrada 12 e as linhas de suprimento 24a, 24b) é orientada para permitir o acesso a um local de amostragem (por exemplo, local 18), próximo às bolsas de coleta ou armazenagem. Desse modo, uma amostra do sangue ou fluido na linha pode ser tirada, sem perturbar a massa do componente coletado.[0089] Preferably, each line (the input line 12 and the
[0090] A Figura 13 ilustra a separação dos componentes de sangue integral corno uma função do tempo. Durante a centrifugação, cada fração é estratificada na bolsa de processamento 2 como uma função da sua densidade. As áreas de sobreposição 175 (Figura 13) indicam a área na separação ao longo de cada linha de estratos na bolsa de processamento 2. à medida que a centrifugação continua, o limite de cada fração fica mais claramente definido; desse modo, a área 175 (Figura 13) diminui e cada fração é coletada de maneira mais completa. Desse modo, a estratégia de centrifugação combina a separação por densidade, o tempo envolvido para estratificação, que difere com a área da superfície externa e a densidade das várias células, força centrifuga, clareza de camadas limites. As decisões na coleta irão variar com base nessas variações, como uma função do constituinte de maior valor e da sua pureza desejada.[0090] Figure 13 illustrates the separation of whole blood components as a function of time. During centrifugation, each fraction is stratified in
[0091] De preferência, a centrifugação de estratificação ocorre a um excesso de 1.000 G, de preferência, de 1.400 G, por aproximadamente vinte minutos. A etapa de centrifugação por transferência ocorre a menos de 100 G, de preferência a 78 G, e impede que a matéria saia do sensor óptico 58. 0 lado direito da Figura 36 mostra a bolsa de células brancas (bolsa de congelamento 6) terminada em incrementos por estrangulamento da válvula 20, ligada/desligada, para extrair a população de WBC.[0091] Preferably, the stratification centrifugation takes place at an excess of 1,000 G, preferably 1,400 G, for approximately twenty minutes. The transfer centrifugation step takes place at less than 100G, preferably at 78G, and prevents matter from exiting the
[0092] Deve ser levado em consideração o fato que, ainda que a presente invenção seja preferivelmente utilizada na separação de componentes sanguíneos, as técnicas e o aparelho de separação são adequados para a separação de outros fluidos. O software programado no módulo de circuito integrado de controle pode fazer com que o servomotor abra e feche muitas vezes a válvula, estrangulando, desse modo, a válvula durante a distribuição dos estratos. Também por meio da variação dos incrementos de tempo, durante um procedimento de coleta, cortes precisos entre os componentes celulares podem ser obtidos para reduzir a mistura entre os tipos celulares, que podem ocorrer em consequência do efeito "toroidal" (Coriolis), durante a remoção do componente sanguíneo da bolsa de processamento 2, e podem ser modificados para a separação de outros fluidos, ou para compensar as várias condições de hardware, tal como uma carga de centrifuga desnivelada.[0092] It should be taken into account that, although the present invention is preferably used in the separation of blood components, the techniques and the separation apparatus are suitable for the separation of other fluids. Software programmed into the control IC module can cause the servo motor to open and close the valve many times, thereby throttling the valve during strata dispensing. Also by varying the time increments, during a collection procedure, precise cuts between cell components can be obtained to reduce mixing between cell types, which can occur as a result of the "toroidal" (Coriolis) effect during the removal of the blood component from the
[0093] Ainda uma outra realização do conjunto de bolsas 210 é mostrada na Figura 15. Na sua essência, o conjunto de bolsas 210 inclui uma bolsa de processamento de sangue integral 201, uma bolsa de células sanguíneas vermelhas (RBC) 204 e uma bolsa de congelamento 206. A bolsa de processamento 202 é suprida por uma linha de entrada 212, que termina em um espigão 208. A bolsa de processamento 202 tem uma forma assimétrica, incluindo uma borda de topo 211a, uma borda lateral curta 211b, uma borda lateral longa 211c e uma borda de fundo inclinada 211d, entre as bordas laterais, de modo que a parte de fundo é afunilada para um ponto assimétrico 214, que leva a uma saída 226. A saída 226 dirige a descarga da bolsa de processamento 202 para uma válvula de segurança 220. Duas linhas de suprimento 224a, 224b seguem da válvula de segurança 220 para a bolsa de RBC 204 e a bolsa de congelamento 206, respectivamente. As linhas de suprimento 224a, 224b e a linha de entrada 212 podem ser todas vedadas termicamente e separadas do conjunto de bolsas 210. Todas as linhas são equipadas com grampos de linha 222, que podem ser fechados para impedir a passagem de fluido, quando desejado. Se outros componentes vão ser separados, o conjunto de bolsas 210 pode incluir outras bolsas com um ajuste correspondente na válvula de segurança 220, para acomodar as bolsas adicionais.[0093] Yet another embodiment of the
[0094] Inicialmente, o sangue de interesse é coletado em uma bolsa de coleta 200 ou um recipiente similar. O espigão 208 é inserido na bolsa de coleta 200, e o sangue é drenado da bolsa de coleta 200 para a bolsa de processamento 202, pela linha de entrada 212 (Figuras 16, 17). A linha de entrada 212 tem, de preferência, um filtro de coágulo 230, pelo qual o sangue passa antes de atingir a bolsa de processamento 202. Após o sangue ser transferido, a linha de entrada 212 é vedada termicamente, e a bolsa de coleta 200 e o filtro de coágulo 230 são removidos (Figura 18).[0094] Initially, the blood of interest is collected in a 200 collection bag or similar container.
[0095] A linha de entrada 212 também tem, de preferência, um orifício de amostragem 232, uma almofada de amostragem 234 e um orifício de acesso 236 (Figura 19). Após a bolsa de coleta 200 e o filtro de coágulo 230 serem movidos da linha de entrada 212, a almofada de amostragem 234 é apertada e liberada para ser preenchida com sangue. A linha de entrada 212 é então vedada termicamente e a almofada de amostragem 234 é removida, juntamente com o orifício de amostragem 232 (Figura 20). 0 sangue na almofada de amostragem 234 pode então ser acessível pelo orifício de amostragem 232, para um ensaio separado.[0095] The
[0096] Distintamente da técnica anterior, na qual um agente de sedimentação é necessário, um agente de sedimentação, tal como hidróxi etil amido (HES), pode ser adicionado opcionalmente à bolsa de processamento 202, pelo orifício de acesso 236 na linha de entrada 212, utilizando um meio de seringa 236a ou um meio de distribuição similar, e a bolsa de processamento 202 é manipulada para misturar intensamente o agente com o sangue (Figura 21). 0 conjunto de bolsas 210 é então colocado no retentor de bolsa 50 e utilizado com uma centrifuga, conforme detalhado acima, para separar as células dentro da mesma (Figura 22). As células sanguíneas vermelhas separadas são transferidas para a bolsa de RBC 204, e a fração de WBC é transferida para a bolsa de congelamento 206, durante essa operação. O conjunto de bolsas 210 é então removido do retentor de bolsa 50 (Figura 23). A linha de suprimento 224a é então vedada termicamente e a bolsa de RBC 204 é removida (Figura 24). 0 conteúdo da bolsa de RBC é acessível por um orifício de amostragem 238.[0096] Unlike the prior art, in which a settling agent is required, a settling agent, such as hydroxy ethyl starch (HES), can optionally be added to the
[0097] Com referência à Figura 25, a linha de suprimento 224b é preferivelmente equipada com uma primeira junção 260, conectando uma linha de entrada auxiliar 240, terminando em um orifício auxiliar 242. Uma segunda junção 262 está presente na própria linha de entrada auxiliar 240, para conectar uma linha de ramificação 244, que termina em uma pêra 246. A linha de ramificação 244 também contém um rabicho de amostragem 248 e um orifício de amostragem 250. Após a remoção da bolsa de RBC 204, a pêra 246, na linha de ramificação 244, é apertada, para dirigir qualquer plasma residual remanescente na linha de suprimento 224b para a bolsa de congelamento 206. 0 grampo 222, na linha de ramificação 244, é então fechado. O conteúdo da bolsa de congelamento 206 é então misturado, preferivelmente pela retenção da bolsa de congelamento 206 a um ângulo de 45° e um aperto lento do pequeno compartimento da bolsa de congelamento 206, por um total de dez vezes por segundo.[0097] Referring to Figure 25, the
[0098] O grampo 222, na linha de ramificação 244, é então aberto, e a pêra 246 é apertada e liberada, para encher o rabicho de amostragem 248 com o conteúdo da bolsa de congelamento 206 (Figura 26). A linha de ramificação 244 é vedada termicamente e removida do conjunto de bolsas 210 (Figura 27). 0 conteúdo do rabicho de amostragem 248 é acessível pelo orifício de amostragem 250, para um ensaio separado.
[0099] A bolsa de congelamento 206 é colocada no seu lado e intercalada entre dois pacotes de gelo 252 (Figura 28). DMSO é introduzido na bolsa de congelamento 206 pelo orifício auxiliar 242, que tem um filtro estéril 242a (isto é, igual ou inferior a 0,2 mícron), na linha de entrada auxiliar 240. Um misturador orbital 254 é utilizado com a bolsa de congelamento 206 intercalada, para misturar intensamente o conteúdo da bolsa de congelamento 206. A bolsa de congelamento 206 intercalada é então colocada no retentor estacionário 256 (Figura 29). Uma seringa 258 é inserida na entrada auxiliar 242 e utilizada para retirar qualquer DMSO residual e ar retido na linha de suprimento 224b e na linha de entrada auxiliar 240. 0 depósito de coágulo / DMSO da bolsa de congelamento 206 é retirado pela seringa 258, até atingir a segunda junção 262 da linha de suprimento 224b. A bolsa de congelamento 206 é então removida do conjunto de bolsas 210 por vedação térmica da linha de suprimento 224b (Figura 30).[0099] The freezing
[00100] Uma parte da linha de suprimento 224b, após a primeira junção 260, é mantida presa na bolsa de congelamento 206. Essa parte da linha de suprimento 224b é vedada termicamente, para formar três amostras separadas 275a, 275b, 275c (ainda conectadas à bolsa de congelamento 206), e a área, separando o pequeno compartimento 206a da bolsa de congelamento 206, é vedada termicamente, para separar a mesma do restante da bolsa de congelamento 206 (Figura 31). O produto final é então congelado para a armazenagem.[00100] A portion of the
[00101] A válvula de segurança 220 é aberta, para permitir que o plasma na bolsa de processamento 202 entre em contato com o depósito de coágulo na linha de suprimento 224b, próximo à primeira e segunda junções 260, 262 (Figura 32). Uma amostra do depósito de coágulo diluído com plasma é retirada para a seringa 258, para amostragem bacteriana, e a seringa 258 é removida do orifício auxiliar 242. A linha de suprimento 224, contendo a linha auxiliar 240 e a primeira e segunda junções 260, 262, é então desconectada da bolsa de processamento 202 e é descartada (Figura 33). As amostras do plasma na bolsa de processamento 202 podem ser removidas ao utilizar o orifício de acesso 236 (Figura 34).[00101] The
[00102] Além disso, tendo sido então descrita a invenção, deve ficar evidente que várias modificações e adaptações estruturais podem ser levadas em consideração, sem que se desvie do âmbito e do significado permitido da presente invenção, conforme mostrado acima e tal como descrito abaixo pelas reivindicações.[00102] Furthermore, having then described the invention, it should be evident that various structural modifications and adaptations can be taken into account without departing from the scope and permitted meaning of the present invention, as shown above and as described below by the claims.
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