BR122020004719B1 - Método de sintetização de compostos - Google Patents

Abstract

A presente invenção refere-se aos compostos de diaril-hidantoína, incluindo diariltioidantoínas, e métodos para a sua sintetização e seu uso no tratamento de câncer da próstata refratário ao hormônio.

Description

[001] Divisão do PI0610359-6, depositado em 29.03.2006.

CAMPO DA INVENÇÃO

[002] A presente invenção refere-se aos compostos de diaril- hidantoína incluindo diariltioidantoínas, e métodos para a sua sintetização e seu uso no tratamento de câncer da próstata refratário ao hormônio. Este pedido reivindica a prioridade dos pedidos provisórios U.S. que levam os números de série 60/756.552, 60/750.351 e 60/680.835, cujos relatórios descritivos são por meio deste incorporados por referência.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[003] O câncer da próstata é a incidência mais comum de câncer e a segunda causa principal de morte por câncer em homens ocidentais. Quando o câncer é confinado localmente, a doença pode ser curada por cirurgia ou radiação. No entanto, 30% de tal câncer reincide com a doença metastática longínqua e os outros possuem doença avançada em diagnósticos. A doença avançada é tratada por castração e/ou administração de antiandrogênios, a assim chamada terapia de privação de androgênio. A castração diminui os níveis de circulação de androgênios e reduz a atividade do receptor de androgênio (AR). A administração de antiandrogênios bloqueia a função do AR mediante a concorrência longe da ligação de androgênio, portanto, reduzindo a atividade do AR. Embora inicialmente eficazes, esses tratamentos rapidamente falham e o câncer transfoma-se em refratário ao hormônio.

[004] Recentemente, superexpressão de AR foi identificada e confirmada como uma causa de câncer da próstata refratário ao hormônio. Vide Chen, C.D., Welsbie, D.S., Tran, C., Baek, S.H., Chen, R., Vessella, R., Rosenfeld, M.G., and Sawyers, C.L., Molecular determinants of resistance to antiandrogen therapy, Nat. Med., 10: 33- 39, 2004, que é por meio deste incorporado por referência. A superexpressão de AR é suficiente para causar a progressão do hormônio sensível ao câncer da próstata refratário ao hormônio, sugerindo que melhores inibidores do AR do que os fármacos correntes podem diminuir o progresso do câncer da próstata. Foi demonstrado que o AR e sua ligação de ligando são necessários para o desenvolvimento de câncer da próstata refratário ao hormônio, indicando que o AR é ainda um alvo para esta doença. Foi também demonstrado que a superexpressão de AR converte os antiandrogênios dos antagonistas em agonistas no câncer da próstata refratário ao hormônio (um antagonista do AR inibe a atividade do AR e um agonista do AR estimula a atividade do AR). Os dados deste trabalho esplicam o porquê que a castração e antiandrogênios deixam de prevenir a progressão do câncer da próstata e revela propriedades não reconhecidas de câncer da próstata refratário ao hormônio.

[005] Bicalutamida (marca nominal: Casodex) é o anti-androgênio mais comumente utilizado. Embora tenha um efeito inibidor sobre o AR no câncer da próstata sensível ao hormônio, deixa de suprimir o AR quando o câncer se torna refratário ao hormônio. Duas fragilidades dos antiandrogênios correntes são consideradas responsáveis pelo fracasso de impedir a progressão do câncer da próstata do estágio sensível ao hormônio para a doença refratária ao hormônio e eficazmente tratar o câncer da próstata refratário ao hormônio. Uma é suas atividades antagonísticas fracas e a outra é suas atividades agonísticas fortes quando o AR for superexpresso no câncer da próstata refratário ao hormônio. Portanto, melhores inibidores de AR com atividades antagonísticas mais potentes e atividades agonísticas mínimas são necessários para retardar a progressão da doença e tratar o câncer da próstata refratário ao hormônio fatal.

[006] Os anti-androgênios não esteroidais, tais como bicalutamida, têm sido preferíveis sobre os compostos esteroidais com relação ao câncer da próstata porque eles são mais seletivos e possuem menos efeitos colaterais. Esta classe de compostos foi descrita em muitas patentes tais como a Patente U.S. número 4.097.578, Patente U.S. No 5.411.981, Patente U.S. No 5.705.654, Pedidos Internacionais PCT WO 97/00071 e WO 00/17163, e Pedido de Patente Publicada U.S. número 2004/0009969, todos dos quais são por meio deste incorporados por referência.

[007] A Patente U.S. No 5.434.176 inclui reivindicações extensas que abrangem um número muito grande de compostos, mas as vias sintéticas são apenas apresentadas com relação a uma fração pequena destes compostos e os dados farmacológicos são apenas apresentados para dois deles, e uma pessoa versada na técnica não pode facilmente visionar outros compostos específicos.

[008] Pela razão do mecanismo de câncer da próstata refratário ao hormônio não ter sido conhecido, não existe nenhum sistema biológico para testar estes compostos descritos nestas patentes com relação ao seu efeito sobre o câncer da próstata refratário ao hormônio. Particularmente, a capacidade da superexpressão de AR no câncer da próstata refratário ao hormônio em comutar os inibidores dos antagonistas em agonistas não foi reconhecida. Algumas novas propriedades do câncer da próstata refratário ao hormônio são relatadas nos pedidos PCT US04/422221 e US05/05529, que são por meio deste incorporados por referência. O Pedido Internacional PCT US05/05529 apresentou uma metodologia para identificar as características do antagonista e agonista receptores de androgênio dos compostos. No entanto, para cada composto produzido, o tempo de consumo do processo para determinar as características de antagonista e agonista de um composto deve ser determinado. Isto é, não existe nenhum método para prognosticar exatamente as características relevantes ao tratamento de câncer da próstata a partir da estrutura química de um composto isoladamente.

[009] Existe uma necessidade para novos compostos de tioidantoína tendo propriedades farmacológicas desejáveis, e vias sintéticas para a sua preparação. Pela razão das atividades serem sensíveis às pequenas mudanças estruturais, um composto pode ser eficaz no tratamento de câncer da próstata, enquanto um segundo composto pode ser ineficaz, mesmo se ele difere do primeiro composto apenas levemente, a supor pela substituição de um substituinte único.

[0010] A identificação dos compostos que possuem potência elevada para antagonizar a atividade de androgênio, e que possuem atividade antagonística mínima deve dominar o câncer da próstata refratário ao hormônio (HRPC) e evitar e diminuir a velocidade da progressão do câncer da próstata sensível ao hormônio (HRPC). Portanto, existe uma necessidade na técnica para a identificação de moduladores seletivos do receptor de androgênio tais como moduladores que são não esteroidais, não tóxicos e seletivos do tecido.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0011] A invenção fornece uma série de compostos tendo atividades antagonísticas fortes com atividades agonísticas mínimas contra o AR. Estes compostos inibem o desenvolvimento do câncer da próstata refratário ao hormônio.

[0012] A invenção inclui um composto tendo a fórmula em que X é selecionado do grupo consistindo em trifluormetila e iodo, em que W é selecionado do grupo consistindo em O e NR5, em que R5 é selecionado do grupo consistindo em H, metila, e em que D é S ou O e E são N ou O e G é alquila, arila, alquila substituída ou arila substituída; ou D é S ou O e E-G juntos são C1-C4 alquila inferior, em que R1 e R2 juntos compreendem oito ou menos átomos de carbono e são selecionados do grupo consistindo em alquila, alquila substituída incluindo haloalquila, e, juntamente com o carbono ao qual eles estão ligados, um grupo de cicloalquila ou cicloalquila substituída, em que R3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogêneo, metila, C1-C4 alcóxi, formila, haloacetóxi, trifluormetila, ciano, nitro, hidroxila, fenila, amino, metilcarbamoíla, metoxicarbonila, acetamido, metanossulfonamino, metanossulfonila, 4- metanossulfonil-1-piperazinila, piperazinila, e C1-C6 alquila ou alquenila opcionalmente substituída com hidroxila, metoxicarbonila, ciano, amino, amido, nitro, carbamoíla ou carbamoíla substituída incluindo metilcarbamoíla, dimetilcarbamoíla e hidroxietilcarbamoíla, em que R4 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, halogêneo, alquila, e haloalquila, e em que R3 não é metilaminometila ou dimetilaminometila.

[0013] R5 pode ser

[0014] O composto pode ter a fórmula em que R3 é selecionado do grupo consistindo em hidróxi, metilcarbamoíla, metilcarbamoilpropila, metilcarbamoiletila, metilcarbamoilmetila, metilsulfonacarbamoilpropila, metilaminometila, dimetilaminometila, metilsulfoniloximetila, carbamoilmetila, carbamoiletila, carboximetila, metoxicarbonilmetila, metanossulfonila, 4- ciano-3-trifluormetilfenilcarbamoilpropila, carboxipropila, 4- metanossulfonil-1-piperazinila, piperazinila, metoxicarbonila, 3-ciano-4- trifluormetilfenilcarbamoíla, hidroxietilcarbamoiletila, e hidroxietoxicarboniletila, e em que R10 e R11 são ambos H ou, respectivamente, F e H, ou H e F. Em certas modalidades, R10 e R11 podem ambos ser H ou, respectivamente, F e H. R3 pode ser metilcarbamoíla.

[0015] Em algumas modalidades, R1 e R2 são independentemente metila ou, juntamente com o carbono ao qual eles estão ligados, um grupo de cicloalquila de 4 a 5 átomos de carbono, e R3 é selecionado do grupo consistindo em carbamoíla, alquilcarbamoíla, carbamoilalquila, e alquilcarbamoilalquila, e R4 é H ou F ou R4 é 3-flúor.

[0016] Em outras modalidades, R1 e R2 são independentemente metila ou, juntamente com o carbono ao qual eles estão ligados, um grupo de cicloalquila de 4 a 5 átomos de carbono, R3 é selecionado do grupo consistindo em ciano, hidróxi, metilcarbamoíla, alquila substituída por metilcarbamoíla, alquila substituída por metilsulfonacarbamoíla, metilaminometila, dimetilaminometila, metilsulfoniloximetila, metoxicarbonila, acetamido, metanossulfonamido, alquila substituída por carbamoíla, carboximetila, metoxicarbonilmetila, metanossulfonila, alquila substituída por 4-ciano-3-trifluormetilfenilcarbamoíla, alquila substituída por carbóxi, 4-(1,1-dimetiletóxi) carbonil)-1-piperazinila, 4- metanossulfonil-1-piperazinila, piperazinila, alquila substituída por hidroxietilcarbamoíla, alquila substituída por hidroxietoxicarbonila, e 3- ciano-4-trifluormetilfenilcarbamoíla, e R4 é F.

[0017] Os compostos da invenção podem ter a fórmula em que R3 é selecionado do grupo consistindo em metilcarbonila, metoxicarbonila, acetamido e metanossulfonamido, e R4 é selecionado do grupo consistindo em F e H.

[0018] Compostos da invenção podem ter a fórmula em que R4 é selecionado do grupo consistindo em F e H.

[0019] Nas modalidades da invenção, em que R1 e R2 juntamente com o carbono ao qual eles estão ligados são

[0020] Os compostos da invenção podem ser aqueles listados nas Série 1, Série 2, Série 3 e/ou Série 4, abaixo. Os compostos particulares da invenção incluem

[0021] A invenção também fornece uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com qualquer um dos compostos precedentes ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

[0022] A invenção abrange um método para o tratamento de um distúrbio hiperproliferativo compreendendo a administração de uma tal composição farmacêutica a um indivíduo com necessidade de tal tratamento, desse modo tratando o distúrbio hiperproliferativo. O distúrbio hiperproliferativo pode ser o câncer da próstata refratário ao hormônio. A dosagem pode estar na fiaxa de cerca de 0,001 mg per kg de peso corporal per dia a cerca de 100 mg per kg de peso corporal per dia, de cerca de 0,01 mg per kg de peso corpora per dia a cerca de 100 mg per kg de peso corporal per dia, de cerca de 0,1 mg per kg de peso corporal per dia a cerca de 10 mg per lg de peso corporal per dia, ou ao redor de 1 mg per kg de peso corporal per dia.

[0023] O composto pode ser administrado por injeção intravenosa, por injeção dentro do tecido, intraperitoneal, oral ou nasalmente. A composição pode ter uma forma selecionada do grupo consistindo em uma solução, dispersão, suspensão, pó, cápsula, comprimido, pílula, cápsula de liberação por tempo, comprimido de liberação por tempo e pílula de liberação por tempo.

[0024] O composto administrado pode ser selecionado do grupo consistindo em RD 162', RD162", RD 169 ou RD170, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. O composto administrado pode ser RD 162 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0025] A invenção fornece um método de sintetização de um composto de diarila de fórmula: que compreende a mistura do Composto I composto I com o Composto II composto II em um primeiro solvente polar para formar uma mistura, aquecimento da mistura, adição de um segundo solvente polar, o mesmo ou diferente do primeiro solvente polar, e um ácido aquoso na mistura, submeter a refluxo a mistura, esfriamento da mistura e combinação com água, e separação do composto de diarila da mistura, em que R51 compreende uma cadeia de alquila de 1 a 4 átomos de carbono, R52 é selecionado do grupo consistindo em ciano, hidróxi, metilcarbamoíla, alquila substituída por metilcarbamoíla, alquila substituída por metilsulfonacarbamoíla, metilaminometila, dimetilaminometila, metilsulfoniloximetila, metoxicarbonila, 3-ciano-4- trifluormetilfenilcarbamoíla, alquila substituída por carbamoíla, carboximetila, metoxicarbonilmetila, metanossulfonila, alquila substituída por 4-ciano-3-trifluormetilfenilcarbamoíla, alquila substituída por carbóxi, 4-metanossulfonil-1-piperazinila, piperazinila, alquila substituída por hidroxietilcarbamoíla e alquila substituída por hidroxietoxicarbonila, e R53 é selecionado do grupo consistindo em F e H.

[0026] R51 pode compreender uma cadeia de alquila de 1 a 2 átomos de carbono, R52 pode ser selecionado do grupo consistindo em carbamoíla e metilcarbamoíla, e R53 pode ser F.

[0027] A invenção fornece métodos de sintetização de um composto da fórmula: que compreende a mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila e N-metil-4-(1-cianociclobutilamimo)-2-fluorbenzamida em dimetilformamida para formar uma primeira mistura, aquecimento da primeira mistura para formar uma segunda mistura, adição de álcool e ácido na segunda mistura para formar uma terceira mistura, submeter a refluxo a terceira mistura para formar uma quarta mistura, esfriamento da quarta mistura, combinação da quarta mistura com água e extração de uma camada orgânica; isolamento do composto da camada orgânica.

[0028] Da mesma maneira, a invenção fornece um método de sintentização de RD162' que compreende a mistura de N-Metil-2-flúor- 4-(1,1-dimetil-cianometil)-aminobenzamida e 4-Isotiocianato-2- trifluormetilbenzonitrila em DMF e aquecimento para formar uma primeira mistura, e processamento como acima.

[0029] A invenção também fornece um método de sintetização de RD162", que compreende a mistura de N-Metil-2-flúor-4-(1- cianociclopentil) aminobenzamida, 4-isotiocianato-2-trifluormetil benzonitrila e DMF e aquecimento sob refluxo para formar uma primeira mistura, e processamento como acima.

[0030] A invenção ainda fornece um método de sintetização de RD 169, que compreende a mistura de N,N-Dimetil 4-[4-(1- cianociclobutilamino) fenil]butanamida, 4-isotiocianato-2-trifluormetil benzonitrila e DMF e aquecimento sob refluxo para formar uma primeira mistura, e processamento como acima.

[0031] A invenção fornece um método de sintetização de RD 170, que compreende a mistura de DMSO, diclorometano e cloreto de oxalila para formar uma primeira mistura, adição de 4-(4-(7-(4-Ciano-3- (trifluormetil) fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]octan-5- il)fenil)butanamida à primeira mistura para formar uma segunda mistura; adição de trietilamina à segunda mistura para formar uma terceira mistura; aquecimento da terceira mistura e extinção com NH4Cl aquoso para formar uma quarta mistura; extração de uma camada orgânica da quarta mistura; e isolamento do composto da camada orgânica.

[0032] Outros compostos de acordo com a invenção possuem a fórmula em que R5 é CN ou NO2 ou SO2R11, em que R6 é CF3, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquila halogenada, alquenila halogenada, aquinila halogenada, halogêneo, em que A é enxofre (S) ou oxigênio (O), em que B é O ou S ou NR8, em que R8 é selecionado do grupo consistindo em H, metila, arila, arila substituída, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocíclica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, cicloalquila substituída, SO2R11, NR11R12, (CO)OR11, (CO)NR11R12, (CO)R11, (CS)R11, (CS)NR11R12, (CS)OR11, em que D é S ou O e E é N ou O e G é alquila, arila, alquila substituída ou arila substituída; ou D é S ou O e E-G juntos são C1-C4 alquila inferior, em que R1 e R2 são independentemente alquila, haloalquila, hidrogênio, arila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquenila halogenada, alquinila halogenada, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocílica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, cicloalquila substituída, ou R1 e R2 são conectados para formar um ciclo que pode ser heterocíclico, heterocíclico substituído, em que X é carbono ou nitrogênio e pode estar em qualquer posição no anel, e em que R3, R4, e R7 são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, halogêneo, metila, metóxi, formila, haloacetóxi, trifluormetila, ciano, nitro, hidroxila, fenila, amino, metilcarbamoíla, alquila substituída por metilcarbamoíla, alquila substituída por dimetilcarbamoíla, metoxicarbonila, acetamido, metanossulfonamino, alquila substituída por carbamoíla, metanossulfonila, 4-metanossulfonil-1-piperazinila, piperazinila, alquila substituída por hidroxietilcarbamoíla, alquila substituída por hidroxila, alquenila substituída por hidroxila, alquenila substituída por carbamoíla, alquila substituída por metoxicarbonila, alquila substituída por ciano, arila, arila substituída, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquenila halogenada, alquinila halogenada, SO2R11, NR11R12, NR12(CO)OR11, MH(CO)NR11R12, NR12(CO)R11, O(CO)R11, O(CO)OR11, O(CS)R11, NR12(CS)R11, NH(CS)NR11R12, NR12(CS)OR11, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocíclica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, cicloalquila substituída, haloalquila, alquila substituída por metilsulfonacarbamoíla, metilaminometila, dimetilaminometila, metilsulfoniloximetila, metoxicarbonila, acetamido, metanossulfonamido, alquila substituída por carbamoíla, carboximetila, metoxicarbonilmetila, metanossulfonila, alquila substituída por 4-ciano- 3-trifluormetilfenilcarbamoíla, alquila substituída por carbóxi, 4-(1,1- dimetiletóxi)carbonil)-1-piperazinila, alquila substituída por hidroxietilcarbamoíla, alquila substituída por hidroxietoxicarbonila, 3- ciano-4-trifluormetilfenilcarbamoíla, em que R11 e R12 são independentemente hidrogênio, arila, aralquila, aralquila substituída, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquila halogenada, alquenila halogenada, alquinila halogenada, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocíclica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, ou cicloalquila substituída, ou R11 e R12 podem ser conectados para formar um ciclo que pode ser heterocíclico aromático ou não aromático, heterocíclico aromático substituído, cicloalquila ou cicloalquila substituída.

[0033] Tais compostos possuem atividade de antagonista do receptor de androgênio substancial e nenhuma atividade agonista substancial sobre as células de câncer da próstata refratário ao hormônio.

[0034] A invenção abrange um método que compreende fornecer pelo menos um tal composto, medir a inibição da atividade do receptor de androgênio para o composto e determinar se a inibição está acima de um primeiro nível predeterminado, medir o estímulo da atividade do receptor de androgênio nas células de câncer refratário ao hormônio com relação ao composto e determinar se o estímulo está abaixo de um segundo nível predeterminado, e selecionar o composto se a inibição estiver acima do primeiro nível predeterminado e se o estímulo está abaixo do segundo nível predeterminado. Os níveis predeterminados podem ser aqueles de bicalutamida. A etapa de medir a inibição pode compreender a medição da concentração inibidora (IC50) em um sistema repórter de resposta do AR ou um sistema de secreção do antígeno específico da próstata. A etapa de medir o estímulo pode compreender a medição da indução dobrada mediante o aumento das concentrações em um sistema repórter de resposta do AR ou um sistema de secreção de antígeno específico da próstata. O método de medir a inibição e/ou o estímulo pode compreender a medição de um efeito do composto sobre o crescimento do tumor em um animal.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0035] As seguintes figuras apresentam os resultados do exame farmacológico de certos compostos.

[0036] A Figura 1 é um gráfico representando que a bicalutamida desempenha um efeito agonístico sobre o LNCaP-AR. As atividades agonísticas de bicalutamida em câncer da próstata refratário ao hormônio superexpresso ao AR. As células de LNCaP com AR superexpresso foram tratadas com o aumento das concentrações de DMSO como veículo ou bicalutamida na ausência de R1881. As atividades de repórter da resposta de AR foram medidas.

[0037] A Figura 2 é um gráfico que representa um ensaio antagonístico de bicalutamida sobre o LNCaP-AR. Atividades agonísticas de bicalutamida no câncer da próstata sensível ao hormônio. As células de LNCaP foram tratadas com o aumento das concentrações de DMSO como veículo ou bicalutamida na ausência de R1 881. As atividades de repórter da resposta de AR foram medidas.

[0038] A Figura 3 é um gráfico que representa o efeito dos compostos sobre LNCaP-AR.

[0039] A Figura 4 é um gráfico que representa o efeito dos compostos sobre LNCaP-AR.

[0040] A Figura 5 é um gráfico que representa o efeito de inibição sobre LNCaP-AR.

[0041] Nas Figuras de 6 a 10, o exemplo 5-3b é RD7 e o exemplo 7-3b é RD37.

[0042] Figura 6. Inibição do crescimento de células LNCaP superexpressas com o AR. O androgênio enfraqueceu as células LNCaP com o AR superexpresso e foram tratadas com o aumento das concentrações de DMSO como veículo ou substâncias de teste na presença de 100 pM de R1881. Após 4 dias de incubação, o crescimento celular foi medido por ensaio MTS.

[0043] Figura 7. Efeito inibidor sobre o crescimento do modelo de enxerto xenoblástico de LNCaP superexpressão por AR. Camundongos com tumores de enxerto xenoblástico de LN-AR estabelecidos foram escolhidos a esmo e tratados com os compostos indicados oralmente uma vez ao dia. O tamanho de tumor foi medido por calibre. (A), os camundongos foram tratados com 1 mg per kg de bicalutamida, exemplo 7-3b, ou veículo durante 44 dias. (B), os camundongos foram tratados com veículo, 0,1, 1, ou 10 mg per kg de exemplo 7-3b durante 44 dias.

[0044] Figura 8. Efeito inibidor sobre a expressão de PSA do modelo de enxerto xenoblástico de LNCaP superexpresso por AR. Os camundongos foram tratados com veículo, 0,1, 1 ou 10 mg per kg de exemplo 7-3b durante 44 dias oralmente uma vez ao dia. Os tumores foram tirados dos camundongos após 44 dias de tratamento, o lisato de tumor foi extraído, e o nível de PSA no lisato de tecido foi determinado por ELISA.

[0045] Figura 9. Efeito inibidor sobre o crescimento e PSA do modelo de enxerto xenoblástico de LNCaP superexpresso por AR. Os camundongos com tumores estabelecidos foram escolhidos a esmo e tratados com 1 mg per kg de bicalutamida, exemplo 7-3b, ou veículo durante 17 dias oralmente uma vez ao dia. (A), o tamanho do tumor foi medido por calibre. (B), os tumores foram tirados dos camundongos após 17 dias de tratamento, o lisato de tumor foi extraído, e o nível de PSA no lisato de tecido foi determinado por ELISA.

[0046] Figura 10. Efeito inibidor sobre o crescimento de células de câncer da próstata sensível ao hormônio. Androgênio matou de fome as células de LNCaP e foram tratadas com o aumento das concentrações de DMSO como veículo ou substâncias de teste na presença de 1 pM de R1881. Após 4 dias de incubação, o crescimento celular foi medido por análise de MTS.

[0047] A Figura 11 é um gráfico de tamanho de tumor. As células de LNCaP que superexpressam o AR foram injetadas nos flancos de camundongos SCID castrados, subcutaneamente. Quando os tumores alcançaram 100 mm cúbico, eles foram escolhidos a esmo em grupos de cinco. Cada grupo tinha nove animais. Após eles alcançarem este volume de tumor, eles foram administrados oralmente com veículo, bicalutamida ou RD162 em 10 ou 50 mg/kg todos os dias. Os tumores foram medidos tridimensionalmente, largura, comprimento e profundidade, usando um compasso de calibre.

[0048] A Figura 12 descreve os resultados experimentais de tamanho de tumor. No dia 18, os animais tiveram imagens tiradas através de uma câmara CCD ótica, 3 horas após a última dose de tratamento. Um ROI induziu o tumor com relação a medição de atividade de luciferase em fóton/segundo. O painel direito é uma representação das medições de ROI.

[0049] A Figura 13 é um gráfico que apresentam as curvas farmacocinéticas de RD162 a partir da administração intravenosa (curva superior) e oral (curva inferior).

[0050] A Figura 14 é um gráfico que apresenta a absorção de PSA medida para células LN-AR após o tratamento com várias doses de vários compostos.

[0051] A Figura 15 apresenta uma tabela que fornece várias características de compostos. A Figura 15 também apresenta um gráfico que fornece as características farmacocinéticas de vários compostos em termos de concentração de soro de composto como uma função de tempo.

[0052] A Figura 16 é um diagrama que apresenta o peso da próstata após o tratamento com vários compostos. 10, 25 ou 50 mg de composto per quilograma de peso corporal foram administrados per dia, como indicado pelo rótulo de uma barra. Os compostos foram administrados em camundongos FVB saudáveis. Após o tratamento com o composto durante 14 dias, o peso do trato urogenital foi determinado pela remoção e pesagem das semivesículas, próstata e bexiga. Três camundongos foram administrados com um dado composto para obter os dados apresenados por uma barra no diagrama. Um grupo de camundongos não foi tratado com um composto: os dados são apresentados na barra rotulada "não tratada". Um outro grupo de camundongos foi tratado apenas com solução de veículo: dos dados são apresentados na barra rotulada "veículo".

[0053] A Figura 17 é um gráfico que apresenta uma análise de PSA executada junto do protocolo experimental apresentado na figura 6.

[0054] A Figura 18 é um gráfico que apresenta o efeito de vários regimes de dose de RD162 sobre o volume de tumor.

[0055] A Figura 19 é um gráfico que apresenta a taxa de emissão de fóton com atividade de luciferase no dia 17 em relação à taxa no dia 0 após o tratamento com RD162 em doses de 0,1, 1 e 10 mg per quilograma de peso corporal per dia e sem tratamento com RD162.

[0056] A Figura 20 apresenta os resultados de uma experiência em que os camundongos SCID foram injetados com a linhagem celular LN- AR (HR) para induzir o crescimento do tumor. Um grupo de camundongos foi tratado com o composto RD162 em uma dose de 10 mg per quilograma de peso corporal per dia; o outro grupo de camundongos foi tratado apenas com solução de veículo. (A) O volume relativo do tumor como uma função de tempo apresentado para cada grupo de camundongos. (B) Imagens de cada grupo de camundongos com emissão de fóton associada com a atividade de luciferase no dia 31 apresentado como contornos coloridos. (C) Taxa de emissão de fóton associada com a atividade de luciferase apresentada em vários momentos para cada grupo de camundongos.

[0057] A Figura 21 é um gráfico que apresenta a absorção de PSA associada com as células LN-AR tratadas com várias concentrações de RD162, RD162', RD162" e RD170 e solução de veículo.

[0058] A Figura 22 é um gráfico que apresenta a absorção de PSA associada com células LN-CaP tratadas com várias concentrações de RD37, RD131, RD162, bicalutamida e DMSO.

[0059] A Figura 23 apresenta os resultados de uma experiência conduzida com camundongos não transgênicos tipo silvestres (WT), camundongos transgênicos com luciferase castrados (Cast), e camundongos transgênicos com luciferase não castrados (Intac). Dados são mostrados com relação aos camundongos transgênicos com luciferase castrados tratados com um grânulo de testosterona implantado que produz 12,5 mg per quilograma de peso corporal com um período de liberação de 90 dias (T/Cast), e dados são apresentados com relação aos camundongos transgênicos com luciferase não castrados tratados com grânulo de testosterona implantado que produz 12,5 mg per quilograma de peso corporal por um período de liberação de 90 dias (Intact+T). Dados são mostrados com relação aos camundongos transgênicos com luciferase castrados tratados com o grânulo de testosterona implantado e com bicalutamida (BIC+T/Cast) ou com RD162 (RD162+T/ Cast) em 10 mg per quilograma de peso corporal per dia. (A) Peso do trato urogenital em 14 dias. (B) Taxa de emissão de fóton em 14 dias. Em todos os casos, um estado doentio refratário ao hormônio não foi induzido.

[0060] A Figura 24 é um gráfico da atividade de luciferase da linhagem celular LIAR dosada com vários compostos administrados em concentrações que variam de 125 nmols a 1000 nmols.

[0061] A Figura 25 é um gráfico da atividade de luciferase com relação a linhagem celular LN/AR para vários compostos administrados em concentrações que variam de 1,25 a 10 μmol.

[0062] A Figura 26 é um gráfico da atividade de luciferase com relação a linhagem celular 4AR para vários compostos administrados em concentrações que variam de 1,25 a 10 μmol.

[0063] A Figura 27 é um gráfico dos níveis de PSA com relação a linhagem celular IAR para vários compostos administrados em concentrações que variam de 1,25 a 10 μmol.

[0064] A Figura 28 é um gráfico dos níveis de PSA com relação a linhagem celular LN/AR para vários compostos administrados em concentrações que variam de 125 nmols a 1000 nmols.

[0065] A Figura 29 é um gráfico da atividade de luciferase para vários compostos administrados em concentrações que variam de 125 nmols a 1000 nmols.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0066] As modalidades da invenção são debatidas com detalhes abaixo. Na descrição das modalidades, a terminologia específica é empregada em consideração a clareza. No entanto, a invenção não é destinada a ser limitada pela terminologia específica assim selecionada. Uma pessoa versada na técnica relevante reconhecerá que outras partes equivalentes podem ser empregadas e outros métodos desenvolvidos sem intervir no espírito e escopo da invenção. Todas as referências aqui citadas são incorporadas por referência como se cada uma tivesse sido individualmente incorporada.

Síntese de Compostos de Diaril-hidantoína.

[0067] A invenção fornece para a síntese do composto de diariltioidantoína tendo a fórmula com R71 incluindo uma cadeia de alquila de 1 a 4 átomos de carbono. Por exemplo, R72 pode ser carbamoíla, por exemplo, - (CO)NH2, ou metilcarbamoíla, por exemplo, -(CO)NHCH3. Um grupo de amida ligado no átomo de carbono da carbonila a uma outra estrutura é denominado um substituinte de carbamoíla. Por exemplo, R73 pode ser um flúor ou um átomo de hidrogênio. Isto é, um átomo de flúor pode ser ligado a qualquer um dos carbonos do anel de arila à direita que não são ligados ao substituinte R72 ou o átomo de nitrogênio. Alternativamente, nenhum átomo de flúor pode ser ligado aos carbonos do anel de arila à direita que não são ligados ao substituinte R72 ou ao átomo de nitrogênio. Por exemplo, um átomo de hidrogênio pode ser ligado a cada um dos carbonos do anel de arila à direita que não são ligados ao substituinte de R72 ou o átomo de nitrogênio.

[0068] Por exemplo, como ainda apresentado abaixo (vide, por exemplo, as figuras 3, 5, 11-13), o composto tendo a fórmula apresentou atividades antagonísticas surpreendentemente potentes com atividades agonísticas mínimas com relação ao AR superexpresso no câncer da próstata refratário ao hormônio.

[0069] Uma lista de vários compostos de acordo com esta invenção é apresentada nas Tabelas de 5 a 11. Os compostos são agrupados em séries, com os compostos da Série 1 a Série 3 sendo esperados serem superiores à bicalutamida para o tratamento de câncer de próstata, os compostos da Série 4 sendo comparáveis à bicalutamida em eficácia, e os compostos da Série 5 e 6 sendo pior do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata. Uma descrição mais detalhada do protocolo usado para ordenar os compostos em séries é apresentada abaixo.

Definições

[0070] Como aqui usado, o termo "alquila" significa cadeias de hidrocarboneto ramificadas ou não ramificadas, preferivelmente tendo cerca de 1 a cerca de 8 carbonos, tais como metila, etila, n-propila, iso- propila, n-butila, sec-butila, iso-butila, terc-butila, 2-metilpentil pentila, hexila, isoexila, heptila, 4,4-dimetil pentila, octila, 2,2,4-trimetilpentil e similares. "Alquila substituída" inclui um grupo de alquila opcionalmente substituída com um ou mais grupos funcionais que podem ser ligados a tais cadeias, tais como, hidroxila, bromo, flúor, cloro, iodo, mercapto ou tio, ciano, alquiltio, heterociclila, arila, heteroarila, carboxila, carbalcoíla, alquila, alquenila, nitro, amino, alcoxila, amido, e similares para formar grupos de alquila tais como trifluormetila, 3-hidroxiexila, 2- carboxipropila, 2-fluoretila, carboximetila, cianobutila e similares.

[0071] A não ser que de outra maneira indicada, o termo "cicloalquila" como aqui empregado isoladamente ou como parte de um outro grupo inclui grupos de hidrocarboneto cíclico saturados ou parcialmente insaturados (contendo 1 ou mais ligações duplas) contendo de 1 a 3 anéis, incluindo alquila monocíclica, alquila bicíclica e alquila tricíclica, contendo um total de 3 a 20 carbonos formando o anéis, preferivelmente de 3 a 10 carbonos, formando o anel e que pode ser fundido a 1 ou 2 anéis aromáticos como descrito para arila, que incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, cicloeptila, ciclooctila, ciclodecila e ciclododecila, cicloexenila. "Cicloalquila substituída" inclui um grupo de cicloalquila opcionalmente substituída com 1 ou mais substituintes tais como halogêneo, alquila, alcóxi, hidróxi, arila, arilóxi, arilalquila, cicloalquila, alquilamido, alcanoilamino, oxo, acila, arilcarbonilamino, amino, nitro, ciano, tiol e/ou alquiltio e/ou qualquer um dos substituintes incluídos na definição de "alquila substituída". Por exemplo,

[0072] e outras mais.

[0073] A não ser que de outra maneira indicada, o termo "alquenila" como aqui usado por si mesmo ou como parte de um outro grupo se refere aos radicais de cadeia reta ou ramificada de 2 a 20 carbonos, preferivelmente de 2 a 12 carbonos, e mais preferivelmente de 2 a 8 carbonos na cadeia normal, que incluem uma ou mais ligações duplas na cadeia normal, tais como vinila, 2-propenila, 3-butenila, 2-butenila, 4- pentenila, 3-pentenila, 2-hexenila, 3-hexenila, 2-heptenila, 3-heptenila, 4-heptenila, 3-octenila, 3-nonenila, 4-decenila, 3-undecenila, 4- dodecenila, 4,8,12-tetradecatrienila, e outras mais. "Alquenila substituída" inclui um grupo de alquenila opcionalmente substituída com um ou mais substituintes, tais como os substituintes incluídos acima na definição de "alquila substituída" e "cicloalquila substituída".

[0074] A não ser que de outra maneira indicada, o termo "alquinila" como aqui usado pode si mesmo ou como parte de outro grupo se refere aos radicais de cadeia reta ou ramificada de 2 a 20 carbonos, preferivelmente de 2 a 12 carbonos e mais preferivelmente de 2 a 8 carbonos na cadeia normal, que incluem uma ou mais ligações triplas na cadeia normal, tal como 2-propinila, 3-butinila, 2-butinila, 4-pentinila, 3-pentinila, 2-hexinila, 3-hexinila, 2-heptinila, 3-heptinila, 4-heptinila, 3- octinila, 3-noninila, 4-decinila, 3-undecinila, 4-dodecinila e similares. "alquinila substituída" inclui um grupo de alquinila opcionalmente substituída com um ou mais substituintes, tais como os substituintes incluídos acima na definição de "alquila substituída" e "cicloalquila substituída".

[0075] Os termos "arilalquila", "arilalquenila" e "arilalquinila" como usados isoladamente ou como parte de um outro grupo se referem aos grupos de alquila, alquenila e alquinila como descritos acima tendo um substituinte de arila. Exemplos representativos de arilalquila incluem, mas não são limitados a eles, benzila, 2-feniletila, 3-fenilpropila, fenetila, benzidrila e naftilmetila e similares. "Arilalquila substituída" inclui grupos de arilalquila em que a parte arila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes, tais como os substituintes incluídos acima na definição de "alquila substituída" e "cicloalquila substituída".

[0076] Os termos "arilalquila", "arilalquenila" e "arilalquinila" como usados isoladamente ou como parte de um outro grupo se referem aos grupos de alquila, alquenila e alquinila como descrito acima tendo um substituinte de arila. Exemplos representativos de arilalquila incluem, mas não são limitados a eles, benzila, 2-feniletila, 3-fenilpropila, fenetila, benzidrila e naftilmetila e similares. "Arilalquila substituída" inclui grupos de arilalquila em que a parte arila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes, tais como os substituintes incluídos acima na definição de "alquila substituída" e "cicloalquila substituída".

[0077] O termo "halogêneo" ou "halo" como aqui usada isoladamente ou como parte de outro grupo se refere à cloro, bromo, flúor e iodo.

[0078] Os termos "alquila halogenada", "alquenila halogenada" e "alquinila" como aqui usados isoladamente ou como parte de outro grupo se refere à "alquila", "alquenila" e "alquinila" que são substituídos por um ou mais átomos selecionados de flúor, cloro, bromo, flúor e iodo.

[0079] A não ser que de outra maneira indicada, o termo "arila" ou "Ar" como aqui empregado isoladamente ou como parte de outro grupo se refere aos grupos aromáticos monocíclicos e policíclicos contendo de 6 a 10 carbono na porção de anel (tal como fenila ou naftila incluindo 1-naftila e 2-naftila) e pode opcionalmente incluir de um a três anéis adicionais fundidos a um anel carbocíclico ou um anel heterocíclico (tal como anéis de arila, cicloalquila, heteroarila ou cicloeteroalquila).

[0080] "Arila substituída" inclui um grupo de arila opcionalmente substituída com um ou mais grupos funcionais, tais como halo, haloalquila, alquila, haloalquila, alcóxi, haloalcóxi, alquenila, trifluormetila, trifluorometóxi, alquinila, cicloalquil-alquila, cicloeteroalquila, cicloeteroalquilalquila, arila, heteroarila, arilalquila, arilóxi, ariloxialquila, arilalcóxi, alcoxicarbonila, arilcarbonila, arilalquenila, aminocarbonilarila, ariltio, arilsulfinila, arilazo, heteroarilalquila, heteroarilalquenila, heteroarileteroarila, heteroarilóxi, hidróxi, nitro, ciano, amino, amino substituído em que o amino inclui 1 ou 2 substituintes (que são alquila, arila ou qualquer um dos outros compostos de arila mencionados nas definições), tiol, alquiltio, ariltio, heteroariltio, ariltioalquila, alcoxiariltio, alquilcarbonila, arilcarbonila, alquilaminocarbonila, arilaminocarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, arilsulfinila, arilsulfinilalquila, arilsulfonilamino ou arilsulfonaminocarbonila e/ou qualquer um dos substituintes de alquila aqui demonstrado.

[0081] A não ser que de outra maneira indicada, o termo "heterocíclico" ou "heterociclo", como aqui usado, representa um sistema de anel monocíclico de 5 a 10 membros estável não substituído ou substituído que pode ser saturado ou insaturado, e que consiste em átomos de carbono e de um a quatro heteroátomos selecionados de N, O ou S, e em que os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem opcionalmente ser oxidados, e o heteroátomo de nitrogênio pode opcionalmente ser quaternizado. O anel heterocíclico pode ser ligado em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono o que resulta na criação de uma estrutura estável. Exemplos de tais grupos heterocíclicos incluem, mas não são limitados a eles, piperidinila, piperazinila, oxopiperazinila, oxopiperidinila, oxopirrolidinila, oxoazepinila, azepinila, pirrolila, pirrolidinila, furanila, tienila, pirazolila, pirazolidinila, imidazolila, imidazolinila, imidazolidinila, piridila, pirazinila, pirimidinila, piridazinila, oxazolila, oxazolidinila, isooxazolila, isoxazolidinila, morfolinila, tiazolila, tiazolidinila, isotiazolila, tiadiazolila, tetraidropiranila, tiamorfolinila, sulfóxido de tiamorfolinila, sulfona de tiamorfolinila e oxadiazolila. O termo "heterocíclico aromático" como aqui usado isoladamente ou como parte de outro grupo se refere a um anel aromático de 5 ou 7 membros que inclui 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos tais como nitrogênio, oxigênio ou enxofre e tais anéis fundidos a um anel de arila, cicloalquila, heteroarila ou heterocicloalquila (por exemplo, benzotiofenila, indolila), e inclui possíveis N-óxidos. "Heteroarila substituído" inclui um grupo de heteroarila opcionalmente substituído com 1 a 4 substituintes, tais como os substituintes incluídos acima na definição de "alquila substituída" e "cicloalquila substituída". Exemplos de grupos de heteroarila incluem os que seguem: e similares.

Exemplo 1 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila, (1a)

[0082] 4-Amino-2-trifluormetilbenzonitrila, (2,23 g, 12 mmoles) foi adicionada em porções durante 15 minutos na mistura heterogênea bem agitada de tiofosgênio (1 ml, 13 mmoles) em água (22 ml) na temperatura ambiente. A agitação continuou durante um adicional de 1 h. O meio de reação foi extraído com clorofórmio (3 x 15 ml). A fase orgânica combinada foi secada por MgSO4 e evaporada para secura sob pressão reduzida para produzir o produto desejado, 4-isotiocianato- 2-trifluormetilbenzonitrila, (1a), como sólido amarronzado e foi usado como tal para a próxima etapa (2,72 g, 11,9 mmol, 99%).

Exemplo 2 2-1). Éster terc-butílico de ácido (4-aminofenil)carbâmico, (2a)

[0083] Uma solução aquosa de carbonato de potássio (1,52 g, 11 mmols em 5 ml de água) foi adicionada à uma solução de 1,4- diaminobenzeno (3,24 g, 30 mmoles) em THF (30 ml) e DMF (10 ml). A esta mistura foi adicionado pirocarbonato de di-terc-butila, Boc2O (2,18 g, 10 mmoles), por gotejamento durante 0,5 h. A mistura de reação foi agitada durante um adicional de 4 h na temperatura ambiente. A mistura foi depois despejada em água gelada (40 ml) e extraída com clorofórmio (3 x 50 ml). A fase orgânica combinada foi secada por MgSO4 e concentrada para produzir um resíduo marrom que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 4:1) para proporcionar éster terc-butílico de ácido (4-aminofenil)carbâmico, (2a) como um sólido amarelo (1,98 g, 9,5 mmol, 95%) (rendimento com base em Boc2O).

2-2). Éster terc-butílico de ácido {4-[(1-ciano-1-metiletil) amino]fenil}carbâmico, 2b

[0084] A mistura de 2a (0,83 g, 4 mmoles), cianoidrina de acetona (4 ml) e MgSO4 (2 g) foi aquecida para 80°C e agitada durante 2,5 h. Após esfriamento para a temperatura ambiente, o composto 2b foi cristalizado em água (30 ml). O sólido foi filtrado e secado para produzir éster terc-butílico de ácido {4-[(1-ciano-1-metiletil)amino]fenil}carbâmico, 2b (1,08 g, 3,9 mmols, 98%). 2-3). Éster terc-butílico de ácido {4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-4- imino-5,5-dimetil-2-tioxo-imidazolidin-1-il]fenil}carbâmico, (2c)

[0085] Trietilamina (0,202 g, 2 mmoles) foi adicionada a uma solução de 1a (0,456 g, 2 mmoles) e 2b (0,57 g, 2 mmoles) em THF seco (5 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 h e depois concentrada para produzir um resíduo escuro que foi submetido à cromatografia instantânea (éter etílico/acetona, 97:3) para proporcionar éster terc-butílico de ácido {4-[3-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-4-imino-5,5-dimetil-2-tioxo-imidazolidin-1- il]fenil}carbâmico, (2c) (0,15 g, 0,3 mmol, 15%).

2-4). 4-[3-(4-aminofenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 2d, [RD9]

[0086] A mistura de 2c (0,15 g, 0,3 mmol) em HCl aq, 3N. (1 ml) e metanol (4 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (5 ml) e extraído com diclorometano (8 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano/acetona, 9:1) para produzir 4-[3-(4-aminofenil)-4,4- dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila, 2d, [RD9] (0,118 g, 0,29 mmol, 97%) como um sólido amarelo.

[0087] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,54 (s, 6H), 6,73 - 6,75 (m, 2H), 7,00 - 7,03 (m, 2H), 8,02 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 22,7, 66,2, 109,1, 114,3, 114,9, 120,4, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,9 Hz), 130,4, 132,5 (q, J = 33,0 Hz), 133,4, 135,6, 138,5, 149,2, 175,3, 180,4.

2-5). 4-[3-(4-azidofenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 2e, [RD10]

[0088] Uma solução aquosa de ácido sulfúrico (25% em peso, 1 ml) foi adicionada à uma solução de 2d (0,10 g, 0,25 mmol) em acetona (1 ml) a -5°C. Uma solução aquosa de NaNO2 (0,024 g, 0,35 mmol, em 0,5 ml de água) foi adicionada lentamente na mistura acima durante 0,1 h. A mistura de reação foi deixada se agitar em -5°C durante um adicional de 1 h e depois uma solução aquosa de NaN3 (0,02 g, 0,3 mmol em 0,3 ml de água) foi adicionada por gotejamento. Após a conclusão da adição, o meio de reação foi aquecido para a temperatura ambiente e agitada durante um adicional de 3 h. O produto foi extraído com diclorometano (3 x 5 ml). A camada orgânica combinada foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4- [3-(4-azidofenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 2e, [RD10] (0,08 g, 0,18 mmol, 72%) como um sólido amarelado.

[0089] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,54 (s, 6H), 7,17 - 7,20 (m, 2H), 7,27 - 7,30 (m, 2H), 7,84 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 23,7, 66,4, 10,1, 114,8, 120,4, 122,1 (q, J = 272,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 131,1, 131,5, 132,3, 133,3 (q, J = 33,0 Hz), 135,3, 137,1, 141,7, 174,8, 180,1. MS para C19H13F3N6OS, calculado 430,4, observado 430,1.

Exemplo 3 3-1). 2-(4-hidroxifenilamino)-2-metilpropanonitrila, 3a

[0090] Uma mistura de 4-aminofenol (1,09 g, 10 mmoles), acetona cianoidrina (10 ml) e MgSO4 (2 g) foi aquecida para 80°C e agitada durante 4 h. Após concentração do meio sob vácuo, o composto 3a foi cristalizado a partir da água (20 ml). O sólido foi filtrado e secado para produzir 2-(4-hidroxifenilamino)-2-metilpropanonitrila, 3a (1,69 g, 9,6 mmol, 96%).

3-2). 4-[3-(4-hidroxifenil)-5-imino-4,4-dimetil-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 3b

[0091] Trietilamina (0,101 g, 1 mmol) foi adicionada à uma solução de 1a (0,456 g, 2 mmoles) e 3a (0,352 g, 2 mmoles) em THF seco (5 ml). A mistura de reação foi agitada em 0°C durante 48 h e depois concentrada para produzir um resíduo escuro que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 85:15) para proporcionar 4-[3-(4-hidroxifenil)-5-imino-4,4-dimetil-2- tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila, 3b (0,274 g, 0,68 mmol, 34%).

3-3). 4-[3-(4-hidroxifenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 3c, [RD8]

[0092] Uma mistura de 3b (0,202 g, 0,5 mmol) em HCl aq., 2N (2 ml) e metanol (5 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano/acetona, 9:1) para produzir 4-[3-(4- hidroxifenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 3c, [RD8] (0,198 g, 0,49 mmol, 98%) como um pó branco.

[0093] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,57 (s, 6H), 6,26 (s, OH), 6,90 - 6,93 (m, 2H), 7,11 - 7,14 (m, 2H), 7,84 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 - 7,98 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,6, 66,5, 109,9, 114,9, 115,7, 116,8, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,2 (q, J = 4,7 Hz), 130,6, 132,3, 133,5 (q, J = 33,2 Hz), 135,3, 137,2, 157,0, 175,3, 180,2.

Exemplo 4 Éster 4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5-dimetil-4-oxo-2-tioxo- imidazolidin-1-il]fenílico de ácido cloroacético, 4a, [RD13]

[0094] Cloreto de cloroacetila (0,045 g, 0,4 mmol) foi adicionado a uma mistura de 3c (0,101g, 0,25 mmol) e trietilamina (0,041g, 0,41 mmol) em THF seco (1,5 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 4 h. Cloridreto de trietilamina foi extraído por filtração. O filtrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano/acetona, 95:5) para produzir 84% de éster 4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5- dimetil-4-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]fenílico de ácido cloroacético, 4a, [RD13] (0,101 g, 0,21 mmol) como pó branco.

[0095] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,58 (s, 6H), 4,32 (s, 2H), 7,33 (s, 4H), 7,83 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,9 Hz, 1H), 7,95 - 7,97 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,7, 40,8, 66,5, 110,1, 114,8, 121,9 (q, J = 272,5 Hz), 122,7, 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 130,9, 132,3, 132,9, 133,5 (q, J = 33,2 Hz), 135,3, 137,1, 150,9, 165,5, 174,8, 180,0.

Exemplo 5 5-1a). 2-metiI-2-(4~metiIfeniI)aminopropanonitriIa, 5a

[0096] Uma mistura de p-toluidina (1,07 g, 10 mmoles) e acetona cianoidrina (10 ml) foi aquecida para 80°C e agitada durante 4 h. O meio foi concentrado e secado sob vácuo para produzir 2-metil-2-(4- metilfenil)aminopropanonitrila, 5a (1,72g, 9,9 mmol, 99%) como sólido marrom.

5-1b). 2-metil-2-(4-metilfenil)aminopropanonitrila, 5 a

[0097] Cianureto de sódio (0,735g, 15 mmoles) foi adicionado a uma mistura de p-toluidina (1,07 g, 10 mmoles) e acetona (1,16 g, 20 mmoles) em 90% ácido acético (10 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois acetato de etila (50 ml) foi adicionado. A camada orgânica foi lavada com água (4 x 30 ml), secada por sulfato de magnésio e concentrada sob vácuo para secura para produzir 2-metil-2-(4-metilfenil)aminopropanonitrila, 5a (1,65g, 9,5 mmol, 95%) como um sólido marrom.

5-2). 4-[3-(4-metilfenil)-5-imino-4,4-dimetil-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 5b

[0098] Trietilamina (0,101 g, 1 mmol) foi adicionada à uma solução de 1a (0,456 g, 2 mmoles) e 5a (0,348 g, 2 mmoles) em THF seco (3 ml). A mistura de reação foi agitada em 0°C durante 2 dias e depois concentrada para produzir um resíduo escuro que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 95:5) para proporcionar 4-[3-(4-metilfenil)-5-imino-4,4-dimetil-2-tioxoimidazolidin- 1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila, 5b (0,136 g, 0,34 mmol, 17%).

5-3a). 4-[3-(4-metilfenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 5c

[0099] Uma mistura de 5b (0,121 g, 0,3 mmol) em HCl aq., 2N (2 ml) e metanol (5 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4-[3-(4-metilfenil)-4,4- dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila, 5c (0,118 g, 0,294 mmol, 98%) como um pó branco.

5-3b). 4-[3-(4-metilfenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 5c, [RD7]

[00100] Uma mistura de 1a (0,547 g, 2,4 mmoles) e 5a (0,348 g, 2 mmoles) em DMF seco (0,6 ml) foi agitada durante 36 h. A esta mistura foram adicionados metanol (20 ml) e 2N HCl (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (30 ml) e extraída com acetato de etila (40 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4-[3-(4-metilfenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2- tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila, 5c, [RD7] (0,596 g, 1,48 mmol, 74%) como um pó branco.

[00101] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,61 (s, 6H), 2,44 (s, 3H), 7,17 - 7,20 (m, 2H), 7,33 - 7,36 (m, 2H), 7,86 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 - 7,98 (m, 2H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 21,3, 23,6, 66,4, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,2, 130,6, 132,2, 132,3, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,2, 140,1, 175,1, 179,9.

Exemplo 6 6-1). 2-metil-2-fenilaminopropanonitrila, 6a

[00102] Uma mistura de aminobenzeno (0,931 g, 10 mmoles) e acetona cianoidrina (2 ml) foi aquecida em refluxo e agitada durante 20 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em acetato de etila (40 ml) e lavada com água gelada (2 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada sob vácuo para secura para produzir 2-metil-2-fenilaminopropanonitrila, 6a (1,51 g, 9,4 mmol, 94%) como líquido marrom pastoso.

[00103] 6-2). 4-[3-fenil-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 6b, [RD10]

[00104] Uma mistura de 1a (0,274 g, 1,2 mmol) e 6a (0,160 g, 1 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada durante 48 h. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e 2N HCl (3 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4-[3-fenil-4,4-dimetil-5-oxo-2- tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila, 6b, [RD10] (0,276 g, 0,71 mmol, 71%) como um pó branco.

[00105] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,60 (s, 6H), 7,28 - 7,31 (m, 2H), 7,50 - 7,58 (m, 3H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 - 7,99 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,7, 66,4, 110,2, 114,8, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,5, 129,8, 129,9, 132,2, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,1, 135,2, 137,2, 175,0, 179,9.

Exemplo 7 7-1a). I-(4-metiIfeniI)aminocicIobutanonitriIa, 7 a

[00106] Cianureto de sódio (0,147g, 3 mmoles) foi adicionado a uma mistura de p-toluidina (0,214 g, 2 mmoles) e ciclobutanona (0,21 g, 3 mmoles) em 90% ácido acético (3 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois 20 ml de acetato de etila foram adicionados. A camada orgânica foi lavada com água (3 x 10 ml), secada por sulfato de magnésio e concentrada sob vácuo para secura para produzir l-(4-metilfenil)aminociclobutanonitrila, 7a (0,343 g, 1,84 mmol, 92%) como um sólido marrom.

7-1b). 1-(4-metilfenil)aminociclobutanonitrila, 7a

[00107] Cianureto de trimetilsilila (0,93 ml, 7 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de p-toluidina (0,535 g, 5 mmoles) e ciclobutanona (0,42 g, 6 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir l-(4-metilfenil)aminociclobutanonitrila, 7a (0,912 g, 4,9 mmol, 98%) como um sólido amarelado.

7-2). 4-(8-imino-6-tioxo-5-(4-metilfeniI)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 7b

[00108] A uma solução de 1a (2,28 g, 10 mmoles) em DMF seco (3 ml) foi adicionado progressivamente, durante 20 horas, uma solução de 7a (1,764 g, 9 mmoles) em DMF seco (3 ml) na temperatura ambiente. O meio foi agitado durante um adicional de 4 h. Após o DMF ser evaporado, o resíduo foi cromatografado (diclorometano/acetona, 95:5) para proporcionar 4-(8-imino-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7- diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 7b (1,937 g, 4,68 mmol, 52%).

7-3a). 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2- trifluormetilbenzonitrala, 7c [RD37]

[00109] Uma mistura de 7b (0,041 g, 0,1 mmol) em HCl aq., 2N (3 ml) e metanol (1 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (5 ml) e extraída com acetato de etila (6 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4- metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 4-(8- oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluor- metilbenzonitrila, 7c (0,04 g, 0,096 mmol, 96%) como um pó branco.

7-3b). 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 7c, [RD37]

[00110] Uma mistura de 1a (0,912 g, 4 mmoles) e 7a (0,558 g, 3 mmoles) em DMF seco (0,5 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 24 h. A esta mistura foram adicionados metanol (30 ml) e HCl aq. 2N (6 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (50 ml) e extraída com acetato de etila (60 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4- metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 7c (0,959 g, 2,31 mmol, 77%) como um pó branco.

[00111] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,62 - 1,69 (m, 1H), 2,16 - 2,22 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,55 - 2,66 (m, 4H), 7,19 - 7,26 (m, 2H), 7,36 - 7,42 (m, 2H), 7,86 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 21,3, 31,4, 67,4, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,5, 130,8, 132,2, 132,4, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,3, 140,1, 175,0, 180,0.

Exemplo 8 8-1). 1-(4-metilfenil)aminociclopentanonitrila, 8a

[00112] Cianureto de trimetilsilila (0,865 ml, 7 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de p-toluidina (0,535 g, 5 mmoles) e ciclopentanona (0,589 g, 7 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir l-(4-metilfenil)aminociclopentanonitrila, 8a (0,981 g, 4,9 mmol, 98%) como um sólido amarelado.

8-2). 4-(4-Oxo-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 8b, [RD35]

[00113] Uma mistura de 1a (0,296 g, 1,3 mmol) e 8a (0,2 g, 1 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada durante 48 h. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. 2N (3 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4- (4-oxo-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 8b, [RD35] (0,3 g, 0,7 mmol, 70%) como um pó branco.

[00114] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,47 - 1,57 (m, 2H), 1,81 - 1,92 (m, 2H), 2,20 - 2,24 (m, 2H), 2,27 - 2,34 (m, 2H), 2,43 (s, 3H), 7,18 - 7,22 (m, 2H), 7,33 - 7,36 (m, 2H), 7,86 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 21,3, 25,2, 36,3, 75,1, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J = 272,5 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,5, 130,7, 123,2, 133,0, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,1, 137,4, 140,0, 176,3, 180,2.

Exemplo 9 9-1). 1-(4-metiIfeniI)aminocicIoexanenitriIa, 9a

[00115] Cianureto de sódio (0,147g, 3 mmoles) foi adicionado a uma mistura de p-toluidina (0,214 g, 2 mmoles) e cicloexanona (0,294 g, 3 mmoles) em ácido acético 90% (3 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois 20 ml de acetato de etila foram adicionados. A camada orgânica foi lavada com água (3 x 10 ml), secada por sulfato de magnésio e concentrada sob vácuo para secura para produzir 1-(4-metilfenil)aminocicloexanonitrila, 9a (0,398 g, 1,86 mmol, 93%) como um sólido marrom.

9-2). 4-(4-imino-2-tioxo-1-(4-metilfeniI)-l,3-diazaespiro[4,5]dec-3-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 9b

[00116] Trietilamina (0,05 g, 0,5 mmol) foi adicionada à uma solução de 1a (0,228 g, 1 mmol) e 9a (0,214 g, 1 mmol) em THF seco (2 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 dias e depois concentrada para produzir um resíduo escuro que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 95:5) para proporcionar 4-(4-imino-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3-diazaespiro[4,5]dec-3- il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 9b (0,035 g, 0,08 mmol, 8%).

9-3). 4-(4-Oxo-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-l,3-diazaespiro[4,5]dec-3-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 9c, [RD48]

[00117] Uma mistura de 9b (0,035 g, 0,08 mmol) em HCl aq., 2N (1 ml) e metanol (3 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (5 ml) e extraída com acetato de etila (6 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 4-(4-Oxo-2-tioxo-1-(4- metilfenil)-1,3-diazaespiro[4,5]dec-3-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 9c, [RD48] (0,034 g, 0,076 mmol, 95%) como um pó branco.

[00118] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,02 - 1,05 (m, 1H), 1,64 - 1,76 (m, 4H), 2,03 - 2,12 (m, 5H), 2,44 (s, 3H), 7,12 - 7,15 (m, 2H), 7,33 - 7,36 (m, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 20,7, 21,3, 24,0, 32,6, 67,4, 109,9, 114,9, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,3 (q, J = 4,6 Hz), 130,0, 130,5, 132,0, 132,5, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,3, 140,1, 174,1, 180,1.

Exemplo 10 10-1). I-(4-metiIfeniI)aminocicIoexanonitriIa, 10a

[00119] Cianureto de sódio (0,147g, 3 mmoles) foi adicionado a uma mistura de p-toluidina (0,214 g, 2 mmoles) e cicloeptanona (0,337 g, 3 mmoles) em ácido acético 90% (3 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois 20 ml de acetato de etila foram adicionados. A camada orgânica foi lavada com água (3 x 10 ml), secada por sulfato de magnésio e concentrada sob vácuo para secura para produzir l-(4-metilfenil)aminocicloexanonitrila, 10a (0,438 g, 1,92 mmol, 96%) como um sólido marrom.

10-2). 4-(4-imino-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-l,3-diazaespiro[4,5] undec-3-il)- 2-trifluormetilbenzonitrila, 10b

[00120] Trietilamina (0,05 g, 0,5 mmol) foi adicionada a uma solução de 1a (0,228 g, 1 mmol) e 9a (0,228 g, 1 mmol) em THF seco (2 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 dias e depois concentrada para produzir um resíduo escuro que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 95:5) para proporcionar 4-(4-imino-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3- diazaespiro[4,5]undec-3-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 10b (0,036 g, 0,08 mmol, 8%).

10-3). 4-(4-oxo-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3-diazaespiro[4,5]undec-3-il)- 2-trifluormetilbenzonitrila, 10c, [RD49]

[00121] Uma mistura de 9b (0,036 g, 0,08 mmol) em HCl aq., 2N (1 ml) e metanol (3 ml) foi aquecida para refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (5 ml) e extraída com acetato de etila (6 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 10c (0,034 g, 0,075 mmol, 94%) como um pó branco.

[00122] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,24 - 134 (m, 2H), 1,37 - 1,43 (m, 2H), 1,53 - 1,60 (m, 2H), 1,74 - 1,82 (m, 2H), 2,19 - 2,25 (m, 4H), 2,44 (s, 3H), 7,16 - 7,19 (m, 2H), 7,32 - 7,35 (m, 2H), 7,83 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 - 7,97 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 21,4, 22,2, 30,9, 36,3, 71,1, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J = 272,5 Hz), 127,2 (q, J = 4,6 Hz), 129,6, 130,5, 132,3, 133,0, 133,2 (q, J = 33,2 Hz), 135,1, 137,4, 140,0, 175,9, 179,7.

Exemplo 11 11-1). 1-(4-hidroxifeniI)aminocicIobutanonitriIa, 11a

[00123] Cianureto de trimetilsilila (0,93 ml, 7 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de 4-hidroxianilina (0,545 g, 5 mmoles) e ciclobutanona (0,42 g, 6 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano:acetona, 98:2) para produzir 11a (0,903 g, 4,8 mmol, 96%) como um sólido amarelado.

11-2). 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-hidroxifenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 11b, [RD58]

[00124] Uma mistura de 1a (0,57 g, 2,5 mmoles) e 7a (0,376 g, 2 mmoles) em DMF seco (0,5 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 40 h. A esta mistura foram adicionados metanol (30 ml) e HCl aq. (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (40 ml) e extraída com acetato de etila (50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano: acetona, 98:2) para produzir 11b (0,659 g, 1,58 mmol, 79%) como um pó branco.

[00125] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,55 - 1,63 (m, 1H), 2,01 - 2,09 (m, 1H), 2,50 - 2,65 (m, 4H), 6,97 - 7,01 (m, 2H), 7,20 - 7,24 (m, 2H), 8,02 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (Acetona-d6, 100 MHz) δ 13,4, 31,3, 67,5, 108,9, 114,8, 116,1, 123,5 (q, J = 271,5 Hz), 127,4 (q, J = 4,9 Hz), 131,3, 131,8 (q, J = 32,7 Hz), 133,3, 135,5, 136,2, 138,5, 158,1, 175,1, 180,7.

Exemplo 12 12-1). 1-(4-bifenilamino)ciclobutanocarbonitrila, 12 a

[00126] Cianureto de trimetilsilila (0,2 ml, 1,5 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de 4-bifenilamina (0,169 g, 1 mmol) e ciclobutanona (0,098 g, 1,4 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir 12a (0,24 g, 0,97 mmol, 97%) como um sólido branco.

[00127] 12-2). 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-bifeniI)-5,7-diazaespiro[3,4]oct- 7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 12b [RD57]

[00128] Uma mistura de 1a (0,137 g, 0,6 mmol) e 12a (0,124 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 3 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (5 ml) e HCl aq. 2N (1 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 12b (0,162 g, 0,34 mmol, 68%) como um pó branco.

[00129] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,67 - 1,76 (m, 1H), 2,19 - 2,31 (m, 1H), 2,59 - 2,74 (m, 4H), 7,40 - 7,44 (m, 3H), 7,47 - 7,53 (m, 2H), 7,64 - 7,67 (m, 2H), 7,79 - 7,82 (m, 2H), 7,88 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 67,5, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 127,3, 128,1, 128,7, 129,0, 130,2, 132,3, 133,5 (q, J = 33,2 Hz), 134,2, 135,2, 137,2, 139,6, 142,8, 174,9, 179,9.

Exemplo 13 13-1). 1-(2-naftilamino)ciclobutanocarbonitrila, 13a

[00130] Cianureto de trimetilsilila (0,27 ml, 2 mnols) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de 2-aminonaftaleno (0,143 g, 1 mmol) e ciclobutanona (0,098 g, 1,4 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir 13a (0,209 g, 0,94 mmol, 94%) como um sólido amarelo.

[00131] 13-2). 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-bifenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct- 7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 12b, [RD85]

[00132] Uma mistura de 1a (0,137 g, 0,6 mmol) e 13a (0,111 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 3 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (5 ml) e HCl aq. (1 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 12b (0,146 g, 0,325 mmol, 65%) como um pó branco.

[00133] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 158 - 1,68 (m, 1H), 2,17 - 2,29 (m, 1H), 2,61 - 2,75 (m, 4H), 7,40 (dd, J1 = 8,6 Hz, J2 = 2,0 Hz, 1H), 7,58 - 7,65 (m, 2H), 7,86 - 8,00 (m, 5H), 8,04 (J = 1,8 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,6, 67,7, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J = 272,6 Hz), 126,8, 127,1 (q, J = 4,8 Hz), 127,2, 127,7, 128,0, 128,3, 129,1, 130,2, 132,2, 132,5, 133,4, 133,5 (q, J = 33,1 Hz), 133,6, 135,2, 137,2, 175,0, 180,1.

Exemplo 14 14-1). 2-(4-metiI-2-piridinamino)-2-metiIpropanonitriIa, 14 a

[00134] Cianureto de trimetilsilila (0,27 ml, 2 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de 2-amino-4-metilpiridina (0,108 g, 1 mmol) e acetona (0,58 g, 10 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 dias e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano: acetona, 60:40) para produzir 14a (0,133 g, 0,76 mmol, 76%) como um sólido branco.

14-2). 4-[4,4-dimetil-3-(4-metilpiridin-2-il)-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]- 2-trifluormetilbenzonitrila, 14b, [RD83]

[00135] Uma mistura de 1a (0,91 g, 0,4 mmol) e 14a (0,053 g, 0,3 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 6 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (5 ml) e HCl aq. (1 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 14b (0,07 g, 0,174 mmol, 58%) como um pó branco.

[00136] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,70 (s, 6H), 2,44 (s, 3H), 7,19 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 0,6 Hz, 1H), 7,82 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 21,1, 24,1, 67,1, 110,2, 114,8, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 124,4, 125,1, 127,3 (q, J = 4,8 Hz), 132,4, 133,5 (q, J = 33,2 Hz), 135,3, 137,1, 149,2, 149,5, 150,0, 175,2, 179,0.

Exemplo 15 15-1). 2-(2-piridinamino)-2-metiIpropanenitriIa, 15 a

[00137] Cianureto de trimetilsilila (0,27 ml, 2 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de 2-aminopiridina (0,094 g, 1 mmol) e acetona (0,58 g, 10 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 dias e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano: acetona, 60:40) para produzir 15a (0,131 g, 0,81 mmol, 81%) como um sólido branco.

15-2). 4-[4,4-dimetil-3-(4-piridin-2-il)-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 15b, [RD82]

[00138] Uma mistura de 1a (0,91 g, 0,4 mmol) e 15a (0,048 g, 0,3 mmol) em DMF seco (0,3 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 10 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (5 ml) e HCl aq. (1 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 15b (0,059 g, 0,153 mmol, 51%) como um pó branco.

[00139] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,73 (s, 6H), 7,38 (dd, J1 = 7,3 Hz, J2 = 5,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,87 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (td, J1 = 7,8 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,62 (dd, J1 = 4,7 Hz, J2 = 1,3 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 24,2, 67,1, 110,3, 114,8, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 123,7, 123,8, 127,3 (q, J = 4,8 Hz), 132,4, 133,6 (q, J = 33,2 Hz), 135,3, 137,1, 138,2, 149,5, 149,6, 175,1, 179,0.

Exemplo 16 16-1). 1-(5-metiI-2H-pirazoI-3-iIamino)-cicIobutanocarbonitriIa, 16a

[00140] Cianureto de trimetilsilila (0,532 ml, 4,0 mmoles) foi adicionado por gotejamento à mistura de 3-amino-5- metilpirazol (0,194 g, 2,0 mmoles) e ciclobutanona (0,154 g, 2,2 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 40 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido escuro que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir 16a (0,267 g, 1,52 mmol, 76%) como um pó esbranquiçado.

16-2). 4-[5-(5-metil-2H-pirazol-3-il)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espi- ro[3,4]oct-7-il]-2-trifluormetil-benzonitrila, 16b, [RD84]

[00141] Uma mistura de 1a (0,0684 g, 0,3 mmol) e 16a (0,053 g, 0,3 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 4 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. 2N (2 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (30 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano: acetona, 97:3) para produzir 16b (0,0826 g, 0,2 mmol, 67%) como um pó branco.

[00142] 1H RMN (acetona d6, 400 MHz) δ δ 1,66 - 1,76 (m, 1H), 2,00 - 2,07 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 2,56 - 2,63 (m, 2H), 2,85 - 2,93 (m, 2H), 8,04 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,6 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 11,99 (s, 1H); 13C RMN (acetona dθ, 100 MHz) δ 10,2, 13,1, 31,1, 67,4, 102,5, 109,1, 114,8, 122,5 (q, J = 271,4 Hz), 127,8 (q, J = 4,8 Hz), 131,9 (q, J = 33,6 Hz), 133,6, 135,6, 138,4, 139,9, 145,0, 175,0, 179,6.

Exemplo 17 4-[3-(4-hidroxifenil)-4,4-dimetil-2,5-ditioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, 17a, [RD59]

[00143] Uma mistura de 3c (0,081 g, 0,2 mmol) e reagente de Lawesson (0,097 g, 0,24 mmol) em tolueno (3 ml) foi aquecida em refluxo durante 15 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:pentano, 9:1) para produzir 17a (0,0185 g, 0,044 mmol, 22%) como um pó branco.

[00144] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,65 (s, 6H), 6,95 - 6,97 (m, 2H), 7,15 - 7,18 (m, 2H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,98 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 27,9, 77,8, 110,9, 114,7, 116,7, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 128,1 (q, J = 4,8 Hz), 129,1, 130,7, 133,3, 133,5 (q, J = 33,2 Hz), 135,5, 140,3, 156,8, 179,9, 207,9.

Exemplo 18 4-[3-(4-hidroxifenil)-4,4-dimetil-2,5-dioxoimidazolidin-1-il]-2-tri- fluormetilbenzonitrila, 18a, [RD60]

[00145] Peróxido de hidrogênio, 30% (3 ml, 26 mmoles) foi adicionado por gotejamento à uma solução de 3c (0,121 g, 0,4 mmol) em ácido acético glacial (3 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois 20 ml de acetato de etila foram adicionados. A camada orgânica foi lavada com água (3 x 15 ml), secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 18a (0,102 g, 0,261 mmol, 87%) como um pó branco.

[00146] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,52 (s, 6H), 6,70 - 6,73 (m, 2H), 7,01 - 7,04 (m, 2H), 7,92 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (dd, J1 = 8,4 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,7, 63,7, 108,4, 115,0, 116,7, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 123,5 (q, J = 4,8 Hz), 124,0, 128,5, 130,5, 133,6 (q, J = 33,2 Hz), 135,5, 136,2, 153,4, 157,2, 174,5.

Exemplo 19 19-1). 3-fIúor-2-metiI-2-(4-metiIfeniI)aminopropionitriIa, 19 a

[00147] Cianureto de trimetilsilila (0,146 ml, 1,1 mmol) foi adicionado por gotejamento à mistura de p-toluidina (0,107 g, 1 mmol) e fluoracetona (0,082 g, 1,1 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir 19a (0,179 g, 0,93 mmol, 93%) como um sólido amarelado.

19-2). 4-(4-fluormetil-4-metil-5-oxo-2-tioxo-3-(4-metilfenil)imidazolidin- 1-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 19b, [RD68]

[00148] Uma mistura de 1a (0,16 g, 0,7 mmol) e 19a (0,096 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,3 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 48 h. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. 2N (2 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (30 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 19b (0,168 g, 0,4 mmol, 80%) como um pó branco.

[00149] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,49 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 4,35 (dd, J1 = 47,2 Hz, J2 = 10,0 Hz, 1H), 4,71 (dd, J1 = 45,2 Hz, J2 = 10 Hz, 1H), 122 - 126 (m, 2H), 7,35 - 7,39 (m, 2H), 7,82 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 17,0 (d, J = 4,6 Hz), 21,3, 69,3 (d, J = 18,3 Hz), 81,9 (d, J = 179,5 Hz), 109,9, 114,8, 121,8 (q, J = 272,6 Hz), 127,2 (q, J = 4,7 Hz), 129,3, 130,9, 131,6, 132,3, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,3, 137,0, 140,5, 174,1, 181,4; 19F RMN (CDCI3, 376 MHz) δ -62,5, 110,9.

Exemplo 20 20-1). 2-metiI-2-(4-trifIuormetiIfeniI)aminopropanonitriIa, 20a

[00150] Uma mistura de 4-trifluormetilanilina (1,61 g, 10 mmoles), acetona cianoidrina (5 ml) e sulfato de magnésio (2 g) foi aquecida para 80°C e agitada durante 12 h. Ao meio foi adicionado acetato de etila (50 ml) e depois lavado com água (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada sob vácuo para secura para produzir 20a (2,166 g, 9,5 mmol, 95%) como sólido marrom.

20-2). 4-(4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxo-3-(4-trifluormetilfenil)imidazolidin-1- il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 20b, [RD66]

[00151] Uma mistura de 1a (0,114 g, 0,5 mmol) e 20a (0,092 g, 0,4 mmol) em DMF seco (0,3 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 48 h. A esta mistura foram adicionado metanol (10 ml) e HCl aq. (3 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 20b (0,117 g, 0,256 mmol, 64%) como um pó branco.

[00152] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,61 (s, 6H), 7,45 - 7,49 (m, 2H), 7,80 - 7,83 (m, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,8, 66,6, 110,3, 114,8, 121,8 (q, J = 272,6 Hz), 123,5 (q, J = 271,1 Hz), 127,0 (q, J = 4,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 130,3, 131,9 (q, J = 32,9 Hz), 132,2, 133,5 (q, J = 33,3 Hz), 135,3, 136,9, 138,4, 174,6, 179,9.

Exemplo 21 21-1). 3-cIoro-2-cIorometiI-2-(4-metiIfeniI)aminopropanonitriIa, 21a

[00153] Cianureto de trimetilsilila (0,27 ml, 2 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de p-toluidina (0,107 g, 1 mmol) e 1,3- dicloroacetona (0,254 g, 2 mmoles). A mistura de reação foi aquecida para 80°C e agitada durante 6 h. À mistura foi adicionado 20 ml de acetato de etila e depois lavado com água (2 x 20 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 21a (0,192 g, 0,79 mmol, 79%) como um pó marrom.

21-2). 4-(4,4-bisclorometil-5-oxo-2-tioxo-3-(4-metiIfenil)imidazolidin-1- iI)-2-trifluormetilbenzonitrila, 21b, [RD67]

[00154] Uma mistura de 1a (0,16 g, 0,7 mmol) e 21a (0,122 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 10 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. 2N (2 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 21b (0,09 g, 0,19 mmol, 38%) como um pó branco.

[00155] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 2,44 (s, 3H), 3,54 (d, J = 11,8 Hz, 2H), 3,93 (d, J = 11,8 Hz, 2H), 7,37 - 7,40 (m, 2H), 7,48 - 7,51 (m, 2H), 7,79 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 21,4, 42,8, 74,3, 110,7, 114,7, 121,7 (q, J = 272,6 Hz), 127,2 (q, J = 4,7 Hz), 128,8, 131,0, 131,1, 132,4, 133,8 (q, J = 33,2 Hz), 135,5, 136,9, 140,9, 169,5, 182,5.

Exemplo 22 22-1). 1-(4-metiIfeniI)aminocicIoexanonitriIa, 22a

[00156] Cianureto de sódio (0,245 g, 5 mmoles) foi adicionado a uma mistura de ácido antranílico (0,411 g, 3 mmoles) e acetona (1 ml, 13,6 mmoles) em ácido acético 90% (3 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 h e depois 50 ml de acetato de etila foram adicionados. A camada orgânica foi lavada com salmoura (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (diclorometano: acetona, 90:10) para produzir 22a (0,551 g, 2,7 mmol, 90%) como um sólido marrom.

22-2). Ácido 2-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5-dimetiI-4-oxo-2- tioxoimidazolidin-1-il]benzóico, 22b, [RD65]

[00157] Uma mistura de 1a (0,114 g, 0, mmol) e 22a (0,103 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 3 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. 2N, (3 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (acetato de etila:pentano, 2:1) para produzir 22b (0,143 g, 0,33 mmol, 66%) como um pó branco.

[00158] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,47 (s, 3H), 1,78 (s, 3H), 7,39 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,7 Hz, 1H) 7,76 - 7,82 (m, 2H), 7,90 - 7,98 (m, 2H), 8,22 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,96 (bs, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 20,6, 26,2, 67,6, 110,1, 114,8, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,2 (q, J = 4,7 Hz), 128,9, 131,0, 130,2, 132,5, 133,2 (q, J = 33,3 Hz), 133,7, 134,7, 135,4, 135,8, 137,3, 169,8, 175,3, 180,7.

Exemplo 23 23-1). 1-(2-metiIfeniI)aminocicIobutanonitriIa, 23a

[00159] Cianureto de trimetilsilila (0,66 ml, 5 mmoles) foi adicionado por gotejamento à mistura de p-toluidina (0,321 g, 3 mmoles) e ciclobutanona (0,28 g, 4 mmoles). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir 23a (0,541 g, 2,91 mmol, 97%) como um sólido amarelado.

23-2). 4-(8-oxo-6-tioxo-5-(2-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2- trifluormetilbenzonitrila, 23b, [RD71]

[00160] Uma mistura de 1a (0,114 g, 0,5 mmol) e 23a (0,093 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,3 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 3 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. 2N, (3 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 23b (0,116 g, 0,28 mmol, 56%) como um pó branco.

[00161] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,63 - 1,69 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 2,28 - 2,41 (m, 2H), 2,58 - 2,76 (m, 3H), 7,21 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,39 - 7,49 (m, 3H), 7,89 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 14,2, 18,0, 30,7, 32,2, 67,6, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 127,5, 129,8, 130,2, 131,9, 132,3, 133,4, 133,5 (q, J = 34,3 Hz), 135,2, 135,8, 137,1, 138,0, 175,3, 178,7.

Exemplo 24 24-1). 1-aminocicIopentanocarbonitriIa, 24a

[00162] Amônia anídrica foi borbulhada em uma mistura de ciclopentanona (0,452 g) e cianureto de trimetilsilila (0,66 ml, 5 mmoles). O excesso de amônia foi submetido a refluxo por um condensador de gelo seco-acetona. Após 1 h de refluxo, A amônia foi deixada desgassificar do meio e depois a mistura remanescente foi concentrada sob vácuo para produzir 24a (0,522 g, 4,75 mmol, 95%) como um líquido incolor.

24-2). 4-(4-imino-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-il)-2-trifluorme- tilbenzonitrila, 24b

[00163] Trietilamina (0,101 g, 0,1 mmol) foi adicionada a uma solução de 1a (0,684 g, 3 mmoles) e 24a (0,33 g, 3 mmoles) em THF seco (5 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h e depois concentrada para produzir um resíduo marrom que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 93:7) para proporcionar 24b (0,741 g, 2,19 mmol, 73%). 24-3). 4-(4-oxo-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-il)-2-trifluorme- tilbenzonitrila, 24c, [RD77]

[00164] Uma mistura de 24b (0,741 g, 2,19 mmoles) em HCl aq., 2N (4 ml) e metanol (20 ml) foi aquecida em refluxo durante 1 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (40 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 24c (0,72 g, 2,12 mmol, 97%) como um pó branco.

[00165] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,86 - 190 (m, 2H), 1,96 - 2,05 (m, 4H), 2,26 - 2,30 (m, 2H)3 7,80 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H) 8,20 (bs, NH); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 25,3, 38,1, 71,0, 110,1, 114,8, 121,8 (q, J = 272,7 Hz), 126,8 (q, J = 4,7 Hz), 131,9, 133,6 (q, J = 34,3 Hz), 135,3, 136,7, 176,1, 179,8.

Exemplo 25 25). 4-[1-(4-nitrofeniI)-4-oxo-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-iI]-2- trifluormetilbenzonitrila, 25a, [RD55]

[00166] Uma mistura de 25c (0,0678 g, 0,2 mmol), 1,8-Diazabiciclo [5,4,0]undec-7-eno (0,05 g, 0,33 mmol) e 4-fluoronitrobenzeno (0,056 g, 0,4 mmol) em dimetilformamida (0,5 ml) foi colocada sob argônio em um tubo lacrado e aquecida para 130°C durante 40 h. A mistura de reação foi despejada em acetato de etila (5 ml) e lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 25a (0,038 g, 0,084 mmol, 42%) como um pó branco.

[00167] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,53 - 1,56 (m, 2H), 1,90 - 1,93 (m, 2H), 2,14 - 2,18 (m, 2H), 2,37 - 2,40 (m, 2H), 7,54 - 7,57 (m, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,39 - 8,43 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 25,2, 36,5, 75,3, 110,3, 114,8, 121,8 (q, J = 272,6 Hz), 125,2, 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 131,4, 132,1, 133,6 (q, J = 34,3 Hz), 135,3, 136,9, 141,7, 148,1, 175,6, 180,2.

Exemplo 26 26). 4-[1-(4-cianofeniI)-4-oxo-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-iI]-2- trifluormetilbenzonitrila, 26a, [RD54]

[00168] Uma mistura de 24c (0,0678 g, 0,2 mmol), 1,8-diazabiciclo [5,4,0] undec-7-eno (0,061 g, 0,4 mmol) e 4-fluorcianobenzeno (0,048 g, 0,4 mmol) em dimetilformamida (0,5 ml) foi colocada sob argônio em um tubo lacrado e aquecida para 140°C durante 5 dias. A mistura de reação foi despejada em acetato de etila (5 ml) e lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 26a (0,023 g, 0,052 mmol, 26%) como um pó branco.

[00169] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,51 - 1,55 (m, 2H), 1,90 - 1,93 (m, 2H), 2,12 - 2,16 (m, 2H), 2,33 - 2,38 (m, 2H), 7,47 - 7,50 (m, 2H), 7,81 - 7,87 (m, 3H), 7,95 - 7,99 (m, 2H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 25,2, 36,5, 75,3, 110,3, 113,9, 114,7, 117,5, 121,8 (q, J = 272,6 Hz), 127,0 (q, J = 4,8 Hz), 131,2, 132,1, 133,6 (q, J = 34,3 Hz), 133,8, 135,3, 136,9, 140,0, 175,6, 180,1.

Exemplo 27 27-1). 1-metil-4-(4-metilfenilamino)piperidina-4-carbonitrila, 27a

[00170] Cianureto de sódio (0,318 g, 6,5 mmoles) foi adicionado a uma mistura de p-toluidina (0,535 g, 5 mmoles) e 1-metil-4-piperidinona (0,678 g, 6 mmoles) em ácido acético 90% (5 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois 100 ml de diclorometano foram adicionados. A camada orgânica foi lavada com uma solução de NaOH, 2N (2 x 50 ml), secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (DCM e depois acetona) para obter 27a (0,722 g, 3,15 mmol, 63%).

27-2). 4-(4-imino-8-metil-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3,8-triazaespiro [4.5]dec-3-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 27b

[00171] Trietilamina (0,02, 0,2 mmol) foi adicionada à uma solução de Ia (0,228 g, 1 mmol) e 27a (0,114 g, 0,5 mmol) em THF seco (2 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 20 h e depois concentrada para produzir um resíduo escuro que foi submetido à cromatografia instantânea (diclorometano/acetona, 90:10, e depois acetona) para proporcionar 27b (0,059 g, 0,13 mmol, 26%).

27-3). 4-(8-metil-4-oxo-2-tioxo-1-(4-metilfenil)-1,3,8-triazaespiro [4,5]dec-3-il)-2-trifluormetilbenzonitrila, 27c, [RD53]

[00172] Uma mistura de 27b (0,059 g, 0,13 mmol) em HCl aq., 2N (1 ml) e metanol (3 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (5 ml) e extraída com acetato de etila (10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 60:40) para produzir 27c (0,055 g, 0,012 mmol, 92%) como um pó branco.

[00173] 1H RMN (Acetona-d6, 400 MHz) δ 1,93 - 1,99 (m, 1H), 2,00 - 2,04 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,24 - 2,28 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,61 - 2,72 (m, 4H), 7,18 -7,20 (m, 2H), 7,32 - 7,35 (m, 2H), 8,03 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (Acetona-d6, 100 MHz) δ 20,3, 31,4, 45,1,49,8, 65,1, 109,1, 114,8, 122,4 (q, J = 275,1 Hz), 127,7 (q, J = 4,8 Hz), 130,0, 130,5, 131,9 (q, J = 32,6 Hz), 132,6, 133,5, 135,6, 138,3, 139,4, 174,0, 180,6.

Exemplo 28 4-(8-metil-4-oxo-2-tioxo-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-3-il)-2-trifluor- metilbenzonitrila, 28a, [RD52]

[00174] O Composto 28a foi sintetizado de acordo com o procedimento descrito na patente US 5958936.

[00175] 1H RMN (Acetona-d6, 400 MHz) δ 1,93 - 2,00 (m, 2H), 2,09 - 2,16 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,42 - 2,49 (m, 2H), 2,75 - 2,80 (m, 2H), 7,97 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 9,80 (bs, NH); 13C RMN (Acetona-d6, 100 MHz) δ 32,9, 45,4, 50,1, 62,3, 109,1, 114,8, 122,4 (q, J = 271,6 Hz), 127,5 (q, J = 4,8 Hz), 131,8 (q, J = 32,7 Hz), 133,2, 135,6, 135,6, 138,0, 175,2, 180,4.

Exemplo 29 4-[3-(4-hidroxibutil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetilbenzonitrila, RU 59063

[00176] O Composto RU 59063 foi sintetizado de acordo com o procedimento descrito por Teutsch et al [J. Steroid. Biochem. Molec. Biol. 1994, 48(1), 111-119].

[00177] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,55 (s, 6H), 1,58 - 1,62 (m, 2H), 1,86 - 1,89 (m, 2H), 2,25 (bs, OH), 3,65 - 3,71 (m, 4H), 7,74 (dd, J1 = 8,0 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,0 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,1, 24,7, 29,6, 43,9, 61,7, 65,2, 109,7, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,8 Hz), 132,2, 133,7 (q, J = 34,3 Hz), 135,2, 137,2, 175,3, 178,2.

Exemplo 30 30-1). 1-metiIaminocicIobutanocarbonitriIa, 30a

[00178] Metilamina foi borbulhada em uma mistura refrigerada de ciclobutanono (0,21 g, 3 mmoles) e cianureto de trimetilsilila (0,396 g, 4 mmoles) até que o volume dobrou. A mistura foi agitada 3 h e depois concentrada para secura para obter 30a (0,33 g, quantitativa).

30-2). 4-(5-metil-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-tri- fluormetilenzonitrila, 30b, [RD73]

[00179] Uma mistura de 1a (0,114 g, 0,5 mmol) e 30a (0,055 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 0,5 h. A esta mistura foram adicionados 10 ml de metanol e 2 ml de 2N HCl. A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 30b (0,148 g, 0,435 mmol, 87%) como um pó branco.

[00180] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,95 - 2,06 (m, 1H), 2,21 - 2,32 (m, 1H), 2,58 - 2,71 (m, 4H), 3,44 (s, 3H), 7,77 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 2,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 30,3, 30,4, 66,1, 109,7, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 126,9 (q, J = 4,8 Hz), 132,1, 133,2 (q, J = 34,3 Hz), 135,2, 137,3, 175,1, 178,7.

30-3). 4-(5-metiI-6,8-dioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-iI)-2-trifIuor- metiIbenzonitriIa, 30c, [RD74]

[00181] Peróxido de hidrogênio (2 mI, 30%) foi adicionado na mistura de 30b (0,068 g, 0,2 mmoI) em ácido acético gIaciaI (3 mI). Após ser agitada na temperatura ambiente durante 10 h, a mistura de reação foi despejada em acetato de etiIa (20 mI) e depois Iavada com água (2 x 20 mI). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (dicIorometano:acetona) para produzir 30c (0,057 g, 0,176 mmoI, 88%) como um pó branco.

[00182] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,91 - 2,35 (m, 1H), 2,21 - 2,31 (m, 1H), 2,50 - 2,61 (m, 4H), 3,12 (s, 3H), 7,89 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 2,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 2,0 Hz, 1H),; 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,9, 25,4, 29,3, 63,4, 108,1, 115,1, 121,6 (q, J = 272,6 Hz), 122,9 (q, J = 4,8 Hz), 127,9, 133,5 (q, J = 34,3 Hz), 135,3, 136,5, 152,7, 174,4.

Exemplo 31 31-1). 1-metiIaminocicIopentanocarbonitriIa, 31a

[00183] Metilamina foi borbulhada em uma mistura refrigerada de ciclopentanona (0,252 g, 3 mmoles) e cianureto de trimetilsilila (0,396 g, 4 mmoles) até que o volume dobrou. A mistura foi agitada 3 h e depois concentrada para secura para obter 31a (0,372 g, quantitativa).

31-2). 4-(1-metil-4-oxo-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-il)-2-tri- fluormetiIbenzonitrila, 31b,

[00184] Uma mistura de 1a (0,114 g, 0,5 mmol) e 31a (0,062 g, 0,5 mmol) em DMF seco (0,2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 0,5 h. A esta mistura foram adicionados 10 ml de metanol e 2 ml de 2N HCl. A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 2 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 31b (0,159 g, 0,45 mmol, 90%) como um pó branco.

[00185] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,91 - 2,05 (m, 6H), 2,16 - 2,21 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 7,77 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 26,4, 30,3, 35,4, 73,2, 109,5, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 126,9 (q, J = 4,8 Hz), 132,2, 133,2 (q, J = 34,3 Hz), 135,2, 137,5, 176,8, 178,5.

[00186] 31-3). 4-(1-metiI-2,4-dioxo-1,3-diaza-espiro[4,4]non-3-iI)-2- trifIuormetiIbenzonitriIa, 31c, [RD76]

[00187] Peróxido de hidrogênio (2 mI, 30%) foi adicionado à mistura de 31b (0,07 g, 0,2 mmoI) em ácido acético gIaciaI (3 mI). Após ser agitada na temperatura ambiente durante 10 h, a mistura de reação foi despejada em acetato de etiIa (20 mI) e depois Iavada com água (2 x 20 mI). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona) para produzir 31c (0,057 g, 0,168 mmol, 84%) como um pó branco.

[00188] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,88 - 1,99 (m, 6H), 2,12 - 2,17 (m, 2H), 2,98 (s, 3H), 7,88 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 25,2, 26,5, 34,8, 70,1, 108,0, 115,1, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 122,9 (q, J = 4,9 Hz), 127,9, 133,5 (q, J = 32,9 Hz), 135,3, 136,6, 152,7, 176,1.

Exemplo 32 4-(8-metiIimino-6-tioxo-5-p-toIiI-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-7-iI)-2- trifluormetil-benzonitrila, 32a, [RD90]

[00189] Uma mistura de 7b (0,042 g, 0,1 mmol), DBU (0,023 g, 0,15 mmol) e iodometano (0,073 g, 0,5 mmol) em DMF (0,3 ml) foi agitada durante 15 h na temperatura ambiente. Após DMF ser evaporado, o meio foi cromatografada (diclorometano) para produzir 32a (0,011 g, 0,026 mmol, 26%) como pó branco.

[00190] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,58 - 1,65 (m, 1H), 2,04 - 2,13 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,70 - 2,77 (m, 2H), 3,06 - 3,10 (m, 2H), 3,58 (s, CH3-N, isômero principal) [2,70 (s, CH3-N, isômero secundário)], 7,20 - 7,34 (m, 4H), 7,75 - 7,91 (m, 3H); (CDCl3, 100 MHz) δ 12,6, 21,4, 30,2, 33,7 (35,3 para o outro isômero), 66,9, 109,1, 115,2, 122,1 (q, J = 272,5 Hz), 128,5 (q, J = 4,9 Hz), 129,8, 130,4, 130,6, 132,8, 133,2 (q, J = 32,9 Hz), 133,5, 134,9, 139,8, 157,0, 180,2.

Exemplo 33 1-[3-(4-ciano-3-trifluormetil-fenil)-5,5-dimetil-2-tioxo-1-p-tolil-imi- dazolidin-4-ilideno]-3-etil-tiouréia, 33a, [RD91]

[00191] Uma mistura de 5b (0,06 g, 0,149 mmol), etiltioisocianato (0,087 g, 1 mmol) e CuI (0,01 g, 0,05 mmol) em DMF (0,1 ml) foi aquecida sob microondas durante 45 minutos. Depois o meio foi lavado com salmoura e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (HPLC, coluna de alumina) para produzir 33a (0,054 g, 0,108 mmol, 72%) como pó branco.

[00192] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,15 (t, J = 7,23 Hz, 3H), 1,70 [1,75 isômero secundário] (s, 6H), 2,42 (s, 3H), 3,28 - 3,39 (m, 2H) [3,15 - 3,22 (m, 2H), isômero secundário], 6,50 (bs, 1H) [6,93 (bs, 1H), isômero secundário], 7,14 - 7,18 (m, 2H), 7,32 - 7,35 (m, 2H), 7,77 - 7,94 (m, 3H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,31 (13,83 secundário), 21,3, 25,22 (24,89 secundário), 40,31 (40,67 secundário), 68,1, 109,9, 114,9, 122,3 (q, J = 272,5 Hz), 127,6 (q, J = 4,9 Hz), 129,1, 129,59 (129,55 secundário), 130,52 (130,57 secundário), 132,27 (132,15 secundário), 132,9 (q, J = 32,9 Hz), 134,27 (134,15 secundário), 134,9, 135,2, 156,33 (156,06 secundário), 180,28 (180,06 secundário), 187,24 (186,63 secundário).

Exemplo 34 1-[7-(4-ciano-3-trifluormetil-fenil)-6-tioxo-5-p-tolil-5,7-diaza-espiro [3,4]oct-8-ilideno]-3-fenil-tiouréia, 34a, [RD92]

[00193] Uma mistura de 7b (0,021 g, 0,05 mmol) e feniltioisocianato (0,027 g, 0,2 mmol) em DMF (0,3 ml) foi agitada durante 2 dias a 60°C. Após o DMF ser evaporado, o meio foi cromatografado (diclorometano) para produzir 34a (0,015 g, 0,028 mmol, 57%) como pó branco.

[00194] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,59 - 1,67 (m, 1H), 2,12 - 2,22 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,61 - 2,71 (m, 2H), 2,81 - 2,87 (m, 2H), 7,18 - 7,27 (m, 6H), 7,33 - 7,41 (m, 5H), 7,60 - 7,62 (m, 1H), 8,40 (bs, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,6, 21,4, 32,3, 69,6, 110,7, 114,8, 121,6, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 126,3, 128,0 (q, J = 4,9 Hz), 128,9, 129,4, 130,7, 132,5, 133,2 (q, J = 32,9 Hz), 134,1, 134,9, 137,7, 139,2, 140,2, 154,8, 180,3, 185,5.

Exemplo 35 1-(4-Ciano-3-trifIuormetiI-feniI)-3-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiI-feniI)-6- tioxo-5-p-tolil-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-8-ilideno]-tiouréia, 35a, [RD93]

[00195] Uma mistura de 1a (0,5,02 g, 2,2 mmoles) e 7a (0,186 g, 1 mmol) em DMF (1 ml) foi agitada na temperatura ambiente. Após 20 horas de agitação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um líquido viscoso laranja, que foi cromatografado (diclorometano:acetona, 99:1) para produzir 35a (0,269 g, 0,42 mmol, 42%) como um pó amarelo. estrutura de raio X de 35a.

Exemplo 36 36-1). 1-(4-hidroximetilfenilamino)-ciclobutanocarbonitrila, 36 a

[00196] Cianureto de trimetilsilila (0,66 ml, 5 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de ácido 4-aminobenzóico (0,492 g, 4 mmoles) e ciclobutanona (0,35 g, 5 mmoles) em diclorometano (10 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 6 h e depois concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano) para produzir 36a (0,677 g, 3,36 mmol, 84%) como um sólido marrom.

36-2). 4-[8-(4-hidroximetilfenil)-5-oxo-7-tioxo-6-azaespiro[3,4]oct-6-il]-2- trifluormetil-benzonitrila, 36b, [RD110]

[00197] Uma mistura de 1a (0,342 g, 1,5 mmol) e 36a (0,21 g, 1 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 24 h. A esta mistura foram adicionados metanol (20 ml) e HCl aq. 2N (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 6 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (40 ml) e extraída com acetato de etila (60 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 90:10) para produzir 36b (0,296 g, 0,69 mmol, 69%) como um pó branco.

[00198] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,63 - 1,68 (m, 1H), 2,17 - 2,26 (m, 1H), 2,52 - 2,68 (m, 4H), 4,75 (s, 2H), 7,30 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,88 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 - 7,98 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 64,4, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 128,3, 130,0, 132,2, 133,3, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 134,2, 137,2, 142,9, 174,9, 179,9.

Exemplo 37 4-[5-(4-formiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-iI]-2- trifluormetil-benzonitrila, 37a, [RD114]

[00199] A uma mistura de 36b (0,303 g, 0,7 mmol) e periodinano Dess-Martin 0,417g, 1 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado piridina (1,01 g, 1 mmol). A mistura foi agitada durante 2 horas na temperatura ambiente e depois éter etílico (10 ml) foi adicionado para precipitar o subproduto da reação. Após filtração e concentração sob pressão reduzida, a mistura foi cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir 37a (0,24 g, 0,56 mmol, 80%) como pó branco.

[00200] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,62 - 1,73 (m, 1H), 2,24 - 2,30 (m, 1H), 2,50 - 2,58 (m, 2H), 2,69 - 2,75 (m, 2H), 7,53 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,97 - 7,99 (m, 2H), 8,11 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 10,12 (s, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,7, 67,5, 110,2, 114,8, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 129,1, 131,0, 131,2, 132,2, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,3, 136,9, 140,5, 174,5, 179,8, 190,8.

Exemplo 38 4-{5-[4-(1-hidroxietiI)-feniI]-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-iI}-2- trifluormetil-benzonitrila, 38a [RD116]

[00201] A mistura de 37a (0,043 g, 0,1 mmol) e THF seco (1 ml) em um frasco secado com fogo foi colocada sob argônio e esfriada para - 78°C. Depois, iodeto de metilmagnésio (1,1 ml, 0,1 M) foi adicionado. A mistura foi agitada em -78°C durante 30 minutos e aquecida lentamente para a temperatura ambiente. O meio foi lavado com água (3 ml) e extraído com acetato de etila (10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir 38a (0,037 g, 0,082 mmol, 82%) como um pó branco.

[00202] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,57 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,61 - 1,71 (m, 1H), 2,09 (d, J = 3,2 Hz, OH), 2,16 - 2,28 (m, 1H), 2,52 - 2,60 (m, 2H), 2,63 - 2,69 (m, 2H), 5,00 (dd, J1 = 6,5 Hz, q, J2 = 3,1 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J1 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 - 7,98 (m, 2H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 25,3, 31,5, 67,4, 69,8, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 127,1, 129,9, 132,2, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 134,1, 135,2, 137,1, 147,6, 174,9, 179,9.

Exemplo 39 Éster etílico de ácido 3-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo- 5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-acrílico, 39a [RD117]

[00203] Uma mistura de 37a (0,043 g, 0,1 mmol) e (carbetoxietilideno)trifenilfosforano (0,039 g, 0,12 mmol) em diclorometano (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 10 horas. O meio foi concentrado e cromatografado (diclorometano) para produzir 39a (0,048 g, 0,096 mmol, 96%) como pó branco.

[00204] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,66 - 1,70 (m, 1H), 2,19 - 2,65 (m, 1H), 2,51 - 2,69 (m, 2H), 2,66 - 2,72 (m, 2H), 4,28 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 6,51 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,73 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 - 7,98 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 14,3, 31,6, 60,8, 67,5, 110,0, 114,9, 120,5, 121,8 (q, J = 272,6 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 129,5, 130,5, 132,2, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 136,0, 136,5, 137,0, 142,7, 166,5, 174,7, 179,8.

Exemplo 40 4-{5-[4-(3-hidroxipropeniI)-feniI]-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro [3,4]oct- 7-il}-2-trifluormetilbenzonitrila, 40a [RD120]

[00205] A uma mistura de 39a (0,05 g, 0,1 mmol) em diclorometano (2 ml) a -78°C foi adicionado uma solução de hidreto de diisobutilalumínio em THF (0,11 ml, 1M, 0,11 mmol). A mistura foi agitada em -78°C durante 3 horas. Após ser aquecida para a temperatura ambiente, a mistura foi lavada com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir 40a (0,040 g, 0,089 mmol, 89%) como um pó branco.

[00206] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,57 - 1,68 (m, 1H), 2,17 - 2,39 (m, 1H), 2,55 - 2,61 (m, 2H), 2,61 - 2,67 (m, 2H), 4,39 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 6,47 (dt, J1 = 16,0 Hz, J2 = 5,3 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,96 - 7,98 (m, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 63,4, 67,4, 110,0, 114,8, 120,5, 121,8 (q, J = 272,6 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 127,9, 129,2, 130,1, 131,1, 132,1, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,1, 138,4, 174,8, 179,9.

Exemplo 41 41-1) Ácido 3-[4-(1-cianocicIobutiIamino)-feniI]-propiônico, 41a (41-1)

[00207] Cianureto de trimetilsilila (0,4 g, 4 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de ácido 3-(4-aminofenil)-propiônico (0,33 g, 2 mmoles), ciclobutanona (0,35 g, 5 mmoles) e sulfato de sódio (1 g) em 1,4-dioxano (5 ml). A mistura foi agitada durante 15 horas. Após filtração para eliminar o sulfato de sódio, o meio foi concentrado sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano:acetona, 50:50) para produzir 41a (0,472 g, 1,93 mmol, 97%) como um sólido amarelado.

41-2) Éster metílico de ácido 3-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo- 6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-propiônico, 41b (41-2) [RD128]

[00208] Uma mistura de 1a (0,661 g, 2,9 mmoles) e 41a (0,472 g, 1,93 mmol) em DMF seco (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. (5 ml, 2M). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 3 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 41b (0,582 g, 1,19 mmol, 62%) como um pó branco.

[00209] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,60 - 1,70 (m, 1H), 2,14 - 2,26 (m, 1H), 2,51 - 2,56 (m, 2H), 2,58 - 2,67 (m, 2H), 2,71 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,05 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,69 (s, 3H), 7,23 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,41 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 30,5, 31,4, 35,1, 51,8, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,9, 130,0, 133,2, 132,3, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,7, 137,2, 142,5, 173,1, 174,9, 179,9.

41-3) Ácido 3-{4-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-iI]-feniI}-propiônico, 41c (41-3) [RD132]

[00210] Uma mistura de 41b (0,487 g, 1 mmoI) em metanoI (10 mI) e soIução de hidróxido de sódio (10 mI, 2M) foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas. MetanoI foi evaporado. O resíduo foi ajustado para pH = 5 por HCI aq. (2M) e depois extraído com acetato de etiIa (3 x 50 mI). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada para secura para obter 41c (0,472 g, 0,99 mmoI, 99%).

41-4) 3-{4-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-iI]-feniI}-propionamida, 41d (41-4) [RD133]

[00211] A uma suspensão de 41c (0,094 g, 0,2 mmoI) em THF (10 mI) a -5°C foi adicionado cIoreto de tioniIa (0,019 mI, 0,26 mmoI). O meio foi agitado em -5oC durante uma hora. Depois amônia foi borbuIhada na mistura. O excesso de amônia foi condensado por condensador de refIuxo em -78°C durante 30 minutos e depois foi deixado evaporar. O meio foi fiItrado. O fiItrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano:acetona, 70:30) para produzir 41d (0,09 g, 0,19 mmol, 95%) como um pó esbranquiçado.

[00212] 1H RMN (acetona-d6, 400 MHz) δ 1,52 - 160 (m, 1H), 2,01 - 2,09 (m, 1H), 2,49 - 2,58 (m, 4H), 2,61 - 2,67 (m, 2H), 2,98 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 6,20 (bs, 1H), 6,78 (bs, 1H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 8,03 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (acetona-d6, 100 MHz) δ 13,4, 30,7, 31,2, 36,4, 67,5, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J = 271,5 Hz), 127,5 (q, J = 4,7 Hz), 129,5, 130,0, 131,8 (q, J = 32,5 Hz), 133,3, 133,8, 135,6, 138,4, 143,2, 171,6, 174,9, 178,0.

41-5) 3-{4-[7-(4-Ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-N-metiI-propionamida, 41e (41-5) [RD134]

[00213] A uma suspensão de 41c (0,094 g, 0,2 mmol) em THF (10 ml) a -5°C foi adicionado cloreto de tionila (0,019 ml, 0,26 mmol). O meio foi agitado em -5°C durante uma hora. Depois metilamina foi borbulhada na mistura em -5°C durante 30 minutos. O meio foi filtrado. O filtrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano:acetona, 75:25) para produzir 41e (0,092 g, 0,19 mmol, 95%) como um pó esbranquiçado.

[00214] 1H RMN (acetona-d6, 400 MHz) δ 1,51 - 1,60 (m, 1H), 2,01 - 2,11 (m, 1H), 2,48 - 2,58 (m, 4H), 2,61 - 2,67 (m, 2H), 2,77 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 2,98 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,03 (bs, NH), 7,33 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 8,01 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (acetona-d6, 100 MHz) δ 13,4, 25,3, 30,0, 31,2, 37,0, 67,6, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J = 271,5 Hz), 127,4 (q, J = 4,7 Hz), 129,5, 130,0, 131,9 (q, J = 32,5 Hz), 133,3, 133,8, 135,6, 138,4, 143,1, 171,7, 175,0, 178,0.

41-6) 3-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-il]-feniI}-N-(2-hidroxietil)-propionamida, 41f (41-6) [RD135]

[00215] A uma suspensão de 41c (0,094 g, 0,2 mmol) em THF (10 ml) a -5°C foi adicionado cloreto de tionila (0,019 ml, 0,26 mmol). O meio foi agitado em -5°C durante uma hora. Depois 2-aminoetanol (0,0183 g, 0,03 mmol) foi adicionado na mistura em -5°C. Após agitação de um adicional de 30 minutos, o meio foi filtrado. O filtrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano:acetona, 50:50) para produzir 41f (0,093 g, 0,18 mmol, 90%) como um pó esbranquiçado.

[00216] 1H RMN (acetona-d6, 400 MHz) δ 1,51 - 161 (m, 1H), 2,01 - 2,11 (m, 1H), 2,49 - 2,66 (m, 6H), 2,99 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 3,27 (dd, J1 = 11,2 Hz, J2 = 5,6 Hz, 3H), 3,51 (dd, J1 = 11,2 Hz, J2 = 5,6 Hz, 2H), 3,87 (bs, OH), 7,20 (bs, NH), 7,33 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 8,02 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (acetona-d6, 100 MHz) δ 13,4, 31,0, 31,2, 37,1, 42,0, 61,2, 67,6, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J = 271,5 Hz), 127,4 (q, J = 4,7 Hz), 129,6, 130,0, 131,9 (q, J = 32,5 Hz), 133,3, 133,8, 135,6, 138,4, 143,0, 171,9, 175,0, 178,1.

42-1) ácido 4-[4-(1-Cianociclobutilamino)-fenil]-butírico, 42 a

[00217] Cianureto de trimetilsilila (0,50 g, 5 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de ácido 4-(4-aminofenil)-butírico (0,537 g, 3 mmoles), ciclobutanona (0,35 g, 5 mmoles) e sulfato de sódio (1 g) em 1,4-dioxano (10 ml). A mistura foi agitada durante 15 horas. Após filtração para eliminar o sulfato de sódio, o meio foi concentrada sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano:acetona, 50:50) para produzir 42a (0,665 g, 2,58 mmol, 86%) como um sólido amarelado.

42-2) Éster metílico de ácido 4-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo- 6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-butírico, 42b [RD129]

[00218] Uma mistura de 1a (0,547 g, 2,4 mmoles) e 42a (0,342 g, 1,5 mmol) em DMF seco (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e HCl aq. (5 ml, 2M). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 3 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano) para produzir 42b (0,594 g, 1,18 mmol, 79%) como um pó branco.

[00219] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,60 - 1,70 (m, 1H), 1,98 - 2,07 (m, 2H), 2,14 - 2,26 (m, 1H), 2,40 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,52 - 2,60 (m, 2H), 2,62 - 2,68 (m, 2H), 2,74 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 3,68 (s, 3H), 7,22 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,86 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 26,1, 31,4, 33,5, 34,8, 51,7, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,7, 130,1, 132,3, 133,0, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,2, 143,5, 173,8, 175,0, 179,9.

42-3) Ácido 4-{4-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-iI]-feniI}-butírico, 42c [RD141]

[00220] Uma mistura de 42b (0,501 g, 1 mmoI) em metanoI (10 mI) e solução de hidróxido de sódio (10 ml, 2M) foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas. O metanol foi evaporado. O resíduo foi ajustado para pH = 5 por HCl aq. (2M) e depois, o meio foi extraído com acetato de etila (3 x 50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada para secura para obter 42c (0,482 g, 0,99 mmol, 99%), a estrutura da qual é illustrada na Fórmula 5.

[00221] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,60 - 1,70 (m, 1H), 1,98 - 2,07 (m, 2H), 2,14 - 2,26 (m, 1H), 2,45 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,51 - 2,59 (m, 2H), 2,62 - 2,68 (m, 2H), 2,77 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,85 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 25,9, 31,4, 33,4, 34,7, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,6 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,8, 130,1, 132,3, 133,0, 133,4 (q, J = 33,1 Hz), 135,2, 137,2, 143,3, 174,9, 178,9, 179,9.

42-4) 4-{4-[7-(4-Ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-iI]-feniI}-butiramida, 42d [RD130]

[00222] A uma suspensão de 42c (0,097 g, 0,2 mmoI) em THF (10 mI) a -5°C foi adicionado cIoreto de tioniIa (0,019 mI, 0,26 mmoI). O meio foi agitado em -5°C durante uma hora. Depois amônia foi borbuIhada na mistura. O excesso de amônia foi condensado por condensador de refIuxo a -78°C durante 30 minutos e depois foi deixado evaporar. O meio foi fiItrado. O fiItrado foi concentrado e cromatografado (dicIorometano:acetona, 70:30) para produzir 42d (0,093 g, 0,19 mmoI, 95%) como um pó esbranquiçdao.

[00223] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,57 - 1,70 (m, 1H), 2,00 - 2,08 (m, 2H), 2,16 - 2,25 (m, 1H), 2,31 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,51 - 2,59 (m, 2H), 2,62 - 2,68 (m, 2H), 2,77 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 5,56 (bs, 1H), 5,65 (bs, 1H), 7,22 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,85 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 26,5, 31,4, 34,8, 35,0, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,8, 130,1, 132,2, 133,0, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,2, 143,5, 173,8, 174,9, 179,9.

42-5) 4-{4-[7-(4-Ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-iI]-feniI}-N-metiI-butiramida, 42e [KD131]

[00224] A uma suspensão de 42c (0,097 g, 0,2 mmoI) em THF (10 mI) a -5°C foi adicionado cIoreto de tioniIa (0,019 mI, 0,26 mmoI). O meio foi agitado em -5°C durante uma hora. Depois metiIamina foi borbuIhada na mistura a -5°C durante 30 minutos. O meio foi fiItrado. O fiItrado foi concentrado e cromatografado (dicIorometano:acetona, 75:25) para produzir 42e (0,095 g, 0,19 mmoI, 95%) como um pó esbranquiçado.

[00225] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,52 - 1,64 (m, 1H), 1,94 - 2,01 (m, 2H), 2,10 - 2,17 (m, 1H), 2,20 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,46 - 2,62 (m, 4H), 2,69 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,73 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 6,09 (bs, 1H), 7,16 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,82 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 26,2, 26,8, 31,4, 35,0, 35,7, 67,5, 109,7, 114,9, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,7, 130,0, 132,3, 133,8, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,3, 143,7, 173,3, 174,9, 179,8.

42-6) N-(4-{4-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-iI]feniI}-butanoiI)-metanossuIfonamida, 42f [RD157]

[00226] Uma mistura de ácido 4-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8- oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]fenil}butanóico (42c) (0,049 g, 0,1 mmol), cloreto de 2,4,6-triclorobenzoíla (0,244 g, 1 mmol), 4- dimetilaminopiridina (0,122 g, 1 mmol) e metanossulfonamida (0,019 g, 0,2 mmol) em diclorometano foi agitada na temperatura ambiente durante 20 horas. A mistura foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 80:20) para produzir N-(4-{4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]fenil}- butanoil)-metanossulfonamida (42f) [RD157] (0,053 g, 0,094 mmol, 94%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 8, como um pó branco. Fórmula 8

[00227] 1H RMN (acetona-d6, 400 MHz) δ 1,51 - 160 (m, 1H), 1,96 - 2,11 (m, 3H), 2,49 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,51 - 2,57 (m, 2H), 2,61 - 2,67 (m, 2H), 2,75 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,94 (bs, 1H), 3,24 (s, 3H), 7,33 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 8,02 (dd, J = 8,3, 1,6 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (acetona-d6, 100 MHz) δ 13,4, 25,8, 31,2, 34,3, 35,2, 40,6, 67,6, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J = 271,5 Hz), 127,5 (q, J = 4,9 Hz), 129,6, 130,1, 131,9 (q, J = 33,6 Hz), 133,3, 133,9, 135,6, 138,4, 143,1, 171,9, 175,0, 180,5.

42-7) N-metil-4-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-6,8-dioxo-5,7- diazaespiro[3,4]oct-5-il]-fenil}butiramida, 42g [RD158]

[00228] Peróxido de hidrogênio (30%, 0,4) foi adicionado por gotejamento a uma solução de N-metil-4-{4-[7-(4-Ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5- il]fenil}butanamida (42e) (0,032 g, 0,064 mmol) em ácido acético glacial (0,5 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas e depois lavada com água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 80:20) para produzir N-metil- 4-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-6,8-dioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5- il]-fenil} butiramida (42g) [RD 158] (0,029 g, 0,06 mmol, 94%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 9, como um pó branco. Fórmula 9

[00229] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,63 - 1,71 (m, 1H), 1,93 - 2,04 (m, 2H), 2,18 - 2,27 (m, 3H), 2,44 - 2,53 (m, 2H), 2,57 - 2,65 (m, 2H), 2,70 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,79 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 5,79 (bs, 1H), 7,21 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,92 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 1,8 Hz, 1H).

Exemplo 43 43-1) Éster terc-butíIico de ácido 4-(4-aminofeniI)-piperazina-1- carboxílico, 43a

[00230] Uma mistura de 4-iodoanilina (0,654 g, 3 mmoles), éster terc- butílico de ácido piperazina-1-carboxílico (0,67 g, 3,6 mmoles), fosfato de potassio (1,272 g, 6 mmoles), etileno glicol (0,33 ml) e iodeto de cobre (0,03 g, 0,15 mmol) em 2-propanol (3 ml) foi colocada sob argônio em um tubo lacrado e aquecido para 80°C durante 30 horas. Após ser esfriado para a temperatura ambiente, o meio foi lavado com água (50 ml) e extraído com acetato de etila (100 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 70:30) para produzir 43a (0,36 g, 1,3 mmol, 43%) como um pó amarelo.

43-2) éster terc-butílico de ácido 4-[4-(1-cianociclobutilamino) fenil]- piperazina-1-carboxílico, 43b

[00231] Cianureto de trimetilsilila (0,3 g, 3 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de 43a (0,415 g, 1,5 mmol), ciclobutanona (0,21 g, 3 mmoles) e sulfato de sódio (1 g) em diclorometano (5 ml). A mistura foi agitada durante 15 horas. Após filtração para eliminar o sulfato de sódio, o meio foi concentrado sob vácuo para obter um líquido marrom que foi submetido à cromatografia (diclorometano:acetona, 75:25) para produzir 43b (0,448 g, 1,26 mmol, 84%) como um sólido amarelo.

43-3) Éster terc-butílico de ácido 4-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8- imino-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-piperazina-1-carbo- xílico, 43c [RD139] e éster terc-butílico de ácido 4-{4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-(4-ciano-3-trifluormetil-feniltiocarbamoilimino)-6- tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-piperazina-1-carboxíIico, 43d [RD140]

[00232] Uma mistura de 1a (0,228 g, 1 mmol) e 43b (0,472 g, 0,63 mmol) em DMF seco (1 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 20 horas. A mistura foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 90:10) para produzir 43c (0,173 g, 0,296 mmol, 47%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 10, como um pó esbranquiçado e 43d (0,169 g, 0,21 mmol, 33%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 11, como um pó amarelo. Fórmula 10

[00233] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,48, (s, 9H), 1,57 - 1,67 (m, 1H), 2,01 - 2,09 (m, 1H), 2,59 - 2,70 (m, 4H), 3,25 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 3,59 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 7,02 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,81 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 1H). Fórmula 11

[00234] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,48, (s, 9H), 1,57 - 1,64 (m, 1H), 2,01 - 2,10 (m, 1H), 2,60 - 2,89 (m, 4H), 3,24 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 3,57 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 7,02 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,54 - 7,98 (m, 4H), 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 1H).

43-4) 4-[8-Oxo-5-(4-piperazin-1-iI-feniI)-6-tioxo-5,7-diazaespiro [3,4] oct-7-iI]-2-trifIuormetiIbenzonitriIa, 43e [RD137]

[00235] Uma mistura de 43c (0,117 g, 0,2 mmoI), metanoI (5 mI) e HCI aq. (2 mI, 2M) foi submetida a refIuxo durante 2 horas. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água geIada (10 mI) e extraída com acetato de etiIa (3 x 30 mI). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (dicIorometano:acetona, 50:50 e depois metanoI: acetona, 50:50) para produzir 43e (0,089 g, 0,184 mmoI, 92%) como um pó branco.

[00236] 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) δ 1,51 - 1,61 (m, 1H), 2,01 - 2,11 (m, 1H), 2,48 - 2,59 (m, 4H), 2,90 - 2,97 (m, 4H), 3,25 - 3,30 (m, 4H), 7,03 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,86 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CD3OD, 100 MHz) δ 13,2, 30,9, 45,1, 48,9, 67,5, 108,9, 114,8, 115,9, 122,3 (q, J- 271,7 Hz), 126,4, 127,3 (q, J = 4,7 Hz), 130,4, 132,2 (q, J = 33,2 Hz), 133,0, 135,4, 138,1, 152,1, 175,4, 180,4.

43-5) 4-{5-[4-(4-metanossulfonilpiperazin-1-il)-fenil]-8-oxo-6-tioxo-5,7- diazaespiro[3,4]oct-7-il}-2-trifluormetilbenzonitrila, 43f [RD138]

[00237] Uma mistura de 43e (0,049g, 0,1 mmol), cloreto de metanossulfonila (0,012 ml, 0,15 mmol) e trietilamina (0,15 ml) em diclorometano foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas. O meio foi filtrado. O filtrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano: acetona, 95:5) para produzir 43f (0,042 g, 0,074 mmol, 74%) como um pó branco.

[00238] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,62 - 1,70 (m, 1H), 2,14 - 2,23 (m, 1H), 2,51 - 2,58 (m, 2H), 2,61 - 2,67 (m, 2H), 2,84 (s, 3H), 3,39 (s, 8H), 7,05 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,84 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 31,4, 34,6, 45,7, 48,4, 67,5, 109,8, 114,9, 117,0, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 126,8, 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 130,7, 132,3, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,3, 151,1, 175,0, 180,2.

Exemplo 44 44-1) Ácido 3-{4-[7-(4-Ciano-3-trifluormetil-feniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7- diaza-espiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-acrílico, 44 a

[00239] Uma mistura de 39a (0,025 g, 0,05 mmol) em metanol (2 ml) e solução de hidróxido de sódio (2 ml, 2M) foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas. Metanol foi evaporada. O resíduo foi ajustada para pH = 5 por HCl aq. (2M) e depois extraído com acetato de etila (3 x 50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada para secura para obter 44a (0,02 g, 0,042 mmol, 85%).

44-2) 3-{4-[7-(4-Ciano-3-trifluormetil-fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza- espiro[3,4]oct-5-il]-fenil}-acrilamida, 44b [RDl 19]

[00240] A uma suspensão de 44b (0,02 g, 0,042 mmol) em THF (1 ml) em -5°C foi adicionado cloreto de tionila (0,007 ml, 0,1 mmol). O meio foi agitado em -5°C durante uma hora. Depois amônia foi borbulhada na mistura. O excesso de amônia foi condensada por condensador de refluxo em -78°C durante 30 minutos e depois foi deixado evaporar. O meio foi filtrado. O filtrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano:acetona, 70:30) para produzir 44b (0,014 g, 0,03 mmol, 71%) como um pó esbranquiçado.

[00241] 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ 1,49 - 1,52 (m, 1H), 1,88 - 1,93 (m, 1H), 2,37 - 2,46 (m, 2H), 2,57 - 2,62 (m, 2H), 6,66 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 7,16 (bs, 1H), 7,43 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 7,58 (bs, 1H), 8,03 (dd, J1 = 8,3 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 8,3 Hz, 1H).

Exemplo 45 [RD145]

[00242] Cianureto de trimetilsilila (0,4 g, 4 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de cloridreto de 4-metanossulfonilfenilamina (0,415 g, 2 mmoles), ciclobutanona (0,28 g, 4 mmoles) e sulfato de sódio (1 g) em DMF (3 ml). A mistura foi agitada durante 15 horas a 120°C. Após filtração para remover o sulfato de sódio, o filtrado foi lavado com salmoura e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 90:10) para produzir 1-(4-metanossulfonilfenilamino)ciclobutanocarbonitrila (45a) (0,116 g, 0,44 mmol, 22%) como um sólido amarelado. 4- metanossulfonilfenilamina (0,201g, 1,17 mmol, 59%) foi também recuperada.

[00243] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (Ia) (0,0,141 g, 0,62 mmol) e 1-(4-metanossulfonilfenilamino) ciclobutanocarbonitrila (45a) (0,11 g, 0,42 mmol) em DMF seco (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 3 dias. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e 2N HCl aq. (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 3 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 97:3) para produzir 4-[5-(4- metanossulfonilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il]-2- trifluormetilbenzonitrila (45b) [RD145] (0,031 g, 0,065 mmol, 15%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 14, como um pó branco. Fórmula 14

[00244] 1H RMN (CDCI3 400 MHz) δ 1,63 - 1,72 (m, 1H), 2,21 - 2,28 (m, 1H), 2,46 - 2,54 (m, 2H), 2,68 - 2,74 (m, 2H), 3,16 (s, 3H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,85 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,3 Hz5 2H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,6, 31,8, 44,4, 67,5, 110,2, 114,8, 122,4 (q, J = 271,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,9 Hz), 129,4, 131,4, 132,1, 133,6 (q, J = 33,3 Hz), 135,3, 136,8, 140,3, 141,8, 174,4, 179,9.

Exemplo 46

[00245] Cianureto de trimetilsilila (0,69 g, 7 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de ácido 4-aminofenilacético (0,755 g, 5 mmoles) e ciclobutanona (0,49 g, 7 mmoles) em dioxano (20 ml). A mistura foi agitada durante 8 horas em 80°C. A mistura foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 60:40) para produzir ácido [4-(1-cianociclobutilamino) fenil]acético (46a) (1,138 g, 4,95 mmol, 99%) como um sólido branco.

46-1) RD146

[00246] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (1a) (0,638 g, 2,8 mmoles) e ácido [4-(1- cianociclobutilamino)fenil]acético (46a) (0,46 g, 2,0 mmoles) em DMF (5 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (20 ml) e 2N HCl aq. (10 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano puro e depois diclorometano:acetona, 95:5) para produzir éster metílico de ácido {4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo- 6-tioxo-5,7-diaza-espiro [3,4]oct-5-il]fenil}acético (46b) [RD146] (0,532 g, 1,124 mmol, 56%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 15, como um pó branco. Fórmula 15

[00247] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,60 - 1,69 (m, 1H), 2,15 - 2,25 (m, 1H), 2,50 - 2,58 (m, 2H), 2,61 - 2,66 (m, 2H), 3,72 (bs, 5H), 7,27 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 31,4, 44,7, 52,3, 67,4, 109,9, 114,9, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,9 Hz), 130,0, 131,1, 132,3, 133,0 (q, J = 33,3 Hz), 134,1, 135,2, 135,9, 137,2, 171,4, 174,9, 179,9.

46-2) RD147

[00248] Uma mistura de éster metílico de ácido {4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]fenil}acético (46b) (0,095 g, 0,2 mmol) e uma solução de hidróxido de sódio (1 ml, 2M) em metanol (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas. O metanol foi evaporada. O resíduo foi ajustado para pH 5 por 2M HCl aq. e depois a mistura foi extraído com acetato de etila (3 x 10 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada para secura para obter ácido {4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo- 5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]fenil}acético (46c) [RD147] (0,087 g, 0,19 mmol, 95%), a estrutura do qual é ilustrada na Fórmula 16. Fórmula 16

[00249] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,60 - 1,69 (m, 1H), 2,15 - 2,25 (m, 1H), 2,50 - 2,64 (m, 4H), 3,73 (s, 2H), 7,26 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 31,4, 40,2, 40,8, 67,4, 109,9, 114,9, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,9 Hz), 129,9, 131,2, 132,3, 133,3 (q, J = 33,3 Hz), 133,9, 135,2, 136,1, 137,2, 174,1, 174,9, 179,9.

46-3) RD148

[00250] Cloreto de tionila (0,238 g, 2 mmoles) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de ácido {4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)- 8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]fenil}acético (46c) (0,357 g, 0,777 mmol) em THF (5 ml) esfriado para 0°C. A mistura foi agitada durante 1 hora na temperatura ambiente e depois amônia foi borbulhada na mistura. O excesso de amônia foi condensada por um condensador de refluxo em -78°C durante 30 minutos e depois foi deixado evaporar. O meio foi filtrado e o filtrado foi concentrado e cromatografado (diclorometano:acetona, 70:30) para produzir 2-{4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5- il]fenil}acetamida (46d) [RD148] (0,345 g, 0,75 mmol, 97%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 17, como um pó esbranquiçado. Fórmula 17

[00251] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,62 - 1,66 (m, 1H), 2,18 - 2,23 (m, 1H), 2,49 - 2,55 (m, 2H), 2,61 - 2,66 (m, 2H), 3,63 (s, 2H), 5,91 (bs, 1H), 6,10 (bs, 1H), 7,27 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,83 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 42,5, 67,4, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J = 272,4 Hz), 127,1 (q, J = 4,9 Hz), 130,2, 131,1, 132,2, 133,3 (q, J = 33,3 Hz), 134,1, 135,2, 136,8, 137,2, 172,8, 174,8, 180,0. 46-4) RD149

[00252] CIoreto de tioniIa (0,238 g, 2 mmoIes) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de ácido {4-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)- 8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-iI]feniI}acético (46c) (0,357 g, 0,777 mmoI) em THF (5 mI) esfriada para 0°C. A mistura foi agitada durante 1 hora na temperatura ambiente e depois metiIamina (0,5 mI) foi adicionada na mistura. A mistura foi agitada durante um adicionaI de 2 horas. O meio foi fiItrado e o fiItrado foi concentrado e cromatografado (dicIorometano-.acetona, 80:20) para produzir N-metiI-2-{4-[7-(4-ciano- 3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5- il]fenil}acetamida (46e) [RD149] (0,348 g, 0,738 mmol, 95%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 18, como um pó esbranquiçado. Fórmula 18

[00253] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,61 - 1,70 (m, 1H), 2,17 - 2,31 (m, 1H), 2,50 - 2,56 (m, 2H), 2,61 - 2,68 (m, 2H), 2,82 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 3,62 (s, 2H), 7,27 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 26,6, 31,5, 43,1, 67,4, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,1 (q, J = 4,9 Hz), 130,2, 131,0, 132,2, 133,3 (q, J = 33,3 Hz), 134,1, 135,2, 137,0, 137,1, 170,1, 174,8, 179,9.

Exemplo 47

[00254] N-{4-[3-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-5,5-dimetiI-4-oxo-2- tioxo-imidazolidin-1-il]fenil}metanossulfonamida (47a) [RD150]

[00255] Uma mistura de 4-[3-(4-aminofenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2- tioxoimidazolidin-1-il]-2-frifluormetilbenzonitrila (2d) (0,02 g, 0,05 mmol), cloreto de metanossulfonila (0,009g, 0,075 mmol) e piridina (0,006 g, 0,075 mmol) em diclorometano (1 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. O meio foi lavado com água (2 ml) e extraído com acetato de etila (5 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (HPLC, coluna de alumina) para produzir N-{4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5-dimetil-4-oxo-2-tioxo-imidazolidin- 1-il]fenil}metanossulfonamida (47a) [RD150] (0,009 g, 0,018 mmol, 36%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 2, como um pó branco.

Fórmula 2

[00256] 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ 1,46 (s, 6H), 3,07 (s, 3H), 7,32 (s, 4H), 8,05 (dd, J = 8,2, 1,2 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 10,08 (bs, 1H); 13C RMN (DMSO-d6, 100 MHz) δ 23,3, 40,4, 66,7, 109,0, 115,5, 119,9, 122,6 (q, J = 272,2 Hz), 128,5 (q, J = 4,7 Hz), 130,8, 131,2, 131,5 (q, J = 32,3 Hz), 134,5, 136,6, 138,6, 139,5, 175,4, 180,4.

Exemplo 48

[00257] N-{4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5-dimetiI-4-oxo-2- tioxo-imidazolidin-1-il]fenil}acetamida, 48a, [RD151]

[00258] Uma mistura de 4-[3-(4-aminofenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2- tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetilbenzonitrila (2d) [RD9] (0,008 g, 0,02 mmol), cloreto de acetila (0,004 g, 0,03 mmol) e trietilamina (0,003 g, 0,03 mmol) em diclorometano (1 ml) foi agitada em 0°C durante 2 horas. A mistura foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 90:10) para produzir N-{4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5-dimetil-4- oxo-2-tioxo-imidazolidin-1-il] fenil}acetamida, 48a, [RD151] (0,007 g, 0,016 mmol, 80%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 3, como um pó branco.

Fórmula 3

[00259] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,58 (s, 6H), 2,21 (s, 3H), 7,24 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,48 (bs, 1H), 7,69 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,83 (dd, J = 8,2, 1,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 23,6, 53,4, 66,4, 110,0, 114,8, 120,7, 122,6 (q, J = 272,2 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,1, 130,2, 132,2, 133,5 (q, J = 32,3 Hz), 135,2, 137,1, 139,2, 168,1, 175,0, 180,0.

Exemplo 49

[00260] Ácido sulfúrico concentrado foi lentamente adicionado a uma mistura de ácido 4-aminobenzóico (4 g, 29,2 mmoles) em metanol esfriado para 0°C. Após a adição, a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura foi lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada sob vácuo para obter éster metílico de ácido 4-aminobenzóico (49a) (4,22 g, 27,9 mmol, 96%) como um sólido esbranquiçado.

[00261] Uma mistura de éster metílico de ácido 4-aminobenzóico (0,32 g, 2,12 mmoles), acetonacianoidrina (3ml) e sulfato de sódio (1 g) foi submetida a refluxo durante 15 horas. Após filtração para remover o sulfato de sódio, o filtrado foi lavado com salmoura e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 60:40) para produzir éster metílico de ácido 4- [(cianodimetilmetil)-amino]-benzóico (49b) (0,398 g, 1,95 mmol, 92%) como um sólido branco.

49-1) RD152

[00262] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (1a) (0,228 g, 1 mmol) e éster metílico de ácido 4-[(cianodimetilmetil)- amino]-benzóico (49b) (0,14 g, 0,64 mmol) em DMF (2 ml) foi aquecida sob irradiação de microondas em 60°C durante 12 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (6 ml) e 2N HCl aq. (2 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 4 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano; diclorometano:acetona, 75:25) para produzir éster metílico de ácido 4-[3-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-5,5-dimetil-4-oxo-2- tioxo-imidazolidin-1-il]benzóico (49c) [RD152] (0,18 g, 0,4 mmol, 63%), a estrutura do qual é ilustrada na Fórmula 19, como um pó branco. Fórmula 19

[00263] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,60 (s, 6H), 3,95 (s, 3H), 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,2, 1,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,6 Hz, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 23,8, 52,6, 66,6, 110,3, 114,8, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 129,8, 131,2, 131,4, 132,2, 133,5 (q, J = 32,3 Hz), 135,3, 137,0, 139,2, 165,9, 174,7, 179,7.

49-2) RD153

[00264] Uma mistura de éster metíIico de ácido 4-[3-(4-ciano-3- trifIuormetiIfeniI)-5,5-dimetiI-4-oxo-2-tioxo-imidazoIidin-1-iI]benzóico (49c) (0,02 g, 0,0435 mmoI) e metiIamina (2 mI distiIado de sua 40% soIução aquosa) foi mantida em -20°C durante 15 horas. Após evaporação da metiIamina, a mistura foi cromatografada (dicIorometano:acetona, 80:20) para produzir 4-[3-(4-ciano-3- trifIuormetiIfeniI)-5,5-dimetiI-4-oxo-2-tioxo-imidazoIidin-1-iI]-N-metiI- benzamida (49d) [RD153] (0,01 g, 0,0224, 51%), a estrutura da quaI é iIustrada na FórmuIa 20. O éster metíIico de ácido 4-[3-(4- ciano-3- trifIuormetiIfeniI)-5,5-dimetiI-4-oxo-2-tioxo-imidazoIidin-1-iI]benzóico (49c) (0,08 g, 0,0179 mmoI, 41%) foi também recuperado.

[00265] 1H RMN (Acetona-d6, 400 MHz) δ 1,60 (s, 6H), 2,90 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 7,48 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,80 (bs, 1H), 7,99 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 8,06 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (Acetona-d6, 100 MHz) δ 23,8, 54,0, 66,5, 110,3, 114,8, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 127,1 (q, J = 4,7 Hz), 128,2, 129,9, 133,5 (q, J = 32,3 Hz), 135,7, 135,8, 138,2, 138,3, 139,2, 166,0, 174,9, 179,7.

Exemplo 50 50-1) RD154

[00266] Uma mistura de 4-[8-(4-hidroximetilfenil)-5-oxo-7-tioxo-6- azaespiro[3,4]oct-6-il]-2-trifluormetil-benzonitrila (36b) (0,086 g, 0,2 mmol) e anidrido de metanossulfonila (0,07 g, 0,4 mmol) em diclorometano (1 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. A mistura foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 98:2) para produzir éster 4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-il]fenilmetílico de ácido metanossulfônico (50a) [RD154] (0,089 g, 0,175 mmol, 88%), a estrutura do qual é ilustrada na Fórmula 22, como um pó branco. Fórmula 22

[00267] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,63 - 1,70 (m, 1H), 2,17 - 2,31 (m, 1H), 2,48 - 2,57 (m, 2H), 2,64 - 2,70 (m, 2H), 3,04 (s, 3H), 5,30 (s, 2H), 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz5 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 1,6 Hz, 1H).

50-2) RD155

[00268] Metilamina (0,5 ml) foi borbulhada em uma mistura de éster 4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct- 5-il]fenilmetílico de ácido metanossulfônico (50a) (0,059 g, 0,115 mmol) em THF (3 ml) esfriada para -78°C. Após 1 hora de reação a -78°C, a mistura foi concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5; metanol) para produzir 4-[5-(4-metilaminometilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7- diazaespiro[3,4]oct-7-il]-2-trifluormetilbenzonitrila (50b) [RD155] (0,042 g, 0,095 mmol, 82%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 23, como um pó branco.

Fórmula 23

[00269] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,57 - 1,70 (m, 1H), 2,16 - 2,24 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,53 - 2,57 (m, 2H), 2,60 - 2,68 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 7,27 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 36,4, 55,6, 67,4, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,9 Hz), 129,1, 129,6, 129,8, 132,2, 133,3 (q, J = 33,3 Hz), 133,7, 135,2, 142,4, 174,8, 179,9.

50-3) RD156

[00270] Uma mistura de éster 4-[7-(4-ciano-3-trifIuormetiIfeniI)-8-oxo- 6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-iI]feniImetíIico de ácido metanossuIfônico (50a) (0,02 g, 0,039 mmoI) e dimetiIamina (0,5 mI; destiIado de sua soIução aquosa a 40%) em THF (1 mI) foi agitada durante 2 horas em -78°C. A mistura foi concentrada e cromatografada (dicIorometano:acetona, 95:5;acetona) para produzir 4-[5-(4- dimetiIaminometiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro [3,4]oct-7-iI]-2- trifIuormetiIbenzonitriIa (50c) [RD156] (0,017 g, 0,037 mmoI, 95%), a estrutura da quaI é iIustrada em FórmuIa 24, como um pó branco. FórmuIa 24

[00271] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,57 - 1,70 (m, 1H), 2,16 - 2,24 (m, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,55 - 2,60 (m, 2H), 2,63 - 2,69 (m, 2H), 3,53 (s, 2H), 7,27 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 45,5, 63,7, 67,4, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J = 272,5 Hz), 127,0 (q, J = 4,9 Hz), 129,1, 129,6, 129,8, 132,2, 133,3 (q, J = 33,3 Hz), 133,7, 135,2, 142,4, 174,8, 179,9.

Exemplo 51

[00272] Cianureto de sódio (0,245 g, 5 mmoles) foi adicionado a uma mistura de ácido 4-aminobenzóico (0,274 g, 2 mmoles) e ciclobutanona (0,21 g, 3 mmoles) em ácido acético a 90% (4,5 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. A mistura foi lavada com HCl aquoso (pH 2) e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio e concentrada para secura sob vácuo para produzir ácido 4-(1- cianociclobutilamino)benzóico (51a) (0,426 g, 1,97 mmol, 99%) como um sólido branco.

51-1) RD159 e RD160

[00273] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (1a) (0,51 g, 2,22 mmoles) e ácido 4-(1-cianociclobutilamino)benzóico (51a) (0,343 g, 1,59 mmol) em DMF (2 ml) foi aquecida sob irradiação de microondas a 60°C e agitada durante 16 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e 2M HCl aq. (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 12 horas. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir éster metílico de ácido 4- [7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaspiro[3,4]oct-5-il]- benzóico (51b) [RD159] (0,09 g, 0,196 mmol, 12%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 25, como um pó branco e N-(3-ciano-4- trifluormetilfenil)-4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7- diazaespiro[3,4]oct-5-il]benzamida (5Ib') [RD160] (0,28 g, 0,45 mmol, 29%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 26, como um pó branco. Fórmula 25

[00274] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,67 - 1,71 (m, 1H), 2,20 - 2,26 (m, 1H), 2,49 - 2,57 (m, 2H), 2,66 - 2,73 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 7,42 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,85 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,3 Hz, 2H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,7, 31,6, 52,6, 67,5, 110,1, 114,8, 121,8 (q, J = 272,7 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 130,2, 131,4, 131,5, 132,2, 133,4 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 137,0, 139,2, 165,9, 174,6, 179,7.

FórmuIa 26

[00275] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,67 - 1,71 (m, 1H), 2,18 - 2,26 (m, 1H), 2,50 - 2,58 (m, 2H), 2,68 - 2,74 (m, 2H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,83 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 9,97 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 8,10-8,14 (m, 3H), 8,21 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 8,88, (s, 1H).

51-2) RD161

[00276] Uma mistura de éster metíIico de ácido 4-[7-(4-ciano-3- trifIuormetiIfeniI)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]oct-5-iI]-benzóico (51b) (0,046 g, 0,1 mmoI) e metiIamina (1 mI distiIado de sua soIução aquosa a 40%) foi mantida em -20°C durante 15 horas. Após evaporação da metilamina, a mistura foi cromatografada (diclorometano:acetona, 80:20) para produzir N-metil-4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro [3,4] oct-5-il]benzamida (51c) [RD161] (0,041 g, 0,085, 84%), a estrutura da qual é ilustrada em Fórmula 27. Fórmula 27

[00277] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,63 - 1,70 (m, 1H), 2,18 - 2,26 (m, 1H), 2,48 - 2,56 (m, 2H), 2,65 - 2,71 (m, 2H), 3,05 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 6,32 (bs, 1H), 7,39 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,95 - 7,98 (m, 4H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,6, 27,0, 31,6, 67,4, 110,3, 114,8, 121,8 (q, J = 272,7 Hz), 127,0 (q, J = 4,7 Hz), 128,7, 130,3, 132,1, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 135,2, 136,3, 137,0, 137,8, 167,2, 174,6, 179,8.

Exemplo 52 [RD162]

[00278] Cloreto de tionila (2,38 g, 20 mmols) foi adicionado lentamente à uma solução de ácido 2-flúor-4-nitrobenzóico (2,97 g, 16 mmoles) em DMF (50 ml) esfriada em -5°C. A mistura foi agitada durante um adicional de 1 hora em -5°C. Metilamina (0,62 g, 20 mmol; recentemente deistiada de sua solução aquosa a 40%) foi adicionada ao meio de reação. A segunda mistura foi agitada durante um adicional de 1 hora. Acetato de etila (300 ml) foi adicionado à mistura, que foi lavada com salmoura (3 x 150 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, e concentrada para produzir N-metil-2-flúor-4-nitrobenzamida (52a) (2,89 g, 14,6 mmol, 91%) como um sólido amarelo. 1H RMN (Acetona d6, 400 MHz) δ 3,05 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 6,31 (dd, J = 13,5, 2,1 Hz, 1H), 6,40 (dd, J = 8,5, 2,1 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,6, 8,6 Hz, 1H).

[00279] Uma mistura de N-metil-2-flúor-4-nitrobenzamida (52a) (2,89 g, 14,6 mmoles) e ferro (5,04 g, 90 mmoles) em acetato de etila (40 ml) e ácido acético (40 ml) foi submetida a refluxo durante 1 hora. As partículas sólidas foram extraídas por filtração. O filtrado foi lavado com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir N-metil-2-flúor-4-aminobenzamida (52b) (2,3 g, 13,7 mmol, 94%) como um sólido esbranquiçado.

[00280] 1H RMN (acetona-d6 400 MHz) δ 2,86 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 5,50 (bs, 2H), 6,37 (dd, J1 = 14,7 Hz, J2 = 2,1 Hz, 1H), 6,50 (dd, J = 8,5, 2,1 Hz, 1H), 7,06 (bs, 1H), 7,68 (dd, J = 8,8 8,8 Hz, 1H); 13C RMN (acetona-d6, 100 MHz) δ 25,8, 99,6 (d, J = 13,8 Hz), 109,2 (d, J = 12,8 Hz), 110,0 (d, J = 1,6 Hz), 132,5 (d, J = 4,8 Hz), 153,5 (d, J = 12,6 Hz), 162,2 (d, J = 242,5 Hz), 164,0 (d, J = 3,1 Hz).

[00281] Cianureto de sódio (1,47 g, 30 mmoles) foi adicionado a uma mistura de N-metil-2-flúor-4-aminobenzamida (52b) (1,68 g, 10 mmoles) e ciclobutanona (1,4 g, 20 mmoles) em 90% ácido acético (20 ml). A mistura de reação foi agitada em 80°C durante 24 horas. A mistura foi lavada com água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio e concentrada para secura sob vácuo. O sólido foi lavado com um 50:50 mistura de éter etílico e hexano (10 ml) para remover ciclobutanona cianoidrina para proporcionar após filtração N-metil-4-(1-cianociclobutilamino)-2-fluorbenzamida (52c) (2,19 g, 8,87 mmol, 89%).

[00282] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,87 - 1,95 (m, 1H), 2,16 - 2,27 (m, 1H), 2,35 - 2,41 (m, 2H), 2,76 - 2,83 (m, 2H), 2,97 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 4,68 (bs, 1H), 6,29 (dd, J = 14,3, 1,8 Hz, 1H), 6,48 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 6,75 (q, J = 4,4 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 8,3, 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 15,7, 26,7, 33,9, 49,4, 100,2 (d, J = 29,5 Hz), 110,6, 111,0 (d, J = 11,8 Hz), 133,1 (d, J = 4,2 Hz), 148,4 (d, J = 12,0 Hz), 162,0 (d, J = 244,1 Hz), 164,4 (d, J = 3,6 Hz).

[00283] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (1a) (2,16 g, 9,47 mmoles) e N-metil-4-(1-cianociclobutilamino)-2- fluorbenzamida (52c) (1,303 g, 5,27 mmoles) em DMF (20 ml) foi aquecida sob irradiação de microondas em 80°C durante 16 horas. A esta mistura foi adicionado metanol (50 ml) e 2N HCl aq. (20 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 3 horas. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (100 ml) e extraída com acetato de etila (150 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir N-metil-4- [7-(4-ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5- il]-2-fluorbenzamida (52d) [RD162] (1,43 g, 3,0 mmol, 57%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 28, como um pó amarelo. Fórmula 28

[00284] 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 1,65 - 1,75 (m, 1H), 2,18 - 2,30 (m, 1H), 2,49 - 2,57 (m, 2H), 2,67 - 2,73 (m, 2H), 3,07 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 6,75 (q, J = 4,6 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 11,5, 1,9 Hz, 1H), 7,26 (dd, J = 8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,83 (dd, J = 8,2, 2,0 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H) 8,30 (dd, J = 8,3, 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 13,6, 27,0, 31,7, 67,4, 110,3, 114,8, 118,2, 118,5, 121,9 (q, J = 272,7 Hz), 126,6, 127,0 (q, J = 4,8 Hz), 132,1, 133,3 (q, J = 33,2 Hz), 133,8, 135,3, 136,8, 139,1 (d, J = 10,9 Hz), 160,5 (d, J = 249,1 Hz), 162,7 (d, J = 3,3 Hz), 174,3, 179,8; 19F RMN (CDCl3, 100 MHz) δ -111,13, -62,58.

Exemplo 53 [RD163]

[00285] Uma mistura de 4-nitro-3-fluorfenol (0,314 g, 2 mmoles) e ferro (0,56 g, 10 mmoles) em acetato de etila (4 ml) e ácido acético (2 ml) foi submetida a refluxo durante 3 horas. As partículas sólidas foram extraídas por filtração. O filtrado foi lavado com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada para produzir 4-amino-3-fluorfenol (53a) (0,25 g, 19,6 mmol, 98%) como um sólido marrom. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,48 - 6,58 (m, 2H), 6,61 - 6,70 (m, 1H), 7,87 (bs, 3H).

[00286] Cianureto de sódio (0,194 g, 4 mmoles) foi adicionado a uma mistura de 4-amino-3-fluorfenol (0,29 g, 2,28 mmoles) e ciclobutanona (0,175 g, 2,5 mmoles) em 90% ácido acético (3 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 horas. O meio foi lavado com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 90:10) para produzir 1-(2-flúor-4- hidroxifenilamino)-ciclobutanocarbonitrila (53b) (0,271 g, 1,31 mmol, 58%) como um sólido esbranquiçado. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 2,13 - 2,20 (m, 2H), 2,36 - 2,41 (m, 2H), 2,70 - 2,75 (m, 2H), 4,00 (bs, 1H), 6,46 (bs, 1H), 6,52 (ddd, J1 = 2,2 Hz, J2 = 0,65 Hz, J3 = 0,22 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 2,3 Hz), 6,62 (dd, J1 = 3,0 Hz, J2 = 0,67 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 15,7, 34,1, 50,9, 104,0 (d, J = 21,9 Hz), 111,0 (d, J = 3,4 Hz), 115,8 (d, J =3,7 Hz), 121,8, 125,3 (d, J = 12,3 Hz), 150,1 (d, J = 10,4 Hz), 152,8 (d, J = 239,3 Hz).

[00287] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (1a) (0,228 g, 1,0 mmol) e 1-(2-flúor-4-hidroxifenilamino)- ciclobutanocarbonitrila (53b) (0,145 g, 0,7 mmol) em DMF seco (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 24 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (10 ml) e 2M HCl aq. (2 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1 hora. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano puro e depois diclorometano:acetona, 90:10) para produzir 4-[5-(2-flúor-4-hidroxifenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7- diazaespiro[3,4]oct-7-il]-2-trifluormetilbenzonitrila (53c) [RD163] (0,17 g, 0,39 mmol, 56%), a estrutura da qual é ilustrada na Fórmula 29, como um pó esbranquiçado. Fórmula 29

[00288] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,66 - 1,75 (m, 1H), 2,18 - 2,28 (m, 1H), 2,42 - 2,50 (m, 1H), 2,54 - 2,67 (m, 3H), 6,76 (d, J = 2,2 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 2,1 Hz, 1H), 7,35 (bs, 1H), 7,87 (dd, J1 = 8,2 Hz, J2 = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 13,8, 31,0, 67,6, 104,8 (d, J = 22,3 Hz), 109,8, 112,6, 114,4 (d, J = 13,1 Hz), 114,9, 121,9 (q, J = 272,8 Hz), 127,1 (q, J = 4,8 Hz), 132,0, 132,3, 133,5 (q, J = 33,3 Hz), 135,3, 137,2, 159,3 (d, J = 11,2 Hz), 159,6 (d, J = 249,7 Hz), 175,2, 180,5; 19F RMN (CDCI3, 100 MHz) δ -117,5, -62,49.

Exemplo 54 [RD168]

[00289] Uma mistura de 4-nitro-2-fluorobenzonitrila (1,83 g, 5 mmoles) e ferro (1,68 g, 6 mmoles) em uma mistura de ácido acético (40 ml) e acetato de etila (40 ml) foi submetida a refluxo durante 2 horas. O sólido foi extraído por filtração e o filtrado foi lavado com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir 4-amino-2-fluorobenzonitrila (54a) (0,653 g, 4,8 mmol, 96%).

[00290] Cianureto de sódio (0,74 g, 15 mmoles) foi adicionado a uma mistura de 4-amino-2-fluorobenzonitrila (1,36 g, 10 mmoles) e ciclopentanona (1,26 g, 15 mmoles) em 90% ácido acético (10 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 3 horas e depois o meio foi aquecido para 80°C e agitado durante um adicional de 5 horas. O meio foi lavado com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 97:3) para produzir 4-(1- cianociclopentilamino)-2-fluorobenzonitrila (54b) (2,07 g, 9,03 mmol, 90%) como um sólido amarelo. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,69 - 1,91 (m, 4H), 2,13 - 2,18 (m, 2H), 2,37 - 2,42 (m, 2H), 5,08 (bs, 1H), 6,54 - 6,62 (m, 2H), 7,39 (t, J = 7,3 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 23,7, 39,8, 56,8, 89,6 (d, J = 15,8 Hz), 101,2 (d, J = 23,8 Hz), 110,9, 115,2, 120,8, 134,1 (d, /= 2,4 Hz), 150,3 (d, J = 11,2 Hz), 164,5 (d, J = 254,1 Hz).

[00291] Uma mistura de 4-isotiocianato-2-trifluormetilbenzonitrila (1a) (0,171 g, 0,75 mmol) e 4-(1-cianociclopentilamino)-2- fluorobenzonitrila (54b) (0,115 g, 0,5 mmol) em DMF seco (1 ml) foi aquecida sob irradiação de microondas em 60°C durante 48 horas. A esta mistura foram adicionados metanol (3 ml) e 2M HCl aq. (2 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1 hora. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (10 ml) e extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 98:2) para produzir 4-[1-(4- ciano-3-fluorofenil)-4-oxo-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]non-3-il]-2- trifluormetilbenzonitrila (54c) [RD168] (0,017 g, 0,037 mmol, 7%), da qual a estrutura é ilustrada na Fórmula 30, como um pó esbranquiçado. Fórmula 30

[00292] 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 1,53 - 1,63 (m, 2H), 1,89 - 2,00 (m, 2H), 2,09 - 2,16 (m, 2H), 2,35 - 2,42 (m, 2H), 7,27 - 7,37 (m, 2H), 7,78 - 7,90 (m, 3H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 25,2, 36,5, 75,3, 103,2 (d, J = 15,3 Hz), 110,4, 112,8, 114,7, 119,2 (d, J = 20,7 Hz), 121,9 (q, J = 272,8 Hz), 127,0 (q, J = 4,8 Hz), 132,1, 133,7 (q, J = 33,2 Hz), 134,6, 135,3, 135,8, 136,8, 141,8 (d, J = 9,5 Hz), 163,4 (d, J = 261,5 Hz), 175,3, 180,1.

Exemplo 55 [RD136 e RD142]

[00293] Compostos de diarilidantoína adicionais podem ser sintetizados, incluindo os seguintes compostos ilustrados nas Fórmulas 35 e 36. Fórmulas 35 [RD136] Fórmulas 36 [RD142]

Exemplo 56 [RD162’]

[00294] No que segue, reações sensíveis ao ar e a umidade foram conduzidas sob atmosfera de argônio usando artigos de vidro secados em forno e técnicas de seringa/septos padrão. As reações foram monitoradas com uma placa de TLC de SiO2 sob luz UV (254 nm) seguido pela visualização com uma solução de manchamento de p- anisaldeído ou ninidrina. A cromatografia de coluna foi executada em sílica-gel 60. Espectros de 1H RMN foram medidos em 400 MHz com CDCl3 a não ser que de outra maneira mencionada e os dados foram relatados como se segue em ppm (δ) a partir do padrão interno (TMS, 0,0 ppm): mudança química (multiplicidade, integração, constante de acoplamento em Hz). Fórmula 37.

[00295] Ácido periódico (1,69 g, 7,41 mmoles) foi dissolvido em acetonitrila (25 ml) mediante agitação vigorosa, e depois trióxido de crômio (0,16 g, 1,60 mmol) foi dissolvido na solução. 2-flúor-4- nitrotolueno (0,33 g, 2,13 mmoles) foi adicionado à solução acima com agitação. Um precipitado branco se formou imediatamente com reação exotérmica. Após 1 h de agitação, o líquido sobrenadante da mistura de reação foi decantado em um frasco, e o solvente foi removido por evaporação. Os resíduos foram extraídos com cloreto de metileno (2 x 30 ml) e água (2 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, e concentrada para dar ácido 2-flúor-4-nitrobenzóico (Fórmula 37) (0,32 mg, 81%) como um sólido branco. 1HRMN δ 8,06 (ddd, 1 H, J = 9,9, 2,2 e 0,3), 8,13 (ddd, 1 H, J = 8,6, 2,2 e 0,9), 8,25 (ddd, 1 H, J = 8,6, 7,0 e 0,3). Fórmula 38

[00296] Cloreto de tionila (0,15 g, 1,30 mmol) foi adicionado lentamente a uma solução de ácido 2-flúor-4-nitrobenzóico (Fórmula 37) (0,20 g, 1,10 mmol) em DMF (5 ml) esfriada em -5°C. A mistura foi agitada durante um adicional de 1 hora a -5°C. Excesso de metilamina (recentemente destilada de sua solução aquosa a 40%) foi adicionado ao meio de reação. A segunda mistura foi agitada durante um adicional de 1 hora. Acetato de etila (50 ml) foi adicionado à mistura, que foi lavada com salmoura (2 x 50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, e concentrada para produzir N-Metil-2-flúor-4-nitrobenzamida (Fórmula 38) (0,18 g, 85%) como um sólido amarelado. 1H RMN (acetona-d6) δ 3,05 (d, 3 H, J = 4,3), 6,31 (dd, 1 H, J = 13,5 e 2,1), 6,40 (dd, 1H, J = 8,6 e 2,1), 7,64 (dd, 1H, J = 8,6 e 8,6). Fórmula 39.

[00297] Uma mistura de N-Metil-2-flúor-4-nitrobenzamida (Fórmula 38) (0,18 g, 0,91 mmol) e ferro (0,31 g, 5,60 mmoles) em acetato de etila (5 ml) e ácido acético (5 ml) foi submetida a refluxo durante 1 h. As partículas sólidas foram extraídas por filtração. O filtrado foi lavado com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna SiO2 (diclorometano:acetona, 95:5) para dar N-Metil-2-flúor-4- aminobenzamida (Fórmula 39) (0,14 g, 92%) como um sólido esbranquiçado. 1H RMN (acetona-d6) δ 2,86 (d, 3 H, J = 4,3), 5,50 (br s, 2 H), 6,37 (dd, 1 H, J = 14,7 e 2,1), 6,50 (dd, 1H, J = 8,6 e 2,1), 7,06 (br s, 1H), 7,68 (dd, 1H, J = 8,8 e 8,8). Fórmula 40

[00298] Uma mistura de N-Metil-2-flúor-4-aminobenzamida (Fórmula 39) (96 mg, 0,57 mmol), acetona cianoidrina (0,3 ml, 3,14 mmoles) e sulfato de magnésio (50 mg) foi aquecida para 80°C e agitada durante 12 h. Ao meio foi adicionado acetato de etila (25 ml) e depois lavado com água (2 x 25 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna SiO2 (diclorometano:acetona, 95:5) para fornecer N-Metil-2-flúor-4-(1,1- dimetil-cianometil)-aminobenzamida (Fórmula 40) (101 mg, 75%) como um sólido branco. 1H RMN δ 1,74 (s, 6 H), 2,98 (dd, 3 H, J = 4,8 e 1,1), 6,58 (dd, 1 H, J = 14,6 e 2,3), 6,63 (dd, 1 H, J = 8,7 e 2,3), 6,66 (br s, 1 H), 7,94 (dd, 1 H, J = 8,7 e 8,7). Fórmula 41

[00299] 4-Amino-2-trifluormetilbenzonitrila (2,23 g, 12 mmoles) foi adicionada em porções durante 15 min em uma mistura heterogênea bem agitada de tiofosgênio (1 ml, 13 mmoles) em água (22 ml) na temperatura ambiente. A agitação continuou durante um adicional de 1 h. O meio de reação foi extraído com clorofórmio (3 x 15 ml). A fase orgânica combinada foi secada por MgSO4 e evaporada para secura sob pressão reduzida para produzir o produto desejado 4-Isotiocianato- 2-trifluormetilbenzonitrila (Fórmula 41) como sólido amarronzado e foi usado como tal durante a próxima etapa (2,72 g, 11,9 mmol, 99%). 1H RMN δ 7,49 (dd, 1 H, J = 8,3 e 2,1), 7,59 (d, 1H, J = 2,1), 7,84 (d, 1 H, J = 8,3). RD162' (Fórmula 42)

56-1) RD162'

[00300] Uma mistura de N-Metil-2-flúor-4-(1,1-dimetil-cianometil)- aminobenzamida (Fórmula 40) (30 mg, 0,13 mmol) e 4-isotiocianato-2- trifluormetilbenzonitrila (Fórmula 41) (58 mg, 0,26 mmol) em DMF (1 ml) foi aquecida sob irradiação de microondas em 100°C durante 11 horas. A esta mistura foi adicionado metanol (20 ml) e 1 N HCl aq. 1 (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1,5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (50 ml) e extraída com acetato de etila (50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna SiO2 (diclorometano:acetona, 95:5) para dar RD162' (Fórmula 42) (15 mg, 25%) como um cristal incolor. 1H RMN δ 1,61 (s, 6 H), 3,07 (d, 3 H, J = 4,1), 6,71 (m, 1 H), 7,15 (dd, 1H, J = 11,7 e 2,0), 7,24 (dd, 1H, J = 8,4 e 2,0), 7,83 (dd, 1H, J = 8,2 e 2,1), 7,95 (d, 1H, J = 2,1), 7,99 (d, 1H, J = 8,2), 8,28 (dd, 1H, J = 8,4 e 8,4). Exemplo 57 Fórmula 43

[00301] Uma mistura de N-Metil-2-flúor-4-aminobenzamida (Fórmula 39) (62 mg, 0,37 mmol), ciclopentanona (0,07 ml, 0,74 mmol) e TMSCN (0,1 ml, 0,74 mmol) foi aquecida para 80°C e agitada durante 13 h. Ao meio foi adicionado acetato de etila (2 x 20 ml) e depois lavado com água (2 x 20 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 95:5) para dar N-Metil 2-flúor-4-(1- cianociclopentil)aminobenzamida (Fórmula 43) (61 mg, 63%) como um sólido branco. 1H RMN δ 7,95 (dd, 1H, J = 8,8, 8,8 Hz), 6,65 (br s, 1H), 6,59 (dd, 1H, J = 8,8, 2,3 Hz), 6,50 (dd, 1H, J = 14,6, 2,3 Hz), 4,60 (br s, 1H), 2,99 (dd, 3H, J = 4,8, 1,1 Hz), 2,36 - 2,45 (m, 2H), 2,10 - 2,18 (m, 2H), 1,82 - 1,95 (m, 4H). RD162" (Fórmula 44)

57-1) RD162"

[00302] Uma mistura de N-Metil 2-flúor-4-(1-cianociclopentil) aminobenzamida (Fórmula 43) (57 mg, 0,22 mmol) e 4-isotiocianato-2- trifluormetil benzonitrila (0,15 g, 0,65 mmol) em DMF (3 ml) foi aquecida sob irradiação de microondas (recipiente aberto) em 130°C durante 12 horas. A esta mistura foi adicionado metanol (20 ml) e 1 N HCl aq. (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1,5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (50 ml) e extraída com acetato de etila (50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 95:5) para fornecer 4-(3-(4-Ciano-3- (trifluormetil) fenil)-4-oxo-2-tioxo-1,3-diazaespiro[4,4]nonan-1-il)-2-flúor- N-metilbenzamida, RD162" (Fórmula 44) (8 mg, 7%) como um sólido amarelado claro. 1H RMN δ 8,28 (dd, 1H, J = 8,4, 8,4 Hz), 7,98 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,96 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,84 (dd, 1H, J = 8,3, 1,8 Hz), 7,27 (dd, 1H, J = 8,4, 1,8 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 11,7, 1,8 Hz), 6,67 - 6,77 (m, 1H), 3,07 (d, 3H, J = 4,3 Hz), 2,32 - 2,41 (m, 2H), 2,13 - 2,21 (m, 2H), 1,85 - 1,96 (m, 2H), 1,49 - 1,59 (m, 2H). Exemplo 58 Fórmula 45

[00303] Anidrido trifluoroacético (0,85 ml, 6,14 mmoles) foi adicionado à uma solução de ácido 4-(4-aminofenil)butírico (0,5 g, 2,79 mmoles) em clorofórmio (10 ml) a 0°C. A mistura foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A mistura foi dividida com clorofórmio (20 ml) e água (20 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 9:1) para fornecer ácido 4-[4-(2,2,2-Trifluoroacetilamino) fenil]butanóico (Fórmula 45) (0,53 g, 69%). 1H RMN δ 7,81 (br s, 1H), 7,48 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,22 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 2,68 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,38 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 1,96 (p, 2H, J = 7,5 Hz). Fórmula 46

[00304] Cloreto de tionila (71 mg, 0,60 mmol) foi adicionado lentamente a uma solução de ácido 4-[4-(2,2,2- trifluoroacetilamino)fenil]butanóico (Fórmula 45) (0,15 g, 0,55 mmol) em DMF (5 ml) esfriado em - 5°C. A mistura foi agitada durante um adicional de 1 hora a -5°C. Excesso de dimetilamina (recentemente destilada de sua solução aquosa a 40%) foi adicionado ao meio de reação.

[00305] A segunda mistura foi agitada durante um adicional de 1 hora. Acetato de etila (50 ml) foi adicionado à mistura, que foi lavada com salmoura (2 x 50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, e concentrada para produzir N,N-Dimetil 4-[4-(2,2,2- Trifluoroacetilamino)fenil]butanamida (Fórmula 46) (0,17 g, quant.) como um sólido amarelado. 1H RMN δ 9,70 (br s, 1H), 7,55 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,11 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 2,91 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 2,60 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 2,27 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 1,89 (p, 2H, J = 7,7 Hz). Fórmula 47

[00306] Solução de 1 N NaOH (3 ml) foi adicionada a uma solução de N,N-Dimetil 4-[4-(2,2,2-trifluoroacetilamino)fenil]butanamida (Fórmula 46) (0,17 g, 0,55 mmol) em metanol (2 ml) na temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 14 horas. A mistura foi dividida com clorofórmio (25 ml) e água (25 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, e concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 9:1) para fornecer N,N- Dimetil 4-(4-aminofenil)butanamida (Fórmula 47) (74 mg, 66%) como um sólido branco. 1H RMN δ 6,97 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 6,61 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 3,56 (br s, 2H), 2,92 (s, 6 H), 2,56 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 2,28 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 1,91 (p, 2H, J = 7,7 Hz). Fórmula 48

[00307] Uma mistura de N,N-Dimetil 4-(4-aminofenil)butanamida (Fórmula 47) (74 mg, 0,36 mmol), ciclobutanona (54 mg, 0,78 mmol) e TMSCN (77 mg, 0,78 mmol) foi aquecida para 80°C e agitada durante 15 h. Ao meio foi adicionado acetato de etila (2 x 20 ml) e depois lavado com água (2 x 20 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 9:1) para fornecer N,N-Dimetil 4-[4- (1-cianociclobutilamino)fenil]butanamida (Fórmula 48) (58 mg, 57%) como um sólido branco. 1H RMN δ 7,07 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 6,59 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 3,94 (br s, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,93 (s, 3H), 2,75 - 2,83 (m, 2H), 2,60 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 2,33 - 2,42 (m, 2H), 2,30 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 2,11 - 2,28 (m, 2H), 1,93 (p, 2H, J = 7,6 Hz). RD169 Fórmula 49

[00308] Uma mistura de N,N-Dimetil 4-[4-(1-cianociclobutilamino) fenil] butanamida (Fórmula 48) (58 mg, 0,20 mmol) e 4-isotiocianato-2- trifluormetil benzonitrila (74 mg, 0,32 mmol) em DMF (3 ml) foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. A esta mistura foi adicionado metanol (20 ml) e 1 N HCl aq. (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1,5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (50 ml) e extraída com acetato de etila (50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 95:5) para fornecer 4-(4-(7-(4-ciano-3- (trifluormetil)fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaspiro[3,4] octan-5-il)fenil)- N,N-dimetilbutanamida, RD169 (Fórmula 49) (44 mg, 42%) como um sólido amarelado claro. 1H RMN δ 7,98 (s, 1H), 7,97 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,86 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,42 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,22 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 2,99 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,78 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,62 - 2,70 (m, 2H), 2,52 - 2,63 (m, 2H), 2,40 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,15 - 2,30 (m, 1H), 2,04 (p, 2H, J = 7,5 Hz), 1,62 - 1,73 (m, 1H). Exemplo 59 Fórmula 50

[00309] Uma mistura de ácido 4-(4-aminofenil)butírico (0,20 g, 1,12 mmol), ciclobutanona (0,17 ml, 2,23 mmoles) e TMSCN (0,30 ml, 2,23 mmoles) foi aquecida para 80°C e agitada durante 13 h. Ao meio foi adicionado acetato de etila (2 x 30 ml) e depois lavado com água (2 x 30 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4 e concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 9:1) para fornecer ácido 4-[4-(1- cianociclobutilamino)fenil]butanóico (Fórmula 50) (0,21 g, 74%) como um sólido amarelado. 1H RMN δ 7,06 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,59 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 2,75 - 2,83 (m, 2H), 2,59 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,37 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,33 - 2,42 (m, 2H), 2,11 - 2,28 (m, 2H), 1,92 (p, 2H, J = 7,5 Hz). Fórmula 51

[00310] Uma mistura de ácido 4-[4-(1-cianociclobutilamino) fenil]butanóico (Fórmula 50) (0,21 g, 0,83 mmol) e 4-isotiocianato-2- trifluoro benzonitrila (0,25 g, 1,08 mmol) em tolueno (10 ml) foi aquecida sob refluxo durante 1 horas. A esta mistura foi adicionado 1 N HCl aq. (5 ml). A segunda mistura foi submetida a refluxo durante 1,5 h. Após ser esfriada para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi despejada em água gelada (50 ml) e extraída com acetato de etila (50 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e o resíduo foi purificado com cromatografia de coluna em sílica-gel (diclorometano:acetona, 95:5) para fornecer ácido 4-(4-(7-(4-ciano-3- (trifluormetil)fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]octan-5- il)fenil)butanóico, RD141 (Fórmula 51) (60 mg, 15%). 1H RMN δ 7,98 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,97 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,86 (dd, 1H, J = 8,3, 1,8 Hz), 7,42 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,24 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 2,79 (t, 2H, J =,7,5 Hz), 2,62 - 2,68 (m, 2H), 2,51 - 2,59 (m, 2H), 2,47 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,14 - 2,26 (m, 1H), 2,06 (p, 2H, J = 7,5 Hz), 1,60 - 1,70 (m, 1H). Exemplo 60 RD130 Fórmula 52

[00311] A uma solução de ácido 4-(4-(7-(4-ciano-3- (trifluoromemil)fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]octan-5- il)fenil)butanóico, RD141 (Fórmula 51) (60 mg, 0,12 mmol) em DMF (3 ml) foi adicionado cloreto de tionila (0,01 ml, 0,15 mmol) em 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 1 hora. Depois amônia foi borbulhada na mistura. A mistura foi divida com acetato de etila (25 ml) e água (25 ml). A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 70:30) para produzir 4-(4-(7- (4-ciano-3-(trifluormetil)fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]octan-5- il) fenil)butanamida, RD130 (Fórmula 52) (37 mg, 61%) como um pó branco. 1H RMN δ 7,97 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,95 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,85 (dd, 1H, J = 8,3 Hz), 7,39 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,22 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 5,59 (br s, 2H), 2,77 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,62 - 2,68 (m, 2H), 2,51 - 2,59 (m, 2H), 2,31 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,16 - 2,25 (m, 1H), 2,05 (p, 2H, J = 7,5 Hz), 1,57 - 1,70 (m, 1H). Exemplo 61 RD170 Fórmula 53

[00312] Uma solução de DMSO (0,01 ml, 0,12 mmol) em diclorometano seco (1 ml) foi adicionada a uma solução agitada de cloreto de oxalila (0,01 ml, 0,09 mmol) em diclorometano seco (2 ml) a -78°C. Após 15 min, uma solução de diclorometano de 4-(4-(7-(4-ciano- 3-(trifluormetil)fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diazaespiro[3,4]octan-5- il)fenil)butanamida, RD130 (Fórmula 52) (35 mg, 0,07 mmol) foi adicionada à mistura de reação. A agitação continuou durante 20 min em -78°C, e depois trietilamina (0,03 ml, 0,22 mmol) foi adicionada. Após 30 min em -78°C, a mistura de reação foi aquecida para a temperatura ambiente e depois a reação foi extinta com solução de NH4Cl aq. saturada. A mistura de reação foi diluída com diclorometano, e extraída com diclorometano. A camada orgânica foi secada por MgSO4, concentrada e cromatografada (diclorometano:acetona, 95:5) para produzir 4-(5-(4-(3-Cianopropil)fenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7- diazaespiro[3,4]octan-7-il)-2-(trifluormetil) benzonitrila, RD170 (Fórmula 53) (29 mg, 87%) como um óleo viscoso. 1H RMN δ 7,98 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,98 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,86 (dd, 1H, J = 8,3, 1,8 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,27 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 2,90 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 2,63 - 2,73 (m, 2H), 2,52 - 2,62 (m, 2H), 2,42 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 2,18 - 2,30 (m, 1H), 2,07 (p, 2H, J = 7,3 Hz), 1,63 - 1,73 (m, 1H).

[00313] Uma pessoa versada na técnica pode modificar e/ou combinar a síntese aqui descrita para preparar outros compostos de diarilidantoína.

[00314] Os compostos da invenção também incluem aqueles com as seguintes fórmulas.

[00315] Onde R é selecionado de hidrogênio, arila, arila substituída, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquila halogenada, alquenila halogenada, aquinila halogenada, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocíclica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, cicloalquila substituída, halogêneo, SO2R11, NR11R12, NR12(CO)OR11, NH(CO)NR11R12, NR12(CO)R11, O(CO)R11, O(CO)OR11, O(CS)R11, NR12(CS)R11, NH(CS)NR11R12, NR12(CS)OR11.

[00316] R1 e R2 são independentemente selecionados de hidrogênio, arila, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquila halogenada, alquenila halogenada, aquinila halogenada, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocílica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, cicloalquila substituída.

[00317] R1 e R2 podem ser conectados para formar um ciclo que pode ser heterocíclico, heterocíclico substituído, cicloaquila, cicloalquila substituída.

[00318] R3 é selecionado de arila, arila substituída, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocíclica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, cicloalquila, cicloalquila substituída, SO2R11, NR11R12, (CO)OR11, (CO)NR11R12, (CO)R11, (CS)R11, (CS)R11, (CS)NR11R12, (CS)OR11.

[00319] R5 é CN ou NO2 ou SO2R11

[00320] R6 é CF3, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquila halogenada, alquenila halogenada, aquinila halogenada, halogêneo.

[00321] A é átomo de enxofre (S) ou átomo de oxigênio (O).

[00322] B é O ou S ou NR3

[00323] X é carbono ou nitrogênio e pode estar em qualquer posição no anel.

[00324] R11 e R12 são independentemente selecionados de hidrogênio, arila, aralquila, aralquila substituída, alquila, alquila substituída, alquenila, alquenila substituída, alquinila, alquinila substituída, alquila halogenada, alquenila halogenada, aquinila halogenada, arilalquila, arilalquenila, arilalquinila, heterocíclica aromática ou não aromática, heterocíclica aromática ou não aromática substituída, ciclolaquila, cicloalquila substituída.

[00325] R11 e R12 podem ser conectados para formar um ciclo que pode ser heterocíclico aromático ou não aromático, heterocíclico aromático substituído, cicloaquila, cicloalquila substituída.

Exame farmacológico dos compostos

[00326] Os compostos para os quais as vias sintéticas são descritas acima foram identificados através da triagem sobre as células de câncer da próstata refratário ao hormônio com relação as atividades antagonísticas e agonísticas contra o AR utilizando os procedimentos de triagem similares àqueles nos pedidos PCT US04/42221 e US05/05529, que são por meio deste incorporados por referência. Vários compostos apresentaram atividades antagonísticas potentes com atividades agonísticas sobre o AR expressão no câncer da próstata refratário ao hormônio.

Ensaio biológico in vitro Efeito dos compostos sobre o AR por um ensaio repórter

[00327] Os compostos foram submetidos aos testes usando um sistema repórter de resposta de AR artificial em uma linhagem celular de câncer da próstata refratário ao hormônio. Neste sistema, as células LNCaP de câncer da próstata foram planejadas para de maneira estável expressar cerca de 5 vezes o nível mais elevado de AR do que o nível endogênico. O AR exogênico possui propriedades similares ao AR endogênico em que ambos são estabilizados por um R1881 androgênico sintético. As células expressas sobre o AR foram também planejadas para estavelmente incorporar um repórter de resposta de AR e a atividade repórter destas células apresenta aspectos de câncer da próstata refratário ao hormônio. Ele responde à baixa concentração de um R1881 androgênio sintético, é inibido apenas por concentrações elevadas de bicalutamida (vide a Tabela 1), e desempenha atividade agonística com bicalutamida (figura 1 e Tabela 2). Consistente com os dados publicados, a bicalutamida inibiu o repórter de resposta de AR e não teve atividade agonística nas células de câncer da próstata sensível ao hormônio (figura 2).

[00328] Examinamos a atividade antagonística dos compostos para os quais a síntese é descrita acima na presença de 100 pM de R1881. As células LNCaP planejadas (LNCaP-AR, também abreviado LN-AR) foram mantidas em meio de Iscove contendo soro bovino fetal a 10% (FBS). Dois dias antes do tratamento com fármaco, as células foram desenvolvidas em meio de Iscove contendo FBS extraído com carvão vegetal a 10% (CS-FBS) para desapossar de androgênios. As células foram divididas e cultivadas em meio de Iscove contendo CS-FBS a 10% com 100 pM de R1881 e concentrações crescentes de compostos de teste. Após dois dias de incubação, as atividades repórteres foram analisadas.

[00329] A Tabela 1 lista a IC50 destes compostos para inibir o AR no câncer da próstata refratário ao hormônio. A substância de controle bicalutamida possui uma IC50 de 889 nM. A maioria dos compostos identificados (diariltioidantoínas) possui IC50s entre 100 a 200 nM na inibição de AR no câncer da próstata refratário ao hormônio. Ao contrário, os compostos antiandrogênicos listados como exemplos na Patente U.S. No 5.705.654, tais como exemplos 30-2, 30-3, 31-2, 31-3 e 24-3 (RD73-RD77) não possuem atividades inibidoras sobre o AR neste sistema. Tabela 1

[00330] Atividades antagonísticas contra o AR no câncer da próstata refratário ao hormônio medido por um repórter de resposta de AR e pela expressão de PSA endogênica. Continuação (*) No: o composto não apresentou repórter de resposta de AR; (**) n/a: o composto não foi examinado nesta análise.

[00331] Uma propriedade anteriormente não reconhecida de superexpressão de AR no câncer da próstata refratário ao hormônio é sua capacidade de comutar de antagonistas para agonistas. Portanto, apenas aqueles compostos com atividades agonísticas mínimas ou nenhuma são qualificados para serem anti-androgênios para esta doença. Para determinar as atividades agonísticas de diferentes compostos, examinamos suas atividades de estímulo sobre o AR usando o repórte de resposta de AR como a medida no sistema LN-AR na ausência de R1881. A Tabela 2 lista as atividades agonísticas de diferentes compostos. Consistente com os resultados anteriores, a bicalutamida ativou o AR no câncer da próstata refratário ao hormônio. Os derivados de diariltioidantoína tais como os exemplos 7-3b (RD37), 33 (RD91), 34 (RD92), e 35 (RD93) não possuem nenhuma atividade agonística. Ao contrário, RU59063, e outros compostos anti- androgênicos listados como exemplos em na Patente U.S. número 5.705.654, tais como os exemplos 30-2, 30-3, 31-2, 31-3, e 24-3 (RD73- RD77) fortemente ativaram o AR no câncer da próstata refratário ao hormônio.

Tabela 2

[00332] Atividades agonísticas de substâncias de teste seletivas sobre o repórter de resposta de AR no câncer da próstata refratário ao hormônio Indução dobrada mediante o aumento das concentrações dos compostos (*) Indução do brada: atividades induzidas por uma substância de teste específica sobre as atividades em veículo de DMSO; (**) n/a: o composto não foi examinado nesta análise.

[00333] Para examinar a especificidade dos inibidores de AR, os compostos seletivos foram testados em células LNCaP com uma superexpressão de receptor de glicocorticóide (GR), o membro mais próximo de AR na família de receptor nuclear. Estas células também carregam um repórter de resposta de GR e a atividade repórter foi induzida por dexametasona, um agonista de GR e a indução foi bloqueada por RU486, um inibidor de GR. O Exemplo 7-3b (RD37) (4- (8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4] oct-7-il)-2- trifluormetil benzonitrila) não teve nenhum efeito sobre o GR neste sistema.

Efeito dos compostos sobre o AR mediante a medição dos níveis secretados de antígeno específico da próstata (PSA)

[00334] É bem estabelecido que os níveis de PSA são indicadores de atividades do AR no câncer da próstata. Para examinar se os compostos afetam a função de AR em um ambiente fisiológico, determinados os níveis secretados de PSA endogênico induzidos por R1881 nas células de LNCaP superexpressas por AR (LNCaP-AR, também abreviado LN-AR). As células de LNCaP-AR são uma linhagem de carcinoma nodosa da linfa de células da próstata transduzida com um plasmídeo que torna os receptores androgênicos expressos. As células de LNCaP-AR foram mantidas em meio de Iscove contendo FBS a 10%. Dois dias antes ao tratamento de fármaco, as células foram desenvolvidas em meio de Iscove contendo CS-FBS a 10% para desapossar de androgênios. As células foram divididas e cultivadas em meio de Iscove contendo CS-FBS a 10% com concentrações apropriadas de R1881 e os compostos de teste. Após quatro dias de incubação, os níveis de PSA secretados foram avaliados usando PSA ELISA kits (American Qualex, San Clemente, CA).

[00335] O nível de PSA secretado de células LNCaP-AR foi fortemente induzido por 25 pM de R1881. Ao contrário, o PSA não foi induzido nas células LNCaP parentais até que a concentração de R1881 alcançou 100 pM. Isto é consistente com nosso relatório anterior em que o AR no câncer da próstata refratário ao hormônio é hipersensível aos androgênios. Uma inibição dependente da dose sobre a atividade de AR foi realizada para determinar as IC50s de diferentes compostos na inibição da expressão de PSA, e os resultados foram listados na Tabela 1. As IC50s dos compostos seletivos sobre a expressão de PSA estritamente se assemelham com aquelas medidas pelo ensaio de repórter, confirmando que os derivados de diarilidantoína são fortes inibidores de AR no câncer da próstata refratário ao hormônio.

[00336] Também examinamos as atividades agonísticas de compostos seletivos sobre o AR no câncer da próstata refratário ao hormônio usando PSA secretado como o marcador substituto. Para fazer isto, as células LNCaP superexpressas por AR mortas de fome por androgênio foram incubadas com concentrações crescentes de compostos para os quais uma síntese é descrita acima na ausência de R1881 e PSA secretado no meio de cultura foi medido 4 dias mais tarde.

[00337] A Tabela 3 lista as atividades agonísticas dos compostos seletivos. Consistente com os resultados obtidos da análise repórter, os derivados de diariltioidantoína tais como os exemplos 7-3b (RD37), 33 (RD91), 34 (RD92) e 35 (RD93) não possuem atividades agonísticas. Ao contrário, RU59063, e outros compostos antiandrogênicos listados como exemplos na Patente U.S. No 5.705.654, tais como os exemplos 30-2 (RD73), 30-3 (RD74) e 31-2 (RD75) estimularam a expressão de PSA no câncer da próstata refratário ao hormônio.

Tabela 3

[00338] Atividades agonísticas de substâncias de teste seletivas sobre o PSA endogênico no câncer da próstata refratário ao hormônio. Indução dobrada mediante o aumento das concentrações dos compostos Continuação (*) Indução dobrada: atividades induzidas por uma substância de teste específica sobre as atividades em veículo de DMSO; (**) n/a: o composto não foi examinado neste ensaio.

Efeito dos compostos sobre a atividade mitocondrial por análise de MTS

[00339] As células LNCaP-AR foram mantidas em meio de Iscove contendo FBS a 10%. Os compostos foram examinados com relação a seu efeito sobre o crescimento de células do câncer da próstata refratário ao hormônio. As células LNCaP superexpressas foram usadas porque estas células se comportam como células de câncer da próstata refratário ao hormônio in vitro e in vivo (1). Medimos a atividade do mitocôndria pela análise de MTS, um substituto para o crescimento. As células LNCaP com AR superexpressa (LN-AR) foram mantidas em meio de Iscove contendo FBS a 10%. Dois dias antes do tratamento com fármaco, as células foram cultivadas em meio de Iscove contendo CS-FBS a 10% para desapossar de androgênios. As células foram depois divididas e cultivadas em meio de Iscove contendo CS-FBS a 10% com concentrações apropriadas de R1881 e concentrações crescentes dos compostos de teste. Após quatro dias de incubação, o crescimento da célula foi monitorado por MTS (Promega, Madison, WI).

[00340] Consistente com a análise repórter e análise PSA, o desenvolvimento da LNCaP superexpressa por AR foi estimulado por 25 microM de R1881, mas as células parentais não foram estimuladas até que a concentração de R1881 alcançasse 100 microM. A Figura 2 mostra o efeito inibidor dos compostos selecionados sobre o desenvolvimento do câncer da próstata refratário ao hormônio na presença de 100 pM de R1881. A bicalutamida medicamentosa clínica corrente não inibiu o câncer da próstata refratário ao hormônio. Ao contrário, o exemplo 5 -3b (RD7) (4-[3-(4-metilfenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2- tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetil-benzonitrila) e o exemplo 7-3b (RD37) (4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2- trifluormetilbenzonitrila) inibiram o câncer da próstata refratário ao hormônio com potência elevada.

[00341] Examinou-se se a inibição do desenvolvimento na análise MTS ocorre mediante o direcionamento de AR, o exemplo 5-3b (RD7) (4-[3-(4-metilfenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2- trifluormetil-benzonitrila) e o exemplo 7-3b (RD37) (4-(8-oxo-6-tioxo-5- (4-metilfenil)-5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila) foram testados em células DU-145, uma linhagem celular de câncer da próstata que carece da expressão de AR. Estes compostos não tiveram nenhum efeito inibidor do crescimento sobre as células DU-145. Os compostos não inibiram as células diferentes das células de câncer da próstata expressas por AR, quando eles não tiveram nenhum efeito sobre MCF7 e SkBr3, duas células de câncer da mama comumente usadas, ou 3T3, uma linhagem celular de fibroblasto de camundongo normal.

[00342] Exemplos da atividade biológica in vitro de derivados de diariltioidantoína são mostrados nas Figuras 3, 4 e 5. Por exemplo, com base na atividade relativa de luciferase, a figura 3 indica que em uma concentração de 500 nM os compostos classificados, na ordem do mais ativo para o menos ativo como se segue: RD152 > RD153 > RD145 > RD163 > RD161 = RD162 > bicalutamida. Por exemplo, com base no nível de PSA relativo, a figura 4 indica que em uma concentração de 500 nM os compostos classificados, na ordem do mais ativo para o menos ativo como se segue: RD138 > RD131 > RD37 > RD133 > RD134 > RD137 > RD138 > RD135 > bicalutamida. Por exemplo, com base nas unidades relativas de MTS, a figura 5 indica que em uma concentração de 500 nM os compostos classificados, na ordem do mais ativo para o menos ativo como se segue: RD168 > RD37 > RD141 > RD162 > bicalutamida.

Efeito inibidor sobre os tumores de enxerto xenoblástico de câncer da próstata refratário ao hormônio

[00343] O Exemplo 7-3b (RD37) (4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)- 5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila) foi usado para examinar se os derivados de diarilidantoína possuem efeitos in vivo sobre o câncer da próstata refratário ao hormônio. Primeiro examinouse este composto sobre os tumores de enxerto xenoblástico estabelecidos de células LNCaP superexpressas por AR. As células planejadas em Matrigel (Collaborative Biomedical) foram injetadas subcutaneamente nos flancos dos camundongos SCID machos castrados. O tamanho do tumor foi medido semanalmente em três dimensões usando compassos de calibre. Logo que os tumores de enxerto xenoblástico estabeleceram-se (o tamanho de tumor alcançou pelo menos 40 mm3), os camundongos com tumores foram escolhidos a esmo e tratados com diferentes doses de compostos oralmente uma vez ao dia. Consistente com a observação clínica, a bicalutamida medicamentosa não inibiu o crescimento do câncer da próstata refratário ao hormônio (o mesmo como veículo) (A Figura 7a). Ao contrário, o exemplo 7-3b (RD37) (4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)-5,7- diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila) fortemente inibiu o crescimento destes tumores (figura 7a) e a inibição é dependente da dose (figura 7b). Além disso, o exemplo 7-3b (RD37) inibiu a expressão de PSA (figura 8), o marcador clínico para o câncer da próstata refratário ao hormônio.

[00344] O Exemplo 7-3b (RD37) (4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)- 5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila) foi também testado em um outro modelo de enxerto xenoblástico de câncer da próstata refratário ao hormônio, LAPC4 refratário ao hormônio. Este modelo foi estabelecido a partir da passagem do câncer da próstata sensível ao hormônio em camundongos castrados, que imita a progressão clínica de câncer da próstata (2). Similar à descoberta usando modelo de enxerto xenoblástico de LNCaP superexpressa por AR, a bicalutamida medicamentosa clínica corrente não inibiu o crescimento e a expressão de PSA no modelo de enxerto xenoblástico de LAPC4 refratário ao hormônio (mesmo como veículo) (figura 9a e 9b). Ao contrário, o exemplo 7-3b (RD37) fortemente inibiu o crescimento e expressão de PSA destes tumores (figura 9a e 9b).

Efeito inibidor sobre o crescimento de células de câncer da próstata sensível ao hormônio.

[00345] Para determinar se os derivados de diariltiaidantoína também inibiram as células de câncer da próstata sensível ao hormônio, testou-se alguns compostos seletivos sobre o crescimento de células LNCaP mediante a medição de MTS das atividades da mitocôndria. Ao contrário, não tiveram nenhum efeito sobre o crescimento de câncer da próstata refratário ao hormônio, a bicalutamida medicamentosa clínica corrente suavemente inibiu as células LNCaP sensíveis ao hormônio em uma maneira dependente da dose. O Exemplo 5-3b (RD7) (4-[3-(4- metilfenil)-4,4-dimetil-5-oxo-2-tioxoimidazolidin-1-il]-2-trifluormetil- benzonitrila) e o exemplo 7-3b (RD37) (4-(8-oxo-6-tioxo-5-(4-metilfenil)- 5,7-diazaespiro[3,4]oct-7-il)-2-trifluormetilbenzonitrila) inibiram o câncer da próstata sensível ao hormônio com uma potência 10 vezes mais elevada do que a bicalutamida (figura 10).

Ensaio biológico in vivo

[00346] Todas as experiências de animal foram executadas em conformidade com as diretrizes do Animal Research Committee of the University of California at Los Angeles. Os animais foram adquiridos da Taconic e mantidos em uma torre de fluxo laminar em uma colônia de flora definida. As células LNCaP-AR e LNCaP-vetor foram mantidas em meio RPMI suplementado com FBS a 10%. 106 células em 100 μl de 1:1 Matrigel para meio RPMI foram injetadas subcutaneamente nos flancos de camundongos SCID intactos ou castrados. O tamanho de tumor foi medido semanalmente em três dimensões (comprimento x largura x profundidade) usando compassos de calibre. Os camundongos foram escolhidos a esmo em grupos de tratamento quando o tamanho do tumor alcançou aproximadamente 100 mm3. Os fármacos foram fornecidos oralmente todos os dias em 10 mg/kg e 50 mg/kg. Para obter a leitura farmacodinâmica, os animais foram imageados através de uma câmara CCD ótica, 3 horas após a última dose do tratamento. Uma ROI é tirada sobre o tumor para medição da atividade de luciferase em fóton/segundo. Os painéis à direita eram uma representação das medições de ROI. Os dados são mostrados nas figuras 11 e 12. Durante 18 dias o RD162 foi eficaz para impedir o crescimento tumoral e ainda causar a diminuição do tumor, e foi distintamente mais eficaz do que a bicalutamida.

[00347] O farmacocinéticos de bicalutamida, 4-[7-(4-ciano-3- trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]-tolueno [RD37], N-metil-4-{4-[7-(4-ciano-3-trifluormetilfeni)-8-oxo-6-tioxo-5,7- diaza-espiro[3,4]oct-5-il]-2-fenil}butanamida [RD131], e N-metil-4-[7-(4- ciano-3-trifluormetilfenil)-8-oxo-6-tioxo-5,7-diaza-espiro[3,4]oct-5-il]-2- fluorbenzamida (52d) [RD 162] foram avaliados in vivo usando camundongos FVB de 8 semanas de idade que foram adquiridos da Charles River Laboratories. Os camundongos foram divididos em grupos de três para cada ponto do tempo. Dois camundongos não foram tratados com fármaco e dois outros camundongos foram tratados com solução de veículo. Cada grupo foi tratado com 10 mg per quilograma de peso corporal.

[00348] O fármaco foi dissolvido em uma mistura de 1:5:14 de DMSO : PEG400 : H2O, (solução de veículo) e foi administrado em camundongos através da veia da cauda. Os animais foram aquecidos sob uma lâmpada térmica por aproximadamente 20 minutos antes do tratamento para dilatar a sua veia da cauda. Cada camundongo foi colocado em um limitador de camundongo (Fisher Sci. Cat# 01-288- 32A) e foi injetado com 200 μm de fármaco em solução de veículo na veia da cauda dilatada. Após a administração de fármaco, os animais foram submetidos a eutanásia através de inalação de CO2 em pontos de tempo diferentes: 5 m, 30 m, 2 h, 6 h, 16 h. Os animais foram imediatamente sangrados após a exposição ao CO2 através de punctura cardíaca (seringa de 1 ml BD + agulha 27G 5/8). Para dosagem oral, o fármaco foi dissolvido em uma mistura de 50:10:1:989 de DMSO: Carboximetilcelulose : Tween80:H2O antes da administração oral através de uma seringa de alimentação.

[00349] As amostras de soro foram analisadas para determinar a concentração de fármaco pela HPLC que (Waters 600 pump, Waters 600 controller and Waters 2487 detector) foi equipada com uma coluna Alltima C18 (3 μ, 150 mm x 4,6 mm). Os compostos RD37, RD131 e RD162 foram detectados em comprimento de onda de 254 nm e bicalutamida foi detectada em comprimento de onda de 270 nm.

[00350] As amostras para a análise de HPLC foram preparadas de acordo com o seguinte procedimento: - As células sangüíneas foram separadas do soro mediante a centrifugação. - À 400 μl de soro foram adicionados 80 μl de uma solução de 10 μM de um padrão interno e 520 μl de acetonitrila. A precipitação ocorreu. - A mistura foi submetida a vórtice durante 3 minutos e depois colocada sob ultra-som durante 30 minutos. - As partículas sólidas foram extraídas por filtração ou foram separadas por centrifugação. - O filtrado foi secado sob fluxo de argônio para secura. A amostra foi reconstruída para 80 μl com acetonitrila antes da análise por HPLC para determinar a concentração de fármaco. - A curva padrão de fármaco foi usada para melhorar a precisão.

[00351] A concentração de RD162 no plasma como uma função de tempo resultante da administração intravenosa e oral é mostrada na figura 13. A concentração em estado constante (Css) de bicalutamida, RD131 e RD162, é mostrada na Tabela 4. A concentração em estado constante de RD162 é essencialmente tão boa quanto aquela de bicalutamida, e substancialmente melhor do que o RD131.

[00352] Tabela 4. Concentração em estado constante de bicalutamida, RD131 e RD162 no plasma de camundongos.

Classificação dos Compostos nas Séries

[00353] As Tabelas de 5 a 10 apresentam compostos de diarilidantoína agrupados nas Séries de 1 a 6. A Tabela 11 apresenta compostos de diarilidantoína que não foram colocados em uma série. A colocação dos compostos em séries foi baseada nos dados disponíveis acoplados com a avaliação analítica. Os dados considerados incluíram ensaios in vitro (sistema repórter de resposta de AR na linhagem celular LNCaP, medição do nível de PSA, análise mitocondrial MTS) e experiências in vivo (tamanho de tumor medido diretamente ou pela emissão induzida pelo gene repórter de luciferase, ensaios farmacocinéticos com base em níveis de plasma sangüíneo). Nem todo composto foi submetido a cada ensaio. Nem todos os dados que foram gerados são mostrados. A avaliação foi aplicada na classificação de compostos em relação de um ao outro por sua utilidade no tratamento de câncer da próstata, em particular quando se classifica dois compostos para os quais as mesmas experiências não foram executadas. As características consideradas no estabelecimento da classificação incluem a atividade de antagonismo de AR, a falta de agonismo de AR nas células refratárias ao hormônio, prevenção do crescimento de tumor, diminuição do tumor, e comportamento farmacocinético, com um tempo de permanência mais longo no sangue sendo vantajoso.

Série 1

[00354] Geralmente, os compostos da Série 1 são diariltioidantoínas com um anel de arila a esquerda dissubstituído que são dissubstituídos no carbono de hidantoína a direita, e possuem um substituinte de oxigênio ou N sobre o carbono de hidantoína a esquerda. É esperado que o substituinte de amido hidrólise em um oxigênio nas soluções aquosas tais como encontradas nos sistemas biológicos, in vitro e in vivo. O RD100 possui boa atividade com um iodo em vez de um substituinte de CF3 sobre o anel de arila a esquerda.

[00355] Os compostos da Série 1 (vide a Tabela 5) foram avaliados de serem muito melhor do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata. No entanto, o RD37 e o RD131 foram observados de metabolizar rápido, isto é, possuem um tempo de residência curto no sangue. O RD162 possui farmacocinéticos desejáveis.

[00356] A Figura 17 mostra que sob tratamento com bicalutamida, os níveis de PSA com relação as células LNCaP permaneceram os mesmos ou aumentaram em relação ao tratamento com solução de veículo, enquanto sob tratamento com RD162, os níveis de PSA diminuíram. A Figura 18 ilustra que sob tratamento com solução de veículo, os tumores continuam a aumentar no tamanho. Ao contrário, sob tratamento com RD162 em uma dose de 1 mg per kg de peso corporal per dia, a taxa de aumento de tumor diminuiu, e o tamanho do tumor pareceu estar estabilizado após cerca de 17 dias. Sob tratamento com RD162 em uma dose de 10 mg per kg de peso corporal per dia, o tamanho de tumor diminuiu com o tempo. A Figura 19 ilustra que sob tratamento com RD162 em uma dose de 10 mg per kg de peso corporal per dia, a emissão de fóton associada com a atividade de luciferase diminuiu. A Figura 20 mostra que o tratamento com RD162 nesta dose resultou em uma diminuição ou estabilização do tamanho de tumor e uma diminuição na emissão de fóton associada com a atividade de luciferase.

[00357] A Figura 21 mostra que sob tratamento com RD162, RD162', RD162", RD169 e RD 170 em doses de 100, 200, 500 e 1000 nM, os níveis de PSA de células LN-AR diminuiram. Além do mais, quanto mais elevada a dose, tanto mais baixo o nível de PSA. A Figura 23 apresenta o peso e a taxa no trato urogenital de emissão de fóton com atividade luciferase inicialmente e após 14 dias de tratamento com bicalutamida ou com RD162 com relação aos camundongos intactos e castrados. O peso e a taxa de emissão de fóton aumentaram com relação aos camundongos tanto intactos quanto castrados. O tratamento de camundongos castrados com RD162 resultou em uma diminuição no peso e emissão de fóton com respeito aos camundongos castrados não tratados, assim como o tratamento com bicalutamida.

[00358] Desta maneira, os compostos da Série 1 são particularmente vantajosos para uso como antagonistas de AR, e como agentes terapêuticos para o câncer da próstata refratário ao hormônio. Eles podem ser úteis para tratar outras doenças ou condições relacionadas com o AR tais como hiperplasia benigna da próstata, perda de cabelo e acne. Estes e os compostos relacionados podem também ser úteis como moduladores de outros receptores nucleares, tais como o receptor de glicocorticóide, receptor de estrogênio, e receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma, e como agentes terapêuticos para doenças em que os receptores nucleares desempenham um papel, tal como câncer da mama, câncer do ovário, diabetes, doenças cardíacas, e doenças relacionadas com o metabolismo. Eles podem ser úteis em ensaios, por exemplo, como padrões, ou como intermediários ou profármacos. TABELA 5

Série 2

[00359] Os compostos da Série 2 (vide a Tabela 6) foram significativamente melhores do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata, embora existiram indicações de que o RD54 pode atuar como um agonista. A Figura 3 ilustra que os compostos RD145, RD152, RD153, RD162 e RD163 na Série 1 e RD161 na Série 2 dosados em concentrações que variam de 125 nM a 1000 nM atuaram para reduzir a atividade de luciferase nas células LNCaP-AR, enquanto as soluções de controle de DMSO e de bicalutamida tiveram pouco ou nenhum efeito. A Figura 4 ilustra, por exemplo, que nas concentrações de 1000 nM, os compostos RD37 e RD 131, na Série 1, causaram uma maior diminuição no nível de PSA das células LNCaP-AR do que os RD133, RD134 e RD138 na Série 2. A Figura 11 apresenta o volume de tumor durante um tempo, e ilustra que sob tratamento com bicalutamida ou solução de veículo, os tumores continuaram a desenvolver, enquanto sob tratamento com RD162, na Série 1, os tumores diminuíram de tamanho. A Figura 12 ilustra que a emissão de fóton associada com a atividade de luciferase permaneceu ao redor da mesma ou aumentou sob tratamento com bicalutamida em relação ao tratamento com solução de veículo, enquanto a emissão de fóton diminuiu sob tratamento com RD162. A Figura 14 ilustra que sob tratamento com bicalutamida, existiu pouca ou nenhuma diminuição nos níveis de PSA, enquanto sob tratamento com RD131 e RD162, os níveis de PSA diminuíram. A Figura 15 ilustra que a IC50 para RD37, RD131 e RD162, na Série 1, foi muito mais baixa do que a IC50 para a bicalutamida.

[00360] Geralmente, os compostos da Série 2 são estruturalmente similares aos compostos da Série 1, mas com substituintes diferentes no anel de arila a direita. Os compostos da série 2 são vantajosos para uso como antagonistas de AR, e como agentes terapêuticos para o câncer da próstata refratário ao hormônio. Eles podem ser úteis para tratar outras doenças ou condições relacionadas com o AR tais como hiperplasia benigna da próstata, perda de cabelo e acne. Estes e os compostos relacionados podem também ser úteis como moduladores de outros receptores nucleares, tais como o receptor de estrogênio e o receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma, e como agentes terapêuticos para doenças em que os receptores nucleares desempenham um papel, tal como câncer da mama, câncer do ovário, diabetes, doenças cardíacas e doenças relacionadas com o metabolismo. Eles podem ser úteis em ensaios, por exemplo, como padrões, ou como intermediários ou pró-fármacos. TABELA 6

Série 3

[00361] Os compostos da Série 3 (vide a Tabela 7) foram avaliados serem levemente melhores do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata. Os RD133, RD134 e RD138 (na Série 2) causaram uma diminuição maior no nível de PSA de céluls LNCaP-AR do que os RD135 e RD137, na Série 3. Todos estes compostos causaram uma maior diminuição no nível de PSA do que a bicalutamida.

[00362] Outros compostos da Série 3 (não mostrados) não eram diariltioidantoínas, e eram comparáveis em atividade aos compostos de monoarilidantoína da técnica anterior RD2, RD4 e RD5.

[00363] Assim, os compostos da Série 3 são úteis como antagonistas de AR, e como agentes terapêuticos para o câncer da próstata refratário ao hormônio. Eles podem ser úteis para tratar outras doenças ou condições relacionadas com o AR tais como hiperplasia benigna da próstata, perda de cabelo e acne. Estes e os compostos relacionados podem também ser úteis como moduladores de outros receptores nucleares, tais como o receptor de estrogênio e o receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma, e como agentes terapêuticos para doenças em que os receptores nucleares desempenham um papel, tal como câncer da mama, câncer do ovário, diabetes, doenças cardíacas e doenças relacionadas com o metabolismo. Eles podem ser úteis em ensaios, por exemplo, como padrões, ou como intermediários ou pró- fármacos. TABELA 7

Série 4

[00364] Os compostos da Série 4 (vide a Tabela 8) foram avaliados não serem melhores do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata. Os RD 39 e RD 40 da Série 4 e o RD 37 da Série 1, por exemplo, diferem apenas no substituinte sobre o carbono a direita inferior do anel de hidantoína. Os substituintes no anel de arila à direita podem também afetar a atividade.

[00365] Alguns compostos da Série 4 (incluindo aqueles apresentados e outros que não são mostrados) não eram compostos de diarila (que carecem do anel de arila a direita), não eram tioidantoínas, não eram dissubstituídos no carbono sobre o lado direito inferior do anel de hidantoína, e/ou tinham substituintes diferentes de oxigênio ou amido sobre o carbono a esquerda inferior do anel de hidantoína. Isto fornece evidência das vantagens surpreendentes de diariltioidantoínas que são dissubstituídas sobre o carbono a direita inferior do anel de hidantoína e possuem oxigênio ou amido sobre o carbono a esquerda inferior do anel de hidantoína.

[00366] Assim, os compostos da Série 4 são úteis como antagonistas de AR, e como agentes terapêuticos para o câncer da próstata refratário ao hormônio, pelo menos na medida em que eles são comparáveis com a bicalutamida. Eles podem ser úteis para tratar outras doenças ou condições relacionadas com o AR tais como hiperplasia benigna da próstata, perda de cabelo e acne. Estes e os compostos relacionados podem também ser úteis como moduladores de outros receptores nucleares, tais como o receptor de estrogênio e o receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma, e como agentes terapêuticos para doenças em que os receptores nucleares desempenham um papel, tal como câncer da mama, câncer do ovário, diabetes, doenças cardíacas e doenças relacionadas com o metabolismo. Eles podem ser úteis em ensaios, por exemplo, como padrões, ou como intermediários ou pró- fármacos. TABELA 8

Série 5

[00367] Os compostos da Série 5 (vide a Tabela 9) eram inativos ou quase inativos, e assim, eram piores do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata. Os substituintes no anel de arila a direita são importantes para determinar a atividade.

[00368] Alguns compostos da Série 5 (alguns dos quais são apresentados e alguns destes não são mostrados) não eram compostos de diarila (que carecem do anel de arila a direita), não eram tioidantoínas, não eram dissubstituídos no carbono sobre o lado direito inferior do anel de hidantoína, e/ou tinham substituintes diferentes de oxigênio ou amido sobre o carbono a esquerda inferior do anel de hidantoína. Isto fornece evidência das vantagens surpreendentes de diariltioidantoínas que são dissubstituídas sobre o carbono a direita inferior do anel de hidantoína e possuem oxigênio ou amido sobre o carbono a esquerda inferior do anel de hidantoína. Em particular, o substituinte terminal em RD155, RD 156 e 158 (CH2NRxRy, onde Rx,y = H ou metila) não é visto como contribuinte para a atividade nestes compostos

[00369] Os compostos da Série 5 não devem ser desejáveis para o tratamento de câncer da próstata ou como antagonistas do AR, embora estes e os compostos relacionados podem ser úteis como moduladores de outros receptores nucleares, tais como o receptor de estrogênio e o receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma, e como agentes terapêuticos para doenças em que os receptores nucleares desempenham um papel, tal como câncer da mama, câncer do ovário, diabetes, doenças cardíacas e doenças relacionadas com o metabolismo. Eles podem ser úteis em ensaios, por exemplo, como padrões, ou como intermediários ou pró-fármacos. TABELA 9

Série 6

[00370] Os compostos da Série 6 (vide a Tabela 10) eram inativos ou quase inativos, e além disso eram fortes agonistas, e assim eram muito piores do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata. Os compostos comparativos foram classificados como muito fraco em relação com os compostos da invenção. Notavelmente, o RD72 tinha atividade muito fraca, com um substituinte de cloro sobre o anel de arila a esquerda, enquanto o RD7, com um trifluorometano, e RD100, com iodo, classificados na Série 1. Os resultados para os compostos da Série 6 fornecem evidência das vantagens surpreendentes de diariltioidantoínas que são dissubstituídas sobre o carbono a direita inferior do anel de hidantoína e possuem oxigênio ou amido sobre o carbono a esquerda inferior do anel de hidantoína, e possuem certos substituintes sobre o anel de arila a esquerda.

[00371] Os compostos da Série 6 não devem ser desejáveis para o tratamento de câncer da próstata ou como antagonistas do AR. TABELA 10

Compostos não organizados em séries

[00372] Para diversos compostos, existiram dados experimentais insuficientes para classificá-los. Estes compostos não organizados em séries são apresentados na Tabela 11.

[00373] Com base nos dados e métodos da invenção, e aplicando avaliação com base no exame de muitos compostos, incluindo alguns não mostrados aqui, pode-se formar algumas observações a cerca dos compostos não organizados em séries. O exemplo comparativo RD1 é esperado de estar na Série 3 com exemplos comparativos RD3-RD5. RD89 é esperado hidrolisar em RD37 (Série 1), e deve portanto ter atividade comparável. RD 104 é esperado hidrolisar em RD58 (Série 1), e deve portanto ter atividade comparável. RD105 é esperado hidrolisar em RD8 (Série 1), e RD 139 e RD140 são esperados hidrolisarem em RD138 (Série 2), e eles devem portanto ter atividades comparáveis. TABELA 11

[00374] Em resumo, os novos compostos que apresentam evidência de serem de longe superiores à bicalutamida no tratamento de câncer da próstata foram identificados e produzidos. Sensibilidade da Atividade Anti-Câncer dos Compostos para Diferenças Estruturais

[00375] Os inventores determinaram que o que pode parecer uma pequena mudança na estrutura dos compostos de hidantoína pode resultar em uma grande mudança neste desempenho de composto no tratamento do câncer de próstata. Por exemplo, os RD161 e RD162 diferem apenas por um substituinte de flúor isolado em um anel de arila, e o RD162 está na Série 1, enquanto o RD161 está na Série 2, ambos sendo melhores do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata, mas RD162 sendo superior. No entanto, RD149, que difere do RD 161 apenas por ter um átomo de carbono adicional entre o grupo de metilcarbamoíla e o anel de arila, não é melhor do que a bicalutamida para o tratamento de câncer de próstata e é classificado na Série 4. O efeito de RD161, RD162 e RD149 sobre a atividade de luciferase pode ser visto na Figura 24. Em uma dada concentração do composto, a atividade de luciferase após a exposição ao RD161 e RD162 é menor do que a atividade de luciferase após a exposição ao RD149.

[00376] O RD9 difere do RD8 apenas em que um grupo de amino é substituído por um grupo de hidroxila. No entanto, visto que o RD8 está na Série 1, muito melhor do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata, o RD9 está na Série 4, não melhor do que a bicalutamida. O efeito de RD8 e RD9 sobre a atividade de luciferase na linhagem celular 1AR pode ser visto na Figura 27. Para uma dada dose, a atividade de luciferase após a exposição ao RD8 é menor do que a atividade de luciferase após a exposição ao RD9. O efeito de RD8 e RD9 sobre a atividade de luciferase na linhagem celular 4AR pode ser visto na Figura 26. Para uma dada dose, a atividade de luciferase após a exposição ao RD8 é menor do que a atividade de luciferase após a exposição ao RD9. O efeito de RD8 e RD9 sobre os níveis de PSA na linhagem celular LN/AR pode ser visto na Figura 25. Para uma dada dose, o nível de PSA após a exposição ao RD8 é menor do que o nível de PSA após a exposição ao RD9.

[00377] O RD130 e o RD131 diferem um do outro apenas por um substituinte de metila e o final de um grupo de carbamoíla e ambos os compostos são classificados na Série 1, embora o RD131 foi observado ser particularmente vantajoso. O RD129 é o mesmo como RD130, com a exceção de um grupo de metóxi sendo substituído por um grupo de amino. No entanto, o RD129 é classificado na Série 3. O RD128 é similar ao RD129, mas possui menos um carbono na ligação da cadeia do grupo de éster ao anel de arila; o RD128 é classificado na Série 3. O efeito de RD130, RD131, RD128 e RD129 sobre os níveis de PSA na linhagem celular LN/AR pode ser visto na Figura 28. Para uma dada concentração, o nível de PSA após exposição ao RD130 e RD131 é menor do que o nível de PSA após a exposição ao RD128 e RD129.

[00378] Os RD153 e RD155 diferem um do outro pelo fato de que o primeiro possui um grupo de metilcarbamoíla ligado a um anel de arila e um substituinte de dimetila ligado ao grupo de tioidantoína, enquanto o último possui um grupo de metilamino ligado ao anel de arila a direita e um substituinte de ciclobutila ligado ao grupo de tioidantoína. Enquanto o RD153 está na Série 1, muito melhor do que a bicalutamida para o tratamento de câncer da próstata, o RD155 está na Série 5, inativo ou quase inativo no tratamento de câncer da próstata. O efeito de RD153 e RD155 sobre a atividade de luciferase na linhagem celular LN/AR pode ser visto na Figura 29. Para uma dada concentração, a atividade de luciferase após a exposição ao RD153 é menor do que a atividade de luciferase após a exposição ao RD155.

[00379] O RD58 e o RD60 diferem um do outro na substituição de um grupo tio para um oxo e um substituinte de dimetila para um substituinte de ciclobutila. Enquanto o RD58 está na Série 1, o RD60 está na Série 4.

Composições Farmacêuticas e Administração

[00380] Os compostos da invenção são úteis como composições farmacêuticas preparadas com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, como aqui definido, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

[00381] Os compostos de diarilidantoína da invenção podem ser formulados como composições farmacêuticas e administrados a um indivíduo com necessidade de tratamento, por exemplo, um mamífero, tal como um paciente humano, em uma variedade de formas adaptadas à via de administração escolhida, por exemplo, oral, nasal, intraperitoneal ou parenteralmente, por vias intravenosas, intramusculares, tópicas ou subcutâneas, ou por injeção no tecido.

[00382] Assim, os compostos de diarilidantoína da invenção podem ser sistematicamente administrados, por exemplo, oralmente, em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável tal como um diluente inerte ou um veículo comestível assimilável, ou por inalação ou insuflação. Eles podem ser inclusos em cápsulas de gelatina de estrutura sólida ou macia, podem ser comprimidos em comprimidos, ou podem ser incorporados diretamente com o alimento da dieta do paciente. Para a administração terapêutica oral, os compostos de diarilidantoína podem ser combinados com um ou mais excipientes e usados na forma de comprimidos ingeríveis, comprimidos bucais, comprimidos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, wafers, e similares. Os compostos de diarilidantoína podem ser combinados com um veículo em pó inerte e inalado pelo indivíduo ou insuflado. Tais composições e preparações devem conter pelo menos 0,1% de compostos de diarilidantoína. A porcentagem das composições e preparações pode, naturalmente, ser variada e pode convenientemente ser entre cerca de 2% a cerca de 60% do peso de uma dada forma de dosagem única. A quantidade de compostos de diarilidantoína em tais composições terapeuticamente úteis é tal que um nível de dosagem eficaz será obtido.

[00383] Os comprimidos, comprimidos, pílulas, cápsulas e similares podem também conter o seguinte: aglutinantes tais como goma tragacanto, acácia, amido de milho ou gelatina; excipientes tais como fosfato de dicálcio; um agente desintegrante tal como amido de milho, amido de batata, ácido algínico e similares; um lubrificante tal como estearato de magnésio; e um agente adoçante tal como sacarose, frutose, lactose ou aspartame ou um agente flavorizante tal como hortelã-pimenta, óleo de gualtéria ou flavorizante de cereja pode ser adicionado. Quando a forma de dosagem unitária for uma cápsula, pode conter, além de materiais do tipo acima, um veículo líquido, tal como um óleo vegetal ou um polietileno glicol. Vários outros materiais podem estar presentes como revestimentos ou de outra maneira para modificar a forma física da forma de dosagem unitária sólida. Por exemplo, comprimidos, pílulas ou cápsulas podem ser revestidas com gelatina, cera, goma-laca ou açúcar e similares. Um xarope ou elixir pode conter o composto ativo, sacarose ou frutose como um agente adoçante, metila e propilparabenos como conservantes, uma tintura e flavorizante tal como sabor de cereja ou laranja. Naturalmente, qualquer material usado na preparação de qualquer forma de dosagem unitária deve ser farmaceuticamente aceitável e substancialmente não-tóxico nas quantidades empregadas. Além disso, os compostos de diarilidantoína podem ser incorporados em preparações e dispositivos de liberação controlada. Por exemplo, os compostos de diarilidantoína podem ser incorporados em cápsulas de liberação por tempo, comprimidos de liberação por tempo e pílulas de liberação por tempo.

[00384] Os compostos de diarilidantoína podem também ser administrados intravenosa ou intraperitonealmente mediante infusão ou injeção. As soluções dos compostos de diarilidantoína podem ser preparadas em água, opcionalmente misturadas com um tensoativo não tóxico. As dispersões podem também ser preparadas em glicerol, polietileno glicóis líquidos, triacetina, e misturas destes e em óleos. Sob condições usuais de armazenagem e uso, estas preparações podem conter um conservante para impedir o desenvolvimento de microorganismos.

[00385] As formas de dosagem farmacêuticas adequadas para injeção ou infusão podem incluir soluções ou dispersões aquosas estéreis ou pós estéreis compreendendo os compostos de diarilidantoína que são adaptados para a preparação extemporânea de soluções ou dispersões injetáveis ou infusíveis estéreis, opcionalmente encapsuladas em lipossomas. Em todos os casos, a forma de dosagem final deve ser estéril, fluida e estável sob as condições de fabricação e armazenagem. O veículo ou veículo líquido pode ser um solvente ou meio de dispersão líquido que compreende, por exemplo, água, etanol, um poliol (por exemplo, glicerol, propileno glicol, polietileno glicóis líquidos, e similares), óleos vegetais, ésteres glicerílicos vegetais, e misturas adequadas destes. A própria fluidez pode ser mantida, por exemplo, pela formação de lipossomas, pela manutenção do tamanho de partícula requerido no caso de dispersões ou mediante o uso de tensoativos. A prevenção da ação de microorganismos pode ser efetuada por vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal, e similares. Em muitos casos, será preferível incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, tamponantes ou cloreto de sódio. A absorção prolongada das composições injetáveis pode ser efetuada mediante o uso nas composições de agentes retardadores da absorção, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelatina.

[00386] As soluções injetáveis estéreis são preparadas pela incorporação dos compostos de diarilidantoína na quantidade requerida no solvente apropriado com vários dos outros ingredientes enumerados acima, quando requerido, seguido pela esterilização de filtro. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, os métodos preferidos de preparação são as técnicas de secagem a vácuo e secagem por congelamento, que produz um pó do ingrediente ativo acrescido de qualquer ingrediente desejável adicional presente nas soluções filtradas anteriormente estéreis.

[00387] Para a administração tópica, os compostos de diarilidantoína podem ser aplicados na forma pura. No entanto, geralmente será desejável administrá-los na pele como composições ou formulações, em combinação com um veículo dermatologicamente aceitável, que pode ser um sólido ou um líquido.

[00388] Os portadores sólidos úteis incluem sólidos finamente divididos tais como talco, argila, celulose microcristalina, sílica e similares. Outros portadores sólidos incluem nanopartículas poliméricas não tóxicas ou micropartículas. Os portadores líquidos úteis incluem água, álcoois ou glicóis ou misturas de água/álcool/glicol, em que os compostos de diarilidantoína podem se dissolvidos ou dispersos em níveis eficazes, opcionalmente com o auxílio de tensoativos não tóxicos. Os adjuvantes tais como fragrâncias e agentes antimicrobianos adicionais podem ser adicionados para otimizar as propriedades para um dado uso. As composições líquidas resultantes podem ser aplicadas a partir de tampões absorventes, usados para impregnar bandagens e outros curativos, ou pulverizadas na área afetada usando pulverizadores tipo bomba ou aerossóis.

[00389] Espessantes tais como polímeros sintéticos, ácidos graxos, sais de ácido graxo e ésteres, álcoois, celuloses modificadas ou materiais minerais modificados podem também ser empregados com portadores líquidos para formar pastas, géis, ungüentos, sabões e similares dispersáveis, para aplicação diretamente à pele do usuário.

[00390] Exemplos de composições dermatológicas úteis que podem ser usados para liberar os compostos de diarilidantoína na pele são conhecidas da técnica; por exemplo, vide Jacquet et al. (Patente U.S. No 4.608.392), Geria (Patente U.S. No 4.992.478), Smith et al. (Patente U.S. No 4.559.157) e Wortzman (Patente U.S. No 4.820.508), todos dos quais são por meio deste incorporados por referência.

[00391] As dosagens úteis dos compostos de fórmula I podem ser determinadas mediante a comparação de sua atividade in vitro, e atividade in vivo em modelos animais. Os métodos para a extrapolação de dosagens eficazes em camundongos, e outros animais, para seres humanos são conhecidos na técnica; por exemplo, vide a Patente U.S. No 4.938.949, que é por meio deste incorporado por referência.

[00392] Por exemplo, a concentração dos compostos de diarilidantoína em uma composição líquida, tal como uma loção, pode ser de cerca de 0,1 a 25% em peso, ou de cerca de 0,5 a 10% em peso. A concentração em uma composição semi-sólida ou sólida tal como um gel ou um pó pode ser de cerca de 0,1 a 5% em peso, ou cerca de 0,5 a 2,5% em peso.

[00393] A quantidade dos compostos de diarilidantoína requerida para uso no tratamento variará não apenas com o sal particular selecionado, mas também com a via de administração, a natureza da condição sendo tratada e a idade e condição do paciente e será enfim na discrição do médico ou clínico acompanhante.

[00394] As dosagens e vias de administração eficazes de agentes da invenção são convencionais. A quantidade exata (dose eficaz) do agente variará de indivíduo para indivíduo, dependendo, por exemplo, da espécie, idade, peso e condição geral ou clínica do indivíduo, a gravidade ou mecanismo de qualquer distúrbio sendo tratado, o agente ou veículo particular usado, o método e cronograma de administração, e similares. Uma dose terapeuticamente eficaz pode ser determinada empiricamente, por procedimentos convencionais conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. Vide, por exemplo, The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman and Gilman, eds., Macmillan Publishing Co., New York. Por exemplo, uma dose eficaz pode ser estimada inicialmente em ensaios de cultura celular ou em modelos animais adequados. O modelo animal pode também ser usado para determinar as faixas de concentração e vias de administração apropriadas. Tal informação pode depois ser usada para determinar as doses e vias úteis para a administração em seres humanos. Uma dose terapêutica pode também ser selecionada em analogia às dosagens para agentes terapêuticos comparáveis.

[00395] O modo de administração particular e o regime de dosagem serão selecionados pelo clínico acompanhante, levando em conta os particulares do caso (por exemplo, o indivíduo, a doença, o estado doentio envolvido, e se o tratamento é profilático). O tratamento pode envolver doses diárias ou múltiplas doses diárias de composto(s) durante um período de um alguns dias a meses, ou mesmo anos.

[00396] Em geral, no entanto, uma dose adequada estará na faixa de cerca de 0,001 a cerca de 100 mg/kg, por exemplo, de cerca de 0,01 a cerca de 100 mg/kg de peso corporal per dia, tal como acima de cerca de 0,1 mg per quilograma, ou em uma faixa de cerca de 1 a cerca de 10 mg per quilograma de peso corporal do recebedor per dia. Por exemplo, uma dose adequada pode ser de cerca de 1 mg/kg, 10 mg/kg ou 50 mg/kg de peso corporal per dia.

[00397] Os compostos de diarilidantoína são convenientemente administrados na forma de dosagem única; por exemplo, contendo de 0,05 a 10000 mg, de 0,5 a 10000 mg, de 5 a 1000 mg, ou cerca de 100 mg de ingrediente ativo per forma de dosagem unitária.

[00398] Os compostos de diarilidantoína podem ser administrados para alcançar concentrações de plasma máximas de, por exemplo, cerca de 0,5 a cerca de 75 μM, de cerca de 1 a 50 μM, de cerca de 2 a cerca de 30 μM, ou cerca de 5 a cerca de 25 μM. As concentrações de plasma desejáveis exemplares incluem pelo menos ou não mais do que 0,25, 0,5, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 100 ou 200 μM. Por exemplo, os níveis de plasma podem se de cerca de 1 a 100 micromolares ou de cerca de 10 a cerca de 25 micromolares. Isto pode ser obtido, por exemplo, pela injeção intravenosa de uma solução a 0,05 a 5% dos compostos de diarilidantoína, opcionalmente em salina, ou oralmente administrados como um bolo contendo cerca de 1 a 100 mg dos compostos de diarilidantoína. Os níveis sangüíneos desejáveis podem ser mantidos pela infusão contínua para fornecer de cerca de 0,00005 a 5 mg per kg de peso corporal per hora, por exemplo, pelo menos ou não mais do que 0,00005, 0,0005, 0,005, 0,05 ou 5 mg/kg/h. Alternativamente, tais níveis podem ser obtidos por infusões intermitentes contendo cerca de 0,0002 a 20 mg per kg de peso corporal, por exemplo, pelo menos ou não mais do que 0,0002, 0,002, 0,2, 2, 20 ou 50 mg dos compostos de diarilidantoína per kg de peso corporal.

[00399] Os compostos de diarilidantoína podem convenientemente ser apresentados em uma dose única ou como doses divididas administradas em intervalos apropriados, por exemplo, como duas, três, quatro ou mais sub-doses per dia. A própria sub-dose pode ser ainda dividida, por exemplo, em várias administrações vagamente espaçadas discretas; tais como múltiplas inalações de um insuflador.

[00400] Vários compostos identificados acima apresentam pouca ou nenhuma atividade agonística com respeito às células de câncer da próstata refratário ao hormônio. Pela razão destes compostos serem fortes inibidores do AR, eles podem ser usados não apenas no tratamento de câncer da próstata, mas também no tratamento de outras doenças ou condições relacionadas com o AR tais como hiperplasia benigna da próstata, perda de cabelo e acne. Desde que o AR pertença à família de receptores nucleares, estes compostos podem servir como andaimes para a síntese de fármaco que direcionam outros receptores nucleares, tais como o receptor de estrogênio e receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma. Portanto, eles podem ser ainda desenvolvidos para outras doenças tais como câncer de mama, câncer de ovário, diabetes, doenças cardíacas e doenças relacionadas com metabolismo, em que os receptores nucleares desempenham um papel.

[00401] As modalidades ilustradas e debatidas neste relatório descritivo são destinadas apenas ao ensino daqueles versados na técnica do melhor meio conhecido pelos inventores para a preparação e uso da invenção. Nada neste relatório descritivo deve ser considerado como limitativo do escopo da presente invenção. Todos os exemplos apresentado são representativos e não limitativos. As modalidades descritas acima da invenção podem ser modificadas ou variadas, sem divergir da invenção, como observado por aqueles versados na técnica à luz dos ensinamentos acima. Deve portanto ficar entendido que, dentro do escopo das reivindicações e seus equivalentes, a invenção pode ser praticada de outra maneira do que como especificamente descrita.

Claims (5)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

3. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 2, compreendendo um sal fosfato do composto.

4. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 2, em que o veículo farmaceuticamente aceitável compreende um álcool.

5. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 4, o álcool sendo álcool 2-propanol.