BRPI0502657B1 - PHARMACOLOGICAL USE OF CYCLODEXTRIN-AU-TIOL-DERIVED / HYDROPHobic COMPOUND NANOParticles - Google Patents
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Abstract
uso farmacologico de nanopartículas ciclodextrina-au-tiolderivada/composto hidrofóbico como antitumoral, antibacteriano, antiviral e/ou antiparasitário e seu processo de obtenção e sua formulação. esta invenção descreve a produção e formulação da violaceína encapsulada em <225>-ciclodextrina conjugada a uma nanopartícula de ouro atravéz de um ditiol como a mono[6-deoxi-6-[(mercaptohexametileno)tio]]-<225>-cyclodextrina-au (au-s(ch~ 2~ )~ 6~-s-<225>-cd) e sua citoxicidade in vitro em duas diferentes culturas de células (células leucêmicas hl60 e fibroblastos v79). o complexo sem a violaceína (au-s(ch~ 2~ )~ 6~-s-<225>-cd) não apresentou citotoxicidade nas linhagens estudadas na concentração usada. os resultados indicam que a complexação da violaceína com au-s(ch~ 2~ )~ 6~-s-<225>-cd manteve o efeito citotóxico nas células leucemicas e reduzem a toxicidade em v79 comparada a violaceína livre. estes dados indicam que o comlexo au-s(ch~ 2~ )~ 6~ -s-<225>-cd/violaceína pode ser usado para melhorar as propridades farmacológicas da violaceína, principalmente as antitumorais, já que o complexo pode manter a atividade antileucêmica e reduzir significativamente a toxicidade em moléculas normais. adicionalmente, estas propriedades podem exercer um importante papel em tratamentos antibacterianos e antiparasitárias e o composto au-s(ch~ 2~ )~ 6~ -s-<225>-cd pode ser usado para transporte de grupos químicos semelhantes em tamanho a violaceína sem restrição da doença a ser tratada.pharmacological use of cyclodextrin-au-thiolderivative nanoparticles / hydrophobic compound as antitumor, antibacterial, antiviral and / or antiparasitic and their process and formulation. This invention describes the production and formulation of the gold nanoparticle-conjugated β-cyclodextrin-encapsulated violacein via a dithiol such as mono [6-deoxy-6 - [(mercaptohexamethylene) thio]] - <225> -cyclodextrin- au (au-s (ch ~ 2) ~ 6 ~ -s- <225> -cd) and its in vitro cytotoxicity in two different cell cultures (hl60 leukemic cells and v79 fibroblasts). The complex without violacein (au-s (ch ~ 2 ~) ~ 6 ~ -s- <225> -cd) did not show cytotoxicity in the studied strains at the concentration used. The results indicate that the complexation of violacein with au-s (ch ~ 2 ~) ~ 6 -s- <225> -cd maintained the cytotoxic effect on leukemic cells and reduced v79 toxicity compared to free violacein. These data indicate that the au-s (ch ~ 2 ~) ~ 6 ~ -s- <225> -cd / violacein complex can be used to improve the pharmacological properties of violacein, especially antitumor, as the complex can maintain antileukemic activity and significantly reduce toxicity in normal molecules. In addition, these properties may play an important role in antibacterial and antiparasitic treatments and the compound au-s (ch ~ 2 ~) ~ 6 ~ -s- <225> -cd may be used to transport violacein-sized chemical groups. without restriction of the disease to be treated.
Description
Uso farmacológico de nanopartículas Ciclodextrinas-Au-Tiol-derivada/ composto hidrofóbico como antitumoral, antibacteriano, antiviral e/ou antiparasitário, seu processo de obtenção e sua formulação.Pharmacological use of Cyclodextrin-Au-Thiol-derived nanoparticles / hydrophobic compound as antitumor, antibacterial, antiviral and / or antiparasitic, its process of obtaining and its formulation.
Campo da invençãoField of invention
A presente invenção está relacionada com processo de obtenção e formulação de nanopartícula de Ciclodextrina-Au-Tiol-derivada/composto hidrofóbico, mais especificamente, β-Ciclodextrina-Au-Tiol-derivada/violaceína de composição aceitável e solúvel em água como antitumoral, antibacteriano, antiparasitário e outras doenças incluindo, mas não limitando, ao câncer, tuberculose, doença de Chagas e 10 Leishmaniose. Mais especificamente ainda, a presente invenção pode exercer um importante papel em tratamentos antibacterianos e antiparasitárias e o composto AuS(CH2)g-S^-CD pode ser usado para transporte de grupos químicos semelhantes em tamanho a violaceína sem restrição da doença a ser tratada.The present invention is related to the process of obtaining and formulating a nanoparticle of Cyclodextrin-Au-Thiol-derived / hydrophobic compound, more specifically, β-Cyclodextrin-Au-Thiol-derived / violacein of acceptable composition and soluble in water as an antitumor, antibacterial , antiparasitic and other diseases including, but not limited to, cancer, tuberculosis, Chagas disease and 10 Leishmaniasis. More specifically, the present invention can play an important role in antibacterial and antiparasitic treatments and the AuS (CH2) g-S ^ -CD compound can be used to transport chemical groups similar in size to violacein without restriction of the disease to be treated.
Assim, a presente invenção visa fornecer uma formulação de composição 15 aceitável e solúvel em água possuindo aplicações em vários setores industriais, dentre os quais se destaca o setor farmacêutico.Thus, the present invention aims to provide a formulation of an acceptable and water-soluble composition having applications in various industrial sectors, among which the pharmaceutical sector stands out.
Fundamentos da invençãoFundamentals of the invention
A violaceína que é mostrada na Figura 1 é um pigmento violáceo produzido por uma das cepas de Chromobacterium violaceum encontrada no Rio Amazonas, como um 20 derivado de indol caracterizado como 3-(1,2-diidro-5-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-oxo-3Hpirrol-3-ilideno)-1,3-diidro-2H-indol-2-ona. A biossíntese e propriedades biológicas deste pigmento têm sido amplamente estudadas (Mendes e col. PIBr 0100199-0, 2001). Em particular as atividades antitumorais (Durán e Haun, PIBr 9702918, 1997), antimicobacterianas (Durán e De Souza, PIBr 0101346-7, 2001), antiulcerogênicas, 25 antileishmaniose e antiviral são de grande interesse (Leon, L. L., Miranda, C. C., De Souza, A. O., and Durán, N. J. Antimicrob. Chemother. 48, 449, 2001; Durán, N., Justo, G. Z., Melo, P. S., De Azevedo, M. B. M., Souza-Brito, A. R. M., Almeida, A. B. A., and Haun. M. Can. J. Physiol. Pharmacol. 81, 387, 2003); (Melo, P. S., Justo, G. Z., De Azevedo, M. B. M., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 186, 217, 2003). 30 Especialmente sua atividade sobre células mieloides leucêmicas (HL60) é de interesse já que o composto efetivamente induz citotoxicidade celular nestas células. Células HL60 são atualmente aceitas como um modelo válido para estudar a biologia da leucemiaThe violacein shown in Figure 1 is a violet pigment produced by one of the strains of Chromobacterium violaceum found in the Amazon River, as an indole derivative characterized as 3- (1,2-dihydro-5- (5-hydroxy-1H) -indol-3-yl) -2-oxo-3Hpirrol-3-ylidene) -1,3-dihydro-2H-indole-2-one. The biosynthesis and biological properties of this pigment have been widely studied (Mendes et al. PIBr 0100199-0, 2001). In particular, antitumor activities (Durán and Haun, PIBr 9702918, 1997), antimycobacterials (Durán and De Souza, PIBr 0101346-7, 2001), antiulcerogenic, 25 antileishmaniasis and antiviral are of great interest (Leon, LL, Miranda, CC, De Souza, AO, and Durán, NJ Antimicrob.Chemother. 48, 449, 2001; Durán, N., Justo, GZ, Melo, PS, De Azevedo, MBM, Souza-Brito, ARM, Almeida, ABA, and Haun. M. Can. J. Physiol. Pharmacol. 81, 387, 2003); (Melo, P. S., Justo, G. Z., De Azevedo, M. B. M., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 186, 217, 2003). 30 Especially its activity on leukemic myeloid cells (HL60) is of interest since the compound effectively induces cell cytotoxicity in these cells. HL60 cells are currently accepted as a valid model for studying the biology of leukemia
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 11/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 11/31
2/12 mieloide e tem sido demonstrado que estas células reagem com violaceína aumentando apoptose e diminuindo a proliferação celular (Melo, P. S., Justo, G. Z., De Azevedo, M. B. M., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 186, 217. 2003). Outros resultados mostram que o efeito citotóxico da violaceína em células HL60 era mensurado via uma ativação do receptor de sinalização de TNF (fator de necrose tumoral) e que este efeito é especifico para células mieloides leucêmicas e não é observado para células não transformadas (Ferreira, C. V., Bos, C. L., Versteeg, H. H. , Justo, G. Z., Duran, N., and Peppelenbosch, M. P. Blood, 2004). Neste trabalho foi demostrado que a violaceína é três vezes, em ordem de magnitude, mais potente em células mieloides leucêmicas 10 humanas que células primárias mononucleares humanas isoladas de voluntários sadios.2/12 myeloid and these cells have been shown to react with violacein by increasing apoptosis and decreasing cell proliferation (Melo, PS, Justo, GZ, De Azevedo, MBM, Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 186, 217 2003). Other results show that the cytotoxic effect of violacein in HL60 cells was measured via an activation of the TNF signaling receptor (tumor necrosis factor) and that this effect is specific for leukemic myeloid cells and is not observed for non-transformed cells (Ferreira, CV, Bos, CL, Versteeg, HH, Justo, GZ, Duran, N., and Peppelenbosch, MP Blood, 2004). In this work it was shown that violacein is three times, in order of magnitude, more potent in human leukemic myeloid cells than human primary mononuclear cells isolated from healthy volunteers.
Logo, o efeito da violaceína se assemelha ao efeito da sinalização da TNFa especifico destas células. Esta via de ativação e aumento de sua toxicidade é de grande importância em termos de aplicação em câncer.Therefore, the effect of violacein is similar to the effect of TNFa signaling specific to these cells. This pathway of activation and increased toxicity is of great importance in terms of application in cancer.
Previamente foi mostrado que violaceína encapsulada em β-ciclodextrina (BR 15 9801307, Durán e col., 1998) aumenta levemente o efeito citotóxico em células da linhagem V79 e significativamente em células HL60 (Melo, P. S., Justo, G. Z., De Azevedo, M. B. M., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 186, 217, 2003). Este encapsulamento foi positivo também em hormônios de crescimento com ciclodextrina (BR 9906202, Durán e col., 1999).Previously it was shown that violacein encapsulated in β-cyclodextrin (BR 15 9801307, Durán et al., 1998) slightly increases the cytotoxic effect in V79 cells and significantly in HL60 cells (Melo, PS, Justo, GZ, De Azevedo, MBM , Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 186, 217, 2003). This encapsulation was also positive in growth hormones with cyclodextrin (BR 9906202, Durán et al., 1999).
Ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos formados por unidades glucopiranose, das quais as formas naturais mais abundantes são conhecidas como alfa-, beta- e gama-ciclodextrina apresentando 6, 7 ou 8 das referidas unidades. Sua conformação assemelha-se a um cone truncado, com uma cavidade interna hidrofóbica e a parte externa hidrofílica. Daí decorre a capacidade das ciclodextrinas encapsularem moléculas 25 em seu interior, formando arranjos supramoleculares conhecidos como complexos de inclusão. As ciclodextrinas são candidatos potenciais para carregadores de drogas, em virtude de sua habilidade de alterar as propriedades químicas, físicas e biológicas das moléculas encapsuladas e complexos de inclusão. A aplicação farmacêutica mais comum das ciclodextrinas visa a aumentar a solubilidade, estabilidade e 30 biodisponibilidade das moléculas de fármacos, além da possibilidade de minimizar efeitos colaterais. As principais vantagens das ciclodextrinas naturais como carregadores de drogas são as seguintes: (1) estrutura química bem definida (2)Cyclodextrins are cyclic oligosaccharides formed by glucopyranose units, of which the most abundant natural forms are known as alpha-, beta- and gamma-cyclodextrin with 6, 7 or 8 of the said units. Its conformation resembles a truncated cone, with a hydrophobic internal cavity and a hydrophilic external part. Hence the ability of cyclodextrins to encapsulate 25 molecules within them, forming supramolecular arrangements known as inclusion complexes. Cyclodextrins are potential candidates for drug carriers, due to their ability to alter the chemical, physical and biological properties of encapsulated molecules and inclusion complexes. The most common pharmaceutical application of cyclodextrins aims to increase the solubility, stability and bioavailability of drug molecules, in addition to the possibility of minimizing side effects. The main advantages of natural cyclodextrins as drug carriers are as follows: (1) well-defined chemical structure (2)
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 12/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 12/31
3/12 disponibilidade de ciclodextrinas com cavidades de tamanhos diferentes (3) baixa toxicidade e baixa atividade farmacológica (4) certa solubilidade em água (5) proteção das drogas incluídas/conjugadas frente a biodegradação (ozsef Szejtli, Chem. Rev., 1998(98)1743-1753).3/12 availability of cyclodextrins with different sized cavities (3) low toxicity and low pharmacological activity (4) certain solubility in water (5) protection of the included / conjugated drugs against biodegradation (ozsef Szejtli, Chem. Rev., 1998 ( 98) 1743-1753).
Monocamadas de derivados de ciclodextrina em superfícies sólidas têm sido preparadas por vários grupos de pesquisa em partículas de ouro como, por exemplo, a 6-(2-mercaptometilamino)-6-deoxi-a-cyclodextrin (Maeda, Y., Kukuda, T., Yamamoto, H., and Kitano, H. Langmuir, 13, 4187, 1997; Fukuda, T., Maeda, Y., and Kitano, H. Langmuir, 15, 1887, 1999; Kitano, H., Taira, Y., and Yamamoto, H. Anal. Chem. 72, 10 2976, 2000) e per-6-tio-p-ciclodextrina (Liu, J., Ong, W., Román, E., Lynn, M. J., andMonolayers of cyclodextrin derivatives on solid surfaces have been prepared by several research groups on gold particles such as 6- (2-mercaptomethylamino) -6-deoxy-a-cyclodextrin (Maeda, Y., Kukuda, T ., Yamamoto, H., and Kitano, H. Langmuir, 13, 4187, 1997; Fukuda, T., Maeda, Y., and Kitano, H. Langmuir, 15, 1887, 1999; Kitano, H., Taira, Y., and Yamamoto, H. Anal. Chem. 72, 10 2976, 2000) and per-6-thio-p-cyclodextrin (Liu, J., Ong, W., Román, E., Lynn, MJ, and
Kaifer, A. E. Langmuir, 16, 3000, 2000; Liu, J., Alvarez, J., Ong, W., and Kaifer, A. E. Nano Lett. 1, 57, 2001; Velic, D., and Kohler, G., Chem. Phys. Lett. 371, 483, 2003). Também foram sintetizados alguns mono e multitiolados de derivados de ciclodextrinas com diferentes grupos de separação (Nelles, G., Weisser, M,. Back, R., Wohlfart, P., 15 Wenz, G., and Mittler-Neher, S. J. Am. Chem. Soc., 118, 5039, 1996; Weisser, M., Nelles, G., Wenz, G., and Mittler-Neher, S. Sensor and Actuators B, 38-39, 58,1997).Kaifer, A. E. Langmuir, 16, 3000, 2000; Liu, J., Alvarez, J., Ong, W., and Kaifer, A. E. Nano Lett. 1, 57, 2001; Velic, D., and Kohler, G., Chem. Phys. Lett. 371, 483, 2003). Some mono and multitiolates of cyclodextrin derivatives with different separation groups were also synthesized (Nelles, G., Weisser, M ,. Back, R., Wohlfart, P., 15 Wenz, G., and Mittler-Neher, SJ Am Chem. Soc., 118, 5039, 1996; Weisser, M., Nelles, G., Wenz, G., and Mittler-Neher, S. Sensor and Actuators B, 38-39, 58.1997).
Nos referidos trabalhos, as ciclodextrinas multitioladas e/ou com grupos de separação curtos acarretam como desvantagem um recobrimento irregular das superfícies e, por outro lado, ciclodextrinas monotioladas com grupos de separação 20 longos acarretam perda de solubilidade em água. A ciclodextrina proposta na presente invenção representa uma condição ótima quanto ao recobrimento e a solubilidade.In said works, multitiolated cyclodextrins and / or with short separation groups result in an uneven covering of surfaces and, on the other hand, monothiolated cyclodextrins with long separation groups 20 cause loss of water solubility. The cyclodextrin proposed in the present invention represents an optimal condition in terms of coating and solubility.
Para estudar estes efeitos biológicos existem vários testes alternativos para ser aplicados posteriormente em sistemas in vivo. Os testes in vitro são geralmente rápidos, sensíveis, fácil de automatizar e econômicos quando comparados com ensaios 25 em animais. Diferentes métodos têm sido usados para determinar citotoxicidade in vitro, incluindo a redução de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-bifenil brometo de tetrazolium (MTT), estes métodos geralmente determinam diferentes funções celulares (De Conti, R., De Oliveira, D. A., Fernandes, A. M. P., Melo, P. S., Rodriguez, J. A., Haun, M., De Castro, S. L., Souza-Brito, A. R. M., and Durán, N. In vitro Mol. Toxicol. 11, 153, 1998). 30 A redução do MTT mede a vulnerabilidade funcional da mitocôndria baseado na redução enzimática da sal de tetrazolium pela desidrogenase mitocondrial das células viáveis (Haun, M., Pereira, M. F., Hoffmann, M. E., Joyas, A., Campos, V., Filardi, L. D.To study these biological effects, there are several alternative tests to be applied later in in vivo systems. In vitro tests are generally quick, sensitive, easy to automate and economical when compared to animal tests. Different methods have been used to determine cytotoxicity in vitro, including the reduction of 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-biphenyl tetrazolium bromide (MTT), these methods generally determine different cellular functions (De Conti, R., De Oliveira, DA, Fernandes, AMP, Melo, PS, Rodriguez, JA, Haun, M., De Castro, SL, Souza-Brito, ARM, and Durán, N. In vitro Mol. Toxicol. 11 , 153, 1998). 30 MTT reduction measures the functional vulnerability of mitochondria based on the enzymatic reduction of tetrazolium salt by mitochondrial dehydrogenase of viable cells (Haun, M., Pereira, MF, Hoffmann, ME, Joyas, A., Campos, V., Filardi , LD
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 13/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 13/31
4/124/12
S., De Castro, S. L., and Durán, N. Biol. Res. 25, 21, 1992; Aoyama, H., Melo, P. S., Granjeiro, P. A., Haun, M., and Ferreira, C. V. Pharm. Pharmacol. 6, 331, 2000).S., De Castro, S. L., and Durán, N. Biol. Res. 25, 21, 1992; Aoyama, H., Melo, P. S., Granjeiro, P. A., Haun, M., and Ferreira, C. V. Pharm. Pharmacol. 6, 331, 2000).
Portanto, tendo em vista a baixa solubilidade em água dos compostos farmacológicos usados como antitumoral, juntamente com a necessidade de melhorar a 5 seletividade de tais fármacos frente a células tumorais, propiciando um tratamento mais seguro e com dosagem minimizada, tornou-se interessante desenvolver uma formulação de composição aceitável e solúvel em água de nanopartículas de ouro contendo em sua superfície moléculas de tióis derivadas de ciclodextrina com a capacidade de encapsular violaceína, mantendo a atividade e diminuindo a toxicidade 10 frente a células normais.Therefore, in view of the low water solubility of the pharmacological compounds used as an antitumor, together with the need to improve the selectivity of such drugs against tumor cells, providing a safer treatment and with minimized dosage, it became interesting to develop a formulation of an acceptable and water-soluble composition of gold nanoparticles containing cyclodextrin-derived thiol molecules on their surface with the ability to encapsulate violacein, maintaining activity and decreasing toxicity 10 against normal cells.
Breve descrição da invençãoBrief description of the invention
A presente invenção está relacionada com a preparação de nanopartículas que podem atuar em processos de reconhecimento molecular através de propriedades da ciclodextrina e de sua ancoragem ditiólica, que poderiam orientar as cavidades 15 ciclodextrinas. A presente invenção descreve, mais especificamente, a síntese de nanopartículas de ouro modificadas por ciclodextrinas tioladas permitindo a imobilização de compostos hidrofóbicos, tal como violaceína, nas cavidades das ciclodextrinas.The present invention is related to the preparation of nanoparticles that can act in molecular recognition processes through the properties of cyclodextrin and its ditholic anchorage, which could guide the cyclodextrin cavities. The present invention describes, more specifically, the synthesis of gold nanoparticles modified by thiolated cyclodextrins allowing the immobilization of hydrophobic compounds, such as violacein, in the cavities of the cyclodextrins.
No caso da violaceína associadas às nanopartículas da presente invenção, foi observado o favorecimento da manutenção da atividade antitumoral frente a células de 20 leucemia mielóide, diminuindo a citotoxicidade frente a células normais, bem como outras atividades biológicas comparadas com a violaceína livre.In the case of violacein associated with the nanoparticles of the present invention, it was observed that the maintenance of antitumor activity against cells of myeloid leukemia was observed, decreasing cytotoxicity against normal cells, as well as other biological activities compared to free violacein.
Em outras palavras, com o uso do composto Au-S(CH2)6-S-p-CD, a solubilização da violaceína se dá pelo seu encapsulamento nas unidades ciclodextrina. Cada partícula de ouro apresenta da ordem de centenas de unidades ciclodextrina ligadas em sua 25 superfície, o que propicia um múltiplo carregamento do composto ativo violaceína e favorece a solubilização em água, utilizando-se uma quantidade mínima do composto Au-S(CH2)6-S-p-CD.In other words, with the use of the compound Au-S (CH2) 6-S-p-CD, the solubilization of violacein occurs through its encapsulation in the cyclodextrin units. Each gold particle has on the order of hundreds of cyclodextrin units bound on its surface, which allows for a multiple loading of the active compound violacein and favors solubilization in water, using a minimum amount of the Au-S (CH2) 6 -Sp-CD.
Logo, o objetivo da presente invenção foi prover uma formulação de composição farmacologicamente aceitável e solúvel em água como antitumoral e outras doenças 30 incluindo, mas não limitando ao câncer, tuberculose, doença de Chagas, Leishmaniose e como antiviral. Cabe ressaltar que a presente invenção pode ser aplicada a qualquerTherefore, the aim of the present invention was to provide a pharmacologically acceptable and water-soluble composition formulation as an antitumor and other diseases 30 including, but not limited to, cancer, tuberculosis, Chagas disease, Leishmaniasis and as antiviral. It should be noted that the present invention can be applied to any
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 14/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 14/31
5/12 composto hidrofóbico possibilitando a produção de composições não só farmacêuticas como também, cosméticas e alimentícias.5/12 hydrophobic compound enabling the production of not only pharmaceutical but also cosmetic and food compositions.
Breve descrição das figurasBrief description of the figures
A seguir faz-se referência às figuras que acompanham este relatório descritivo, para melhor entendimento e ilustração do mesmo, onde se têm:Below, reference is made to the figures accompanying this descriptive report, for a better understanding and illustration of it, where they are found:
A figura 1 apresenta a estrutura molecular da violaceína.Figure 1 shows the molecular structure of violacein.
A figura 2 apresenta a estrutura geral das nanopartículas.Figure 2 shows the general structure of the nanoparticles.
A figura 3 apresenta um esquema da estrutura hipotética simplificada da nanopartícula.Figure 3 presents a schematic of the simplified hypothetical structure of the nanoparticle.
A figura 4 apresenta os espectros de absorção no UV/Visível das nanopartículas na ausência e na presença da violaceína.Figure 4 shows the UV / Visible absorption spectra of nanoparticles in the absence and presence of violacein.
A figura 5 apresenta os espectros infravermelhos das nanopartículas na ausência e na presença da violaceína.Figure 5 shows the infrared spectra of nanoparticles in the absence and presence of violacein.
A figura 6 apresenta a microscopia eletrônica de transmissão das nanopartículas.Figure 6 shows the transmission electron microscopy of the nanoparticles.
A figura 7 apresenta a viabilidade celular, determinada pelo método de redução do MTT, de células V79 de pulmão de Hamster chinês, expostas a violaceína livre e ao complexo Au-S(CH2)6-S-3-CD/violaceína.Figure 7 shows the cell viability, determined by the MTT reduction method, of Chinese Hamster lung V79 cells exposed to free violacein and the Au-S (CH2) 6-S-3-CD / violacein complex.
A figura 8 apresenta a viabilidade celular, determinada pelo método de redução do MTT, de células HL60 de leucemia mielóide humana, expostas a violaceína livre e ao complexo Au-S(CH2)6-S-p-CD/violaceína.Figure 8 shows the cell viability, determined by the MTT reduction method, of human myeloid leukemia HL60 cells, exposed to free violacein and the Au-S (CH2) 6-S-p-CD / violacein complex.
Descrição detalhada da invençãoDetailed description of the invention
A presente invenção se trata de um processo de obtenção de partículas de ouro (2-4 nm) com ciclodextrina a partir das seguintes etapas:The present invention is a process of obtaining gold particles (2-4 nm) with cyclodextrin from the following steps:
a) β-ciclodextrina > β-ciclodextrina monotosilado (composto 1);a) monotosylated β-cyclodextrin> β-cyclodextrin (compound 1);
b) β-ciclodextrina monotosilado (composto 1) > β-ciclodextrina tiolada (composto 2);b) monotosylated β-cyclodextrin (compound 1)> thiolated β-cyclodextrin (compound 2);
c) HAuCl4+NaBH4+β-ciclodextrina tiolada(composto 2) > Au -S(CH2)6-S^CD (composto 3); ec) HAuCl4 + NaBH4 + thiolated β-cyclodextrin (compound 2)> Au -S (CH2) 6-S ^ CD (compound 3); and
d) Au-S(CH2)6-S^-CD (3) + violaceina > Au -S(CH2)6-S^-CD/violacein (composto 4).d) Au-S (CH2) 6-S ^ -CD (3) + violacein> Au -S (CH2) 6-S ^ -CD / violacein (compound 4).
Exemplo 1: Processo de obtenção do complexo Au -SÍCH2)6-S-B-CD/violaceinaExample 1: Process of obtaining the Au -SÍCH2) 6-S-B-CD / violacein complex
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 15/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 15/31
6/126/12
O composto 1 foi preparado misturando a solução (30 ml) de cloreto de ptoluensulfonila (1,28 g) in piridina seca com a solução (300 ml) de β-ciclodextrina (10 g) também em piridina seca, resfriada abaixo de 5°C. Após reação por 12 horas o solvente foi evaporado ( 40oC) e redissolvido em éter etílico (Matsui e Okimoto, Bull.Compound 1 was prepared by mixing the solution (30 ml) of ptoluensulfonyl chloride (1.28 g) in dry pyridine with the solution (300 ml) of β-cyclodextrin (10 g) also in dry pyridine, cooled below 5 ° Ç. After reaction for 12 hours the solvent was evaporated (40oC) and redissolved in ethyl ether (Matsui and Okimoto, Bull.
Chem. Soc. Jpn, 51, 3030, 1978). Após recristalizações sucessivas em água o produto foi obtido (30% de rendimento) e caracterizado por espectroscopias de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), Raman e ressonância nuclear magnética de 13C (NMR).Chem. Soc. Jpn, 51, 3030, 1978). After successive recrystallizations in water, the product was obtained (30% yield) and characterized by Fourier Transform Infrared (FTIR), Raman spectroscopy and 13C magnetic resonance (NMR).
Para preparar o composto 2 (mono[6-deoxi-6-[(mercaptohexametileno)tio]]^10 ciclodextrina, o composto 1 (0,5-1,5 g) foi dissolvido em solução de carbonato de sódio aquoso (pH 12) contendo 15-25% de etanol. Logo, até completa dissolução, 1,6hexanedithiol foi adicionado (1,0-3,0 g) e a mistura de reação foi aquecida sobe nitrogênio a 40-50°C por 3-5h. A solução foi acidificada com HCl (pH 4), lavada com éter (3 x 20 ml), neutralizada com NaOH a pH 7,0, concentrada a vácuo e acidificada 15 (pH 4) e extraída com tricloroetileno (1,0 ml) por 12 h. O precipitado foi filtrado e dissolvido em água (10 ml).To prepare compound 2 (mono [6-deoxy-6 - [(mercaptohexamethylene) thio]] ^ 10 cyclodextrin, compound 1 (0.5-1.5 g) was dissolved in aqueous sodium carbonate solution (pH 12 ) containing 15-25% ethanol, then, until complete dissolution, 1.6hexanedithiol was added (1.0-3.0 g) and the reaction mixture was heated under nitrogen at 40-50 ° C for 3-5 hours. The solution was acidified with HCl (pH 4), washed with ether (3 x 20 ml), neutralized with NaOH at pH 7.0, concentrated in vacuo and acidified 15 (pH 4) and extracted with trichlorethylene (1.0 ml) for 12 h The precipitate was filtered and dissolved in water (10 ml).
A concentração a vácuo seguido por adição de água foi repetido pelo menos 4 vezes. A solução aquosa resultante foi seca a vácuo dando um sólido branco. Numa preparação típica de nanopartículas de ouro com o composto (2) na superfície, uma 20 solução de dimetilsulfóxido (DMSO, 20-50 ml)) contendo 100-200 mg de NaBH4 foi rapidamente misturada com outra solução de DMSO (20-60 ml) contendo 100-200 mg de HAuCl4 e 50-150 mg do composto 2 a temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 12-24 h e logo as nanopartículas agregadas foram precipitadas pela adição de 5090 ml de CH3CN. O sólido foi isolado por centrifugação e lavado três vezes 25 consecutivas com mistura de CH3CN: DMSO (1:1 v/v), e finalmente lavada com etanol e seco em vácuo. As partículas sólidas foram isoladas com uma cor marrom escura que foi muito solúvel em água. As nanopartículas foram caracterizadas por espectroscopia UV-Vis e microscopia eletrônica de transmissão (TEM), e esta se mostra como uma estrutura geral da nanopartícula na Figura 2. Na preparação do Au-S(CH2)6-S^30 CD/violacein (4), que pode ser representada numa estrutura hipotética simplificada na Figura 3, uma solução aquosa (1-3 ml) de nanopartículas Au -S(CH2)6-S^-CD (3) (5-15 mg) foi misturada com uma solução da violaceína (1,0 mg) em 10-20 ml de acetonaThe vacuum concentration followed by addition of water was repeated at least 4 times. The resulting aqueous solution was dried in vacuo to give a white solid. In a typical preparation of gold nanoparticles with compound (2) on the surface, a solution of dimethyl sulfoxide (DMSO, 20-50 ml)) containing 100-200 mg of NaBH4 was quickly mixed with another solution of DMSO (20-60 ml) ) containing 100-200 mg of HAuCl4 and 50-150 mg of compound 2 at room temperature. The mixture was stirred for 12-24 h and then the aggregated nanoparticles were precipitated by the addition of 5090 ml of CH3CN. The solid was isolated by centrifugation and washed three times for 25 consecutive times with a mixture of CH3CN: DMSO (1: 1 v / v), and finally washed with ethanol and dried in vacuo. The solid particles were isolated with a dark brown color that was very soluble in water. The nanoparticles were characterized by UV-Vis spectroscopy and transmission electron microscopy (TEM), and this is shown as a general structure of the nanoparticle in Figure 2. In the preparation of Au-S (CH2) 6-S ^ 30 CD / violacein ( 4), which can be represented in a simplified hypothetical structure in Figure 3, an aqueous solution (1-3 ml) of Au -S (CH2) 6-S ^ -CD (3) nanoparticles (5-15 mg) was mixed with a solution of violacein (1.0 mg) in 10-20 ml of acetone
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7/12 pelo procedimento previamente publicado para o complexo-p-CD/violaceína (De Azevedo et al. J. Inclusion Phenom. Macrocyclic Chem., 37, 67, 2000; 37, 93, 2000). A mistura foi agitada e aquecida a 50-60°C por 1-2h e logo a acetona foi evaporada. O resíduo da violaceína foi precipitada e separada da fase aquosa por centrifugação. A 5 solução aquosa foi liofilizada e a quantidade de violaceína incorporada no sólido foi determinado por analise elementar.7/12 by the previously published procedure for the p-CD / violacein complex (De Azevedo et al. J. Inclusion Phenom. Macrocyclic Chem., 37, 67, 2000; 37, 93, 2000). The mixture was stirred and heated to 50-60 ° C for 1-2 hours and then the acetone was evaporated. The violacein residue was precipitated and separated from the aqueous phase by centrifugation. The aqueous solution was lyophilized and the amount of violacein incorporated in the solid was determined by elemental analysis.
Exemplo 2: Quantificação do o complexo Au-SÍCH2)6-S-B-CD/violaceínaExample 2: Quantification of the Au-SÍCH2) 6-S-B-CD / violacein complex
A violaceína por análise elementar mostrou que 1,017 mg of Au-S(CH2)6-S-pCD/violaceina contem 16.80% em C, 3.33% em H e 1.30% em N. Logo, há 10,63% de 10 violaceína no complexo de Au-S(CH2)6-S-p-CD/violaceína.Violacein by elementary analysis showed that 1.017 mg of Au-S (CH2) 6-S-pCD / violacein contains 16.80% in C, 3.33% in H and 1.30% in N. Therefore, there are 10.63% of 10 violacein in the Au-S (CH2) 6-Sp-CD / violacein complex.
Na ausência da violaceína Au-S(CH2)6-S-p-CD apresenta uma absorção de ressonância plasmónica em 518 nm, como mostrada no espectro de absorção na FiguraIn the absence of the violacein Au-S (CH2) 6-S-p-CD it has a plasma resonance absorption at 518 nm, as shown in the absorption spectrum in Figure
4. Na presença da violaceína nas nanopartículas de Au-S(CH2)6-S-p-CD/violaceina (4), esta banda permanece essencialmente sem mudanças.4. In the presence of violacein in Au-S (CH2) 6-S-p-CD / violacein (4) nanoparticles, this band remains essentially unchanged.
A presença do derivado da ciclodextrina foi indicada pelo espectro de FTIR (discos de KBr) das partículas isoladas como sólido, que mostram as bandas características da ciclodextrina (Fig.5). Em comparação com o espectro do composto livre, 2, as intensidades das bandas a 2923 e 2852 cm-1, atribuídas ao estiramento assimétrico e simétrico do CH2 que separa as cadeias foram reduzidas drasticamente. O desaparecimento da banda a 2921 cm-1 atribuída ao estiramento assimétrico de CH2 tem sido também observada após ligação de ciclodextrinas tioladas a superfície dos filmes de ouro. Isto se deve a que tióis imobilizados contem somente as vibrações com componentes de momento dipolar perpendicular à superfície do ouro.The presence of the cyclodextrin derivative was indicated by the FTIR spectrum (KBr disks) of the isolated particles as a solid, which show the characteristic bands of the cyclodextrin (Fig.5). In comparison with the spectrum of the free compound, 2, the intensities of the bands at 2923 and 2852 cm-1, attributed to the asymmetric and symmetrical stretching of the CH2 that separates the chains have been drastically reduced. The disappearance of the band at 2921 cm-1 attributed to the asymmetric CH2 stretch has also been observed after binding of thiolated cyclodextrins to the surface of the gold films. This is because immobilized thiols contain only vibrations with dipole moment components perpendicular to the gold surface.
As amostras de nanopartículas apresentam formas esféricas e podem ser 25 observadas pela imagem de microscopia eletrônica de transmissão (TEM) (Fig.6a). A distribuição de diâmetros podem ser verificadas no histograma que mostra um valor médio de 3,8±1,0 nm. (Fig.6b).The nanoparticle samples have spherical shapes and can be seen by the transmission electron microscopy (TEM) image (Fig.6a). The diameter distribution can be verified in the histogram that shows an average value of 3.8 ± 1.0 nm. (Fig.6b).
O efeito citotóxico dos compostos expressa a viabilidade das células e isto foi feito sob células fibroblásticas de pulmão de hamster Chines (V79), que é usada em 30 estudos de citotoxicidade (Rodriguez e Haun, Planta Med. 65, 1, 1995). Neste teste as células são semeadas a uma densidade de 3 x 104 per ml em 96-poços em cada placa. O meio (Eagle modificado) foi removido após 48 horas após ter inoculado as células eThe cytotoxic effect of the compounds expresses the viability of the cells and this was done under fibroblastic Chinese hamster lung cells (V79), which is used in 30 cytotoxicity studies (Rodriguez and Haun, Planta Med. 65, 1, 1995). In this test the cells are seeded at a density of 3 x 104 per ml in 96-wells on each plate. The medium (modified Eagle) was removed 48 hours after inoculating the cells and
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8/12 substituído com meio contendo o composto em estudo durante 72 horas. Células leucêmicas humanas (HL60) foram cultivadas por métodos padrões (Anazetti, M. C., Melo, P. S., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 188, 261, 2003). Nestes testes diferentes concentrações de violaceína ou Au-S(CH2)6-S-p-CD/violaceína ou Au5 S(CH2)6-S-p-CD foram inoculadas por 72 horas. A viabilidade celular foi determinada pelo método de redução do MTT (Anazetti, M. C., Melo, P. S., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 188, 261, 2003). Em ambas as culturas de células o composto Au-S(CH2)6S-p-CD não foi citotóxico até uma concentração máxima avaliada (100% de viabilidade celular a 100 ng/ml) demonstrando a ausência de efeitos citotóxicos do complexo puro 10 (Figures 7 e 8). Entretanto, nas células V79 (Fig.7) o Au -S(CH2)6-S-p-CD/violaceína mostrou menos toxicidade no ensaio de MTT, contrário a violaceína livre que atingiu 50% de efeito inibitório sobre a viabilidade celular (IC50) numa concentração de 5 μM. Nestas gráficas cada ponto representa à média + SD de dois experimentos com quatro replicatas Estes resultados corroboram o efeito citotóxico da violaceína que previamente 15 foi mostrada ser por indução da apoptose em células V79 (Melo, P. S., Maria, S. S.,8/12 replaced with medium containing the test compound for 72 hours. Human leukemic cells (HL60) were cultured by standard methods (Anazetti, M. C., Melo, P. S., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 188, 261, 2003). In these tests, different concentrations of violacein or Au-S (CH2) 6-S-p-CD / violacein or Au5 S (CH2) 6-S-p-CD were inoculated for 72 hours. Cell viability was determined by the MTT reduction method (Anazetti, M. C., Melo, P. S., Durán, N., and Haun, M. Toxicology, 188, 261, 2003). In both cell cultures the Au-S (CH2) 6S-p-CD compound was not cytotoxic until a maximum concentration evaluated (100% cell viability at 100 ng / ml) demonstrating the absence of pure complex 10 cytotoxic effects ( Figures 7 and 8). However, in V79 cells (Fig.7), Au -S (CH2) 6-Sp-CD / violacein showed less toxicity in the MTT assay, contrary to free violacein which reached 50% inhibitory effect on cell viability (IC50) at a concentration of 5 μM. In these graphs, each point represents the mean + SD of two experiments with four replicates. These results corroborate the cytotoxic effect of violacein that previously was shown to be due to apoptosis induction in V79 cells (Melo, P. S., Maria, S. S.,
Vidal, B. C., Haun, M., and Durán, N. In Vitro Cel. Devel. Biol. - Animal, 36, 539, 2000).Vidal, B. C., Haun, M., and Durán, N. In Vitro Cel. Devel. Biol. - Animal, 36, 539, 2000).
Ao contrario a violaceína livre em células de HL60 inibe a um valor de IC50 de 0.8 μM e o Au-S(CH2)6-S-p-CD/violaceína mostrou um valor de IC50 de 1.8 μM (Fig. 8). Estes resultados indicam que a complexação da violaceína com Au-S(CH2)6-S-p-CD 20 manteve as propriedades antileucêmicas. Deve-se notar que o tratamento com células V79 e HL60 com o composto Au-S(CH2)6-S-p-CD (nanopartículas bacias) não induziram nenhum efeito citotóxico sobre estas células as concentrações usadas.In contrast, free violacein in HL60 cells inhibits an IC50 value of 0.8 μM and Au-S (CH2) 6-S-p-CD / violacein showed an IC50 value of 1.8 μM (Fig. 8). These results indicate that the complexation of violacein with Au-S (CH2) 6-S-p-CD 20 maintained the anti-leukemic properties. It should be noted that treatment with V79 and HL60 cells with the compound Au-S (CH2) 6-S-p-CD (basin nanoparticles) did not induce any cytotoxic effect on these cells at the concentrations used.
Logo, esta invenção mostra a grande aplicabilidade do complexo Au-S(CH2)6-Sβ-CD/violaceína para terapias graves como as mencionadas no texto sem os problemas 25 da sua toxicidade para células normais como outras drogas em uso.Therefore, this invention shows the wide applicability of the Au-S (CH2) 6-Sβ-CD / violacein complex for serious therapies such as those mentioned in the text without the problems of its toxicity to normal cells like other drugs in use.
Ainda é previsto como objeto do presente pedido de patente o uso do composto farmacêutico conforme definido anteriormente para ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária, formulados com ciclodextrina 30 conjugada a uma nanopartícula de ouro através de ditiol para encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de qualquer produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico.The use of the pharmaceutical compound as defined above to be directed towards the manufacture of medications with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic applications, formulated with cyclodextrin 30 conjugated to a gold nanoparticle is also contemplated as an object of the present patent application. through dithiol to encapsulate a pharmaceutically effective amount of any hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product.
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9/129/12
Sendo que a ciclodextrina é, preferencialmente, uma β-ciclodextrina conjugada a uma nanopartícula de ouro através de um ditiol para encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico e ser direcionado para manufatura de medicamentos e ser direcionado para manufatura de 5 medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.Since cyclodextrin is preferably a β-cyclodextrin conjugated to a gold nanoparticle through a dithiol to encapsulate a pharmaceutically effective amount of hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product and be directed towards the manufacture of medicines and be directed towards the manufacture of 5 medicines with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic application.
O produto farmacêutico hidrofóbico ser, mais especificamente, um antibiótico, um anti-inflamatório, bloqueadores alfa e beta, drogas citotóxicas, antiangiogênicas, anti-câncer e suas misturas, que tenham um diâmetro menor que a cavidade da 10 ciclodextrina e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária. Sendo preferencialmente o produto farmacêutico hidrofóbico uma quantidade farmaceuticamente eficaz de fármacos com atividade antitumoral.The hydrophobic pharmaceutical product is, more specifically, an antibiotic, an anti-inflammatory, alpha and beta blockers, cytotoxic drugs, anti-angiogenics, anti-cancer and their mixtures, which have a diameter smaller than the cyclodextrin 10 cavity and is intended for manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic application. The hydrophobic pharmaceutical product being preferably a pharmaceutically effective amount of drugs with antitumor activity.
Em uma modalidade preferencial o produto farmacêutico hidrofóbico ser, mais 15 especificamente, uma quantidade farmaceuticamente eficaz de moléculas de violaceína e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.In a preferred embodiment, the hydrophobic pharmaceutical product will be, more specifically, a pharmaceutically effective amount of violacein molecules and be directed towards the manufacture of medications with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic applications.
Em outra modalidade o produto cosmético hidrofóbico ser, mais especificamente, uma quantidade farmaceuticamente eficaz de moléculas de um antioxidante e ser 20 direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.In another embodiment, the hydrophobic cosmetic product is, more specifically, a pharmaceutically effective amount of molecules of an antioxidant and is intended for the manufacture of medications with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic applications.
O veículo utilizado uma solução aquosa para solubilizar o composto ciclodextrina conjugada a uma nanopartícula de ouro através de um ditiol para encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico 25 e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária. Sendo que a ciclodextrina é, mais especificamente, uma β-ciclodextrina capaz de encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico com um diâmetro de cerca de 2,0 a cerca de 4,0 nm e ser 30 direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.The vehicle used an aqueous solution to solubilize the cyclodextrin compound conjugated to a gold nanoparticle through a dithiol to encapsulate a pharmaceutically effective amount of hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product 25 and be directed towards the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, therapeutic application. antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic. Cyclodextrin being, more specifically, a β-cyclodextrin capable of encapsulating a pharmaceutically effective amount of hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product with a diameter of about 2.0 to about 4.0 nm and being directed towards the manufacture of medicines with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic application.
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10/1212/10
Sendo que o uso do composto farmacêutico é direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária, apresentando sua citotoxicidade específica em células leucêmicas e fibrobastos e uma redução na citotoxicidade em 5 moléculas normais.Since the use of the pharmaceutical compound is directed towards the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic application, presenting its specific cytotoxicity in leukemic cells and fibroblasts and a reduction in cytotoxicity in 5 normal molecules.
Ainda é objeto do presente pedido de patente o uso da composição farmacêutica, conforme definido anteriormente direcionado para manufatura de medicamentos formulados com ciclodextrina conjugada a uma nanopartícula de ouro através de ditiol para encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de qualquer 10 produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico e pela adição de uma quantidade farmaceuticamente eficaz de veículos, diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis. Sendo que a ciclodextrina é, preferencialmente, βciclodextrina conjugada a uma nanopartícula de ouro através de um ditiol para encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de produto farmacêutico ou 15 cosmético hidrofóbico, adicionado a uma quantidade farmaceuticamente eficaz de veículos, diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.The use of the pharmaceutical composition is still the subject of the present patent application, as defined above directed to the manufacture of drugs formulated with cyclodextrin conjugated to a gold nanoparticle through dithiol to encapsulate a pharmaceutically effective amount of any hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product and by addition of a pharmaceutically effective amount of pharmaceutically acceptable vehicles, diluents, solvents and / or excipients. Since cyclodextrin is preferably βcyclodextrin conjugated to a gold nanoparticle through a dithiol to encapsulate a pharmaceutically effective amount of pharmaceutical or hydrophobic cosmetic product, added to a pharmaceutically effective amount of vehicles, diluents, solvents and / or excipients, pharmaceutically acceptable and be directed to the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic application.
Adicionalmente é objeto da presente invenção o uso da composição 20 farmacêutica, sendo que o produto farmacêutico hidrofóbico ser, mais especificamente, um antibiótico, um anti-inflamatório, bloqueadores alfa e beta, drogas citotóxicas, antiangiogênicas, anti-câncer e suas misturas, que tenham um diâmetro menor que a cavidade da ciclodextrina e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, 25 antioxidante e antiparasitária. Em uma modalidade preferencial o produto farmacêutico hidrofóbico uma quantidade farmaceuticamente eficaz de fármacos com atividade antitumoral, adicionado a uma quantidade farmaceuticamente eficaz de veículos, diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, 30 antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária. Em uma modalidade mais preferencial é previsto na presente invenção o uso da composição farmacêutica, sendo que o produto farmacêutico hidrofóbico é, mais especificamente,In addition, the use of the pharmaceutical composition is an object of the present invention, the hydrophobic pharmaceutical product being, more specifically, an antibiotic, an anti-inflammatory, alpha and beta blockers, cytotoxic, antiangiogenic drugs, anti-cancer and their mixtures, which have a smaller diameter than the cyclodextrin cavity and be directed to the manufacture of medications with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic applications. In a preferred embodiment, the hydrophobic pharmaceutical product is a pharmaceutically effective amount of drugs with antitumor activity, added to a pharmaceutically effective amount of pharmaceutically acceptable vehicles, diluents, solvents and / or excipients and directed to the manufacture of drugs with antitumor therapeutic application, 30 antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic. In a more preferred embodiment, the use of the pharmaceutical composition is provided for in the present invention, the hydrophobic pharmaceutical product being, more specifically,
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 20/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 20/31
11/12 uma quantidade farmaceuticamente eficaz de moléculas de violaceína, adicionado a uma quantidade farmaceuticamente eficaz de veículos, diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, 5 antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.11/12 a pharmaceutically effective amount of violacein molecules, added to a pharmaceutically effective amount of pharmaceutically acceptable vehicles, diluents, solvents and / or excipients and to be directed towards the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, 5 antiulcerogenic application, antioxidant and antiparasitic.
Em outra modalidade preferencial é objeto da presente invenção o uso da composição farmacêutica, sendo que o produto cosmético hidrofóbico é, mais especificamente, uma quantidade farmaceuticamente eficaz de moléculas de um antioxidante, adicionado a uma quantidade farmaceuticamente eficaz de veículos, 10 diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.In another preferred embodiment, the use of the pharmaceutical composition is the object of the present invention, the hydrophobic cosmetic product being, more specifically, a pharmaceutically effective amount of molecules of an antioxidant, added to a pharmaceutically effective amount of vehicles, 10 diluents, solvents and / or excipients, pharmaceutically acceptable and be directed to the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic application.
Ainda é previsto o uso da composição farmacêutica, sendo que o veículo utilizado é uma solução aquosa para solubilizar o composto ciclodextrina conjugada a uma 15 nanopartícula de ouro através de um ditiol para encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico, conter diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis, para aplicação terapêutica e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e 20 antiparasitária.The use of the pharmaceutical composition is still foreseen, and the vehicle used is an aqueous solution to solubilize the cyclodextrin compound conjugated to a gold nanoparticle through a dithiol to encapsulate a pharmaceutically effective amount of hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product, contain diluents, pharmaceutically acceptable solvents and / or excipients for therapeutic application and to be directed to the manufacture of drugs with therapeutic anti-tumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and anti-parasitic application.
Adicionalmente é objeto da presente patente de invenção o uso da composição farmacêutica, de acordo com todas as reivindicações acima, caracterizada pela ciclodextrina ser, mais especificamente, uma β-ciclodextrina capaz de encapsular uma quantidade farmaceuticamente eficaz de produto farmacêutico ou cosmético hidrofóbico 25 com um diâmetro de cerca de 2,0 a cerca de 4,0 nm, conterem uma quantidade farmaceuticamente eficaz de veículos, diluentes, solventes e/ou excipientes, farmaceuticamente aceitáveis e ser direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária.In addition, the use of the pharmaceutical composition according to all of the above claims is an object of the present patent, characterized in that the cyclodextrin is, more specifically, a β-cyclodextrin capable of encapsulating a pharmaceutically effective amount of hydrophobic pharmaceutical or cosmetic product 25 diameter from about 2.0 to about 4.0 nm, contain a pharmaceutically effective amount of pharmaceutically acceptable vehicles, diluents, solvents and / or excipients and be directed towards the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic application , antioxidant and antiparasitic.
É também objeto da presente invenção o uso da composição farmacêutica, direcionado para manufatura de medicamentos com aplicação terapêutica antitumoral, antibacteriana, antiviral, antiulcerogenica, antioxidante e antiparasitária, apresentandoIt is also the object of the present invention to use the pharmaceutical composition, aimed at the manufacture of drugs with antitumor, antibacterial, antiviral, antiulcerogenic, antioxidant and antiparasitic therapeutic applications, presenting
Petição 870190018957, de 25/02/2019, pág. 21/31Petition 870190018957, of 02/25/2019, p. 21/31
12/12 sua citotoxicidade específica em células leucêmicas e fibrobastos e uma redução na citotoxicidade em moléculas normais.12/12 its specific cytotoxicity in leukemic cells and fibroblasts and a reduction in cytotoxicity in normal molecules.
Adicionalmente é previsto na presente invenção o uso da Composição farmacêutica, para manufatura de medicamentos que apresentam sua citotoxicidade 5 específica em células leucêmicas e fibrobastos e apresentam uma redução na citotoxicidade em moléculas normais.In addition, the use of the Pharmaceutical Composition is foreseen in the present invention, for the manufacture of drugs that have their specific cytotoxicity in leukemic cells and fibroblasts and show a reduction in cytotoxicity in normal molecules.
A descrição acima da presente invenção foi apresentada com o propósito de ilustração e descrição. Além disso, a descrição não tenciona limitar a invenção à forma aqui revelada. Em conseqüência, variações e modificações compatíveis com os 10 resultados acima e a habilidade ou conhecimento da técnica relevante, estão dentro do escopo da presente invenção.The above description of the present invention has been presented for the purpose of illustration and description. In addition, the description is not intended to limit the invention to the form disclosed herein. As a result, variations and modifications compatible with the above 10 results and the skill or knowledge of the relevant technique are within the scope of the present invention.
As modalidades acima descritas tencionam melhor explicar os modos conhecidos para a prática da invenção e para permitir que os técnicos na área utilizem à invenção em tais, ou outras, modalidades e com várias modificações necessárias pelas aplicações 15 específicas ou usos da presente invenção. É a intenção que a presente invenção inclua todas as modificações e variações da mesma, dentro do escopo descrito no relatório e nas reivindicações anexas.The modalities described above are intended to better explain the known methods for practicing the invention and to allow those skilled in the art to use the invention in such or other modalities and with various modifications necessary for the specific applications or uses of the present invention. It is the intention that the present invention includes all modifications and variations thereof, within the scope described in the report and in the appended claims.
Claims (42)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BRPI0502657A BRPI0502657B8 (en) | 2005-06-28 | 2005-06-28 | pharmacological use of cyclodextrin-au-thiol-derived nanoparticles / hydrophobic compound as antitumor, antibacterial, antiviral and/or antiparasitic, its process of obtaining and its formulation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BRPI0502657A BRPI0502657B8 (en) | 2005-06-28 | 2005-06-28 | pharmacological use of cyclodextrin-au-thiol-derived nanoparticles / hydrophobic compound as antitumor, antibacterial, antiviral and/or antiparasitic, its process of obtaining and its formulation |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0502657A BRPI0502657A (en) | 2007-05-08 |
| BRPI0502657B1 true BRPI0502657B1 (en) | 2019-05-07 |
| BRPI0502657B8 BRPI0502657B8 (en) | 2021-05-25 |
Family
ID=38007743
Family Applications (1)
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| BRPI0502657A BRPI0502657B8 (en) | 2005-06-28 | 2005-06-28 | pharmacological use of cyclodextrin-au-thiol-derived nanoparticles / hydrophobic compound as antitumor, antibacterial, antiviral and/or antiparasitic, its process of obtaining and its formulation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
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Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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-
2005
- 2005-06-28 BR BRPI0502657A patent/BRPI0502657B8/en active IP Right Grant
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BRPI0502657A (en) | 2007-05-08 |
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