BR112021001389A2 - método de alimentação de peixes - Google Patents

Abstract

MÉTODO DE ALIMENTAÇÃO DE PEIXES. A presente invenção fornece métodos de alimentação de peixes de baixo trófico com um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias. Métodos para melhorar a atratividade ou palatabilidade de um produto alimentar para um peixe de trófico mais baixo, estimulando o aumento na ingestão de alimentos, aumentando a taxa de crescimento ou ingestão de alimentos de um peixe de trófico mais baixo e o uso de biomassa compreendendo uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias como um atrator ou estimulante alimentar também são descritos.

Description

MÉTODO DE ALIMENTAÇÃO DE PEIXES

[0001] Este pedido reivindica prioridade ao Pedido Provisório Australiano nº. 2018902685 intitulado "Method of Feeding" depositado em 25 de julho de 2018, todo o conteúdo do qual é aqui incorporado por referência em sua totalidade.

CAMPO DA INVENÇÃO

[0002] Esta invenção se refere, em geral, ao uso de um produto alimentar compreendendo biomassa microbiana mista seca como alimento para peixes, tal como peixes de trófico mais baixo. A invenção também se refere ao uso de biomassa microbiana mista seca como um atrator alimentar ou estimulante alimentar para peixes.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0003] Há uma expansão contínua da aquicultura global para produzir animais aquáticos como peixes, moluscos e crustáceos como alimento para atender às demandas crescentes de uma crescente população humana. Também é necessário aliviar a pressão sobre os estoques de peixes de alto trófico, como salmão, barramundi, atum e bacalhau, o que resultou em esforços para incluir uma proporção maior de espécies de peixes de baixo trófico na dieta humana. Como resultado, há uma demanda crescente por peixes de baixo trófico, como tilápia, bagre e carpa, e sua produção mundial por aquicultura está se expandindo rapidamente.

[0004] Em particular, os ciclídeos tilapiína tais como Oreochromis, Sarotherodon e Tilapia são exemplos de peixes de baixo nível trófico comercialmente importantes. Esses peixes são objeto de grandes esforços de aquicultura em escala mundial, principalmente em águas tropicais. As tilápias se tornaram um dos peixes mais importantes na aquicultura, depois da carpa e do salmão. As tilapiínas tiveram uma produção global de 5,67 milhões de toneladas avaliadas em 8,9 bilhões de dólares US em 2015 (FAO, 2018). Elas são um dos peixes mais fáceis e lucrativos de cultivar, pois são tolerantes à alta densidade de estocagem e crescem rapidamente. As tilapiínas são onívoros e podem ser alimentadas com uma dieta à base de vegetais ou cereais; ao passo que peixes de trófico mais alto, como o salmão, requerem um alto teor de proteína para fornecer um crescimento eficiente. A cepa GIFT (Genetically Improved Farmed Tilapia - Tilápia Cultivada Geneticamente Melhorada) é uma tilápia do Nilo criada seletivamente, Oerochromis niloticus, respondendo por 80% da produção total de sementes de tilápia na China, 75% na Tailândia e 40% nas Filipinas em 2010 (Sukmanomon et al., 2012).

[0005] Há uma necessidade de rações formuladas de forma sustentável com boa relação custo-benefício para apoiar a crescente produção mundial de peixes de baixo trófico. Por exemplo, atualmente, farinha de peixe e óleo de peixe estão incluídos em quantidades entre 0 e 20% e 0 e 10%, respectivamente, nas dietas comerciais de tilapiína. A farinha de peixe é cara e os suprimentos podem não ser confiáveis. A substituição da farinha e do óleo de peixe, por alternativas mais sustentáveis e mais baratas na alimentação das tilapiínas, tem sido foco de pesquisas. Estudos avaliaram a substituição da farinha de peixe em dietas de tilapiína por farinhas vegetais e animais mais baratas e disponíveis localmente (El-Saidy and Gaber, 2002; Herath et al., 2016; Koch et al., 2016; Hg e Romano, 2013; Shiau et al., 1989). A substituição da farinha de peixe por farinha de soja, concentrado de proteína de soja e farinha de subproduto de aves com adição de aminoácidos essenciais (como metionina, lisina) e/ou fósforo foi estudada em vários estudos de curto prazo em alevinos de tilápia (Ng e Romano, 2013). O desempenho da tilápia em uma dieta contendo farelo de soja e aminoácidos essenciais como única fonte de proteína demonstrou ser pior do que em dietas também contendo 15-30% de farinha de subproduto de aves e uma dieta de controle contendo 20% de farinha de peixe (Koch et al., 2016). A farinha de peixe pode ser substituída por uma seleção cuidadosa de farinhas de subprodutos vegetais e/ou animais nas dietas de tilápia, mas o crescimento resultante é semelhante ou inferior ao da presença de farinha de peixe, com efeitos prejudiciais em outras métricas, como taxa de conversão alimentar e retenção de proteína (Herath et al., 2016; Koch et al., 2016).

[0006] Quando comparados com as fontes de proteína aquática, as fontes de proteína derivada de plantas e subprodutos animais são consideradas de baixa qualidade ou de valor nutricional inferior, ou são menos atraentes para os peixes. Quando alimentados como o componente proteico de uma dieta de peixes, o desempenho resultante é inferior ao das dietas contendo proteínas derivadas de água. Substituições adequadas para recursos de proteína aquática, como farinha de peixe, são necessárias para resolver uma ou mais das desvantagens de reduzir ou excluir proteínas derivadas de água de produtos alimentares para peixes.

[0007] Estudos foram realizados para identificar fontes de proteína na dieta para substituir a farinha de peixe em dietas de camarão (Richard et al., 2011; Sookying e Davis,

2011; Suárez et al., 2009; Xie et al., 2016). Algum sucesso foi observado na substituição da farinha de peixe em dietas de Litopenaeus vannamei (Sookying e Davis, 2011), mas verificou-se que Penaeus monodon se beneficia da inclusão de farinha de peixe (Glencross et al., 2014). Este estudo também demonstrou que NovacqTM, um ingrediente para rações natural composto principalmente de biomassa microbiana mista seca, pode fornecer uma solução sustentável para eliminar totalmente a necessidade de farinha de peixe em rações de Penaeus monodon. Inclusões de 5% e 10% de NovacqTM também aumentaram o crescimento em uma variedade de níveis de proteína em até 60% (Glencross et al., 2015). O uso de biomassas microbianas produzidas usando diferentes sistemas, como a tecnologia de bioflocos, demonstrou ter vários graus de sucesso em camarões (Anand et al., 2014; Kuhn et al., 2010) e tilápia (Avnimelech, 2007; Azim e Little, 2008; Caldini et al., 2015). Caldini et al. avaliaram os efeitos do fornecimento de biomassa seca de biofloco para criação de tilápia do Nilo. A conclusão em Caldini et al. afirma que qualquer nível de substituição de ração artificial com bioflocos secos prejudica o desempenho de crescimento na tilápia; e não há justificativa para a secagem da biomassa de bioflocos para fornecê-la à tilápia cultivada.

[0008] Permanece uma necessidade de rações alternativas sustentáveis para a criação de peixes de baixo trófico, como ciclídeos tilapiína que abordam uma ou mais das desvantagens dos produtos alimentares conhecidos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0009] O presente inventor descobriu que produtos alimentares para peixes, compreendendo biomassa seca compreendendo uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias, promovem uma taxa de crescimento aumentada e/ou saúde melhorada quando fornecidos aos peixes, em particular, peixes de baixo trófico, como ciclídeos tilapiína. O inventor também descobriu surpreendentemente que a biomassa misturada seca atua como um atrator e/ou estimulante alimentar em peixes.

[0010] A inclusão da biomassa seca, incluindo bactérias e microalgas em um produto alimentar que compreende ainda outros componentes nutricionais, mostrou aumentar a ingestão de alimentos quando alimentada a peixes e, portanto, resulta em ganho de peso melhorado. Acredita-se que esta biomassa misturada seca atua como um atrativo alimentar ou estimulante alimentar para peixes, por exemplo, peixes com trófico mais baixo, como ciclídeos tilapiína. Esta descoberta encontra aplicação no fornecimento de produtos alimentares melhorados para peixes de trófico mais baixo. Sem se ater à teoria, acredita-se que a estimulação alimentar pode estar ligada à melhora na palatabilidade ou atratividade da ração. No entanto, a estimulação alimentar também pode ser a consequência da biomassa seca agindo em diferentes vias gustativas ou metabólicas para aquelas tipicamente ligadas a atrativos ou estimulantes alimentares ricos em nitrogênio. Por exemplo, a estimulação alimentar pode ser, pelo menos em parte, uma consequência do aumento da taxa de evacuação gastrointestinal ou taxa de absorção de nutrientes.

[0011] A farinha de peixe e a farinha de krill são fontes de proteína altamente nutritivas, muitas vezes incorporadas em produtos alimentares para peixes. Eles são atrativos para peixes e, além de fornecerem benefícios nutricionais,

normalmente atuam como atrativos para rações quando incorporados em produtos para rações. O uso de biomassa seca que compreende bactérias e microalgas oferece uma alternativa ao uso de recursos aquáticos como um atrativo. O inventor descobriu surpreendentemente que a biomassa microbiana mista seca pode ser mais eficaz que um atrator ou estimulante alimentar do que os recursos aquáticos, visto que a inclusão da biomassa foi considerada mais eficaz em concentrações mais baixas em um produto alimentar do que o necessário para os recursos aquáticos como farinha de peixe.

[0012] Esta descoberta prevê o uso de biomassa seca compreendendo bactérias e microalgas em produtos alimentares para peixes compostos por ingredientes nutricionais de baixa qualidade, ou ingredientes com valor nutricional inferior, para encorajar os peixes a consumir uma quantidade maior do produto alimentar. Verificou-se que a incorporação da biomassa produz alimentação intensificada e maior ganho de peso e crescimento quando comparada às formulações alimentares tradicionais e às formulações alimentares desprovidas de recursos aquáticos. A biomassa microbiana mista seca também encontra aplicação em situações em que a atratividade ou palatabilidade dos produtos alimentares para animais precisa ser aumentada. A palatabilidade dos ingredientes para o peixe é importante porque, independentemente da composição e digestibilidade dos nutrientes, isso pode ter um grande impacto na utilidade de um produto alimentar. O uso da biomassa seca para melhorar a palatabilidade ou atratividade dos produtos alimentares na ausência de recursos aquáticos, como farinha de peixe, oferece a oportunidade de incorporar uma ampla gama de ingredientes brutos de qualidade alimentar disponíveis localmente, como fontes de proteína derivada de plantas ou subprodutos animais para substituir recursos proteicos de origem aquática, como farinha de peixe ou peixe lixo. Em circunstâncias em que há um fornecimento local limitado de ingredientes brutos de qualidade, isso pode melhorar a relação custo-benefício das dietas de peixes, reduzindo os custos de abastecimento e transporte de ingredientes de qualidade, como farinha de peixe.

[0013] Assim, em um primeiro aspecto, a presente invenção fornece um método de alimentação de peixes de baixo trófico, compreendendo alimentar o peixe com um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

[0014] Em outro aspecto, a invenção também fornece um método de criação de peixes de baixo trófico, incluindo uma etapa de alimentar o peixe com um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

[0015] Em ainda outro aspecto, a invenção também fornece um uso de um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias em uma quantidade eficaz para fornecer nutrição a um peixe de trófico mais baixo.

[0016] Foi surpreendentemente descoberto que a inclusão da biomassa misturada seca que compreende bactérias e microalgas em um produto alimentar que compreende ainda outros componentes nutricionais, incentiva o aumento da ingestão de alimentos quando alimentada com peixe de trófico mais baixo e, portanto, resulta em ganho de peso melhorado.

Acredita-se que a biomassa misturada seca pode atuar como um atrativo alimentar ou estimulante alimentar para peixes, como peixes de trófico mais baixo, por exemplo, ciclídeos tilapiína.

[0017] Consequentemente, em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um uso de biomassa seca compreendendo uma população mista de microrganismos incluindo microalgas e bactérias como um atrator alimentar ou estimulante alimentar para peixe de trófico mais baixo.

[0018] Em ainda um outro aspecto, a presente invenção fornece um método para melhorar a atratividade e/ou palatabilidade de um produto alimentar para um peixe de trófico mais baixo, compreendendo alimentar o peixe com o produto alimentar na presença de uma biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

[0019] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um método para estimular um peixe de trófico mais baixo a aumentar sua ingestão de alimentos, compreendendo fornecer ao peixe um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

[0020] Em ainda outro aspecto, a presente invenção também fornece um método para aumentar a taxa de crescimento ou ingestão de alimento de um peixe de trófico mais baixo, compreendendo fornecer aos peixes um produto alimentar, o referido produto alimentar compreendendo biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

[0021] Considera-se também que, devido ao seu apelo para os peixes, a biomassa microbiana mista seca pode ser usada para aumentar a atratividade e eficácia das iscas de pesca para animais aquáticos.

[0022] Consequentemente, em um aspecto adicional, a presente invenção fornece adicionalmente um uso de biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos incluindo microalgas e bactérias como isca para um animal aquático.

[0023] Ainda em um aspecto adicional, a presente invenção fornece uma isca que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

[0024] Em algumas modalidades, a biomassa seca é uma biomassa microbiana mista de acordo com o documento WO 2009/132392 A1, ou uma biomassa microbiana mista preparada de acordo com um processo descrito no documento WO 2009/132392 A1, cujo conteúdo está incluído na presente invenção em sua totalidade. Em algumas modalidades, a biomassa seca, de preferência, compreende bactérias em uma quantidade de 5% p/p a 25% p/p. Em algumas modalidades, a biomassa seca compreende microalgas em uma quantidade de 10% p/p a 80% p/p. Em modalidades preferidas, a biomassa microbiana mista seca é NovacqTM. De preferência, o produto alimentar compreende de 2% p/p a 15% p/p de biomassa seca. De preferência, o produto alimentar compreende um ou mais ingredientes nutricionais adicionais, de preferência, selecionados a partir de fontes de proteína, fontes de carboidratos e/ou fontes de lipídeos. De preferência, o produto alimentar é um produto nutricionalmente equilibrado. De preferência, o produto alimentar é nutricionalmente equilibrado para as espécies de peixes particulares.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0025] A Figura 1 é uma representação gráfica que mostra a relação entre a taxa de inclusão de NovacqTM e o ganho de peso diário e o consumo alimentar diário de tilápia GIFT.

[0026] A Figura 2 é uma representação gráfica que mostra a ingestão média diária de ração de matéria seca para diferentes taxas de inclusão de NovacqTM, expressa em % do peso corporal, ao longo do experimento.

[0027] A Figura 3 é uma representação gráfica que mostra a relação entre o ganho de peso e o teor de farinha de peixe das dietas, com e sem inclusão de NovacqTM. As diferenças significativas são marcadas por letras diferentes [ANOVA de duas vias, efeito Novacq, P<0,05; Efeito da farinha de peixe, P<0,05; interação, P>0,05].

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

1. Definições

[0028] Salvo definição em contrário, todos os termos técnicos e científicos usados aqui têm o mesmo significado como é comumente entendido por um indivíduo técnico no assunto à qual a invenção pertence. Embora quaisquer métodos e materiais semelhantes ou equivalentes aos aqui descritos possam ser usados na prática ou teste da presente invenção, os métodos e materiais preferidos são descritos. Para os fins da presente invenção, os seguintes termos são definidos abaixo.

[0029] Ao longo deste relatório descritivo, a palavra "compreende", ou variações da mesma, como "compreendem" ou "compreendendo", será entendida como implicando a inclusão de um elemento , inteiro ou etapa indicada, ou grupo de elementos, inteiros ou etapas, mas não a exclusão de qualquer outro elemento, inteiro ou etapa, ou grupo de elementos, inteiros ou etapas.

[0030] Ao longo deste relatório descritivo, a referência a valores numéricos, a menos que indicado de outra forma, é considerada como significando "cerca de" o valor numérico. O termo "cerca de" é usado para indicar que um valor inclui a variação inerente de erro para o dispositivo ou método sendo empregado para determinar o valor, ou a variação que existe entre os valores experimentais.

[0031] Os artigos "um" e "uma" são usados na presente invenção para se referir a um ou mais de um (ou seja, a pelo menos um) do objeto gramatical do artigo. A título de exemplo, "um elemento" significa um elemento ou mais de um elemento.

[0032] O termo "biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias" ou "biomassa microbiana mista seca" e semelhantes, como aqui utilizado, se refere a uma biomassa seca, por exemplo, uma biomassa sólida, que compreende uma população mista de microrganismos incluindo bactérias e microalgas. Normalmente, outros microrganismos, como leveduras, protistas e fungos podem estar presentes. A biomassa também pode incluir matéria orgânica celulósica. A biomassa microbiana mista é preparada através da cultura de uma população mista ou heterogênea de microrganismos sob condições controladas, onde o crescimento tanto de microalgas quanto de bactérias é estimulado. O crescimento bacteriano é estimulado pela adição de uma fonte de carbono que é utilizada pelas bactérias. Esta cocultura resulta em uma biomassa microbiana mista contendo uma quantidade significativa de biomassa derivada de bactérias, por exemplo, de 5% p/p a 25% p/p. Os métodos para a produção de biomassa microbiana mista são descritos no documento PCT/AU2009/000539, publicado em 5 de novembro de 2009 como WO 2009/132392 A1 (Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation) e documento PCT/AU2014/000419 A1, publicado em 16 de outubro de 2014 como WO 2014/165936 A1 (Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation). Em uma modalidade preferida, a biomassa microbiana mista seca é uma biomassa produzida comercialmente usada como um suplemento para alimentação de camarão e vendida sob o nome NovacqTM. A NovacqTM usada na presente invenção foi fabricada na Austrália pela Ridley AgriProducts (www.ridley.com.au) e compreende biomassa microbiana mista seca preparada de acordo com os processos descritos nos documentos WO 2009/132392 A1 (CSIRO) e WO 2014/165936 A1 (CSIRO), os conteúdos dos quais são incorporados na presente invenção em sua totalidade.

[0033] Quando usado aqui, o termo "nível trófico" se refere à classificação do peixe pelos níveis tróficos de 2 a 5 para diferentes espécies, dependendo de qual alimento eles comem e em que nível trófico seu alimento é classificado. O termo "baixo trófico" ou "trófico mais baixo" e semelhantes, quando usado aqui, se refere a peixes que estão mais abaixo na cadeia alimentar e tendo um nível trófico de, por exemplo, 2,0 a 2,5 ou 3. Peixes de baixo trófico comumente produzidos em escala comercial pela aquicultura incluem ciclídeos tilapiína, como os gêneros Oreochromis, Sarotherodon e Tilapia, incluindo cepas GIFT

(Genetically Improved Farmed Tilapia - Tilápia Cultivada Geneticamente Melhorada). Outros ciclídeos Tilapiína incluem os gêneros Alcolapia, Danakilia, Iranocichlia e Steatocranus. Em algumas modalidades, o ciclídeo tilapiína é tilápia do Nilo, também conhecida como Oreochromis niloticus. Em particular, uma variedade de Oreochromis niloticus é a cepa GIFT de tilápia do Nilo. Outros peixes de baixo trófico comumente produzidos em escala comercial pela aquicultura incluem, mas não estão limitados a carpa; e bagre, incluindo bagre tubarão, pangasius, basa e tra.

[0034] Quando usado aqui, o termo "alto trófico" ou "trófico mais alto" se refere a peixes em um alto nível na cadeia alimentar e tendo um alto nível trófico de, por exemplo, 3,5 a 4,5. Os peixes de alto nível trófico que podem ser produzidos pela aquicultura incluem cobia, truta, bacalhau, salmão, peixe-rei e barramundi.

[0035] Salvo indicação em contrário, deve ser entendido que todas as porcentagens aqui descritas são porcentagens em peso [% p/p]. Quando se referem à composição da biomassa microbiana mista, as porcentagens se referem a % p/p em uma base de massa/massa seca ao ar.

[0036] Quando usado aqui, o termo "produto alimentar" se refere a uma composição alimentar que compreende biomassa microbiana mista seca e, de preferência, um ou mais ingredientes nutricionais adicionais selecionados a partir de fontes de carboidratos, fontes de proteínas e fontes de lipídeos. O produto alimentar também pode compreender um ou mais ingredientes nutricionais adicionais selecionados de vitaminas e minerais; e/ou excipientes, tais como agentes de ligação. A composição é, de preferência, substancialmente homogênea e pode estar em qualquer forma adequada conhecida na técnica para uso em aquicultura, tal como pó, pasta, bolo, grânulos, péletes e semelhantes. Em algumas modalidades, de preferência, o produto alimentar está na forma de um pélete. De preferência, a composição do produto alimentar é nutricionalmente equilibrada para alimentar peixe de trófico mais baixo. Em algumas modalidades, o produto alimentar é substancialmente livre de recursos derivados de aquáticos, como proteínas e/ou óleos derivados de aquáticos.

[0037] Quando usado aqui, o termo "nutricionalmente equilibrado" significa que o produto alimentar tem uma razão adequada dos componentes selecionados em particular, tais como carboidratos, proteínas e lipídeos, que sustentariam efetivamente o crescimento do peixe de trófico mais baixo relevante. O técnico no assunto seria facilmente capaz de determinar as quantidades e proporções dos vários componentes nutricionais necessários para uma dada espécie de peixe com base nos ensinamentos dos exemplos aqui e no conhecimento geral na área.

[0038] O termo "recurso aquático" deve ser entendido como incluindo elementos, produtos, composições ou recursos derivados de um ecossistema ou ambiente aquático, incluindo cepas, espécies, populações e estoques derivados de um ecossistema ou ambiente aquático, incluindo recursos relativos a peixes, crustáceos ou outros animais aquáticos, como fontes de proteínas derivadas de animais aquáticos, incluindo peixes de "lixo" ou peixes "ásperos", farinha de peixe, farinha de lula ou farinha de krill e fontes de lipídeos derivadas de animais aquáticos, incluindo óleo de peixe, óleo de lula ou óleo de krill, como seria compreendido por uma pessoa técnica no assunto. Peixe "lixo" ou "áspero" se refere a peixes considerados de pouca utilidade ou valor como alimento, portanto, geralmente são descartados.

[0039] Termos como "baixa qualidade" ou "valor nutricional inferior", quando usados na presente invenção com referência a ingredientes nutricionais, se referem a ingredientes como fontes nutricionais derivadas de plantas, em particular, fontes de proteínas derivadas de plantas, que são geralmente menos nutritivas ou menos aceitáveis para peixes do que recursos derivados de aquáticos. O consumo de alimentos de baixa qualidade ou de valor nutricional inferior resulta em redução da taxa de crescimento quando baseado na quantidade consumida. O termo ingredientes nutricionais "desagradáveis" se refere a ingredientes que são menos atrativos ou desagradáveis aos peixes. A presença de ingredientes desagradáveis na alimentação dos peixes pode resultar em menos consumo de comida pelos peixes e, portanto, a taxa de crescimento é baixa. Exemplos de ingredientes de baixa qualidade ou de valor nutricional inferior incluem fontes de proteína derivadas de plantas, como farinha de soja, farinha de tremoço (kernel) e farinha de glúten.

2. Métodos da invenção

[0040] A presente invenção se refere a métodos de alimentação ou criação de peixe de baixo trófico em condições de aquicultura. Exemplos não limitativos de peixes de baixo trófico incluem ciclídeos tilapiína; espécies de bagre, como basa, tra e pangasius; e espécies de carpas; embora se acredite que a invenção seja aplicável a qualquer peixe de baixo trópico e, em particular, aqueles que são criados comercialmente. De preferência, os peixes são da tribo dos ciclídeos tilapiína e incluem peixes dos gêneros Oreochromis, Sarotherodon e Tilapia, incluindo cepas GIFT (Genetically Improved Farmed Tilapia). Um determinado peixe é a tilápia do Nilo, também conhecida como Oreochromis niloticus. Em particular, uma variedade de Oreochromis niloticus é a tilápia do Nilo de cepa GIFT.

[0041] A biomassa seca compreendendo uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias utilizadas nos métodos aqui descritos, é de preferência preparada a partir de uma população mista ou heterogênea de microrganismos sob condições controladas onde o crescimento de microalgas e bactérias é encorajado. O crescimento bacteriano é estimulado pela adição de uma fonte de carbono que é utilizada pelas bactérias. Isso resulta em uma biomassa microbiana mista contendo uma quantidade significativa de biomassa derivada de bactérias, por exemplo, de cerca de 1% p/p a cerca de 50% p/p; de cerca de 5% p/p a cerca de 40% p/p; ou de 5% p/p a cerca de 25% p/p.

[0042] De preferência, a população mista de microrganismos compreende microalgas e bactérias em que a bactéria está presente em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 25% p/p em uma base de matéria seca e as microalgas estão presentes em uma quantidade de cerca de 10 % p/p a cerca de 80% p/p com base na matéria seca. De preferência, a razão de peso seco de bactérias para microalgas está entre cerca de 20:1 a cerca de 0,4:1. Com mais preferência, a bactéria está presente na biomassa microbiana em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 10% p/p com base na matéria seca. De preferência, a biomassa microbiana mista compreende um teor mínimo de bactérias de 5% p/p da biomassa seca.

[0043] A biomassa microbiana mista e processos para a sua preparação são descritos no documento WO 2009/132392 A1. Esta biomassa microbiana é adequadamente seca antes da incorporação em um aditivo alimentar. Um exemplo de biomassa microbiana mista seca está disponível comercialmente sob o nome de NovacqTM.

[0044] O presente inventor demonstrou que a inclusão da biomassa microbiana mista seca no produto alimentar alimentada a peixes de trófico mais baixo levou a um ganho de peso significativo nos peixes. Os resultados demonstrados aqui mostram que a melhora média de crescimento em relação à dieta de controle sem biomassa foi de 7,8%, 23,6% e 34,6% quando incluída em 2,5, 5 e 10%, respectivamente. Consequentemente, a ingestão diária de ração aumentou com a biomassa inclusão e refletiu de perto a tendência de crescimento. A ingestão de ração em quantidade absoluta e específica para o peso corporal dos peixes foi significativamente maior na dieta contendo 10% p/p de biomassa do que na dieta de controle correspondente.

[0045] A biomassa microbiana mista está, de preferência, compreendida em um produto alimentar, como um pó, grânulos ou péletes. Em uma modalidade preferida, o produto alimentar está na forma de péletes, por exemplo, péletes extrudidos. De preferência, a biomassa microbiana mista é incluída em um produto alimentar em níveis de cerca de 5% p/p a cerca de 15% p/p ou de cerca de 5% p/p a cerca de 10% p/p. Em algumas modalidades, a biomassa microbiana mista seca pode ser incluída em um nível de aproximadamente 5% p/p ou aproximadamente 10% p/p. De preferência, o produto alimentar também compreende um ou mais ingredientes nutricionais adicionais, de preferência, selecionados de fontes de proteína, fontes de carboidratos e fontes de lipídeos. De preferência, o produto alimentar é nutricionalmente equilibrado.

[0046] Nos métodos da invenção, será apreciado que os peixes devem ser fornecidos com produto alimentar suficiente para permitir que eles sustentem o crescimento. Em algumas modalidades preferidas, os peixes podem se alimentar até a saciedade. O técnico no assunto será prontamente capaz de determinar a quantidade de alimento necessária dependendo da composição de nutrientes do produto alimentar e das espécies e tamanho dos peixes com base no conhecimento geral no campo da aquicultura e no ensino dos Exemplos aqui.

[0047] Tendo em vista sua capacidade de atuar como um atrator ou estimulante alimentar em peixes, a presente invenção também fornece um método para atrair um animal aquático, como um peixe, que compreende o uso de uma isca que compreende biomassa microbiana mista seca. Também é fornecido o uso de biomassa microbiana mista seca como isca de pesca.

[0048] A presente invenção também fornece uma isca de pesca que compreende biomassa microbiana mista seca. A isca de pesca pode ser usada para atrair um animal aquático, como um peixe, um molusco ou um crustáceo. Em algumas modalidades, o peixe é um peixe de alto trófico ou um peixe de baixo trófico. Dependendo da espécie de animal aquático visado pela isca de pesca, a isca de pesca pode ainda incluir outros ingredientes de isca selecionados de, por exemplo, ingredientes de isca naturais, como minhocas; sanguessugas;

larvas; vermes; lagartas; rãs; farinha de peixe; peixes, como isca de peixe, salmão-cão ou vairão; rãs; camarão; e insetos como gafanhotos ou formigas. A isca da invenção pode também incluir qualquer atrativo conhecido nos campos da pesca comercial ou pesca com anzol recreativa, como queijo, pão e semelhantes.

3. Materiais da invenção

[0049] A biomassa microbiana mista para uso nos métodos da invenção é preparada a partir de uma população mista de microrganismos sob condições controladas onde o crescimento de microalgas e bactérias é encorajado. O crescimento bacteriano é estimulado pela adição de uma fonte de carbono que é utilizada pelas bactérias. Isso resulta em uma biomassa microbiana mista contendo uma quantidade significativa de biomassa derivada de bactérias. A biomassa compreendendo uma população mista de microrganismos incluindo microalgas e bactérias, e os processos para sua produção são revelados no documento PCT/AU2009/000539, publicado em 5 de novembro de 2009 como WO 2009/132392 A1 (Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation); e no documento PCT/AU2014/000419, publicado em 16 de outubro de 2014 como WO 2014/165936 A1 (Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation), os conteúdos de cada um estão incluídos na presente invenção em sua totalidade. A fonte de microrganismos pode ocorrer naturalmente na água usada no sistema de cultura para produzir a biomassa microbiana e pode incluir água do mar bruta não filtrada; águas residuais de tanques de aquicultura; ou água reciclada de uma cultura anterior. Além de bactérias e microalgas, a biomassa misturada utilizada nesta invenção pode incluir ainda leveduras, fungos e/ou protistas.

[0050] O processo de produção da biomassa microbiana mista geralmente compreende: a) fornecer uma população mista de microrganismos que compreende microalgas e bactérias; de preferência, a bactéria está presente em uma quantidade de cerca de 5% em peso a cerca de 25% em peso com base na matéria seca e as microalgas estão presentes em uma quantidade de cerca de 10% em peso a cerca de 80% em peso com base na matéria seca; b) adicionar uma fonte de carbono à população mista de organismos; c) adicionar uma fonte de nitrogênio à população mista de organismos; d) cultivar a população mista de microrganismos sob condições adequadas para o crescimento de ambas as microalgas e bactérias para formar uma biomassa microbiana; e e) colher a biomassa microbiana.

[0051] Os processos para cultura, colheita e secagem da biomassa microbiana mista são descritos nos documentos WO 2014/165936 A1 e WO 2009/132392 A1. Em algumas modalidades, a fonte de carbono é de preferência derivada de resíduos, material agrícola de baixo valor, alto volume, e resíduos agrícolas. De preferência, a fonte de carbono é gerada localmente. O material agrícola de baixo valor pode incluir produtos, subprodutos ou correntes de resíduos do processamento da cana-de-açúcar, como a lama filtrada, a parte superior da cana, o melaço ou o bagaço. Outras fontes incluem produtos, subprodutos ou correntes de resíduos do processamento de arroz, trigo, triticale, milho, sorgo, tapioca, sementes oleaginosas (incluindo farinha de canola e cascas de tremoço) e pó de elevador de instalações de manuseio de grãos.

[0052] A biomassa microbiana mista inclui uma quantidade significativa de biomassa derivada de bactérias, por exemplo, de cerca de 1% p/p a cerca de 50% p/p; de cerca de 5% p/p a cerca de 40% p/p; ou de 5% p/p a cerca de 25% p/p. Com mais preferência, a bactéria está presente na biomassa microbiana em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 10% p/p com base na matéria seca. De preferência, a biomassa microbiana mista compreende um teor mínimo de bactérias de 5% p/p da biomassa seca.

[0053] Em algumas modalidades, a população mista de microrganismos compreende mais de 50% p/p de uma população mista de bactérias; por exemplo mais de 60% p/p; mais de 70% p/p; ou mais de 80% p/p ou 85% p/p de uma população mista de bactérias.

[0054] Em algumas modalidades, a microalga está presente na biomassa microbiana mista em uma quantidade de cerca de 0,1% p/p a cerca de 50% p/p; de cerca de 0,1% p/p a cerca de 40% p/p; de cerca de 0,1% p/p a cerca de 30% p/p; de cerca de 0,1% p/p a cerca de 25% p/p; de cerca de 0,1% p/p a cerca de 20% p/p; de cerca de 0,1% p/p a cerca de 15% p/p; de cerca de 0,1% p/p a cerca de 10% p/p; ou de cerca de 0,1% p/p a cerca de 5% p/p com base na matéria seca. Em algumas modalidades, a biomassa compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias, em que a bactéria está presente em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 20% p/p com base na matéria seca e as microalgas estão presentes em uma quantidade de cerca de 10% p/p a cerca de 80% p/p com base na matéria seca.

[0055] Em uma modalidade preferida, a biomassa compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias, em que a bactéria está presente em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 20% p/p ou cerca de 25% p/p em uma base de matéria seca e as microalgas estão presentes em uma quantidade de cerca de 10% p/p a cerca de 80% p/p em uma base de matéria seca. Em algumas modalidades, a bactéria está presente em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 20% p/p, ou cerca de 5% p/p a cerca de 10% p/p. De preferência, a população mista de microrganismos compreende microalgas e bactérias em que a bactéria está presente em uma quantidade de cerca de 5% p/p a cerca de 25% p/p em uma base de matéria seca e as microalgas estão presentes em uma quantidade de cerca de 10 % p/p a cerca de 80% p/p com base na matéria seca. De preferência, a razão de peso seco de bactérias para microalgas está entre cerca de 20:1 a cerca de 0,4:1.

[0056] A determinação da composição da biomassa microbiana misturada está bem dentro do escopo e do conhecimento do técnico no assunto. A quantificação do teor de microalgas pode ser baseada no teor de clorofila a da biomassa microbiana; e a quantificação da bactéria pode ser baseada no teor de ácido murâmico usando métodos convencionais conhecidos na técnica.

[0057] A biomassa colhida é de preferência seca para formar uma biomassa microbiana mista seca. A biomassa pode ser seca usando qualquer meio adequado conhecido na técnica, entretanto a secagem rápida sob um alto fluxo de ar a temperatura moderada, tal como de 40 a 80 ºC, por exemplo aproximadamente 40 ºC, é preferida. De preferência, o produto seco contém menos de 10% em peso de umidade.

[0058] Embora possa ser usada como alimento na sua forma seca sem processamento adicional ou adição de outros ingredientes, para os fins desta invenção, a biomassa microbiana misturada seca é vantajosamente combinada com ingredientes nutricionais adicionais para formar um produto alimentar.

[0059] Em algumas modalidades preferidas, o produto alimentar compreende: biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias; e um ou mais ingredientes nutricionais adicionais.

[0060] Nas modalidades preferidas, a biomassa microbiana mista compreende de cerca de 2% a cerca de 25% em peso do produto alimentar. De preferência, a biomassa compreende cerca de 5% em peso, ou mais, do produto alimentar. Em algumas modalidades, a biomassa compreende 2% a 15%; 2% a 15%; 5% a 25%; 5% a 20%; 5% a 15%; ou 5% a 10% em peso. O produto alimentar inclui adequadamente ingredientes nutricionais selecionados a partir de fontes de carboidratos, fontes de proteínas e fontes de lipídeos. De preferência, o produto alimentar é nutricionalmente equilibrado. De preferência, os ingredientes nutricionais adicionais são selecionados de modo que o produto alimentar seja nutricionalmente equilibrado para peixes de trófico mais baixo, como um ciclídeo tilapiína.

[0061] Em algumas modalidades, o produto alimentar compreende de cerca de 30% a cerca de 40% de proteínas; de cerca de 45% a cerca de 55% de carboidratos; e de cerca de 4% a cerca de 6% de lipídeos.

[0062] As fontes nutricionais adequadas são bem conhecidas nos campos da nutrição de peixes e da aquicultura. As fontes de proteína incluem, mas não estão limitadas a, fontes aquáticas, tais como peixe lixo ou peixes ásperos, farinha de krill, farinha de lula e farinha de peixe e misturas dos mesmos. Fontes de proteína derivadas de recursos não aquáticos incluem, mas não estão limitadas a, farinha de soja, farinha de ave, farinha de tremoço (kernel) e farinha de glúten e misturas dos mesmos. Em algumas modalidades, a fonte de proteína é derivada de recursos não aquáticos.

[0063] Fontes de carboidratos adequadas incluem, mas não estão limitadas a, farinha de trigo, farelo de arroz, tapioca, farinha de arroz, farinha de maisena ou de milho ou misturas dos mesmos.

[0064] Fontes de lipídeos adequadas incluem, mas não estão limitadas a, lipídeos derivados de água, tais como óleo de peixe, óleo de krill ou óleo de lula, ou misturas dos mesmos ou lipídeos não aquáticos. Os lipídeos não aquáticos incluem, mas não estão limitados a, lipídeos vegetais, como óleo vegetal, óleo de canola (semente de colza), óleo de linhaça, óleo de semente de cânhamo, óleo de soja, óleo de semente de abóbora ou misturas dos mesmos.

[0065] Em algumas modalidades, o produto alimentar pode ser substancialmente livre de um recurso aquático, em que os recursos aquáticos podem ser uma fonte de proteína derivada de animal aquático, como peixe lixo, farinha de peixe, farinha de lula ou farinha de krill; ou uma fonte de lipídeos, como óleo de peixe de krill ou óleo de lula.

[0066] O produto alimentar pode compreender ainda ingredientes, tais como um agente de ligação, tais como glúten, alginatos ou amido; uma mistura de vitaminas apropriada para as espécies aquáticas pretendidas; uma mistura de minerais apropriada para as espécies aquáticas pretendidas; e outros suplementos nutricionais, farmacêuticos ou de crescimento. A seleção de ingredientes adicionais adequados e as quantidades a serem incluídas em um ingrediente alimentar estarão bem dentro do escopo de conhecimento do técnico no assunto. O técnico no assunto compreenderá que os ingredientes não devem ser tóxicos para os peixes nas quantidades presentes.

[0067] Em uma modalidade, o produto alimentar compreende biomassa microbiana mista seca; uma ou mais fontes de proteína; uma ou mais fontes de carboidratos; e uma ou mais fontes de lipídeos; por exemplo; biomassa microbiana mista seca, farelo de soja, farinha de peixe, farinha de trigo, glúten de trigo, óleo de peixe e óleo de soja. Além das fontes de carboidratos, proteínas e lipídeos, o produto alimentar também pode compreender componentes nutricionais adicionais selecionados a partir de fontes minerais, como difosfato de cálcio (fonte de cálcio) e aminoácidos, como L- lisina ou DL-metionina. O produto alimentar também pode incluir micronutrientes na forma de minerais e/ou vitaminas.

[0068] Os ingredientes do produto alimentar são, de preferência, combinados para fornecer uma composição uniforme. Se necessário, a mistura homogênea pode ser processada posteriormente. O produto alimentar pode estar em qualquer formato adequado para a alimentação de peixes em um ambiente de aquicultura. Convenientemente, o produto alimentar está na forma de uma pasta, pó, grânulo, bolo ou pélete. Em uma modalidade preferida, o produto alimentar está na forma de péletes e, de preferência, é um produto alimentar peletizado nutricionalmente equilibrado. Os métodos de preparação de péletes, tais como péletes extrudados, são bem conhecidos na técnica e são descritos nos exemplos aqui e nos documentos WO 2009/132392 A1 e WO 2014/165936 A1.

[0069] Os processos de preparação de produto alimentar para peixes são bem conhecidos na técnica da aquicultura. Normalmente, os ingredientes necessários são selecionados e combinados nas razões exigidas. De preferência, os ingredientes secos são moídos e combinados com mistura para fornecer uma composição uniforme. Normalmente, os ingredientes são combinados por mistura, por exemplo, usando um misturador planetário, para fornecer uma mistura homogênea. Os ingredientes secos podem ser combinados com ingredientes líquidos, tais como ingredientes lipídicos, antes da extrusão da mistura resultante. Em algumas modalidades, os ingredientes secos são combinados com água em uma extrusora. A mistura é então extrudida e seca antes de infundir os péletes resultantes com uma fonte de lipídeo, se necessário. O teor de água do pélete pode ser controlado para fornecer um pélete flutuante. A extrusão da mistura através de uma matriz de 2,5 a 3,0 mm, por exemplo, uma matriz de 2,8 mm, fornece péletes de um diâmetro adequado para peixe de trófico mais baixo, como ciclídeos tilapiína. Em algumas modalidades, os péletes são cortados em comprimentos de cerca de 4 mm a cerca de 5 mm, por exemplo, comprimentos de 4,5 mm na face da matriz para produzir um pélete de cerca de 2,5 a cerca de 3,0 mm de diâmetro e cerca de 4 mm a cerca de 5 mm de comprimento. Em algumas modalidades, os péletes medem aproximadamente 2,8 mm por 4,5 mm.

[0070] A fim de que a invenção possa ser facilmente compreendida e colocada em prática, as modalidades preferidas particulares serão agora descritas por meio dos seguintes exemplos não limitativos.

EXEMPLOS Materiais e Métodos Sistema de cultura e população de peixes

[0071] O experimento de crescimento foi conduzido nos laboratórios da sede da WorldFish em Penang, Malásia, usando tilápia do Nilo GIFT (Genetically Improved Farmed Tilapia), Oreochromis niloticus. Um aquário (tanque) transparente de 54 x 10L no total em um sistema de água doce recirculado foi usado. O fluxo de água foi regulado a 2 trocas por hora e recirculado a 95% através de uma série de meios de filtro e escumadores de proteína. Água da chuva armazenada foi usada como água de reposição. A qualidade da água ao longo de todo o experimento foi mantida da seguinte forma: média ± D.P. da temperatura da água = 27,1 ± 0,8 ºC; D.O. 7,0 ± 1,1 mg L-1; pH = 6,8 ± 0,3; NH3 <0,5 ppm; NO2 <1,0 ppm; NO3 <80 ppm. Um total de 1500 alevinos de peixes foram obtidos do centro de reprodução Worldfish GIFT em Jitra, Malásia. O estoque foi classificado para incluir apenas peixes dentro de um desvio padrão da média a ser usada para o experimento. Dez (10) peixes por tanque (peso médio 11,43 ± 1,75 g ± DP) no total foram alocados aleatoriamente. Três amostras de 10 peixes iniciais agrupados foram retiradas para análises de composição subsequentes. Tratamentos dietéticos e composição

[0072] Oito dietas experimentais isonitrogênicas e isoenergéticas no total foram extrusadas.

Cada um dos ingredientes foi moído a <750 µm antes do lote, a composição química do ingrediente pode ser encontrada na Tabela 1. 10 kg de cada uma das dietas experimentais no total foram misturados completamente (sem o componente de óleo) usando um misturador planetário vertical (BakerMix, Artarmon, NSW, Austrália). As dietas foram então extrudadas através de uma extrusora de dupla-rosca de 24 mm em escala de laboratório (MPF24:25, Baker Perkins, Peterborough, Reino Unido), com parafusos corrotativos entrelaçados.

A extrusora era composta por uma série de parafusos de alimentação (FS - “feed screws”) entrelaçados, pás de encaminhamento (FP - “forwarding paddles”) e parafusos de avanço (LS - “lead screws”) dispostos de acordo com diâmetros de barril definidos (D) de modo que a configuração geral da extremidade da unidade fosse 16D de FS, 2D de FP, 1D de FS, 2D de FP, 1D de LS, 1D de FP, 2D de LS para a matriz.

Uma única matriz cilíndrica de 2,8 mm de diâmetro afunilada em um ângulo de 67º com um comprimento de superfície de 3 mm foi usada.

O barril compreendia quatro zonas de temperatura que foram ajustadas em 70, 80, 100 e 110 ºC da unidade até a matriz, respectivamente, e a máquina funcionou a cerca de 160 rpm.

A pasta foi aplicada no barril a uma taxa de cerca de 4,2 a 4,9 kg h-1, e a água foi bombeada peristalticamente (Thermoline, Wetherrill Park, NSW, Austrália) para o barril entre 2,1 e 3,0 L h-1. A adição de água foi variada entre as dietas para produzir alimentos flutuantes de ~ 4,2 mm Ø.

Os péletes foram cortados em comprimentos de 4,5 mm na face da matriz com um cortador de velocidade variável de 2 lâminas.

Os péletes foram então secos a 60 ºC por 24h, após o que cada dieta foi infundida a vácuo com a alocação específica de óleo. Os péletes foram então deixados esfriar antes de serem ensacados e rotulados. Todos os alimentos foram mantidos congelados (-20 ºC), exceto durante a alimentação ou pesagem dos alimentos.

[0073] Os tratamentos dietéticos consistiram em quatro dietas contendo 10% de farinha de peixe com nível incremental de NovacqTM (0, 2,5, 5 e 10%), e quatro dietas com nível decrescente de farinha de peixe (5% e 0%) com e sem 10% de NovacqTM (respectivos controles). NovacqTM foi incorporado substituindo uma quantidade igual de farinha de trigo, enquanto a farinha de peixe foi substituída por farinha de soja e níveis crescentes de metionina, lisina e óleo de peixe, com uma diminuição simultânea no óleo de soja para manter o lipídeo total igual (Tabela 2). Uma dieta comercial de referência também foi usada no experimento. A composição química medida confirmou que todas as dietas apresentaram teor proteico e energético semelhante (Tabela 2). Tabela 1. Composição da dieta comercial e ingredientes utilizados nas rações experimentais, com base na matéria seca. Dieta Farelo Glúten Composição Farinha Farinha Farinha comercial NovacqTM de de (%) de peixe de soja de trigo (CD) trigo trigo Matéria seca 83,3 90,0 90,0 93,0 87,6 89,2 90,2 Proteína total 34,8 71,9 51,6 3,8 12,2 17,4 83,1 Lipídeo 3,3 11,7 2,3 0,4 1,9 4,6 3,6 total

Energia bruta

(kJ/g) 19,0 21,8 19,9 9,10 18,7 19,3 23,6

Cinza 10,0 12,6 7,0 64,6 0,6 6,8 0,8

Carboi-

drato 52,8 3,7 39,1 31,3 85,3 71,3 12,5

Tabela 2. Formulações dietéticas e composição de alimentos com base na matéria seca.

Ingredi- 10FM- 10FM- 10FM- 10FM- 5FM- 5FM- 0FM- 0FM- ente 0NQ 2,5NQ 5NQ 10NQ 0NQ 10NQ 0NQ 10NQ (mg kg-1)

Farinha de 100 100 100 100 50 50 0 0 Peixe

Farinha de 300 320 320 320 380 390 450 460 soja

Farelo de 200 200 200 200 200 200 200 200 trigo

NovacqTM 0 25 50 100 0 100 0 100

Farinha de 271 224 199 149 235 125 210 100 trigo

Glúten de 50 50 50 50 50 50 50 50 trigo

Óleo de 10 10 10 10 15 15 20 20 peixe

Óleo de 30 32 32 32 29 29 27 27 soja

CaHPO4 20 20 20 20 20 20 20 20

L-Lisina 1 1 1 1 2 2 3 3

DL- 5 5 5 5 6 6 7 7 metionina Micronu- 13 13 13 13 13 13 13 13 trientes* Composição (%) Matéria 93,7 94,1 94,4 95,1 94,7 94,2 94,4 94,8 seca Proteína total 35,6 35,4 34,6 34,3 35,8 35,6 34,9 35,1 Lipídeo 4,7 5,0 5,0 4,7 5,2 5,0 4,9 5,0 total Energia 20,6 19,8 19,7 18,8 19,8 20,3 18,9 20,1 bruta (KJ g-1) Cinza 6,8 8,4 10,0 13,3 9,6 6,6 13,2 6,3 Carboidra- 53,0 51,3 50,4 47,7 49,4 52,9 47,0 53,5 to

[0074] Farinha e óleo de peixe: Fonte sul-americana, fornecida por Ridley, Narangba, QLD, Austrália. Farinha de soja: KEWPIE Stock feeds, Kingaroy, QLD, Austrália; Farinha de trigo e glúten de trigo: Manildra, Auburn, NSW, Austrália. Farelo de trigo: Allora Grain and Milling, Allora, QLD, Austrália; Novacq: Produção da lagoa CSIRO, comercial de confiança.

[0075] *micronutrientes (mg kg-1 da dieta): Colina (cloreto de colina a 60%), 5; Vitamina C (Stay-C), 2; vitamina de peixes e premix mineral, 61; 1O teor da pré-mistura de vitaminas e minerais na ração final (UI ou g por kg de ração) foi: Vitamina A, 15 KIU; Vitamina D3, 1,5 KIU; Vitamina E, 0,1 g; Vitamina K3, 0,01 g; Vitamina

B1, 0,025 g; Vitamina B2, 0,03 g; Vitamina B3, 0,15 g; Vitamina B5, 0,05 g; Vitamina B6, 0,01 g; Vitamina B9, 5 mg; Vitamina B12, 0,03 mg; Biotina, 1 mg; vitamina C, 0,45g; Cloreto de colina, 1 g; Inositol, 0,35 g; Etoxiquina, 0,125 g; Cobre, 0,015 g; Ferro ferroso, 0,04 g; Magnésio, 0,1 g; Manganês, 0,09 g; Zinco, 0,15 g. Medidas de alimentação e crescimento

[0076] Os peixes foram alimentados manualmente duas vezes ao dia até a saciedade. Cada tanque foi alimentado com um mínimo de três eventos de alimentação separados ao longo de 120 minutos pela manhã e 120 minutos à tarde, durante os quais os peixes foram alimentados até que os péletes não consumidos fossem observados por 10 minutos na ocasião final, indicando que os peixes atingiram a saciedade. Os péletes não consumidos foram coletados em uma tela de 300 µm diariamente, e secos em uma folha de alumínio pré-pesada até peso seco constante (4 horas a 105 ºC). A alimentação diária aplicada foi obtida a partir dos pesos diferenciais antes e depois da alimentação para recipientes de ração específicos do tanque e expressa em matéria seca. A ingestão de ração foi calculada diariamente como a diferença entre a matéria seca aplicada e a matéria seca coletada. A ingestão de ração (FI - “feed intake”) foi expressa em gramas de matéria seca de ração por peixe por dia, contabilizando qualquer mortalidade diária, bem como expresso como ingestão de ração específica (SFI - “specific feed intake”), em porcentagem do peso corporal (ou seja, SFI = FI/BWe x 100). O peso corporal médio esperado (Bwee - “expected body weight”) do peixe a cada dia foi calculado com base nos pesos dos peixes quinzenais e nas taxas de crescimento linear medidas obtidas em todos os tratamentos: ã çã / / ã á çã = / 42 á !"#

[0077] Os peixes foram pesados individualmente nos dias 0 e 42 e os tanques foram pesados nos dias 14 e 28 para minimizar o estresse do manuseio dos peixes. Os peixes foram anestesiados usando óleo de cravo antes da pesagem e recuperados no seu tanque alocado após a pesagem. Este procedimento foi realizado em cada dia de verificação de peso. Qualquer mortalidade observada apenas na primeira semana foi substituída por um peixe equivalente com o mesmo peso do tanque de estoque.

[0078] O crescimento dos peixes foi linear ao longo do período experimental para todos os tratamentos (em média, peso = 1,76 x Dias + 7,49 g). Portanto, o crescimento dos peixes foi expresso como ganho de peso ou ganho de peso diário nas figuras. O crescimento também foi expresso em diferença percentual em relação à dieta de controle.

[0079] A taxa de conversão alimentar foi responsável pelas mortalidades, e também foi expressa corrigida para a matéria seca da alimentação, como segue: $ % & ã ' ( ) ã ' çã = ℎ ' %. ã ' ( ) % = ℎ ' %.

[0080] As eficiências de retenção de nutrientes foram calculadas a partir do consumo de ração e da composição da carcaça para proteína e energia da seguinte forma: ,- % ê % çã ),; % 1 =

- ' − é % ' 100 45 89 ã é Análises da composição química

[0081] Carcaças de peixes foram congeladas a -20 ºC até a análise. O teor de matéria seca foi determinado por análise gravimétrica após secagem a 105 ºC por 4h. As amostras foram então moídas, enviadas aos laboratórios analíticos da CSIRO e analisadas quanto à composição química. O teor de cinzas foi determinado com base na mudança de massa após a combustão em um forno mufla a 550 ºC por 6h. O teor total de lipídeos foi determinado gravimetricamente após extração em 2:1:0,4 de clorofórmio:metanol:água, usando uma modificação do método proposto por Folch et al. (1957). A medição do teor de nitrogênio total foi determinada pelo método Dumas usando um Analisador Elementar Flash 2100 (Thermo Fisher Scientific., Waltham, MA, EUA) e usada para calcular o teor de proteína da amostra com base em N x 6,25. A energia bruta foi determinada por calorimetria de bomba isoperibólica em um calorímetro de bomba de oxigênio Parr 6200 com uma bomba 1108CL para ingredientes e dietas e uma bomba semimicro 1109A para fezes (Par Instrument Company, Moline, IL, EUA). O carboidrato foi calculado por diferença. Análise estatística

[0082] As diferenças nos índices de desempenho da cultura e na composição da carcaça foram testadas por ANOVAs de uma via seguida de comparações post-hoc usando testes de Tukey- Kramer. ANOVAs de medidas repetidas foram usadas para testar diferenças na ingestão diária de ração e no consumo específico de ração entre os tratamentos durante toda a duração do experimento e nos primeiros 7 dias. Diferenças significativas no ganho de peso diário com inclusões de farinha de peixe e NovacqTM, e a interação, foram testadas por uma ANOVA de duas vias. Antes de todas as análises, os pressupostos da ANOVA de normalidade dos resíduos e homogeneidade das variâncias foram testados pelos testes de Shapiro-Wilk e Levene, respectivamente. Os dados de sobrevivência foram transformados em raiz quadrada de arco seno e dados de log10 ou raiz quadrada transformada quando necessário para satisfazer o teste de Levene para homogeneidade de variância (P.0,05). Todas as análises estatísticas foram realizadas no NCSS 11. Resultados Efeito da taxa de inclusão de NovacqTM em uma dieta prática de tilápia

[0083] A tilápia cresceu bem em todas as dietas experimentais, com ganhos de peso e sobrevivência > 80%, não diferente de uma dieta comercial de referência (CD) (Tabela 3). A inclusão de NovacqTM aumentou do ganho de peso significativamente (Tabela 3 e Figura 1). A melhora média do crescimento em relação à dieta de controle sem NovacqTM foi de 7,8%, 23,6% e 34,6% quando incluídos em 2,5, 5 e 10%, respectivamente (Tabela 3).

[0084] O ingestão diária de ração aumentou com inclusão de NovacqTM e espelhou de perto a tendência de crescimento (Figura 1). A ingestão de ração em quantidade absoluta (FI) e específica para peso corporal dos peixes (SFI) foi significativamente maior na dieta contendo 10% de NovacqTM do que a dieta de controle (Tabela 3). A tendência de maior ingestão específica com inclusão de NovacqTM foi alcançada ao longo do experimento (Figura 2).

[0085] As taxas de conversão alimentar, conforme alimentadas e expressas em DM de ração, não variaram significativamente com inclusão de NovacqTM, e foram significativamente melhores em todas as rações experimentais contendo 10% de FM do que CD de referência (Tabela 3). A eficiência de retenção de proteína e energia não diferiu significativamente entre as dietas (Tabela 3).

[0086] As análises de composição da carcaça não indicaram diferenças significativas entre os peixes, exceto para uma diminuição na proteína para os peixes alimentados com 10FM- 5NQ contra as dietas CD e 10FM-2,5NQ (Tabela 4). Tabela 3. Peso médio inicial, ganho de peso, sobrevivência, ingestão diária de ração, FCR e eficiência de retenção de nutrientes em tilápias alimentadas com uma dieta comercial (CD - “commercial diet”) de referência e dietas práticas com inclusão crescente de NovacqTM após 42 dias (média ± S.E., n=6); As diferenças significativas são marcadas por letras diferentes [ANOVAs de uma via, P<0,05; ANOVA de medidas repetidas para FI e SFI, P<0,05] CD 10FM-0NQ 10FM-2,5NQ 10FM-5NQ 10FM-10NQ PESO INICIAL 11,22 ± 11,26 ± 11,26 ± 11,44 ± 11,30 ± (G) 0,49a 0,16a 0,13a 0,31a 0,11a GANHO DE PESO 69,17 ± 65,43 ± 70,52 ± 80,85 ± 88,09 ± (G) 1,53ab 4,62a 3,25ab 4,07bc 1,47c DIFERENÇA DE 5,72 ± 0 7,77 ± 23,56 ± 34,63 ± CRESCIMENTO. 2,34a 4,96a 6,22ab 2,25b PARA 10FM-0NQ (%) SOBREVIVÊNCIA 80,00 ± 83,33 ± 90,00 ± 93,33 ± 86,67 ± (%) 5,16a 4,94a 3,65a 3,33a 3,33a FI(GDM PEIXE-1 1,74 ± 1,51 ± 1,64 ± 1,87 ± 0,07b 2,11 ±

DIA-1) 0,04ab 0,06a 0,06ab 0,05c

SFI(%BW DIA-1) 5,06 ± 4,50 ± 4,46 ± 4,76 ± 5,27 ±

0,10ac 0,07b 0,06b 0,06ab 0,12c

FCR 1,31 ± 1,05 ± 1,05 ± 1,04 ± 0,02b 1,08 ±

0,02a 0,04b 0,02b 0,02b

FCRDM 1,09 ± 0,99 ± 0,99 ± 0,98 ± 0,02b 1,02 ±

0,01a 0,03b 0,02b 0,02ab

REPROTEÍNA 43,26 ± 45,44± 3,74 45,23± 1,30 45,62± 2,10 44,17± 1,40

3,44

REENERGIA 26,36 ±

1,96 26,97± 3,17 25,44± 1,21 30,55± 1,72 28,14± 1,65

Tabela 4. Composição média da carcaça de tilápia alimentada com dieta comercial (CD) de referência e dietas práticas com inclusão crescente de NovacqTM após 42 dias (média ± S.E., n=6). Dados com base na matéria seca.

As diferenças significativas são marcadas por letras diferentes [ANOVAs de uma via, P<0,05] CD 10FM-0NQ 10FM-2,5NQ 10FM-5NQ 10FM-10NQ

MATÉRIA 28,59 ± 28,82± 2,42 24,98± 0,90 27,81± 3,27 25,27± 0,85

SECA (%) 3,10

PROTEÍNA 59,36 ± 58,03 ± 60,58 ± 0,92b 55,38 ± 58,45 ±

BRUTA (%) 1,18b 0,64ab 0,13a 1,28ab

ENERGIA 24,54 ±

BRUTA 0,48 24,29± 0,32 23,82± 0,56 24,86± 0,18 23,81± 0,47

(KJ/G)

LIPÍDEO 25,48 ± 28,09± 2,77 24,27± 1,40 28,38± 0,25 26,50± 0,35

TOTAL (%) 3,75

CINZA (%) 14,24 ± 12,76± 0,56 14,88± 0,43 13,16± 0,43 14,59± 0,80

1,83

Substituição de farinha de peixe com e sem NovacqTM

[0087] O ganho de peso significativamente menor foi alcançado quando os peixes foram alimentados com rações com 0% de farinha de peixe em comparação com 10% de farinha de peixe (Figura 3). No entanto, a adição de 10% de NovacqTM teve um efeito positivo no ganho de peso geral em todas as inclusões de farinha de peixe (Tabela 5). O crescimento médio em relação ao controle 10FM-0NQ diminuiu 3% e 14,5% quando a farinha de peixe foi reduzida para 5 e 10%, respectivamente. O crescimento médio em relação ao controle 10FM-0NQ aumentou 19,5% e 15,5% com a adição de 10% de NovacqTM quando a farinha de peixe foi reduzida para 5 e 10%, respectivamente (Tabela 5).

[0088] A ingestão de ração em quantidade absoluta (FI) e específica para peso corporal dos peixes (SFI) foi significativamente maior na dieta contendo 10% de NovacqTM do que nas dietas sem (Tabela 5).

[0089] As taxas de conversão alimentar, conforme fornecidas e expressas em DM de ração, tenderam a aumentar com a redução da farinha de peixe, mas não variaram significativamente com inclusão de farinha de peixe e/ou NovacqTM (Tabela 5). A eficiência de retenção de proteína e energia não diferiu significativamente entre as dietas (Tabela 5). As análises de composição da carcaça não indicaram diferenças significativas entre os peixes (Tabela 6). Tabela 5. Peso médio inicial, ganho de peso, sobrevivência, ingestão diária de ração, FCR e eficiência de retenção de nutrientes para tilápia alimentada com 50% e 100% de substituída de farinha de peixe com e sem 10% de NovacqTM após 42 dias (média ± S.E., n=6). As diferenças significativas são marcadas por letras diferentes [ANOVAs de uma via, P<0,05; ANOVA de medidas repetidas para FI e SFI, P<0,05].

5FM-0NQ 5FM-10NQ 0FM-0NQ 0FM-10NQ PESO INICIAL (G) 11,45 ± 0,24a 11,71 ± 0,36a 11,87 ± 0,19a 11,43 ± 0,23a GANHO DE PESO (G) 63,43 ± 2,98a 78,15 ± 4,26b 55,94 ± 1,42a 75,59 ± 3,93b DIFERENÇA DE -3,06 ± 4,55a 19,44 ± 6,51b -14,51 ± 2,18a 15,52 ± 6,01b

CRESCIMENTO PARA 10FM-0NQ (%) SOBREVIVÊNCIA (%) 91,67 ± 4,77a 95,00 ± 2,24a 86,67 ± 3,33a 98,33 ± 1,67a FI (GDM PEIXE-1 1,53 ± 0,04a 1,96 ± 0,08b 1,49 ± 0,04a 2,00 ± 0,08b DIA-1) SFI (%BW DIA-1) 4,50 ± 0,08a 5,10 ± 0,08bc 4,83 ± 0,05ab 5,44 ± 0,17c FCR 1,08 ± 0,04a 1,13 ± 0,03a 1,15 ± 0,04a 1,18 ± 0,03a FCRDM 0,99 ± 0,02a 1,02 ± 0,04a 1,06 ± 0,03a 1,09 ± 0,04a REPROTEÍNA 45,02 ± 3,31 40,30± 0,78 44,82± 6,70 36,97± 0,71 REENERGIA 25,59± 3,07 23,50± 1,45 23,53± 4,46 22,79± 1,18 Tabela 6. Composição média da carcaça de tilápia alimentada com 50% e 100% de substituição de farinha de peixe com e sem 10% de NovacqTM após 42 dias (média ± S.E., n=6); Dados com base na matéria seca; Nenhuma diferença significativa foi encontrada [ANOVAs de uma via, P>0,05] 5FM-0NQ 5FM-10NQ 0FM-0NQ 0FM-10NQ MATÉRIA SECA (%) 27,93 ± 1,78 24,11± 0,43 22,48± 0,15 23,92± 0,62 PROTEÍNA BRUTA (%) 57,45 ± 1,68 60,26± 0,78 62,34± 0,59 58,09± 1,79 ENERGIA BRUTA (KJ/G) 23,14 ± 0,51 23,14 ± 0,53 23,93 ± 0,28 24,07 ± 0,11 LIPÍDEO TOTAL (%) 25,13 ± 1,83 26,15± 1,34 28,28± 2,54 26,84± 1,47 CINZA (%) 14,08 ± 1,06 14,58± 0,67 12,48± 0,52 13,76± 0,28

[0090] Os resultados demonstram claramente que há um benefício de crescimento ao incluir biomassa microbiana mista seca em várias taxas de inclusão em dietas práticas de tilápia extrusada; e a biomassa microbiana mista seca melhora o desempenho de crescimento da tilápia em dietas com pouca ou nenhuma farinha de peixe. A biomassa quando incluída em uma quantidade de 10% aumentou significativamente o desempenho de crescimento da tilápia em até 35% em dietas com 10%, 5% e 0% de farinha de peixe. As dietas foram dietas extrudadas, demonstrando que o benefício da biomassa microbiana mista seca não é diminuído quando o tratamento térmico de extrusão é aplicado. Todas as dietas extrudadas contendo a biomassa superaram o desempenho de uma dieta comercial de referência contendo quantidade semelhante de proteína e energia, portanto, os resultados de crescimento obtidos no estudo são comercialmente relevantes. O ganho de peso aumentou em paralelo com o aumento das taxas de inclusão de biomassa microbiana mista, com ganhos de peso de 7,8%, 23,6% e 34,5% em relação a uma dieta de controle isoenergética e isonitrogênica, com inclusão de biomassa microbiana mista seca de 2,5%, 5% e 10%, respectivamente. Embora a resposta do ganho de peso diminua em direção à inclusão mais alta, ela não atingiu um platô de resposta indicando que maiores ganhos de peso podem ser alcançados em taxas de inclusão mais altas na dieta de tilápia. Uma inclusão de 5% maximizou o benefício da biomassa em relação à quantidade necessária nas dietas de tilápia para obter uma resposta.

[0091] Estudos anteriores de substituição de farinha de peixe bem-sucedidos alcançaram ganhos de peso em linha com o controle experimental (ver Furuya et al., 2004; Koch et al. 2016). O inventor descobriu que a substituição total de 10% de farinha de peixe por farinha de soja e o aumento da inclusão de metionina, lisina e óleo de peixe para compensar as deficiências de nutrientes ainda resultou em uma diminuição significativa de cerca de 14,5% no ganho de peso diário. Um nível intermediário de farinha de peixe (5%) não afetou significativamente o ganho de peso. Esses resultados estão de acordo com vários estudos anteriores que mostram que o desempenho do crescimento da tilápia diminui com a substituição da farinha de peixe por proteínas vegetais individuais, possivelmente devido à presença de fatores antinutricionais, principalmente do farelo de soja (Borgeson et al., 2006; Koch et al., 2016). A substituição do farelo de soja por uma mistura complexa de planta processada ou ingrediente de proteína processada resultou em um crescimento superior. A redução no crescimento observada nos presentes estudos em uma dieta com 0% de farinha de peixe não pode estar relacionada a um impacto significativo da remoção da farinha de peixe na ingestão de alimentos (4,8% BW dia-1), FCR (1,06) ou retenção de proteína (45%), indicando que outros mecanismos de ingestão ou digestão de nutrientes estavam desempenhando um papel.

[0092] Os resultados aqui demonstraram que a biomassa microbiana mista seca pode aumentar o ganho de peso da tilápia em dietas com 0% de farinha de peixe em até 35%, resultando em uma melhoria líquida no desempenho da cultura de 15,5% contra o controle de 10% de farinha de peixe. Como tal, o uso da biomassa como aditivo alimentar pode mais do que compensar o impacto negativo da eliminação da farinha de peixe em dietas para tilápia e melhora o valor de sustentabilidade das dietas em países com acesso limitado a ingredientes brutos de qualidade.

[0093] O consumo de ração nas dietas experimentais refletiu as tendências de crescimento alcançadas. A caracterização da palatabilidade dos ingredientes é importante porque, independentemente de sua composição de nutrientes e digestibilidade, pode ter um grande impacto em sua utilidade como alimento. Para um animal demonstrar uma resposta precisa de ingestão de ração, ele deve ter a oportunidade de recusar a ração (Glencross et al., 2007). Nos estudos atuais, a alimentação manual cuidadosa, permitindo tempo e esforço suficientes para alimentar os peixes até a saciedade, foi realizada a fim de coletar alimentos não consumidos de todos os tanques duas vezes ao dia após o evento de alimentação. Para desacoplar o crescimento e a ingestão de ração, a ingestão de matéria seca da ração foi expressa como uma porcentagem do peso corporal diário esperado com base nas taxas de crescimento linear medidas, para levar em conta a variação do peso dos peixes. Os peixes alimentados com a dieta de referência comercial apresentaram uma ingestão de matéria seca relativamente alta em relação às suas taxas de crescimento mais pobres quando comparados às dietas atuais, resultando em taxas de conversão alimentar significativamente mais baixas, possivelmente devido ao uso de ingredientes menos digestíveis. Os peixes alimentados com dietas que incorporam biomassa comeram significativamente mais alimento ao longo do experimento do que seus respectivos peixes alimentados com controle, tanto em termos absolutos, mas também em porcentagem de seu peso corporal, e a resposta estava em uma relação direta com as taxas de inclusão. Uma inclusão de 10% de biomassa microbiana mista seca resultou em um aumento de aproximadamente 33% na ingestão de ração em todos os níveis de inclusão de farinha de peixe, indicando um efeito claro da biomassa microbiana mista seca na palatabilidade da dieta da tilápia, independentemente do teor de farinha de peixe. A farinha de peixe é frequentemente usada como um intensificador de palatabilidade na alimentação dos peixes, mas ficou claro a partir desses estudos que a ingestão de alimentos poderia ser estimulada pela inclusão de biomassa microbiana mista seca além do efeito da farinha de peixe.

[0094] O efeito da biomassa microbiana mista seca como estimulante alimentar foi rápido e foi observado nos primeiros dias de alimentação (Figura 2). Os peixes alimentados com dietas contendo a biomassa frequentemente exibem um comportamento alimentar voraz e maior apetite em comparação com seus homólogos alimentados com dietas de controle (observação). As medições de ingestão de ração, e taxas de conversão alimentar semelhantes e REs medidos nestes estudos, apontam fortemente para a biomassa microbiana mista seca como sendo um estimulante ou atrativo alimentar em tilápias. Isso é surpreendente, pois as propriedades físico- químicas mais comuns dos atrativos e estimulantes alimentares para peixes são não voláteis, de baixo peso molecular, contendo nitrogênio, anfotéricos, solúveis em água, estáveis ao tratamento térmico e de ampla distribuição biológica. Essas propriedades são consistentes com as dos aminoácidos livres e substâncias nitrogenadas relacionadas, como nucleotídeos, nucleosídeos e bases de amônio quaternário (de la Higuera, 2007). A forte estimulação de alimentação de biomassa microbiana mista seca é, portanto, inesperada considerando seu baixo teor de nitrogênio (ou seja, N = 0,6%), possivelmente indicando estimulação de diferentes vias gustativas (Lamb, 2007).

[0095] A revelação de cada patente, pedido de patente e publicação citada na presente invenção é aqui incorporada por referência em sua totalidade.

[0096] A citação de qualquer referência aqui não deve ser interpretada como uma admissão de que tal referência está disponível como "Técnica Anterior" para o presente pedido.

[0097] Ao longo do relatório descritivo, o objetivo tem sido descrever as modalidades preferidas da invenção sem limitar a invenção a qualquer modalidade ou coleção específica de características. Os técnicos no assunto, portanto, apreciarão que, à luz da presente revelação, várias modificações e mudanças podem ser feitas nas modalidades particulares exemplificadas sem se afastar do escopo da presente invenção. Todas essas modificações e mudanças devem ser incluídas no escopo das reivindicações anexas.

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[00116] Shiau, S. Y., Kwok, C. C., Hwang, J. Y., Chen, C. M. and Lee, S. L. (1989). Replacement of Fishmeal with Soybean Meal in Male Tilapia (Oreochromis niloticusxO. aureus) Fingerling Diets at a Suboptimal Protein Level. Journal of the World Aquaculture Society 20, 230-235.

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[00118] Suárez, J. A., Gaxiola, G., Mendoza, R., Cadavid, S., Garcia, G., Alanis, G., Suárez, A., Faillace, J. and Cuzon, G. (2009). Substitution of fish meal with plant protein sources and energy budget for white shrimp Litopenaeus vannamei (Boone, 1931). Aquaculture 289, 118-

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[00119] Sukmanomon, S., Kamonrat, W., Poompuang, S., Nguyen, T. T. T., Bartley, D. M., May, B. and Na-Nakorn, U. (2012). Genetic changes, intra- and inter-specific introgression in farmed Nile tilapia (Oreochromis niloticus) in Thailand. Aquaculture 324-325, 44-54.

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Aquaculture 464, 296-302.

Claims (14)

REIVINDICAÇÕES

1. Método de alimentação de peixes de baixo trófico, caracterizado pelo fato de que compreende alimentar os peixes com um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

2. Método de criação de um peixe de baixo trófico, caracterizado pelo fato de que compreende uma etapa de alimentar os peixes com um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

3. Uso de um produto alimentar caracterizado pelo fato de que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias, em uma quantidade eficaz para fornecer nutrição a um peixe de baixo trófico.

4. Uso de biomassa seca caracterizado pelo fato de que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias, como um atrator ou estimulante alimentar para peixes de trófico mais baixo.

5. Método para melhorar a atratividade e/ou palatabilidade de um produto alimentar para peixes de trófico mais baixo, caracterizado pelo fato de que compreende alimentar o peixe com o produto alimentar na presença de uma biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

6. Método para estimular um peixe de trófico mais baixo a aumentar sua ingestão de alimentos, caracterizado pelo fato de que compreende fornecer ao peixe um produto alimentar que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

7. Método para aumentar a taxa de crescimento ou a ingestão de alimento de um peixe de trófico mais baixo, caracterizado pelo fato de que compreende fornecer ao peixe um produto alimentar, o dito produto alimentar compreendendo biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

8. Método ou uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que o produto alimentar compreende adicionalmente um ou mais ingredientes nutricionais.

9. Método ou uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que o produto alimentar compreende a biomassa seca em uma quantidade de 5% p/p a cerca de 15% p/p.

10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 5, 6, 8 ou 9, ou uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 3, 4, 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que o peixe de trófico mais baixo é um ciclídeo tilapiína.

11. Método ou uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o ciclídeo tilapiína é tilápia do Nilo (Oerochromis niloticus).

12. Método de pesca usando isca, caracterizado pelo fato de que a isca compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.

13. Uso de biomassa seca, caracterizado pelo fato de que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias, como isca para um animal aquático.

14. Isca caracterizada pelo fato de que compreende biomassa seca que compreende uma população mista de microrganismos, incluindo microalgas e bactérias.