BR112020018931A2 - HIGH PURITY STEVIOL GLYCOSIDES - Google Patents
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Abstract
são descritos métodos para preparar glicosídeos de esteviol altamente purificados, em particular esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo a, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo d, rubusosídeo, esteviolbiosídeo a, esteviolbiosídeo b, rebaudiosídeo b, esteviosídeo, rebaudiosídeo g, esteviosídeo a, esteviosídeo b, esteviosídeo c, rebaudiosídeo a, rebaudiosídeo e, rebaudiosídeo e2, rebaudiosídeo e4, rebaudiosídeo e6, rebaudiosídeo e3, rebaudiosídeo d, rebaudiosídeo i, rebaudiosídeo am, rebaudiosídeo d7, rebaudiosídeo m, rebaudiosídeo m4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou svg7. os métodos incluem utilizar preparados enzimáticos e micro-organismos recombinantes para converter várias composições iniciais em glicosídeos de esteviol alvo. os glicosídeos de esteviol altamente purificados são úteis como edulcorantes não calóricos, realçadores de sabor, realçadores de doçura e supressores de espuma em composições comestíveis e mastigáveis, tais como quaisquer bebidas, confeitos, produtos panificados, cookies e chicletes.methods for preparing highly purified steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside a, steviolbioside, steviolbioside d, rubusoside, steviolbioside a, steviolbioside b, rebaudioside b, stevioside, rebaudioside g, stevioside a, stevioside a, stevioside a, stevioside a, stevioside a, stevioside a , rebaudioside e, rebaudioside e4, rebaudioside e6, rebaudioside e3, rebaudioside d, rebaudioside i, rebaudioside am, rebaudioside d7, rebaudioside m, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1a, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1q, rebaudioside 1q, rebaudioside 1q, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2 f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2 and 2, rebaudioside methods include using enzyme preparations and recombinant microorganisms to convert various starting compositions to target steviol glycosides. highly purified steviol glycosides are useful as non-caloric sweeteners, flavor enhancers, sweetening enhancers and foam suppressants in edible and chewable compositions, such as any drinks, confectionery, baked goods, cookies and chewing gum.
Description
[001]A presente invenção refere-se a um processo para preparar composições compreendendo glicosídeos de esteviol, inclusive composições de glicosídeo de esteviol altamente purificadas.[001] The present invention relates to a process for preparing compositions comprising steviol glycosides, including highly purified steviol glycoside compositions.
[002]Edulcorantes de alta intensidade possuem um nível de doçura muitas vezes superior ao da sacarose. Eles são essencialmente não calóricos e frequentemente são usados em produtos, incluindo alimentos e bebidas, diet e de calorias reduzidas. Edulcorantes de alta intensidade não provocam resposta glicêmica, o que os torna adequados para uso em produtos direcionados para diabéticos e outras pessoas interessadas em controlar seu consumo de carboidratos.[002] High intensity sweeteners have a sweetness level many times higher than sucrose. They are essentially non-caloric and are often used in products, including food and drinks, diet and reduced calories. High intensity sweeteners do not cause a glycemic response, which makes them suitable for use in products aimed at diabetics and other people interested in controlling their carbohydrate consumption.
[003]Os glicosídeos de esteviol são uma classe de compostos encontrados nas folhas de Stevia rebaudiana Bertoni, um arbusto perene da família Asteraceae (Compositae) nativo de determinadas regiões da América do Sul. Eles são caracterizados estruturalmente por uma única base, o esteviol, que difere pela presença de resíduos de carboidrato nas posições C13 e C19. Eles acumulam-se nas folhas de Stevia, respondendo por cerca de 10% a 20% do peso seco total. Em uma base em peso seco, os quatro glicosídeos principais encontrados nas folhas de Stevia incluem tipicamente o esteviosídeo (9,1%), o rebaudiosídeo A (3,8%), o rebaudiosídeo C (0,6% a 1,0%) e o dulcosídeo A (0,3%). Outros glicosídeos de esteviol conhecidos incluem os rebaudiosídeos B, C, D, E, F e M, o esteviolbiosídeo e o rubusosídeo.[003] Steviol glycosides are a class of compounds found in the leaves of Stevia rebaudiana Bertoni, a perennial shrub of the Asteraceae family (Compositae) native to certain regions of South America. They are structurally characterized by a single base, steviol, which differs by the presence of carbohydrate residues in positions C13 and C19. They accumulate on Stevia leaves, accounting for about 10% to 20% of the total dry weight. On a dry weight basis, the four main glycosides found in Stevia leaves typically include stevioside (9.1%), rebaudioside A (3.8%), rebaudioside C (0.6% to 1.0% ) and dulcoside A (0.3%). Other known steviol glycosides include rebaudiosides B, C, D, E, F and M, steviolbioside and rubusoside.
[004]Embora conheçam-se métodos para preparar glicosídeos de esteviol a partir da Stevia rebaudiana, muitos desses métodos são inadequados para uso em termos comerciais.[004] Although methods are known for preparing steviol glycosides from Stevia rebaudiana, many of these methods are unsuitable for use in commercial terms.
[005]Logo, persiste a necessidade por métodos simples, eficazes e econômicos para preparar composições compreendendo glicosídeos de esteviol, inclusive composições de glicosídeo de esteviol altamente purificadas.[005] Therefore, the need remains for simple, effective and economical methods to prepare compositions comprising steviol glycosides, including highly purified steviol glycoside compositions.
[006]Conforme usado neste documento, o termo abreviado "reb" refere-se a "rebaudiosídeo". Ambos os termos têm o mesmo significado e podem ser usados de maneira intercambiável.[006] As used in this document, the abbreviated term "reb" refers to "rebaudioside". Both terms have the same meaning and can be used interchangeably.
[007]Conforme usados neste documento, "biocatálise" ou "biocatalítico" referem-se ao uso de biocatalisadores, tais como enzimas, ou células compreendendo uma ou mais enzimas, naturais ou geneticamente modificados capazes de transformações químicas em compostos orgânicos em uma única etapa ou em várias etapas. Processos de biocatálise incluem processos de fermentação, biossíntese, bioconversão e biotransformação. Tanto métodos de biocatálise com enzimas isoladas quanto métodos de biocatálise com células inteiras são conhecidos na técnica. Enzimas proteicas de biocatálise podem ser proteínas de ocorrência natural ou recombinantes.[007] As used in this document, "biocatalysis" or "biocatalytic" refers to the use of biocatalysts, such as enzymes, or cells comprising one or more enzymes, natural or genetically modified capable of chemical transformations into organic compounds in a single step or in several stages. Biocatalysis processes include fermentation, biosynthesis, bioconversion and biotransformation processes. Both biocatalysis methods with isolated enzymes and whole cell biocatalysis methods are known in the art. Protein enzymes from biocatalysis can be naturally occurring or recombinant proteins.
[008]Conforme usado neste documento, o termo "glicosídeo(s) de esteviol" refere-se a um glicosídeo de esteviol, incluindo, entre outros, glicosídeos de esteviol de ocorrência natural, por exemplo, esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k,[008] As used herein, the term "steviol glycoside (s)" refers to a steviol glycoside, including but not limited to naturally occurring steviol glycosides, for example steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E6, re3 , rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside
rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s, glicosídeos de esteviol sintéticos, por exemplo, glicosídeos de esteviol enzimaticamente glicosilados e combinações desses.rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2c, rebaudioside 2 , rebaudioside 2i, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s, glycosides of glycosides of steviol glycosides .
[009]Conforme usado neste documento, o termo "SvG7" refere-se a quaisquer glicosídeos de esteviol de ocorrência natural ou a quaisquer glicosídeos de esteviol sintéticos, inclusive glicosídeos de esteviol enzimaticamente glicosilados e combinações desses, mais especificamente a uma molécula compreendendo esteviol com sete resíduos de glicose ligados de maneira covalente, incluindo, entre outros, reb 1a, reb 1b, reb 1c, reb 1d, reb 1e, reb 1f, reb 1g, reb 1h, reb 1i, reb 1j, reb 1k, reb 1l, reb 1m, reb 1n, reb 1o, reb 1p, reb 1q, reb 1r, reb 1s, reb 1t, reb 2a, reb 2b, reb 2c, reb 2d, reb 2e, reb 2f, reb 2g, reb 2h, reb 2i, reb 2j, reb 2k, reb 2l, reb 2m, reb 2n, reb 2o, reb 2p, reb 2q, reb 2r e/ou reb 2s. SvG7 pode referir-se a um único glicosídeo de esteviol com sete resíduos de glicose ligados de maneira covalente ou a uma mistura de glicosídeos de esteviol com sete resíduos de glicose ligados de maneira covalente.[009] As used herein, the term "SvG7" refers to any naturally occurring steviol glycosides or to any synthetic steviol glycosides, including enzymatically glycosylated steviol glycosides and combinations thereof, more specifically to a molecule comprising steviol with seven covalently linked glucose residues, including but not limited to reb 1a, reb 1b, reb 1c, reb 1d, reb 1e, reb 1f, reb 1g, reb 1h, reb 1i, reb 1j, reb 1k, reb 1l, reb 1m, reb 1n, reb 1o, reb 1p, reb 1q, reb 1r, reb 1s, reb 1t, reb 2a, reb 2b, reb 2c, reb 2d, reb 2e, reb 2f, reb 2g, reb 2h, reb 2i , reb 2j, reb 2k, reb 2l, reb 2m, reb 2n, reb 2o, reb 2p, reb 2q, reb 2r and / or reb 2s. SvG7 can refer to a single steviol glycoside with seven covalently linked glucose residues or to a mixture of steviol glycosides with seven covalently linked glucose residues.
[010]A presente invenção propõe um processo para preparar uma composição compreendendo um glicosídeo de esteviol alvo ao colocar uma composição inicial compreendendo um substrato orgânico em contato com uma célula microbiana e/ou preparado enzimático, produzindo assim uma composição compreendendo um glicosídeo de esteviol alvo.[010] The present invention proposes a process for preparing a composition comprising a target steviol glycoside by placing an initial composition comprising an organic substrate in contact with a microbial cell and / or enzyme preparation, thereby producing a composition comprising a target steviol glycoside .
[011]A composição inicial pode ser qualquer composto orgânico que compreenda ao menos um átomo de carbono. Em uma modalidade, a composição inicial é selecionada dentre o grupo composto por glicosídeos de esteviol, polióis ou álcoois de açúcar, vários carboidratos.[011] The initial composition can be any organic compound that comprises at least one carbon atom. In one embodiment, the initial composition is selected from the group consisting of steviol glycosides, polyols or sugar alcohols, various carbohydrates.
[012]O glicosídeo de esteviol alvo pode ser qualquer glicosídeo de esteviol.[012] The target steviol glycoside can be any steviol glycoside.
Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s, SvG7 ou um glicosídeo de esteviol sintético.In one embodiment, the target steviol glycoside is steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside C, stevioside C, , rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1b, rebaudioside 1b, rebaudioside 1b, rebaudioside 1b, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudi osídeo 2i, rebaudiosídio 2j, rebaudiosídio 2k, rebaudiosídio 2m, rebaudiosídio 2n, rebaudiosídio 2o, rebaudiosídio 2p, rebaudiosídio 2r, rebaudiosídio 2r, rebaudiosídio 2s, rebaudioside 2s, rebaudioside 2s, rebaudioside 2s, rebaudioside 2s, rebaudiosídio 2s
[013]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1a.[013] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1a.
[014]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1b.[014] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1b.
[015]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1c.[015] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1c.
[016]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1d.[016] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1d.
[017]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1e.[017] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1e.
[018]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1f.[018] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1f.
[019]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1g.[019] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 1g rebaudioside.
[020]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1h.[020] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 1h rebaudioside.
[021]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1i.[021] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1i.
[022]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1j.[022] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1j.
[023]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1k.[023] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1k.
[024]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1l.[024] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1l.
[025]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1m.[025] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 1 m rebaudioside.
[026]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1n.[026] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 1n rebaudioside.
[027]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1o.[027] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1o.
[028]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1p.[028] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1p.
[029]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1q.[029] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1q.
[030]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1r.[030] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1r.
[031]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1s.[031] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1s.
[032]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1t.[032] In one embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside 1t.
[033]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2a.[033] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2a.
[034]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2b.[034] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2b.
[035]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2c.[035] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2c.
[036]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2d.[036] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2d.
[037]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2e.[037] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2e.
[038]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2f.[038] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2f.
[039]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2g.[039] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2g.
[040]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2h.[040] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 2h rebaudioside.
[041]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2i.[041] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2i.
[042]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2j.[042] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2j.
[043]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2k.[043] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 2k rebaudioside.
[044]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2l.[044] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2l.
[045]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2m.[045] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 2 m rebaudioside.
[046]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2n.[046] In one embodiment, the target steviol glycoside is the 2n rebaudioside.
[047]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2o.[047] In one embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside 2nd.
[048]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2p.[048] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2p.
[049]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2q.[049] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2q.
[050]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2r.[050] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2r.
[051]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2s.[051] In one embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2s.
[052]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo M4.[052] In one embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside M4.
[053]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o SvG7.[053] In one embodiment, the target steviol glycoside is SvG7.
[054]Em algumas modalidades preferidas, utiliza-se um preparado enzimático compreendendo uma ou mais enzimas, ou uma célula microbiana compreendendo uma ou mais enzimas, capaz de converter a composição inicial em glicosídeos de esteviol alvo. A enzima pode estar situada na superfície e/ou dentro da célula. O preparado enzimático pode ser providenciado na forma de uma suspensão de células inteiras, de um lisado bruto ou como enzima(s) purificada(s). O preparado enzimático pode ser em forma livre ou imobilizado junto a um suporte sólido feito de materiais inorgânicos ou orgânicos.[054] In some preferred embodiments, an enzyme preparation comprising one or more enzymes, or a microbial cell comprising one or more enzymes, capable of converting the initial composition into target steviol glycosides is used. The enzyme can be located on the surface and / or inside the cell. The enzyme preparation can be provided as a suspension of whole cells, a crude lysate or as a purified enzyme (s). The enzyme preparation can be in free form or immobilized next to a solid support made of inorganic or organic materials.
[055]Em algumas modalidades, uma célula microbiana compreende as enzimas necessárias e genes que codificam as mesmas para converter a composição inicial em glicosídeos de esteviol alvo. Logo, a presente invenção também propõe um processo para preparar uma composição compreendendo um glicosídeo de esteviol alvo ao colocar uma composição inicial compreendendo um substrato orgânico em contato com uma célula microbiana compreendendo ao menos uma enzima capaz de converter a composição inicial em glicosídeos de esteviol alvo, produzindo assim um meio compreendendo ao menos um glicosídeo de esteviol alvo.[055] In some embodiments, a microbial cell comprises the necessary enzymes and genes that encode them to convert the initial composition into target steviol glycosides. Therefore, the present invention also proposes a process for preparing a composition comprising a target steviol glycoside by placing an initial composition comprising an organic substrate in contact with a microbial cell comprising at least one enzyme capable of converting the initial composition into target steviol glycosides thereby producing a medium comprising at least one target steviol glycoside.
[056]As enzimas necessárias para converter a composição inicial em glicosídeos de esteviol alvo incluem as enzimas da biossíntese do esteviol, NDP- glicosiltransferases (NGTs), ADP-glicosiltransferases (AGTs), CDP- glicosiltransferases (CGTs), GDP-glicosiltransferases (GGTs), TDP- glicosiltransferases (TDPs), UDP-glicosiltransferases (UGTs) e/ou enzima recicladora da NDP, enzima recicladora da ADP, enzima recicladora da CDP, enzima recicladora da GDP, enzima recicladora de TDP, e/ou enzima recicladora da UDP.[056] The enzymes needed to convert the initial composition to target steviol glycosides include steviol biosynthesis enzymes, NDP-glycosyltransferases (NGTs), ADP-glycosyltransferases (AGTs), CDP-glycosyltransferases (CGTs), GDP-glycosyltransferases (GGlycostransferases (GGlycostransferases) ), TDP-glycosyltransferases (TDPs), UDP-glycosyltransferases (UGTs) and / or NDP recycling enzyme, ADP recycling enzyme, CDP recycling enzyme, GDP recycling enzyme, TDP recycling enzyme, and / or UDP recycling enzyme .
[057]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol incluem enzimas da via do mevalonato (MVA).[057] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes include enzymes from the mevalonate pathway (MVA).
[058]Em outra modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol incluem enzimas da via do 2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato não mevalonato (MEP/DOXP).[058] In another embodiment, steviol biosynthesis enzymes include enzymes from the non-mevalonate 2-C-methyl-D-erythritol-4-phosphate pathway (MEP / DOXP).
[059]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol são selecionadas dentre o grupo composto por difosfato de geranilgeranila sintase, difosfato de copalila sintase, caureno sintase, caureno oxidase, ácido caurenoico 13- hidroxilase (KAH), esteviol sintetase, desoxixilulose 5-fosfato sintase (DXS), D-l- desoxixilulose 5-fosfato reductoisomerase (DXR), 4-difosfocitidil-2-C-metil-D-eritritol sintase (CMS), 4-difosfocitidil-2-C-metil-D-eritritol quinase (CMK), 4-difosfocitidil-2-C- metil-D-eritritol 2,4-ciclodifosfato sintase (MCS), 4-difosfato de 1-hidróxi-2-metil-2(E)- butenila sintase (HDS), 4-difosfato de 1-hidróxi-2-metil-2(E)-butenila redutase (HDR), acetoacetil-CoA tiolase, HMG-CoA redutase truncada, mevalonato quinase, fosfomevalonato quinase, mevalonato pirofosfato descarboxilase, citocromo P450 redutase etc.[059] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes are selected from the group consisting of geranylgeranyl synthase diphosphate, copalyl synthase diphosphate, kaurene synthase, kaurene oxidase, kaurenic acid 13-hydroxylase (KAH), steviol synthetase, deoxyxylulose 5 -phosphate synthase (DXS), D1-deoxyxylulose 5-phosphate reductoisomerase (DXR), 4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol synthase (CMS), 4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase (CMK), 4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol 2,4-cyclodiphosphate synthase (MCS), 1-hydroxy-2-methyl-2 (E) - butenyl synthase (HDS) 4-diphosphate, 1-hydroxy-2-methyl-2 (E) -butenyl reductase (HDR) 4-diphosphate, acetoacetyl-CoA thiolase, truncated HMG-CoA reductase, mevalonate kinase, phosphomevalonate kinase, mevalonate pyrophosphate decarboxyl50 redoxase, cytocutyl4.
[060]A UDP-glicosiltransferase pode ser qualquer UDP-glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol e/ou a um substrato de glicosídeo de esteviol para obter o glicosídeo de esteviol alvo.[060] UDP-glycosyltransferase can be any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol and / or to a steviol glycoside substrate to obtain the target steviol glycoside.
[061]Conforme usado doravante, o termo "SuSy_AT", salvo especificação em contrário, refere-se à sacarose sintase com a sequência de aminoácidos de "SEQ ID 1", conforme descrita no Exemplo 1, ou a um polipeptídeo com identidade de sequência de aminoácidos significativa (>85%, >86%, >87%, >88%, >89%, >90%, >91%, >92%, >93%, >94%, >95%, >96%, >97%, >98%, >99%) com o polipeptídeo de SEQ ID 1, bem como a moléculas de ácido nucleico isoladas que codifiquem esses polipeptídeos.[061] As used hereinafter, the term "SuSy_AT", unless otherwise specified, refers to sucrose synthase with the amino acid sequence of "SEQ ID 1" as described in Example 1, or to a polypeptide with sequence identity significant amino acid (> 85%,> 86%,> 87%,> 88%,> 89%,> 90%,> 91%,> 92%,> 93%,> 94%,> 95%,> 96 %,> 97%,> 98%,> 99%) with the polypeptide of SEQ ID 1, as well as to isolated nucleic acid molecules encoding those polypeptides.
[062]Conforme usado doravante, o termo "UGTSl2", salvo especificação em contrário, refere-se à sacarose sintase com a sequência de aminoácidos de "SEQ ID 2", conforme descrita no Exemplo 1, ou a um polipeptídeo com identidade de sequência de aminoácidos significativa (>85%, >86%, >87%, >88%, >89%, >90%, >91%, >92%, >93%, >94%, >95%, >96%, >97%, >98%, >99%) com o polipeptídeo de SEQ ID 2, bem como a moléculas de ácido nucleico isoladas que codifiquem esses polipeptídeos.[062] As used hereinafter, the term "UGTSl2", unless otherwise specified, refers to sucrose synthase with the amino acid sequence of "SEQ ID 2" as described in Example 1, or to a polypeptide with sequence identity significant amino acid (> 85%,> 86%,> 87%,> 88%,> 89%,> 90%,> 91%,> 92%,> 93%,> 94%,> 95%,> 96 %,> 97%,> 98%,> 99%) with the polypeptide of SEQ ID 2, as well as to isolated nucleic acid molecules encoding those polypeptides.
[063]Conforme usado doravante, o termo "UGT76G1", salvo especificação em contrário, refere-se à sacarose sintase com a sequência de aminoácidos de "SEQ ID 3", conforme descrita no Exemplo 1, ou a um polipeptídeo com identidade de sequência de aminoácidos significativa (>85%, >86%, >87%, >88%, >89%, >90%, >91%, >92%, >93%, >94%, >95%, >96%, >97%, >98%, >99%) com o polipeptídeo de SEQ ID 3, bem como a moléculas de ácido nucleico isoladas que codifiquem esses polipeptídeos.[063] As used hereinafter, the term "UGT76G1", unless otherwise specified, refers to sucrose synthase with the amino acid sequence of "SEQ ID 3" as described in Example 1, or to a polypeptide with sequence identity significant amino acid (> 85%,> 86%,> 87%,> 88%,> 89%,> 90%,> 91%,> 92%,> 93%,> 94%,> 95%,> 96 %,> 97%,> 98%,> 99%) with the polypeptide of SEQ ID 3, as well as with isolated nucleic acid molecules encoding those polypeptides.
[064]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol e as UDP- glicosiltransferases são produzidas em uma célula microbiana. A célula microbiana pode ser, por exemplo, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp.,[064] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes and UDP-glycosyltransferases are produced in a microbial cell. The microbial cell can be, for example, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp.,
Bacillus sp., Yarrowia sp. etc. Em outra modalidade, as UDP-glicosiltransferases são sintetizadas.Bacillus sp., Yarrowia sp. etc. In another embodiment, UDP-glycosyltransferases are synthesized.
[065]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é selecionada dentre o grupo composto por UGT74G1, UGT85C2, UGT76G1, UGT91D2, UGTSl2, EUGT11 e UGTs com identidade de sequência de aminoácidos significativa (>85%, >86%, >87%, >88%, >89%, >90%, >91%, >92%, >93%, >94%, >95%, >96%, >97%, >98%, >99%) com esses polipeptídeos, além de moléculas de ácido nucleico isoladas que codifiquem essas UGTs.[065] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is selected from the group consisting of UGT74G1, UGT85C2, UGT76G1, UGT91D2, UGTSl2, EUGT11 and UGTs with significant amino acid sequence identity (> 85%,> 86%,> 87% ,> 88%,> 89%,> 90%,> 91%,> 92%,> 93%,> 94%,> 95%,> 96%,> 97%,> 98%,> 99%) with these polypeptides, as well as isolated nucleic acid molecules that encode these UGTs.
[066]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol, as UGTs e o sistema de reciclagem da UDP-glicose fazem-se presentes em um micro- organismo (célula microbiana). O micro-organismo pode ser, por exemplo, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp., Bacillus sp., Yarrowia sp.[066] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes, UGTs and the UDP-glucose recycling system are present in a micro-organism (microbial cell). The microorganism can be, for example, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp., Bacillus sp., Yarrowia sp.
[067]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol ou a qualquer glicosídeo de esteviol com um grupo funcional -OH em C13 para obter um glicosídeo de esteviol alvo com uma ligação glicosídica entre -O-glicose e beta- glicopiranosídeo em C13. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[067] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol or any steviol glycoside with a -OH functional group in C13 to obtain a target steviol glycoside with a glycosidic bond between -O-glucose and beta-glycopyranoside at C13 In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[068]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol ou a qualquer glicosídeo de esteviol inicial com um grupo funcional -COOH em C19 para obter um glicosídeo de esteviol alvo com uma ligação glicosídica entre -COO- glicose e beta-glicopiranosídeo em C19. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT74G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[068] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol or any initial steviol glycoside with a -COOH functional group in C19 to obtain a target steviol glycoside with a glycosidic bond between -COO- glucose and C19 beta-glucopyranoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT74G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[069]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→2 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[069] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 2 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[070]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→3 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[070] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 3 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[071]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→4 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[071] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 4 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[072]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→6 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[072] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 6 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[073]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→2 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP-[073] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 2 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[074]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→3 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[074] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 3 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[075]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→4 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[075] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 4 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[076]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→6 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[076] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 6 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[077]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol para formar um esteviolmonosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[077] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol to form a steviolmonoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[078]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol para formar o esteviolmonosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[078] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviol to form steviolmonoside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT74G1.
[079]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo para formar um esteviolbiosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[079] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviolmonoside to form a steviolbioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[080]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo para formar o esteviolbiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[080] In another embodiment, the UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the steviolmonoside to form the steviolbioside D. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[081]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo para formar um rubusosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[081] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviolmonoside to form a rubusoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[082]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo A para formar um rubusosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[082] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolmonoside A to form a rubusoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[083]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo A para formar o esteviolbiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[083] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolmonoside A to form steviolbioside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[084]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo A para formar o esteviolbiosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[084] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolmonoside A to form steviolbioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[085]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo para formar o rebaudiosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[085] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the steviolbioside to form rebaudioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[086]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo para formar um esteviosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[086] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviolbioside to form a stevioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[087]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo D para formar o rebaudiosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[087] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside D to form rebaudioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[088]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo D para formar o rebaudiosídeo G. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[088] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside D to form rebaudioside G. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[089]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar um esteviosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[089] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rubusoside to form a stevioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTS12 or UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[090]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar o rebaudiosídeo G. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[090] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the rubusoside to form the rebaudioside G. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[091]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar o esteviosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[091] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rubusoside to form stevioside A. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[092]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar o esteviosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[092] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rubusoside to form stevioside B. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[093]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo A para formar o esteviosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[093] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolbioside A to form stevioside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[094]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo A para formar o esteviosídeo C. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[094] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolbioside A to form stevioside C. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[095]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo B para formar o esteviosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[095] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolbioside B to form stevioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[096]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo B para formar o esteviosídeo C. Em uma modalidade específica, a[096] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside B to form stevioside C. In a specific embodiment, the
UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[097]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo B para formar o rebaudiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[097] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to rebaudioside B to form rebaudioside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[098]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo para formar o rebaudiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[098] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the stevioside to form rebaudioside A. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[099]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo para formar o rebaudiosídeo E. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[099] In another embodiment, the UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the stevioside to form the rebaudioside E. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0100]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo para formar o rebaudiosídeo E2. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0100] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the stevioside to form the E2 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0101]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo G para formar o rebaudiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0101] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside G to form the rebaudioside A. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0102]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo G para formar o rebaudiosídeo E4. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0102] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside G to form the rebaudioside E4. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0103]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo G para formar o rebaudiosídeo E6. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0103] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside G to form the rebaudioside E6. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0104]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo A para formar o rebaudiosídeo E. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0104] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside A to form rebaudioside E. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0105]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo A para formar o rebaudiosídeo E4. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0105] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside A to form the E4 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0106]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo A para formar o rebaudiosídeo E3. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0106] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside A to form the E3 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0107]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo B para formar o rebaudiosídeo E2. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0107] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside B to form the E2 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0108]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo B para formar o rebaudiosídeo E6. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0108] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside B to form the E6 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0109]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo B para formar o rebaudiosídeo E3. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0109] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside B to form the E3 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0110]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo C para formar o rebaudiosídeo E3. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0110] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside C to form the E3 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0111]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo A para formar o rebaudiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP-[0111] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to rebaudioside A to form rebaudioside D. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0112]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo A para formar o rebaudiosídeo I. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0112] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rebaudioside A to form rebaudioside I. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0113]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E para formar o rebaudiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0113] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the rebaudioside E to form the rebaudioside D. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0114]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E para formar o rebaudiosídeo AM. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0114] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E rebaudioside to form the AM rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0115]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E2 para formar o rebaudiosídeo I. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0115] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to E2 rebaudioside to form rebaudioside I. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0116]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E2 para formar o rebaudiosídeo AM. Em uma modalidade específica,[0116] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E2 rebaudioside to form the AM rebaudioside. In a specific modality,
a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.UDP-glycosyltransferase is UGTS12 or UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0117]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E4 para formar o rebaudiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0117] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E4 rebaudioside to form the rebaudioside D. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0118]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E4 para formar o rebaudiosídeo D7. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0118] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E4 rebaudioside to form the D7 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0119]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E6 para formar o rebaudiosídeo I. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0119] In another embodiment, the UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the E6 rebaudioside to form the rebaudioside I. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0120]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E6 para formar o rebaudiosídeo D7. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0120] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E6 rebaudioside to form the D7 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0121]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E3 para formar o rebaudiosídeo AM. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0121] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E3 rebaudioside to form the AM rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0122]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E3 para formar o rebaudiosídeo D7. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0122] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E3 rebaudioside to form the D7 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0123]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo D para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0123] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to D rebaudioside to form M rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0124]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo I para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0124] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rebaudioside I to form rebaudioside M. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0125]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo AM para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0125] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the AM rebaudioside to form the M rebaudioside. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0126]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo AM para formar o rebaudiosídeo M4. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP-[0126] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the AM rebaudioside to form the M4 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0127]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo D7 para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0127] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the D7 rebaudioside to form the M rebaudioside. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0128]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1a. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0128] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the rebaudioside 1a. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0129]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1b. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0129] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M rebaudioside to form the 1b rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0130]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1c. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0130] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1c rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0131]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1d. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0131] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1d rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0132]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1e. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0132] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1e rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0133]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1f. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0133] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1f rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0134]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1g. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0134] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M rebaudioside to form the 1g rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0135]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1h. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0135] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1h rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0136]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1i. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0136] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the rebaudioside 1i. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0137]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1j. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0137] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside M to form the rebaudioside 1j. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0138]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1k. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0138] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1k rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0139]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1l. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0139] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1 l rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0140]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1m. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0140] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1 m rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0141]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1n. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0141] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1n rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0142]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1o. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0142] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1st rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0143]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1p. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0143] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M rebaudioside to form the 1p rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0144]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1q. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0144] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1q rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0145]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1r. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0145] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1r rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0146]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1s. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0146] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1s rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0147]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1t. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0147] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1t rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0148]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2a. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0148] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2a rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0149]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2b. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0149] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2b rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0150]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2c. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0150] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2c rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0151]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2d. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0151] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2d rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0152]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2e. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0152] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2e rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0153]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2f. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0153] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2f rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0154]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2g. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0154] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2g rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0155]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2h. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0155] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2h rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0156]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2l. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0156] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2l rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0157]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2j. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0157] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2j rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0158]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2k. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0158] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2k rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0159]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2l. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0159] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2l rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0160]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2m. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0160] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2m rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0161]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2n. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0161] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2n rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0162]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2o. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0162] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2nd rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0163]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2p. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0163] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2p rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0164]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2q. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0164] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2q rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0165]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2r. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0165] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2r rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0166]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2s. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0166] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2s rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0167]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 1q. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1. Como opção, o método da presente invenção compreende ainda reciclar a UDP para obter a UDP-glicose. Em uma modalidade, o método compreende reciclar a UDP providenciando-se um catalisador de reciclagem e um substrato de reciclagem, de tal modo que a biotransformação do esteviol e/ou do substrato de glicosídeo de esteviol no glicosídeo de esteviol alvo se dê usando quantidades catalíticas de UDP-glicosiltransferase e UDP-glicose.[0167] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 1q rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1. As an option, the method of the present invention further comprises recycling UDP to obtain UDP-glucose. In one embodiment, the method comprises recycling the UDP by providing a recycling catalyst and a recycling substrate, such that the biotransformation of the steviol and / or the steviol glycoside substrate into the target steviol glycoside occurs using catalytic amounts UDP-glycosyltransferase and UDP-glucose.
[0168]Em uma modalidade, o catalisador de reciclagem é a sacarose sintase SuSy_At ou uma sacarose sintase com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com a SuSy_At.[0168] In one embodiment, the recycling catalyst is suSose synthase SuSy_At or sucrose synthase with> 85% amino acid sequence identity with SuSy_At.
[0169]Em uma modalidade, o substrato de reciclagem para o catalisador de reciclagem da UDP-glicose é a sacarose.[0169] In one embodiment, the recycling substrate for the UDP-glucose recycling catalyst is sucrose.
[0170]Como opção, o método da presente invenção compreende ainda o uso de transglicosidases que utilizam oligossacarídeos ou polissacarídeos como doadores de açúcar para modificar as moléculas de glicosídeo de esteviol alvo recipientes. Exemplos não exaustivos incluem a ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase), frutofuranosidase, amilase, sacarase, glicossucrase, beta-h-frutosidase, beta-frutosidase, sucrase, frutosilinvertase, invertase alcalina, invertase ácida, frutofuranosidase. Em algumas modalidades, a glicose e outro(s) açúcar(es) que não a glicose, incluindo, entre outros, a frutose, xilose, ramnose, arabinose, desoxiglicose, galactose, são transferidos aos glicosídeos de esteviol alvo recipientes. Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol recipiente é o rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r e/ou rebaudiosídeo 2s. Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol recipiente é o rebaudiosídeo M4. Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol recipiente é o SvG7.[0170] As an option, the method of the present invention further comprises the use of transglycosidases that use oligosaccharides or polysaccharides as sugar donors to modify the recipient steviol glycoside molecules. Non-exhaustive examples include cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase), fructofuranosidase, amylase, sucrase, glucosucrase, beta-h-fructidase, beta-fructidase, sucrase, fructosilvertase, alkaline invertase, acid invertase, fructofuranosidase. In some embodiments, glucose and sugar (s) other than glucose, including, among others, fructose, xylose, rhamnose, arabinose, deoxyglucose, galactose, are transferred to the target steviol glycosides in containers. In one embodiment, the recipient steviol glycoside is rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e , rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r and / or rebaudioside 2s. In another embodiment, the recipient steviol glycoside is the rebaudioside M4. In another embodiment, the recipient steviol glycoside is SvG7.
[0171]Como opção, o método da presente invenção compreende ainda separar o glicosídeo de esteviol alvo do meio a fim de obter uma composição de glicosídeo de esteviol alvo altamente purificada. O glicosídeo de esteviol alvo pode ser separado por ao menos um método adequado, tal como, por exemplo, cristalização, separação por membranas, centrifugação, extração, separação cromatográfica ou uma combinação desses métodos.[0171] As an option, the method of the present invention further comprises separating the target steviol glycoside from the medium in order to obtain a highly purified target steviol glycoside composition. The target steviol glycoside can be separated by at least one suitable method, such as, for example, crystallization, membrane separation, centrifugation, extraction, chromatographic separation or a combination of these methods.
[0172]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo pode ser produzido dentro do micro-organismo. Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo pode ser secretado no meio. Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol liberado pode ser continuamente removido do meio. Em ainda outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é separado após a conclusão da reação de conversão.[0172] In one embodiment, the target steviol glycoside can be produced within the microorganism. In another embodiment, the target steviol glycoside can be secreted into the medium. In another embodiment, the released steviol glycoside can be continuously removed from the medium. In yet another embodiment, the target steviol glycoside is separated after completion of the conversion reaction.
[0173]Em uma modalidade, a separação produz uma composição compreendendo mais que cerca de 80% em peso do glicosídeo de esteviol alvo sobre uma base anidra, isto é, uma composição de glicosídeo de esteviol altamente purificada. Em outra modalidade, a separação produz uma composição compreendendo mais que cerca de 90% em peso do glicosídeo de esteviol alvo. Em modalidades específicas, a composição compreende mais que cerca de 95% em peso do glicosídeo de esteviol alvo. Em outras modalidades, a composição compreende mais que cerca de 99% em peso do glicosídeo de esteviol alvo.[0173] In one embodiment, the separation produces a composition comprising more than about 80% by weight of the target steviol glycoside on an anhydrous basis, i.e., a highly purified steviol glycoside composition. In another embodiment, the separation produces a composition comprising more than about 90% by weight of the target steviol glycoside. In specific embodiments, the composition comprises more than about 95% by weight of the target steviol glycoside. In other embodiments, the composition comprises more than about 99% by weight of the target steviol glycoside.
[0174]O glicosídeo de esteviol alvo pode se dar em qualquer forma polimórfica ou amorfa, incluindo hidratos, solvatos, anidros ou combinações desses.[0174] The target steviol glycoside can occur in any polymorphic or amorphous form, including hydrates, solvates, anhydrates or combinations thereof.
[0175]Os glicosídeos de esteviol alvo purificados podem ser usados em bens de consumo como edulcorantes, modificadores de sabor, essências com propriedades modificadoras e/ou supressores de espumação. Bens de consumo adequados incluem, entre outros, alimentos, bebidas, composições farmacêuticas, produtos de tabaco, composições nutracêuticas, composições de higiene oral e composições cosméticas.[0175] Purified target steviol glycosides can be used in consumer goods such as sweeteners, flavor modifiers, essences with modifying properties and / or foaming suppressors. Suitable consumer goods include, but are not limited to, food, beverages, pharmaceutical compositions, tobacco products, nutraceutical compositions, oral hygiene compositions and cosmetic compositions.
[0176]As FIGs. de 1a a 1t ilustram a estrutura química de alguns glicosídeos de esteviol SvG7 rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o,[0176] FIGS. 1 to 1 illustrate the chemical structure of some SvG7 steviol glycosides rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1st,
rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s e rebaudiosídeo 1t, respectivamente.rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s and rebaudioside 1t, respectively.
[0177]As FIGs. de 2a a 2s ilustram a estrutura química de alguns glicosídeos de esteviol SvG7 rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r e rebaudiosídeo 2s, respectivamente.[0177] FIGS. from 2a to 2s illustrate the chemical structure of some SvG7 steviol glycosides rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r and rebaudioside 2s, respectively.
[0178]A FIG. 3 ilustra a estrutura química do rebaudiosídeo M4.[0178] FIG. 3 illustrates the chemical structure of the M4 rebaudioside.
[0179]As FIGs. de 4a a 4s ilustram as vias para produzir o rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s e rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, e rebaudiosídeo 2s, rebaudiosídeo M4 e vários glicosídeos de esteviol a partir do esteviol e vários glicosídeos de esteviol intermediários.[0179] FIGS. 4a to 4s illustrate the ways to produce rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside 1n, rebaudioside 1, rebaudioside 1p, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2n, rebaudioside 2n, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, and rebaudioside 2s, rebaudioside M4 and various steviol glycosides from steviol and various glycosides from steviol and various glycosides.
[0180]As FIGs. de 5a a 5t ilustram a produção biocatalítica do rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m e rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q,[0180] FIGS. from 5a to 5t illustrate the biocatalytic production of rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1, rebaudioside 1j, rebaudioside , rebaudioside 1st, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q,
rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s e rebaudiosídeo 1t, respectivamente, a partir do rebaudiosídeo A usando as enzimas UGTSl2 e UGT76G1 e a reciclagem concomitante da UDP em UDP-glicose através da sacarose sintase SuSy_At.rebaudioside 1r, rebaudioside 1s and rebaudioside 1t, respectively, from rebaudioside A using the enzymes UGTSl2 and UGT76G1 and the concomitant recycling of UDP into UDP-glucose using suSose synthase SuSy_At.
[0181]As FIGs. de 6a a 6t ilustram a produção biocatalítica do rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e rebaudiosídeo 1q, respectivamente, a partir do esteviosídeo usando as enzimas UGTSl2 e UGT76G1 e a reciclagem concomitante da UDP em UDP-glicose através da sacarose sintase SuSy_At.[0181] FIGS. 6a to 6t illustrate the biocatalytic production of rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2, rebaudioside 2j, rebaudioside , rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and rebaudioside 1q, respectively, from the stevioside using the enzymes UGTSl2 and UGT76G1 and the concomitant recycling of UDP into UDP-glucose via sucrose suase suSose suase suSose suase
[0182]A FIG. 7 ilustra a produção biocatalítica do rebaudiosídeo M4 a partir do esteviosídeo usando as enzimas UGTSl2 e UGT76G1 e a reciclagem concomitante da UDP em UDP-glicose através da sacarose sintase SuSy_At.[0182] FIG. 7 illustrates the biocatalytic production of rebaudioside M4 from stevioside using the enzymes UGTSl2 and UGT76G1 and the concomitant recycling of UDP into UDP-glucose using suSose synthase SuSy_At.
[0183]As FIGs. de 8a a 8t ilustram a produção biocatalítica do rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e rebaudiosídeo 1q, respectivamente, a partir do rebaudiosídeo AM usando as enzimas UGTSl2 e UGT76G1 e a reciclagem concomitante da UDP em UDP-glicose através da sacarose sintase SuSy_At.[0183] FIGS. 8a to 8t illustrate the biocatalytic production of rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2j, rebaudioside 2j, rebaudioside 2j, rebaudioside , rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and rebaudioside 1q, respectively, from rebaudioside AM using the enzymes UGTSl2 and UGT76G1 and the concomitant recycling of UDP into UDP-glucose via sucrose sucrose.
[0184]A FIG. 9 ilustra a produção biocatalítica do rebaudiosídeo M4 a partir do rebaudiosídeo A usando as enzimas UGTSl2 e UGT76G1 e a reciclagem concomitante da UDP em UDP-glicose através da sacarose sintase SuSy_At.[0184] FIG. 9 illustrates the biocatalytic production of rebaudioside M4 from rebaudioside A using the enzymes UGTSl2 and UGT76G1 and the concomitant recycling of UDP into UDP-glucose using suSose synthase SuSy_At.
[0185]As FIGs. de 10a a 10t ilustram a produção biocatalítica do rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d,[0185] FIGS. 10a to 10t illustrate the biocatalytic production of rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d,
rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e rebaudiosídeo 1q, respectivamente, a partir do rebaudiosídeo M4 usando as enzimas UGTSl2 e UGT76G1 e a reciclagem concomitante da UDP em UDP-glicose através da sacarose sintase SuSy_At.rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p from the rebaudioside M4 using the enzymes UGTSl2 and UGT76G1 and the concomitant recycling of UDP into UDP-glucose through suSose synthase SuSy_At.
[0186]A FIG. 11a ilustra o cromatograma de HPLC do esteviosídeo. O pico com o tempo de retenção de 20,958 minutos corresponde ao esteviosídeo. O pico com o tempo de retenção de 20,725 minutos corresponde ao rebaudiosídeo A. O pico em 32,925 minutos corresponde ao rebaudiosídeo B. O pico em 33,930 minutos corresponde ao esteviolbiosídeo.[0186] FIG. 11a illustrates the HPLC chromatogram of the stevioside. The peak with the retention time of 20.958 minutes corresponds to the stevioside. The peak with the retention time of 20.725 minutes corresponds to rebaudioside A. The peak in 32.925 minutes corresponds to rebaudioside B. The peak in 33.930 minutes corresponds to steviolbioside.
[0187]A FIG. 11b ilustra o cromatograma de HPLC do produto da produção biocatalítica de moléculas de SvG7 a partir do esteviosídeo. O pico em 5,089 minutos corresponde ao rebaudiosídeo 2m. O pico em 6,459 minutos corresponde ao rebaudiosídeo 2a. O pico em 9,825 minutos corresponde ao rebaudiosídeo AM. O pico em 13,845 minutos corresponde ao rebaudiosídeo M. O pico em 32,974 minutos corresponde ao rebaudiosídeo B. O pico em 33,979 minutos corresponde ao esteviolbiosídeo.[0187] FIG. 11b illustrates the HPLC chromatogram of the product of the biocatalytic production of SvG7 molecules from the stevioside. The peak at 5.089 minutes corresponds to the 2 m rebaudioside. The peak in 6.459 minutes corresponds to rebaudioside 2a. The peak in 9.825 minutes corresponds to the rebaudioside AM. The peak at 13.845 minutes corresponds to rebaudioside M. The peak at 32.974 minutes corresponds to rebaudioside B. The peak at 33.979 minutes corresponds to steviolbioside.
[0188]A FIG. 11c ilustra o cromatograma de HPLC do rebaudiosídeo 2a após purificação por HPLC. O pico com o tempo de retenção de 6,261 minutos corresponde ao rebaudiosídeo 2a.[0188] FIG. 11c illustrates the HPLC chromatogram of rebaudioside 2a after purification by HPLC. The peak with the retention time of 6.261 minutes corresponds to rebaudioside 2a.
[0189]A FIG. 11d ilustra o cromatograma de HPLC do rebaudiosídeo 2m após purificação por HPLC. O pico com o tempo de retenção de 5,197 minutos corresponde ao rebaudiosídeo 2m.[0189] FIG. 11d illustrates the HPLC chromatogram of the 2 m rebaudioside after HPLC purification. The peak with a retention time of 5.197 minutes corresponds to the 2 m rebaudioside.
[0190]A FIG. 12a ilustra o espectro de RMN de 1H do rebaudiosídeo 2a (500 MHz, piridina-d5).[0190] FIG. 12a illustrates the 1H NMR spectrum of rebaudioside 2a (500 MHz, pyridine-d5).
[0191]A FIG. 12b ilustra o espectro de HSQC do rebaudiosídeo 2a (500 MHz, piridina-d5).[0191] FIG. 12b illustrates the HSQC spectrum of rebaudioside 2a (500 MHz, pyridine-d5).
[0192]A FIG. 12c ilustra o espectro de H,H COSY do rebaudiosídeo 2a (500 MHz, piridina-d5).[0192] FIG. 12c illustrates the H, H COZY spectrum of rebaudioside 2a (500 MHz, pyridine-d5).
[0193]A FIG. 12d ilustra o espectro de HMBC do rebaudiosídeo 2a (500 MHz, piridina-d5).[0193] FIG. 12d illustrates the HMBC spectrum of rebaudioside 2a (500 MHz, pyridine-d5).
[0194]A FIG. 12e ilustra o espectro de HSQC-TOCSY do rebaudiosídeo 2a (500 MHz, piridina-d5).[0194] FIG. 12e illustrates the HSQC-TOCSY spectrum of rebaudioside 2a (500 MHz, pyridine-d5).
[0195]A FIG. 12b ilustra o espectro de 1D-NOESY do rebaudiosídeo 2a (500 MHz, piridina-d5).[0195] FIG. 12b illustrates the 1D-NOESY spectrum of rebaudioside 2a (500 MHz, pyridine-d5).
[0196]A FIG. 12g ilustra o cromatograma de LC do rebaudiosídeo 2a.[0196] FIG. 12g illustrates the LC chromatogram of rebaudioside 2a.
[0197]A FIG. 12h ilustra o espectro de massas do rebaudiosídeo 2a.[0197] FIG. 12h illustrates the mass spectrum of rebaudioside 2a.
[0198]A FIG. 13a ilustra o espectro de RMN de 1H do rebaudiosídeo 2m (500 MHz, piridina-d5).[0198] FIG. 13a illustrates the 1H NMR spectrum of the 2m rebaudioside (500 MHz, pyridine-d5).
[0199]A FIG. 13b ilustra o espectro de HSQC do rebaudiosídeo 2m (500 MHz, piridina-d5).[0199] FIG. 13b illustrates the HSQC spectrum of the 2m rebaudioside (500 MHz, pyridine-d5).
[0200]A FIG. 13c ilustra o espectro de H,H COSY do rebaudiosídeo 2m (500 MHz, piridina-d5).[0200] FIG. 13c illustrates the H, H COZY spectrum of the 2m rebaudioside (500 MHz, pyridine-d5).
[0201]A FIG. 13d ilustra o espectro de HMBC do rebaudiosídeo 2m (500 MHz, piridina-d5).[0201] FIG. 13d illustrates the HMBC spectrum of the 2m rebaudioside (500 MHz, pyridine-d5).
[0202]A FIG. 13e ilustra o espectro de HSQC-TOCSY do rebaudiosídeo 2m (500 MHz, piridina-d5).[0202] FIG. 13e illustrates the HSQC-TOCSY spectrum of the 2m rebaudioside (500 MHz, pyridine-d5).
[0203]A FIG. 13f ilustra o espectro de 1D-NOESY do rebaudiosídeo 2m (500 MHz, piridina-d5).[0203] FIG. 13f illustrates the 1D-NOESY spectrum of the 2m rebaudioside (500 MHz, pyridine-d5).
[0204]A FIG. 13g ilustra o cromatograma de LC do rebaudiosídeo 2m.[0204] FIG. 13g illustrates the LC chromatogram of the 2m rebaudioside.
[0205]A FIG. 13h ilustra o espectro de massas do rebaudiosídeo 2m.[0205] FIG. 13h illustrates the mass spectrum of the 2m rebaudioside.
[0206]A presente invenção propõe um processo para preparar uma composição compreendendo um glicosídeo de esteviol alvo ao colocar uma composição inicial compreendendo um substrato orgânico em contato com uma célula microbiana e/ou preparado enzimático, produzindo assim uma composição compreendendo um glicosídeo de esteviol alvo.[0206] The present invention proposes a process for preparing a composition comprising a target steviol glycoside by placing an initial composition comprising an organic substrate in contact with a microbial cell and / or an enzyme preparation, thereby producing a composition comprising a target steviol glycoside .
[0207]Um objetivo da invenção consiste em propor um método biocatalítico eficaz para preparar glicosídeos de esteviol alvo, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 ou um glicosídeo de esteviol sintético a partir de várias composições iniciais.[0207] An object of the invention is to propose an effective biocatalytic method for preparing target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudios stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside M, rebaudioside D7, rebaudioside M7, rebaudioside D7, rebaudioside , rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1m, rebaudioside 1m, rebaudioside 1m, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudio sd 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside SvG7 or a synthetic steviol glycoside from various initial compositions.
Composição InicialInitial Composition
[0208]Conforme usado neste documento, "composição inicial" refere-se a qualquer composição (via de regra uma solução aquosa) que contenha um ou mais compostos orgânicos compreendendo ao menos um átomo de carbono.[0208] As used in this document, "starting composition" refers to any composition (usually an aqueous solution) that contains one or more organic compounds comprising at least one carbon atom.
[0209]Em uma modalidade, a composição inicial é selecionada dentre o grupo composto por esteviol, glicosídeos de esteviol, polióis e vários carboidratos.[0209] In one embodiment, the initial composition is selected from the group consisting of steviol, steviol glycosides, polyols and various carbohydrates.
[0210]A composição inicial glicosídeo de esteviol é selecionada dentre o grupo composto por esteviol, esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M e/ou rebaudiosídeo M4 ou outro glicosídeo de esteviol que ocorra no vegetal Stevia rebaudiana, glicosídeos de esteviol sintéticos, por exemplo, glicosídeos de esteviol enzimaticamente glicosilados e combinações desses.[0210] The initial steviol glycoside composition is selected from the group consisting of steviol, steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M7 and rebaudioside M and / or other reevere rebaudiana, synthetic steviol glycosides, for example, enzymatically glycosylated steviol glycosides and combinations thereof.
[0211]Em uma modalidade, a composição inicial é esteviol.[0211] In one embodiment, the initial composition is steviol.
[0212]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é um esteviolmonosídeo.[0212] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is a steviolmonoside.
[0213]Em ainda outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviolmonosídeo A.[0213] In yet another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is steviolmonoside A.
[0214]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é um esteviolbiosídeo.[0214] In another embodiment, the initial glycoside steviol glycoside composition is a steviolbioside.
[0215]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviolbiosídeo D.[0215] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is steviolbioside D.
[0216]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é um rubusosídeo.[0216] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is a rubusoside.
[0217]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é um rubusosídeo.[0217] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is a rubusoside.
[0218]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviolbiosídeo A.[0218] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is steviolbioside A.
[0219]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviolbiosídeo B.[0219] In another embodiment, the initial glycoside steviol glycoside composition is steviolbioside B.
[0220]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo B.[0220] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside B.
[0221]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é um esteviosídeo.[0221] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is a stevioside.
[0222]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo G.[0222] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside G.
[0223]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviosídeo A.[0223] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is stevioside A.
[0224]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviosídeo B.[0224] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is stevioside B.
[0225]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o esteviosídeo C.[0225] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is stevioside C.
[0226]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo A.[0226] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside A.
[0227]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo E.[0227] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside E.
[0228]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo E2.[0228] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside E2.
[0229]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo E4.[0229] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside E4.
[0230]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo E6.[0230] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside E6.
[0231]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo E3.[0231] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is the rebaudioside E3.
[0232]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo D.[0232] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside D.
[0233]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo I.[0233] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside I.
[0234]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo AM.[0234] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside AM.
[0235]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo D7.[0235] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside D7.
[0236]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo M.[0236] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside M.
[0237]Em outra modalidade, a composição inicial glicosídeo de esteviol glicosídeo é o rebaudiosídeo M4.[0237] In another embodiment, the initial glycoside composition of steviol glycoside is rebaudioside M4.
[0238]O termo "poliol" refere-se a uma molécula que contém mais de um grupo hidroxila. Um poliol pode ser um diol, triol ou tetraol contendo 2, 3 e 4 grupos hidroxila, respectivamente. Um poliol também pode conter mais de quatro grupos hidroxila, tais como um pentaol, hexaol, heptaol ou seus semelhantes, que contêm 5, 6 ou 7 grupos hidroxila, respectivamente. Além disso, um poliol também pode ser um álcool de açúcar, álcool polihídrico ou poliálcool que seja uma forma reduzida de um carboibrato, em que o grupo carbonila (aldeído ou cetona, açúcar redutor) foi reduzido a um grupo hidroxila primário ou secundário. Exemplos de polióis incluem, entre outros, eritritol, maltitol, manitol, sorbitol, lactitol, xilitol, inositol, isomalte, propileno glicol, glicerol, treitol, galactitol, isomaltulose hidrogenada, isomalto- oligossacarídeos reduzidos, xilo-oligossacarídeos reduzidos, gentio-oligossacarídeos reduzidos, xarope de maltose reduzido, xarope de glicose reduzido, hidrolisados de amido hidrogenado, poliglicitóis e álcoois de açúcar ou quaisquer outros carboidratos que possam ser reduzidos.[0238] The term "polyol" refers to a molecule that contains more than one hydroxyl group. A polyol can be a diol, triol or tetraol containing 2, 3 and 4 hydroxyl groups, respectively. A polyol can also contain more than four hydroxyl groups, such as a pentaol, hexaol, heptaol or the like, which contain 5, 6 or 7 hydroxyl groups, respectively. In addition, a polyol can also be a sugar alcohol, polyhydric alcohol or polyalcohol that is a reduced form of a carbohydrate, in which the carbonyl group (aldehyde or ketone, reducing sugar) has been reduced to a primary or secondary hydroxyl group. Examples of polyols include, but are not limited to, erythritol, maltitol, mannitol, sorbitol, lactitol, xylitol, inositol, isomalt, propylene glycol, glycerol, treitol, galactitol, hydrogenated isomaltulose, reduced isomalto-oligosaccharides, reduced xyl-oligosaccharides, reduced oligosaccharides , reduced maltose syrup, reduced glucose syrup, hydrogenated starch hydrolysates, polyglycitols and sugar alcohols or any other carbohydrates that can be reduced.
[0239]O termo "carboidrato" refere-se a compostos de aldeído ou cetona substituídos com vários grupos hidroxila da fórmula geral (CH2O)n, em que n é de 3 a 30, bem como a seus oligômeros e polímeros. Os carboidratos da presente invenção podem, além disso, ser substituídos ou desoxigenados em uma ou mais posições. Carboidratos, conforme usados neste documento, abrangem carboidratos não modificados, derivados de carboidratos, carboidratos substituídos e carboidratos modificados. Conforme usados neste documento, os sintagmas "derivados de carboidratos", "carboidratos substituídos" e "carboidratos modificados" são sinônimos. Carboidrato modificado significa qualquer carboidrato ao qual ao menos um átomo foi adicionado, do qual ao menos um átomo foi subtraído ou no qual ao menos um átomo foi substituído, ou combinações desses. Sendo assim, derivados de carboidratos ou carboidratos substituídos incluem monossacarídeos, dissacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos substituídos e não substituídos.[0239] The term "carbohydrate" refers to compounds of aldehyde or ketone substituted with various hydroxyl groups of the general formula (CH2O) n, where n is 3 to 30, as well as their oligomers and polymers. The carbohydrates of the present invention can, in addition, be substituted or deoxygenated in one or more positions. Carbohydrates, as used in this document, include unmodified carbohydrates, carbohydrate derivatives, substituted carbohydrates and modified carbohydrates. As used in this document, the phrases "carbohydrate derived", "substituted carbohydrates" and "modified carbohydrates" are synonymous. Modified carbohydrate means any carbohydrate to which at least one atom has been added, from which at least one atom has been subtracted or in which at least one atom has been replaced, or combinations thereof. Therefore, derivatives of carbohydrates or substituted carbohydrates include substituted and unsubstituted monosaccharides, disaccharides, oligosaccharides and polysaccharides.
Os derivados de carboidratos ou carboidratos substituídos podem ser opcionalmente desoxigenados em qualquer posição de C correspondente, e/ou substituídos com um ou mais grupamentos tais como hidrogênio, halogênio, haloalquila, carboxila, acila, acilóxi, amino, amido, derivados carboxila, alquilamino, dialquilamino, arilamino, alcóxi, arilóxi, nitro, ciano, sulfo, mercapto, imino, sulfonila, sulfenila, sulfinila, sulfamoíla, carboalcóxi, carboxamido, fosfonila, fosfinila, fosforila, fosfino, tioéster, tioéter, oximino, hidrazino, carbamila, fosfo, fosfonato, ou qualquer outro grupo funcional variável contanto que o derivado de carboidrato ou carboidrato substituído atue para realçar o sabor doce da composição edulcorante.Derivatives of carbohydrates or substituted carbohydrates can optionally be deoxygenated in any corresponding C position, and / or substituted with one or more groups such as hydrogen, halogen, haloalkyl, carboxyl, acyl, acyloxy, amino, starch, carboxyl, alkylamino derivatives, dialkylamino, arylamino, alkoxy, aryloxy, nitro, cyano, sulfo, mercapto, imino, sulfonyl, sulfenyl, sulfinyl, sulfamoyl, carboalkoxy, carboxamido, phosphonyl, phosphoryl, phosphoryl, phosphine, thioester, thioether, oxyamino, carbamino, hydrazine phosphonate, or any other variable functional group as long as the carbohydrate or substituted carbohydrate derivative acts to enhance the sweet taste of the sweetener composition.
[0240]Exemplos de carboidratos que podem ser usados de acordo com a presente invenção incluem, entre outros, tagatose, trehalose, galactose, ramnose,[0240] Examples of carbohydrates that can be used in accordance with the present invention include, but are not limited to, tagatose, trehalose, galactose, rhamnose,
várias ciclodextrinas, oligossacarídeos cíclicos, vários tipos de maltodextrinas, dextrano, sacarose, glicose, ribulose, frutose, treose, arabinose, xilose, lixose, alose, altrose, manose, idose, lactose, maltose, açúcar invertido, isotrehalose, neotrehalose, isomaltulose, eritrose, desoxirribose, gulose, idose, talose, eritrulose, xilulose, psicose, turanose, celobiose, amilopectina, glicosamina, manosamina, fucose, ácido glucurônico, ácido glucônico, glucono-lactona, abequose, galactosamina, oligossacarídeos da beterraba, isomalto-oligossacarídeos (isomaltose, isomaltotriose, panose e seus semelhantes), xilo-oligossacarídeos (xilotriose, xilobiose e seus semelhantes), oligossacarídeos terminados por xilo, gentio-oligossacarídeos (gentiobiose, gentiotriose, gentiotetraose e seus semelhantes), sorbose, nigero-oligossacarídeos, oligossacarídeos de palatinose, fruto-oligossacarídeos (questose, nistose e seus semelhantes), maltotetraol, maltotriol, malto-oligossacarídeos (maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, maltohexaose, maltoheptaose e seus semelhantes), amido, inulina, inulo- oligossacarídeos, lactulose, melibiose, rafinose, ribose, açúcares líquidos isomerizados tais como xaropes de milho com alto teor de frutose, açúcares de acoplamento, e oligossacarídeos de soja. Além disso, os carboidratos, conforme usados nestes documento, podem ser ou da configuração D ou da configuração L.various cyclodextrins, cyclic oligosaccharides, various types of maltodextrins, dextran, sucrose, glucose, ribulose, fructose, threose, arabinose, xylose, lixose, alose, altrose, mannose, idose, lactose, maltose, invert sugar, isotrehalose, isothalose, neotrehalose erythrose, deoxyribose, gulose, idose, thalose, erythrulose, xylulose, psychosis, turanosis, cellobiose, amylopectin, glucosamine, mannosamine, fucose, glucuronic acid, gluconic acid, glucono-lactone, abecose, galactosamine, oligosaccharides of sugar beet (isomalto) isomaltose, isomaltotriose, panose and the like), xylo-oligosaccharides (xylotriose, xylobiose and the like), xyl-terminated oligosaccharides, gentio-oligosaccharides (gentiobiose, gentiotriose, gentiotetraose and the like), sorbose, oligosaccharides, oligosaccharides, oligosaccharides , fructo-oligosaccharides (questose, nystosis and the like), maltotetraol, maltotriol, malto-oligosaccharides (maltotriose, mal totetraose, maltopentaose, maltohexaose, maltoheptaose and the like), starch, inulin, inulo-oligosaccharides, lactulose, melibiosis, raffinose, ribose, isomerized liquid sugars such as high fructose corn syrups, coupling sugars, and soy oligosaccharides . In addition, carbohydrates, as used in these documents, can be either D configuration or L configuration.
[0241]A composição inicial pode ser sintética ou purificada (em parte ou por inteiro), comercialmente disponível ou preparada.[0241] The initial composition can be synthetic or purified (in part or in whole), commercially available or prepared.
[0242]Em uma modalidade, a composição inicial é o glicerol.[0242] In one embodiment, the initial composition is glycerol.
[0243]Em outra modalidade, a composição inicial é a glicose.[0243] In another embodiment, the initial composition is glucose.
[0244]Em outra modalidade, a composição inicial é a ramnose.[0244] In another embodiment, the initial composition is rhamnose.
[0245]Em ainda outra modalidade, a composição inicial é a sacarose.[0245] In yet another modality, the initial composition is sucrose.
[0246]Em ainda outra modalidade, a composição inicial é o amido.[0246] In yet another embodiment, the initial composition is starch.
[0247]Em outra modalidade, a composição inicial é a maltodextrina.[0247] In another embodiment, the initial composition is maltodextrin.
[0248]Em ainda outra modalidade, a composição inicial é a celulose.[0248] In yet another modality, the initial composition is cellulose.
[0249]Em ainda outra modalidade, a composição inicial é a amilose.[0249] In yet another modality, the initial composition is amylose.
[0250]O(s) composto(s) orgânico(s) da composição inicial atuam como substrato para a produção do(s) glicosídeo(s) de esteviol alvo, conforme descrito neste documento.[0250] The organic compound (s) of the initial composition act as a substrate for the production of the target steviol glycoside (s), as described in this document.
Glicosídeo de Esteviol AlvoTarget Steviol Glycoside
[0251]O glicosídeo de esteviol alvo do presente método pode ser qualquer glicosídeo de esteviol que possa ser preparado pelo processo revelado neste documento. Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é selecionado dentre o grupo composto por esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s, SvG7 ou outro glicosídeo de esteviol que ocorra no vegetal Stevia rebaudiana, glicosídeos de esteviol sintéticos, por exemplo, glicosídeos de esteviol enzimaticamente glicosilados e combinações desses.[0251] The steviol glycoside targeted by the present method can be any steviol glycoside that can be prepared by the process disclosed in this document. In one embodiment, the target steviol glycoside is selected from the group consisting of steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside A, , rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1p rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, reb audioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudioside rebaudiana, synthetic steviol glycosides, for example, enzymatically glycosylated steviol glycosides and combinations thereof.
[0252]Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é um esteviolmonosídeo.[0252] In one embodiment, the target steviol glycoside is a steviolmonoside.
[0253]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviolmonosídeo A.[0253] In another embodiment, the target steviol glycoside is steviolmonoside A.
[0254]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é um esteviolbiosídeo.[0254] In another embodiment, the target steviol glycoside is a steviolbioside.
[0255]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviolbiosídeo D.[0255] In another embodiment, the target steviol glycoside is steviolbioside D.
[0256]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é um rubusosídeo.[0256] In another embodiment, the target steviol glycoside is a rubusoside.
[0257]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviolbiosídeo A.[0257] In another embodiment, the target steviol glycoside is steviolbioside A.
[0258]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviolbiosídeo B.[0258] In another embodiment, the target steviol glycoside is steviolbioside B.
[0259]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo B.[0259] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside B.
[0260]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é um esteviosídeo.[0260] In another embodiment, the target steviol glycoside is a stevioside.
[0261]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo G.[0261] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside G.
[0262]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviosídeo A.[0262] In another embodiment, the target steviol glycoside is stevioside A.
[0263]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviosídeo B.[0263] In another embodiment, the target steviol glycoside is stevioside B.
[0264]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o esteviosídeo C.[0264] In another embodiment, the target steviol glycoside is stevioside C.
[0265]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo A.[0265] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside A.
[0266]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo E.[0266] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside E.
[0267]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo E2.[0267] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside E2.
[0268]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo E4.[0268] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside E4.
[0269]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo E6.[0269] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside E6.
[0270]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo E3.[0270] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside E3.
[0271]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo D.[0271] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside D.
[0272]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo I.[0272] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside I.
[0273]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo AM.[0273] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside AM.
[0274]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo D7.[0274] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside D7.
[0275]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo M.[0275] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside M.
[0276]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo M4.[0276] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside M4.
[0277]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1a.[0277] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1a.
[0278]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1b.[0278] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1b.
[0279]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1c.[0279] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1c.
[0280]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1d.[0280] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1d.
[0281]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1e.[0281] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1e.
[0282]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1f.[0282] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1f.
[0283]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1g.[0283] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1g.
[0284]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1h.[0284] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1h.
[0285]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1i.[0285] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1i.
[0286]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1j.[0286] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1j.
[0287]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1k.[0287] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1k.
[0288]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1l.[0288] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1l.
[0289]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1m.[0289] In another embodiment, the target steviol glycoside is the 1 m rebaudioside.
[0290]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1n.[0290] In another embodiment, the target steviol glycoside is the 1n rebaudioside.
[0291]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1o.[0291] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1o.
[0292]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1p.[0292] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1p.
[0293]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1q.[0293] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1q.
[0294]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1r.[0294] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1r.
[0295]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1s.[0295] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 1s.
[0296]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1t.[0296] In another embodiment, the target steviol glycoside is the rebaudioside 1t.
[0297]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2a.[0297] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2a.
[0298]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2b.[0298] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2b.
[0299]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2c.[0299] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2c.
[0300]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2d.[0300] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2d.
[0301]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2e.[0301] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2e.
[0302]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2f.[0302] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2f.
[0303]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2g.[0303] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2g.
[0304]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2h.[0304] In another embodiment, the target steviol glycoside is the 2h rebaudioside.
[0305]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2i.[0305] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2i.
[0306]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2j.[0306] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2j.
[0307]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2k.[0307] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2k.
[0308]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2l.[0308] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2l.
[0309]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2m.[0309] In another embodiment, the target steviol glycoside is the 2 m rebaudioside.
[0310]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2n.[0310] In another embodiment, the target steviol glycoside is the 2n rebaudioside.
[0311]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2o.[0311] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2nd.
[0312]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2p.[0312] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2p.
[0313]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2q.[0313] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2q.
[0314]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2r.[0314] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2r.
[0315]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2s.[0315] In another embodiment, the target steviol glycoside is rebaudioside 2s.
[0316]Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol alvo é SvG7.[0316] In another embodiment, the target steviol glycoside is SvG7.
[0317]O glicosídeo de esteviol alvo pode se dar em qualquer forma polimórfica ou amorfa, incluindo hidratos, solvatos, anidros ou combinações desses.[0317] The target steviol glycoside can occur in any polymorphic or amorphous form, including hydrates, solvates, anhydrous or combinations thereof.
[0318]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção de esteviolmonosídeo.[0318] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of steviolmonoside.
[0319]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviolmonosídeo A.[0319] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of steviolmonoside A.
[0320]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção de esteviolbiosídeo.[0320] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of steviolbioside.
[0321]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviolbiosídeo D.[0321] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of steviolbioside D.
[0322]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção de rubusosídeo.[0322] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rubusoside.
[0323]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviolbiosídeo A.[0323] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of steviolbioside A.
[0324]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviolbiosídeo B.[0324] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of steviolbioside B.
[0325]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo B.[0325] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside B.
[0326]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção de esteviosídeo.[0326] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of stevioside.
[0327]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo G.[0327] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside G.
[0328]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviosídeo A.[0328] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of stevioside A.
[0329]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviosídeo B.[0329] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of stevioside B.
[0330]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do esteviosídeo C.[0330] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of stevioside C.
[0331]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo A.[0331] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside A.
[0332]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo E.[0332] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside E.
[0333]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo E2.[0333] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside E2.
[0334]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo E4.[0334] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the E4 rebaudioside.
[0335]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo E6.[0335] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the E6 rebaudioside.
[0336]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo E3.[0336] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the E3 rebaudioside.
[0337]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo D.[0337] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside D.
[0338]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo I.[0338] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside I.
[0339]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo AM.[0339] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside AM.
[0340]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo D7.[0340] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the rebaudioside D7.
[0341]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo E3.[0341] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the E3 rebaudioside.
[0342]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo M.[0342] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside M.
[0343]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo M4.[0343] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the M4 rebaudioside.
[0344]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1a.[0344] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1a.
[0345]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1b.[0345] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1b.
[0346]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1c.[0346] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1c.
[0347]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1d.[0347] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1d.
[0348]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1e.[0348] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1e.
[0349]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1f.[0349] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1f.
[0350]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1g.[0350] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1g.
[0351]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1h.[0351] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the 1h rebaudioside.
[0352]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1l.[0352] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1l.
[0353]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1j.[0353] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1j.
[0354]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1k.[0354] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1k.
[0355]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1l.[0355] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1l.
[0356]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1m.[0356] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the 1m rebaudioside.
[0357]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1n.[0357] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1n.
[0358]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1o.[0358] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1o.
[0359]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1p.[0359] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1p.
[0360]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1q.[0360] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1q.
[0361]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1r.[0361] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1r.
[0362]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1s.[0362] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1s.
[0363]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1t.[0363] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1t.
[0364]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2a.[0364] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2a.
[0365]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2b.[0365] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2b.
[0366]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2c.[0366] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2c.
[0367]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2d.[0367] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of 2d rebaudioside.
[0368]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2e.[0368] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2e.
[0369]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2f.[0369] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2f.
[0370]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2g.[0370] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2g.
[0371]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2h.[0371] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the 2h rebaudioside.
[0372]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2i.[0372] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2i.
[0373]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2j.[0373] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2j.
[0374]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2k.[0374] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2k.
[0375]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2l.[0375] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2l.
[0376]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2m.[0376] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of the 2 m rebaudioside.
[0377]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2n.[0377] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2n.
[0378]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2o.[0378] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2o.
[0379]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2p.[0379] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2p.
[0380]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2q.[0380] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2q.
[0381]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2r.[0381] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2r.
[0382]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2s.[0382] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2s.
[0383]Em uma modalidade, a presente invenção é um processo biocatalítico para a produção de SvG7.[0383] In one embodiment, the present invention is a biocatalytic process for the production of SvG7.
[0384]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1a a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0384] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1a from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0385]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1b a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0385] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1b from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0386]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1c a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0386] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1c from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0387]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1d a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0387] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1d from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0388]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1e a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0388] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1e from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0389]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1f a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0389] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1f from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0390]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1g a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0390] In a specific embodiment, the present invention proposes a biocatalytic process for the production of rebaudioside 1g from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0391]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1h a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0391] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1h from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0392]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1i a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0392] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1i from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0393]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1j a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0393] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1j from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0394]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1k a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0394] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1k from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0395]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1l a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0395] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1l from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0396]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1m a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0396] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 1m rebaudioside from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0397]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1n a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0397] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1n from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0398]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1o a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0398] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1o from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0399]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1p a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0399] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1p from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0400]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1q a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0400] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1q from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0401]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1r a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0401] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1r from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0402]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1s a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0402] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1s from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0403]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1t a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0403] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1t from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0404]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2a a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0404] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2a from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0405]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2b a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0405] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2b from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0406]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2c a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0406] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2c from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0407]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2d a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0407] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2d rebaudioside from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0408]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2e a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0408] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2e from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0409]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2f a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0409] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2f from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0410]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2g a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0410] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2g from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0411]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2h a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0411] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2h rebaudioside from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0412]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2i a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0412] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2i from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0413]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2j a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0413] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2j from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0414]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2k a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0414] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2k from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0415]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2l a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0415] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2l from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0416]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2m a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0416] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2m rebaudioside from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0417]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2n a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0417] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2n from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0418]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2o a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0418] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2o from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0419]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2p a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0419] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2p from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0420]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2q a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0420] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2q rebaudioside from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0421]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2r a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0421] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2r from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0422]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2s a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0422] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2s from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0423]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1q a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0423] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1q from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0424]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo M4 a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0424] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of M4 rebaudioside from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0425]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2a a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0425] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2a from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0426]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2b a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0426] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2b from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0427]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2c a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0427] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2c from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0428]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2d a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0428] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2d rebaudioside from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0429]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2e a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0429] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2e from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0430]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2f a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0430] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2f from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0431]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2g a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0431] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2 g rebaudioside from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0432]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2h a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0432] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2h rebaudioside from an initial composition comprising AM and UDP-glucose rebaudioside.
[0433]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2i a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0433] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2i from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0434]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2j a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0434] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2j from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0435]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2k a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0435] In a specific embodiment, the present invention proposes a biocatalytic process for the production of rebaudioside 2k from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0436]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2l a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0436] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2l from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0437]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2m a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0437] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2m rebaudioside from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0438]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2n a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0438] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2n rebaudioside from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0439]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2o a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0439] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2o from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0440]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2p a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0440] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2p rebaudioside from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0441]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2q a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0441] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2q from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0442]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2r a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0442] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2r from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0443]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2s a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0443] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2s from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0444]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1q a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0444] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1q from an initial composition comprising rebaudioside AM and UDP-glucose.
[0445]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo M4 a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0445] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of M4 rebaudioside from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0446]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2a a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0446] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2a from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0447]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2b a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0447] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2b from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0448]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2c a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0448] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2c from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0449]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2d a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0449] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2d rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0450]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2e a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0450] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2e from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0451]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2f a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0451] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2f from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0452]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2g a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0452] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2 g rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0453]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2h a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0453] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2h rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0454]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2i a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0454] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2i from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0455]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2j a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0455] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2j from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0456]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2k a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0456] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2k rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0457]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2l a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0457] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2l from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0458]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2m a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0458] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 2m rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0459]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2n a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0459] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2n rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0460]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2o a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0460] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2o from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0461]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2p a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0461] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2p from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0462]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2q a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0462] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 2q rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0463]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2r a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0463] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2r from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0464]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 2s a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0464] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 2s from an initial composition comprising rebaudioside M4 and UDP-glucose.
[0465]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1q a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0465] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 1q rebaudioside from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0466]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1a a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0466] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1a from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0467]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1b a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0467] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1b from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0468]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1c a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0468] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1c from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0469]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1d a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo e UDP-glicose.[0469] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1d from an initial composition comprising rebaudioside and UDP-glucose.
[0470]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1e a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo e UDP-glicose.[0470] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1e from an initial composition comprising rebaudioside and UDP-glucose.
[0471]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1f a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0471] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1f from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0472]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1g a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0472] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 1g rebaudioside from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0473]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1h a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0473] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of 1h rebaudioside from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0474]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1i a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0474] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1i from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0475]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1j a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0475] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1j from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0476]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1k a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0476] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1k from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0477]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1l a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0477] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1l from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0478]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1m a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0478] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 1m rebaudioside from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0479]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1n a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo e UDP-glicose.[0479] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1n from an initial composition comprising rebaudioside and UDP-glucose.
[0480]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1o a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0480] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1o from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0481]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1p a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0481] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1p from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0482]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1q a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0482] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 1q rebaudioside from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0483]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1r a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0483] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1r from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0484]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1s a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0484] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of rebaudioside 1s from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0485]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção do rebaudiosídeo 1t a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M e UDP-glicose.[0485] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of the 1t rebaudioside from an initial composition comprising M rebaudioside and UDP-glucose.
[0486]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção de SvG7 a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo e UDP-glicose.[0486] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of SvG7 from an initial composition comprising stevioside and UDP-glucose.
[0487]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção de SvG7 a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0487] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of SvG7 from an initial composition comprising rebaudioside A and UDP-glucose.
[0488]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção de SvG7 a partir de uma composição inicial que compreende esteviosídeo, rebaudiosídeo A e UDP-glicose.[0488] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of SvG7 from an initial composition comprising stevioside, rebaudioside A and UDP-glucose.
[0489]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção de SvG7 a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo AM e UDP-glicose.[0489] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of SvG7 from an initial composition comprising AM rebaudioside and UDP-glucose.
[0490]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção de SvG7 a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo e UDP-glicose.[0490] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of SvG7 from an initial composition comprising rebaudioside and UDP-glucose.
[0491]Em uma modalidade específica, a presente invenção propõe o processo biocatalítico para a produção de SvG7 a partir de uma composição inicial que compreende rebaudiosídeo M4 e UDP-glicose.[0491] In a specific embodiment, the present invention proposes the biocatalytic process for the production of SvG7 from an initial composition comprising M4 rebaudioside and UDP-glucose.
[0492]Como opção, o método da presente invenção compreende ainda separar o glicosídeo de esteviol alvo do meio a fim de obter uma composição de glicosídeo de esteviol alvo altamente purificada. O glicosídeo de esteviol alvo pode ser separado por qualquer método adequado, tal como, por exemplo, cristalização, separação por membranas, centrifugação, extração, separação cromatográfica ou uma combinação desses métodos.[0492] As an option, the method of the present invention further comprises separating the target steviol glycoside from the medium in order to obtain a highly purified target steviol glycoside composition. The target steviol glycoside can be separated by any suitable method, such as, for example, crystallization, membrane separation, centrifugation, extraction, chromatographic separation or a combination of these methods.
[0493]Em modalidades específicas, o processo descrito neste documento resulta em uma composição de glicosídeo de esteviol alvo altamente purificada. O termo "altamente purificado(a)", conforme usado neste documento, refere-se a uma composição com mais que cerca de 80% em peso do glicosídeo de esteviol alvo sobre uma base anidra (seca). Em uma modalidade, a composição de glicosídeo de esteviol altamente purificada contém mais que cerca de 90% em peso do glicosídeo de esteviol alvo sobre uma base anidra (seca), tal como, por exemplo, mais que cerca de 91%, mais que cerca de 92%, mais que cerca de 93%, mais que cerca de 94%, mais que cerca de 95%, mais que cerca de 96%, mais que cerca de 97%, mais que cerca de 98% ou mais que cerca de 99% de teor de glicosídeo de esteviol alvo sobre uma base seca.[0493] In specific embodiments, the process described in this document results in a highly purified target steviol glycoside composition. The term "highly purified (a)", as used herein, refers to a composition of more than about 80% by weight of the target steviol glycoside on an anhydrous (dry) basis. In one embodiment, the highly purified steviol glycoside composition contains more than about 90% by weight of the target steviol glycoside on an anhydrous (dry) basis, such as, for example, more than about 91%, more than about 92%, more than about 93%, more than about 94%, more than about 95%, more than about 96%, more than about 97%, more than about 98% or more than about 99% target steviol glycoside content on a dry basis.
[0494]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo M4, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo M4 em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo M4, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0494] In one embodiment, when the target steviol glycoside is M4 rebaudioside, the process described in this document produces a composition with more than about 90% M4 rebaudioside content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside M4, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0495]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1a, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1a em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1a, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0495] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1a, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside 1a content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1a, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0496]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1b, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1b em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1b, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0496] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1b, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1b by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1b, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0497]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1c, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1c em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1c, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0497] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1c, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1c by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1c, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight on a dry basis.
[0498]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1d, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1d em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1d, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0498] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1d, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1d by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1d, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0499]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1e, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1e em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1e, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0499] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1e, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1e by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1e, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0500]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1f, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1f em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1f, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0500] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1f, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1f by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1f, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0501]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1g, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1g em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1g, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0501] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1g, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1g by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1g, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0502]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1h, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1h em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1h, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0502] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1h, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1h by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1h, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0503]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1i, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1i em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1i, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0503] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1i, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1i by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1i, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0504]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1j, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1j em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1j, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0504] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1j, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1j by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1j, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0505]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1k, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1k em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1k, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0505] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1k, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1k by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1k, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0506]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1l, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1l em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1l, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0506] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1l, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1l by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1l, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0507]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1m, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1m em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1m, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0507] In one embodiment, when the target steviol glycoside is the 1 m rebaudioside, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1 m by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is the 1 m rebaudioside, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0508]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1n, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1n em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1n, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0508] In one embodiment, when the target steviol glycoside is 1n rebaudioside, the process described in this document produces a composition with more than about 90% 1n rebaudioside content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1n, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0509]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1o, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1o em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1o, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0509] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1o, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside 1o content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1o, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0510]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1p, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1p em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1p, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0510] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1p, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1p by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1p, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0511]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1q, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1q em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1q, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0511] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1q, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1q by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1q, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0512]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1r, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1r em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1r, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0512] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1r, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1r by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1r, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0513]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1s, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1s em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1s, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0513] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1s, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1s by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1s, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0514]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1t, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 1t em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 1t, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0514] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1t, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 1t by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 1t, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0515]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2a, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2a em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2a, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0515] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2a, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside 2a content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2a, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0516]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2b, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2b em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2b, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0516] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2b, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside 2b content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2b, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0517]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2c, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2c em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2c, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0517] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2c, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2c by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2c, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0518]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2d, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2d em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2d, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0518] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2d, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2d by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2d, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0519]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2e, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2e em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2e, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0519] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2e, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside 2e content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2e, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0520]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2f, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2f em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2f, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0520] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2f, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2f by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2f, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0521]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2g, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2g em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2g, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0521] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2g, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2g by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2g, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0522]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2h, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2h em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2h, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0522] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2h, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2h by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2h, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0523]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2i, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2i em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2i, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0523] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2i, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2i by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2i, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight on a dry basis.
[0524]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2j, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2j em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2j, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0524] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2j, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2j by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2j, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0525]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2k, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2k em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2k, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0525] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2k, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2k by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2k, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0526]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2l, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2l em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2l, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0526] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2l, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2l by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2l, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight on a dry basis.
[0527]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2m, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2m em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2m, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0527] In one embodiment, when the target steviol glycoside is the 2 m rebaudioside, the process described in this document produces a composition with more than about 90% 2 m rebaudioside content on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is the 2 m rebaudioside, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0528]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2n, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2n em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2n, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0528] In one embodiment, when the target steviol glycoside is the 2n rebaudioside, the process described in this document produces a composition with more than about 90% 2n rebaudioside content on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is the 2n rebaudioside, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0529]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2o, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2o em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2o, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0529] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2o, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside 2o content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2o, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0530]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2p, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2p em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2p, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0530] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2p, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2p by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2p, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0531]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2q, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2q em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2q, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0531] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2q, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2q by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2q, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% by weight of it on a dry basis.
[0532]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2r, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2r em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2r, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0532] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2r, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2r by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2r, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0533]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2s, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de rebaudiosídeo 2s em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o rebaudiosídeo 2s, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor em peso do mesmo sobre uma base seca.[0533] In one embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2s, the process described in this document produces a composition with more than about 90% rebaudioside content 2s by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is rebaudioside 2s, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% of its weight content on a dry basis.
[0534]Em uma modalidade, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o SvG7, o processo descrito neste documento produz uma composição com mais que cerca de 90% de teor de SvG7 em peso sobre uma base seca. Em outra modalidade específica, quando o glicosídeo de esteviol alvo é o SvG7, o processo descrito neste documento produz uma composição que compreende mais que cerca de 95% de teor de SvG7 em peso sobre uma base seca.[0534] In one embodiment, when the target steviol glycoside is SvG7, the process described in this document produces a composition with more than about 90% SvG7 content by weight on a dry basis. In another specific embodiment, when the target steviol glycoside is SvG7, the process described in this document produces a composition that comprises more than about 95% SvG7 content by weight on a dry basis.
Micro-organismos e preparados enzimáticosMicroorganisms and enzyme preparations
[0535]Em uma modalidade da presente invenção, coloca-se um micro- organismo (célula microbiana) e/ou preparado enzimático em contato com um meio contendo a composição inicial a fim de produzir glicosídeos de esteviol alvo.[0535] In one embodiment of the present invention, a microorganism (microbial cell) and / or enzymatic preparation is placed in contact with a medium containing the initial composition in order to produce target steviol glycosides.
[0536]O preparado enzimático pode ser providenciado na forma de uma suspensão de células inteiras, de um lisado bruto, de uma enzima purificada ou de uma combinação desses. Em uma modalidade, o biocatalisador é uma enzima purificada capaz de converter a composição inicial no glicosídeo de esteviol alvo. Em outra modalidade, o biocatalisador é um lisado bruto que compreende ao menos uma enzima capaz de converter a composição inicial no glicosídeo de esteviol alvo.[0536] The enzyme preparation can be provided in the form of a suspension of whole cells, a crude lysate, a purified enzyme or a combination thereof. In one embodiment, the biocatalyst is a purified enzyme capable of converting the initial composition into the target steviol glycoside. In another embodiment, the biocatalyst is a crude lysate that comprises at least one enzyme capable of converting the initial composition into the target steviol glycoside.
Em ainda outra modalidade, o biocatalisador é uma suspensão de células inteiras que compreende ao menos uma enzima capaz de converter a composição inicial no glicosídeo de esteviol alvo.In yet another embodiment, the biocatalyst is a suspension of whole cells that comprises at least one enzyme capable of converting the initial composition into the target steviol glycoside.
[0537]Em outra modalidade, o biocatalisador é uma ou mais células microbianas que compreendem enzima(s) capaz(es) de converter a composição inicial no glicosídeo de esteviol alvo. A enzima pode situar-se sobre a superfície da célula, dentro da célula ou tanto sobre a superfície da célula quanto dentro da célula.[0537] In another embodiment, the biocatalyst is one or more microbial cells that comprise enzyme (s) capable of converting the initial composition into the target steviol glycoside. The enzyme can be located on the cell surface, inside the cell or both on the cell surface and inside the cell.
[0538]Enzimas adequadas para converter a composição inicial em glicosídeos de esteviol incluem, entre outras, as enzimas da biossíntese do esteviol,[0538] Suitable enzymes for converting the initial composition to steviol glycosides include, among others, steviol biosynthesis enzymes,
NDP-glicosiltransferases (NGTs), ADP-glicosiltransferases (AGTs), CDP- glicosiltransferases (CGTs), GDP-glicosiltransferases (GGTs), TDP- glicosiltransferases (TDPs), UDP-glicosiltransferases (UGTs). Como opção, elas podem incluir enzima(s) recicladora(s) da NDP, enzima(s) recicladora(s) da ADP, enzima(s) recicladora(s) da CDP, enzima(s) recicladora(s) da GDP, enzima(s) recicladora(s) da TDP e/ou enzima(s) recicladora(s) da UDP.NDP-glycosyltransferases (NGTs), ADP-glycosyltransferases (AGTs), CDP-glycosyltransferases (CGTs), GDP-glycosyltransferases (GGTs), TDP-glycosyltransferases (TDPs), UDP-glycosyltransferases (UGTs). Optionally, they can include NDP recycle enzyme (s), ADP recycle enzyme (s), CDP recycle enzyme (s), GDP recycle enzyme (s), TDP recycling enzyme (s) and / or UDP recycling enzyme (s).
[0539]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol incluem enzimas da via do mevalonato (MVA).[0539] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes include enzymes from the mevalonate pathway (MVA).
[0540]Em outra modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol incluem enzimas da via do 2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato não mevalonato (MEP/DOXP).[0540] In another embodiment, steviol biosynthesis enzymes include enzymes from the 2-C-methyl-D-erythritol-4-non-mevalonate pathway (MEP / DOXP).
[0541]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol são selecionadas dentre o grupo composto por difosfato de geranilgeranila sintase, difosfato de copalila sintase, caureno sintase, caureno oxidase, ácido caurenoico 13- hidroxilase (KAH), esteviol sintetase, desoxixilulose 5-fosfato sintase (DXS), D-l- desoxixilulose 5-fosfato reductoisomerase (DXR), 4-difosfocitidil-2-C-metil-D-eritritol sintase (CMS), 4-difosfocitidil-2-C-metil-D-eritritol quinase (CMK), 4-difosfocitidil-2-C- metil-D-eritritol 2,4-ciclodifosfato sintase (MCS), 4-difosfato de 1-hidróxi-2-metil-2(E)- butenila sintase (HDS), 4-difosfato de 1-hidróxi-2-metil-2(E)-butenila redutase (HDR), acetoacetil-CoA tiolase, HMG-CoA redutase truncada, mevalonato quinase, fosfomevalonato quinase, mevalonato pirofosfato descarboxilase, citocromo P450 redutase etc.[0541] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes are selected from the group consisting of geranylgeranyl synthase diphosphate, copalyl synthase diphosphate, kaurene synthase, kaurene oxidase, kaurenic acid 13-hydroxylase (KAH), steviol synthetase, deoxyxylulose 5 -phosphate synthase (DXS), D1-deoxyxylulose 5-phosphate reductoisomerase (DXR), 4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol synthase (CMS), 4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase (CMK), 4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol 2,4-cyclodiphosphate synthase (MCS), 1-hydroxy-2-methyl-2 (E) - butenyl synthase (HDS) 4-diphosphate, 1-hydroxy-2-methyl-2 (E) -buthyl reductase (HDR) 4-diphosphate, acetoacetyl-CoA thiolase, truncated HMG-CoA reductase, mevalonate kinase, phosphomevalonate kinase, mevalonate pyrophosphate decarboxyl50 redoxase, cytocutyl4.
[0542]A UDP-glicosiltransferase pode ser qualquer UDP-glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol e/ou a um substrato de glicosídeo de esteviol para obter o glicosídeo de esteviol alvo.[0542] UDP-glycosyltransferase can be any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol and / or to a steviol glycoside substrate to obtain the target steviol glycoside.
[0543]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol e as UDP- glicosiltransferases são produzidas em uma célula microbiana. A célula microbiana pode ser, por exemplo, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp.,[0543] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes and UDP-glycosyltransferases are produced in a microbial cell. The microbial cell can be, for example, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp.,
Bacillus sp., Yarrowia sp. etc. Em outra modalidade, as UDP-glicosiltransferases são sintetizadas.Bacillus sp., Yarrowia sp. etc. In another embodiment, UDP-glycosyltransferases are synthesized.
[0544]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é selecionada dentre o grupo composto por UGT74G1, UGT85C2, UGT76G1, UGT91D2, UGTSl2, EUGT11 e UGTs com identidade de sequência de aminoácidos significativa (>85%, >86%, >87%, >88%, >89%, >90%, >91%, >92%, >93%, >94%, >95%, >96%, >97%, >98%, >99%) com esses polipeptídeos, além de moléculas de ácido nucleico isoladas que codifiquem essas UGTs.[0544] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is selected from the group consisting of UGT74G1, UGT85C2, UGT76G1, UGT91D2, UGTSl2, EUGT11 and UGTs with significant amino acid sequence identity (> 85%,> 86%,> 87% ,> 88%,> 89%,> 90%,> 91%,> 92%,> 93%,> 94%,> 95%,> 96%,> 97%,> 98%,> 99%) with these polypeptides, as well as isolated nucleic acid molecules that encode these UGTs.
[0545]Em uma modalidade, as enzimas da biossíntese do esteviol, as UGTs e o sistema de reciclagem da UDP-glicose fazem-se presentes em um micro- organismo (célula microbiana). O micro-organismo pode ser, por exemplo, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp., Bacillus sp., Yarrowia sp.[0545] In one embodiment, steviol biosynthesis enzymes, UGTs and the UDP-glucose recycling system are present in a micro-organism (microbial cell). The microorganism can be, for example, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp., Bacillus sp., Yarrowia sp.
[0546]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol ou a qualquer glicosídeo de esteviol com um grupo funcional -OH em C13 para obter um glicosídeo de esteviol alvo com uma ligação glicosídica entre -O-glicose e beta- glicopiranosídeo em C13. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0546] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol or any steviol glycoside with a -OH functional group on C13 to obtain a target steviol glycoside with a glycosidic bond between -O-glucose and beta-glycopyranoside at C13. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0547]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol ou a qualquer glicosídeo de esteviol inicial com um grupo funcional -COOH em C19 para obter um glicosídeo de esteviol alvo com uma ligação glicosídica entre -COO- glicose e beta-glicopiranosídeo em C19. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT74G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[0547] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviol or any initial steviol glycoside with a functional group -COOH at C19 to obtain a target steviol glycoside with a glycosidic bond between -COO- glucose and C19 beta-glucopyranoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT74G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[0548]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→2 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0548] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 2 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0549]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→3 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0549] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 3 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0550]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→4 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0550] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 4 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0551]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C19 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→6 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0551] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C19 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 6 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0552]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→2 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP-[0552] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 2 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0553]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→3 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0553] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 3 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0554]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→4 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0554] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 4 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0555]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose a qualquer glicose existente no lado C13 de qualquer glicosídeo de esteviol inicial para obter um glicosídeo de esteviol alvo com ao menos uma glicose adicional portando ao menos uma ligação glicosídica com beta 1→6 glicopiranosídeo na(s) ligação(ões) glicosídica(s) recém-formada(s). Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0555] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to any glucose on the C13 side of any initial steviol glycoside to obtain a target steviol glycoside with at least one glucose additional carrying at least one glycosidic bond with beta 1 → 6 glycopyranoside in the newly formed glycosidic bond (s). In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0556]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol para formar um esteviolmonosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0556] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol to form a steviolmonoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0557]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviol para formar o esteviolmonosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[0557] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviol to form steviolmonoside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT74G1.
[0558]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo para formar um esteviolbiosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0558] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviolmonoside to form a steviolbioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0559]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo para formar o esteviolbiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0559] In another embodiment, the UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the steviolmonoside to form the steviolbioside D. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0560]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo para formar um rubusosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[0560] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviolmonoside to form a rubusoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[0561]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo A para formar um rubusosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0561] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolmonoside A to form a rubusoside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0562]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo A para formar o esteviolbiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0562] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolmonoside A to form steviolbioside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0563]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolmonosídeo A para formar o esteviolbiosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0563] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolmonoside A to form steviolbioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0564]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo para formar o rebaudiosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0564] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the steviolbioside to form rebaudioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0565]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo para formar um esteviosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[0565] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the steviolbioside to form a stevioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[0566]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo D para formar o rebaudiosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0566] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside D to form rebaudioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0567]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo D para formar o rebaudiosídeo G. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[0567] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside D to form rebaudioside G. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[0568]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar um esteviosídeo. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0568] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rubusoside to form a stevioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTS12 or UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0569]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar o rebaudiosídeo G. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0569] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the rubusoside to form the rebaudioside G. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0570]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar o esteviosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0570] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rubusoside to form stevioside A. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0571]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rubusosídeo para formar o esteviosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0571] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rubusoside to form stevioside B. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0572]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo A para formar o esteviosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0572] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolbioside A to form stevioside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0573]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo A para formar o esteviosídeo C. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0573] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside A to form stevioside C. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0574]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo B para formar o esteviosídeo B. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0574] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to steviolbioside B to form stevioside B. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0575]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo B para formar o esteviosídeo C. Em uma modalidade específica, a[0575] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside B to form stevioside C. In a specific embodiment, the
UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0576]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo B para formar o rebaudiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT74G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT74G1.[0576] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to rebaudioside B to form rebaudioside A. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT74G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT74G1.
[0577]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo para formar o rebaudiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0577] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the stevioside to form rebaudioside A. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0578]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo para formar o rebaudiosídeo E. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0578] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the stevioside to form rebaudioside E. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85 % amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0579]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo para formar o rebaudiosídeo E2. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0579] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the stevioside to form the E2 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0580]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo G para formar o rebaudiosídeo A. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0580] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside G to form the rebaudioside A. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0581]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo G para formar o rebaudiosídeo E4. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0581] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside G to form the rebaudioside E4. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0582]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo G para formar o rebaudiosídeo E6. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0582] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside G to form the E6 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0583]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo A para formar o rebaudiosídeo E. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0583] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to stevioside A to form rebaudioside E. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0584]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo A para formar o rebaudiosídeo E4. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0584] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside A to form the E4 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0585]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo A para formar o rebaudiosídeo E3. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0585] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside A to form the E3 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0586]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo B para formar o rebaudiosídeo E2. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0586] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside B to form the E2 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0587]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo B para formar o rebaudiosídeo E6. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0587] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside B to form the E6 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0588]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviosídeo B para formar o rebaudiosídeo E3. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0588] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to stevioside B to form the E3 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0589]Em uma modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao esteviolbiosídeo C para formar o rebaudiosídeo E3. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT85C2.[0589] In one embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to steviolbioside C to form the E3 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT85C2.
[0590]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo A para formar o rebaudiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP-[0590] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to rebaudioside A to form rebaudioside D. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0591]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo A para formar o rebaudiosídeo I. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0591] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to rebaudioside A to form rebaudioside I. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0592]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E para formar o rebaudiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0592] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside E to form the rebaudioside D. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0593]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E para formar o rebaudiosídeo AM. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0593] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E rebaudioside to form the AM rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0594]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E2 para formar o rebaudiosídeo I. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0594] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to E2 rebaudioside to form rebaudioside I. In a specific modality, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0595]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E2 para formar o rebaudiosídeo AM. Em uma modalidade específica,[0595] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E2 rebaudioside to form the AM rebaudioside. In a specific modality,
a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.UDP-glycosyltransferase is UGTS12 or UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0596]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E4 para formar o rebaudiosídeo D. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0596] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E4 rebaudioside to form the rebaudioside D. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0597]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E4 para formar o rebaudiosídeo D7. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0597] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E4 rebaudioside to form the D7 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0598]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E6 para formar o rebaudiosídeo I. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0598] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E6 rebaudioside to form the rebaudioside I. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0599]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E6 para formar o rebaudiosídeo D7. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0599] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E6 rebaudioside to form the D7 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0600]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E3 para formar o rebaudiosídeo AM. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0600] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E3 rebaudioside to form the AM rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0601]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo E3 para formar o rebaudiosídeo D7. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0601] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the E3 rebaudioside to form the D7 rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0602]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo D para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0602] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside D to form the rebaudioside M. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0603]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo I para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0603] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to rebaudioside I to form rebaudioside M. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0604]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo AM para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0604] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the AM rebaudioside to form the M rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0605]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo AM para formar o rebaudiosídeo M4. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP-[0605] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the AM rebaudioside to form the M4 rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0606]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo D7 para formar o rebaudiosídeo M. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0606] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the D7 rebaudioside to form the M rebaudioside. In a specific modality, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTS12. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0607]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1a. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0607] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside M to form the rebaudioside 1a. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0608]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1b. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0608] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M rebaudioside to form the 1b rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0609]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1c. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0609] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M rebaudioside to form the 1c rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0610]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1d. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0610] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1d rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0611]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1e. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0611] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the rebaudioside 1e. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0612]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1f. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0612] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M rebaudioside to form the 1f rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0613]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1g. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0613] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1g rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0614]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1h. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0614] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1h rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0615]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1i. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0615] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the rebaudioside 1i. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0616]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1j. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0616] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the rebaudioside M to form the rebaudioside 1j. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0617]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1k. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0617] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1k rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0618]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1l. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0618] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1 l rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0619]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1m. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0619] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1 m rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0620]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1n. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0620] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1n rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0621]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1o. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0621] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1st rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0622]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1p. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0622] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1p rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0623]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1q. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0623] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1q rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0624]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1r. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0624] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1r rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0625]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1s. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTS32 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0625] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1s rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTS32 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0626]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M para formar o rebaudiosídeo 1t. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0626] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M rebaudioside to form the 1t rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0627]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2a. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0627] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2a rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0628]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2b. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0628] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2b rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0629]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2c. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0629] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2c rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0630]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2d. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0630] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2d rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0631]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2e. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0631] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2e rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0632]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2f. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0632] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2f rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0633]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2g. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0633] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2g rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0634]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2h. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0634] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2h rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0635]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2i. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0635] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2i rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0636]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2j. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0636] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the M4 rebaudioside to form the 2j rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0637]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2k. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0637] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2k rebaudioside. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0638]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2l. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0638] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2l rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0639]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2m. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0639] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2m rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0640]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2n. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2.[0640] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2n rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2.
[0641]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2o. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0641] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2nd rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0642]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2p. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0642] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2p rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0643]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2q. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0643] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2q rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0644]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2r. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0644] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2r rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0645]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 2s. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP-[0645] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 2s rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific modality, UDP-
glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0646]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase é qualquer UDP- glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose ao rebaudiosídeo M4 para formar o rebaudiosídeo 1q. Em uma modalidade específica, a UDP-glicosiltransferase é UGTSl2 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTSl2. Em outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é EUGT11, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com EUGT11. Em ainda outra modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT91D2, ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT91D2. Em uma modalidade específica, a UDP- glicosiltransferase é UGT76G1 ou uma UGT com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGT76G1.[0646] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase is any UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one unit of glucose to the M4 rebaudioside to form the 1q rebaudioside. In a specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is UGTSl2 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGTSl2. In another specific embodiment, the UDP-glycosyltransferase is EUGT11, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with EUGT11. In yet another specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT91D2, or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT91D2. In a specific embodiment, UDP-glycosyltransferase is UGT76G1 or a UGT with> 85% amino acid sequence identity with UGT76G1.
[0647]Como opção, o método da presente invenção compreende ainda reciclar a UDP para obter a UDP-glicose. Em uma modalidade, o método compreende reciclar a UDP providenciando-se um catalisador de reciclagem e um substrato de reciclagem, de tal modo que a biotransformação do esteviol e/ou do substrato de glicosídeo de esteviol no glicosídeo de esteviol alvo se dê usando quantidades catalíticas de UDP-glicosiltransferase e UDP-glicose.[0647] As an option, the method of the present invention further comprises recycling UDP to obtain UDP-glucose. In one embodiment, the method comprises recycling the UDP by providing a recycling catalyst and a recycling substrate, such that the biotransformation of the steviol and / or the steviol glycoside substrate into the target steviol glycoside occurs using catalytic amounts UDP-glycosyltransferase and UDP-glucose.
[0648]Em uma modalidade, o catalisador de reciclagem é a sacarose sintase SuSy_At ou uma sacarose sintase com >85% de identidade de sequência de aminoácidos com a SuSy_At.[0648] In one embodiment, the recycling catalyst is suSose synthase SuSy_At or sucrose synthase with> 85% amino acid sequence identity with SuSy_At.
[0649]Em uma modalidade, o substrato de reciclagem para o catalisador de reciclagem da UDP-glicose é a sacarose.[0649] In one embodiment, the recycling substrate for the UDP-glucose recycling catalyst is sucrose.
[0650]Como opção, o método da presente invenção compreende ainda o uso de transglicosidases que utilizam oligossacarídeos ou polissacarídeos como doadores de açúcar para modificar as moléculas de glicosídeo de esteviol alvo recipientes. Exemplos não exaustivos incluem a ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase), frutofuranosidase, amilase, sacarase, glicossucrase, beta-h-frutosidase, beta-frutosidase, sucrase, frutosilinvertase, invertase alcalina, invertase ácida, frutofuranosidase. Em algumas modalidades, a glicose e outro(s) açúcar(es) que não a glicose, incluindo, entre outros, a frutose, xilose, ramnose, arabinose, desoxiglicose, galactose, são transferidos aos glicosídeos de esteviol alvo recipientes. Em uma modalidade, o glicosídeo de esteviol recipiente é o rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r e/ou rebaudiosídeo 2s. Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol recipiente é o rebaudiosídeo M4. Em outra modalidade, o glicosídeo de esteviol recipiente é o SvG7.[0650] As an option, the method of the present invention further comprises the use of transglycosidases that use oligosaccharides or polysaccharides as sugar donors to modify the recipient steviol glycoside molecules. Non-exhaustive examples include cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase), fructofuranosidase, amylase, sucrase, glucosucrase, beta-h-fructidase, beta-fructidase, sucrase, fructosilvertase, alkaline invertase, acid invertase, fructofuranosidase. In some embodiments, glucose and sugar (s) other than glucose, including, among others, fructose, xylose, rhamnose, arabinose, deoxyglucose, galactose, are transferred to the target steviol glycosides in containers. In one embodiment, the recipient steviol glycoside is rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e, rebaudioside 2e , rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r and / or rebaudioside 2s. In another embodiment, the recipient steviol glycoside is the rebaudioside M4. In another embodiment, the recipient steviol glycoside is SvG7.
[0651]Em outra modalidade, a UDP-glicosiltransferase capaz de adicionar ao menos uma unidade de glicose à composição inicial glicosídeo de esteviol possui >85% de identidade de sequência de aminoácidos com UGTs selecionadas dentre a lista de números identificadores da GenInfo a seguir, de preferência dentre o grupo dado nas Tabelas 1 e 2.[0651] In another embodiment, UDP-glycosyltransferase capable of adding at least one glucose unit to the initial steviol glycoside composition has> 85% amino acid sequence identity with UGTs selected from the following list of GenInfo identifier numbers, preferably within the group given in Tables 1 and 2.
Tabela 1Table 1
Número GI Acesso OrigemGI Number Access Origin
190692175 ACE87855.1 Stevia rebaudiana190692175 ACE87855.1 Stevia rebaudiana
41469452 AAS07253.1 Oryza sativa41469452 AAS07253.1 Oryza sativa
62857204 BAD95881.1 Ipomoea nil62857204 BAD95881.1 Ipomoea nil
62857206 BAD95882.1 Ipomoea purperea62857206 BAD95882.1 Ipomoea purperea
56550539 BAD77944.1 Bellis perennis56550539 BAD77944.1 Bellis perennis
115454819 NP_001051010.1 Oryza sativa grupo Japonica115454819 NP_001051010.1 Oryza sativa Japonica group
115459312 NP_001053256.1 Oryza sativa grupo Japonica115459312 NP_001053256.1 Oryza sativa Japonica group
115471069 NP_001059133.1 Oryza sativa grupo Japonica115471069 NP_001059133.1 Oryza sativa Japonica group
115471071 NP_001059134.1 Oryza sativa grupo Japonica115471071 NP_001059134.1 Oryza sativa Japonica group
116310985 CAH67920.1 Oryza sativa grupo Indica116310985 CAH67920.1 Oryza sativa Indica group
116788066 ABK24743.1 Picea sitchensis116788066 ABK24743.1 Picea sitchensis
122209731 Q2V6J9.1 Fragaria x ananassa122209731 Q2V6J9.1 Fragaria x ananassa
125534461 EAY81009.1 Oryza saliva grupo Indica125534461 EAY81009.1 Oryza saliva group Indica
125559566 EAZ05102.1 Oryza saliva grupo Indica125559566 EAZ05102.1 Oryza saliva group Indica
125588307 EAZ28971.1 Oryza saliva grupo Japonica125588307 EAZ28971.1 Oryza saliva Japonica group
148907340 ABR16806.1 Picea sitchensis148907340 ABR16806.1 Picea sitchensis
148910082 ABR18123.1 Picea sitchensis148910082 ABR18123.1 Picea sitchensis
148910612 ABRI 8376.1 Picea sitchensis148910612 ABRI 8376.1 Picea sitchensis
15234195 NP_194486.1 Arabidopsis thaliana15234195 NP_194486.1 Arabidopsis thaliana
15239523 NP_200210.1 Arabidopsis thaliana15239523 NP_200210.1 Arabidopsis thaliana
15239937 NP_196793.1 Arabidopsis thaliana15239937 NP_196793.1 Arabidopsis thaliana
1685005 AAB36653.1 Nicotiana tabacum1685005 AAB36653.1 Nicotiana tabacum
183013903 ACC38471.1 Medicago truncatula183013903 ACC38471.1 Medicago truncatula
186478321 NP_172511.3 Arabidopsis thaliana186478321 NP_172511.3 Arabidopsis thaliana
187373030 ACD03249.1 Avena strigosa187373030 ACD03249.1 Avena strigosa
194701936 ACF85052.1 Zea mays194701936 ACF85052.1 Zea mays
19743740 AAL92461.1 Solanum lycopersicum19743740 AAL92461.1 Solanum lycopersicum
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222619587 EEE55719.1 Oryza sativa grupo Japonica222619587 EEE55719.1 Oryza sativa Japonica group
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225454342 XP_002275850.1 Vitis vinifera225454342 XP_002275850.1 Vitis vinifera
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238477377 ACR43489.1 Triticum aestivum238477377 ACR43489.1 Triticum aestivum
240254512 NP_565540.4 Arabidopsis thaliana240254512 NP_565540.4 Arabidopsis thaliana
2501497 Q43716.1 Petunia x hybrida2501497 Q43716.1 Petunia x hybrida
255555369 XP_002518721.1 Ricinus communis255555369 XP_002518721.1 Ricinus communis
26452040 BAC43110.1 Arabidopsis thaliana26452040 BAC43110.1 Arabidopsis thaliana
296088529 CBI37520.3 Vitis vinifera296088529 CBI37520.3 Vitis vinifera
297611791 NP_001067852.2 Oryza sativa grupo Japonica297611791 NP_001067852.2 Oryza sativa group Japonica
297795735 XP_002865752.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata297795735 XP_002865752.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata
297798502 XP_002867135.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata297798502 XP_002867135.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata
297820040 XP_002877903.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata297820040 XP_002877903.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata
297832276 XP_002884020.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata297832276 XP_002884020.1 Arabidopsis lyrata subsp. lyrata
302821107 XP_002992218.1 Selaginella moellendorffli302821107 XP_002992218.1 Selaginella moellendorffli
30680413 NP_179446.2 Arabidopsis thaliana30680413 NP_179446.2 Arabidopsis thaliana
319759266 ADV71369.1 Pueraria montana var. lobata319759266 ADV71369.1 Pueraria montana var. lobata
326507826 BAJ86656.1 Hordeum vulgare subsp.326507826 BAJ86656.1 Hordeum vulgare subsp.
VulgareVulgare
343457675 AEM37036.1 Brassica rapa subsp. oleifera343457675 AEM37036.1 Brassica rapa subsp. oleifera
350534960 NP_001234680.1 Solanum lycopersicum350534960 NP_001234680.1 Solanum lycopersicum
356501328 XP_003519477.1 Glycine max356501328 XP_003519477.1 Glycine max
356522586 XP_003529927.1 Glycine max356522586 XP_003529927.1 Glycine max
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357445733 XP_003593144.1 Medicago truncatula357445733 XP_003593144.1 Medicago truncatula
357452783 XP_003596668.1 Medicago truncatula357452783 XP_003596668.1 Medicago truncatula
357474493 XP_003607531.1 Medicago truncatula357474493 XP_003607531.1 Medicago truncatula
357500579 XP_003620578.1 Medicago truncatula357500579 XP_003620578.1 Medicago truncatula
357504691 XP_003622634.1 Medicago truncatula357504691 XP_003622634.1 Medicago truncatula
359477998 XP_003632051.1 Vitis vinifera359477998 XP_003632051.1 Vitis vinifera
359487055 XP_002271587 Vitis vinifera359487055 XP_002271587 Vitis vinifera
359495869 XP_003635104.1 Vitis vinifera359495869 XP_003635104.1 Vitis vinifera
387135134 AFJ52948.1 Linum usitatissimum387135134 AFJ52948.1 Linum usitatissimum
387135176 AFJ52969.1 Linum usitatissimum387135176 AFJ52969.1 Linum usitatissimum
387135192 AFJ52977.1 Linum usitatissimum387135192 AFJ52977.1 Linum usitatissimum
387135282 AFJ53022.1 Linum usitatissimum387135282 AFJ53022.1 Linum usitatissimum
387135302 AFJ53032.1 Linum usitatissimum387135302 AFJ53032.1 Linum usitatissimum
387135312 AFJ53037.1 Linum usitatissimum387135312 AFJ53037.1 Linum usitatissimum
388519407 AFK47765.1 Medicago truncatula388519407 AFK47765.1 Medicago truncatula
393887646 AFN26668.1 Barbarea vulgaris subsp. arcuata393887646 AFN26668.1 Barbarea vulgaris subsp. arcuata
414888074 DAA64088.1 Zea mays414888074 DAA64088.1 Zea mays
42572855 NP_974524.1 Arabidopsis thaliana42572855 NP_974524.1 Arabidopsis thaliana
449440433 XP_004137989.1 Cucumis sativus449440433 XP_004137989.1 Cucumis sativus
449446454 XP_004140986.1 Cucumis sativus449446454 XP_004140986.1 Cucumis sativus
449449004 XP_004142255.1 Cucumis sativus449449004 XP_004142255.1 Cucumis sativus
449451593 XP_004143546.1 Cucumis sativus449451593 XP_004143546.1 Cucumis sativus
449515857 XP_004164964.1 Cucumis sativus449515857 XP_004164964.1 Cucumis sativus
460382095 XP_004236775.1 Solanum lycopersicum460382095 XP_004236775.1 Solanum lycopersicum
460409128 XP_004249992.1 Solanum lycopersicum460409128 XP_004249992.1 Solanum lycopersicum
460409461 XP_004250157.1 Solanum lycopersicum460409461 XP_004250157.1 Solanum lycopersicum
460409465 XP_004250159.1 Solanum lycopersicum460409465 XP_004250159.1 Solanum lycopersicum
462396388 EMJ02187.1 Prunus persica462396388 EMJ02187.1 Prunus persica
462402118 EMJ07675.1 Prunus persica462402118 EMJ07675.1 Prunus persica
462409359 EMJ 14693.1 Prunus persica462409359 EMJ 14693.1 Prunus persica
462416923 EMJ21660.1 Prunus persica462416923 EMJ21660.1 Prunus persica
46806235 BAD17459.1 Oryza sativa grupo Japonica46806235 BAD17459.1 Oryza sativa Japonica group
470104266 XP_004288529.1 Fragaria vesca subsp. vesca470104266 XP_004288529.1 Fragaria vesca subsp. vesca
470142008 XP_004306714.1 Fragaria vesca subsp. vesca470142008 XP_004306714.1 Fragaria vesca subsp. vesca
475432777 EMT01232.1 Aegilops tauschii475432777 EMT01232.1 Aegilops tauschii
51090402 BAD35324.1 Oryza sativa grupo Japonica51090402 BAD35324.1 Oryza sativa Japonica group
Tabela 2Table 2
Número GI Acesso Origem ReferênciaGI Number Access Origin Reference
InternaInternal
460409128 XP.004249992.1 Solanum lycopersicum UGTSl460409128 XP.004249992.1 Solanum lycopersicum UGTSl
460386018 XP.004238697.1 Solanum lycopersicum -460386018 XP.004238697.1 Solanum lycopersicum -
460409134 XP.004249995.1 Solanum lycopersicum -460409134 XP.004249995.1 Solanum lycopersicum -
460410132 XP.004250485.1 Solanum lycopersicum UGTSl2460410132 XP.004250485.1 Solanum lycopersicum UGTSl2
460410130 XP.004250484.1 Solanum lycopersicum -460410130 XP.004250484.1 Solanum lycopersicum -
460410128 XP.004250483.1 Solanum lycopersicum -460410128 XP.004250483.1 Solanum lycopersicum -
460378310 XP.004234916.1 Solanum lycopersicum -460378310 XP.004234916.1 Solanum lycopersicum -
209954733 BAG80557.1 Lycium barbarum UGTLB 209954725 BAG80553.1 Lycium barbarum -209954733 BAG80557.1 Lycium barbarum UGTLB 209954725 BAG80553.1 Lycium barbarum -
[0652]Uma modalidade da presente invenção refere-se a uma célula microbiana que compreende uma enzima, isto é, uma enzima capaz de converter a composição inicial no glicosídeo de esteviol alvo. Logo, algumas modalidades do presente método incluem colocar um micro-organismos em contato com um meio contendo a composição inicial a fim de obter um meio que compreenda ao menos um glicosídeo de esteviol alvo.[0652] One embodiment of the present invention relates to a microbial cell that comprises an enzyme, that is, an enzyme capable of converting the initial composition into the target steviol glycoside. Therefore, some embodiments of the present method include placing a microorganism in contact with a medium containing the initial composition in order to obtain a medium that comprises at least one target steviol glycoside.
[0653]O micro-organismo pode ser qualquer micro-organismo que possua a(s) enzima(s) necessária(s) para converter a composição inicial no(s) glicosídeo(s) de esteviol alvo. Essas enzimas são codificadas dentro do genoma do micro- organismo.[0653] The microorganism can be any microorganism that has the necessary enzyme (s) to convert the initial composition into the target steviol glycoside (s). These enzymes are encoded within the microorganism's genome.
[0654]Micro-organismos adequados incluem, entre outros, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp., Bacillus sp., Yarrowia sp. etc.[0654] Suitable microorganisms include, but are not limited to, E. coli, Saccharomyces sp., Aspergillus sp., Pichia sp., Bacillus sp., Yarrowia sp. etc.
[0655]Em uma modalidade, o micro-organismo encontra-se livre quando colocado em contato com a composição inicial.[0655] In one embodiment, the microorganism is free when placed in contact with the initial composition.
[0656]Em outra modalidade, o micro-organismo encontra-se imobilizado quando colocado em contato com a composição inicial. Por exemplo, o micro- organismo pode ser imobilizado em um suporte sólido feito de materiais inorgânicos ou orgânicos. Exemplos não exaustivos de suportes sólidos adequados para imobilizar os micro-organismos incluem celulose derivatizada ou vidro, cerâmica, óxidos de metal ou membranas. O micro-organismo pode ser imobilizado no suporte sólido, por exemplo, por ligação covalente, por adsorção, reticulação, aprisionamento ou encapsulação.[0656] In another modality, the microorganism is immobilized when placed in contact with the initial composition. For example, the microorganism can be immobilized on a solid support made of inorganic or organic materials. Non-exhaustive examples of solid supports suitable for immobilizing microorganisms include derivatized cellulose or glass, ceramics, metal oxides or membranes. The microorganism can be immobilized on the solid support, for example, by covalent bonding, by adsorption, cross-linking, entrapment or encapsulation.
[0657]Em ainda outra modalidade, a enzima capaz de converter a composição inicial no glicosídeo de esteviol alvo é secretada do micro-organismo ao meio de reação.[0657] In yet another embodiment, the enzyme capable of converting the initial composition into the target steviol glycoside is secreted from the microorganism to the reaction medium.
[0658]O glicosídeo de esteviol alvo é opcionalmente purificado. A purificação do glicosídeo de esteviol alvo a partir do meio de reação pode ser obtida por ao menos um método adequado para obter uma composição de glicosídeo de esteviol alvo altamente purificada. Métodos adequados incluem cristalização, separação por membranas, centrifugação, extração (fase líquida ou sólida), separação cromatográfica, HPLC (preparativa ou analítica) ou uma combinação desses métodos.[0658] The target steviol glycoside is optionally purified. Purification of the target steviol glycoside from the reaction medium can be achieved by at least one suitable method to obtain a highly purified target steviol glycoside composition. Suitable methods include crystallization, membrane separation, centrifugation, extraction (liquid or solid phase), chromatographic separation, HPLC (preparative or analytical) or a combination of these methods.
UsosUses
[0659]Um ou mais glicosídeos alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, obtidos de acordo com a presente invenção podem ser usados "tal como obtidos" ou em combinação a outros edulcorantes, essências, ingredientes alimentares e combinações desses.[0659] One or more highly purified target glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside rebaudioside 1f, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1n, rebaudioside 1, rebaudioside 1p, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2 , rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, reb audioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or used "as obtained" or in combination with other sweeteners, essences, food ingredients and combinations thereof.
[0660]Exemplos não exaustivos de essências incluem, entre outras, lima, limão, laranja, fruta, banana, uva, pera, abacaxi, manga, bagos, amêndoas amargas, cola, canela, açúcar, algodão-doce, baunilha e combinações dessas.[0660] Non-exhaustive examples of essences include, among others, lime, lemon, orange, fruit, banana, grape, pear, pineapple, mango, berries, bitter almonds, cola, cinnamon, sugar, cotton candy, vanilla and combinations thereof .
[0661]Exemplos não exaustivos de outros ingredientes alimentares incluem, entre outros, acidulantes, ácidos orgânicos, aminoácidos, agentes corantes, agentes de volume, amidos modificados, gomas, texturizantes, conservantes, cafeína, antioxidantes, emulsificantes, estabilizantes, espessantes, agentes gelificantes e combinações desses.[0661] Non-exhaustive examples of other food ingredients include, but are not limited to, acidulants, organic acids, amino acids, coloring agents, bulking agents, modified starches, gums, texturizers, preservatives, caffeine, antioxidants, emulsifiers, stabilizers, thickeners, gelling agents and combinations of these.
[0662]Um ou mais glicosídeos alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 obtidos de acordo com a presente invenção podem ser preparados em várias formas polimórficas, incluindo, entre outras, hidratos, solvatos, formas anidras, formas amorfas e combinações dessas.[0662] One or more highly purified target glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside rebaudioside 1f, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1n, rebaudioside 1, rebaudioside 1p, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2 , rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, reb audioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2 in accordance with this agreement various polymorphic forms, including, but not limited to, hydrates, solvates, anhydrous forms, amorphous forms and combinations thereof.
[0663]Um ou mais glicosídeos alvo altamente purificados, em particular esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 obtidos de acordo com a presente invenção podem ser incorporados como um edulcorante natural de alta intensidade em gêneros alimentícios, bebidas, composições farmacêuticas, cosméticos, chicletes, produtos de mesa, cereais, lacticínios, cremes dentais e outras composições para a cavidade oral etc.[0663] One or more highly purified target glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside B, stevioside A rebaudioside E, rebaudioside E2, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1q, rebaudioside 1q, rebaudioside 1q, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebau dioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or a high intensity natural sweetener in foodstuffs, beverages, pharmaceutical compositions, cosmetics, chewing gum, tableware, cereals, dairy products, toothpastes and other compositions for the oral cavity etc.
[0664]Em algumas modalidades, um ou mais glicosídeos alvo altamente purificados da presente invenção fazem-se presentes em gêneros alimentícios, bebidas, composições farmacêuticas, cosméticos, chicletes, produtos de mesa, cereais, lacticínios, cremes dentais e outras composições para a cavidade oral etc.[0664] In some embodiments, one or more highly purified target glycosides of the present invention are present in foodstuffs, beverages, pharmaceutical compositions, cosmetics, chewing gum, table products, cereals, dairy products, toothpastes and other cavity compositions oral etc.
em uma quantidade de cerca de 0,0001% a cerca de 12% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 0,0001% em peso, de cerca de 0,0005% em peso, de cerca de 0,001% em peso, de cerca de 0,005% em peso, de cerca de 0,01% em peso, de cerca de 0,05% em peso, de cerca de 0,1% em peso, de cerca de 0,5% em peso, de cerca de 1,0% em peso, de cerca de 1,5% em peso, de cerca de 2,0% em peso, de cerca de 2,5% em peso, de cerca de 3,0% em peso, de cerca de 3,5% em peso, de cerca de 4,0% em peso, de cerca de 4,5% em peso, de cerca de 5,0% em peso, de cerca de 5,5% em peso, de cerca de 6,0% em peso, de cerca de 6,5% em peso, de cerca de 7,0% em peso, de cerca de 7,5% em peso, de cerca de 8,0% em peso, de cerca de 8,5% em peso, de cerca de 9,0% em peso, de cerca de 9,5% em peso, de cerca de 10,0% em peso, de cerca de 10,5% em peso, de cerca de 11,0% em peso, de cerca de 11,5% em peso ou de cerca de 12,0% em peso.in an amount from about 0.0001% to about 12% by weight, such as, for example, from about 0.0001% by weight, from about 0.0005% by weight, from about 0.001% in weight, about 0.005% by weight, about 0.01% by weight, about 0.05% by weight, about 0.1% by weight, about 0.5% by weight, about 1.0 wt%, about 1.5 wt%, about 2.0 wt%, about 2.5 wt%, about 3.0 wt%, about 3.5% by weight, about 4.0% by weight, about 4.5% by weight, about 5.0% by weight, about 5.5% by weight, about 6.0% by weight, about 6.5% by weight, about 7.0% by weight, about 7.5% by weight, about 8.0% by weight, about 8.5% by weight, about 9.0% by weight, about 9.5% by weight, about 10.0% by weight, about 10.5% by weight, about 11.0% by weight, about 11.5% by weight or about 12.0% by weight.
[0665]Em uma modalidade específica, o edulcorante se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,0001% em peso a cerca de 8% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 0,0001% em peso a cerca de 0,0005% em peso, de cerca de 0,0005% em peso a cerca de 0,001% em peso, de cerca de 0,001% em peso a cerca de 0,005% em peso, de cerca de 0,005% em peso a cerca de 0,01% em peso, de cerca de 0,01% em peso a cerca de 0,05% em peso, de cerca de 0,05% em peso a cerca de 0,1% em peso, de cerca de 0,1% em peso a cerca de 0,5% em peso, a cerca de 0,5% em peso a cerca de 1% em peso, de cerca de 1% em peso a cerca de 2% em peso, de cerca de 2% em peso a cerca de 3% em peso, de cerca de 3% em peso a cerca de 4% em peso, de cerca de 4% em peso a cerca de 5% em peso, de cerca de 5% em peso a cerca de 6% em peso, de cerca de 6% em peso a cerca de 7% em peso, e de cerca de 7% em peso a cerca de 8% em peso.[0665] In a specific embodiment, the sweetener is present in the drink in an amount of about 0.0001% by weight to about 8% by weight, such as, for example, from about 0.0001% by weight to about 0.0005% by weight, from about 0.0005% by weight to about 0.001% by weight, from about 0.001% by weight to about 0.005% by weight, from about 0.005% by weight to about 0.01% by weight, from about 0.01% by weight to about 0.05% by weight, from about 0.05% by weight to about 0.1% by weight, from about 0.1% by weight to about 0.5% by weight, to about 0.5% by weight to about 1% by weight, from about 1% by weight to about 2% by weight, from about from 2% by weight to about 3% by weight, from about 3% by weight to about 4% by weight, from about 4% by weight to about 5% by weight, from about 5% by weight at about 6% by weight, from about 6% by weight to about 7% by weight, and from about 7% by weight to about 8% by weight.
[0666]Um ou mais glicosídeos alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A,[0666] One or more highly purified target glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, strevioside B THE,
rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6,rebaudioside E, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6,
rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM,rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM,
rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a,rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1a,
rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e,rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e,
rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i,rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i,
rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m,rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m,
rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q,rebaudioside 1n, rebaudioside 1st, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q,
rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a,rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a,
rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e,rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e,
rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i,rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i,
rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m,rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m,
rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q,rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q,
rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s, SvG7 e/ou combinações desses, obtidos de acordo com a presente invenção podem ser empregados como um composto edulcorante ou podem ser usados junto com ao menos um edulcorante de alta intensidade de ocorrência natural, tal como dulcosídeo A, dulcosídeo B, dulcosídeo C, dulcosídeo D, rebaudiosídeo A2, rebaudiosídeo A3, rebaudiosídeo A4,rebaudioside 2r, rebaudioside 2s, SvG7 and / or combinations thereof, obtained in accordance with the present invention can be used as a sweetening compound or can be used together with at least one naturally occurring high-intensity sweetener, such as dulcoside A, dulcoside B, dulcoside C, dulcoside D, rebaudioside A2, rebaudioside A3, rebaudioside A4,
rebaudiosídeo B2, rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo C2, rebaudiosídeo C3,rebaudioside B2, rebaudioside C, rebaudioside C2, rebaudioside C3,
rebaudiosídeo C4, rebaudiosídeo C5, rebaudiosídeo C6, rebaudiosídeo D2,rebaudioside C4, rebaudioside C5, rebaudioside C6, rebaudioside D2,
rebaudiosídeo D3, rebaudiosídeo D4, rebaudiosídeo D5, rebaudiosídeo D6,rebaudioside D3, rebaudioside D4, rebaudioside D5, rebaudioside D6,
rebaudiosídeo D8, rebaudiosídeo E5, rebaudiosídeo E7, rebaudiosídeo F,rebaudioside D8, rebaudioside E5, rebaudioside E7, rebaudioside F,
rebaudiosídeo F2, rebaudiosídeo F3, rebaudiosídeo H, rebaudiosídeo H2,rebaudioside F2, rebaudioside F3, rebaudioside H, rebaudioside H2,
rebaudiosídeo H3, rebaudiosídeo H4, rebaudiosídeo H5, rebaudiosídeo H6,rebaudioside H3, rebaudioside H4, rebaudioside H5, rebaudioside H6,
rebaudiosídeo I2, rebaudiosídeo I3, rebaudiosídeo J, rebaudiosídeo K,rebaudioside I2, rebaudioside I3, rebaudioside J, rebaudioside K,
rebaudiosídeo K2, rebaudiosídeo KA, rebaudiosídeo L, rebaudiosídeo M2,rebaudioside K2, rebaudioside KA, rebaudioside L, rebaudioside M2,
rebaudiosídeo M3, rebaudiosídeo N, rebaudiosídeo N2, rebaudiosídeo N3,rebaudioside M3, rebaudioside N, rebaudioside N2, rebaudioside N3,
rebaudiosídeo N4, rebaudiosídeo N5, rebaudiosídeo O, rebaudiosídeo O2,rebaudioside N4, rebaudioside N5, rebaudioside O, rebaudioside O2,
rebaudiosídeo O3, rebaudiosídeo O4, rebaudiosídeo Q, rebaudiosídeo Q2, rebaudiosídeo Q3, rebaudiosídeo R, rebaudiosídeo S, rebaudiosídeo T, rebaudiosídeo T1, rebaudiosídeo U, rebaudiosídeo U2, rebaudiosídeo V, rebaudiosídeo V2, rebaudiosídeo V3, rebaudiosídeo W, rebaudiosídeo W2, rebaudiosídeo W3, rebaudiosídeo Y, rebaudiosídeo Z1, rebaudiosídeo Z2, esteviolbiosídeo C, esteviolbiosídeo E, esteviosídeo D, esteviosídeo E, esteviosídeo E2, esteviosídeo F, esteviosídeo G, esteviosídeo H, mogrosídeos, brazzeína, neohesperidina dihidrocalcona, ácido glicirrízico e seus sais, taumatina, perillartina, pernandulcina, mucuroziosídeos, baiyunosídeo, flomisosídeo-I, ácido dimetil- hexahidrofluoreno-dicarboxílico, abrusosídeos, periandrina, carnosiflosídeos, ciclocariosídeo, pterocariosídeos, polipodosídeo A, brasilina, hernandulcina, filodulcina, glicifilina, florizina, trilobatina, dihidroflavonol, dihidroquercetin-3-acetato, neoastilibina, trans-cinamaldeíco, monatina, sais de monatina, outros edulcorantes derivados de indol, seligueaína A, hematoxilina, monelina, osladina, pterocariosídeo A, pterocariosídeo B, mabinlina, pentadina, miraculina, curculina, neoculina, ácido clorogênico, cinarina, edulcorante Luo Han Guo, mogrosídeo V, siamenosídeo, siratose e combinações desses.rebaudioside O3, rebaudioside O4, rebaudioside Q2, rebaudioside Q3, rebaudioside R, rebaudioside S, rebaudioside T, rebaudioside U, rebaudioside V2, rebaudioside V2, rebaudioside V2, rebaudioside V2, rebaudioside V2, rebaudioside V2 , rebaudioside Y, rebaudioside Z1, rebaudioside Z2, steviolbioside C, steviolbioside E, stevioside D, stevioside E, stevioside E2, stevioside F, stevioside G, stevioside H, mogrosides, brazzein, hisheshydrohydrate and peroxyacrylate; , pernandulcin, mucuroziosides, baiyunoside, flomisoside-I, dimethyl-hexahydrofluorene-dicarboxylic acid, abrusosides, periandrine, carnosiflosides, cyclocarioside, pterocariosides, polypeptide A, brasilina, hernandulcina, filodulhidrin, trifluorohydrin, glyphiline, glyphyl , neoastilibine, trans-cinnamaldehyde, monatin, monatin salts, others and sweeteners derived from indole, seligueaine A, hematoxylin, monelin, osladin, pterocarioside A, pterocarioside B, mabinline, pentadine, miraculin, curculine, neoculin, chlorogenic acid, cinnarine, sweetener Luo Han Guo, mogroside V, siamenes and combinations.
[0667]Em uma modalidade específica, o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n,[0667] In a specific embodiment, steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, reudioside E, rebaudios rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside M, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1b , rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n,
rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r,rebaudioside 1st, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r,
rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b,rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b,
rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f,rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f,
rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j,rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j,
rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n,rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n,
rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r,rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r,
rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 podem ser usados em uma composição edulcorante que compreende um composto selecionado dentre o grupo composto por dulcosídeorebaudioside 2s and / or SvG7 can be used in a sweetening composition comprising a compound selected from the group consisting of dulcoside
A, dulcosídeo B, dulcosídeo C, dulcosídeo D, rebaudiosídeo A2, rebaudiosídeo A3,A, dulcoside B, dulcoside C, dulcoside D, rebaudioside A2, rebaudioside A3,
rebaudiosídeo A4, rebaudiosídeo B2, rebaudiosídeo C, rebaudiosídeo C2,rebaudioside A4, rebaudioside B2, rebaudioside C, rebaudioside C2,
rebaudiosídeo C3, rebaudiosídeo C4, rebaudiosídeo C5, rebaudiosídeo C6,rebaudioside C3, rebaudioside C4, rebaudioside C5, rebaudioside C6,
rebaudiosídeo D2, rebaudiosídeo D3, rebaudiosídeo D4, rebaudiosídeo D5,rebaudioside D2, rebaudioside D3, rebaudioside D4, rebaudioside D5,
rebaudiosídeo D6, rebaudiosídeo D8, rebaudiosídeo E5, rebaudiosídeo E7,rebaudioside D6, rebaudioside D8, rebaudioside E5, rebaudioside E7,
rebaudiosídeo F, rebaudiosídeo F2, rebaudiosídeo F3, rebaudiosídeo H,rebaudioside F, rebaudioside F2, rebaudioside F3, rebaudioside H,
rebaudiosídeo H2, rebaudiosídeo H3, rebaudiosídeo H4, rebaudiosídeo H5,rebaudioside H2, rebaudioside H3, rebaudioside H4, rebaudioside H5,
rebaudiosídeo H6, rebaudiosídeo I2, rebaudiosídeo I3, rebaudiosídeo J, rebaudiosídeo K, rebaudiosídeo K2, rebaudiosídeo KA, rebaudiosídeo L,rebaudioside H6, rebaudioside I2, rebaudioside I3, rebaudioside J, rebaudioside K, rebaudioside K2, rebaudioside KA, rebaudioside L,
rebaudiosídeo M2, rebaudiosídeo M3, rebaudiosídeo N, rebaudiosídeo N2,rebaudioside M2, rebaudioside M3, rebaudioside N, rebaudioside N2,
rebaudiosídeo N3, rebaudiosídeo N4, rebaudiosídeo N5, rebaudiosídeo O,rebaudioside N3, rebaudioside N4, rebaudioside N5, rebaudioside O,
rebaudiosídeo O2, rebaudiosídeo O3, rebaudiosídeo O4, rebaudiosídeo Q,rebaudioside O2, rebaudioside O3, rebaudioside O4, rebaudioside Q,
rebaudiosídeo Q2, rebaudiosídeo Q3, rebaudiosídeo R, rebaudiosídeo S,rebaudioside Q2, rebaudioside Q3, rebaudioside R, rebaudioside S,
rebaudiosídeo T, rebaudiosídeo T1, rebaudiosídeo U, rebaudiosídeo U2,rebaudioside T, rebaudioside T1, rebaudioside U, rebaudioside U2,
rebaudiosídeo V, rebaudiosídeo V2, rebaudiosídeo V3, rebaudiosídeo W,rebaudioside V, rebaudioside V2, rebaudioside V3, rebaudioside W,
rebaudiosídeo W2, rebaudiosídeo W3, rebaudiosídeo Y, rebaudiosídeo Z1,rebaudioside W2, rebaudioside W3, rebaudioside Y, rebaudioside Z1,
rebaudiosídeo Z2, esteviolbiosídeo C, esteviolbiosídeo E, esteviosídeo D,rebaudioside Z2, steviolbioside C, steviolbioside E, stevioside D,
esteviosídeo E, esteviosídeo E2, esteviosídeo F, esteviosídeo G, esteviosídeo H,stevioside E, stevioside E2, stevioside F, stevioside G, stevioside H,
NSF-O2, Mogrosídeo V, siratose, Luo Han Guo, alulose, alose, D-tagatose, eritritol e combinações desses.NSF-O2, Mogroside V, siratosis, Luo Han Guo, allulose, alose, D-tagatose, erythritol and combinations thereof.
[0668]Um ou mais glicosídeos alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, também podem ser usados em combinação a edulcorantes de alta intensidade sintéticos, tais como sucralose, acessulfame de potássio, aspartame, alitame, sacarina, neohesperidina dihidrocalcona, ciclamato, neotame, dulcina, suosan advantame, sais dos mesmos e combinações desses.[0668] One or more highly purified target glycosides, in particular the steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B, stevioside B A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1n, rebaudioside 1, rebaudioside 1p, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2 , rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, reb audioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or sv synthetic intensities, such as sucralose, acesulfame potassium, aspartame, alitame, saccharin, neohesperidine dihydrocalcona, cyclamate, neotame, dulcin, suosan advantame, salts thereof and combinations thereof.
[0669]Além disso, um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A,[0669] In addition, one or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G rebaudioside, stevioside A,
esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeostevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside
E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D,E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D,
rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M,rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M,
rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c,rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c,
rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g,rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g,
rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k,rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k,
rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o,rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1st,
rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s,rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s,
rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c,rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c,
rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g,rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g,
rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k,rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k,
rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o,rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd,
rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7,rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7,
podem ser usados em combinação a supressores edulcorantes naturais, tais como ácido gimnêmico, hodulcina, zizifina, lactisol e outros.they can be used in combination with natural sweetening suppressants, such as gymnemic acid, hodulcin, zizifin, lactisol and others.
O esteviolmonosídeo,Steviolmonoside,
esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeosteviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside
G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeoG, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside
E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3,E, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3,
rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7,rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside D7,
rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b,rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b,
rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f,rebaudioside 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f,
rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j,rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j,
rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n,rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n,
rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r,rebaudioside 1st, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r,
rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b,rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b,
rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f,rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f,
rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 também podem ser combinados a vários realçadores de sabor umami. O esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 podem ser misturados a aminoácidos de sabor umami e doces, tais como glutamato, ácido aspártico, glicina, alanina, treonina, prolina, serina, glutamato, lisina, triptofano e combinações desses.rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, reudioside umami flavor. Steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside B, stevioside C, rebaudioside E, rebaudios E, rebaudios E, rebaudios4 , rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1e, rebaudioside 1e, rebaudioside 1e, rebaudioside 1e 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 2a, rebaudioside 2a, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, re baudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7 can be mixed with amino acids with umami flavor and sweet, such as glutamate, aspartic acid, glycine, aspartic, glycine, aspartic, glycine , proline, serine, glutamate, lysine, tryptophan and combinations thereof.
[0670]Um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B,[0670] One or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G rebaudioside, stevioside A, stevioside
esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, podem ser usados em combinação a um ou mais aditivos selecionados dentre o grupo composto por carboidratos, polióis, aminoácidos e seus sais correspondentes, poliaminoácidos, e seus sais correspondentes, ácidos de açúcar e seus sais correspondentes, nucleotídeos, ácidos orgânicos, ácidos inorgânicos, sais orgânicos incluindo sais de ácido orgânicos e sais de base orgânicos, sais inorgânicos, compostos amargos, essências e ingredientes aromatizantes, compostos adstringentes, proteínas ou hidrolisados de proteínas, tensoativos, emulsificantes, flavonoides, álcoois, polímeros e combinações desses.stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside M, rebaudioside M, rebaudioside 1, rebaudioside M4, rebaudioside M4, , rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1m, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1p 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2l, rebaudioside 2l, rebaudioside 2l, rebaudioside 2l, rebaudioside 2l, rebaudioside 2l rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, can be used in combination with one or more selected additives among the group consisting of carbohydrates, polyols, amino acids and their corresponding salts, polyamino acids, and their corresponding salts, sugar acids and their corresponding salts, nucleotides, organic acids, inorganic acids, organic salts including organic acid salts and base salts organic, inorganic salts, bitter compounds, flavoring essences and ingredients, astringent compounds, proteins or protein hydrolysates, surfactants, emulsifiers, flavonoids, alcohols, polymers and combinations thereof.
[0671]Um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I,[0671] One or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G rebaudioside, stevioside A, stevioside , rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I,
rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4,rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4,
rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d,rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d,
rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h,rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h,
rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l,rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l,
rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p,rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1st, rebaudioside 1p,
rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t,rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t,
rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d,rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d,
rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h,rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h,
rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l,rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l,
rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p,rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p,
rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, podem ser combinados a polióis ou álcoois de açúcar.rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, can be combined with polyols or sugar alcohols.
O termo "poliol" refere-se a uma molécula que contém mais de um grupo hidroxila.The term "polyol" refers to a molecule that contains more than one hydroxyl group.
Um poliol pode ser um diol, triol ou tetraol contendo 2, 3 e 4 grupos hidroxila, respectivamente.A polyol can be a diol, triol or tetraol containing 2, 3 and 4 hydroxyl groups, respectively.
Um poliol também pode conter mais de quatro grupos hidroxila, tais como um pentaol, hexaol, heptaol ou seus semelhantes, que contêm 5, 6 ou 7 grupos hidroxila, respectivamente.A polyol can also contain more than four hydroxyl groups, such as a pentaol, hexaol, heptaol or the like, which contain 5, 6 or 7 hydroxyl groups, respectively.
Além disso, um poliol também pode ser um álcool de açúcar, álcool polihídrico ou poliálcool que seja uma forma reduzida de um carboibrato, em que o grupo carbonilaIn addition, a polyol can also be a sugar alcohol, polyhydric alcohol or polyalcohol that is a reduced form of a carbohydrate, where the carbonyl group
(aldeído ou cetona, açúcar redutor) foi reduzido a um grupo hidroxila primário ou secundário.(aldehyde or ketone, reducing sugar) was reduced to a primary or secondary hydroxyl group.
Exemplos de polióis incluem, entre outros, eritritol, maltitol, manitol,Examples of polyols include, but are not limited to, erythritol, maltitol, mannitol,
sorbitol, lactitol, xilitol, inositol, isomalte, propileno glicol, glicerol, treitol, galactitol,sorbitol, lactitol, xylitol, inositol, isomalt, propylene glycol, glycerol, treitol, galactitol,
isomaltulose hidrogenada, isomalto-oligossacarídeos reduzidos, xilo-hydrogenated isomaltulose, reduced isomalto-oligosaccharides, xylo-
oligossacarídeos reduzidos, gentio-oligossacarídeos reduzidos, xarope de maltose reduzido, xarope de glicose reduzido, hidrolisados de amido hidrogenado,reduced oligosaccharides, reduced gentio-reduced oligosaccharides, reduced maltose syrup, reduced glucose syrup, hydrogenated starch hydrolysates,
poliglicitóis e álcoois de açúcar ou quaisquer outros carboidratos capazes de ser reduzidos que não afetem adversamente o sabor da composição edulcorante.polyglycitols and sugar alcohols or any other carbohydrates capable of being reduced that do not adversely affect the taste of the sweetening composition.
[0672]Um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, podem ser combinados a edulcorantes de calorias reduzidas, tais como, por exemplo, D- tagatose, L-açúcares, L-sorbose, L-arabinose e combinações desses.[0672] One or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G rebaudioside, stevioside A, stevioside, stevioside A, stevioside , rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1p rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudios ideo 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2m, rebaudioside 2d, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudias e ser, rewud reduced, such as, for example, D-tagatose, L-sugars, L-sorbose, L-arabinose and combinations thereof.
[0673]Um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d,[0673] One or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G rebaudioside, stevioside A, stevioside , rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside M4, 1a rebaudioside
rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h,rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h,
rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l,rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l,
rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p,rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1st, rebaudioside 1p,
rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t,rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t,
rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d,rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d,
rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h,rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h,
rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l,rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l,
rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p,rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p,
rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, também podem ser combinados a vários carboidratos.rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, can also be combined with various carbohydrates.
O termo "carboidrato" refere-se em geral a compostos de aldeído ou cetona substituídos com vários grupos hidroxila da fórmula geral (CH2O)n, em que n é de 3 a 30, bem como a seus oligômeros e polímeros.The term "carbohydrate" refers in general to aldehyde or ketone compounds substituted with various hydroxyl groups of the general formula (CH2O) n, where n is 3 to 30, as well as their oligomers and polymers.
Os carboidratos da presente invenção podem, além disso, ser substituídos ou desoxigenados em uma ou mais posições.The carbohydrates of the present invention can, in addition, be substituted or deoxygenated in one or more positions.
Carboidratos, conforme usados neste documento, abrangem carboidratos não modificados, derivados de carboidratos,Carbohydrates, as used in this document, include unmodified carbohydrates, derived from carbohydrates,
carboidratos substituídos e carboidratos modificados.substituted carbohydrates and modified carbohydrates.
Conforme usados neste documento, os sintagmas "derivados de carboidratos", "carboidratos substituídos" eAs used in this document, the phrases "derived from carbohydrates", "substituted carbohydrates" and
"carboidratos modificados" são sinônimos."modified carbohydrates" are synonymous.
Carboidrato modificado significa qualquer carboidrato ao qual ao menos um átomo foi adicionado, do qual ao menos um átomo foi subtraído ou no qual ao menos um átomo foi substituído, ou combinações desses.Modified carbohydrate means any carbohydrate to which at least one atom has been added, from which at least one atom has been subtracted or in which at least one atom has been replaced, or combinations thereof.
Sendo assim, derivados de carboidratos ou carboidratos substituídos incluem monossacarídeos, dissacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos substituídos e não substituídos.Therefore, derivatives of carbohydrates or substituted carbohydrates include substituted and unsubstituted monosaccharides, disaccharides, oligosaccharides and polysaccharides.
Os derivados de carboidratos ou carboidratos substituídos podem ser opcionalmente desoxigenados em qualquer posição de C correspondente, e/ou substituídos com um ou mais grupamentos tais como hidrogênio, halogênio, haloalquila, carboxila, acila, acilóxi, amino, amido, derivados carboxila, alquilamino, dialquilamino, arilamino, alcóxi, arilóxi, nitro, ciano, sulfo,The derivatives of carbohydrates or substituted carbohydrates can optionally be deoxygenated in any corresponding C position, and / or substituted with one or more groups such as hydrogen, halogen, haloalkyl, carboxyl, acyl, acyloxy, amino, starch, carboxyl, alkylamino derivatives, dialkylamino, arylamino, alkoxy, aryloxy, nitro, cyano, sulfo,
mercapto, imino, sulfonila, sulfenila, sulfinila, sulfamoíla, carboalcóxi, carboxamido, fosfonila, fosfinila, fosforila, fosfino, tioéster, tioéter, oximino, hidrazino, carbamila, fosfo, fosfonato, ou qualquer outro grupo funcional variável contanto que o derivado de carboidrato ou carboidrato substituído atue para realçar o sabor doce da composição edulcorante.mercapto, imino, sulfonyl, sulfenyl, sulfinyl, sulfamoyl, carboalkoxy, carboxamido, phosphonyl, phosphinyl, phosphoryl, phosphine, thioester, thioether, oximino, hydrazine, carbamyl, phosphorus, phosphonate, or any other variable functional group as long as the carbohydrate derivative or substituted carbohydrate acts to enhance the sweet taste of the sweetener composition.
[0674]Exemplos de carboidratos que podem ser usados de acordo com a presente invenção incluem, entre outros, psicose, turanose, alose, tagatose, trehalose, galactose, ramnose, várias ciclodextrinas, oligossacarídeos cíclicos, vários tipos de maltodextrinas, dextrano, sacarose, glicose, ribulose, frutose, treose, arabinose, xilose, lixose, altrose, manose, idose, lactose, maltose, açúcar invertido, isotrehalose, neotrehalose, isomaltulose, eritrose, desoxirribose, gulose, idose, talose, eritrulose, xilulose, psicose, turanose, celobiose, amilopectina, glicosamina, manosamina, fucose, ácido glucurônico, ácido glucônico, glucono-lactona, abequose, galactosamina, oligossacarídeos da beterraba, isomalto-oligossacarídeos (isomaltose, isomaltotriose, panose e seus semelhantes), xilo-oligossacarídeos (xilotriose, xilobiose e seus semelhantes), oligossacarídeos terminados por xilo, gentio-oligossacarídeos (gentiobiose, gentiotriose, gentiotetraose e seus semelhantes), sorbose, nigero-oligossacarídeos, oligossacarídeos de palatinose, fruto-oligossacarídeos (questose, nistose e seus semelhantes), maltotetraol, maltotriol, malto-oligossacarídeos (maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, maltohexaose, maltoheptaose e seus semelhantes), amido, inulina, inulo- oligossacarídeos, lactulose, melibiose, rafinose, ribose, açúcares líquidos isomerizados, tais como xaropes de milho com alto teor de frutose, açúcares de acoplamento, e oligossacarídeos de soja. Além disso, os carboidratos, conforme usados nestes documento, podem ser ou da configuração D ou da configuração L.[0674] Examples of carbohydrates that can be used according to the present invention include, but are not limited to, psychosis, turanosis, alose, tagatose, trehalose, galactose, rhamnose, various cyclodextrins, cyclic oligosaccharides, various types of maltodextrins, dextran, sucrose, glucose, ribulose, fructose, threose, arabinose, xylose, lixose, altrose, mannose, idose, lactose, maltose, inverted sugar, isotrehalose, neotrehalose, isomaltulose, erythrose, deoxyribose, glucose, idose, thalose, erythrulose, xylulose, psychosis, turan , cellobiosis, amylopectin, glucosamine, mannosamine, fucose, glucuronic acid, gluconic acid, glucono-lactone, abecose, galactosamine, beetroot oligosaccharides, isomaltosoligosaccharides (isomaltose, isomaltotriosis, panosis and the like), xylo-oligosaccharides and their like), xyl-terminated oligosaccharides, gentio-oligosaccharides (gentiobiose, gentiotriose, gentiotetraose and their similar), sorbose, nigero-oligosaccharide rats, palatinose oligosaccharides, fructo-oligosaccharides (questose, nystosis and the like), maltotetraol, maltotriol, malto-oligosaccharides (maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, maltohexaose, maltoheptaose and the like), starch, lactose, inulin, inulin, melibiosis, raffinose, ribose, isomerized liquid sugars, such as high fructose corn syrups, coupling sugars, and soy oligosaccharides. In addition, carbohydrates, as used in these documents, can be either D configuration or L configuration.
[0675]Um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo,[0675] One or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside,
esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, obtidos de acordo com a presente invenção podem ser usados em combinação a várias substâncias fisiologicamente ativas ou ingredientes funcionais. Os ingredientes funcionais via de regra são classificados em categorias tais como carotenoides, fibras dietéticas, ácidos graxos, saponinas, antioxidantes, nutracêuticos, flavonoides, isotiocianatos, fenóis, esteróis vegetais e estanóis (fitosteróis e fitostanóis); polióis; prebióticos, probióticos; fitoestrógenos; proteína de soja; sulfetos/tióis; aminoácidos; proteínas; vitaminas; e minerais. Ingredientes funcionais também podem ser classificados com base em seus benefícios à saúde, tais como cardiovasculares, redutores do colesterol e anti-inflamatórios. Exemplos de ingredientes funcionais são dados na WO2013/096420, cujo conteúdo incorpora-se ao presente documento por referência.steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E4, rebaudios E4, rebaudios3 I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M4, rebaudioside M1, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2b, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2d, rebaudioside , rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudio side 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, obtained in accordance with the present invention can be used in combination with various physiologically active substances or functional ingredients. Functional ingredients are usually classified into categories such as carotenoids, dietary fibers, fatty acids, saponins, antioxidants, nutraceuticals, flavonoids, isothiocyanates, phenols, plant sterols and stanols (phytosterols and phytostanols); polyols; prebiotics, probiotics; phytoestrogens; soy protein; sulfides / thiols; amino acids; proteins; vitamins; and minerals. Functional ingredients can also be classified based on their health benefits, such as cardiovascular, cholesterol-lowering and anti-inflammatory. Examples of functional ingredients are given in WO2013 / 096420, the content of which is hereby incorporated by reference.
[0676]Um ou mais glicosídeos de esteviol altamente purificado(s), em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo,[0676] One or more highly purified steviol glycosides (s), in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside,
esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B,steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B,
rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B,rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B,
esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeostevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E2, rebaudioside
E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I,E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I,
rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4,rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4,
rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d,rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1d,
rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h,rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h,
rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l,rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l,
rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p,rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1st, rebaudioside 1p,
rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t,rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t,
rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d,rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d,
rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h,rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h,
rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l,rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l,
rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p,rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p,
rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, obtidos de acordo com a presente invenção podem ser aplicados como um edulcorante de alta intensidade para produzir bebidas e gêneros alimentícios zero-calóricos, de calorias reduzidas ou diabéticos com características de sabor aprimoradas.rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, obtained in accordance with the present invention can be applied as a high-intensity sweetener to produce zero calorie, reduced calorie or diabetic drinks and foodstuffs with enhanced flavor characteristics.
Eles também podem ser usados em bebidas, gêneros alimentícios, produtos farmacêuticos e outros produtos nos quais não se pode usar açúcar.They can also be used in drinks, foodstuffs, pharmaceuticals and other products in which sugar cannot be used.
Além disso, um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D,In addition, one or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D,
rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo,rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside,
rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A,rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A,
rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6,rebaudioside E, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6,
rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM,rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM,
rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a,rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1a,
rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, podem ser usados como edulcorante não só para bebidas, gêneros alimentícios e outros produtos dedicados ao consumo humano mas também na alimentação animal e forragem com características aprimoradas.rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1l, rebaudioside 1, rebaudioside 1m, rebaudioside 1m, rebaudioside 1m, rebaudioside 1m , rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2j 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, can be used as a sweetener not only for drinks, foodstuffs and other products dedicated to human consumption but also in animal feed and forage with improved characteristics.
[0677]Um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h,[0677] One or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G rebaudioside, stevioside A, stevioside , rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1p rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudios 2g video, 2h rebaudioside,
rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, obtidos de acordo com a presente invenção podem ser aplicados como um supressor de espumação a fim de produzir bebidas e produtos alimentícios zero-calóricos, de calorias reduzidas ou diabéticos.rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s, rebaudioside 2s and / or SvG7 can be obtained according to the present agreement foaming to produce zero-calorie, low-calorie or diabetic drinks and food products.
[0678]Exemplos de bens de consumo nos quais um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2 , rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, podem ser usados como composto edulcorante incluem, entre outros, bebidas alcoólicas tais como vodka, vinho, cerveja, liquor e saquê etc.; sucos naturais; bebidas refrescantes; bebidas gaseificadas; bebidas diet; bebidas zero-calóricas; bebidas e alimentos de calorias reduzidas; iogurtes; sucos instantâneos; café instantâneo; bebidas instantâneas em pó; produtos enlatados; xaropes; pasta de soja fermentada; molho de soja; vinagre; molhos; maionese; ketchups; curry; sopa; caldo instantâneo; molho de soja em pó; vinagre em pó; diversos tipos de biscoitos; biscoito de arroz; crackers; pão; chocolates; caramelo; balas; chicletes; gelatina; pudim; frutas e verduras conservadas; nata fresca; geleia; marmelada; pasta de flores; leite em pó; sorvete; gelado; frutas e verduras envasadas; favas cozidas e enlatadas; carne e outros alimentos cozidos em molho adocicado; produtos alimentícios vegetais agrícolas; frutos do mar; presunto; salsicha; presunto de peixe; salsicha de peixe; pasta de peixe frutos do mar fritos por imersão; frutos do mar desidratados; frutos do mar congelados; algas conservadas; carne conservada; tabaco; produtos medicinais; e muitos outros. Em teoria, eles podem ter aplicações ilimitadas.[0678] Examples of consumer goods in which one or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside A, rebaudioside G, stevioside G , stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M7, rebaudioside M7, rebaudioside M7, rebaudioside M7, rebaudioside M7 1c, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudio side 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside used as a sweetening compound include, but are not limited to, alcoholic beverages such as vodka, wine, beer, liquor and sake etc .; natural juices; refreshing drinks; carbonated drinks; diet drinks; zero-calorie drinks; low calorie drinks and foods; yogurts; instant juices; instant coffee; instant powder drinks; canned products; syrups; fermented soybean paste; soy sauce; vinegar; sauces; mayonnaise; ketchups; curry; soup; instant broth; powdered soy sauce; powdered vinegar; several types of cookies; rice cracker; crackers; bread; chocolates; caramel; bullets; chewing gum; gelatine; pudding; preserved fruits and vegetables; fresh cream; jelly; marmalade; flower paste; powdered milk; ice cream; ice cold; potted fruits and vegetables; cooked and canned beans; meat and other foods cooked in a sweet sauce; agricultural vegetable food products; Seafood; Ham; sausage; fish ham; fish sausage; fish paste fried seafood by immersion; dehydrated seafood; frozen seafood; conserved algae; preserved meat; tobacco; medicinal products; and many others. In theory, they can have unlimited applications.
[0679]Exemplos de bens consumíveis nos quais um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j,[0679] Examples of consumables in which one or more highly purified target steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M7, rebaudioside M, rebaudioside , rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1n, rebaudioside 1, rebaudioside 1n 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudio side 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2j,
rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, podem ser usados como modificador de sabor ou essência com propriedades modificadoras incluem, entre outros, bebidas alcoólicas tais como vodka, vinho, cerveja, liquor e saquê etc.; sucos naturais; bebidas refrescantes bebidas gaseificadas; bebidas diet; bebidas zero-calóricas; bebidas e alimentos de calorias reduzidas; iogurtes; sucos instantâneos; café instantâneo; bebidas instantâneas em pó; produtos enlatados; xaropes; pasta de soja fermentada; molho de soja; vinagre; molhos; maionese; ketchups; curry; sopa; caldo instantâneo; molho de soja em pó; vinagre em pó; diversos tipos de biscoitos; biscoito de arroz; crackers; pão; chocolates; caramelo; balas; chicletes; gelatina; pudim; frutas e verduras conservadas; nata fresca; geleia; marmelada; pasta de flores; leite em pó; sorvete; gelado; frutas e verduras envasadas; favas cozidas e enlatadas; carne e outros alimentos cozidos em molho adocicado; produtos alimentícios vegetais agrícolas; frutos do mar; presunto; salsicha; presunto de peixe; salsicha de peixe; pasta de peixe frutos do mar fritos por imersão; frutos do mar desidratados; frutos do mar congelados; algas conservadas; carne conservada; tabaco; produtos medicinais; e muitos outros. Em teoria, eles podem ter aplicações ilimitadas.rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2n, rebaudioside 2n, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, can be used as a flavor modifier or essence with modifying properties include, among other, alcoholic beverages include, among other, alcoholic drinks such as vodka, wine, beer, liquor and sake etc .; natural juices; refreshing drinks carbonated drinks; diet drinks; zero-calorie drinks; low calorie drinks and foods; yogurts; instant juices; instant coffee; instant powder drinks; canned products; syrups; fermented soybean paste; soy sauce; vinegar; sauces; mayonnaise; ketchups; curry; soup; instant broth; powdered soy sauce; powdered vinegar; several types of cookies; rice cracker; crackers; bread; chocolates; caramel; bullets; chewing gum; gelatine; pudding; preserved fruits and vegetables; fresh cream; jelly; marmalade; flower paste; powdered milk; ice cream; ice cold; potted fruits and vegetables; cooked and canned beans; meat and other foods cooked in a sweet sauce; agricultural vegetable food products; Seafood; Ham; sausage; fish ham; fish sausage; fish paste fried seafood by immersion; dehydrated seafood; frozen seafood; conserved algae; preserved meat; tobacco; medicinal products; and many others. In theory, they can have unlimited applications.
[0680]Durante a fabricação de produtos tais como gêneros alimentícios, bebidas, produtos farmacêuticos, produtos de mesa e chicletes, métodos convencionais como mistura, amassamento, dissolução, decapagem, permeação, percolação, polvilhamento, atomização, infusão e outros métodos podem ser usados.[0680] During the manufacture of products such as foodstuffs, beverages, pharmaceuticals, tableware and chewing gum, conventional methods such as mixing, kneading, dissolving, stripping, permeation, percolation, dusting, atomization, infusion and other methods can be used .
[0681]Além disso, o(s) glicosídeo(s) de esteviol alvo altamente purificado(s) esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo,[0681] Furthermore, the highly purified target steviol glycoside (s) steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside,
rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 obtidos na presente invenção podem ser usados nas formas seca ou líquida.rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D, rebaudioside AM, rebaudioside , rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1l, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2d, rebaudioside 2d, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7 obtained in the This invention can be used in dry or liquid forms.
[0682]O glicosídeo de esteviol alvo altamente purificado pode ser adicionado antes ou depois do tratamento térmico dos gêneros alimentícios. A quantidade do(s) glicosídeo(s) de esteviol altamente purificado(s), em particular esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n,[0682] The highly purified target steviol glycoside can be added before or after heat treatment of foodstuffs. The quantity of the highly purified steviol glycoside (s), in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, G reevioside, stevioside A, stevioside A, stevioside A, stevioside A B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside M, rebaudioside M, rebaudioside M, rebaudioside M, rebaudioside M4 rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n,
rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7, depende da finalidade do uso. Conforme discutido acima, eles podem ser adicionados à parte ou em combinação com outros compostos.rebaudioside 1st, rebaudioside 1p, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2d, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2f, rebaudioside 2f, rebaudioside , rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7, depends on the purpose of use. As discussed above, they can be added separately or in combination with other compounds.
[0683]A presente invenção também se refere ao realce da doçura em bebidas usando um esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 como realçador de doçura, em que o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo,[0683] The present invention also relates to enhancing sweetness in beverages using a steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevium b C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside M4, rebaudioside 1, rebaudioside M4, rebaudioside rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1p, rebaudioside 1p , rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudiosí deo 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2d, rebaudioside 2p, rebaudioside 2p, rebaudioside 2r, rebaudios de 2r, res steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside,
esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 se faz presente a uma concentração nos ou abaixo dos seus respectivos limites de reconhecimento de doçura.steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E4, rebaudios E4, rebaudios3 I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M4, rebaudioside M1, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2b, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2d, rebaudioside , rebaudioside 2j, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudio sIDE 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7 is present at a concentration at or below their respective sweetness recognition limits.
[0684]Conforme usado neste documento, o termo "realçador de doçura" refere-se a um composto capaz de realçar ou intensificar a percepção do sabor doce em uma composição, tal como uma bebida. O termo "realçador de doçura" é sinônimo dos termos "potencializador do sabor doce", "potencializador de doçura", "amplificador de doçura" e "intensificador de doçura".[0684] As used in this document, the term "sweetness enhancer" refers to a compound capable of enhancing or enhancing the perception of sweet taste in a composition, such as a drink. The term "sweetness enhancer" is synonymous with the terms "sweet flavor enhancer", "sweetness enhancer", "sweetness amplifier" and "sweetness enhancer".
[0685]O termo "concentração limite de reconhecimento de doçura", conforme usado largamente neste documento, é a menor concentração conhecida de um composto doce perceptível ao paladar humano, tipicamente em torno de 1,0% de equivalência com a sacarose (1,0% SE). Em termos gerais, os realçadores de doçura podem realçar ou potencializar o sabor doce dos edulcorantes sem conferir nenhum sabor doce perceptível por si próprios quando presentes na ou abaixo da concentração limite de reconhecimento de doçura de dado realçador de doçura; porém, os realçadores de doçura podem eles próprios conferir um sabor doce a concentrações acima de sua concentração limite de reconhecimento de doçura. A concentração limite de reconhecimento de doçura é específica de dado realçador e variará com base na matriz da bebida. A concentração limite de reconhecimento de doçura pode ser determinada facilmente por meio de um teste de sabor no qual aumentam-se as concentrações de dado realçador até detectar mais que 1,0% de equivalência com a sacarose em dada matriz de bebida. Considera-se a concentração que confere cerca de 1,0% de equivalência com a sacarose o limite de reconhecimento de doçura.[0685] The term "sweetness recognition limit concentration", as used widely in this document, is the lowest known concentration of a sweet compound perceptible to the human palate, typically around 1.0% equivalence with sucrose (1, 0% SE). In general terms, sweetness enhancers can enhance or enhance the sweet taste of sweeteners without imparting any sweet taste that is perceptible on their own when present at or below the sweetness recognition concentration of a sweetness enhancer data; however, sweetness enhancers can themselves impart a sweet taste to concentrations above their sweetness recognition limit concentration. The limit concentration of sweetness recognition is specific to a data enhancer and will vary based on the beverage matrix. The limit concentration of sweetness recognition can be easily determined by means of a taste test in which the concentrations of enhancer data are increased until detecting more than 1.0% equivalence with sucrose in a given beverage matrix. The concentration that confers about 1.0% equivalence with sucrose is considered the sweetness recognition limit.
[0686]Em algumas modalidades, o edulcorante se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,0001% a cerca de 12% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 0,0001% em peso, de cerca de 0,0005% em peso, de cerca de 0,001% em peso, de cerca de 0,005% em peso, de cerca de 0,01% em peso, de cerca de 0,05% em peso, de cerca de 0,1% em peso, de cerca de 0,5% em peso, de cerca de 1,0% em peso, de cerca de 1,5% em peso, de cerca de 2,0% em peso, de cerca de 2,5% em peso, de cerca de 3,0% em peso, de cerca de 3,5% em peso, de cerca de 4,0% em peso, de cerca de 4,5% em peso, de cerca de 5,0% em peso, de cerca de 5,5% em peso, de cerca de 6,0% em peso, de cerca de 6,5% em peso, de cerca de 7,0% em peso, de cerca de 7,5% em peso, de cerca de 8,0% em peso, de cerca de 8,5% em peso, de cerca de 9,0% em peso, de cerca de 9,5% em peso, de cerca de 10,0% em peso, de cerca de 10,5% em peso, de cerca de 11,0% em peso, de cerca de 11,5% em peso ou de cerca de 12,0% em peso.[0686] In some embodiments, the sweetener is present in the beverage in an amount of about 0.0001% to about 12% by weight, such as, for example, from about 0.0001% by weight, from about from 0.0005% by weight, from about 0.001% by weight, from about 0.005% by weight, from about 0.01% by weight, from about 0.05% by weight, from about 0.1 wt%, about 0.5 wt%, about 1.0 wt%, about 1.5 wt%, about 2.0 wt%, about 2.5 wt%, about 3.0 wt%, about 3.5 wt%, about 4.0 wt%, about 4.5 wt%, about 5.0 wt % by weight, about 5.5% by weight, about 6.0% by weight, about 6.5% by weight, about 7.0% by weight, about 7.5 wt%, about 8.0 wt%, about 8.5 wt%, about 9.0 wt%, about 9.5 wt%, about 10.0 % by weight, about 10.5% by weight, about 11.0% by weight, about 11.5% by weight or about 12.0% by weight.
[0687]Em uma modalidade específica, o edulcorante se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,0001% em peso a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 0,0001% em peso a cerca de 0,0005% em peso,[0687] In a specific embodiment, the sweetener is present in the drink in an amount of about 0.0001% by weight to about 10% by weight, such as, for example, from about 0.0001% by weight at about 0.0005% by weight,
de cerca de 0,0005% em peso a cerca de 0,001% em peso, de cerca de 0,001% em peso a cerca de 0,005% em peso, de cerca de 0,005% em peso a cerca de 0,01% em peso, de cerca de 0,01% em peso a cerca de 0,05% em peso, de cerca de 0,05% em peso a cerca de 0,1% em peso, de cerca de 0,1% em peso a cerca de 0,5% em peso, de cerca de 0,5% em peso a cerca de 1% em peso, de cerca de 1% em peso a cerca de 2% em peso, de cerca de 2% em peso a cerca de 3% em peso, de cerca de 3% em peso a cerca de 4% em peso, de cerca de 4% em peso a cerca de 5% em peso, de cerca de 5% em peso a cerca de 6% em peso, de cerca de 6% em peso a cerca de 7% em peso, de cerca de 7% em peso a cerca de 8% em peso, de cerca de 8% em peso a cerca de 9% em peso, ou de cerca de 9% em peso a cerca de 10% em peso. Em uma modalidade específica, o edulcorante se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% em peso a cerca de 10% em peso. Em outra modalidade específica, o edulcorante se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 2% em peso a cerca de 8% em peso.from about 0.0005% by weight to about 0.001% by weight, from about 0.001% by weight to about 0.005% by weight, from about 0.005% by weight to about 0.01% by weight, about 0.01% by weight to about 0.05% by weight, from about 0.05% by weight to about 0.1% by weight, from about 0.1% by weight to about 0 , 5% by weight, from about 0.5% by weight to about 1% by weight, from about 1% by weight to about 2% by weight, from about 2% by weight to about 3% by weight, from about 3% by weight to about 4% by weight, from about 4% by weight to about 5% by weight, from about 5% by weight to about 6% by weight, from about from 6% by weight to about 7% by weight, from about 7% by weight to about 8% by weight, from about 8% by weight to about 9% by weight, or from about 9% by weight weight to about 10% by weight. In a specific embodiment, the sweetener is present in the beverage in an amount of about 0.5% by weight to about 10% by weight. In another specific embodiment, the sweetener is present in the drink in an amount of about 2% by weight to about 8% by weight.
[0688]Em uma modalidade, o edulcorante é um edulcorante calórico tradicional. Edulcorantes adequados incluem, entre outros, sacarose, frutose, glicose, xarope de milho com alto teor de frutose e xarope de amido com alto teor de frutose.[0688] In one embodiment, the sweetener is a traditional caloric sweetener. Suitable sweeteners include, but are not limited to, sucrose, fructose, glucose, high fructose corn syrup and high fructose starch syrup.
[0689]Em outra modalidade, o edulcorante é o eritritol.[0689] In another embodiment, the sweetener is erythritol.
[0690]Em ainda outra modalidade, o edulcorante é um açúcar raro. Açúcares raros adequados incluem, entre outros, D-alose, D-psicose, D-ribose, D-tagatose, L- glicose, L-fucose, L-arabinose, D-turanose, D-leucrose e combinações dos desses.[0690] In yet another modality, the sweetener is a rare sugar. Suitable rare sugars include, but are not limited to, D-alose, D-psychosis, D-ribose, D-tagatose, L-glucose, L-fucose, L-arabinose, D-turanosis, D-leucrose and combinations thereof.
[0691]Contempla-se que um edulcorante seja usado à parte ou em combinação a outros edulcorantes.[0691] It is contemplated that a sweetener is used separately or in combination with other sweeteners.
[0692]Em uma modalidade, o açúcar raro é a D-alose. Em uma modalidade mais específica, a D-alose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0692] In one embodiment, the rare sugar is D-alose. In a more specific embodiment, D-alose is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0693]Em outra modalidade, o açúcar raro é a D-psicose. Em uma modalidade mais específica, a D-psicose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0693] In another modality, the rare sugar is D-psychosis. In a more specific embodiment, D-psychosis is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0694]Em ainda outra modalidade, o açúcar raro é a D-ribose. Em uma modalidade mais específica, a D-ribose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0694] In yet another modality, the rare sugar is D-ribose. In a more specific embodiment, D-ribose is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0695]Em ainda outra modalidade, o açúcar raro é a D-tagatose. Em uma modalidade mais específica, a D-tagatose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0695] In yet another modality, the rare sugar is D-tagatose. In a more specific embodiment, D-tagatose is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0696]Em ainda outra modalidade, o açúcar raro é a L-glicose. Em uma modalidade mais específica, a L-glicose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0696] In yet another modality, the rare sugar is L-glucose. In a more specific embodiment, L-glucose is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0697]Em uma modalidade, o açúcar raro é a L-fucose. Em uma modalidade mais específica, a L-fucose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0697] In one embodiment, the rare sugar is L-fucose. In a more specific embodiment, L-fucose is present in the beverage in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0698]Em outra modalidade, o açúcar raro é a L-arabinose. Em uma modalidade mais específica, a L-arabinose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0698] In another modality, the rare sugar is L-arabinose. In a more specific embodiment, L-arabinose is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0699]Em ainda outra modalidade, o açúcar raro é a D-turanose. Em uma modalidade mais específica, a D-turanose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0699] In yet another modality, the rare sugar is D-turanosis. In a more specific embodiment, D-turanosis is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0700]Em ainda outra modalidade, o açúcar raro é a D-leucrose. Em uma modalidade mais específica, a D-leucrose se faz presente na bebida em uma quantidade de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso, tal como, por exemplo, de cerca de 2% a cerca de 8%.[0700] In yet another modality, the rare sugar is D-leukrose. In a more specific embodiment, D-leukrose is present in the drink in an amount of about 0.5% to about 10% by weight, such as, for example, from about 2% to about 8%.
[0701]A adição do realçador de doçura em uma concentração no ou abaixo do limite de reconhecimento de doçura aumenta a equivalência com a sacarose detectada da bebida compreendendo o edulcorante e o realçador de doçura em comparação a uma bebida correspondente sem o realçador de doçura. Além disso, a doçura pode ser aumentada em uma quantidade superior à doçura detectável de uma solução contendo a mesma concentração do ao menos um realçador de doçura na ausência de qualquer edulcorante.[0701] The addition of the sweetness enhancer at a concentration at or below the sweetness recognition limit increases equivalence with the detected sucrose of the drink comprising the sweetener and sweetness enhancer compared to a corresponding drink without the sweetness enhancer. In addition, sweetness can be increased by more than the detectable sweetness of a solution containing the same concentration as at least one sweetener enhancer in the absence of any sweetener.
[0702]Logo, a presente invenção também propõe um método para realçar a doçura de uma bebida que compreende um edulcorante, o método compreendendo providenciar uma bebida que compreende um edulcorante e adicionar um realçador de doçura selecionado dentre esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k,[0702] Therefore, the present invention also proposes a method for enhancing the sweetness of a drink comprising a sweetener, the method comprising providing a drink comprising a sweetener and adding a sweetness enhancer selected from steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E6, re3 , rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside 1h, rebaudioside
rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 ou uma combinação desses, em que o esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 fazem-se presentes em uma concentração nos ou abaixo dos seus limites de reconhecimento de doçura.rebaudioside 1l, rebaudioside 1m, rebaudioside 1n, rebaudioside 1p, rebaudioside 1q, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2c, rebaudioside 2 , rebaudioside 2i, rebaudioside 2k, rebaudioside 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or one of these, or a combination of these, or one of those, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E4 , rebaudioside I, rebaudioside AM, rebaudioside D7, rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1c, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1k, rebaudioside 1l, rebaudioside 1l, rebaudioside 1l, rebaudioside 1l, rebaudioside 1l rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 1t, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2 , rebaudioside 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7 are present in a concentration at or below their sweetness recognition limits.
[0703]A adição de esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A,[0703] The addition of steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A,
esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4, rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7 em uma concentração no ou abaixo do limite de reconhecimento de doçura a uma bebida contendo um edulcorante pode aumentar e equivalência com a sacarose detectada em cerca de 1,0% a cerca de 5,0%, tal como, por exemplo, em cerca de 1,0%, em cerca de 1,5%, em cerca de 2,0%, em cerca de 2,5%, em cerca de 3,0%, em cerca de 3,5%, em cerca de 4,0%, em cerca de 4,5% ou em cerca de 5,0%.steviolbioside B, rebaudioside B, stevioside, rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E2, rebaudioside E4, rebaudioside E3, rebaudioside E3, rebaudioside E3, rebaudioside rebaudioside M, rebaudioside M4, rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1i, rebaudioside 1h, rebaudioside 1, rebaudioside 1j, rebaudioside , rebaudioside 1p, rebaudioside 1r, rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 2a, rebaudioside 2b, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2e, rebaudioside 2f, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2, rebaudioside 2g 2l, rebaudioside 2m, rebaudioside 2n, rebaudioside 2nd, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudi osride 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7 at a concentration at or below the sweetness recognition limit for a drink containing a sweetener may increase and equivalence with sucrose detected by about 1.0% to about 5.0%, such as, for example, about 1.0%, about 1.5%, about 2.0%, about 2.5%, about 3.0%, about 3 , 5%, about 4.0%, about 4.5% or about 5.0%.
[0704]Os exemplos a seguir ilustram modalidades preferidas da invenção para o preparo de um ou mais glicosídeos de esteviol alvo altamente purificados, em particular esteviolmonosídeo, esteviolmonosídeo A, esteviolbiosídeo, esteviolbiosídeo D, rubusosídeo, esteviolbiosídeo A, esteviolbiosídeo B, rebaudiosídeo B, esteviosídeo, rebaudiosídeo G, esteviosídeo A, esteviosídeo B, esteviosídeo C, rebaudiosídeo A, rebaudiosídeo E, rebaudiosídeo E2, rebaudiosídeo E4, rebaudiosídeo E6, rebaudiosídeo E3, rebaudiosídeo D, rebaudiosídeo I, rebaudiosídeo AM, rebaudiosídeo D7, rebaudiosídeo M, rebaudiosídeo M4,[0704] The following examples illustrate preferred embodiments of the invention for the preparation of one or more highly purified steviol glycosides, in particular steviolmonoside, steviolmonoside A, steviolbioside, steviolbioside D, rubusoside, steviolbioside A, steviolbioside B, steviolbioside B, steviosides B , rebaudioside G, stevioside A, stevioside B, stevioside C, rebaudioside A, rebaudioside E, rebaudioside E4, rebaudioside E6, rebaudioside E3, rebaudioside D, rebaudioside I, rebaudioside M, rebaudioside AM, rebaudioside
rebaudiosídeo 1a, rebaudiosídeo 1b, rebaudiosídeo 1c, rebaudiosídeo 1d, rebaudiosídeo 1e, rebaudiosídeo 1f, rebaudiosídeo 1g, rebaudiosídeo 1h, rebaudiosídeo 1i, rebaudiosídeo 1j, rebaudiosídeo 1k, rebaudiosídeo 1l, rebaudiosídeo 1m, rebaudiosídeo 1n, rebaudiosídeo 1o, rebaudiosídeo 1p, rebaudiosídeo 1q, rebaudiosídeo 1r, rebaudiosídeo 1s, rebaudiosídeo 1t, rebaudiosídeo 2a, rebaudiosídeo 2b, rebaudiosídeo 2c, rebaudiosídeo 2d, rebaudiosídeo 2e, rebaudiosídeo 2f, rebaudiosídeo 2g, rebaudiosídeo 2h, rebaudiosídeo 2i, rebaudiosídeo 2j, rebaudiosídeo 2k, rebaudiosídeo 2l, rebaudiosídeo 2m, rebaudiosídeo 2n, rebaudiosídeo 2o, rebaudiosídeo 2p, rebaudiosídeo 2q, rebaudiosídeo 2r, rebaudiosídeo 2s e/ou SvG7. Perceber-se-á que a presente invenção não se limita aos materiais, proporções, condições e procedimentos delineados nos exemplos, que são dados tão somente à guisa de ilustração.rebaudioside 1a, rebaudioside 1b, rebaudioside 1d, rebaudioside 1e, rebaudioside 1f, rebaudioside 1g, rebaudioside 1h, rebaudioside 1j, rebaudioside 1j, rebaudioside 1k, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside 1, rebaudioside , rebaudioside 1r, rebaudioside 1s, rebaudioside 2a, rebaudioside 2a, rebaudioside 2c, rebaudioside 2c, rebaudioside 2d, rebaudioside 2f, rebaudioside 2g, rebaudioside 2h, rebaudioside 2h, rebaudioside 2h, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i, rebaudioside 2i 2n, rebaudioside 2, rebaudioside 2p, rebaudioside 2q, rebaudioside 2r, rebaudioside 2s and / or SvG7. It will be realized that the present invention is not limited to the materials, proportions, conditions and procedures outlined in the examples, which are given only by way of illustration.
EXEMPLOS EXEMPLO 1 Sequências proteicas de enzimas geneticamente modificadas usadas no processo biocatalítico SEQ ID 1: >SuSy_At, variante PM1-54-2-E05 (sacarose sintase geneticamente modificada; fonte do gene WT: Arabidopsis thaliana)EXAMPLES EXAMPLE 1 Protein sequences of genetically modified enzymes used in the biocatalytic process SEQ ID 1:> SuSy_At, variant PM1-54-2-E05 (genetically modified sucrose synthase; source of the WT gene: Arabidopsis thaliana)
RPLAQAVPLAQDD SEQ ID 2: >UGTSl2, variante 0234 (glicosiltransferase modificada geneticamente; fonte do gene WT: Solanum lycopersicum)RPLAQAVPLAQDD SEQ ID 2:> UGTSl2, variant 0234 (genetically modified glycosyltransferase; source of the WT gene: Solanum lycopersicum)
TGEILRAKVREISKNLKSIRDEEMDAVAEELIQLCRNSNKSK SEQ ID 3: >UGT76G1, variante 0042 (glicosiltransferase geneticamente modificada; fonte do gene WT: Stevia rebaudiand)TGEILRAKVREISKNLKSIRDEEMDAVAEELIQLCRNSNKSK SEQ ID 3:> UGT76G1, variant 0042 (genetically modified glycosyltransferase; source of the WT gene: Stevia rebaudiand)
YISSL EXEMPLO 2 Expressão e formulação da variante de SuSy_At de SEQ ID 1YISSL EXAMPLE 2 Expression and formulation of the SuSy_At variant of SEQ ID 1
[0705]O gene que codifica a variante de SuSy_At de SEQ ID 1 (EXEMPLO 1) foi clonado no vetor de expressão pLElA17 (derivado do pRSF-1b, Novagen). O plasmídeo resultante foi usado na transformação de células BL21(DE3) da E.coli.[0705] The gene encoding the SuSy_At variant of SEQ ID 1 (EXAMPLE 1) was cloned into the pLElA17 expression vector (derived from pRSF-1b, Novagen). The resulting plasmid was used to transform E.coli BL21 (DE3) cells.
[0706]As células foram cultivadas em meio ZYM505 (F. William Studier, Expression and Purification 41 (2005), 207-234) suplementado com canamicina (50 mg/l) a 37° C. A expressão dos genes foi induzida na fase logarítmica por IPTG (0,2 mM) e realizada a 30° C e 200 rpm por 16 a 18 horas.[0706] The cells were cultured in ZYM505 medium (F. William Studier, Expression and Purification 41 (2005), 207-234) supplemented with kanamycin (50 mg / l) at 37 ° C. The gene expression was induced in the logarithmic by IPTG (0.2 mM) and performed at 30 ° C and 200 rpm for 16 to 18 hours.
[0707]As células foram coletadas por centrifugação (3.220 x g, 20 min, 4° C) e ressuspensas a uma densidade óptica de 200 (medida a 600 nm (OD600)) com tampão de lise celular (100 mM de Tris-HCl, pH 7,0; 2 mM de MgCl2, 20 U/mL de DNA nuclease, 0,5 mg/mL de lisozima). Em seguida, as células foram rompidas por sonicação, e os extratos brutos foram separados do resíduo celular por centrifugação (18.000 x g 40 min, 4° C). O sobrenadante foi esterilizado por filtragem através de um filtro de 0,2 μm e diluído a 50:50 com água destilada, resultando assim em um preparado enzimático ativo.[0707] The cells were collected by centrifugation (3,220 xg, 20 min, 4 ° C) and resuspended at an optical density of 200 (measured at 600 nm (OD600)) with cell lysis buffer (100 mM Tris-HCl, pH 7.0; 2 mM MgCl2, 20 U / mL DNA nuclease, 0.5 mg / mL lysozyme). Then, the cells were disrupted by sonication, and the crude extracts were separated from the cell residue by centrifugation (18,000 x g 40 min, 4 ° C). The supernatant was sterilized by filtration through a 0.2 μm filter and diluted to 50:50 with distilled water, thus resulting in an active enzyme preparation.
[0708]Em se tratando de preparados enzimáticos ativos de SuSy_At, a atividade em Unidades é definida de acordo com o seguinte: 1 mU de SuSy_At transforma 1 nmol de sacarose em frutose em 1 minuto. As condições de reação para o ensaio são de 30° C, 50 mM de tampão fosfato de potássio com pH 7,0, 400 mM de sacarose em t0, 3 mM de MgCl2 e 15 mM de difosfato de uridina (UDP).[0708] In the case of active enzymatic preparations of SuSy_At, the activity in Units is defined according to the following: 1 mU of SuSy_At transforms 1 nmol of sucrose into fructose in 1 minute. The reaction conditions for the test are 30 ° C, 50 mM potassium phosphate buffer with pH 7.0, 400 mM sucrose in t0, 3 mM MgCl2 and 15 mM uridine diphosphate (UDP).
EXEMPLO 3EXAMPLE 3
Expressão e formulação da variante de UGTSl12 de SEQ ID 2Expression and formulation of the UGTSl12 variant of SEQ ID 2
[0709]O gene que codifica a variante de UGTSl2 de SEQ ID 2 (EXEMPLO 1) foi clonado no vetor de expressão pLElA17 (derivado do pRSF-1b, Novagen). O plasmídeo resultante foi usado na transformação de células BL21(DE3) da E.coli.[0709] The gene encoding the UGTS12 variant of SEQ ID 2 (EXAMPLE 1) was cloned into the pLElA17 expression vector (derived from pRSF-1b, Novagen). The resulting plasmid was used to transform E.coli BL21 (DE3) cells.
[0710]As células foram cultivadas em meio ZYM505 (F. William Studier, Expression and Purification 41 (2005), 207-234) suplementado com canamicina (50 mg/l) a 37° C. A expressão dos genes foi induzida na fase logarítmica por IPTG (0,1 mM) e realizada a 30° C e 200 rpm por 16 a 18 horas.[0710] The cells were cultured in ZYM505 medium (F. William Studier, Expression and Purification 41 (2005), 207-234) supplemented with kanamycin (50 mg / l) at 37 ° C. The expression of the genes was induced in the logarithmic by IPTG (0.1 mM) and performed at 30 ° C and 200 rpm for 16 to 18 hours.
[0711]As células foram coletadas por centrifugação (3.220 x g, 20 min, 4° C) e ressuspensas a uma densidade óptica de 200 (medida a 600 nm (OD600)) com tampão de lise celular (100 mM de Tris-HCl, pH 7,0; 2 mM de MgCl2, 20 U/mL de DNA nuclease, 0,5 mg/mL de lisozima). Em seguida, as células foram rompidas por sonicação, e os extratos brutos foram separados do resíduo celular por centrifugação (18.000 x g 40 min, 4° C). O sobrenadante foi esterilizado por filtragem através de um filtro de 0,2 μm e diluído a 50:50 com 1 M de solução de sacarose, resultando assim em um preparado enzimático ativo.[0711] The cells were collected by centrifugation (3,220 xg, 20 min, 4 ° C) and resuspended at an optical density of 200 (measured at 600 nm (OD600)) with cell lysis buffer (100 mM Tris-HCl, pH 7.0; 2 mM MgCl2, 20 U / mL DNA nuclease, 0.5 mg / mL lysozyme). Then, the cells were disrupted by sonication, and the crude extracts were separated from the cell residue by centrifugation (18,000 x g 40 min, 4 ° C). The supernatant was sterilized by filtration through a 0.2 μm filter and diluted to 50:50 with 1 M sucrose solution, thus resulting in an active enzyme preparation.
[0712]Em se tratando de preparados enzimáticos ativos de UGTSl2, a atividade em Unidades é definida de acordo com o seguinte: 1 mU de UGTSl2 transforma 1 nmol de rebaudiosídeo A (Reb A) em rebaudiosídeo D (Reb D) em 1 minuto. As condições de reação para o ensaio são de 30° C, 50 mM de tampão fosfato de potássio com pH 7,0, 10 mM de Reb A em t0, 500 mM de sacarose, 3 mM de MgCl2, 0,25 mM de difosfato de uridina (UDP) e 3 U/ml de Susy_At.[0712] In the case of active enzyme preparations of UGTSl2, the activity in Units is defined according to the following: 1 mU of UGTSl2 transforms 1 nmol of rebaudioside A (Reb A) into rebaudioside D (Reb D) in 1 minute. The reaction conditions for the test are 30 ° C, 50 mM potassium phosphate buffer with pH 7.0, 10 mM Reb A in t0, 500 mM sucrose, 3 mM MgCl2, 0.25 mM diphosphate uridine (UDP) and 3 U / ml Susy_At.
EXEMPLO 4 Expressão e formulação da variante de UGT76G1 de SEQ ID 3EXAMPLE 4 Expression and formulation of the UGT76G1 variant of SEQ ID 3
[0713]O gene que codifica a variante de UGT76G1 de SEQ ID 3 (EXEMPLO 1) foi clonado no vetor de expressão pLElA17 (derivado do pRSF-1b, Novagen). O plasmídeo resultante foi usado na transformação de células BL21(DE3) da E.coli.[0713] The gene encoding the UGT76G1 variant of SEQ ID 3 (EXAMPLE 1) was cloned into the expression vector pLElA17 (derived from pRSF-1b, Novagen). The resulting plasmid was used to transform E.coli BL21 (DE3) cells.
[0714]As células foram cultivadas em meio ZYM505 (F. William Studier, Expression and Purification 41 (2005), 207-234) suplementado com canamicina (50 mg/l) a 37° C. A expressão dos genes foi induzida na fase logarítmica por IPTG (0,1 mM) e realizada a 30° C e 200 rpm por 16 a 18 horas.[0714] The cells were grown in ZYM505 medium (F. William Studier, Expression and Purification 41 (2005), 207-234) supplemented with kanamycin (50 mg / l) at 37 ° C. The expression of the genes was induced in the logarithmic by IPTG (0.1 mM) and performed at 30 ° C and 200 rpm for 16 to 18 hours.
[0715]As células foram coletadas por centrifugação (3.220 x g, 20 min, 4° C) e ressuspensas a uma densidade óptica de 200 (medida a 600 nm (OD600)) com tampão de lise celular (100 mM de Tris-HCl, pH 7,0; 2 mM de MgCl2, 20 U/mL de DNA nuclease, 0,5 mg/mL de lisozima). Em seguida, as células foram rompidas por sonicação, e os extratos brutos foram separados do resíduo celular por centrifugação (18.000 x g 40 min, 4° C). O sobrenadante foi esterilizado por filtragem através de um filtro de 0,2 μm e diluído a 50:50 com 1 M de solução de sacarose, resultando assim em um preparado enzimático ativo.[0715] The cells were collected by centrifugation (3,220 xg, 20 min, 4 ° C) and resuspended at an optical density of 200 (measured at 600 nm (OD600)) with cell lysis buffer (100 mM Tris-HCl, pH 7.0; 2 mM MgCl2, 20 U / mL DNA nuclease, 0.5 mg / mL lysozyme). Then, the cells were disrupted by sonication, and the crude extracts were separated from the cell residue by centrifugation (18,000 x g 40 min, 4 ° C). The supernatant was sterilized by filtration through a 0.2 μm filter and diluted to 50:50 with 1 M sucrose solution, thus resulting in an active enzyme preparation.
[0716]Em se tratando de preparados enzimáticos ativos de UGT76G1, a atividade em Unidades é definida de acordo com o seguinte: 1 mU de UGT76G1 transforma 1 nmol de rebaudiosídeo D (Reb D) em rebaudiosídeo M (Reb M) em 1 minuto. As condições de reação para o ensaio são de 30° C, 50 mM de tampão fosfato de potássio com pH 7,0, 10 mM de Reb D em t0, 500 mM de sacarose, 3 mM de MgCl2, 0,25 mM de difosfato de uridina (UDP) e 3 U/ml de Susy_At.[0716] In the case of active enzymatic preparations of UGT76G1, the activity in Units is defined according to the following: 1 mU of UGT76G1 transforms 1 nmol of rebaudioside D (Reb D) into rebaudioside M (Reb M) in 1 minute. The reaction conditions for the test are 30 ° C, 50 mM potassium phosphate buffer with pH 7.0, 10 mM Reb D in t0, 500 mM sucrose, 3 mM MgCl2, 0.25 mM diphosphate uridine (UDP) and 3 U / ml Susy_At.
EXEMPLO 5 Síntese do SvG7 por reação em pote único adicionando-se UGTSl2, SuSy_At e UGT76G1 ao mesmo tempo.EXAMPLE 5 Synthesis of SvG7 by single pot reaction adding UGTSl2, SuSy_At and UGT76G1 at the same time.
[0717]Várias moléculas de SvG7 foram sintetizadas diretamente a partir de esteviosídeo (vide a Fig. 11a) em uma reação em pote único utilizando as três enzimas (vide os EXEMPLOS 1, 2, 3 e 4): UGTSl2 (variante de SEQ ID 2), SuSy_At (variante de SEQ ID 1) e UGT76G1 (variante de SEQ ID 3).[0717] Several SvG7 molecules were synthesized directly from stevioside (see Fig. 11a) in a single pot reaction using the three enzymes (see EXAMPLES 1, 2, 3 and 4): UGTSl2 (SEQ ID variant 2), SuSy_At (variant of SEQ ID 1) and UGT76G1 (variant of SEQ ID 3).
[0718]A solução de reação final conteve 348 U/L de UGTSl2, 1.341 U/L de SuSy_At, 10 U/L de UGT76G1, 47 mM de esteviosídeo, 0,32 mM de difosfato de uridina (UDP), 0,99 M de sacarose, 3,9 mM de MgCl2 e tampão fosfato de potássio (pH 6,6). Primeiramente, misturaram-se 206 mL de água destilada a 0,24 g de MgCl2∙6h2O, 102 g de sacarose, 9,8 mL de 1,5 M de tampão fosfato de potássio (pH 6,6) e 15 g de esteviosídeo. O volume final da mistura de reação foi ajustado em 300 mL.[0718] The final reaction solution contained 348 U / L of UGTSl2, 1,341 U / L of SuSy_At, 10 U / L of UGT76G1, 47 mM stevioside, 0.32 mM uridine diphosphate (UDP), 0.99 M sucrose, 3.9 mM MgCl2 and potassium phosphate buffer (pH 6.6). First, 206 ml of distilled water were mixed with 0.24 g of MgCl2 ∙ 6h2O, 102 g of sucrose, 9.8 ml of 1.5 M of potassium phosphate buffer (pH 6.6) and 15 g of stevioside . The final volume of the reaction mixture was adjusted to 300 ml.
[0719]Depois de dissolver os componentes, ajustou-se a temperatura em 45° C e adicionaram-se UGTSl2, SuSy_At, UGT76G1 e 39 mg de UDP. A mistura de reação foi incubada em um agitador a 45o C durante 24 h. Adicionaram-se mais 39 mg de UDP às 12 horas, 24 horas e 36 horas. O teor de reb 2a, reb 2m e vários SvG7 ao fim da reação (48 horas) foi analisado por HPLC.[0719] After dissolving the components, the temperature was adjusted to 45 ° C and UGTSl2, SuSy_At, UGT76G1 and 39 mg of UDP were added. The reaction mixture was incubated on a shaker at 45o C for 24 h. An additional 39 mg of UDP was added at 12 hours, 24 hours and 36 hours. The content of reb 2a, reb 2m and several SvG7 at the end of the reaction (48 hours) was analyzed by HPLC.
EXEMPLO 6 Análise por HPLCEXAMPLE 6 HPLC Analysis
[0720]Para a análise, amostras de biotransformação foram inativadas ajustando o pH da mistura de reação em 5,5 usando H3PO4 a 17% e, em seguida, cozinhadas durante 10 minutos. As amostras resultantes foram filtradas, e os filtrados diluídos por 10 vezes e usados como amostras para a análise por HPLC. O ensaio de HPLC foi realizado em um sistema de HPLC Agilent HP 1200, composto por uma bomba, um termostato de coluna, um autoamostrador, um detector UV com capacidade para correção de ruídos e um sistema de aquisição de dados. Os analitos foram separados usando uma coluna Agilent Poroshell 120 SB-C18, 4,6 mm x 150 mm, 2,7 μm a 40° C. A fase móvel consistiu em duas pré-misturas: - pré-mistura 1 contendo 75% de tampão fosfato a 10 mM (pH 2,6) e 25% de acetonitrila, e - pré-mistura 2 contendo 68% de tampão fosfato a 10 mM (pH 2,6) e 32% de acetonitrila.[0720] For analysis, biotransformation samples were inactivated by adjusting the pH of the reaction mixture to 5.5 using 17% H3PO4 and then cooked for 10 minutes. The resulting samples were filtered, and the filtrates diluted 10 times and used as samples for HPLC analysis. The HPLC test was performed on an Agilent HP 1200 HPLC system, consisting of a pump, a column thermostat, a self-sampler, a UV detector capable of correcting noise and a data acquisition system. The analytes were separated using an Agilent Poroshell 120 SB-C18 column, 4.6 mm x 150 mm, 2.7 μm at 40 ° C. The mobile phase consisted of two premixes: - premix 1 containing 75% 10 mM phosphate buffer (pH 2.6) and 25% acetonitrile, and - premix 2 containing 68% 10 mM phosphate buffer (pH 2.6) and 32% acetonitrile.
[0721]O gradiente de eluição começou com a pré-mistura 1, mudou para a pré-mistura 2 a 50% a 12,5 minutos e mudou para a pré-mistura 2 a 100% a 13 minutos. O tempo de operação total foi de 45 minutos. A temperatura da coluna foi mantida em 40° C. O volume de injeção foi de 5 μL. Espécies de rebaudiosídeo foram detectadas por UV a 210 nm.[0721] The elution gradient started with premix 1, changed to premix 2 at 50% at 12.5 minutes and changed to premix 2 at 100% at 13 minutes. The total operating time was 45 minutes. The column temperature was maintained at 40 ° C. The injection volume was 5 μL. Rebaudioside species were detected by UV at 210 nm.
[0722]A Tabela 3 ilustra, para cada ponto no tempo, a conversão do esteviosídeo em espécies de rebaudiosídeo identificadas (porcentagem de área). Os cromatogramas do material inicial esteviosídeo e a mistura de reação a 48 horas são dados na Fig. 11a e Fig. 11b, respectivamente. Os versados na técnica apreciarão que os tempos de retenção podem variar ocasionalmente com mudanças no solvente e/ou equipamento.[0722] Table 3 illustrates, for each point in time, the conversion of the stevioside into identified rebaudioside species (percentage of area). Chromatograms of the stevioside starting material and the 48 hour reaction mixture are given in Fig. 11a and Fig. 11b, respectively. Those skilled in the art will appreciate that retention times may vary from time to time with changes in solvent and / or equipment.
Tabela 3 Biotransformação do esteviosídeo em reb 2a (rt 6,459), reb 2m (rt 5,089) e vários SvG7 Pico % de conversão do esteviosídeo tempo de reação tempo de reação 0h 48 h rt 2,651 0 0,83 rt 2,874 0 6,79 rt 3,275 0 0,15 rt 3,570 0 0,05 rt 3,798 0 0,18 rt 4,279 0 0,08 rt 4,477 0 0,05 rt 4,798 0 0,04 rt 5,089 0 0,68 rt 5,350 0 0,86 rt 5,758 0 0,28 rt 5,896 0 1,06 rt 6,261 0 0,22 rt 6,459 0 1,37 rt 6,842 0 0,57 rt 7,952 0 0,5 rt 8,775 0 1,07 reb AM 0 65,7 rt 10,346 0 0,83 rt 11,217 0 0,54 rt 12,425 0 0,2 reb M 0 14,97 rt 15,174 0 0,4 reb A 12,97 0 esteviosídeo 82,83 0 reb В 0,38 1,47 esteviosídeo 3,82 1,11 EXEMPLO 7 Purificação de rebaudiosídeos 2a, 2m e vários SvG7Table 3 Biotransformation of stevioside into reb 2a (rt 6,459), reb 2m (rt 5,089) and several SvG7 Peak% conversion of stevioside reaction time reaction time 0h 48 h rt 2,651 0 0.83 rt 2.874 0 6.79 rt 3.275 0 0.15 rt 3.570 0 0.05 rt 3.798 0 0.18 rt 4.289 0 0.08 rt 4.477 0 0.05 rt 4.788 0 0.04 rt 5.089 0 0.68 rt 5.350 0 0.86 rt 5.758 0 0.28 rt 5.896 0 1.06 rt 6.261 0 0.22 rt 6.459 0 1.37 rt 6.842 0 0.57 rt 7.952 0 0.5 rt 8.775 0 1.07 reb AM 0 65.7 rt 10.346 0 0, 83 rt 11.217 0 0.54 rt 12.425 0 0.2 reb M 0 14.97 rt 15.174 0 0.4 reb A 12.97 0 stevioside 82.83 0 reb В 0.38 1.47 stevioside 3.82 1, 11 EXAMPLE 7 Purification of rebaudiosides 2a, 2m and several SvG7
[0723]Trezentos mL da mistura de reação do EXEMPLO 5 (após 48 h) foram inativados ajustando-se o pH em 5,5 com H3PO4 e, em seguida, cozidos durante 10 minutos e filtrados. O filtrado foi carregado em uma coluna contendo 500 mL da resina YWD03 (Cangzhou Yuanwei, China) pré-equilibrada com água. A resina foi lavada com 2,5 L de água, e o efluente de água dessa etapa foi descartado.[0723] Three hundred mL of the reaction mixture from EXAMPLE 5 (after 48 h) was inactivated by adjusting the pH to 5.5 with H3PO4 and then cooked for 10 minutes and filtered. The filtrate was loaded onto a column containing 500 mL of the YWD03 resin (Cangzhou Yuanwei, China) pre-equilibrated with water. The resin was washed with 2.5 L of water, and the effluent from that stage was discarded.
[0724]Os glicosídeos de esteviol foram eluídos a partir da coluna de resina YWD03 por eluição com 2,5 L de etanol/água a 70% v/v. O efluente dessa etapa foi coletado e seco a vácuo a 60° C para obter 20 g do produto sólido seco. Essa amostra foi dissolvida em água e submetida a novo fracionamento e separação por HPLC, usando as condições listadas na Tabela 4 abaixo.[0724] The steviol glycosides were eluted from the YWD03 resin column by elution with 2.5 L of 70% v / v ethanol / water. The effluent from this step was collected and vacuum dried at 60 ° C to obtain 20 g of the dry solid product. This sample was dissolved in water and subjected to further fractionation and separation by HPLC, using the conditions listed in Table 4 below.
[0725]As frações de HPLC que corresponderam a compostos individuais de vários ciclos foram combinadas de acordo com o tempo de retenção. As frações foram secos por congelamento.[0725] The HPLC fractions that corresponded to individual compounds from several cycles were combined according to the retention time. The fractions were freeze-dried.
Tabela 4 Condições para HPLC Coluna Agilent Prodigy 3μ ODS(3) 100A, 4,6mm x 250mm, 3 mícrons Temperatura 40° C Fase Móvel Isocrática - Água a 77%, Acetonitrila a 23% Taxa de fluxo 0,5 mL/min Injeção 10 μL Tempo de interrupção 45 min Temperatura do Ambiente autoamostrador Detecção UV a 210 nmTable 4 Conditions for HPLC Column Agilent Prodigy 3μ ODS (3) 100A, 4.6mm x 250mm, 3 microns Temperature 40 ° C Isocratic Mobile Phase - 77% water, 23% acetonitrile Flow rate 0.5 mL / min Injection 10 μL Interruption time 45 min Self-sampling room temperature UV detection at 210 nm
[0726]A pureza das frações obtidas foi avaliada por um método de HPLC analítica descrito no EXEMPLO 6. O cromatograma do rebaudiosídeo 2a purificado é dada na Fig. 11c. O cromatograma do rebaudiosídeo 2m purificado é dada na Fig.[0726] The purity of the fractions obtained was evaluated by an analytical HPLC method described in EXAMPLE 6. The chromatogram of the purified rebaudioside 2a is given in Fig. 11c. The chromatogram of the purified 2m rebaudioside is given in Fig.
11d.11d.
EXEMPLO 8 Elucidação estrutural do rebaudiosídeo 2aEXAMPLE 8 Structural clarification of rebaudioside 2a
[0727]Experimentos de RMN foram realizados em um espectrômetro Bruker de 500 MHz com a amostra dissolvida em piridina-d5. Junto com os sinais da amostra, observaram-se os sinais da piridina-d5 a δC 123,5, 135,5, 149,9 ppm e δH 7,19, 7,55, 8,71 ppm. O espectro de RMN de 1H do rebaudiosídeo 2a registrado em piridina-d5 confirmou a excelente qualidade da amostra (vide a Fig. 12a). A HSQC (vide a Fig. 12b) exibe a presença de um grupo exo-metileno na região de açúcar com um acoplamento de longo alcance com C-15, observável na H,H-COSY (Fig.[0727] NMR experiments were performed on a 500 MHz Bruker spectrometer with the sample dissolved in pyridine-d5. Along with the sample signals, the pyridine-d5 signals were observed at δC 123.5, 135.5, 149.9 ppm and δH 7.19, 7.55, 8.71 ppm. The 1H NMR spectrum of rebaudioside 2a recorded in pyridine-d5 confirmed the excellent quality of the sample (see Fig. 12a). HSQC (see Fig. 12b) shows the presence of an exo-methylene group in the sugar region with a long-range coupling with C-15, observable in H, H-COZY (Fig.
12c). Outros sinais de campo profundo dos carbonetos quarternários (C-13, C-16 e C-19) são detectados pela HMBC (Fig. 12d). A correlação dos sinais na HSQC, HMBC e H,H-COSY revelam a presença de glicosídeo de esteviol com a estrutura de aglicona a seguir:12c). Other deep-field signals from quarternary carbides (C-13, C-16 and C-19) are detected by HMBC (Fig. 12d). The correlation of signals in HSQC, HMBC and H, H-COZY reveals the presence of steviol glycoside with the following aglycone structure:
[0728]A correlação da HSQC e HMBC ilustra a presença de sete sinais anoméricos, marcados por 1i, 1ii, 1iii, 1iv, 1v, 1vi e 1vii. A constante de acoplamento dos prótons anoméricos de cerca de 8 Hz, os amplos sinais de sua ligação com açúcar e as correlações de NOE dos prótons anoméricos permitem a identificação desses sete açúcares como β-D-glicopiranosídeos.[0728] The correlation of HSQC and HMBC illustrates the presence of seven anomeric signals, marked by 1i, 1ii, 1iii, 1iv, 1v, 1vi and 1vii. The coupling constant of the anomeric protons of about 8 Hz, the wide signs of their binding with sugar and the NOE correlations of the anomeric protons allow the identification of these seven sugars as β-D-glycopyranosides.
[0729]Os dados combinados da HSQC e HMBC revelam as ligações açúcar- açúcar e açúcar-aglicona. A designação da sequência de açúcar foi confirmada usando-se a combinação de HSQC-TOCSY (Fig. 12e) e NOESY (Fig. 12f).[0729] The combined data from HSQC and HMBC reveal the sugar-sugar and sugar-aglycone bonds. The designation of the sugar sequence was confirmed using the combination of HSQC-TOCSY (Fig. 12e) and NOESY (Fig. 12f).
[0730]Em suma, os resultados dos experimentos de RMN acima foram usados para designar as mudanças químicas dos prótons e carbonos da estrutura do rebaudiosídeo 2a (vide a Tabela 5).[0730] In summary, the results of the above NMR experiments were used to designate the chemical changes in protons and carbons in the structure of rebaudioside 2a (see Table 5).
Tabela 5 Mudanças químicas do rebaudiosídeo 2a Posição δC [ppm] δH [ppm] J [Hz]/(INT) HMBC (H→C) Grupamento aglicona 0,67 m 1 40,1 t 1,62 m 1,36 m 2 19,5 t 2,10 mTable 5 Chemical changes of rebaudioside 2nd Position δC [ppm] δH [ppm] J [Hz] / (INT) HMBC (H → C) Agglone group 0.67 m 1 40.1 t 1.62 m 1.36 m 2 19.5 t 2.10 m
1,05 m 3 37,1 t 2,77 m1.05 m 3 37.1 t 2.77 m
4 44,5 s -4 44.5 s -
5 57,1 d 0,94 m5 57.1 d 0.94 m
1,92 m 6 21,8 t 2,13 m1.92 m 6 21.8 t 2.13 m
1,22 m 7 40,9 t 1,36 m1.22 m 7 40.9 t 1.36 m
8 42,1 s -8 42.1 s -
9 53,4 d 0,82 m9 53.4 d 0.82 m
10 39,1 s -10 39.1 s -
1,57 m 11 20,4 t 1,60 m1.57 m 11 20.4 t 1.60 m
1,90 m 12 37,4 t 2,13 m1.90 m 12 37.4 t 2.13 m
13 86,5 s -13 86.5 s -
1,77 d 11,1 14 43,4 t 2,47 d 11,11.77 d 11.1 14 43.4 t 2.47 d 11.1
1,96 d 16,0 15 47,2 t 7, 8, 9, 14 1,99 d 16,01.96 d 16.0 15 47.2 t 7, 8, 9, 14 1.99 d 16.0
16 153,7 s -16 153.7 s -
4,99 br s 17 104,4 t 13, 15, 16 5,67 br s4.99 br s 17 104.4 t 13, 15, 16 5.67 br s
18 28,5 q 1,40 s (3H) 3, 4, 5, 1918 28.5 q 1.40 s (3H) 3, 4, 5, 19
19 175,7 s -19 175.7 s -
20 16,0 q 1,04 s (3H) 1, 5, 9, 1020 16.0 q 1.04 s (3H) 1, 5, 9, 10
Tabela 5 (continuação)Table 5 (continued)
Mudanças químicas do rebaudiosídeo 2aChemical changes of rebaudioside 2a
Posição δC [ppm] δH [ppm] J [Hz]/(Int) HMBC NOEPosition δC [ppm] δH [ppm] J [Hz] / (Int) HMBC NOE
(H→C) (H→H)(H → C) (H → H)
Grupamento de açúcarSugar group
Açúcar I: β-D-GlicopiranosídeoSugar I: β-D-Glycopyranoside
1i 97,0 d 5,09 d 7,7 131i 97.0 d 5.09 d 7.7 13
2i 81,9 d 4,16 m2i 81.9 d 4.16 m
3i 75,8 d 4,37 m3i 75.8 d 4.37 m
4i 81,9 3,85 m4i 81.9 3.85 m
5i 75,6 d 3,97 m5i 75.6 d 3.97 m
4,20 m 6i 61,8 t 4,80 m4.20 m 6i 61.8 t 4.80 m
Açúcar II: β-D-GlicopiranosídeoSugar II: β-D-Glycopyranoside
1ii 105,0 d 5,28 d 8,0 2i 2i1ii 105.0 d 5.28 d 8.0 2i 2i
2ii 76,3 d 4,09 m2ii 76.3 d 4.09 m
3ii 78,0 d 4,29 m3ii 78.0 d 4.29 m
4ii 70,8 d 4,24 m4ii 70.8 d 4.24 m
5ii 78,1 d 3,91 m5ii 78.1 d 3.91 m
4,39 m 6ii 61,4 t 4,50 m4.39 m 6ii 61.4 t 4.50 m
Açúcar III: β-D-GlicopiranosídeoSugar III: β-D-Glycopyranoside
1iii 102,4 d 4,98 d 8,1 4i 4i1iii 102.4 d 4.98 d 8.1 4i 4i
2iii 84,8 d 4,05 m2iii 84.8 d 4.05 m
3iii 77,9 d 4,22 m3iii 77.9 d 4.22 m
4iii 70,9 d 4,12 m4iii 70.9 d 4.12 m
5iii 77,6 d 3,92 m5iii 77.6 d 3.92 m
6iii 62,5 t 4,31 m6iii 62.5 t 4.31 m
4,53 m4.53 m
Açúcar IV: β-D-GlicopiranosídeoSugar IV: β-D-Glycopyranoside
1iv 106,4 d 5,22 d 7,8 2iii 2iii1iv 106.4 d 5.22 d 7.8 2iii 2iii
2iv 76,1 d 4,12 m2iv 76.1 d 4.12 m
3iv 78,1 d 4,06 m3iv 78.1 d 4.06 m
4iv 70,4 d 4,25 m4iv 70.4 d 4.25 m
5iv 78,3 d 3,81 m5iv 78.3 d 3.81 m
4,24 m 6iv 61,6 t 4,50 m4.24 m 6iv 61.6 t 4.50 m
Açúcar V: β-D-GlicopiranosídeoSugar V: β-D-Glycopyranoside
1v 93,0 d 6,25 d 8,1 191v 93.0 d 6.25 d 8.1 19
2V 76,8 d 4,47 m2V 76.8 d 4.47 m
3V 88,2 d 4,28 m3V 88.2 d 4.28 m
4V 69,1 d 4,12 m4V 69.1 d 4.12 m
5V 78,2 d 3,92 m5V 78.2 d 3.92 m
4,16 m 6V 61,5 t 4,33 m4.16 m 6V 61.5 t 4.33 m
Tabela 5 (continuação)Table 5 (continued)
Mudanças químicas do rebaudiosídeo 2aChemical changes of rebaudioside 2a
Posição δC [ppm] δH [ppm] J [Hz]/ (Int) HMBC NOEPosition δC [ppm] δH [ppm] J [Hz] / (Int) HMBC NOE
(H→C) (H→H)(H → C) (H → H)
Grupamento de açúcarSugar group
Açúcar VI: β-D-GlicopiranosídeoSugar VI: β-D-Glycopyranoside
1vi 103,5 d 5,77 d 7,8 2v 2v1vi 103.5 d 5.77 d 7.8 2v 2v
2vi 75,4 d 4,00 m2vi 75.4 d 4.00 m
3vi 77,6 d 4,27 m3vi 77.6 d 4.27 m
4vi 71,1 d 4,27 m4vi 71.1 d 4.27 m
5vi 78,0 d 3,96 m 4,42 m 6vi 62,7 t 4,58 m Açúcar VII: β-D-Glicopiranosídeo 1vii 104,4 d 5,28 d 8,0 3v 3v 2vii 75,0 d 4,01 m 3vii 77,2 d 4,17 m 4vii 71,5 d 4,10 m 5vii 77,9 d 4,00 m 4,42 m 6vii 61,8 t 4,52 m5vi 78.0 d 3.96 m 4.42 m 6vi 62.7 t 4.58 m Sugar VII: β-D-Glycopyranoside 1vii 104.4 d 5.28 d 8.0 3v 3v 2vii 75.0 d 4 , 01 m 3vii 77.2 d 4.17 m 4vii 71.5 d 4.10 m 5vii 77.9 d 4.00 m 4.42 m 6vii 61.8 t 4.52 m
[0731]A correlação de todos os resultados de RMN indica o rebaudiosídeo 2a com sete β-D-glicoses ligadas à aglicona de esteviol, conforme representado na estrutura química a seguir:[0731] The correlation of all NMR results indicates rebaudioside 2a with seven β-D-glucoses linked to the steviol aglycone, as represented in the following chemical structure:
[0732]A análise por LCMS (Fig. 12g e Fig. 12h) do rebaudiosídeo 2a demonstrou um íon [M-H]- a m/z 1.451,6, em consonância com a fórmula molecular esperada C62H100O38 (calculada para o íon monoisotópico [C62H99O38]- 1.451,6). Os dados de MS confirmam que o rebaudiosídeo 2a possui fórmula molecular[0732] LCMS analysis (Fig. 12g and Fig. 12h) of rebaudioside 2a demonstrated an [MH] - am / z 1,451.6 ion, in line with the expected molecular formula C62H100O38 (calculated for the monoisotopic ion [C62H99O38] - 1,451.6). MS data confirm that rebaudioside 2a has a molecular formula
C62H100O38. A análise por LCMS foi realizada nas condições listadas na Tabela 6 a seguir.C62H100O38. LCMS analysis was performed under the conditions listed in Table 6 below.
Tabela 6 Condições para a análise por LCMS Coluna Agilent Poroshell 120 SB-C18, 4,6 mm x 150 mm, 2,7 μm Temperatura 40° C Fase Móvel A: Solução Pré-Mistura da Fase Móvel - 25% de Acetonitrila : 75% de Ácido Fórmico (0,1% em Água) B: Solução Pré-Mistura da Fase Móvel - 32% de Acetonitrila : 68% de Ácido Fórmico (0,1% em Água) Gradiente Tempo (min) A (%) B (%) 0 100 0 12,0 100 0 12,5 50 50 13,0 0 100 60,0 0 100 Taxa de fluxo 0,5 mL/min Injeção 2 μL Tempo de operação 45 mins Pós-tempo 5 mins Temperatura do Ambiente autoamostrador Detecção MSD no modo de Varredura NegativaTable 6 Conditions for LCMS analysis Agilent Poroshell 120 SB-C18 column, 4.6 mm x 150 mm, 2.7 μm Temperature 40 ° C Mobile phase A: Mobile phase premix solution - 25% Acetonitrile: 75 % Formic Acid (0.1% in Water) B: Mobile Phase Pre-Mix Solution - 32% Acetonitrile: 68% Formic Acid (0.1% in Water) Gradient Time (min) A (%) B (%) 0 100 0 12.0 100 0 12.5 50 50 13.0 0 100 60.0 0 100 Flow rate 0.5 mL / min Injection 2 μL Operating time 45 mins Post-time 5 mins Self-sampling environment MSD detection in Negative Scan mode
Configuração de MSD Modo: ES-API, Polaridade Negativa Fluxo de gás de secagem: 13,0 L/min Pressão do nebulizador: 30 psig Temperatura do gás de secagem: 270° C Fragmentador: 50V Faixas de varredura: 500 a 1.500 de massa Preparo da amostra 1 mg/ml (30% de ACN em água) EXEMPLO 9 Elucidação estrutural do rebaudiosídeo 2mMSD configuration Mode: ES-API, Negative Polarity Drying gas flow: 13.0 L / min Nebulizer pressure: 30 psig Drying gas temperature: 270 ° C Fragmenter: 50V Scanning ranges: 500 to 1,500 mass Sample preparation 1 mg / ml (30% ACN in water) EXAMPLE 9 Structural clarification of rebaudioside 2m
[0733]Experimentos de RMN foram realizados em um espectrômetro Bruker de 500 MHz com a amostra dissolvida em piridina-d5. Junto com os sinais da amostra, observaram-se os sinais da piridina-d5 a δC 123,5, 135,5, 149,9 ppm e δH 7,19, 7,55, 8,71 ppm. O espectro de RMN de 1H do rebaudiosídeo 2m registrado em piridina-d5 confirmou a excelente qualidade da amostra (vide a Fig. 13a). A HSQC (vide a Fig. 13b) exibe a presença de um grupo exo-metileno na região de açúcar com um acoplamento de longo alcance com C-15, observável na H,H-COSY (Fig. 13c). Outros sinais de campo profundo dos carbonetos quarternários (C-13, C-16 e C-19) são detectados pela HMBC (Fig. 13d). A correlação dos sinais na HSQC, HMBC e H,H-COSY revelam a presença de glicosídeo de esteviol com a estrutura de aglicona a seguir:[0733] NMR experiments were performed on a 500 MHz Bruker spectrometer with the sample dissolved in pyridine-d5. Along with the sample signals, the pyridine-d5 signals were observed at δC 123.5, 135.5, 149.9 ppm and δH 7.19, 7.55, 8.71 ppm. The 1H NMR spectrum of the 2m rebaudioside recorded in pyridine-d5 confirmed the excellent quality of the sample (see Fig. 13a). HSQC (see Fig. 13b) shows the presence of an exo-methylene group in the sugar region with a long-range coupling with C-15, observable in H, H-COZY (Fig. 13c). Other deep-field signals from the quarternary carbides (C-13, C-16 and C-19) are detected by HMBC (Fig. 13d). The correlation of signals in HSQC, HMBC and H, H-COZY reveals the presence of steviol glycoside with the following aglycone structure:
[0734]A correlação da HSQC e HMBC ilustra a presença de sete sinais anoméricos, marcados por 1i, 1ii, 1iii, 1iv, 1v, 1vi e 1vii. A constante de acoplamento dos prótons anoméricos de cerca de 8 Hz, os amplos sinais de sua ligação com açúcar e as correlações de NOE dos prótons anoméricos permitem a identificação desses sete açúcares como β-D-glicopiranosídeos.[0734] The correlation of HSQC and HMBC illustrates the presence of seven anomeric signals, marked by 1i, 1ii, 1iii, 1iv, 1v, 1vi and 1vii. The coupling constant of the anomeric protons of about 8 Hz, the wide signs of their binding with sugar and the NOE correlations of the anomeric protons allow the identification of these seven sugars as β-D-glycopyranosides.
[0735]Os dados combinados da HSQC e HMBC revelam as ligações açúcar- açúcar e açúcar-aglicona. A designação da sequência de açúcar foi confirmada usando-se a combinação de HSQC-TOCSY (Fig. 13e) e NOESY (Fig. 13f).[0735] The combined data from HSQC and HMBC reveal the sugar-sugar and sugar-aglycone bonds. The designation of the sugar sequence was confirmed using the combination of HSQC-TOCSY (Fig. 13e) and NOESY (Fig. 13f).
[0736]Em suma, os resultados dos experimentos de RMN acima foram usados para designar as mudanças químicas dos prótons e carbonos da estrutura do rebaudiosídeo 2m (vide a Tabela 7).[0736] In summary, the results of the above NMR experiments were used to designate the chemical changes in protons and carbons in the structure of the 2 m rebaudioside (see Table 7).
Tabela 7 Mudanças químicas do rebaudiosídeo 2m Posição δC [ppm] δH [ppm] J [Hz]/ (INT) HMBC (H→C) Grupamento aglicona 0,68 m 1 40,0 t 1,63 m 1,38 m 2 19,3 t 2,06 m 1,04 m 3 37,1 t 2,81 m 4 44,0 s - 5 56,9 d 0,96 m 1,93 m 6 21,8 t 2,13 m 1,25 m 7 41,1 t 1,36 m 8 41,6 s - 9 53,6 d 0,82 m 10 40,4 s -Table 7 Chemical changes of the 2 m rebaudioside position δC [ppm] δH [ppm] J [Hz] / (INT) HMBC (H → C) Agglomerate group 0.68 m 1 40.0 t 1.63 m 1.38 m 2 19.3 t 2.06 m 1.04 m 3 37.1 t 2.81 m 4 44.0 s - 5 56.9 d 0.96 m 1.93 m 6 21.8 t 2.13 m 1 , 25 m 7 41.1 t 1.36 m 8 41.6 s - 9 53.6 d 0.82 m 10 40.4 s -
1,58 m 11 19,8 t 1,61 m1.58 m 11 19.8 t 1.61 m
1,96 m 12 37,5 t 1,99 m1.96 m 12 37.5 t 1.99 m
13 86,2 s -13 86.2 s -
1,73 d 10,9 14 43,1 t 2,34 d 10,91.73 d 10.9 14 43.1 t 2.34 d 10.9
1,96 d 15,9 15 47,5 t 7, 8, 9, 14 2,02 d 15,91.96 d 15.9 15 47.5 t 7, 8, 9, 14 2.02 d 15.9
16 153,4 s -16 153.4 s -
4,98 br s 17 104,3 t 13, 15, 16 5,55 br s4.98 br s 17 104.3 t 13, 15, 16 5.55 br s
18 28,6 q 1,42 s (3H) 3, 4, 5, 1918 28.6 q 1.42 s (3H) 3, 4, 5, 19
19 175,3 s -19 175.3 s -
20 16,3 q 1,01 s (3H) 1, 5, 9, 1020 16.3 q 1.01 s (3H) 1, 5, 9, 10
Tabela 7 (continuação) Mudanças químicas do rebaudiosídeo 2mTable 7 (continued) Chemical changes of the 2m rebaudioside
Posição δC [ppm] δH [ppm] J [Hz]/ (Int) HMBC NOEPosition δC [ppm] δH [ppm] J [Hz] / (Int) HMBC NOE
(H→C) (H→H)(H → C) (H → H)
Grupamento de açúcarSugar group
Açúcar I: β-D-GlicopiranosídeoSugar I: β-D-Glycopyranoside
1i 97,3 d 4,88 d 7,8 13 Зi, 5i1i 97.3 d 4.88 d 7.8 13 Зi, 5i
2i 81,9 d 3,75 m2i 81.9 d 3.75 m
3i 75,3 d 4,18 m3i 75.3 d 4.18 m
4i 79,6 d 4,40 m4i 79.6 d 4.40 m
5i 74,0 d 3,50 m5i 74.0 d 3.50 m
6i 67,9 t 4,55 m (2H) 5i, 1iv6i 67.9 t 4.55 m (2H) 5i, 1iv
Açúcar II: β-D-GlicopiranosídeoSugar II: β-D-Glycopyranoside
1ii 105,7 d 5,10 d 8,0 2i 2i, 3ii, 5ii1ii 105.7 d 5.10 d 8.0 2i 2i, 3ii, 5ii
2ii 74,6 d 4,02 m2ii 74.6 d 4.02 m
3ii 77,9 d 4,18 m3ii 77.9 d 4.18 m
4ii 71,4 d 4,20 m4ii 71.4 d 4.20 m
5ii 78,1 d 3,87 m5ii 78.1 d 3.87 m
4,19 m 6ii 61,8 t 4,46 m4.19 m 6ii 61.8 t 4.46 m
Açúcar III: β-D-GlicopiranosídeoSugar III: β-D-Glycopyranoside
1iii 104,3 d 5,57 d 8,1 4i 4i, Зiii, 5iii1iii 104.3 d 5.57 d 8.1 4i 4i, Зiii, 5iii
2iii 75,2 d 4,03 m2iii 75.2 d 4.03 m
3iii 77,1 d 4,35 m3iii 77.1 d 4.35 m
4iii 71,4 d 4,23 m4iii 71.4 d 4.23 m
5iii 76,8 d 4,19 m5iii 76.8 d 4.19 m
4,34 m 6iii 63,3 t 4,56 m4.34 m 6iii 63.3 t 4.56 m
Açúcar IV: β-D-GlicopiranosídeoSugar IV: β-D-Glycopyranoside
1iv 104,9 d 5,37 d 8,0 6i 6i, 3iv, 5iv1iv 104.9 d 5.37 d 8.0 6i 6i, 3iv, 5iv
2iv 75,0 d 4,06 m2iv 75.0 d 4.06 m
3iv 78,3 d 4,29 m3iv 78.3 d 4.29 m
4iv 71,1 d 4,27 m4iv 71.1 d 4.27 m
5iv 78,0 d 3,99 m5iv 78.0 d 3.99 m
4,22 m 6iv 62,1 t 4,36 m4.22 m 6iv 62.1 t 4.36 m
Açúcar V: β-D-GlicopiranosídeoSugar V: β-D-Glycopyranoside
1v 92,8 d 6,27 d 8,1 19 3v, 5v1v 92.8 d 6.27 d 8.1 19 3v, 5v
2v 77,0 d 4,47 m2v 77.0 d 4.47 m
3v 88,2 d 4,28 m3v 88.2 d 4.28 m
4v 69,0 d 4,10 m4v 69.0 d 4.10 m
5v 78,1 d 3,88 m5v 78.1 d 3.88 m
4,22 m 6v 61,7 t 4,36 m4.22 m 6v 61.7 t 4.36 m
Tabela 7 (continuação)Table 7 (continued)
Mudanças químicas do rebaudiosídeo 2mChemical changes of the 2m rebaudioside
Posição δC [ppm] δH [ppm] J [Hz]/ (Int) HMBC NOEPosition δC [ppm] δH [ppm] J [Hz] / (Int) HMBC NOE
(H→C) (H→H)(H → C) (H → H)
Grupamento de açúcarSugar group
Açúcar VI: β-D-GlicopiranosídeoSugar VI: β-D-Glycopyranoside
1vi 103,2 d 5,78 d 7,8 2v 2v, 3vi, 5vi1vi 103.2 d 5.78 d 7.8 2v 2v, 3vi, 5vi
2vi 75,6 d 3,99 m2vi 75.6 d 3.99 m
3vi 78,2 d 4,25 m3vi 78.2 d 4.25 m
4vi 72,7 d 4,10 m4vi 72.7 d 4.10 m
5vi 78,0 d 3,93 m5vi 78.0 d 3.93 m
4,29 m 6vi 62,6 t 4,40 m4.29 m 6vi 62.6 t 4.40 m
Açúcar VII: β-D-GlicopiranosídeoSugar VII: β-D-Glycopyranoside
1vii 104,4 d 5,30 d 8,0 3V 3v, 3vii, 5vii1vii 104.4 d 5.30 d 8.0 3V 3v, 3vii, 5vii
2vii 75,3 d 4,00 m2vii 75.3 d 4.00 m
3vii 78,1 d 4,12 m3vii 78.1 d 4.12 m
4vii 71,2 d 4,12 m4vii 71.2 d 4.12 m
5vii 78,1 d 3,97 m5vii 78.1 d 3.97 m
4,26 m 6vii 62,0 t 4,46 m4.26 m 6vii 62.0 t 4.46 m
[0737]A correlação de todos os resultados de RMN indica o rebaudiosídeo 2m com sete β-D-glicoses ligadas à aglicona de esteviol, conforme representado na estrutura química a seguir:[0737] The correlation of all NMR results indicates the 2 m rebaudioside with seven β-D-glucoses linked to the steviol aglycone, as represented in the following chemical structure:
[0738]A análise por LCMS (Fig. 13g e Fig. 13h) do rebaudiosídeo 2m demonstrou um íon [M-H]- a m/z 1.451,6, em consonância com a fórmula molecular esperada C62H100O38 (calculada para o íon monoisotópico [C62H99O38]- 1.451,6). Os dados de MS confirmam que o rebaudiosídeo 2m possui fórmula molecular C62H100O38. A análise por LCMS foi realizada nas condições listadas na Tabela 6.[0738] LCMS analysis (Fig. 13g and Fig. 13h) of the 2m rebaudioside demonstrated an [MH] - am / z 1,451.6 ion, in line with the expected molecular formula C62H100O38 (calculated for the monoisotopic ion [C62H99O38] - 1,451.6). MS data confirm that the 2m rebaudioside has the molecular formula C62H100O38. LCMS analysis was performed under the conditions listed in Table 6.
[0739]Embora tenham-se descrito a invenção e suas vantagens em detalhes, deve-se ter em mente é possível realizar várias mudanças, substituições e alterações à presente invenção sem divergir de seu âmbito nem de sua essência conforme definidos nas reivindicações apensas. Além disso, não tenciona-se que o âmbito deste pedido limite-se às modalidades específicas da invenção descrita no relatório descritivo. Como os versados na técnica perceberão prontamente mediante a leitura da revelação da invenção, as composições, processos, métodos e etapas, existentes hoje ou desenvolvidos no futuro, que realizem substancialmente a mesma função ou atinjam substancialmente o mesmo resultado que as modalidades correspondentes descritas neste documento podem ser utilizados de acordo com a presente invenção.[0739] Although the invention and its advantages have been described in detail, it should be borne in mind that it is possible to carry out various changes, substitutions and alterations to the present invention without diverging from its scope or its essence as defined in the attached claims. Furthermore, it is not intended that the scope of this application be limited to the specific modalities of the invention described in the specification. As those skilled in the art will readily perceive by reading the disclosure of the invention, the compositions, processes, methods and steps, existing today or developed in the future, that perform substantially the same function or achieve substantially the same result as the corresponding modalities described in this document can be used in accordance with the present invention.
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