BR112017011187B1 - Derivados 2' e/ou 5' éster fosforamidato de aminoácido de 3- desoxiadenosina, composições farmacêuticas compreendendo os mesmos e seus usos no tratamento de câncer - Google Patents

Abstract

DERIVADOS 2' E/OU 5' ÉSTER FOSFORAMIDATO DE AMINOÁCIDO DE 3- DESOXIADENOSINA, COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS COMPREENDENDO OS MESMOS E SEUS USOS NO TRATAMENTO DE CÂNCER. A presente invenção se refere a compostos químicos, a compostos para uso em um método de tratamento, em particular em um método de profilaxia ou tratamento para o câncer, um processo para a preparação dos compostos e composições farmacêuticas que compreendem os compostos. Os compostos podem, em particular, ser úteis no tratamento de leucemias, linfomas e/ou tumores sólidos em Homo sapiens. Os compostos são derivados de cordicepina (3'-desoxiadenosina), possuindo uma porção 2' e/ou 5' éster fosforamidato de aminoácido.

Description

[0001] A presente invenção se refere a compostos químicos, os compostos para uso em um método de tratamento, particularmente em um método de profilaxia ou tratamento para câncer, um processo para a preparação dos compostos e composições farmacêuticas que compreendem os compostos.

[0002] Particularmente, embora não exclusivamente, a presente invenção se refere a compostos químicos para uso no tratamento de leucemia, linfoma e/ou tumores sólidos em Homo sapiens.

[0003] A cordicepina é 3'-desoxiadenosina (3'dA). Ela é um nucleosídico análogo de adenosina que não possui o grupo 3'-hidroxila na porção ribose.

[0004] A cordicepina é uma das principais substâncias bioativas produzidas pelo Cordyceps militaris, um fungo parasita usado na medicina tradicional Chinesa em virtude de seus efeitos de ativador imune, antienvelhecimento e antitumor. Referência é feita a Tuli, H. S. et al 3 Biotech (2014) 4: 1-12.

[0005] A cordicepina pode ser produzida sinteticamente a partir de adenosina. Referência para tais procedimentos de síntese é feita a Robins, J. R. et al J. Org. Chem. 1995, 60, 7902-7908 e Aman, S. et al., Organic Process Research & Development 2000, 4, 601-605.

[0006] A cordicepina foi estudada mais extensivamente como um agente anticâncer.

[0007] Em virtude de sua estrutura, 3'dA e sua forma de trifosfato poderiam interferir potencialmente com qualquer processo que requeira, respectivamente, adenosina ou trifosfato de adenosina (ATP).

[0008] Após administração, 3'dA é, no entanto, rapidamente desaminada pela adenosina desaminase (ADA) e rapidamente metabolizada em um metabólito inativo, 3'- desoxi-inosina, in vivo. Referência é feita a Tsai, Y-J et al, J. Agri. Food Chem. 58 4638-43 (2010).

[0009] Conforme descrito em Glazer, R. et al, Cancer Research 38, 2233-2238 (1978), foi mostrado que a cordicepina exibe potência anticâncer quando usada em combinação com um inibidor de adenosina desaminase, tal como pentostatina (2- desoxicoformicina, DCF). Outros inibidores de ADA também foram propostos como cofármacos alternativos a serem administrados com a cordicepina, mas é a combinação de 3'dA- dCF que tem sido usada em ensaios clínicos. Conforme reconhecido em Wehbe-Janek, H. et al., Anticancer Research 27: 3143-3146 (2007), a 2-desoxicoformicina é, no entanto, conhecida por ser um fármaco relativamente tóxico.

[0010] 2-Fluorocordicepina (3'-desoxi-2 fluoroadenosina) também é conhecida por ser citotóxica (vide, por exemplo, Montgomery et al., J. Med. Chem., 1969, 12(3), 498-504 e Dickinson et al., J. Med. Chem., 1967, 10(6), 1165-1166).

[0011] 2-Clorocordicepina (3'-desoxi-2- cloroadenosina) foi avaliada quanto à sua atividade antiviral (Rosowsky et al. J. Med. Chem., 1989, 32, 113540).

[0012] A presente invenção tem como objetivo uma solução para o problema de aumento da potência de um 3'- desoxinucleosídeo com base em purina, conforme exemplificado pela cordicepina (3'-desoxiadenosina), em um método de profilaxia ou tratamento, particularmente, embora não exclusivamente, em quimioterapia anticâncer, incluindo quimioterapia para o tratamento de leucemia, linfoma e/ou tumores sólidos.

[0013] Um outro objetivo da presente invenção é fornecer uma solução para o problema de 3'- desoxinucleosídeos com base em purina, conforme exemplificado pela cordicepina (3'-desoxiadenosina), serem desaminados por ADA mediante administração e depois rapidamente metabolizados em um metabólito inativo.

[0014] Um outro objetivo da presente invenção é fornecer uma solução para o problema de 3'- desoxinucleosídeos com base em purina, conforme exemplificado pela cordicepina (3'-desoxiadenosina), serem desaminados por ADA mediante administração e depois rapidamente metabolizados em um metabólito inativo, de modo a eliminar completamente, ou reduzir pelo menos parcialmente, a necessidade de coadministrar um inibidor de ADA quando um 3'-desoxinucleosídeo com base em purina é usado em um método de profilaxia ou tratamento particularmente, embora não exclusivamente, em quimioterapia anticâncer, incluindo quimioterapia para o tratamento de leucemia, linfoma e/ou tumores sólidos.

[0015] De acordo com um primeiro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto o qual é um composto de fórmula (Ia): em que: W1 e W2 são, cada um independentemente, selecionados a partir do grupo que consiste em -P(=O)(U)(V) e H, contanto que pelo menos um de W1 e W2 seja -P(=O)(U)(V), onde U e V, independentemente para cada um de W1 e W2, são selecionados a partir do grupo que consiste em: (a) U é -OAr em combinação com V é -NR4-CR1R2-C(=O)OR3, onde Ar é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-30arila e 5-30heteroarila, cada uma das quais é opcionalmente substituída; cada um de R1 e R2 é independentemente selecionado a partir de H e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1- 6alquila, C2-20alquenila, C1-20alcóxi, C1-20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3-20cicloalquilC6-30arila, C6-30arilóxi e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; R3 é selecionado a partir de H e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1-20alquila, C2-20alquenila, C1- 20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3- 20cicloalquilC6-30arila e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; R4 é selecionado a partir deH e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1-20alquila, C2-20alquenila, C1-20alcóxi, C1-20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3- 20cicloalquilC6-30arila, C6-30arilóxi e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; e (b) cada um de U e V é selecionado independentemente a partir de -NR5R6, onde R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila e R6 é -CR7R8CO2R9, onde R7 e R8 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste nas cadeias laterais, incluindo H, de alfa aminoácidos de ocorrência natural e R9 é selecionado a partir de H e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1-20alquil-, C2-20alquenila, C1-20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3- 20cicloalquilC6-30arila e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; ou R5 e R6, junto com o átomo de N ao qual eles estão ligados, formam uma porção em anel que compreende 5 a 8 átomos no anel; Q é selecionado a partir do grupo que consiste em O, S e CR10R11, onde R10 e R11 são independentemente selecionados a partir de H, F e C1-6alquila; cada um de X e Z é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, F, Cl, Br, I, C1- 6alquila, -NR12R13 onde cada um de R12 e R13 é independentemente selecionado a partir de H e C1-6alquila e -SR14 onde R14 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila; e Y é selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, F, Cl, Br, I, -OC1-6alquila, C1-6alquila, C2-8alquinila, - NR15R16, onde cada um de R15 e R16 é independentemente selecionado a partir de H e C1-6alquila e -SR17, onde R17 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila, ou um sal, éster, sal de um éster, solvato ou pró- fármaco farmaceuticamente aceitável do composto de fórmula (Ia).

[0016] Os compostos da presente invenção são 3'- desoxinucleosídeos com base em purina, nos quais cada uma das posições substituintes 3' na porção açúcar do nucleosídeo é ocupada por H.

[0017] Em uma outra concretização, o composto da invenção pode ser um composto de fórmula (Ib) em que: W1 e W2 são, cada um independentemente, selecionados a partir do grupo que consiste em -P(=O)(U)(V) e H, contanto que pelo menos um de W1 e W2 é -P(=O)(U)(V), onde U e V, independentemente para cada um de W1 e W2, são selecionados a partir do grupo que consiste em: (c) U é -OAr e V é -NR4-CR1R2-C(=O)OR3, onde Ar é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-30arila e 5-30heteroarila, cada uma das quais é opcionalmente substituída; cada um de R1 e R2 é independentemente selecionado a partir de H e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1- 6alquila, C2-20alquenila, C1-20alcóxi, C1-20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3-20cicloalquila, C6- 30arila, C6-30arilóxi e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; R3 é selecionado a partir de H e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1-20alquila, C2-20alquenila, C1- 20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3- 20cicloalquila, C6-30arila e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; R4 é selecionado a partir deH e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1-20alquila, C2-20alquenila, C1-20alcóxi, C1-20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3- 20cicloalquila, C6-30arila, C6-30arilóxi e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; e (d) cada um de U e V é selecionado independentemente a partir de -NR5R6, onde R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila e R6 é -CR7R8CO2R9, onde R7 e R8 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste nas cadeias laterais, incluindo H, de alfa aminoácidos de ocorrência natural e R9 é selecionado a partir de H e o grupo que consiste em C1-20alquila, C6-30arilC1-20alquil-, C2-20alquenila, C1-20alcóxiC1-20alquila, C1-20alcóxiC6-30arila, C2-20alquinila, C3- 20cicloalquila, C6-30arila e 5-20heterociclila, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído; ou R5 e R6, junto com o átomo de N ao qual eles estão ligados, formam uma porção em anel que compreende 5 a 8 átomos no anel; X é selecionado a partir de NR12R13 onde cada um de R12 e R13 é independentemente selecionado a partir de H e C1- 6alquila; e -SR14, onde R14 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila; Z é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquila, -NR12R13 e -SR14, onde R14 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila; e Y é selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, F, Cl, Br, I, -OC1-6alquila, C1-6alquila, C2-8alquinila, - NR15R16, onde cada um de R15 e R16 é independentemente selecionado a partir de H e C1-6alquila e -SR17, onde R17 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6alquila, ou um sal, éster, sal de um éster, solvato ou pró- aceitável do composto de fórmula (Ib).

[0018]O composto de fórmula (Ib) pode ser um composto de fórmula (II): em que Ar, Y, Z, R2 e R3 são conforme descrito acima para a fórmula (Ib) e em que X é –NR12R13.

[0019] O composto de fórmula (Ib) pode ser um composto de fórmula (III): em que Ar, R2 e R3 são conforme descrito acima para a fórmula (Ib) e em que Y é selecionado a partir de H, F, Cl e OMe.

[0020] As afirmações a seguir se aplicam a compostos de qualquer uma das fórmulas (Ia), (Ib), (II) e (III). Estas afirmações são independentes e permutáveis. Em outras palavras, qualquer uma das características descritas em qualquer uma das afirmações a seguir pode (quando quimicamente permitido) ser combinada com as características descritas em uma ou mais afirmações abaixo. Em particular, quando um composto é exemplificado ou ilustrado no presente relatório descritivo, quaisquer duas ou mais das afirmações abaixo as quais descrevem uma característica deste composto, expressas em qualquer nível de generalidade, podem ser combinadas de modo a representar o assunto que é considerado como fazendo parte da descrição da presente invenção no presente relatório descritivo.

[0021] No presente relatório descritivo, o termo "alfa aminoácido de ocorrência natural" significa um aminoácido que pode ter estereoquímica L ou D, selecionado a partir do grupo que consiste em glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofano, serina, treonina, lisina, arginina, histidina, ácido aspártico, ácido glutâmico, asparagina, glutamina, cisteína e metionina. No presente relatório descritivo, uma cadeia lateral de um alfa aminoácido de ocorrência natural é, assim, um membro selecionado a partir do grupo que consiste H, CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)(CH2CH3), -CH2Ph, -CH2Ph-OH, - CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH, - (CH3)(OH), -CH2CH2CH2CH2NH3+, -CH2CH2CH2NHC(=NH2+)NH2, - CH2C(O)O-, -CH2CH2C(O)O-, -CH2C(O)NH2, -CH2CH2C(O)NH2,

[0022] Pode ser que W1 seja -P(=O)(U)(V) e W2 seja H e o composto da invenção seja um 5'-fosforamidato do 3'- desoxinucleosídeo parental. Em determinadas concretizações preferidas, W1 é -P(=O)(U)(V), em que U é -OAr e V é -NR4- CR1R2-C(=O)OR3 e W2 é H.

[0023] Pode ser que W1 seja H e W2 seja -P(=O)(U)(V) e o composto da invenção seja um 2'-fosforamidato do 3'- desoxinucleosídeo parental. Em determinadas concretizações preferidas, W1 é H e W2 é -P(=O)(U)(V), em que U é -OAr e V é -NR4-CR1R2-C(=O)OR3.

[0024] Pode ser que cada um de W1 e W2 seja -P(=O)(U)(V) e o composto da invenção seja um 2',5'-fosforamidato do 3'- desoxinucleosídeo parental. Em determinadas concretizações preferidas, onde cada um de W1 e W2 é -P(=O)(U)(V), U é -OAr e V é -NR4-CR1R2-C(=O)OR3. Em determinadas concretizações preferidas, W1 é o mesmo que W2.

[0025] Ar pode ser não substituído. Ar pode ser substituído. Quando Ar é substituído, ele pode ser substituído por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes. Os substituintes podem ser selecionados a partir de: halo, C1-C4-alquila, C1-C4-alcóxi, nitro e ciano.

[0026] Ar, quer substituído ou não substituído, pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em fenila, piridila, naftila e quinolila. Em determinadas concretizações preferidas, Ar é selecionado a partir do grupo que consiste em fenila e naftila. Em concretizações preferidas adicionais onde Ar é naftila, a ligação a -O-P está na posição 1 em naftila. Em concretizações preferidas adicionais, Ar é fenila não substituída ou naftila não substituída, com ligação a -O-P na posição 1 em naftila.

[0027] R1 e R2 podem ser selecionados de modo que a porção -CR1R2COO- corresponda à parte correspondente de um alfa aminoácido de ocorrência natural.

[0028] Pode ser que cada um de R1 e R2 seja independentemente selecionado a partir de Me e H. Em determinadas concretizações preferidas, um de R1 e R2 é Me e um de R1 e R2 é H, de modo que o átomo de C que traz R1 e R2 tenha a mesma configuração absoluta que L-alanina.

[0029] Pode ser que R1 seja H. Pode ser que R2 seja C1-C4 alquila. Pode ser que R2 seja metila. Pode ser que o átomo de C que traz R1 e R2 tenha a mesma configuração absoluta que L-alanina.

[0030] Pode ser que cada um de R1 e R2 seja Me. Pode ser que cada um de R1 e R2 seja H.

[0031] Pode ser que R3 seja selecionado a partir do grupo que consiste em C6-30arilC1-6alquila e C1-20alquila não substituída. Em determinadas concretizações preferidas, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em benzila (-CH2- Ph), metila não substituída (-CH3) e n-pentila não substituída (-n-C5H11). Em outras concretizações preferidas, R3 é benzila.

[0032] R4 pode ser H.

[0033] U e V podem ser selecionados independentemente a partir de -NR5R6. De preferência, cada um de U e V é o mesmo. Em outras concretizações preferidas, R8 é H e R7 é selecionado a partir do grupo que compreende H, metila, i- propila, -CH2Ph, -CH2CH(CH3)2 e -CH(CH3)(CH2H5). Em outras concretizações preferidas, R7 é metila. Em outras concretizações preferidas, a estereoquímica do átomo de C que traz R7 e R8 tem a mesma configuração absoluta que L- alanina. Alternativamente, a estereoquímica do átomo de C que traz R7 e R8 pode ter a mesma configuração absoluta que D-alanina. Em determinadas concretizações preferidas, R9 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-C13 alquila acíclica, C3-C18 alquila cíclica e C6-30arilC1-6alquila ramificadas ou não ramificadas, qualquer uma das quais é opcionalmente substituída. Em determinadas concretizações preferidas, R9 é benzila.

[0034] Em determinadas concretizações, um composto da presente invenção compreende U e V, em que cada um de U e V é selecionado, independentemente, a partir de -NR5R6, em que R5 e R6, junto com o átomo de N ao qual eles estão presos, formam uma porção em anel que compreende 5 a 8 átomos no anel. U e V podem ser os mesmos.

[0035] Q pode ser O.

[0036] Pode ser que W1 seja -P(=O)(U)(V), onde U é -O- 1-naftila e V é -NH-(L)CH(CH3)-C(=O)-O-CH2-Ph, W2 é H e Q é O.

[0037] Pode ser que cada um de X e Z seja independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, F, Cl, NH2, SH e -SC1-6alquila e Y selecionado a partir do grupo que consiste em H, OH, F, Cl, -OC1-6alquila, NH2, C2-8alquinila, SH e -SC1-6alquila. Pode ser que X seja NR12R13, por exemplo, NH2. Em determinadas concretizações preferidas, Z é H. Em outras concretizações preferidas, X é NH2 e Z é H. Em concretizações preferidas, X é NH2, Y é H e Z é H; X é NH2, Y é F e Z é H; X é NH2, Y é Cl e Z é H; ou X é NH2, Y é -OCH3 e Z é H. Em determinadas concretizações preferidas, X é NH2, Y é H e Z é H, de modo a fornecer compostos da invenção que são derivados de cordicepina (3’dA).

[0038] Em determinadas concretizações particularmente preferidas, Ar é fenila, R3 é benzila e R2 é metila.

[0039] Nos compostos da presente invenção, quando P é assimétrico, o composto pode consistir no diastereoisômero Rp, no diastereoisômero Sp ou uma mistura dos diastereoisômeros Rp e Sp.

[0040] Compostos preferidos da invenção incluem: 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforil)amino)propanoato de (2S)-Benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) acetato de Benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforil)amino)-4-metilpentanoato de (2S)-Pentila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforil)amino)-2-metilpropanoato de Metila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(2-(3-etoxi-3- oxopropil)fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-Benzila; 2-(((((2R,3R,5S)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(fenoxi)fosforil) amino)propanoato de (2S)-Benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-((((1- (benziloxi)-1-oxopropan-2-il)amino)(fenoxi)fosforil)oxi) tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de Benzila; 2-(((((2R,3R,5S)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(naftalen-1- iloxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-Benzila; 2-[({[5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxioxolan-2-il] metoxi}({[1-(benziloxi)-1-oxopropan-2-il]amino})fosforil) amino]propanoato de Benzila; 2-((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-metoxi-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1- iloxi)fosforilamino)propanoato de (2S)-Benzila; 2-((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-metoxi-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforilamino) propanoato de (2S)-Benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-Benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2- il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-Hexila; 2-((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-cloro-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforilamino)propanoato de (2R)-Benzila; 3’-Deoxiadenosina-5'-O-[fenil(benziloxi-L-alaninil)] fosfato; 2-O-Metil-3’-deoxiadenosina-5'-O-[1-naftil(1-pentiloxi -L-leucinil)] fosfato; 2-O-Metil-3’-deoxiadenosina-5'-O-[fenil(1-hexiloxi-L- alaninil)] fosfato; 2-Fluoro-3’-deoxiadenosina-5'-O-[1-naftil(benziloxi-L- alaninil)] fosfato; 2-Fluoro-3’-deoxiadenosina-5'-O-[1-naftil(1-pentiloxi -L-leucinil)] fosfato; 2-Cloro-3’deoxiadenosina-5'-O-[1-fenil(2,2-dimetil propoxi-L-alanina)] fosfato; 2-Cloro-3’deoxiadenosin-5'-O-[1-naftil(2,2-dimetil propoxi-L-alanina)] fosfato; 2-Cloro-3’deoxiadenosina-5'-O-[1-fenil(etoxi-L- alanina)] fosfato; e 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-isopropila; e sais, ésteres, sais de um éster, solvatos ou pró- fármacos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0041] Em determinadas concretizações, o composto da invenção não é: 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-isopropila.

[0042] De acordo com um segundo aspecto da presente invenção, é fornecido um composto da presente invenção para uso em um método de tratamento. O composto pode ser para uso na profilaxia ou tratamento de câncer.

[0043] De acordo com um terceiro aspecto da presente invenção, é fornecido o uso de um composto da presente invenção na fabricação de um medicamento para a profilaxia ou tratamento em particular, embora não exclusivamente, de câncer.

[0044] De acordo com um quarto aspecto da presente invenção, é fornecido um método de profilaxia ou tratamento em particular, embora não exclusivamente, de câncer que compreende administração, a um paciente que precisa de tal tratamento, de uma dose eficaz de um composto da presente invenção.

[0045] Em relação a cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da presente invenção, as concretizações da invenção compreendem um câncer selecionado dentre tumores hematológicos e sólidos. Em particular, o câncer pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em leucemia, mieloma múltiplo, câncer de fígado, câncer de mama, câncer de cabeça e pescoço, neuroblastoma, carcinoma da tireoide, câncer de pele (incluindo melanoma), carcinoma epidermoide oral, tumor de células de Leydig, câncer de cólon, câncer colorretal, câncer de pulmão (células não pequenas e células pequenas), câncer biliar, câncer de pâncreas, sarcoma, câncer de próstata, câncer do sistema nervoso central, sarcoma de Ewing, colangiocarcinoma e cânceres ginecológicos, câncer uterino e câncer do colo do útero, incluindo carcinoma epitelial do colo do útero. Em concretizações preferidas, o câncer é leucemia ou linfoma, por exemplo, um câncer selecionado a partir do grupo que consiste em leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia promielocítica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mieloide crônica, leucemia linfocítica crônica, leucemia monoblástica, leucemia de células pilosas, linfoma de Hodgkin e linfoma não-Hodgkin. Em concretizações preferidas adicionais, o câncer é leucemia linfoblástica aguda.

[0046] Cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da invenção pode compreender concretizações para o tratamento de câncer usadas em combinação com outra terapia para câncer. Exemplos de outras terapias para câncer incluem radioterapia e/ou outra quimioterapia. Sem estar limitado pela teoria ou mecanismo, foi reportado (por exemplo, Robertson, J. B. et al., Int. J. Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med. 1978 34(5): 417-29, Hiraoka, W. et al., Radiat. Res. (1988) 114(2): 231-9 e Hiraoka, W. et al., J. Radiat. Res. (Tóquio) (1990) 31(2): 156-61) que 3'- desoxiadenosina inibe a reparação de danos ao DNA induzidos por raios X. Em determinadas concretizações preferidas de cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da presente invenção, os compostos da invenção são para uso ou são usados em um método de tratamento de câncer que compreende administração, a um paciente que precisa de tal tratamento, de um composto da presente invenção em conjunto com radioterapia.

[0047] Em relação a cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da presente invenção, outras concretizações da invenção compreendem compostos da invenção para uso ou a serem usados em um método de profilaxia ou tratamento de síndrome mielodisplásica.

[0048] Sem estar limitado pela teoria ou mecanismo: Tuli et al. (supra) reportaram que a cordicepina, além de ter atividade antitumor e atividade apoptótica, também mostra atividades antioxidante, anti-inflamatória, antimalária, antifúngica, imunomoduladora, antidiabética/hipoglicêmica, esteroidogênica e antienvelhecimento; Vodnala, S. K. et al., J. Med. Chem. 2013, 56, 9861-9873 reportaram, cada um, que a cordicepina e 2-fluorocordicepina mostram atividade antiparasitária; Ahn, Y. J. et al., J. Agric. Food Chem. 2000 48 (7) 2744-8 reportaram que a cordicepina mostra atividade antibacteriana e de Julian-Ortiz J. V. et al., J. Med. Chem. 1999 42(17) 3308-14 reportaram que a cordicepina mostra atividade antiviral; Sugar et al., Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42 (6) 1424-7 mostraram que a cordicepina tem atividade antifúngica. Em relação a cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da presente invenção, as concretizações da invenção compreendem compostos da invenção para uso ou a serem usados em um método de profilaxia ou tratamento de um paciente com uma doença ou condição que precisa de pelo menos um tratamento selecionado a partir do grupo que consiste em atividade antioxidante, anti-inflamatória, antimalária, antifúngica, imunomoduladora, antidiabética/ hipoglicêmica, esteroidogênica, antienvelhecimento, antiparasitária, antibacteriana e antiviral.

[0049] Em relação a cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da invenção, as concretizações da invenção compreendem compostos da presente invenção para uso ou a serem usados em um método de profilaxia ou tratamento, em que o método não emprega a administração de um cofármaco que seja um inibidor de adenosina desaminase. Ao contrário do composto parental cordicepina que, tipicamente, precisa ser coadministrado com um inibidor de ADA para ser eficaz, pode ser que os compostos da invenção não exijam tal coadministração.

[0050] Contudo, pode ser usado um inibidor de ADA como cofármaco, se desejado, em relação a cada um dos segundo, terceiro e quarto aspectos da invenção. Um inibidor de ADA adequado para coadministração com um composto que incorpora a presente invenção é hidroxiureia ou pentastatina.

[0051] De acordo com um outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto da presente invenção em combinação com um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0052] De acordo com um outro aspecto da presente invenção, é fornecido um método de preparação de uma composição farmacêutica que compreende a etapa de combinação de um composto da presente invenção com um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0053] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido um método de preparação de um composto de fórmula (Ia): por meio de reação de um composto de fórmula IV: com: (a) um composto de fórmula V: ou (b) POCl3, seguido por um sal de N+R5R6H2, onde W1, W2, Q, X, Y, Z, Ar, R1, R2, R3, R4, R5 e R6 têm os significados apresentados aqui em relação à fórmula (Ia).

[0054] Surpreendentemente, descobriu-se que os compostos que concretizam a presente invenção têm atividade farmacêutica aprimorada, em particular atividade anticâncer aprimorada, comparado com seu 3'-desoxinucleosídeo com base em purina parental (isto é, em que W1 e W2 são H), especialmente quando empregados no tratamento de leucemia, linfoma e/ou tumores sólidos.

[0055] O aumento da atividade foi verificado na ausência de administração de um cofármaco para inibir a adenosina desaminase, comparado com o nucleosídeo com base em purina parental administrado na ausência de um cofármaco para inibir a ADA.

[0056] A presente invenção fornece, assim, inesperadamente, um meio para empregar um derivado de 3'- desoxiadenosina, ou um derivado de um análogo de 3'- desoxiadenosina, como um agente farmacêutico, particularmente como um agente anticâncer, que atenua o problema de desaminação pela adenosina desaminase, evitando completamente, se desejado, o uso de um cofármaco que é um inibidor de adenosina desaminase, incluindo a 2- desoxicoformicina relativamente tóxica.

[0057] Sem estar preso a qualquer teoria, a eficácia, particularmente a eficácia anticâncer, exibida pelos compostos da presente invenção demonstra que os compostos de 3'-desoxinucleosídeo da presente invenção são fosforilados intracelularmente em trifosfato de 3'-desoxiadenosina, ou ao trifosfato de um análogo de 3'-desoxiadenosina. Quando os compostos da presente invenção têm W1 como -P-(=O)(U)(V), acredita-se que a clivagem enzimática de U e V dentro da célula converte os compostos diretamente em monofosfato de 3'-desoxiadenosina, ou ao monofosfato do análogo de 3'- desoxiadenosina, antes de fosforilação ao trifosfato.

[0058] Nenhuma das atividades intracelulares acima dos compostos da presente invenção poderia ter sido anteriormente prevista.

[0059] Os benefícios citados acima são, além disso, permeabilidade aumentada da membrana celular dos nucleosídeos de fosforamidato da presente invenção, comparado com a 3'-desoxiadenosina parental, ou o análogo de 3'-desoxiadenosina parental, onde a permeabilidade aumentada da membrana celular é atribuível à estrutura de fosforamidato dos presentes compostos. O benefício de permeabilidade aumentada da membrana celular não pode, além disso, ser assumido como estando presente a priori para o fosforamidato de qualquer nucleosídeo. Acredita-se que os compostos da presente invenção sejam os primeiros exemplos de um fosforamidato de um 3'-desoxinucleosídeo que mostre uma potência anticâncer aumentada, em relação ao seu 3'- desoxinucleosídeo parental. O benefício de permeabilidade aumentada da membrana celular pelos compostos da presente invenção é, assim, surpreendente.

[0060] As concretizações preferidas dos compostos da presente invenção têm, em combinação, as características apresentadas acima em relação às concretizações dos compostos da invenção.

[0061] Cada um de Ar, R1, R2, R3 e R4 pode ser substituído por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes.

[0062] Substituintes sobre Ar podem estar localizados em orto-, meta-, para- ou, de outro modo, sobre os grupos aromáticos. Substituintes sobre Ar são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em hidróxi, C1-6 acila, C1-6 acilóxi, nitro, amino, carboxila, C2-6 éster, C1-6 aldeído, ciano, C1-6 alquilamino, diC1-6 alquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C1-6 alcóxiC1-6 alquila, C1-6 alcóxiC6-10 arila, C5-7 cicloalquila, C511 cicloalquilC1-6alquila, C5-7 cicloalquenila, C8-12 cicloalquinila, C6-11 arilC1-6alquila, C1-6 alquilC6-11arila, C611 arila, C1-6 fluoroalquila, C2-6 fluoroalquenila, SO3H, SH e SR', em que R' é independentemente selecionado a partir do mesmo grupo apresentado acima como R1 em relação à fórmula Ia. Cada substituinte pode ser substituído por qualquer outro substituinte.

[0063] Substituintes sobre R1, R2, R3 e R4 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em hidróxi, C1-6 acila, C1-6 acilóxi, nitro, amino, amido, carbóxi, C2-6 éster, C1-6 aldeído, ciano, C1-6 alquilamino, diC1- 6 alquilamino, tiol, cloro, bromo, fluoro, iodo, C5-7 cicloalquila, C5-7 cicloalquenila, C8-12 cicloalquinila, C6-11 arila, C6-11 arilC1-6 alquila, 5-20 heterociclila, SO3H, SH e SR', em que R' é independentemente selecionado a partir do mesmo grupo apresentado acima como R1 em relação à fórmula Ib.

[0064] Em determinadas concretizações preferidas, R1 e R2 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, C1-10 alquila, C6-30 arilC1-6 alquila, C2-10 alquenila, C2-10 alcóxiC1-10 alquila, C1-10 alcóxiC6-10 arila, C210 alquinila, C3-20 cicloalquila, C3-20 cicloalquenila, C8-20 cicloalquinila e 5-10 heterociclila.

[0065] Em determinadas concretizações, R1 e/ou R2 correspondem a uma cadeia lateral, incluindo H, de um alfa aminoácido de ocorrência natural, o qual pode ter a estereoquímica L ou D. Assim, pode ser que R1 e/ou R2 (por exemplo, apenas um ou R1 e R2) sejam selecionados a partir do grupo que consiste em H, CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, - CH(CH3)(CH2CH3), -CH2Ph, -CH2Ph-OH, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, - CH2OH, CH(CH3)(OH), -CH2CH2CH2CH2NH3+, -CH2CH2CH2NHC(=NH2+)NH2,

[0066] Em determinadas concretizações preferidas, R1 e R2 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, -CH3 e -CH2CH(CH3)2. Em outras concretizações preferidas, R1 e R2 juntos correspondem às cadeias laterais de L alanina.

[0067] R3 pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-20alquila, C6-30arilC1-6alquila, C2-10 alquenila, C1-10 alcóxiC1-10 alquila, C1-10 alcóxiC6-10 arila, C210 alquinila, C3-20 cicloalquila, C3-20 cicloalquenila, C8-20 cicloalquinila e 5-20 heterociclila.

[0068] R3 pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-20 alquila, C6-30 arilC1-6 alquila e C3-20 cicloalquila. R3 pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em C6-30 arilC1-6 alquila e C1-20 alquila não substituída. Em determinadas concretizações preferidas, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em benzila (- CH2Ph), metila não substituída (-CH3) e n-pentila não substituída (-n-C5H11). R3 pode ser benzila.

[0069] R4 pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-20 alquila, C6-30 arilC1-6 alquila, C2-10 alquenila, C1-10 alcóxi, C1-10 alcóxiC1-10 alquila, C1-10 alcóxiC6- 10 arila, C2-10 alquinila, C3-20 cicloalquila, C3-20 cicloalquenila, C8-20 cicloalquinila e 5-20 heterociclila.

[0070] R4 pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-18 alquila, C6-30 arilC1-6 alquila, C3-20 cicloalquila e 5-20 heterociclila. R4 pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, metila, etila, propila, butila, pentila, hexila e ciclo-hexila. R4 pode ser H.

[0071] A invenção fornece um composto da invenção para uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas.

[0072] A invenção fornece o uso de um composto da invenção na fabricação de um medicamento para terapia alvo de células-tronco cancerosas.

[0073] A invenção fornece um método para terapia alvo de células-tronco cancerosas, o método compreendendo fornecimento, a uma população de células-tronco cancerosas, de uma quantidade de um composto da invenção suficiente para terapia alvo de tais células-tronco cancerosas.

[0074] A terapia alvo de células-tronco cancerosas à qual se refere a presente invenção pode ser empregada na prevenção ou tratamento de câncer. Em tais concretizações, a população de células-tronco cancerosas pode estar em um câncer ou condição pré-cancerosa em um paciente que precisa de tal terapia alvo e o método pode compreender administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção ao paciente.

[0075] A invenção fornece um composto da invenção para uso como um medicamento anti-células-tronco cancerosas. Este uso de um composto da invenção também pode ser empregado na prevenção ou tratamento de câncer.

[0076] A invenção fornece um método para determinar se um paciente com câncer ou uma condição pré-cancerosa se beneficiará de prevenção ou tratamento de câncer com um composto da invenção, o método compreendendo: - ensaio de uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-cancerosa no paciente para detectar a presença de células-tronco cancerosas; em que a presença de células-tronco cancerosas na amostra biológica indica que o paciente se beneficiará do tratamento com um composto da invenção.

[0077] A invenção fornece um método para determinar um regime de tratamento adequado para um paciente com câncer ou uma condição pré-cancerosa, o método compreendendo: ensaio de uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-cancerosa no paciente para detectar a presença de células-tronco cancerosas; em que a presença de células-tronco cancerosas na amostra biológica indica que um regime de tratamento adequado compreenderá o tratamento do paciente com um composto da invenção.

[0078] A invenção fornece um composto da invenção para uso na prevenção ou tratamento de câncer em um paciente selecionado para tal tratamento por meio de um método que compreende: ensaio de uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-cancerosa no paciente para detectar a presença de células-tronco cancerosas; em que a presença de células-tronco cancerosas na amostra biológica indica que o paciente é adequado para tratamento com um composto da invenção.

[0079] Os métodos descritos acima podem compreender ainda uma etapa de prevenir ou tratar o câncer ou condição pré-cancerosa usando um composto da invenção.

[0080] Em concretizações adequadas dos métodos da invenção, o câncer é câncer em recidiva ou refratário. Um composto da invenção pode ser usado para o tratamento de câncer, tal como em recidiva ou refratário.

[0081] A invenção fornece um composto da invenção para uso no tratamento de câncer refratário em um indivíduo. O indivíduo pode ser um paciente humano. O indivíduo pode ser um animal doméstico, por exemplo, um mamífero.

[0082] A invenção fornece o uso de um composto da invenção na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer em recidiva ou refratário em um indivíduo. O indivíduo pode ser um animal doméstico, por exemplo, um mamífero.

[0083] A invenção fornece um método de tratamento de câncer em recidiva ou refratário em um indivíduo, o método compreendendo o fornecimento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção a um indivíduo que precisa de tal tratamento. O indivíduo pode ser um animal doméstico, por exemplo, um mamífero.

[0084] A invenção fornece um composto da invenção para uso no tratamento de câncer, em que um composto da invenção é para uso em uma dose de entre cerca de 25 mg/m2 e 4000 mg/m2 por semana em pelo menos um ciclo inicial de tratamento e, então, para uso em uma dose semanal mais baixa em pelo menos outro ciclo de tratamento. O câncer pode ser um câncer em recidiva ou refratário.

[0085] Vários aspectos da invenção se baseiam na descoberta de que um composto da invenção é capaz de reduzir o número de células-tronco cancerosas e pode reduzi-las preferencialmente comparado com outros tipos de células. Esta descoberta é surpreendente pelo fato de que as células- tronco cancerosas são conhecidas por serem resistentes a muitos agentes quimioterapêuticos e não houve anteriormente nenhuma sugestão de que um composto da invenção ou cordicepina ou 2-fluorocordicepina, o composto de pró- fármaco parental a partir do qual um composto da invenção é derivado, foram capazes de uso em terapia alvo de células- tronco cancerosas. Assim, a descoberta de que um composto da invenção é capaz de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas e, assim, reduzir seus números, uma descoberta que os inventores confirmaram ser aplicável através de uma ampla variedade de cânceres, representa um avanço surpreendente, permitindo uma série de novas aplicações terapêuticas de um composto da invenção.

[0086] As atividades biológicas exercidas pelos compostos da invenção, que não foram anteriormente reportadas, indicam que estes compostos são capazes de fornecer um tratamento que é suscetível de ser eficaz em pacientes com cânceres em recidivva ou refratários. O tratamento deste tipo usando os compostos da invenção pode provocar uma redução no tamanho do tumor e/ou uma redução em biomarcadores clinicamente relevantes, qualquer um dos quais pode estar associado a um prognóstico mais favorável. Além disso, o tratamento com um composto da presente invenção pode ajudar a manter uma redução no tamanho de tumores em pacientes com câncer em recidiva ou refratário. Consequentemente, o tratamento usando um composto da invenção podem atingir uma Taxa de Controle de Doença (DCR) elevada, durável em pacientes com cânceres recidivantes ou refratários.

[0087] Sem desejar estar preso por qualquer hipótese, os inventores acreditam que a capacidade dos compostos da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas contribui para a utilidade terapêutica destes compostos no tratamento de câncer recidivante ou refratário.

[0088] Exceto onde o contexto requer de outro modo, na presente descrição, referências a um "uso" de um composto da invenção de acordo com a invenção podem ser tomadas como sendo aplicáveis a qualquer um dos usos médicos dos compostos da invenção descritos aqui. Similarmente, referências a "métodos" da invenção usando um composto da invenção devem ser tomadas como sendo aplicáveis a qualquer um dos métodos da invenção descritos aqui.

[0089] A capacidade de um composto da invenção em alvejar células-tronco cancerosas fornece novas terapias dirigidas contra aquelas células cancerosas que são consideradas mais difíceis de tratar e que são consideradas como desempenhando um papel importante na resistência que limita a eficácia de muitas terapias existentes para o câncer. Esta capacidade fornece também uma forma de terapia alvo de células que se acredita estarem associadas ao desenvolvimento, progressão, recorrência e propagação de cânceres. Consequentemente, deve ser observado que esta atividade anti-células-tronco cancerosa de um composto da invenção produz benefícios em contextos nos quais têm sido procuradas terapias novas e eficazes.

Breve Descrição das Figuras

[0090] As concretizações da invenção são descritas adicionalmente a seguir com referência aos desenhos anexos, nos quais: Figura 1. Comparação dos valores de DL50 para Cordicepina, Compostos A, 2-F-Cordicepina, Compostos O, P, Q e R. Todos os ensaios foram realizados usando células KG1a e os dados são apresentados como a média (± DP) de cinco experimentos independentes. Figura 2. Análise da capacidade de uso em terapia alvo de células-tronco leucêmicas (LSC) da Cordicepina e Composto A. Os dados anteriormente gerados (ii) são mostrados para comparação. Todos os dados são a média (± DP) de três experimentos independentes. Figura 3. Análise da capacidade de uso em terapia alvo em LSC de 2-F-Cordicepina e Compostos O, P, Q e R. Todos os dados são a média (± DP) de três experimentos independentes. Figura 4. Comparação da capacidade de uso em terapia alvo em LSC de 2-F-Cordicepina e cada proTide. Todos os dados são a média (± DP) de três experimentos independentes.

Descrição Detalhada

[0091] Conforme usado aqui, o termo "alquila" se refere a um radical hidrocarboneto cíclico ou acíclico monovalente saturado de cadeia linear ou ramificada (exceto onde o contexto requer de outro modo) que tem o número de átomos de carbono conforme indicado (ou, quando não indicado, um grupo alquila acíclico pode ter 1-20, 1-18, 1-10, 1-6 ou 1-4 átomos de carbono e um grupo alquila cíclico pode ter 320, 3-10 ou 3-7 átomos de carbono), opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente do grupo apresentado acima em relação a substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 e R4. A título de exemplos não limitativos, os grupos alquila podem incluir metila, etila, propila, butila, pentila, hexila, octila, nonila e dodecila.

[0092] Conforme usado aqui, o termo "alquenila" se refere a um radical hidrocarboneto cíclico ou acíclico monovalente insaturado de cadeia linear ou ramificada (exceto onde o contexto requer de outro modo) que tem uma ou mais ligações duplas C=C e tem o número de átomos de carbono conforme indicado (ou, onde não indicado, um grupo alquenila acíclico pode ter 2-20, 2-10, 2-6 ou 2-4 átomos de carbono e um grupo alquenila cíclico pode ter 3-20 ou 5-7 átomos de carbono), opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente do grupo apresentado acima em relação a substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 e R4. A título de exemplos não limitativos, os grupos alquenila podem incluir vinila, propenila, butenila, pentenila e hexenila.

[0093] Conforme usado aqui, o termo "alquinila" se refere a um radical hidrocarboneto cíclico ou acíclico monovalente insaturado de cadeia linear ou ramificada (exceto onde o contexto requer de outro modo) que tem uma ou mais ligações triplas C=C e tem o número de átomos de carbono conforme indicado (ou, onde não indicado, um grupo alquinila acíclico pode ter 2-20, 2-10, 2-6 ou 2-4 átomos de carbono e um grupo alquinila cíclico pode ter 8-20 átomos de carbono), opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes independentemente selecionados a partir do grupo apresentado acima em relação a substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 e R4.

[0094] Conforme usado aqui, o termo "alcóxi" se refere ao grupo alquila-O-, em que alquila é conforme definido acima e em que a porção alquila pode ser opcionalmente substituída por um, dois ou três substituintes, conforme definido acima para alquila. A ligação é através de -O-. A título de exemplos não limitativos, os grupos alcóxi podem incluir metóxi, etóxi, n-propóxi, iso-propóxi, n-butóxi, terc- butóxi, sec-butóxi, n-pentóxi, n-hexóxi e 1,2- dimetilbutoxila.

[0095] Conforme usado aqui, o termo "arilóxi" se refere ao grupo arila-O-, em que arila é conforme definido abaixo e em que a porção arila pode ser opcionalmente substituída por um, dois ou três substituintes conforme apresentado acima em relação ao grupo Ar. A ligação é através de -O-.

[0096] Conforme usado aqui, o termo "alcoxialquila" se refere a um grupo alquila com um substituinte alcóxi. A ligação é feita através do grupo alquila. A porção alquila e a porção alcóxi são conforme definidas aqui em relação às definições de alquila e alcóxi, respectivamente. Os grupos alcóxi e alquila podem ser, cada um, substituídos por um, dois ou três substituintes conforme apresentado acima em relação à definição do grupo alquila.

[0097] Conforme usado aqui, o termo "arilalquila" se refere a um grupo alquila com um substituinte arila. A ligação é feita através do grupo alquila. A porção arila e o grupo alquila são conforme definidos aqui em relação às definições de arila e alquila, respectivamente. As porções arila e alquila podem ser, cada uma, substituídas por um, dois ou três substituintes, os substituintes sendo conforme definidos aqui em relação às definições dos substituintes que podem estar presentes em relação à arila e alquila, respectivamente. Em uma concretização preferida, arilalquila é benzila, a qual é Ph-CH2-.

[0098] Conforme usado aqui, o termo "alcoxiarila" se refere a um grupo arila com um substituinte alcóxi. A ligação é feita através do grupo arila. A porção alcóxi e o grupo arila são conforme definidos aqui em relação às definições de arila e alcóxi, respectivamente. As porções alcóxi e arila podem ser, cada uma, substituídas por um, dois ou três substituintes, os substituintes sendo conforme definidos aqui em relação às definições dos substituintes que podem estar presentes em relação a alcóxi e arila, respectivamente.

[0099] Conforme usado aqui, o termo "cicloalquilarila" se refere a um grupo arila que tem um substituinte alquila cíclico. A ligação é feita através do grupo arila. A porção cicloalquila e a porção arila são conforme definidas aqui em relação às definições de arila e cicloalquila, respectivamente. A porção cicloalquila e a porção arila podem, cada uma, ser opcionalmente substituídas por um, dois ou três substituintes, conforme definido aqui em relação às definições de alquila e arila, respectivamente.

[0100] Conforme usado aqui, o termo "arila" se refere a um radical carbocíclico aromático monovalente (exceto onde o contexto requer de outro modo) que tem um, dois, três, quatro, cinco ou seis anéis e que tem o número de átomos de carbono indicados (ou, onde não indicado, 6 a 30, 6 a 12 ou 6 a 11 átomos de carbono). Uma concretização preferida tem um, dois ou três anéis. Um grupo arila pode ser opcionalmente substituído por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes, conforme apresentado acima em relação aos substituintes opcionais que podem estar presentes no grupo Ar. Em concretizações preferidas, um grupo arila compreende: um anel monocíclico aromático que contém 6 átomos de carbono; um sistema de anel aromático bicíclico fundido que contém 7, 8, 9 ou 10 átomos de carbono; ou um sistema de anel aromático fundido tricíclico que contém 10, 11, 12, 13 ou 14 átomos de carbono. Exemplos não limitativos de arila incluem fenila e naftila. Em uma concretização preferida, os grupos substituintes opcionais em um grupo arila podem ser independentemente selecionados a partir de hidróxi, C1- 6acila, C1-6acilóxi, nitro, amino, carboxila, ciano, C1- 6alquilamino, diC1-6alquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, SO3H, SH e SR', em que R' é independentemente selecionado a partir do mesmos grupos como R1 em relação à fórmula Ia.

[0101] Conforme usado aqui, o termo "5-30 heteroarila" se refer a um radical heterocíclico aromático monovalente insaturado (exceto onde o contexto requer de outro modo) com 5 a 30 elementos no anel na forma de um, dois, três, quatro, cinco ou seis anéis fundidos e, contido dentro de pelo menos um anel, pelo menos um heteroátomo selecionado a partir do grupo que consiste em N, O e S. Uma concretização preferida tem um, dois ou três anéis fundidos. Átomos de carbono e/ou heteroátomos disponíveis no sistema de anel podem ser substituídos no anel por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes, conforme apresentado acima em relação aos substituintes que podem estar presentes no grupo Ar. Os grupos heteroarila podem incluir um sistema de anel monocíclico aromático que contém seis elementos no anel, dos quais pelo menos um elemento no anel é um átomo de N, O ou S e que contém opcionalmente um, dois ou três átomos de N adicionais no anel; um anel monocíclico aromático que tem seis elementos dos quais um, dois ou três átomos no anel são um átomo de N; um sistema de anel aromático bicíclico condensado que tem nove elementos, dos quais pelo menos um elemento no anel é um átomo de N, O ou S e que contém opcionalmente um, dois ou três átomos de N adicionais no anel; ou um sistema de anel bicíclico fundido aromático que tem dez elementos no anel dos quais um, dois ou três átomos no anel são um átomo de N. Exemplos incluem, e não estão limitados a, piridila e quinolila.

[0102] Conforme usado aqui, o termo "520 heterociclila" se refere a um radical heterocíclico monovalente (exceto onde o contexto requer de outro modo), saturado ou parcialmente insaturado, com 5 a 20 elementos no anel, com pelo menos um elemento no anel selecionado a partir do grupo que consiste em N, O e S, e estando na forma de um, dois, três, quatro, cinco ou seis anéis fundidos. Em uma concretização preferida, o radical tem um, dois ou três anéis. Em uma concretização preferida, o radical tem 5 a 10 elementos no anel. Os radicais heterociclila podem incluir: um sistema de anel monocíclico que tem cinco elementos no anel, dos quais pelo menos um elemento no anel é um átomo de N, O ou S e que contém opcionalmente um átomo de O adicional no anel ou um, dois ou três átomos de N adicionais no anel; um sistema de anel monocíclico com seis elementos no anel dos quais um, dois ou três átomos no anel são um átomo de N e que inclui opcionalmente um átomo de O; um sistema de anel fundido bicíclico com nove elementos no anel, dos quais pelo menos um elemento no anel é um átomo de N, O ou S e que contém opcionalmente um, dois ou três átomos de N adicionais no anel; ou um sistema de anel fundido bicíclico com dez elementos no anel dos quais um, dois ou três átomos no anel são um átomo de N. Exemplos incluem, e não estão limitados a, pirrolinila, pirrolidinila, 1,3-dioxolanila, imidazolinila, imidazolidinila, pirazolinila, pirazolidinila, piperidinila, morfolinila ou piperazinila.

[0103] Átomos de carbono e/ou heteroátomos no anel disponíveis nos sistemas de anel "heterociclila" descritos acima podem ser substituídos por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes. Onde o(s) anel(is) é/são substituído(s) por um ou mais heteroátomos, os heteroátomos substituintes são selecionados a partir de halogênio (F, Cl, Br e I) e a partir de oxigênio, nitrogênio e enxofre, onde o oxigênio, nitrogênio ou enxofre forma parte de uma porção substituinte. Onde o(s) anel(is) é/são substituído(s) por um ou mais heteroátomos, de preferência há 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em oxigênio, nitrogênio, enxofre e halogênio. Exemplos de grupos substituintes que podem estar presentes no sistema de anel heterocíclico podem ser independentemente selecionados a partir de hidróxi, C1-6acila, C1-6acilóxi, nitro, amino, carboxila, ciano, C1-6alquilamino, diC1-6alquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, SO3H, SH e SR', em que R' é independentemente selecionado a partir dos mesmos grupos conforme R1 em relação à fórmula Ia.

[0104] Conforme usado aqui, o termo "acila" se refere a um radical de cadeia linear ou ramificada, saturado ou insaturado, substituído ou não substituído, monovalente (exceto onde o contexto requer de outro modo) que inclui a porção -C(=O)-, onde a ligação é através o átomo de -C- da porção -C(=O)- e tem o número de átomos de carbono indicado (ou, quando não indicado, um grupo acila tem 1-6, ou 1-4 ou 1-2 átomos de carbono, incluindo o átomo de C da porção - C(=O)-), opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir do grupo apresentado acima em relação aos substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 e R4. A título de exemplos não limitativos, os grupos acila incluem HC(=O)-, CH3C(=O)- , C2H5C(=O)-, C3H7C(=O)-, C4H9C(=O)- e C5H11C(=O)-.

[0105] Conforme usado aqui, o termo "acilóxi" se refere a um radical monovalente de cadeia linear ou ramificada, saturado ou insaturado, substituído ou não substituído (exceto quando o contexto requer de outro modo) que inclui a porção -C(=O)-O-, em que a ligação é através do átomo de -O- e tem o número de átomos de carbono indicado, incluindo o átomo de C da porção -C(=O)-O- (ou, quando não indicado, um grupo acilóxi tem 1-6, 1-4 ou 1-2 átomos de carbono, incluindo o átomo de carbono da porção -C(=O)-O-, opcionalmente substituído por um, dois ou três dos substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 e R4. A título de exemplos não limitativos, os grupos acilóxi incluem HC(=O)-O-, CH3C(=O)-O-, C2H5C(=O)-O-, C3H7C(=O)-O-, C4H9C(=O)- O- e C5H11C(=O)=O-.

[0106] Conforme usado aqui, o termo "C2-6 éster" se refere a um radical monovalente substituído ou não substituído (exceto onde o contexto requer de outro modo) que compreende R18C(=O)-O-R19, onde R18 é selecionado a partir do grupo que consiste de H e C1-4 alquila e R19 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-5 alquila, contanto que o número máximo total de átomos de carbono, incluindo o átomo de C da porção -C(=O)-O-, de R18C(=O)-O-R19 seja seis. A ligação é feita através de R18 ou R19, com um H do respectivo grupo ausente, de modo que o grupo alquila através do qual a ligação ocorre seja divalente ou, quando R18 representa H, por meio do C da porção -C(=O)-O-. Em uma concretização preferida, o C2-6 éster, incluindo o átomo de C da porção - C(=O)-O-, tem 2-5 átomos de carbono. O C2-6 éster pode ser opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir do grupo apresentado acima em relação aos substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 e R4. A título de um exemplo não limitativo, o C2-6 éster pode ser -C2H4-C(=O)-O-C2H5, onde a porção -C2H4- é -CH2-CH2- e a ligação é através da porção -C2H4-.

[0107] Conforme usado aqui, o termo "aldeído" se refere a um radical monovalente de cadeia linear ou ramificada, saturado ou insaturado, substituído ou não substituído (exceto onde o contexto requer de outro modo) que compreende HC(=O)-R20-, onde a ligação é através de -R20- , tem o número de átomos de carbono indicado, incluindo o átomo de C da porção -C(=O)- (ou, quando não indicado, um grupo aldeído tem 1-6, 1-4 ou 1-2 átomos de carbono, incluindo o átomo de C da porção -C(=O)-), opcionalmente substituído por um, dois ou três dos substituintes que podem estar presentes em R1, R2, R3 ou R4. A título de exemplos não limitativos, grupos aldeído incluem HC(=O)-CH2-, HC(=O)-C2H4- , HC(=O)-C3H6-, HC(=O)-C4H8- e HC(=O)-C5H10-.

[0108] Conforme usado aqui, o termo "fluoroalquila" se refere a um grupo alquila, onde o grupo alquila é um radical hidrocarboneto cíclico ou acíclico monovalente saturado de cadeia linear ou ramificada (exceto onde o contexto requer de outro modo), que tem o número de átomos de carbono conforme indicado (ou, onde não indicado, um grupo alquila acíclico tem 1-6 ou 1-4 átomos de carbono e um grupo alquila cíclico tem 3-6 átomos de carbono) substituídos por 1 a 6 átomos de F.

[0109] Conforme usado aqui, o termo "fluoroalquenila" se refere a um grupo alquenila, onde o grupo alquenila é um radical hidrocarboneto acíclico ou cíclico monovalente insaturado de cadeia linear ou ramificada (exceto onde o contexto requer de outro modo) que tem uma ou mais ligações duplas C=C e tem o número de átomos de carbono conforme indicado (ou, quando não indicado, um grupo alquenila acíclico tem 2-6 ou 2-4 átomos de carbono e um grupo alquenila cíclico tem 4-6 átomos de carbono) substituídos por 1 a 6 átomos de F.

[0110] O processo para a preparação de um composto de fórmula Ia ou Ib é, de preferência, realizado na presença de um solvente adequado.

[0111] Solventes adequados incluem solventes de hidrocarboneto, tais como benzeno e tolueno; solventes do tipo éter, tais como dietil éter, tetra-hidrofurano, difenil éter, anisol e dimetoxibenzeno; solventes de hidrocarboneto halogenado, tais como cloreto de metileno, clorofórmio e clorobenzeno; solventes de tipo cetona, tais como acetona, metil etil cetona e metil isobutil cetona; solventes de tipo álcool, tais como metanol, etanol, propanol, isopropanol, álcool n-butílico e álcool terc-butílico; solventes de tipo nitrila, tais como acetonitrila, propionitrila e benzonitrila; solventes de tipo éster, tais como acetato de etila e acetato de butila; solventes de tipo carbonato, tais como carbonato de etileno e carbonato de propileno; e assim por diante. Estes podem ser usados isoladamente ou dois ou mais dos mesmos podem ser usados em mistura.

[0112] De preferência, um solvente inerte é usado no processo da presente invenção. O termo "solvente inerte" significa um solvente inerte sob as condições da reação a ser descrita em conjunto com o mesmo incluindo, por exemplo, benzeno, tolueno, acetonitrila, tetra-hidrofurano, dimetilformamida, clorofórmio, cloreto de metileno (ou diclorometano), dietil éter, acetato de etila, acetona, metil etil cetona, metanol, etanol, propanol, isopropanol, terc-butanol, dioxano, piridina e assim por diante. Tetra- hidrofurano é particularmente preferido.

[0113] De preferência, o processo da presente invenção é realizado sob condições substancialmente secas.

[0114] O fosforocloridato pode ser preparado a partir de um arilóxi fosforodicloridato e um derivado de aminoácido adequadamente protegido. Alternativamente, a química de fosfato pode ser usada com agentes de condensação adequados.

[0115] De preferência, o processo para a preparação do composto de fórmula Ib pode incluir a etapa de proteção dos grupos OH livres, sobre outro nucleosídeo que não aquele ao qual o fosforamidato deve ser ligado. Por exemplo, a realização da reação de 3'-desoxinucleosídeo com o fosforocloridato desejado na presença de t-BuMgCl permite que o 2'-fosforamidato seja preparado.

[0116] Reação do 3'-desoxinucleosídeo com POCl3, seguido por um sal de N+R5R6H2 permite que os compostos sejam preparados, onde cada um de U e V representa um grupo - NR5R6. Sais adequados incluem sais cloreto, tosilato, sulfonato e ésteres, tais como sulfonato de 4-metil- benzeno. A subsequente adição de uma base, tal como di- isopropil etil amina, pode auxiliar no processo.

[0117] Conforme usado aqui, o termo "estereoisômero" define todos os possíveis compostos constituídos pelos mesmos átomos ligados pela mesma sequência de ligações, mas que têm estruturas tridimensionais diferentes daquelas que os compostos da presente invenção podem possuir.

[0118] Onde os compostos de acordo com a presente invenção têm pelo menos um centro quiral, eles podem, consequentemente, existir como enantiômeros. Quando os compostos possuem dois ou mais centros quirais, eles podem existir adicionalmente como diastereoisômeros. Quando os processos para a preparação dos compostos de acordo com a invenção originam uma mistura de estereoisômeros, estes isômeros podem ser separados por meio de técnicas convencionais, tal como cromatografia preparativa. Os compostos podem ser preparados na forma estereoquimicamente mista ou os enantiômeros individuais podem ser preparados através de técnicas convencionais conhecidas por aqueles versados na técnica, por exemplo, por meio de síntese ou decomposição enantioespecífica, formação de pares diastereoméricos através de formação de sal com um ácido oticamente ativo, seguido de cristalização fracionada e regeneração da base livre. Os compostos também podem ser decompostos por meio da formação de ésteres ou amidas diastereoméricas, seguido por separação cromatográfica e remoção do auxiliar quiral. Alternativamente, os compostos podem ser decompostos usando uma coluna de HPLC quiral. Deve ser entendido que todos estes isômeros e misturas dos mesmos estão englobados dentro do âmbito da presente invenção.

[0119] Além disso, deverá ser notado que o centro de fosfato é quiral nos compostos da presente invenção e os compostos podem existir na forma de diastereoisômeros RP e SP. A composição do composto pode ser diastereoisômeros RP e SP misturados ou um diastereoisômero puro. Em uma concretização preferida, o composto é um diastereoisômero único substancialmente puro de qualquer um de RP ou SP. Por "diastereoisômero único substancialmente puro" entenda-se que o composto consiste em 98% ou mais de qualquer um dos diastereoisômeros RP ou SP. Em outra concretização, pode haver uma mistura 1:1 de diastereoisômeros RP para SP. Alternativamente, o composto pode compreender uma mistura de diastereoisômeros RP e SP em uma proporção de diastereoisômeros RP para SP de 1:90 a 90:1, 1:50 a 50:1, 1:20 a 20:1, 1:15 a 15:1, 1:10 a 10:1, 1:9 a 9:1, 1:8 a 8:1, 1:7 a 7:1, 1:6 a 6:1, 1:5 a 5:1, 1:4 a 4:1, 1:3 a 3:1 ou 1:2 a 2:1. Em concretizações preferidas, o composto da invenção pode compreender uma proporção de diastereoisômeros RP para SP de maior do que 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:15, 1:20, 1:50, 1:90, 1:95 ou 1:99 ou vice-versa.

[0120] O termo "solvato" significa um composto de fórmula Ia ou fórmula Ib, conforme definido aqui, em que as moléculas de um solvente adequado estão incorporadas na matriz cristalina. Um solvente adequado é fisiologicamente tolerável na dosagem administrada. Exemplos de solventes adequados são etanol, água e similares. Quando água é o solvente, a molécula é dita como um hidrato.

[0121] Os compostos da presente invenção também podem estar presentes na forma de sais farmacêuticos aceitáveis. Para uso em medicina, os sais dos compostos da presente invenção são ditos como "sais farmaceuticamente aceitáveis". Formas de sal farmaceuticamente aceitável aprovadas pela FDA (Ref. International J. Pharm. 1986, 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1977, Jan, 66 (1)) incluem sais ácidos/aniônicos ou básicos/catiônicos farmaceuticamente aceitáveis.

[0122] Sais ácidos /aniônicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, e não estão limitados a, acetato, benzenossulfonato, benzoato, bicarbonato, bitartarato, brometo, edetato de cálcio, cansilato, carbonato, cloreto, citrato, dicloridrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gliceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromidrato, cloridrato, hidroxinaftoato, iodeto, isetionato, lactato, maleato, mandelato, mesilato, metilbrometo, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, pamoato, pantotenato, fosfato, difosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tanato, tartarato, teoclato, tosilato e trietiodeto.

[0123] Sais básicos/catiônicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, e não estão limitados a, alumínio, benzatina, cálcio, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilenodiamina, lítio, magnésio, potássio, procaína, sódio e zinco.

[0124] A presente invenção inclui, dentro de seu escopo, pró-fármacos dos compostos da presente invenção. Em geral, tais pró-fármacos são derivados funcionais dos compostos que são facilmente convertidos in vivo ao composto requerido. Assim, nos métodos de tratamento da presente invenção, o termo "administração" deverá abranger o tratamento dos vários transtornos descritos com o composto especificamente descrito ou com um composto que pode não ser especificamente descrito, mas que é convertido ao composto especificado in vivo após administração ao indivíduo. Procedimentos convencionais para a seleção e preparação de derivados de pró-fármaco adequados são descritos, por exemplo, em "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

[0125] Derivados de éster farmaceuticamente aceitáveis nos quais um ou mais grupos hidróxi livres são esterificados na forma de um éster farmaceuticamente aceitável são exemplos específicos de ésteres de pró-fármacos que podem ser passíveis de conversão, por meio de solvólise sob condições fisiológicas, aos compostos da presente invenção que têm grupos hidróxi livres.

[0126] As composições farmacêuticas para uso de acordo com a presente invenção podem ser formuladas de uma maneira convencional usando um ou mais veículos fisiologicamente aceitáveis que compreendem excipientes e auxiliares que facilitam o processamento dos compostos ativos em preparados que podem ser usados farmaceuticamente. Estas composições farmacêuticas podem ser fabricadas de uma maneira que é conhecida per se, por exemplo, por meio de processos convencionais de mistura, dissolução, granulação, fabricação de drágeas, levigação, emulsão, encapsulação, contenção ou liofilização. A formulação apropriada é dependente da via de administração escolhida.

[0127] A composição farmacêutica ou composto de acordo com a presente invenção pode ser administrado(a) a um paciente, que pode ser Homo sapiens ou um animal, através de qualquer meio adequado.

[0128] Os medicamentos empregados na presente invenção podem ser administrados por vias orais ou parenterais, incluindo administração intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutânea, transdérmica, vias aéreas (aerossol), retal, vaginal e tópica (incluindo bucal e sublingual).

[0129] Para administração oral, os compostos da invenção são, em geral, fornecidos na forma de comprimidos ou cápsulas, tal como um pó ou grânulos, ou como uma solução ou suspensão aquosa.

[0130] Comprimidos para uso oral podem incluir o ingrediente ativo misturado com excipientes farmaceuticamente aceitáveis, tais como diluentes inertes, agentes desintegrantes, agentes aglutinantes, agentes lubrificantes, agentes edulcorantes, agentes flavorizantes, agentes colorantes e conservantes. Diluentes inertes adequados incluem carbonato de sódio e de cálcio, fosfato de sódio e de cálcio e lactose, enquanto que amido de milho e ácido algínico são agentes desintegrantes adequados. Agentes aglutinantes podem incluir amido e gelatina, enquanto o agente lubrificante, se presente, em geral será estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Se desejado, os comprimidos podem ser revestidos com um material, tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila, para retardar a absorção no trato gastrintestinal.

[0131] As cápsulas para uso oral incluem cápsulas de gelatina dura, nas quais o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido e cápsulas de gelatina mole, nas quais o ingrediente ativo é misturado com água ou um óleo, tal como óleo de amendoim, parafina líquida ou azeite.

[0132] As formulações para administração retal podem ser apresentadas como um supositório com uma base adequada que compreende, por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.

[0133] As formulações adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações para pulverização que contêm, além do ingrediente ativo, veículos conforme conhecidos na técnica como sendo apropriados.

[0134] Para uso intramuscular, intraperitoneal, subcutâneo e intravenoso, os compostos da invenção serão, em geral, fornecidos em soluções ou suspensões aquosas estéreis, tamponadas para um pH e isotonicidade apropriados. Veículos aquosos adequados incluem solução de Ringer e cloreto de sódio isotônico. As suspensões aquosas de acordo com a invenção podem incluir agentes, tais como derivados de celulose, alginato de sódio, polivinil- pirrolidona e goma tragacanto, e um agente umectante, tal como lecitina. Conservantes adequados para suspensões aquosas incluem etil e n-propil p-hidroxibenzoato.

[0135] Os compostos da invenção também podem ser apresentados como formulações lipossômicas.

[0136] Em geral, uma dose adequada estará na faixa de 0,1 a 300 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia. Uma dose mais apropriada pode estar na faixa de 0,5 mg a 150 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia, na faixa de 0,5 a 100 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia, na faixa de 1 a 50 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia ou na faixa de 1 a 10 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia. Uma dose mínima adequada pode ser de 0,5 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia ou 1 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia. Alternativamente, uma dose adequada pode estar na faixa de 1 a 100 mg por m2 de área de superfície corporal do receptor por dia ou 5 a 50 mg por m2 de área de superfície corporal do receptor por dia. Doses adequadas podem ser de 6, 12, 24 ou 48 mg por m2 de área de superfície corporal do receptor por dia. A dose desejada pode ser apresentada e administrada como uma dose diária única ou como duas, três, quatro, cinco ou seis ou mais subdoses administradas em intervalos apropriados ao longo do dia. As doses podem ser administradas em formas de dosagem unitárias, por exemplo, que contêm 10 a 1500 mg, de preferência 20 a 1000 mg e, mais preferivelmente, 50 a 700 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária. A dose diária total é, adequadamente, 1000 a 3000 mg, quer administrada como uma única dose ou como subdoses em intervalos ao longo do dia.

"Células-Tronco Cancerosas"

[0137] Células-tronco cancerosas, que são, algumas vezes, alternativamente referidas como "células iniciadoras de tumor", são bem conhecidas por aqueles versados na técnica. Conforme usado aqui, o termo "células-tronco cancerosas" deve ser interpretado de acordo com seu significado geralmente aceito, que é uma célula que possui a capacidade de se autorrenovar através de divisão assimétrica para iniciar a formação do tumor e dar origem a uma prole de células cancerosas que não células-tronco mais madura através de diferenciação.

[0138] As células-tronco cancerosas desempenham um papel importante no desenvolvimento, progressão, recorrência e propagação de cânceres. Deste modo, a constatação de que os compostos da invenção são capazes de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas e, assim, reduzir seus números, oferece possibilidades terapêuticas na prevenção ou tratamento destas atividades.

[0139] Conforme discutido em maiores detalhes em todo o relatório descritivo, células-tronco cancerosas são encontradas em condições pré-cancerosas, onde se acredita que sua presença contribui para o desenvolvimento de tais condições em cânceres. Consequentemente, métodos de tratamento e usos médicos da invenção, nos quais um composto da invenção é usado para terapia alvo de células-tronco cancerosas, podem ser usados para reduzir o número de células-tronco cancerosas em condições pré-cancerosas (tal como síndrome mielodisplásica ou outras condições consideradas em todo o relatório descritivo) e, assim, evitar a progressão destas condições pré-cancerosas em câncer.

[0140] Conforme citado acima, a divisão celular assimétrica de células-tronco cancerosas dá origem a células cancerosas que não células-tronco diferenciadas. Assim, as células-tronco cancerosas são responsáveis pela formação e manutenção da massa do tumor.

[0141] O acúmulo de tais células cancerosas que não células-tronco desempenha um papel importante na progressão de cânceres. A terapia alvo de células-tronco cancerosas por um composto da invenção é capaz de reduzir o número de células-tronco cancerosas o que, por sua vez, reduz o número de proles de células cancerosas que não células-tronco. Assim, métodos de tratamento e usos médicos de um composto da invenção de acordo com a presente invenção são benéficos no tratamento de câncer para prevenir a progressão de câncer. Tais concretizações são descritas em maiores detalhes em outras partes do presente relatório descritivo.

[0142] Células-tronco cancerosas também são capazes de atuar como um reservatório de células cancerosas pelo fato de que elas podem causar a recorrência de câncer após remissão. Mesmo no caso em que a maioria das células cancerosas de um paciente tenha sido removida (por exemplo, por meio de cirurgia, radioterapia ou quimioterapia, quer isoladamente ou em combinação), de modo que nenhum sinal observável de um câncer permaneça, a presença contínua de células-tronco cancerosas pode permitir a recorrência do câncer ao longo do tempo. A terapia alvo de células-tronco cancerosas por um composto da presente invenção constitui um novo modo pelo qual os números de células-tronco cancerosas podem ser reduzidos e as células-tronco cancerosas mortas. Consequentemente, e conforme discutido em maiores detalhes em outra parte no relatório descritivo, em concretizações adequadas a presente invenção fornece métodos e usos médicos nos quais um composto da invenção previne ou retarda a recorrência de câncer.

[0143] Além disso, o movimento de células-tronco cancerosas do local de um câncer para outro local no interior do corpo pode contribuir para a propagação do câncer, por exemplo, dando origem a metástases. Consequentemente, a capacidade de um composto da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas, portanto, fornece novos métodos de tratamento e usos médicos na prevenção ou tratamento de propagação do câncer.

[0144] Além de suas atividades biológicas, células- tronco cancerosas podem ser identificadas por sua expressão de determinados marcadores característicos na superfície celular. Células-tronco cancerosas identificadas em malignidades hematológicas são, tipicamente, células CD34+ enquanto que, em tumores sólidos, CD44+, CD133+ e CD90+ foram identificados como marcadores de células-tronco cancerosas. A tabela a seguir resume exemplos de fenótipos na superfície de células-tronco cancerosas. Espera-se que cada uma destas formas de células-tronco cancerosas possa ser atingida usando um composto da invenção de acordo com a invenção e, assim, através de métodos ou usos que empregam um composto da invenção, pode ser usado na prevenção ou tratamento de cânceres associados a células-tronco cancerosas que expressam qualquer um destes conjuntos de marcadores.

[0145] Os dados apresentados nos Exemplos demonstram que um composto da invenção é capaz de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas de linhagens de células-tronco leucêmicas, especificamente células-tronco cancerosas presentes na linhagem de células de leucemia mieloide aguda KG1a. Esta linhagem de células manifesta um compartimento de tipo células-tronco menor com um imunofenotipagem distinta (Lin-/CD34+/CD38-/CD123+) que é alvejada por um composto da invenção. Consequentemente, os métodos de tratamento ou usos médicos de um composto da invenção de acordo com a presente invenção podem ser usados para prevenir ou tratar leucemia ou outros cânceres associados a células-tronco cancerosas que expressam estes marcadores característicos.

[0146] A presente invenção também fornece métodos e usos médicos nos quais os pacientes são selecionados para prevenção ou tratamento de câncer, usando um composto da invenção, com base na identificação da presença de células- tronco cancerosas em uma amostra biológica representativa do câncer ou condição pré-cancerosa do paciente. Os marcadores definidos acima constituem exemplos adequados que podem ser usados para identificar a presença de células-tronco cancerosas de acordo com tais concretizações da invenção. Técnicas adequadas através das quais a expressão destes marcadores pode ser investigada em uma amostra biológica são ainda consideradas em outra parte no presente relatório descritivo.

"Terapia-Alvo de Células-Tronco Cancerosas"

[0147] A presente invenção fornece a primeira indicação de que os compostos da invenção podem ser usados para a terapia alvo de células-tronco cancerosas. A capacidade dos compostos da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas é ilustrada nos Exemplos descritos no presente relatório descritivo.

[0148] Pode ser visto que, quando um composto da invenção é fornecido a populações de células cancerosas que contêm células-tronco cancerosas, ele atinge as células- tronco cancerosas presentes, levando a uma redução no número total de células cancerosas. Conforme discutido em outra parte do presente relatório descritivo, determinados compostos da invenção têm como alvo preferencialmente células-tronco cancerosas, em oposição a células tumorais em massa, e a atividade de tais compostos é capaz não apenas de reduzir o número total de células cancerosas presente, mas também reduzir a proporção do total de células cancerosas que exibem marcadores fenotípicos de células-tronco cancerosas.

[0149] Acredita-se que os compostos da presente invenção entram em células cancerosas e são incorporados em ácidos nucleicos (RNA e/ou DNA) com as células. Sem estar preso por qualquer teoria, acredita-se que a eficácia, particularmente a eficácia anticâncer, exibida pelos compostos da presente invenção demonstra que os compostos da presente invenção são fosforilados em trifosfato de cordicepina ou um derivado de cordicepina (por exemplo, 2- fluorocordicepina ou 2-Cl-cordicepina) e acredita-se que a clivagem enzimática dentro da célula converte um composto da invenção diretamente em monofosfato de 8-cloroadenosina antes de fosforilação ao trifosfato.

[0150] Acredita-se também que os compostos da invenção possuem maior permeabilidade na membrana celular (quando comparado com a cordicepina) e que isto contribui para a potência anticâncer aumentada dos compostos da invenção em comparação com o precursor do qual eles são derivados.

[0151] Sem desejar estar preso por qualquer hipótese, os inventores acreditam que a redução nos números de células- tronco cancerosas surge como um resultado de morte direcionada de células-tronco cancerosas entre a população de células cancerosas. Assim, os compostos da invenção são capazes de causar a morte das células-tronco cancerosas. Além disso, os resultados descritos em outra parte do presente relatório descritivo ilustram que determinados compostos da invenção parecem matar células-tronco cancerosas preferencialmente quando comparado à morte de células cancerosas que não células-tronco, causando, assim, não apenas a morte das células-tronco cancerosas, mas também uma redução na proporção de células-tronco cancerosas entre a população total de células cancerosas.

[0152] Embora os inventores acreditem que os compostos da invenção que têm como alvo preferencialmente células- tronco cancerosas matam preferencialmente células-tronco cancerosas em comparação com células cancerosas que não células-tronco, outros mecanismos também podem contribuir para a redução na proporção de células-tronco cancerosas provocada por um composto da invenção que tem como alvo estas células.

[0153] Meramente a título de exemplo, o tratamento com um composto da invenção pode provocar um aumento na diferenciação de células-tronco cancerosas, reduzindo, assim, o número de células-tronco cancerosas e também a proporção do total de células cancerosas representadas por células-tronco cancerosas. Alternativamente, um composto da invenção pode fazer com que as células-tronco cancerosas percam seu fenótipo de células-tronco, por exemplo, percam sua capacidade de se autorrenovar, reduzindo, assim, o número de células-tronco cancerosas.

[0154] Referências à terapia alvo de células-tronco cancerosas na presente descrição deve ser interpretadas de modo correspondente. Para fins do presente relatório descritivo, "terapia alvo" de células-tronco cancerosas pode ser tomado como incluindo qualquer mecanismo pelo qual um composto da invenção reduz o número de células-tronco cancerosas presentes em uma população de células, quer in vitro ou in vivo. Em particular, a terapia alvo de células- tronco cancerosas pode ser tomada como abrangendo redução preferencial dos números de células-tronco cancerosas, em comparação com outros tipos de células, particularmente em comparação com células cancerosas que não células-tronco. Referências à terapia alvo no presente relatório descritivo podem ser consideradas como incluindo morte e, opcionalmente, morte preferencial de células-tronco cancerosas, em comparação com células cancerosas que não células-tronco.

"Prevenção ou Tratamento de Câncer"

[0155] A invenção fornece usos médicos e métodos de tratamento nos quais um composto da invenção é usado para a prevenção ou tratamento de câncer. No contexto da presente invenção, "prevenção" de câncer deve ser considerada como estando relacionada a aplicações profiláticas de um composto da invenção usado antes do desenvolvimento de câncer e com o objetivo de interromper o desenvolvimento do câncer. Por outro lado, "tratamento" de câncer é tomado como se referindo ao uso de um composto da invenção após o câncer ter ocorrido com vistas a melhorar o câncer ao abrandar ou interromper a proliferação de células cancerosas e o crescimento do tumor. Vantajosamente, o tratamento de câncer pode causar a redução parcial ou total do número de células cancerosas e tamanho do tumor. O tratamento eficaz de câncer pode fazer com que a doença se "estabilize" ou "responda" de acordo com as orientações do RECIST (Critérios de Avaliação de Resposta em tumores sólidos).

[0156] Conforme descrito em maiores detalhes abaixo, a prevenção de câncer de acordo com a presente invenção pode ser particularmente benéfica em pacientes que têm uma condição pré-cancerosa que aumenta a probabilidade de desenvolver câncer.

"Prevenção de Câncer"

[0157] A prevenção de câncer de acordo com a presente invenção pode ser realizada por meio de tratamento de uma condição pré-cancerosa usando um composto da invenção de acordo com os vários aspectos ou concretizações da invenção descritos aqui.

[0158] Em particular, a prevenção de câncer, no âmbito da presente invenção, pode ser obtida por meio dos métodos ou usos médicos da invenção nos quais um composto da invenção é fornecido a um paciente com uma condição pré-cancerosa. Os métodos de tratamento ou usos médicos de acordo com esta concretização podem evitar o desenvolvimento da condição pré-cancerosa tratada em câncer, permitindo, assim, uma prevenção eficaz do câncer.

[0159] Referências à prevenção de câncer, no contexto da presente invenção, também podem abranger outras aplicações profiláticas de um composto da invenção. Por exemplo, a capacidade de um composto da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas e, assim, prevenir o desenvolvimento de câncer e/ou prevenir a progressão de câncer e/ou prevenir a recorrência de câncer e/ou impedir a propagação de câncer.

"Condições Pré-Cancerosas"

[0160] O câncer é frequentemente precedido pelo desenvolvimento de uma condição pré-cancerosa que, por si só, não é cancerosa, mas está associada a um risco aumentado de câncer. O acúmulo de alterações genéticas ou epigênicas pode fazer com que células anteriormente normais desenvolvam um fenótipo de células-tronco cancerosas. Consequentemente, células-tronco cancerosas também podem estar presentes em tais condições pré-cancerosas, bem como em condições cancerosas.

[0161] Acredita-se que a presença de células-tronco cancerosas em condições pré-cancerosas contribui para o desenvolvimento destas condições em câncer. Os métodos e usos médicos da invenção podem ser empregados para terapia alvo de células-tronco cancerosas presentes em condições pré-cancerosas e, assim, tratamento de tais condições. Será apreciado que a descoberta nova e inesperada de que os compostos da invenção têm como alvo células-tronco cancerosas significa que o tratamento de condições pré- cancerosas com tais compostos pode ser usado para impedir que as condições tratadas se desenvolvam em câncer. Isto representa uma forma pela qual um composto da invenção pode ser usado clinicamente para a prevenção de câncer, conforme considerado no restante do presente relatório descritivo.

[0162] Exemplos de condições pré-cancerosas que podem ser tratadas de acordo com a presente invenção incluem, porém sem limitações, aquelas selecionadas a partir do grupo que consiste em: queratose actínica, esôfago de Barrett, gastrite atrófica, disqueratose congênita, disfagia sideropênica, líquen plano, fibrose da submucosa oral, elastose solar, displasia cervical, leucoplasia, eritroplasias, gamopatia monoclonal de significado indeterminado (MGUS), de linfocitose monoclonal de células B (MBL), síndromes mielodisplásicas, bem como condições pré- cancerosas do estômago, tais como gastrite atrófica, úlcera gástrica, anemia perniciosa, lesões gástricas, pólipos gástricos e doença de Ménétrier. Dentre as condições pré- cancerosas do estômago listadas, gastrite atrófica, anemia perniciosa, lesões gástricas e determinados tipos de pólipos gástricos podem ter um risco particularmente intensificado de se desenvolver em cânceres.

[0163] Condições pré-cancerosas tomam, muitas vezes, a forma de lesões que compreendem células displásicas ou hiperplásicas. Consequentemente, a presença de displasia ou hiperplasia, como uma alternativa ou adição à presença de células com marcadores ou fenótipos característicos de células-tronco cancerosas expressos, pode ser usada na identificação de condições pré-cancerosas.

[0164] A gravidade da displasia pode variar entre diferentes condições pré-cancerosas ou com o desenvolvimento de uma única condição pré-cancerosa ao longo do tempo. Em geral, quanto mais avançada a displasia associada a uma condição pré-cancerosa, maior a probabilidade de que a condição pré-cancerosa se desenvolva em câncer. A displasia é, tipicamente, classificada como branda, moderada ou grave. A displasia grave geralmente se desenvolve em câncer se não tratada. Adequadamente, os métodos de tratamento ou usos médicos que empregam um composto da invenção podem, portanto, ser usados para tratar um paciente com uma condição pré- cancerosa associada à displasia grave.

[0165] Em uma concretização adequada da invenção, um composto da invenção é usado para tratar um paciente com displasia cervical grave. A displasia cervical grave pode ser diagnosticada por meio de um teste de esfregaço. Em outra concretização da invenção, um composto da invenção é usado para tratar displasia esofageal grave ("esôfago de Barrett"). A displasia esofageal grave pode ser diagnosticada após uma biópsia tecidual.

[0166] Recentemente, foi reportado que pré- malignidades também podem ser identificadas através da detecção de mutações somáticas em células em indivíduos que desconheciam ter câncer. Em particular, foi reportado que a hematopoiese clonal relacionada à idade é uma condição pré- maligna comum que está associada ao aumento da mortalidade global e aumento do risco de doença cardiometabólica. A maioria das mutações detectadas em células sanguíneas ocorreu em três genes: DNMT3A, TET2 e ASXL1. Consequentemente, os pacientes que se beneficiarão do uso de um composto da invenção para terapia alvo de células-tronco cancerosas e, assim, tratamento de uma condição pré- cancerosa, podem ser identificados por meio de ensaio de uma amostra que compreende as células sanguíneas quanto à presença de mutações genéticas indicativas de uma condição pré-cancerosas em pelo menos um de: DNMT3A e/ou TET2 e/ou ASXL1.

[0167] Condições pré-cancerosas que podem se beneficiar do tratamento com um composto de acordo com a invenção para terapia alvo de células-tronco cancerosas também podem ser identificadas ao determinar a presença de células-tronco cancerosas com referência a qualquer uma das técnicas com base em expressão de marcadores característicos de células-tronco cancerosas, ou fenótipos de células-tronco cancerosas, discutidas em outra parte do relatório descritivo.

"Tratamento de Câncer"

[0168] Aqueles versados na técnica reconhecerão que há muitas medições pelas quais o "tratamento" de câncer pode ser avaliado. Meramente a título de exemplo, qualquer redução ou prevenção do desenvolvimento de câncer, progressão de câncer, recorrência de câncer ou propagação de câncer pode ser considerada como indicação de um tratamento eficaz de câncer.

[0169] Em determinadas concretizações, um composto da invenção pode ser usado para: reduzir a proporção de células- tronco cancerosas em uma população de células cancerosas; e/ou inibir o crescimento do tumor; e/ou reduzir a tumorigenicidade; e/ou prevenir ou tratar um câncer primário; e/ou prevenir ou tratar um câncer em recidiva; e/ou prevenir ou tratar um câncer metastático ou secundário; e/ou tratar, prevenir ou inibir metástase ou recorrência; e/ou tratar ou prevenir câncer refratário.

[0170] A capacidade de tratamento de câncer usando um composto da invenção para provocar uma redução no tamanho do tumor e também manter a redução no tamanho do tumor durante/após o período em que o tratamento é administrado e representa uma indicação particularmente relevante de tratamento eficaz do câncer. Conforme apresentado nos exemplos, os tratamentos ou usos médicos da invenção provaram, surpreendentemente, ser eficazes a este respeito, mesmo em modelos usando células representativas de cânceres recidivantes ou refratários que eram anteriormente resistentes ao tratamento com outras terapias.

[0171] Os dados apresentados nos exemplos ilustram que o tratamento com um composto da presente invenção reduz a proporção de células-tronco cancerosas em uma população de células cancerosas. Atividades biológicas ou marcadores na superfície celular característicos através dos quais as células-tronco cancerosas podem ser identificadas são descritos em outra parte no relatório descritivo. Em uma concretização adequada, o tratamento de câncer de acordo com a presente invenção pode dar origem a uma redução na proporção de células-tronco cancerosas presentes em um paciente com câncer de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução na proporção do células-tronco cancerosas presentes em um paciente com câncer de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução na proporção do células-tronco cancerosas presentes em um paciente com câncer de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução na proporção de células-tronco cancerosas presentes em um paciente com câncer de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou até 100% (de modo que substancialmente nenhuma célula-tronco cancerosa permaneça).

[0172] A divisão assimétrica de células-tronco cancerosas contribui para o crescimento de tumores. O tratamento de câncer com um composto da invenção de acordo com a presente invenção pode levar a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Adequadamente, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95% em um paciente assim tratado. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100% em um câncer assim tratado.

[0173] O crescimento do tumor pode ser avaliado através de qualquer método adequado no qual a alteração no tamanho de um tumor é avaliada ao longo do tempo. Adequadamente, o tamanho de um tumor antes do tratamento de câncer pode ser comparado com o tamanho do tumor mesmo durante ou após o tratamento de câncer. Uma série de formas pelas quais o tamanho de um tumor pode ser avaliado são conhecidas. Por exemplo, o tamanho de um tumor pode ser avaliado por meio de imagiologia do tumor in situ dentro de um paciente. Técnicas adequadas, tais como técnicas de imagiologia, podem permitir que o volume de um tumor seja determinado e alterações no volume do tumor sejam avaliadas.

[0174] Conforme mostrado nos resultados apresentados nos Exemplos do presente relatório descritivo, os métodos de tratamento e usos médicos de um composto da invenção são capazes não apenas de interromper o crescimento do tumor, mas são realmente capazes de provocar uma redução no volume do tumor em pacientes com câncer, incluindo pacientes com cânceres recidivantes ou refratários. Adequadamente, o tratamento de câncer de acordo com a presente invenção pode dar origem a uma redução no volume do tumor de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução no volume do tumor de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução no volume do tumor de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução no volume do tumor de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100%.

[0175] Uma redução no volume do tumor do tipo descrito acima pode ser calculada com referência a um controle adequado. Por exemplo, em estudos realizados in vitro ou in vivo em modelos animais adequados, a redução no volume do tumor pode ser determinada por meio de comparação direta entre o volume de um tumor tratado com um composto da invenção e o volume de um tumor de controle (o qual pode ser não tratado ou pode ter recebido tratamento diferente daquele de um composto da invenção). Será reconhecido que tais modelos que requerem falta de tratamento de um tumor podem não ser eticamente aceitáveis no contexto dos ensaios clínicos ou gestão terapêutica de pacientes e, neste caso, uma redução no volume do tumor pode ser avaliada ao comparar o volume de um tumor tratado com o volume do mesmo tumor antes de tratamento ou com um volume previsto que seria atingido pelo tumor sem que nenhum tratamento fosse administrado.

[0176] Os métodos de tratamento e usos médicos de um composto da invenção podem levar a uma redução dos biomarcadores indicativos de câncer. A redução de tais biomarcadores fornece uma avaliação adicional pela qual tratamento eficaz de câncer pode ser demonstrado. Exemplos adequados de tais biomarcadores podem ser selecionados com base no tipo de câncer a ser tratado: no caso de cânceres ginecológicos, CA125 representa um exemplo adequado de um biomarcador enquanto que, no caso de cânceres pancreáticos ou biliares, CA19.9 representa um adequado exemplo de um biomarcador e, no caso de cânceres colorretais, CEA pode ser um biomarcador adequado.

[0177] Adequadamente, o tratamento de câncer de acordo com a presente invenção pode dar origem a uma redução nos biomarcadores de câncer de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução nos biomarcadores de câncer de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução nos biomarcadores de câncer de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos, 95%. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução nos biomarcadores de câncer de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100%.

[0178] Os efeitos benéficos, tal como uma redução na proporção de células-tronco cancerosas presentes, redução no crescimento de tumor ou redução no volume do tumor ou biomarcadores de câncer, observados no tratamento de câncer de acordo com a presente invenção podem ser mantidos durante pelo menos um mês. Adequadamente, tais efeitos benéficos podem ser mantidos durante pelo menos dois meses, pelo menos três meses, pelo menos quatro meses, pelo menos cinco meses ou pelo menos seis meses. Na verdade, tais efeitos benéficos podem ser mantidos durante pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses ou pelo menos 24 meses. Adequadamente, o efeito benéfico pode ser mantido durante pelo menos três anos, pelo menos quatro anos, pelo menos cinco anos, pelo menos seis anos, pelo menos sete anos, pelo menos oito anos, pelo menos nove anos ou dez anos ou mais.

[0179] Em uma concretização adequada da invenção, um composto da invenção é usado em um método de prevenção ou tratamento de câncer ou uma condição pré-maligna através de terapia alvo de células-tronco cancerosas. Em uma concretização adequada, a invenção fornece o uso de um composto da invenção em um método de prevenção ou tratamento de câncer ou uma condição pré-maligna, em que o método reduz a tumorigenicidade de uma ou mais células-tronco cancerosas. Adequadamente, tais métodos podem impedir a progressão do câncer ou inibir o crescimento do tumor.

[0180] Quando um composto da invenção é usado em métodos ou usos médicos da presente invenção para prevenir ou tratar a progressão de um câncer, tal prevenção ou tratamento pode fazer com que a progressão do câncer seja retardada, atrasada ou completamente interrompida.

[0181] A progressão de um câncer é, tipicamente, determinada ao atribuir um estágio ao câncer. A atribuição de estágios normalmente é realizada através da atribuição de um número de I a IV ao câncer, I sendo um câncer isolado e IV sendo um câncer que se espalhou para o limite das medidas de avaliação. As especificidades de atribuição de estágios variam entre os tipos de câncer, mas o estágio geralmente leva em conta o tamanho de um tumor, se ele invadiu órgãos adjacentes, para quantos gânglios linfáticos regionais (na proximidade) ele se espalhou (se houver) e se apareceu em locais mais distantes (formou metástases).

[0182] Em geral, o Estágio I está localizado em uma parte do corpo e pode ser tratado por meio de ressecção cirúrgica (para tumores sólidos que são suficientemente pequenos). O Estágio II é localmente avançado e é tratável por quimioterapia, radioterapia, cirurgia ou uma combinação dos mesmos. O Estágio III também é localmente avançado e a designação de Estágio II ou Estágio III depende do tipo específico de câncer, embora o Estágio III seja geralmente aceito como sendo localmente avançado "tardio". Cânceres no Estágio IV frequentemente sofreram metástase para um segundo órgão. O tratamento de câncer usando um composto da invenção nos métodos ou usos médicos da presente invenção pode ser usado para tratar um câncer em Estágio I, II, III ou IV através de terapia alvo de células-tronco cancerosas. O tratamento com um composto da invenção pode ser usado para prevenir a progressão de um câncer de um estágio para o seguinte. Em uma concretização, o tratamento com um composto da invenção é usado para prevenir a progressão do Estágio I para o Estágio II. Em outra concretização, o tratamento com um composto da invenção é usado para prevenir a progressão do Estágio II para o Estágio III. Em ainda outra concretização, o tratamento com um composto da invenção é usado para prevenir a progressão do Estágio III para o Estágio IV.

[0183] A prevenção ou inibição da progressão de câncer é particularmente importante para impedir a disseminação do câncer, por exemplo, a progressão do Estágio I para o Estágio II, onde o câncer se espalha localmente ou a progressão do Estágio III para o Estágio IV, onde o câncer sofre metástase para outros órgãos. As células-tronco cancerosas são tumorigênicas e, portanto, acredita-se que desempenham um papel fundamental na disseminação do câncer, tanto local como metastasicamente. Os métodos de tratamento ou usos médicos da invenção que empregam um composto da invenção podem, portanto, ser usados para prevenir a disseminação do câncer através de terapia alvo de células-tronco cancerosas tumorigênicas e, assim, reduzir seu número.

"Cânceres"

[0184] Os compostos da invenção demonstram um aumento da atividade anticâncer em comparação com os nucleosídeos parentais a partir dos quais eles são derivados. Esta atividade anticâncer aumentada parece ser conferida como um resultado de aumento da atividade tanto contra células- tronco cancerosas como células cancerosas que não células- tronco.

[0185] As células-tronco cancerosas desempenham um papel na atividade biológica de uma grande variedade de cânceres. Consequentemente, há uma vasta faixa de cânceres que podem ser prevenidos ou tratados de acordo com a presente invenção.

[0186] Conforme discutido aqui em outra parte, as células-tronco cancerosas são conhecidas por estarem presentes em muitos tipos de tumor, incluindo tumores líquidos (incluindo tumores hematológicos, tais como leucemias e linfomas) e tumores sólidos (tais como cânceres de mama, pulmão, cólon, próstata, ovário, pele, bexiga, biliar e pâncreas). Consequentemente, espera-se que os métodos de tratamento e usos médicos de um composto da invenção para terapia alvo de células-tronco cancerosas sejam úteis na prevenção ou tratamento de tais cânceres.

[0187] Adequadamente, um composto da invenção pode ser usado na prevenção ou tratamento de um câncer selecionado a partir do grupo que consiste em: leucemia, linfoma, mieloma múltiplo, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de mama, câncer de cabeça e pescoço, neuroblastoma, carcinoma da tiroide, câncer de pele (incluindo melanoma), carcinoma espinocelular oral, câncer de bexiga, tumor de células de Leydig, câncer das vias biliares, tais como colangiocarcinoma ou ducto biliar câncer, câncer do pâncreas, câncer do cólon, câncer colo-rectal e os câncers ginecológicos, incluindo câncer do ovário, câncer do endométrio, câncer da trompa de Falópio, câncer uterino e câncer cervical, carcinomas, incluindo do epitélio cervical. Em concretizações adequadas, o câncer é leucemia e pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielogênea aguda (também conhecida como leucemia mieloide aguda ou leucemia não- linfocítica aguda), leucemia promielocítica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mieloide crônica (também conhecida como leucemia mielogênea crônica, leucemia mielocítica crônica ou leucemia granulocítica crônica), leucemia linfocítica crônica, leucemia monoblástica e leucemia das células pilosas. De acordo com outras concretizações preferidas, o câncer é leucemia linfoblástica aguda. Em uma concretização particular, a leucemia é leucemia refratária TdT-positiva. Em uma concretização adequada, o câncer é linfoma, o qual pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em: linfoma de Hodgkin; linfoma não- Hodgkin; linfoma de Burkitt; e linfoma linfocítico pequeno.

[0188] Adequadamente, a terapia alvo de células-tronco cancerosas em tais cânceres pode obter um tratamento eficaz do câncer ao prevenir ou tratar o desenvolvimento do câncer, ao prevenir ou tratar a progressão do câncer, ao prevenir ou tratar a recorrência do câncer ou ao prevenir ou tratar a propagação do câncer.

[0189] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece um composto da invenção para uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas na prevenção ou tratamento de câncer metastático.

[0190] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece um composto da invenção para uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas no tratamento de câncer recidivante ou refratário.

[0191] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece um composto da invenção para uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas no tratamento de um câncer primário. Adequadamente, o câncer primário tratado pode ser um câncer primário secundário.

[0192] A invenção fornece um composto da invenção para uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas no tratamento de câncer secundário. Em uma concretização adequada, o câncer secundário é um câncer metastático.

[0193] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece um composto da invenção para uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas, em que a terapia alvo de células-tronco cancerosas impede ou inibe: (i) a recorrência de um câncer; (ii) a ocorrência de câncer primário secundário; ou (iii) a metástase de um câncer.

[0194] Os métodos de tratamento ou usos médicos nos quais um composto da presente invenção é empregado com base em sua capacidade de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas podem ser usados no tratamento de câncer recidivante ou refratário. As considerações referentes a um câncer recidivante ou refratário em tais concretizações são, exceto onde o contexto requer de outro modo, as mesmas conforme para o tratamento de câncer recidivante ou refratário em relação aos aspectos da invenção.

"Câncer Recidivante ou Refratário"

[0195] Conforme observado acima, determinados aspectos e concretizações da invenção referem-se particularmente ao uso de um composto da invenção no tratamento de cânceres recidivantes ou refratários.

[0196] Para fins da presente invenção, os cânceres refratários podem ser tomados como cânceres que demonstram resistência ao tratamento por outras terapias anticâncer que não aquelas que usam um composto da invenção. Por exemplo, um composto da invenção pode ser usado no tratamento de cânceres refratários que são resistentes ao tratamento com radioterapia. Alternativa ou adicionalmente, um composto da invenção pode ser usado no tratamento de cânceres refratários que são resistentes a agentes biológicos usados no tratamento de câncer. Em uma concretização adequada, um composto da invenção pode ser usado no tratamento de cânceres refratários que são resistentes ao tratamento com outros agentes quimioterapêuticos que não um composto da invenção.

[0197] Em particular, os cânceres refratários que podem se beneficiar dos métodos de tratamento e usos médicos da invenção que empregam um composto da invenção incluem os cânceres que são resistentes à cordicepina ou 2- fluorocordicepina.

[0198] Cânceres recidivantes (ou cânceres recorrentes) são aqueles que voltam depois de um período de remissão, durante o qual o câncer não pode ser detectado. A recorrência do câncer pode ocorrer no local do câncer inicial (recorrência de câncer local), em um local próximo daquele do câncer inicial (recorrência de câncer regional) ou em um local distante do câncer original (recorrência de câncer distal). Acredita-se que células-tronco cancerosas exerçam um papel na recorrência de câncer, constituindo uma fonte da qual são geradas células cancerosas reincidentes. Consequentemente, os métodos de tratamento e usos médicos de um composto de acordo com a invenção que permitem a terapia alvo de células-tronco cancerosas podem ser de grande benefício no contexto de cânceres recidivantes. A capacidade de um composto da invenção de uso em terapia alvo de células- tronco cancerosas pode ser usada para remover as populações daquelas células que são capazes de dar origem à recorrência, impedindo, assim, a incidência de câncer recidivante. A atividade anti-células-tronco de um composto da invenção também pode ser usada para terapia alvo de células-tronco cancerosas em cânceres que eram recidivantes, bem como exercer potencialmente efeitos citotóxicos sobre células cancerosas que não células-tronco, fornecendo, assim, tratamento de cânceres recidivantes.

[0199] Em vista do exposto acima, será reconhecido que um composto da invenção pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para a prevenção ou tratamento de um câncer recidivante. Um composto da invenção pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para a prevenção ou tratamento de um câncer recidivante local, regional ou distal.

[0200] Um composto da invenção pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para prevenir a recorrência de câncer, fornecendo remissão durante pelo menos 2 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses, pelo menos 24 meses ou pelo menos 30 meses. Na verdade, um composto da invenção pode ser usado para prevenir a recorrência de câncer ao fornecer uma remissão de pelo menos 4 anos, pelo menos 5 anos, pelo menos de 6 anos, pelo menos 7 anos, pelo menos 8 anos, pelo menos 9 anos ou pelo menos 10 anos.

[0201] Um composto da invenção pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para o tratamento de um câncer recidivante que recorreu após pelo menos 2 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses, pelo menos 24 meses ou pelo menos 30 meses de remissão. Na verdade, um composto da invenção pode ser usado para tratar um câncer recidivante que recorreu após pelo menos 4 anos, pelo menos 5 anos, pelo menos de 6 anos, pelo menos 7 anos, pelo menos 8 anos, pelo menos 9 anos ou pelo menos 10 anos de remissão.

[0202] A capacidade dos compostos da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas dá origem à capacidade destes compostos de prevenir ou tratar o câncer, de acordo com os usos médicos ou métodos de tratamento da invenção. No entanto, deverá ser observado que os compostos da invenção também exercem um efeito citotóxico direto sobre as células cancerosas que não células-tronco que compõem o volume dos tumores. Embora a atividade de células-tronco cancerosas possa ser subjacente à grande parte da resistência que torna os cânceres recidivantes ou refratários tão difíceis de tratar, as células cancerosas que não células- tronco também são um dos principais constituintes de tais cânceres recidivantes ou refratários.

[0203] Os compostos da invenção exercem efeitos citotóxicos sobre células cancerosas que não células-tronco maiores do que a cordicepina ou 2-fluorocordicepina, a molécula quimioterapêutica a partir da qual os compostos da invenção são derivados. Consequentemente, o mecanismo pelo qual um composto da invenção atua no tratamento de câncer recidivante ou refratário não pode estar limitado unicamente à atividade de anti-células-tronco cancerosas do presente composto, mas pode também fazer uso da ação de um composto da invenção em células cancerosas que não células-tronco. Em tais usos, o tratamento com um composto da invenção reduzirá o número total tanto de células-tronco cancerosas como de células cancerosas que não células-tronco. Quando determinados compostos da invenção são usados, tais tratamentos reduzirão preferencialmente a proporção de células-tronco cancerosas que permanecem após o tratamento.

Doses Terapeuticamente Eficazes de um Composto da Invenção

[0204] Uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção pode ser uma quantidade suficiente para induzir à morte de células cancerosas. Uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção pode ser uma quantidade suficiente para induzir à morte de células- tronco cancerosas. Em algumas concretizações, em particular àquelas que se referem ao tratamento de câncer recidivante ou refratário, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção pode ser uma quantidade suficiente para induzir a morte de células-tronco cancerosas e também para induzir a morte de células cancerosas que não células-tronco.

[0205] Há diversas maneiras diferentes pelas quais a quantidade de um composto terapeuticamente eficaz, tal como um composto da invenção, a ser administrado a um paciente pode ser calculada e expressa. Uma de tais formas que é considerada particularmente relevante em doses de agentes para a prevenção ou tratamento de câncer é a quantidade do agente a ser administrado por unidade de área de superfície corporal do paciente. Tais doses são, tipicamente, expressas em termos da quantidade do agente (a qual pode ser determinada em massa) por metro quadrado (m2) da área de superfície.

[0206] Usos de um composto da invenção para a prevenção ou tratamento de câncer podem empregar uma dose semanal entre 10 mg/m2 e 1000 mg/m2. Tais tratamentos podem, por exemplo, usar uma dose semanal entre 375 mg/m2 e 900 mg/m2. Por exemplo, o tratamento eficaz de cânceres recidivantes ou refratários pode ser fornecido quando os pacientes recebem doses semanais de um composto da invenção que variam entre cerca de 500 mg/m2 e 825 mg/m2.

[0207] Sem desejar estar preso por qualquer hipótese, os inventores acreditam que a capacidade de um composto da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas permite que a eficácia terapêutica seja obtida usando doses mais baixas deste composto do que, de outra forma, seria esperado. Meramente a título de exemplo, doses semanais de um composto da invenção que são tão baixas quanto 825 mg/m2, 750 mg/m2, 600 mg/m2 ou 500 mg/m2 podem ser terapeuticamente eficazes para os usos e métodos da invenção.

[0208] Uma dose semanal escolhida de um composto da invenção pode ser fornecida em uma única incidência de administração ou em múltiplas incidências de administração durante uma semana. Por exemplo, uma dose semanal de um composto da invenção pode ser fornecida em duas incidências de administração, em três incidências de administração ou mais. Assim, no caso de uma dose semanal de 750 mg/m2, isto pode ser conseguido por três administrações de 250 mg/m2 ao longo de uma semana ou duas administrações de 375 mg/m2 durante uma semana. Da mesma forma, no caso de uma dose semanal de 600 mg/m2, isto pode ser conseguido por três administrações de 200 mg/m2 ao longo de uma semana ou duas administrações de 300 mg/m2 durante uma semana.

[0209] Uma quantidade adequada de um composto da invenção a ser administrada em uma única incidência de tratamento de modo a fornecer uma dose requerida deste composto ao longo de semanas pode estar entre cerca de 100 mg/m2 e 300 mg/m2.

[0210] A dose semanal fornecida de um composto da invenção pode diminuir ao longo do curso do tratamento. Por exemplo, o tratamento pode ser iniciado com uma dose semanal de cerca de 1000 mg/m2, 900 mg/m2, 825 mg/m2, 750 mg/m2 ou 725 mg/2 e, durante o curso de tratamento, a dose necessária pode diminuir para cerca de 750 mg/m2 (nos casos em que a dose inicial é acima deste valor), cerca de 650 mg/m2, cerca de 625 mg/m2 ou mesmo cerca de 500 mg/m2 ou cerca de 375 mg/m2.

[0211] As doses de um composto da invenção podem, evidentemente, ser apresentadas em outras maneiras. A mais comum destas é a quantidade do agente ativo a ser fornecido por unidade de massa corporal. Calcula-se que, para um paciente humano médio, uma dose de 1 mg/m2 é equivalente a aproximadamente 0,025 mg/kg de massa corporal. Deste modo, os dados indicam que um composto da invenção é eficaz para o tratamento de câncer recidivante ou refratário em doses que variam a partir de cerca de 6,25 mg/kg a cerca de 25 mg/kg. Uma dose adequada pode, por exemplo, estar entre cerca de 9,5 mg/kg e 22,5 mg/kg. Em uma concretização adequada, um composto da invenção obtém tratamento eficaz de cânceres recidivantes ou refratários quando os pacientes recebem doses semanais que variam entre cerca de 12,5 mg/kg e 20,5 mg/kg.

[0212] Considerações sobre formulações de um composto da presente invenção adequadas para uso nos métodos de prevenção ou tratamento e usos médicos da presente invenção são descritas em outra parte na presente descrição. No caso de formulações injetáveis de um composto da invenção, estas podem ser administradas por via intravenosa. A administração intravenosa pode ser alcançada através de qualquer período de tempo adequado, por exemplo, em uma injeção de 10 minutos ou similar.

Tipos de Tratamento

[0213] Em uma concretização adequada, um composto da invenção pode ser usado para a terapia alvo de células-tronco cancerosas como um tratamento de primeira linha para o câncer.

[0214] No entanto, a descoberta de que os compostos da invenção são capazes de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas e, assim, tratar câncer recidivante ou refratário, ilustra que um composto da invenção é capaz de fornecer um tratamento eficaz para o câncer em contextos nos quais outros tratamentos se revelaram ineficazes. Consequentemente, em uma concretização apropriada, a presente invenção fornece um composto da invenção para a terapia alvo de células-tronco cancerosas como um tratamento de segunda linha para o câncer. Na verdade, em uma concretização apropriada, a presente invenção fornece um composto da invenção para a terapia alvo de células-tronco cancerosas como um tratamento de terceira linha ou adicional para o câncer.

[0215] Em uma concretização adequada, é fornecido um composto da invenção para uso como um neoadjuvante no tratamento de câncer. Um neoadjuvante é um agente fornecido a um paciente de modo a reduzir o tamanho de um tumor antes de uma terapia anticâncer "principal", tal como remoção cirúrgica do câncer. Um composto da invenção pode ser usado como uma terapia neoadjuvante para um paciente que será subsequentemente submetido a tratamento cirúrgico para um câncer e/ou radioterapia para um câncer.

[0216] Alternativa, ou adicionalmente, a invenção fornece um composto para uso como um adjuvante no tratamento de câncer. Um adjuvante é um agente fornecido a um paciente após uma terapia anticâncer "principal", tal como remoção cirúrgica do câncer, de modo a evitar o retorno de um câncer após a terapia principal. Um composto da invenção pode ser usado como um adjuvante para um paciente que foi submetido a tratamento cirúrgico para um câncer e/ou radioterapia para um câncer.

[0217] Um composto da invenção pode ser empregado nos métodos ou usos da presente invenção em uma monoterapia, o que quer dizer em prevenções ou tratamentos nos quais um composto da presente invenção fornece substancialmente toda a atividade terapêutica que é usada na prevenção ou tratamento.

[0218] Alternativamente, os métodos ou usos da presente invenção podem empregar um composto da invenção em uma terapia combinada. Em tais concretizações, um composto da invenção é usado em conjunto com pelo menos uma terapia adicional para o câncer. A terapia adicional para o câncer pode compreender cirurgia e/ou radioterapia. Adicional ou alternativamente, a terapia para o câncer pode compreender ainda o uso de pelo menos um agente terapêutico adicional que contribui para que prevenção ou tratamento do câncer seja alcançado. Adequadamente, tal agente pode ser um agente quimioterapêutico ou um agente biológico usado na prevenção ou tratamento de câncer.

[0219] Em uma concretização adequada, uma terapia combinada de um composto da invenção e um agente terapêutico adicional pode ser fornecida a um paciente ao mesmo tempo. Em um exemplo apropriado, o composto da invenção e outro agente terapêutico podem ser formulados como parte da mesma composição farmacêutica. Alternativamente, o composto da invenção e outro agente terapêutico podem ser formulados separadamente para fornecimento ao paciente substancialmente ao mesmo tempo.

[0220] Em outra concretização adequada de uma terapia combinada, um composto da invenção e um agente terapêutico adicional podem ser fornecidos a um paciente em momentos diferentes. O composto da invenção e um agente terapêutico adicional podem ser fornecidos a um paciente sequencialmente. Por exemplo, o composto da invenção pode ser fornecido ao paciente antes de fornecimento do agente terapêutico adicional. Alternativamente, um composto da invenção pode ser fornecido ao paciente após fornecimento de outro agente terapêutico.

"Outros Agentes Terapêuticos"

[0221] Um composto da invenção pode ser usado em combinação com uma grande variedade de outros agentes terapêuticos para a prevenção ou tratamento de câncer. Estes incluem agentes biológicos, agentes imunoterapêuticos e agentes quimioterapêuticos que podem ser usados para a prevenção ou tratamento de câncer.

[0222] Embora exemplos específicos de outros agentes adequados sejam considerados nos parágrafos a seguir, estes não devem ser considerados como limitativos da variedade de outros agentes terapêuticos adequados para uso com um composto da invenção. Na verdade, a capacidade de um composto da invenção de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas indica que eles podem ser usados beneficamente em combinação com qualquer outro agente terapêutico usado na prevenção ou tratamento de câncer, quer tal agente adicional tenha como alvo células-tronco cancerosas, células-tronco não cancerosas ou outras células ou componentes envolvidos no desenvolvimento, manutenção, reincidência ou propagação de câncer.

[0223] Exemplos de outros agentes terapêuticos que podem ser usados em combinação com um composto da invenção incluem: (a) um agente antiangiogênico, opcionalmente em que o agente antiangiogênico é: (i) um inibidor da via de VEGF, opcionalmente bevacizumabe; (ii) um inibidor de tirosina quinase, opcionalmente sorafenibe, sunitinibe ou pazopanibe; ou (iii) um inibidor de mTOR, opcionalmente everolimus; (b) um agente de alquilação; (c) um antimetabólito; (d) um antibiótico antitumor; (e) um inibidor de topoisomerase; (f) um inibidor mitótico; (g) um anticorpo monoclonal; (h) um agente metálico; ou (i) uma imunoterapia ativa ou passiva.

[0224] Exceto onde o contexto requer de outro modo, os agentes terapêuticos adicionais apresentados na lista anterior devem todos ser considerados adequados para uso em qualquer uma das concretizações de terapias combinadas com um composto da invenção consideradas acima.

Seleção de Pacientes

[0225] A constatação dos inventores de que um composto da invenção é capaz de uso em terapia alvo de células-tronco cancerosas torna possível uma série de métodos pelos quais é possível determinar se um determinado paciente é suscetível de se beneficiar de um composto da invenção na prevenção ou tratamento de câncer, tal como câncer recidivante ou refratário.

[0226] Consequentemente, a invenção fornece um método para determinar se um paciente com câncer ou uma condição pré-cancerosa se beneficiará de prevenção ou tratamento de câncer com um composto da invenção, o método compreendendo: ensaio de uma amostra biológica representativa de câncer ou de uma condição pré-cancerosa no paciente quanto à presença de células-tronco cancerosas; em que a presença de células- tronco cancerosas na amostra biológica indica que o paciente se beneficiará de tratamento com um composto da invenção.

[0227] A invenção fornece ainda um método para determinação de um regime de tratamento adequado para um paciente com câncer ou uma condição pré-cancerosa, o método compreendendo: ensaio de uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-cancerosa no paciente quanto à presença de células-tronco cancerosas; em que a presença de células-tronco cancerosas na amostra biológica indica que um regime de tratamento adequado compreenderá tratamento do paciente com um composto da invenção.

[0228] A invenção também fornece um composto da invenção para uso na prevenção ou tratamento de câncer em um paciente selecionado para tal tratamento através de um método que compreende: ensaio de uma amostra biológica e representativa de câncer ou uma condição pré-cancerosa no paciente quanto à presença de células-tronco cancerosas; em que a presença de células-tronco cancerosas na amostra biológica indica que o paciente é adequado para tratamento com um composto da invenção.

[0229] Em concretizações adequadas, as células-tronco cancerosas em uma amostra biológica podem ser identificadas por sua expressão de padrões característicos de marcadores discutidos anteriormente no pedido.

[0230] Aqueles versados na técnica reconhecerão que há muitos exemplos adequados de amostras biológicas que podem ser usadas em concretizações da invenção, tais como aquelas apresentadas acima. Adequadamente, tal amostra pode incluir células do câncer ou condição pré-cancerosa. Uma amostra biológica adequada pode ser uma amostra de tecido, tal como uma amostra para uso em histologia. As células em tais amostras podem ser diretamente avaliadas quanto à sua expressão de marcadores de células-tronco cancerosas, tais como aqueles apresentados acima.

[0231] Alternativa ou adicionalmente, uma amostra biológica adequada pode compreender moléculas alvo representativas da expressão do gene por células do câncer ou condição pré-cancerosa. Exemplos destas moléculas alvo incluem as proteínas codificadas pelos genes expressos, ou ácidos nucleicos, tal como mRNA, representativos da expressão do gene.

[0232] Exemplos adequados de técnicas por meio das quais a expressão de marcadores de células-tronco cancerosas pode ser avaliada podem ser selecionadas com referência ao tipo de amostra. Técnicas para a investigação de marcadores expressos são frequentemente usadas no contexto de avaliação clínica (tal como para fins de diagnóstico ou prognóstico) e seu uso será familiar para aqueles versados na técnica no contexto da presente invenção. Meramente a título de exemplo, em amostras que contêm proteínas, a presença de marcadores de células-tronco cancerosas pode ser avaliada por meio de técnicas adequadas usando anticorpos que reagem com os marcadores de células-tronco cancerosas em questão. Exemplos de tais amostras que contêm marcadores proteicos de células- tronco cancerosas incluem amostras histológicas (onde a presença dos marcadores pode ser visualizada através de técnicas adequadas de imunocitoquímica) ou amostras derivadas da circulação. Aqui, a presença de células-tronco cancerosas (as quais se acredita contribuir para a propagação do câncer através de metástase) em circulação pode ser avaliada através de técnicas, tal como citometria de fluxo.

[0233] Em amostras que contêm ácidos nucleicos representativos da expressão de marcadores de células-tronco cancerosas, tal expressão pode ser avaliada por meio de técnicas adequadas de biologia molecular, tal como reação em cadeia de polimerase (PCR) usando iniciadores adequados.

Exemplo 1 - Procedimentos Sintéticos

[0234] Os compostos da invenção podem ser feitos de acordo com ou analogamente aos Procedimentos Gerais e Procedimentos Sintéticos exemplificativos a seguir.

Procedimento Geral 1 (para os compostos A-F e L-U)

[0235] N-metilimidazol (1,0 mmol) e uma solução do fosforocloridrato adequado (0,6 mmol) em THF anidro (2 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 3'- desoxiadenosina (0,20 mmol) ou da 3'-desoxiadenosina substituída em THF anidro (10 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna e TLC preparativa produziu o composto desejado como um sólido branco. As quantidades de componentes usados podem variar e os valores reais são fornecidos nos exemplos abaixo.

Procedimento Geral 2 (para o composto J)

[0236] 3'-desoxiadenosina (0,80 mmol) foi suspensa em (CH3O)3PO (5 mL) e POCl3 (0,80 mmol) foi adicionado gota a gota a -5°C. Permitiu-se que a mistura de reação atingisse a temperatura ambiente e fosse agitada durante 4 horas. Uma solução do sal de éster de aminoácido apropriado (4,0 mmol) dissolvido em CH2Cl2 anidro (5 mL) foi adicionada, seguido por di-isopropiletilamina (8,0 mmol) a -78°C. Após agitação em temperatura ambiente durante 20 horas, água foi adicionada e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com diclorometano e a fase orgânica lavada com salina. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em coluna (eluição em gradiente de CH2Cl2/MeOH=100/0 a 93/7) para fornecer o produto desejado como uma espuma branca. As quantidades de componentes usados podem variar e os valores reais são fornecidos nos exemplos abaixo.

Procedimento Geral 3 (para os compostos G-I)

[0237] 3'-desoxiadenosina (0,20 mmol) foi suspensa em THF anidro (5 ml) e tBuMgCl (solução a 1,0 M em THF, 0,22 mmol) foi adicionada gota a gota em temperatura ambiente. Uma solução do fosforocloridrato adequado (0,6 mmol) em THF anidro (2 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna e TLC preparativa produziu o composto desejado como um sólido branco. As quantidades dos componentes empregados podem variar e os valores reais são fornecidos nos exemplos abaixo.

Procedimento Geral 4 (para o composto V)

[0238] Cloreto de terc-butildimetilsilila (3,3 mol/eq.) e imidazol 6,6 (mol/eq.) foram adicionados a uma solução do derivado de 3'-desoxiadenosina apropriado (1 mol/eq.) em DMF anidro e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para outro (16-20 h). Em seguida, NH4Cl foi adicionado à mistura e lavado duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e o solvente foi removido sob vácuo. Purificação da mistura por meio de cromatografia em coluna obteve o intermediário C1. O intermediário C1 foi, então, dissolvido em uma solução aquosa de THF/H2O/TFA a 4/1/1 (6 ml/eq.) e agitada a 0°C durante 4 h. A solução foi, então, cuidadosamente neutralizada com uma solução saturada aquosa de NaHCO3 e a mistura foi lavada duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e o solvente foi removido sob vácuo. Purificação da mistura por meio de cromatografia em coluna obteve o intermediário C2. Em seguida, o Procedimento Geral B foi aplicado e o intermediário C3 foi obtido. O intermediário C3 foi dissolvido em uma solução aquosa de THF/H2O/TFA a 1/1/1 (6 ml/eq.) a 0°C e foi agitada em temperatura ambiente durante 24 h. Purificação por meio de cromatografia proporcionou os compostos desejados como sólidos brancos.

Procedimento Geral 5 (para a preparação de 3'- desoxiadenosina e 3'-desoxi-2-cloroadenosina empregadas nos exemplos):

[0239] Uma solução de H2O/CH3CN a 1:9 e, em seguida, α-AIBBr (4,0 mol/eq.) foram adicionados sequencialmente a uma suspensão de adenosina seca ou 2-cloroadenosina em CH3CN anidro e a agitação foi continuada em temperatura ambiente (20°C). Após 1 h, uma solução saturada de NaHCO3 foi adicionada com cautela e a solução foi extraída com EtOAc. A fase orgânica combinada foi lavada com salina. A fase aquosa foi extraída com EtOAc e a fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para fornecer uma goma branca. A mistura bruta foi dissolvida em MeOH anidro e agitada durante 1 h com resina Amberlite (2 x OH-) previamente bem lavada com MeOH anidro. A solução foi, então, filtrada e a resina cuidadosamente lavada com metanol anidro. Evaporação do filtrado combinado proporcionou a 2',3'- desidroadenosina ou 2',3'-desidro-2-cloroadenosina como um sólido branco.

[0240] Uma solução de LiEt3BH (solução a 1M em THF 4-4,3 mol/eq.) foi adicionada gota a gota a uma solução gelada (4°C) de 2',3‘-desidroadenosina ou 2',3’-desidro—2- cloroadenosina (1 mol/eq.) em DMSO/THF anidro (1/10) sob uma atmosfera de argônio. Agitação foi continuada a 4°C durante 1 h e em temperatura ambiente de um dia para o outro (16 h). A mistura de reação foi cuidadosamente acidificada (AcOH a 5%/H2O), purgada com N2 durante 1 h (sob o exaustor de fumaça) para remover o trietilborano pirofórico e evaporada. O resíduo foi cromatografado para proporcionar 3’- desoxiadenosina ou 3’-desoxi-2-cloroadenosina como um pó branco.

[0241] Usando o Procedimento Geral 5: 2',3’- desidroadenosina foi preparada a partir de 10,0 g (37,4 mmol) de adenosina, 7,5 mL de H2O/CH3CN (1/9), 22 mL (149,7 mmol) de α-AIBBr em 500 mL de CH3CN anidro e 300 mL de resina Amberlite (2 x OH-) em 400 mL de metanol seco. 2',3’- desidroadenosina foi obtida como um sólido branco (9,12 g, 98%). 3’-Deoxiadenosina foi preparada a partir de 9,12 g (36,6 mmol) de 2',3’-desidroadenosina e 159 mL (159 mmol) de LiEt3BH/THF a 1M, em DMSO/THF anidro (1/10, 50 mL). Purificação por meio de cromatografia em coluna sobre gel de sílica (sistema de eluente de MeOH a 3-18% em DCM) proporcionou 3’-deoxiadenosina como um pó branco (7,12 g, 77%).

[0242] 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,37 (s, 1H, H8), 8,17 (s, 1H, H2), 7,29 (br s, 2H, NH2), 5,89 (d, J = 2,5 Hz, 1H, H1’), 5,68 (d, J = 4,5 Hz, 1H, OH-2'), 5,19 (t, J = 6,0 Hz, 1H, OH-5'), 4,63 - 4,58 (m, 1H, H2'), 4,40 - 4,34 (m, 1H, H4’), 3,71 (ddd, J = 12,0, 6,0, 3,0 Hz, 1H, H5'), 3,53-3,49 (ddd, J = 12,0, 6,0, 4,0 Hz, 1H, H5'), 2,30-2,23 (m, 1H, H3’), 1,98-1,90 (m, 1H, H3’). 13C RMN (125 MHz, DMSO-d6) δ 156,00 (C6), 152,41 (C2), 148,82 (C4), 139,09 (C8), 119,06 (C5), 90,79 (C1’), 80,66 (C4’), 74,56 (C2'), 62,61 (C5'), 34,02 (C3’).

[0243] Usando o Procedimento Geral 5: 2',3’-desidro- 2-cloroadenosina foi preparada a partir de 5,0 g (16,6 mmol) de 2-cloroadenosina, 3,0 mL de H2O/CH3CN (1/9), 9,7 mL (66,2 mmol) de α-AIBBr em 38 mL de CH3CN anidro e 150 mL de resina Amberlite (2 x OH-) em 200 mL de metanol anidro. 2',3’- desidro-2-cloroadenosina foi obtida como um sólido branco (3,03 g, 60%). 3’-desoxi-2-cloroadenosina foi preparada a partir de 2,18 g (7,68 mmol) de 2',3’-desidro-2- cloroadenosina e 30,7 mL (30,7 mmol) de LiEt3BH/THF a 1M em DMSO/THF anidro (1/10 mL, 30 mL). Purificação por meio de cromatografia em coluna sobre gel de sílica (sistema de eluente de MeOH a 2-20% em DCM) proporcionou 3’-desoxi-2- cloroadenosina como um pó branco (1,20 g, 55%).

[0244] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δ H 8,41 (s, 1H, H8), 5,93 (d, J = 2,5 Hz, 1H, H1’), 4,68-4,66 (m, 1H, H2'), 4,56 4,52 (m, 1H, H4’), 3,95 (dd, J = 3, 12,5 Hz, 1H, H5'), 3,70 (dd, J = 3, 12,5 Hz, 1H, H5'), 2,39-2,33 (m, 1H, H3’), 2,08 2,03 (m, 1H, H3’) 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 158,14 (C6), 155,19 (C2), 151,15 (C4), 141,30 (C8), 119,56 (C5), 93,58 (C1’), 82,80 (C4’), 76,81 (C2'), 64,01 (C5'), 34,33 (C3’).

Preparação de 3’-desoxi-2-fluoroadenosina:

[0245] Uma solução de H2O/CH3CN (1:9; 1,4 mL) e, em seguida, α-AIBBr (4,10 mL, 28,05 mmol) foram adicionados sequencialmente a uma suspensão de 2-fluoroadenosina seca (2,0 g, 7,01 mmol) em CH3CN anidro (50 mL) e a agitação foi continuada em temperatura ambiente (20°C). Após 1 h, solução saturada de NaHCO3 foi adicionada cuidadosamente e a solução foi extraída com EtOAc (2 x 100 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salina (1 x 50 mL). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 mL) e a fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para proporcionar uma goma branca. A mistura bruta foi dissolvida em uma mistura de THF/H2O (4/1, 50 mL) e agitada durante 1 h com 60 mL de resina Amberlite (2 x OH-) (previamente bem lavada com THF). A solução foi, então, filtrada e a resina cuidadosamente lavada com THF. Evaporação do filtrado combinado e cristalização do resíduo a partir de EtOH proporcionou 2',3’-desidro-2-fluoroadenosina como um sólido branco (1,13 g, 60%).

[0246] Uma solução de LiEt3BH/THF (1M; 18,01 mL, 18,01 mmol) foi adicionada gota a gota a uma solução gelada (4°C, banho de gelo) de 2',3’-desidro-2-fluoroadenosina (1,13 g, 4,18 mmol) em DMSO/THF anidro (1/10, 15 mL) sob uma atmosfera de argônio. Agitação foi continuada a 4°C durante 1 h e em temperatura ambiente de um dia para o outro (16 h). A mistura de reação foi cuidadosamente acidificada (AcOH a 5%/H2O), purgada com N2 durante 1 h (sob o exaustor de fumaça) para remover o trietilborano pirofórico e evaporada. O resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica (MeOH a 3-18% em DCM) para proporcionar 3’-desoxi-2-fluoroadenosina como um pó branco (7,12 g, 77%).

[0247] 19F RMN (470 MHz, DMSO-d6): δF -52,19, 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δH 8,34 (s, 1H, H8), 7,80 (br s, 2H, NH2), 5,78 (d, J = 2,25 Hz, 1H, H1’), 5,68 (br s, 1H, OH- 2'), 5,01 (br s, 1H, OH-5'), 4,55-4,51 (m, 1H, H2'), 4,39-4,32 (m, 1H, H4’), 3,73-3,76 (m, 1H, H5'), 3,56-3,50 (m, 1H, H5'), 2,26-2,18 (m, 1H, H3’), 1,94-1,85 (m, 1H, H3’). 13C RMN (125 MHz, DMSO-d6) δC 158,51 (d, 1JC-F = 202,7 Hz, C2), 157,55 (d, 3JC-F = 21,2 Hz, C6), 150,11 (d, 3JC-F = 20,3 Hz, C4), 139,22 (d, 6JC-F = 2,2 Hz, C8), 117,37 (d, 4JC-F = 4,1 Hz, C5), 90,67 (C1’), 80,90 (C4’), 74,73 (C2'), 62,35 (C5'), 33,89 (C3’).

Preparação de 3’-desoxi-2-metoxiadenosina:

[0248] Uma solução de H2O/CH3CN (1:9; 1,4 mL) e, então, α-AIBBr (4,10 mL, 28,05 mmol) foram adicionados sequencialmente a uma suspensão de 2-fluoroadenosina seca (2,0 g, 7,01 mmol) em CH3CN anidro (50 mL) e a agitação foi continuada em temperatura ambiente (20°C). Após 1 h, solução saturada de NaHCO3 foi adicionada cuidadosamente e a solução foi extraída com EtOAc (2 x 100 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salina (1 x 50 mL). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 mL) e a fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para proporcionar uma goma branca. A mistura bruta foi dissolvida com MeOH anidro (50 mL) e agitada durante 1 h com 60 mL de resina Amberlite (2 x OH-) (previamente bem lavada com MeOH anidro). A solução foi, então, filtrada e a resina cuidadosamente lavada com THF. Evaporação do filtrado combinado e cristalização do resíduo a partir de EtOH proporcionou 2',3’- desidro-2-metoxiadenosina como um sólido branco (1,57 g, 84%).

[0249] Uma solução de LiEt3BH (solução a 1M em THF; 8,53 mL, 8,53 mmol) foi adicionada gota a gota a uma solução gelada (4°C) de 2',3’-desidro-2-metoxiadenosina (762 mg, 2,84 mmol) em DMSO/THF anidro (1/10, 15 mL) sob uma atmosfera de argônio. Agitação foi continuada a 4°C durante 1 h e em temperatura ambiente de um dia para o outro (16 h). A mistura de reação foi cuidadosamente acidificada (AcOH a 5%/H2O), purgada com N2 durante 1 h (sob o exaustor de fumaça) para remover o trietilborano pirofórico e evaporada. O resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica (MeOH a 3-17% em DCM) para proporcionar 3’-desoxi-2-metoxiadenosina como um pó branco (650 mg, 81%).

[0250] 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δH 8,20 (s, 1H, H8), 5,90 (d, J = 2,4 Hz, 1H, H1’), 4,75-4,71 (m, 1H, H2'), 4,544,48 (m, 1H, H4’), 3,91 (dd, J = 12,3, 2,5 Hz, 1H, H5'), 3,69 (dd, J = 12,30, 4,0 Hz, 1H, H5'), 3,37 (s, 3H, OCH3), 2,43-2,35 (m, 1H, H3’), 2,08-2,02 (m, 1H, H3’). 13C RMN (125 MHz, CD3OD) δC 163,68 (C2), 158,12 (C6), 151,94 (C4), 139,71 (C8), 116,64 (C5), 93,36 (C1’), 82,53 (C4’), 76,59 (C2'), 64,24 (C5'), 55,29 (OCH3), 34,81 (C3’).

[0251] Fosforocloridratos foram preparados por meio de métodos publicados a partir de fosforodicloridratos de arila e cloridratos de éster de aminoácido. adenosina-5'-O-[fenil(benziloxi-L-alaninil)] fosfato A

[0252] Composto A foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 3’-desoxiadenosina (50 mg, 0,20 mmol), N-metilimidazol (80 μL, 1,0 mmol) e fenil(benziloxi- L-alaninil) fosforocloridrato (212 mg, 0,6 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 7/93) com gradiente de CH2Cl2/MeOH (100% a 95:5%) e TLC preparativa (1000 μm, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto do título como um sólido branco (31 mg, 28%).

[0253] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,26 (s, 0,5H, H8), 8,24 (s, 0,5H, H8), 8,22 (s, 0,5H, H2), 8,21 (s, 0,5H, H2), 7,34-7,25 (m, 7H, Ar), 7,21-7,13 (m, 3H, Ar), 6,01 (d, J = 2,9 Hz, 1H, H1’), 6,00 (d, J = 2,9 Hz, 1H, H1’), 5,15-5,04 (m, 2H, OCH2Ph), 4,73-4,63 (m, 2H, H2', H4’), 4,43-4,35 (m, 1H, H5'), 4,27-4,20 (m, 1H, H5'), 4,03-3,91 (m, 1H, CHCH3), 2,35-2,28 (m, 1H, H3’), 2,09-2,02 (m, 1H, H3’), 1,32 (d, J = 7,4 Hz, 1,5 H, CHCH3), 1,28 (d, J = 7,4 Hz, 1,5 H, CHCH3).

[0254] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 174,84 (d, 3JC-P = 4,5 Hz, C=O), 174,63 (d, 3JC-P = 4,5 Hz, C=O), 157,32 (C6), 157,31 (C6), 153,86 (C2), 153,84 (C2), 152,13 (C4), 152,07 (C4), 150,20 (C-Ar), 150,18 (C-Ar), 140,47 (C8), 137,26 (C Ar), 137,19 (C-Ar), 130,76 (CH-Ar), 130,74 (CH-Ar), 129,57 (CH-Ar), 129,32 (CH-Ar), 129,31 (CH-Ar), 129,29 (CH-Ar), 129,26 (CH-Ar), 126,16 (CH-Ar), 126,14 (CH-Ar), 121,46 (d, 3JC-P = 4,7 Hz, CH-Ar), 121,38 (d, 3JC-P = 4,7 Hz, CH-Ar) 120,54 (C5), 120,53 (C5), 93,24 (C1’), 93,18 (C1’), 80,43 (d, 3JC-P = 3,6 Hz, C4’), 80,36 (d, 3JC-P = 3,6 Hz, C4’), 76,62 (C2'), 68,62 (d, 2JC-P = 5,3 Hz, C5'), 68,30 (d, 2JC-P = 5,3 Hz, C5'), 67,95 (OCH2Ph), 67,92 (OCH2Ph), 51,74 (CHCH3), 51,60 (CHCH3), 34,91 (C3’), 34,70 (C3’), 20,45 (d, 3JC-P = 7,0 Hz, CHCH3), 20,28 (d, 3JC-P = 7,0 Hz, CHCH3).

[0255] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 3,9, 3,7.

[0256] MS (ES+) m/z: Encontrado: 569,2 (M + H+), 591,2 (M + Na+), 1159,4 (2M + Na+) C26H29N6O7P requerido: (M) 568,2,

[0257] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 14,02 min. e tR 14,26 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi)fosforil) amino)propanoato de (2S)-benzila B

[0258] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (240 μL, 3,0 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(naftalen-1-iloxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)- benzila (727 mg, 1,8 mmol) em THF anidro (10 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 3’-deoxiadenosina (150 mg, 0,6 mmol) em THF anidro e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (2000 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (45 mg, 12%).

[0259] MS (ES+) m/z: Encontrado: 619,2 (M + H+), 641,2 (M + Na+), 1259,4 (2M + Na+) C30H31N6O7P requerido: (M) 618,58.

[0260] 31P RMN (202 MHz, CH3OD): δP 4,3 (s), 4,1 (s).

[0261] 1H RMN (500 MHz, CH3OD): δH 8,24 (s, 0,5H, H8), 8,22 (s, 0,5H, H8), 8,20 (s, 0,5H, H2), 8,19 (s, 0,5H, H2), 8,14-8,09 (m, 1H, Ar), 7,89-7,85 (m, 1H, Ar), 7,70-7,67 (m, 1H, Ar), 7,53-7,42 (m, 3H, Ar), 7,39-7,34 (m, 1H, Ar), 7,317,25 (m, 5H, Ar), 5,99 (d, J = 2,0 Hz, 0,5H, H1’), 5,98 (d, J = 2,0 Hz, 0,5H, H1’), 5,10-5,01 (m, 2H, CH2Ph), 4,72-4,61 (m, 2H, H2', H4’), 4,47-4,40 (m, 1H, H5'), 4,33-4,24 (m, 1H, H5'), 4,09-3,98 (m, 1H, CH ala) 2,35-2,26 (m, 1H, H3’), 2,071,98 (m, 1H, H3’), 1,30-1,24 (m, 3H, CH3).

[0262] 13C RMN (125 MHz, CH3OD): δC 174,85 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 174,56 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 157,33 (C6), 157,31 (C6), 153,87 (C2), 153,85 (C2), 150,24 (C4), 150,23 (C4), 147,91 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, ‘ipso’ Nap), 147,95, (d, 3JC- P = 7,5 Hz, ‘ipso’ Nap), 140,56 (C8), 140,50 (C8), 137,22 (C-Ar), 137,17 (C-Ar), 136,28 (C-Ar), 129,55 (CH-Ar), 129,53 (CH-Ar), 129,30 (CH-Ar), 129,25 (CH-Ar), 128,88 (CH-Ar), 128,82 (CH-Ar), 127,91 (d, 2JC-P = 6,25 Hz, C-Ar), 127,83 (d, 2JC-P = 6,25 Hz, C-Ar), 127,77 (CH-Ar), 127,75 (CH-Ar), 127,49 (CH-Ar), 127,45 (CH-Ar), 126,48 (CH-Ar), 126,47 (CH-Ar), 126,02 (CH-Ar), 125,97 (CH-Ar), 122,77 (CH-Ar), 122,63 (CHAr), 120,58 (C5), 120,53 (C5), 116,35 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 116,15 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 93,22 (C1’), 93,20 (C1’), 80,30 (d, 3JC-P = 2,75 Hz, C4’), 80,24 (d, 3JC-P = 2,75 Hz, C4’), 76,51 (C2'), 76,44 (C2'), 68,87 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 68,64 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 67,93 (OCH2Ph), 51,82 (CH ala), 51,73 (CH ala), 35,01 (C-3’), 34,76 (C3’), 20,41 (d, 3JC-P = 6,7 Hz, CH3 ala), 20,22 (d, 3JC-P = 6,7, CH3 ala).

[0263] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 200 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 16,36 min. e tR 16,60 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9—il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)acetato de Benzila C

[0264] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (80 μL, 1,0 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(fenoxi)fosforil)amino)acetato de benzila (204 mg, 0,6 mmol) em THF anidro (2 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 3’-desoxiadenosina (50 mg, 0,20 mmol) em THF anidro e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (500 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (21 mg, 19 %).

[0265] (ES+) m/z, encontrado: 555,2 (M + H+), 577,2 (M + Na+), 1131,4 (2M + Na+). C25H27N6O7P requerido: (M) 554,2.

[0266] 31P RMN (202 MHz, CH3OD) δ 5,1, 4,9,

[0267] 1H RMN (500 MHz, CH3OD) δ 8,27 (s, 0,5H, H8), 8,24 (s, 0,5H, H8), 8,22 (s, 0,5H, H2), 8,21 (s, 0,5H, H2), 7,37-7,26 (m, 7H, Ph), 7,22-7,13 (m, 3H, Ph), 6,02 (d, J = 1,8 Hz, 0,5H, H1’), 6,00 (d, J = 1,8 Hz, 0,5H, H1’), 5,145,11 (m, 2H, OCH2Ph), 4,73-4,64 (m, 2H, H2', H4’), 4,50-4,39 (m, 1H, H5'), 4,36-4,24 (m, 1H, H5'), 3,53-3,71 (m, 2H, CH2 gly), 2,39-2,25 (m, 1H, H3’), 2,13-2,02 (m, 1H, H3’).

[0268] 13C RMN (125 MHz, CH3OD) δ 172,30 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 172,27 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 157,34 (C6), 157,32 (C6), 153,88 (C2), 153,87 (C2), 152,08 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, C Ar), 152,05 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, C-Ar), 150,20 (C4), 150,19 (C4), 140,52 (C8), 140,42 (C8), 137,15 (C-Ar), 130,79 (CH Ar), 129,57 (CH-Ar), 129,55 (CH-Ar), 129,35 (CH-Ar), 129,34 (CH-Ar), 129,33 (CH-Ar), 126,22 (CH-Ar), 121,44 (d, JC-P = 3,7 Hz, CH-Ar), 121,40 (d, JC-P = 3,7 Hz, CH-Ar), 120,51 (C5), 120,49 (C5), 93,19, 93,14 (C1’), 80,46 (d, 3JC-P = 4,60 Hz, C4’), 80,39 (d, 3JC-P = 4,60, C4’), 76,66 (C2'), 68,68 (d, 2JC-P = 5,42 Hz, C5'), 68,24 (d, 2JC-P = 5,42 Hz, C5'), 67,95 (OCH2Ph), 67,93 (OCH2Ph), 43,90 (CH2 gly), 43,83 (CH2 gly), 34,83 (C3’), 34,54 (C3’).

[0269] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 200 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 13,63 min. e tR 13,41 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi)fosforil) amino)-4-metilpentanoato de (2S)-pentila D

[0270] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (76 μL, 0,95 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(naftalen-1-iloxi)fosforil)amino)-4-metilpentanoato de (2S)-pentila (250 mg, 0,6 mmol) em THF anidro (1 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 3’-desoxiadenosina (48 mg, 19 mmol) em THF anidro (5 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 5/95) e TLC preparativa (1000 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 4/96) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (27 mg, 22 %).

[0271] MS (ES+) m/z: Encontrado: 641,3 (M + H+), 663,3 (M + Na+), 1303,6 (2M + Na+) C31H41N6O7P requerido: (M) 640,3.

[0272] 31P RMN (202 MHz, CH3OD) δ 4,64, 4,37.

[0273] 1H RMN (500 MHz, CH3OD) δ 8,28 (s, 0,5H, H-8), 8,25 (s, 0,5H, H-8), 8,21 (s, 0,5H, H-2), 8,20 (s, 0,5H, H- 2), 8,17-8,12 (m, 1H, Nap), 7,88-7,83 (m, 1H, Nap), 7,69-7,66 (m, 1H, Nap), 7,54-7,42 (m, 3H, Nap), 7,40-7,35 (m, 1H, Nap), 7,31-7,26 (m, 5H, Ar), 6,01 (d, J = 2,1 Hz, 0,5H, H1’), 6,00 (d, J = 2,1 Hz, 0,5H, H1’), 4,47-4,67 (m, 2H, H2', H4’), 4,55-4,44 (m, 1H, H5'), 4,43-4,31 (m, 1H, H5'), 4,00-3,87 (m, 3H, CH leu, CH2 Pen), 2,44-2,30 (m, 1H, H3’), 2,14-2,04 (m, 1H, H3’), 1,66-1,39 (m, 5H, CH2CH leu, CH2 Pen), 1,1,281,21 (m, 4H, CH2CH2 Pen), 0,86-0,81 (m, 3H, CH3 Pen), 0,810,68 (m, 6H, (CH3)2 leu).

[0274] 13C RMN (125 MHz, CH3OD) δ 175,42 (d, 3JC-P = 2,5 Hz, C=O), 175,04 (d, 3JC-P = 2,5 Hz, C=O), 157,32 (C6), 153,87 (C2), 153,86 (C2), 150,23 (C4), 147,97 (d, 3JC-P = 6,2 Hz, ‘ipso’ Nap), 140,55 (C8), 136,30 (C-Ar), 136,29 (C-Ar), 128,89 (CH-Ar), 128,84 (CH-Ar), 127,95 (C-Ar), 127,91 (C-Ar), 127,84 (C-Ar), 127,78 (CH-Ar), 127,76 (CH-Ar), 127,46 (CH-Ar), 126,50 (C-Ar), 126,48 (C-Ar), 126,46 (C-Ar), 126,01 (CH-Ar), 125,91 (CH-Ar), 122,80 (CH-Ar), 122,70 (CH-Ar), 120,58 (C5), 120,56 (C5), 116,40 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, CH-Ar), 116,01 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, CH-Ar), 93,31 (C1’), 93,27 (C1’), 80,35 (d, 3JC-P = 3,5 Hz, C4’), 80,29 (d, 3JC-P = 3,5 Hz, C4’), 76,54 (C2'), 76,50 (C2'), 69,07 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C5'), 68,85 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C5'), 66,33 (CH2 Pent), 66,32 (CH2 Pent), 54,81 (CH leu), 54,71 (CH leu), 44,22 (d, 3JC-P = 7,6 Hz, CH2 leu), 43,93 (d, 3JC-P = 7,6 Hz, CH2 leu), 35,15 (C3’), 34,86 (C3’), 29,32 (CH2 pent), 29,30 (CH2 Pent), 29,11 (CH2 pent), 25,67 (CH leu), 25,45 (CH leu), 23,30 (CH2 pent), 23,12 (CH3 leu), 23,02 (CH3 leu), 22,04 (CH3 leu), 21,78 (CH3 leu), 14,28 (CH3 pent).

[0275] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 200 nm, mostrou um pico dos dois diastereoisômeros em sobreposição com tR 20,84 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9—il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)-metoxi)(naftalen-1-iloxi)fosforil) amino)-2-metilpropanoato de metila E

[0276] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (24 μL, 3,0 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(naftalen-1-iloxi)fosforil)amino)-2-metilpropanoato de metila (612 mg, 1,8 mmol) em THF anidro (1 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 3’-deoxiadenosina (150 mg, 0,6 mmol) em THF anidro (15 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 0/100 a 7/93) e TLC preparativa (1000 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 4/96) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (20 mg, 6%).

[0277] MS (ES+) m/z: Encontrado: 557,2 (M + H+), 579,2 (M + Na+), 1135,4 (2M + Na+) C25H29N6O7P requerido: (M) 556,51,

[0278] 31P RMN (202 MHz, CH3OD) δ 2,73,

[0279] 1H RMN (500 MHz, CH3OD) δ 8,28 (s, 0,5H, H8), 8,25 (s, 0,5H, H8), 8,21 (s, 0,5H, H2), 8,19 (s, 0,5H, H2), 8,18-8,14 (m, 1H, Nap), 7,90-7,84 (m, 1H, Nap), 7,71-7,66 (m, 1H, Nap), 7,53-7,47 (m, 3H, Nap), 7,41-7,35 (m, 1H, Nap), 6,03 (d, J = 2,1 Hz, 0,5H, H1’), 5,99 (d, J = 2,1 Hz, 0,5H, H1’), 4,76-4,67 (m, 2H, H2', H4’), 4,52-4,44 (m, 1H, H5'), 4,42-4,33 (m, 1H, H5'), 3,65 (s, 1,5H, OCH3), 3,64 (s, 1,5H, OCH3), 2,48-2,41 (m, 0,5H, H3’), 2,37-2,30 (m, 0,5H, H3’), 2,15-2,09 (m, 0,5H, H3’), 2,08-2,02 (m, 0,5H, H3’), 1,47-1,44 (m, 6H, CH3).

[0280] 13C RMN (125 MHz, CH3OD) δ 177,25 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 157,53 (C6), 157,51 (C6), 153,86 (C2), 150,28 (C4), 150,25 (C4), 148,06 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, ‘ipso’ Nap), 148,04 (d, 3JC-P = 7,5, ‘ipso’ Nap), 140,67 (C8), 140,60 (C8), 136,28 (C-Ar), 136,27 (C-Ar), 128,82 (CH-Ar), 128,80 (CH-Ar), 127,93 (d, 2JC-P = 6,25 Hz, C-Ar), 127,92 (d, 2 JC-P = 6,25 Hz, C-Ar), 127,71 (CH-Ar), 127,69 (CH-Ar), 127,32 (CH-Ar), 126,44 (CH-Ar), 125,84 (CH-Ar), 122,93 (CH-Ar), 120,56 (C5), 120,50 (C5), 116,38 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 116,36 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 93,25 (C1’), 80,40 (d, 3JC-P = 8,0 Hz, C4’), 80,33 (d, 3JC-P = 8,0 Hz, C4’), 76,57 (C2'), 76,43 (C2'), 68,99 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C5'), 68,84 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C5'), 53,01 (OCH3), 35,22 (C-3’), 34,90 (C3’), 27,85 (d, 3JC-P = 6,0 Hz, CH3), 27,80 (d, 3JC-P = 6,0, CH3), 27,60 (d, 3JC-P = 6,0, CH3), 27,56 (d, 3JC-P = 6,0, CH3).

[0281] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou dois picos com tR 16,51 min, tR 16,75 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(2-(3-etoxi-3-oxopropil) fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila F

[0282] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (32 μL, 4,2 mmol) e uma solução de 2-((cloro(2- (3-etoxi-3-oxopropil)fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila (1,14 g, 2,5 mmol) em THF anidro (2 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 3’-desoxiadenosina (210 mg, 0,84 mmol) em THF anidro (10 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CHCl3 a 0/100 a 8/92) e TLC preparativa (1000 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (123 mg, rendimento = 22%).

[0283] MS (ES+) m/z: Encontrado: 669,3 (M + H+), 691,3 (M + Na+), C31H37N6O9P requerido: (M) 668,63.

[0284] 31P RMN (202 MHz, CH3OD): δP 3,95, 3,65.

[0285] 1H RMN (500 MHz, CH3OD): δH 8,25 (s, 0,5H, H8), 8,21 (s, 1H, H8, H2), 8,20 (s, 0,5H, H2), 7,35-7,29 (m, 6H, Ph), 7,25-7,21 (m, 1H, Ph), 7,16-7,07 (m, 2H, Ar), 6,00 (d, J = 1,9 Hz, 0,5H, H1’), 5,98 (d, J = 1,9 Hz, 0,5H, H1’), 5,17-5,05 (m, 2H, OCH2Ph), 4,76-4,73 (m, 0,5H, H2'), 4,70-4,59 (m, 1,5H, H2', H4’), 4,45-4,34 (m, 1H, H5'), 4,30-4,22 (m, 1H, H5'), 4,08-3,96 (m, 3H, CH2CH3, CH ala), 2,98-2,92 (m, 2H, CH2CH2), 2,62-2,56 (m, 2H, CH2CH2), 2,40-2,29 (m, 1H, H3’), 2,11-2,03 (m, 1H, H3’), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 1,5 H, CH3 ala), 1,33 (d, J = 6,9 Hz, 1,5 H, CH3 ala), 1,17 (t, J = 7,0 Hz, 1,5 H, CH2CH3), 1,16 (t, J = 7,0 Hz, 1,5 H, CH2CH3).

[0286] 13C RMN (125 MHz, CH3OD): δC 174,82 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 174,62 (C=O), 174,58 (C=O), 174,55 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 157,34 (C6), 157,32 (C6), 153,86 (C2), 153,84 (C2), 150,48 (d, JC-P = 2,5 Hz, C-Ar), 150,44 (C4), 150,22 (d, JC-P = 2,5 Hz, C-Ar), 140,49 (C8), 137,29 (C-Ar), 137,21 (C-Ar), 133,09 (d, J = 7,5 Hz, C-Ar), 132,94 (d, J = 7,5 Hz, C-Ar), 131,62 (CH-Ar), 131,59 (CH-Ar), 129,58 (CH-Ar), 129,34 (CH-Ar), 129,31 (CH-Ar), 129,28 (CH-Ar), 128,70 (d, J = 5,0 Hz, CH-Ar), 128,69 (d, J = 5,0 Hz, CH-Ar), 126,18 (CH-Ar), 121,02 (d, J = 2,5 Hz, CH-Ar), 120,49 (d, J = 2,5 Hz, CH-Ar), 120,58 (C5), 93,28 (C1’), 93,24 (C1’), 80,32 (d, 3JC-P = 8,7 Hz, C4’), 76,57 (C2'), 68,86 (d, 2JC-P = 5,0 Hz, C5'), 68,53 (d, 2JC-P = 5,0 Hz, C5'), 67,98 (OCH2Ph), 67,95 (OCH2Ph), 61,57 (CH2CH3), 51,76 (CH ala), 51,65 (CH ala), 35,37 (CH2CH2), 35,30 (CH2CH2), 35,08 (C3’), 34,85 (C3’), 26,77 (CH2CH2), 26,72 (CH2CH2), 20,55 (d, 3JC-P = 6,2 Hz, CH3 ala), 20,33 (d, 3JC-P = 6,2 Hz, CH3 ala), 14,53 (CH2CH3).

[0287] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 245 nm, mostrou um pico com tR 15,99 min. 2-(((((2R,3R,5S)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-(hidroxi metil)tetra-hidro-furan-3-il)oxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-benzila G

[0288] Usando o Procedimento Geral 3 acima, 3’- deoxiadenosina (50 mg, 0,20 mmol) foi suspensa em THF anidro (5 mL) e tBuMgCl (solução a 1,0 M em THF, 0,22 mL, 0,22 mmol) foi adicionada gota a gota em temperatura ambiente. Uma solução de 2-((cloro(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila (212 mg, 0,6 mmol) em THF anidro (2 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 8/92) e TLC preparativa (500 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 = 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (6 mg, 5%).

[0289] MS (ES+) m/z: Encontrado: 569,2 (M + H+), 591,2 (M + Na+), 1159,4 (2M + Na+) C26H29N6O7P requerido: (M) 568,2.

[0290] 31P RMN (202 MHz, CH3OD): δP 2,44 (s), 2,92 (s).

[0291] 1H RMN (500 MHz, CH3OD): δH 8,41 (s, 0,5 H, H8), 8,28 (s, 0,5 H, H8), 8,19 (s, 0,5H, H2), 8,18 (s, 0,5H, H2), 7,39-7,30 (m, 4H, Ar), 7,28-7,18 (m, 4H, Ar), 7,17-7,11 (m, 1H, Ar), 7,08-7,03 (m, 1H, Ar), 6,23 (d, J = 2,0 Hz, 0,5H, H1’), 6,08 (d, J = 3,4 Hz, 0,5H, H1’), 5,52-5,43 (m, 1H, C2'), 5,19-5,12 (m, 1H, CH2Ph), 5,07-4,95 (m, 1H, CH2Ph), 4,48-4,42 (m, 1H, H4’), 4,05-3,97 (m, 1H, CH ala), 3,95-3,87 (m, 1H, H5'), 3,69-3,61 (m, 1H, H5'), 2,59-2,45 (m, 1H, H3’), 2,31-2,23 (m, 1H, H3’), 1,36-1,27 (m, 3H, CH3 ala).

[0292] 13C RMN (125 MHz, CH3OH): δC 174,76 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 174,52 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 157,44 (C6), 153,76 (C2), 151,93 (C4), 150,06 (C-Ar), 149,93 (C-Ar), 141,38 (C8), 141,18 (C8), 137,33 (C-Ar), 137,10 (C-Ar), 130,69 (CH-Ar), 130,79 (CH-Ar), 129,61 (CH-Ar), 129,51 (CHAr), 129,40 (CH-Ar), 129,30 (CH-Ar), 129,23 (CH-Ar), 126,33 (CH-Ar), 126,16 (CH-Ar), 121,53 (d, 3JC-P = 4,5 Hz, CH-Ar), 121,20 (d, 3JC-P = 4,5 H, CH-Ar), 120,76 (C5), 91,56 (d, 3JC- P = 7,7 Hz, C1’), 91,45 (d, 3JC-P = 7,7 Hz, C1’), 82,78 (C4’), 82,28 (C4’), 81,83 (d, 2JC-P = 4,7 Hz, C2'), 80,96 (2 x d, 2JC-P = 4,7 Hz, C2'), 67,95 (OCH2Ph), 67,92 (OCH2Ph), 64,13 (C5'), 63,59 (C5'), 51,88 (CH ala), 51,75 (CH ala), 33,75 (d, 3JC-P = 3,0 Hz, C3’), 33,59 (d, 3JC-P = 3,0 Hz, C3’), 20,33 (d, 3JC-P = 7,1 CH3 ala), 20,18 (d, 3JC-P = 7,1 CH3 ala).

[0293] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3OH de 90/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 22,16 min. e tR 22,43 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino—9H-purin-9-il)-4-((((1- (benziloxi)-l-oxopropan-2-il)amino)(fenoxi)fosforil)oxi) tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)-amino) propanoato de Benzila H

[0294] Usando o Procedimento Geral 3 acima, 3’- desoxiadenosina (50 mg, 0,20 mmol) foi suspensa em THF anidro (5 mL) e tBuMgCl (solução a 1,0 M em THF, 0,22 mL, 0,22 mmol) foi adicionada gota a gota em temperatura ambiente. Uma solução de 2-((cloro(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila (212 mg, 0,6 mmol) em THF anidro (2 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 8/92) e TLC preparativa (500 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (19 mg, rendimento = 11%).

[0295] MS (ES+) m/z, encontrado: 886,3 (M + H+), 1771,6 (2M + H+), 751,2 (molécula sem nucleobase M). C42H45N7O11P2 requerido: (M+) 885,3.

[0296] 31P RMN (202 MHz, CH3OD): δP 3,98, 3,88, 3,59, 3,12, 3,05, 2,45, 2,32.

[0297] 1H RMN (500 MHz, CH3OD): δH 8,24-8,13 (m, 2H, H8, H2), 7,39-7,08 (m, 20H, Ph), 6,27-6,23 (m, 0,5H, H1’), 6,16-6,13 (m, 0,5H, H1’), 5,61-5,48 (m, 1H, H2'), 5,17-4,91 (m, 4H, CH2Ph), 4,57-4,49 (m, 1H, H4’), 4,41-4,29 (m, 1H, H5'), 4,25-4,15 (m, 1H, H5'), 4,10-4,01 (m, 1H, CH ala), 3,99-3,89 (m, 1H, CH ala), 2,57-2,41 (m, 1H, H3’), 2,28-2,17 (m, 1H, H3’), 1,38-1,23 (m, 6H, CH3 ala).

[0298] 13C RMN (125 MHz, CH3OD): δC 174,88 (C=O), 174,83 (C=O), 174,79 (C=O), 174,73 (C=O), 174,61 (C=O), 174,57 (C=O), 174,53 (C=O), 157,36 (C6), 157,34 (C6), 157,32(C6), 157,29 (C6), 154,04 (C2), 154,01 (C2), 153,97 (C2), 153,94 (C2), 152,09 (C4), 152,04 (C4), 152,02 (C4), 151,97 (C4), 150,31 (C-Ar), 150,29 (C-Ar), 150,16 (C-Ar), 140,98 (C8), 140,91 (C8), 140,81 (C8), 137,31 (C-Ar), 137,28 (C-Ar), 137,22 (C-Ar), 137,09 (C-Ar), 130,86 (CH-Ar), 130,78 (CH Ar), 130,77 (CH-Ar), 129,65 (CH-Ar), 129,61 (CH-Ar), 129,58 (CH-Ar), 129,55 (CH-Ar), 129,44 (CH-Ar), 129,42 (CH-Ar), 129,38 (CH-Ar), 129,34 (CH-Ar), 129,32 (CH-Ar), 129,30 (CHAr), 129,28 (CH-Ar), 129,23 (CH-Ar), 129,21 (CH-Ar), 12,42 (CH-Ar), 126,23 (CH-Ar), 126,20 (CH-Ar), 126,17 (CH-Ar), 121,65 (CH-Ar), 121,63 (CH-Ar), 121,61 (CH-Ar), 121,59 (CHAr), 121,52 (CH-Ar), 121,50 (CH-Ar), 121,47 (CH-Ar), 121,46 (CH-Ar), 121,40 (CH-Ar), 121,39 (CH-Ar), 121,36 (CH-Ar), 121,35 (CH-Ar), 121,30 (CH-Ar), 121,28 (CH-Ar), 121,26 (CHAr), 121,24 (CH-Ar), 120,61 (C5), 120,57 (C5), 120,56 (C5), 120,54 (C5), 91,56 (C1’), 91,51 (C1’), 91,45 (C1’), 91,25 (C1’), 91,20 (C1’), 81,84 (C2'), 81,82 (C2'), 81,79 (C2'), 81,27 (C2'), 81,22 (C2'), 81,18 (C2'), 80,49 (C4’), 80,43 (C4’), 80,06 (C4’), 79,99 (C4’), 68,29 (C5', OCH2Ph), 68,25 (C5', OCH2Ph), 68,00 (C5', OCH2Ph), 67,96 (C5', OCH2Ph), 67,94 (C5', OCH2Ph), 67,90 (C5', OCH2Ph), 67,71 (C5', OCH2Ph), 67,67 (C5', OCH2Ph), 51,91 (CH ala), 51,74 (CH ala), 51,70 (CH ala), 51,59 (CH ala), 34,22 (C3’), 34,20 (C3’), 34,16 (C3’), 33,97 (C3’), 33,94 (C3’), 33,91 (C3’), 20,44 (CH3 ala), 20,43 (CH3 ala), 20,39 (CH3 ala), 20,29 (CH3 ala), 20,27 (CH3 ala), 20,24 (CH3 ala), 20,21 (CH3 ala), 20,19 (CH3 ala).

[0299] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou um pico amplo com tR 15,97 min. 2-(((((2R,3R,5S)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- (hidroximetil)tetra-hidro-furan-3-il)oxi)(naftalen-1-iloxi) fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila I

[0300] Usando o Procedimento Geral 3 acima, 3’- Deoxiadenosina (50 mg, 0,20 mmol) foi suspensa em THF anidro (5 mL) e tBuMgCl (solução a 1,0 M em THF, 0,3 mL, 0,3 mmol) foi adicionada gota a gota em temperatura ambiente. Uma solução de 2-((cloro(naftalen-1-iloxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-benzila (323 mg, 0,8 mmol) em THF anidro (2 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (500 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (14 mg, 11 %).

[0301] (ES+) m/z, encontrado: 619,2 (M + H+), 641,2 (M + Na+), 1259,4 (2M + Na+). C30H31N6O7P requerido: (M) 618,20.

[0302] 31P RMN (202 MHz, CH3OD): δP 3,27 (s), 2,75 (s).

[0303] 1H RMN (500 MHz, CH3OD): δH 8,37 (s, 1H, H8), 8,18 (s, 1H, H8), 8,14 (s, 1H, H2), 8,13-8,11 (m, 0,5 H, Nap) 8,11 (s, 1H, H2), 7,94-7,90 (m, 0,5 H, Ar), 7,90-7,87 (m, 0,5 H, Ar), 7,86-7,82 (m, 0,5 H, Ar), 7,74-7,70 (m, 0,5 H, Ar), 7,66-7,61 (m, 0,5 H, Ar), 7,57-7,47 (m, 1,5 H, Ar), 7,46-7,37 (m, 2,5 H, Ar), 7,34-7,27 (m, 4 H, Ar), 7,25-7,17 (m, 1 H, Ar), 6,19 (d, J = 2,4 Hz, 0,5H, H1’), 6,04 (d, J = 2,4 Hz, 0,5H, H1’), 5,60-5,54 (m, 0,5H, H2'), 5,50-5,42 (m, 0,5H, H2'), 5,16-4,99 (m, 2H, OCH2Ph), 4,46-4,40 (m, 0,5H, H4’), 4,36-4,30 (m, 0,5H, H4’), 4,13-4,04 (m, 1H, CH ala), 3,90-3,83 (m, 1H, H5'), 3,64-3,56 (m, 1H, H5'), 2,61-2,54 (m, 0,5H, H3’), 2,49-2,41 (m, 0,5H, H3’), 2,35-2,27 (m, 0,5H, H3’), 2,22-2,16 (m, 0,5H, H3’), 1,35-1,24 (m, 3H, CH3 ala).

[0304] 13C RMN (125 MHz, CH3OH): δC 174,52 (C=O), 174,49 (C=O), 157,27 (C6), 153,58 (C2), 149,97 (C4), 149,93 (C-4), 147,70 (d, 3JC-P = 7,5, ‘ipso’ Nap), 147,48 (d, 3JC-P = 7,5, ‘ipso’ Nap), 141,36 (C8), 141,19 (C8), 137,25 (C-Ar), 137,05 (C-Ar), 136,31 (C-Ar), 136,20 (C-Ar), 129,58 (CH-Ar), 129,48 (CH-Ar), 129,37 (CH-Ar), 129,26 (CH-Ar), 129,22 (CH-Ar), 128,88 (CH-Ar), 127,84 (CH-Ar), 127,75 (CH-Ar), 127,49 (CHAr), 127,44 (CH-Ar), 126,48 (CH-Ar), 126,39 (CH-Ar), 126,26 (CH-Ar), 126,05 (CH-Ar), 122,76 (CH-Ar), 122,38 (CH-Ar), 120,68 (C5), 120,61 (C5), 116,64 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 116,13 (d, 3JC-P = 3,75, CH-Ar), 91,60 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, C1’), 91,43 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, C1’), 82,74 (C4’), 82,27 (C4’), 81,99 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C2'), 81,12 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C2'), 67,97 (OCH2Ph), 67,94 (OCH2Ph), 64,16 (C5'), 63,51 (C5'), 51,96 (CH ala), 51,89 (CH ala), 33,89 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, CH3 ala), 33,63 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, CH3 ala).

[0305] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3OH de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 200 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 24,84 min. e tR 25,43 min. 2-[({[5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxioxolan-2-il] metoxi}({[1-(benziloxi)-1-oxopropan-2-il]amino})fosforil) amino]propanoato de Benzila J

[0306] Usando o Procedimento Geral 2 acima, 3’- deoxiadenosina (200 mg, 0,80 mmol) foi suspensa em (CH3)3PO3 (5 mL) e POCl3 (75 μL, 0,80 mmol) foi adicionada gota a gota a -5°C. Deixou-se a mistura de reação atingir a temperatura ambiente e sob agitação durante 4 horas. Uma solução de 4- metilbenzenossulfonato de (S)-1-(benziloxi)-1-oxopropan-2- amínio (1,4 g, 4,0 mmol) dissolvida em CH2Cl2 anidro (5 mL) foi adicionada, seguido por di-isopropil etil amina (1,4 mL, 8,0 mmol) a -78°C. Após agitação em temperatura ambiente durante 20 horas, água foi adicionada e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com diclorometano e a fase orgânica lavada com salina. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em coluna (eluição em gradiente de CH2Cl2/MeOH = 100/0 a 93/7) para proporcionar uma espuma branca (256 mg, 49%).

[0307] MS (ES+) m/z: Encontrado: 654,2 (M + H+), 676,2 (M + Na+), 1329,5 (2M + Na+) C30H36N7O8P requerido: (M) 653,62.

[0308] 31P RMN (202 MHz, CH3OD) δ 13,9.

[0309] 1H RMN (500 MHz, CH3OD) δ 8,28 (s, 1H, H8), 8,22 (s, 1H, H2), 7,37-7,26 (m, 10H, Ph), 6,00 (d, J = 1,9 Hz, 1H, H1’), 5,15-5,05 (m, 4H, OCH2Ph), 4,74-4,70 (m, 1H, H2'), 4,63-4,56 (m, 1H, H4’), 4,24-4,18 (m, 1H, H5'), 4,11-4,05 (m, 1H, H5'), 3,97-3,87 (m, 1H, CH ala), 2,35-2,27 (m, 1H, H3’), 2,07-2,01 (m, 1H, H3’), 1,34-1,27 (m, 3H, CH3 ala).

[0310] 13C RMN (125 MHz, CH3OD) δ 175,40 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 175,36 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 157,36 (C6), 153,91 (C2), 150,25 (C4), 140,64 (C8), 137,33 (C-Ar), 137,29 (C Ar), 129,58 (CH-Ar), 129,57 (CH-Ar), 129,33 (CH-Ar), 129,31 (CH-Ar), 129,29 (CH-Ar), 120,55 (C5), 93,18 (C1’), 80,67 (d, 3JC-P = 8,4 Hz, C4’), 76,59 (C2'), 67,90 (OCH2Ph), 67,47 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 51,14 (d, 2JC-P = 1,7 Hz, CH ala), 51,11 (d, 2JC-P = 1,7 Hz, CH ala), 35,08 (C3’), 20,77 (d, 3JC-P = 6,5 Hz, CH3 ala), 20,59 (d, 3JC-P = 6,5 Hz, CH3 ala).

[0311] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 90/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou um pico com tR 13,87 min. 2-((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-metoxi-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforilamino)propanoato de (2S)-benzila K

[0312] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (99 μL, 1,24 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(naftalen-1-iloxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)- benzila (303 mg, 0,75 mmol) em THF anidro (5 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 2-O-metil-3’- desoxiadenosina (70 mg, 0,25 mmol) em THF anidro (10 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (96 mg, 60%).

[0313] MS (ES+) m/z: Encontrado: 649,2 (M + H+) C31H33N6O8P requerido: 648,21(M).

[0314] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 4,38 (s), 4,08 (s).

[0315] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,14-8,11 (d, J = 8,0Hz, 0,5H, Ar), 8,07 (d, J = 8,0Hz, 0,5H, Ar), 8,05 (s, 0,5H, H8), 8,02 (s, 0,5H, H8), 7,82-7,80 (m, 1H, Ar), 7,61 (d, J = 7,0Hz, Ar), 7,47-7,44 (m, 4H, Ar), 7,35-7,29 (m, 2H, Ar), 7,24-7,22 (m, 3H, Ar), 5,88 (s, 1H, H1’), 4,71-4,68 (m, 1H, H4’), 4,65-6,60 (m, 1H, H2'), 4,42-4,40 (m, 1H, H5'), 4,30-4,27 (m, 1H, H5'), 4,08-3,98 (m, 1H, CH ala) 3,88 (s, 1,5H, OCH3), 3,86 (s, 1,5H, OCH3), 2,37-2,33 (m, 1H, H3’), 2,04-2,01 (m, 1H, H3’), 1,27 (d J = 7,0 Hz, 1,5H, CH3), 1,24 (d J = 7,0 Hz, 1,5H, CH3).

[0316] 13C RMN (125 MHz, CH3OD): δC 174,83 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 174,60 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 163,70 (C-2), 158,10 (C6), 151,95 (C4), 147,95 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, ‘ipso’ Nap), 147,91, (d, 3JC-P = 7,5 Hz, ‘ipso’ Nap), 139,39 (C8), 139,37 (C8), 137,12, 137,17 (C-ipso CH2Ph), 136,22 (C-Ar), 129,57, 129,54, 129,48, 129,32, 129,27, 129,12, 129,24 128,89, 128,83, (CH-Ar), 127,85 (d, 2JC-P = 6,25 Hz, C-Ar), 127,86, 127,76, 127,51, 127,48, 126,49, 126,00, 125,97, 122,73, 122,63 (CH-Ar), 116,86 (C5), 116,72 (C5), 116,29 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 116,22 (d, 3JC-P = 3,75 Hz, CH-Ar), 93,33 (C1’), 93,31(C1’), 80,24 (d, 3JC-P = 2,75 Hz, C4’), 76,29 (C2'), 76,26 (C2'), 69,09 (d, 2JC-P = 5,0 Hz, C5'), 68,16 (d, 2JC-P = 8,2 Hz, C5'), 67,95 (OCH2Ph), 55,28, 55,32 (OCH3), 51,79 (CH ala), 51,71 (CH ala), 35,40 (C-3’), 35,12 (C3’), 20,49 (d, 3JC-P = 6,7 Hz, CH3 ala), 20,35 (d, 3JC-P = 6,7, CH3 ala).

[0317] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN a partir de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, F =1 ml/min, À = 280 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 16,22 min. e tR 16,48 min. 2-((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-metoxi-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforilamino)propanoato de (2S)-benzila L

[0318] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (99 μL, 1,24 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila (264 mg, 0,75 mmol) em THF anidro (2 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 2-O-metil-3’-desoxiadenosina (70 mg, 0,25 mmol) em THF anidro e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (13 mg, 10%).

[0319] (ES+) m/z, encontrado: 599,2 (M + H+), C27H31N6O8P requerido: 598,19 (M).

[0320] 31P RMN (202 MHz, CD3OD) δ 3,97, 3,64.

[0321] 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,06 (s, 0,5H, H8), 8,04 (s, 0,5H, H8), 7,33-7,28 (m, 7H, Ph), 7,20-7,14 (m, 3H, Ph), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 0,5H, H1’), 5,90 (d, J = 1,5 Hz, 0,5H, H1’), 5,14-5,04 (m, 2H, OCH2Ph), 4,78-4,76 (m, 0,5H, H4’), 4,74-4,72 (m, 0,5H, H4’), 4,63-4,59 (m, 1H, H2'), 4,104,34 (m, 1H, H5'a), 4,25-4,20 (m, 1H, H5'b), 3,94, 3,95 (OCH3), 3,99-3,90 (m, 1H, CH ala), 2,40-2,37 (m, 1H, H3’), 2,07-2,04 (m, 1H, H3’), 1,31 (d J =7,0 Hz, CH3), 1,26 (d, J = 7,0 Hz, CH3).

[0322] 13C RMN (125 MHz, CD3OD) δ 174,82 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 174,62 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 163,80 (C-2), 158,16, 158,13 (C6), 152,15 (C4), 152,05 (d, 3JC-P = 4,8 Hz, C-ipso Ph), 152,00 (d, 3JC-P = 4,8 Hz, C-ipso Ph), 139,39 (C8), 137,30, 137,21 (C-ipso CH2Ph), 130,72, 129,57, 129,31,129,27, 126,122 (CH-Ar), 121,42 (d, JC-P = 4,5 Hz, CHAr), 121,37 (d, JC-P = 4,5 Hz, CH-Ar), 116,72 (C5), 116,69 (C5), 93,33, 93,24 (C1’), 80,26 (d, 3JC-P = 8,87, C4’), 80,19 (d, 3JC-P = 8,87, C4’), 76,35 (C2'), 68,78 (d, 2JC-P = 5,0 Hz, C5'), 68,35 (d, 2JC-P = 5,0 Hz, C5'), 67,94 (OCH2Ph), 67,92 (OCH2Ph), 55,25, 55,28 (OCH3), 51,69, 51,57 (CH ala), 35,23 (C3’), 34,96 (C3’), 20,38 (d, 3JC-P = 6,7, CH3 ala), 20,26 (d, 3JC-P = 6,7, CH3 ala).

[0323] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, F =1 ml/min, À = 280 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 14,22 min. e tR 14,51 min. 2-O-metil-3’-desoxiadenosina-5'-O-[1-naftil(1- pentiloxi-L-leucinil)] fosfato M

[0324] Composto M foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 2-O-metil-3’-deoxiadenosina (70 mg, 0,25 mmol), N-metilimidazol (99 μL, 1,24 mmol) e naftil(pentiloxi-L-leucinil) fosforocloridrato (330 mg, 0,75 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de gradiente CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (2000 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 7/93) proporcionou o composto do título como um sólido branco (50 mg, 30%).

[0325] 31P RMN (202 MHz, CD3OD) δP 4,53, 4,28.

[0326] 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δH 8,04-7,96 (m, 1H, H8), 7,77-7,71 (m, 1H, Nap), 7,58-7,53 (m, 1H, Nap), 7,45- 7,17 (m, 5H, Nap), 5,83-5,75 (m, 1H, H1’), 4,64-4,51 (m, 2H, H2', H4’), 4,40-4,16 (m, 2H, H5'), 3,88-3,75 (m, 6H, OCH3, O(CH2)4CH3, CHCH2CH(CH3)2), 2,38-2,24 (m, 1H, H3’), 2,00-1,91 (m, 1H, H3’), 1,53-1,05 (m, 11H, O(CH2)4CH3, CHCH2CH(CH3)2), 0,77-0,55 (m, 9H, O(CH2)4CH3, CHCH2CH(CH3)2).

[0327] 13C RMN (125 MHz, CD3OD) δC 175,02 (d, 3JC-P = 2,5 Hz, C=O), 174,78 (d, 3JC-P = 2,5 Hz, C=O), 163,76 (C2), 158,14 (C6), 151,03 (C4), 147,96 (d, 3JC-P = 7,2, ‘ipso’ Nap), 138,96 (C8), 136,30 (C-Ar), 136,28 (C-Ar), 136,22 (C-Ar), 128,93 (CH-Ar), 128,88 (CH-Ar), 128,81 (CH-Ar), 128,48 (CH-Ar), 127,77 (CH-Ar), 127,73 (CH-Ar), 127,44 (CH-Ar), 127,42 (CHAr), 127,06 (CH-Ar), 126,86 (CH-Ar), 126,45 (CH-Ar), 126,44 (CH-Ar), 126,31 (CH-Ar), 125,98 (CH-Ar), 125,88 (CH-Ar), 123,83 (CH-Ar), 123,43 (CH-Ar), 123,24 (CH-Ar), 122,81 (CHAr), 122,77 (CH-Ar), 122,69 (CH-Ar), 116,34 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, CH-Ar), 116,02 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, CH-Ar), 115,71 (C5), 93,42 (C1’), 93,32 (C1’), 80,22 (d, 3JC-P = 5,3 Hz, C4’), 80,15 (d, 3JC-P = 5,3 Hz, C4’), 76,29 (C2'), 76,27 (C2'), 69,22 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 69,028 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 66,31 (O(CH2)4CH3), 66,30 (O(CH2)4CH3), 55,29 (OCH3), 55,24 (OCH3), 54,79 (CHCH2CH(CH3)2), 54,68 (CHCH2CH(CH3)2), 44,20 (d, 3JC-P = 7,25 Hz, CHCH2CH(CH3)2), 43,93 (d, 3JC-P = 7,25 Hz, CHCH2CH(CH3)2), 35,49 (C3’), 35,17 (C3’), 29,31 (O(CH2)4CH3), 29,11 (O(CH2)4CH3), 25,67 (CHCH2CH(CH3)2), 25,44 (CHCH2CH(CH3)2), 23,30 (O(CH2)4CH3), 23,10 (CHCH2CH(CH3)2), 23,00 (CHCH2CH(CH3)2), 22,94 (CHCH2CH(CH3)2), 22,81 (CHCH2CH(CH3)2), 14,27 (O(CH2)4CH3).

[0328] (ES+) m/z, encontrado: 671,3 (M + H+), C32H43N6O8P requerido: 670,69 (M).

[0329] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 20,83 min. e tR 20,93 min. 2-O-metil-3’-deoxiadenosina-5'-O-[fenil(1-hexiloxi-L- alaninil)] fosfato N

[0330] Composto N foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 2-O-metil-3’-desoxiadenosina (70 mg, 0,25 mmol), N-metilimidazol (99 μL, 1,24 mmol) e fenil(hexiloxi-L-alaninil) fosforocloridrato (261 mg, 0,75 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de gradiente CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (1000 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 7/93) proporcionou o composto do título como um sólido branco (26 mg, 18%).

[0331] 31P RMN (202 MHz, CD3OD) δP 3,87, 3,65.

[0332] 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δH 8,08 (s, 0,5H, H8), 8,07 (s, 0,5H, H8), 7,36-7,29 (m, 2H, Ph), 7,24-7,14 (m, 3H, Ph), 5,94 (d, J = 2,0 Hz, 0,5H, H1’), 5,92 (d, J = 2,0 Hz, 0,5H, H1’), 4,81-4,76 (m, 1H, H2'), 4,71-4,62 (m, 1H, H4’), 4,48-4,43 (m, 0,5H, H5'), 4,42-4,36 (m, 0,5H, H5'), 4,33-4,25 (m, 1H, H5'), 4,10-3,83 (m, 6H, OCH3, O(CH2)5CH3, CHCH3), 2,48-2,40 (m, 1H, H3’), 2,13-2,07 (m, 1H, H3’), 1,61-1,51 (m, 2H, O(CH2)5CH3), 1,33-1,24 (m, 9H, O(CH2)5CH3, CHCH3), 0,89 (m, 3H, O(CH2)5CH3).

[0333] 13C RMN (125 MHz, CD3OD) δC 175,13 (d, 3JC-P = 4,3 Hz, C=O), 174,94 (d, 3JC-P = 4,3 Hz, C=O), 163,80 (C2), 163,78 (C2), 158,17 (C6), 158,15 (C6), 152,17 (d, 2JC-P = 6,3 Hz, C Ar), 152,15 (d, 2JC-P = 6,3 Hz, C-Ar), 152,03 (C4), 151,99 (C4), 139,42 (C8), 139,39 (C8), 130,75 (CH-Ar), 130,74 (CH Ar), 126,13 (CH-Ar), 121,43 (CH-Ar), 121,41 (CH-Ar), 121,39 (CH-Ar), 121,37 (CH-Ar), 116,74 (C5), 116,69 (C5), 93,40 (C1’), 93,27 (C1’), 80,30 (C4’), 80,23 (C4’), 76,40 (C2'), 68,85 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 68,42 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 66,43 (O(CH2)5CH3), 55,30 (OCH3), 55,26 (OCH3), 51,64 (CHCH3), 51,54 (CHCH3), 35,30 (C3’), 35,04 (C3’), 32,58 (O(CH2)5CH3), 29,67 (O(CH2)5CH3), 29,64 (O(CH2)5CH3), 26,61 (O(CH2)5CH3), 23,59 (O(CH2)5CH3), 20,56 (d, 3JC-P = 6,4 Hz, CHCH3), 20,41 (d, 3JC-P = 6,4 Hz, CHCH3), 14,36 (O(CH2)5CH3).

[0334] (ES+) m/z, encontrado: 593,3 (M + H+), C32H43N6O8P requerido: 592,58 (M).

[0335] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 17,02 min. e tR 17,23 min. 2-Fluoro-3‘-deoxiadenosina—5'-O-[1-naftil(benziloxi-L- alaninil)] fosfato O

[0336] Composto O foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 2-Fluoro-3’-desoxiadenosina (50 mg, 0,18 mmol), N-metilimidazol (74 μL, 0,93 mmol) e fenil(benziloxi-L-alaninil) fosforocloridrato (196 mg, 0,56 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de gradiente CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (500 μM, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto do título como um sólido branco (5 mg, 4%).

[0337] 31P RMN (202 MHz, CD3OD) δP 4,33, 4,08.

[0338] 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δH 8,17 (s, 0,5H, H8), 8,14 (s, 0,5H, H8), 8,14-8,09 (m, 1H, Ar), 7,89-7,85 (m, 1H, Ar), 7,70-7,66 (m, 1H, Ar), 7,54-7,42 (m, 4H, Ar), 7,40-7,24 (m, 5H, Ar), 5,89 (d, J = 2,3 Hz, 0,5H, H1’), 5,88 (d, J = 2,3 Hz, 0,5H, H1’), 5,08-5,01 (m, 2H, OCH2Ph), 4,70-4,60 (m, 2H, H2', C4’), 4,46-4,39 (m, 1H, C5'), 4,32-4,24 (m, 1H, C5'), 4,09-3,97 (m, 1H, CHCH3), 2,36-2,25 (m, 1H, H3’), 2,06-1,98 (m, 1H, H3’), 1,32-1,25 (m, 3H, CHCH3).

[0339] 13C RMN (125 MHz, CD3OD) δC 175,54 (CO), 175,22 (CO), 161,02 (d, 1JC-F = 207,3 Hz, C2), 160,89 (d, 1JC-F = 207,3 Hz, C2), 158,45 (d, 3JC-F = 18,2 Hz, C6), 158,23 (d, 3JC-F = 18,2 Hz, C6), 150,63 (d, 3JC-F = 18,4 Hz, C4), 140,67 (C8), 136,26 (C-Ar), 131,62, 131,54, 129,56 (CH-Ar), 129,52 (CH-Ar), 129,37 (CH-Ar), 129,31 (CH-Ar), 129,26 (CH-Ar), 128,87 (CH-Ar), 128,81 (CH-Ar), 128,29 (CH-Ar), 128,02 (CHAr), 127,79 (CH-Ar), 127,76 (CH-Ar), 127,51 (CH-Ar), 127,49 (CH-Ar), 127,47 (CH-Ar), 126,47 (CH-Ar), 126,33 (C-Ar), 126,27 (C-Ar), 125,97 (CH-Ar), 122,78 (CH-Ar), 122,74 (CH Ar), 122,64 (CH-Ar), 122,62 (CH-Ar), 116,35 (d, 4JC-F = 3,0 Hz, C5), 116,15 (d, 4JC-F = 3,0 Hz, C5), 93,25 (C1’), 93,20 (C1’), 80,41 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, C4’), 80,33 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, C4’), 76,43 (C2'), 76,35 (C2'), 68,84 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C5'), 68,45 (d, 2JC-P = 5,5 Hz, C5'), 67,92 (OCH2Ph), 67,92 (OCH2Ph), 51,75 (CHCH3), 51,52 (CHCH3), 34,97 (C3’), 34,74 (C3’), 20,42 (d, 3JC-P = 6,7 Hz, CHCH3), 20,20 (d, 3JC-P = 6,7 Hz, CHCH3).

[0340] 19F RMN (470 MHz, CD3OD) δF -53,14, -53,22.

[0341] (ES+) m/z, encontrado: 637,2 (M + H+), C30H30FN6O7P requerido: 636,57 (M).

[0342] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou dois picos dos diastereômeros com tR 17,09 min. e tR 17,34 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-benzila P

[0343] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- metilimidazol (74 μL, 0,93 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila (196 mg, 0,56 mmol) em THF anidro (2 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 2-Fluoro-3’-desoxiadenosina (50 mg, 0,18 mmol) em THF anidro (5 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (5 mg, 7%).

[0344] (ES+) m/z, encontrado: 587,1 (M + H+), C26H28FN6O7P requerido: 586,17 (M).

[0345] 19F RMN (470 MHz, CD3OD): δF -53,17, -53,23.

[0346] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 3,95 (s), 3,67 (s).

[0347] 1H RMN (500 MHz, CDCl3): δH 8,19 (s, 0,5H, H8), 8,16 (s, 0,5H, H8), 7,36-7,27 (m, 7H, Ar), 7,22-7,13 (m, 3H, Ar), 5,91 (d, J = 1,5 Hz, 0,5H, H1’), 5,89 (d, J = 1,7 Hz, 0,5H, H1’), 5,15-5,06 (m, 2H, OCH2Ph), 4,73-4,58 (m, 2H, H2', H4’), 4,42-4,34 (m, 1H, H5'), 4,02-3,90 (m, 1H, H5'), 3,273,24 (m, 1H, H3’), 2,08-2,00 (m, 1H, H3’), 1,33 (d, J = 7,1 Hz, 1,5H, CH3 ala), 1,29 (d, J = 7,1 Hz, 1,5H, CH3 ala).

[0348] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 175,85 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 174,63 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 160,58 (d, 1JC-F = 207,5 Hz, C2), 160,53 (d, 1JC-F = 207,5 Hz, C2), 159,06 (d, 3JC-F = 18,7 Hz, C6), 159,05 (d, 3JC-F = 17,5 Hz, C6), 152,11 (d, 2JC-P = 8,75 Hz, C-Ar), 152,08 (d, 2JC-P = 8,7 Hz, C-Ar), 151,58 (d, 3JC-F = 19,7 Hz, C4), 151,56 (d, 3JC-F = 19,5 Hz, C4), 140,63 (C8), 137,28 (C-Ar), 137,21 (C-Ar), 130,78 (CH Ar), 130,75 (CH-Ar), 129,58 (CH-Ar), 129,38 (CH-Ar), 129,34 (CH-Ar), 129,32 (CH-Ar), 129,28 (CH-Ar), 128,3 (CH-Ar), 128,02 (CH-Ar), 121,16 (CH-Ar), 121,18 (CH-Ar), 121,47 (CHAr), 121,51 (CH-Ar), 121,42 (CH-Ar), 121,39 (CH-Ar), 121,36 (CH-Ar), 118,75 (d, 4JC-F = 3,7 Hz, C5), 118,72 (d, 4JC-F = 3,7 Hz, C5), 93,25 (C1’), 93,18 (C1’), 80,48 (d, 3JC-P = 8,3 Hz, C4’), 80,46 (d, 3JC-P = 8,1 Hz, C4’), 76,51 (C2'), 76,49 (C2'), 68,54 (d, 2JC-P = 5,2 Hz, C5'), 68,18 (d, 2JC-P = 5,6 Hz, C5'), 67,94 (CH2 Bn), 67,91 (CH2 Bn), 51,71 (CH ala), 51,56 (CH ala), 34,85 (C3’), 34,64 (C3’), 20,42 (d, 3JC-P = 7,1 Hz, CH3 ala), 20,25 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, CH3 ala).

[0349] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 280 nm, mostrou dois picos dos diastereisômeros com tR 14,98 min. e tR 15,12 min. 2-Fluoro-3‘-desoxiadenosina—5'-O-[1-naftil(1-pentiloxi -L-leucinil)] fosfato Q

[0350] Composto Q foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 2-Fluoro-3’-desoxiadenosina (50 mg, 0,18 mmol), N-metilimidazol (74 μL, 0,93 mmol) e naftil(pentiloxi-L-leucinil) fosforocloridrato (246 mg, 0,56 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CHCl3 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (1000 μm, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto do título como um sólido branco (65 mg, 53%).

[0351] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): 4,60, 4,35.

[0352] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,23 (s, 0,5H, H8), 8,20 (s, 0,5H, H8), 8,18-8,12 (m, 1H, Ar), 7,92-7,86 (m, 1H, Ar), 7,73-7,68 (m, 1H, Ar), 7,57-7,46 (m, 3H, Ar), 7,42-7,36 (m, 1H, Ar), 5,93-5,91 (m, 1H, H1’), 4,74-4,62 (m, 2H, H2', H4’), 4,55-4,50 (m, 0,5H, H5'), 4,49-4,44 (m, 0,5H, H5'), 4,43-4,37 (m, 0,5H, H5'), 4,36-4,31 (m, 0,5H, H5'), 4,023,86 (m, 3H, CHCH2CH(CH3)2, O(CH2)4CH3), 2,43-2,29 (m, 1H, H3’), 2,12-2,04 (m, 1H, H3’), 1,67-1,20 (m, 11H, O(CH2)4CH3, CHCH2CH(CH3)2), 0,89-0,67 (m, 9H, O(CH2)4CH3, CHCH2CH(CH3)2).

[0353] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 175,03 (d, 3JC-P = 2,5 Hz, C=O), 174,93 (d, 3JC-P = 2,5 Hz, C=O), 161,45 (d, 1JC- F = 205,5 Hz, C2), 160,39 (d, 1JC-F = 205,5 Hz, C2), 158,33 (C6), 151,60 (C4), 147,92 (C-Ar), 140,69 (C8), 136,30 (C Ar), 128,88 (CH-Ar), 128,83 (CH-Ar), 127,80 (CH-Ar), 127,76 (CH-Ar), 127,49 (CH-Ar), 127,46 (CH-Ar), 126,48 (CH-Ar), 126,45 (CH-Ar), 126,02 (CH-Ar), 125,91 (CH-Ar), 123,03 (C-Ar), 122,81 (CH-Ar), 122,69 (CH-Ar), 116,39 (d, 3JC-P = 2,9 Hz, CH-Ar), 116,28 (C5), 116,26 (C5), 115,97 (d, 3JC-P = 2,9 Hz, CH-Ar), 93,29 (C1’), 93,23 (C1’), 80,45 (d, 3JC-P = 6,0 Hz, C4’), 80,38 (d, 3JC-P = 6,0 Hz, C4’), 76,45 (C2'), 76,41 (C2'), 68,99 (d, 2JC-P = 5,4 Hz, C5'), 68,78 (d, 2JC-P = 5,4 Hz, C5'), 66,31 (O(CH2)4CH3), 66,29 (O(CH2)4CH3), 54,78 (CHCH2CH(CH3)2), 54,66 (CHCH2CH(CH3)2), 44,16 (d, 3JC-P = 7,25 Hz, CHCH2CH(CH3)2), 43,84 (d, 3JC-P = 7,3 Hz, CHCH2CH(CH3)2), 35,09 (C3’), 34,79 (C3’), 29,31 (O(CH2)4CH3), 29,12 (O(CH2)4CH3), 25,65 (CHCH2CH(CH3)2), 25,41 (CHCH2CH(CH3)2), 23,33 (O(CH2)4CH3), 23,11 (CHCH2CH(CH3)2), 23,00 (CHCH2CH(CH3)2), 21,95 (CHCH2CH(CH3)2), 21,68 (CHCH2CH(CH3)2), 14,29 (O(CH2)4CH3).

[0354] 19F RMN (470 MHz, CD3OD): δF -53,15, -53,20.

[0355] (ES+) m/z, encontrado: 659,3 (M + H+), C31H40FN6O7P requerido: 658,66 (M).

[0356] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 254 nm, mostrou um pico dos diastereoisômeros em sobreposição com tR 21,95 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-hexila R

[0357] Usando o Procedimento Geral 1 acima, N- 0,93 mmol) e uma solução de 2- ((cloro(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-hexila (196 mg, 0,56 mmol) em THF anidro (2 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de 2-Fluoro-3’-desoxiadenosina (50 mg, 0,18 mmol) em THF anidro (5 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (5 mg, 7%).

[0358] (ES+) m/z, encontrado: 587,1 (M + H+), C26H28FN6O7P requerido: 586,17 (M).

[0359] 19F RMN (470 MHz, CD3OD): δF -53,15, -53,20.

[0360] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): 3,91 (s), 3,73 (s).

[0361] 1H RMN (500 MHz, CDCl3): δH 8,21 (s, 0,5H, H8), 8,20 (s, 0,5H, H8), 7,37-7,29 (m, 7H, Ar), 7,26-7,13 (m, 3H, Ar), 5,94-5,91 (m, 1H, H1’), 4,76-4,64 (m, 2H, H2', H4’), 4,49-4,44 (m, 0,5H, H5'), 4,43-4,37 (m, 0,5H, H5'), 4,334,26 (m, 1H, H5'), 4,11-3,99 (m, 2H, CH2 Hex), 3,97-3,83 (m, 1H, CH ala), 2,41-2,32 (m, 1H, H3’), 2,13-2,06 (m, 1H, H3’), 1,62-1,52 (m, 2H, CH2 Hex), 1,37-1,23 (m, 9H, CH3 ala, CH2 Hex), 0,92-0,85 (m, 3H, CH3 Hex).

[0362] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 175,15 (d, 3JC-P = 3,7 Hz, C=O), 174,96 (d, 3JC-P = 5,0 Hz, C=O), 160,59 (d, 1JC-F = 207,5 Hz, C2), 160,56 (d, 1JC-F = 207,5 Hz, C2), 159,09 (d, 3JC-F = 21,2 Hz, C6), 159,08 (d, 3JC-F = 20,0 Hz, C6), 152,16 (d, 2JC-P = 7,5 Hz, C-Ar), 152,14 (d, 2JC-P = 6,3 Hz, C-Ar), 151,71 (d, 3JC-F = 20,0 Hz, C4), 151,67 (d, 3JC-F = 20,0 Hz, C4), 140,70 (d, 5JC-F = 2,5 Hz, C8), 140,68 (d, 5JC-F = 2,5 Hz, C8), 130,77 (CH-Ar), 130,74 (CH-Ar), 126,16 (CH-Ar), 126,24 (CH-Ar), 121,48 (CH-Ar), 121,44 (CH-Ar), 121,41 (CH-Ar), 121,37 (CH-Ar), 118,80 (d, 4JC-F = 3,7 Hz, C5), 118,77 (d, 4JC-F = 3,7 Hz, C5), 93,37 (C1’), 93,25 (C1’), 80,52 (d, 3JC- P = 3,7 Hz, C4’), 80,45 (d, 3JC-P = 4,1 Hz, C4’), 76,52 (C2'), 76,49 (C2'), 68,69 (d, 2JC-P = 5,4 Hz, C5'), 68,30 (d, 2JC-P = 4,9 Hz, C5'), 66,46 (CH2 Hex), 51,68 (CH ala), 51,57 (CH ala), 35,02 (C3’), 34,80 (C3’), 32,58 (CH2 Hex), 29,65 (CH2 Hex), 26,61 (CH2 Hex), 23,59 (CH2 Hex), 20,60 (d, 3JC-P = 7,1 Hz, CH3 ala), 20,43 (d, 3JC-P = 7,5 Hz, CH3 ala), 14,35 (CH3 Hex).

[0363] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, 1 ml/min, l = 280 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 17,83 min. e tR 18,02 min. 2-((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-2-cloro-9H-purin-9-il)-4- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi) fosforilamino)propanoato de (2R)-benzila S

[0364] A uma solução agitada de 2-cloro-3’- deoxiadenosina (100 mg, 1,0 mol/eq.) em 10 mL de THF anidro, 424 mg de 2-(cloro(naftalen-1-iloxi)fosforilamino) propanoato de (2S)-benzila (3,0 eq./mol) dissolvida em 10 mL de THF anidro foram adicionados gota a gota. A esta mistura de reação, 0,14 mL de NMI (5 mol/eq.) foram adicionados gota a gota em temperatura ambiente sob uma atmosfera de argônio. A mistura de reação foi agitada durante 88 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia em coluna com gradiente de eluente (CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 5/95) para proporcionar um produto desejado como um sólido desejado. (7 mg, rendimento = 3%).

[0365] MS (ES+) m/z: Encontrado: 653 (M + H+), 675 (M + Na+) C30H30ClN6O7P requerido: 652,16 (M).

[0366] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 4,39 (s), 4,12 (s).

[0367] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,10 (s, 0,5 H, H8), 8,07 (s, 0,5 H, H8), 8,02-7,97 (m, 3H, CH2Ph e Naf), 7,437,14 (m, 9H, CH2Ph e Naf), 5,80-5,81 (m, 1H, H1’), 4,89-4,97 (m, 2H, CH2Ph) 4,49-4,53 (m, 2H, H4’and H2'), 4,30-4,35 (m, 1H, H5'), 4,15-4,21 (m, 1H, H5'), 3,87-3,95 (m, 1H, CHCH3), 2,12-2,23 (m, 1H, H3’), 1,86-1,93 (m, 1H H3’), 1,14-1,17 (m, 3H, CHCH3).

[0368] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 174,85 (d JCP = 4,0 Hz, C=O), 174,55 (d JCP = 4,3 Hz, C=O), 158,07, 158,04 (C6), 155,31, 155,28 (C2), 151,34, 151,31 (C4), 149,69 (C-Ar), 147,96 (d 3JCP = 7,25 Hz, C-ipso Naf), 147,90 (d 3JCP= 7,0 Hz, C-ipso Naf), 140,70 (C8), 137,21, 137,16 (C-ipso CH2Ph), 136,26 (C-Ar), 130,92, 130,80, 129,56, 129,53, 129,31, 129,27, 129,25, 128,88, 128,81 (CH-Ar), 127,78 (d JCP = 4,7 Hz, CH-Ar), 127,50 (d JCP = 6,2 Hz, CH-Ar), 126,48, 126,02, 125,97 (CH-Ar), 119,46, 119,42 (C5), 116,33 (d, JCP = 3,0, CH-Ar), 116,16 (d, JCP = 3,4, CH-Ar), 93,30, 93,27 (C1’), 80,56 (d J = 8,3 Hz, C4’), 80,51 (d J = 8,4 Hz, C4’), 76,61, 76,54 (C2'), 68,74 (d JCP= 5,3 Hz, C5'), 68,54 (d JCP= 5,1 Hz, C5'), 67,93, 67,90 (CH2Ph), 51,81, 51,70 (CHCH3), 34,79, 34,53 (C3’), 20,42 (d JCP = 6,5 Hz, CHCH3), 20,23 (d JCP = 7,7 Hz, CHCH3).

[0369] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 90/10 a 0/100 em 30 minutos, F = 1 ml/min, l = 254 nm, tR 18,03 min. 2-Cloro-3’desoxiadenosina 5'-O-[1-fenil (2,2-dimetil propoxi-L-alanina)] fosfato T

[0370] Composto T foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 2-cloro-3’-desoxiadenosina (350 mg, 1,25 mmol), N-metilimidazol (490 μL, 6,15 mmol) e fenil(2,2-dimetilpropoxi-L-alaninil) fosforocloridrato (1231 mg, 3,69 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 5/95) e TLC preparativa (1000 μm, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 4/96) proporcionou o composto do título como um sólido branco (181 mg, 25 %).

[0371] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 3,93, 3,72.

[0372] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,12 (s, 0,5 H, H8), 8,10 (s, 0,5 H, H8), 7,19-7,23 (m, 2 H, Ph), 7,03-7,12 (m, 3 H, Ph), 5,84 (d J =2, 0,5 H, H1’), 5,83 (d J =2, 0,5 H, H1’), 4,54-4,60 (m, 2 H, H4’and H2'), 4,34-4,38 (m, 0,5 H, H5'), 4,27-4,31 (m, 0,5 H, H5'), 4,16-4,23 (m, 1 H, H5'), 3,80-3,90 (m, 1 H, CHCH3), 3,57-3,73 (m, 2 H OCH2C(CH3)3), 2,18-2,28 (m, 1 H, H3’), 1,94-1,99 (m, 1 H, H3’), 1,20-1,24 (m, 3 H, CHCH3), 0,81 (s, 4,5 H OCH2(CH3)3), 0,79 (s, 4,5 H OCH2C(CH3)3).

[0373] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 175,09 (d 3JCP = 4,75 Hz, C=O), 174,90 (d 3JCP = 5,37 Hz, C=O), 158,10, (C6), 155,31, 155,28 (C2), 152,14 (d 2JCP= 6,37 Hz, C-ipso Ph), 152,13 (d 2JCP= 6,25 Hz, C-ipso Ph), 151,33, 151,30 (C4), 140,87, 140,76 (C8), 130,78, 130,77 (CH-Ar), 126,17, 126,42 (CH-Ar), 121,45 (d 3JCP = 11,75 Hz, CH-Ar), 121,41 (d 3JCP = 11,75 Hz, CH-Ar), 119,52, 119,48 (C5), 93,49, 93,35 (C1’), 80,67 (d 3J = 8,62 Hz, C4’), 80,65 (d 3J = 8,25 Hz, C4’), 76,70, 76,67 (C2'), 75,43, (OCH2C(CH3)3), 68,68 (d 2JCP= 5,12 Hz, C5'), 68,42 (d 2JCP= 5,12 Hz, C5'), 51,77, 51,60 (CHCH3), 34,94, 34,67 (C3’), 32,36, 32,32 (OCH2C(CH3)3), 26,78, 26,76 (OCH2C(CH3)3), 20,83 (d JCP = 6,25 Hz, CHCH3), 20,61 (d JCP = 7,12 Hz, CHCH3).

[0374] MS (ES+) m/z: Encontrado: 583 (M + H+), 605 (M + Na+) C24H32ClN6O7P requerido: 582,18 (M).

[0375] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 90/10 a 0/100 em 30 minutos, F = 1 ml/min, l = 254 nm, tR 16,37, 16,55 min. 2-Cloro-3’desoxiadenosina 5'-O-[1-Naftil (2,2-dimetil propoxi-L-alanina)] fosfato U

[0376] Composto U foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 1 usando 2-cloro-3’-desoxiadenosina (350 mg, 1,25 mmol), N-metilimidazol (490 μL, 6,15 mmol) e Naftil(2,2-dimetilpropoxi-L-alaninil) fosforocloridrato (1416 mg, 3,69 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 5/95) e TLC preparativa (1000 μm, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 4/96) proporcionou o composto do título como um sólido branco (264 mg, 34 %).

[0377] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 4,35, 4,20.

[0378] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,23 (s, 0,5 H, H8), 8,21 (s, 0,5 H, H8), 8,11-8,16 (m, 1 H, Naf), 7,86-7,89 (m, 1 H, Naf), 7,69-7,70 (m, 1 H, Naf), 7,54-7,46 (m, 3 H, Naf), 7,37-7,41 (m, 1 H, Naf), 5,95 (d J = 2, 0,5 H, H1’), 5,94 (d J = 1,5, 0,5 H, H1’), 4,67-4,73 (m, 2 H, H4’and H2'), 4,344,55 (m, 2 H, H5'), 4,00-4,08 (m, 1 H, CHCH3), 3,66-3,81 (m, 2 H OCH2C(CH3)3), 2,28-2,41 (m, 1 H, H3’), 2,03-2,10 (m, 1 H, H3’), 1,31-1,34 (m, 3 H, CHCH3), 0,90 (s, 4,5 H OCH2C(CH3)3), 0,89 (s, 4,5 H CH2(CH3)3).

[0379] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 175,11 (d JCP = 4,1 Hz, C=O), 174,85 (d JCP = 5,0 Hz, C=O), 158,10, 158,04 (C6), 155,32, 155,30 (C2), 151,33 (C4), 147,96 (d 2JCP = 7,25 Hz, C-ipso Naf), 147,93 (d 2JCP= 7,25 Hz, C-ipso Naf), 140,84, 140,76 (C8), 136,29 (C-Ar), 128,87, 128,82 (CH-Ar), 127,85 (C-Ar), 127,77, 127,74, 127,48, 127,45, 126,47, 125,99, 125,96, 122,74, 122,66 (CH-Ar), 119,47 (C5), 116,29 (d 3JCP = 3,4 Hz, CH-Ar), 116,17 (d 3JCP = 2,9 Hz, CH-Ar), 93,42, 93,34 (C1’), 80,57 (d 3JCP = 8,1 Hz, C4’), 80,53 (d 3JCP = 5,1 Hz, C4’), 76,61, 76,53 (C2'), 75,41, 75,38 (OCH2C(CH3)3), 68,95 (d 2JCP= 5,3 Hz, C5'), 68,82 (d 2JCP= 5,2 Hz, C5'), 51,84, 51,73 (CHCH3), 35,04, 34,75 (C3’), 32,29 (OCH2C(CH3)3), 26,70 (OCH2C(CH3)3), 20,76 (d 3JCP = 6,4 Hz, CHCH3), 20,55 (d 3JCP = 7,2 Hz, CHCH3).

[0380] MS (ES+) m/z: Encontrado: 633 (M + H+), 655 (M + Na+) C28H34ClN6O7P requerido: 652,16 (M).

[0381] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 90/10 a 0/100 em 30 minutos, F = 1 ml/min, l = 254 nm, tR 19,16 min. 2-Cloro-3’desoxiadenosina 5' -O- [1-fenil(etoxi-L- alanina)] fosfato V

[0382] Composto V foi preparado de acordo com o Procedimento Geral 4 usando 2-cloro-3’-desoxiadenosina (343 mg, 0,66 mmol), cloreto de terc-butildimetilsilila (328 mg 2,18 mmol), imidazol (297 mg, 4,36 mmol). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 12/88) proporcionou o intermediário 1 em um rendimento quantitativo. Em seguida, o intermediário 1 (970 mg, 1,89 mmol) reagiu com 12 mL de uma solução de THF/H2O/TFA a 4/1/1. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 12/88) proporcionou o intermediário 2 (544 mg, 72 %). Então, o intermediário 2 (204 mg, 0,51 mmol) reagiu com cloreto de terc-butilmagnésio e uma solução de fenil(etiloxi-L- alaninil) fosforocloridrato (348,56 mg, 1,02 mmol) em THF anidro (5 mL). Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 8/92) proporcionou o intermediário 3 (93 mg, 28 %). Finalmente, o intermediário 3 (93 mg, 0,14 mmol) reagiu com uma solução de THF/TFA/H2O a 1/1/1 (3 mL). Purificação por meio de TLC preparativa (2000 μm, sistema de eluente de CH3OH/CH2CI2 a 4/96) proporcionou o composto do título como um sólido branco (50 mg, 66 %). (Rendimento global de 13 %).

[0383] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 3,93, 3,72.

[0384] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,12 (s, 0,5 H, H8), 8,11 (s, 0,5 H, H8), 7,18-7,23 (m, 2 H, Ph), 7,03-7,12 (m, 3 H, Ph), 5,85 (d J =1,5, 0,5 H, H1’), 5,84 (d J =2, 0,5 H, H1’), 4,55-4,62 (m, 2 H, H4’and H2'), 4,34-4,38 (m, 0,5 H, H5'), 4,28-4,32 (m, 0,5 H, H5'), 4,16-4,22 (m, 1 H, H5'), 3,93-4,03 (m, 2 H, OCH2CH3), 3,70-3,84 (m, 1 H, CHCH3), 2,20- 2,28 (m, 1 H, H3’), 1,95-1,99 (m, 1 H, H3’), 1,15-1,21 (m, 3 H, CHCH3), 1,06-1,11 (m, 3 H, OCH2CH3).

[0385] 13C RMN (125 MHz, CD3OD): δC 173,66 (d 3JCP = 4,5 Hz, C=O), 173,65 (d 3JCP = 5,3 Hz, C=O), 156,68, 156,70 (C6), 153,93, 153,88 (C2), 150,72 (d 2JCP= 6,7 Hz, C-ipso Ph), 150,71 (d 2JCP= 6,5 Hz, C-ipso Ph), 149,89, 149,94 (C4), 139,41, 139,35 (C8), 129,33 (CH-Ar), 124,74, 124,73 (CH-Ar), 120,03 (d 3JCP = 4,75 Hz, CH-Ar), 119,97 (d 3JCP = 4,87 Hz, CH-Ar), 118,07, 118,03 (C5), 92,02, 91,88 (C1’), 79,26, 79,19 (C4’), 75,26, 75,24 (C2'), 67,18 (d 2JCP= 5,25 Hz, C5'), 66,81 (d 2JCP= 5,12 Hz, C5'), 60,96 (OCH2CH3), 50,23, 50,12 (CHCH3), 33,46, 33,21 (C3’), 19,16 (d 3JCP = 6,3 Hz, CHCH3), 18,97 (d 3JCP = 7,2 Hz, CHCH3), 13,10, 13,07 (OCH2CH3).

[0386] MS (ES+) m/z: Encontrado: 541 (M + H+), 563 (M + Na+) C21H26ClN6O7P requerido: 540 (M).

[0387] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 90/10 a 0/100 em 30 minutos, F = 1 ml/min, l = 254 nm, tR 12,41, 12,83 min. 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9—il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-isopropila W

[0388] N-metilimidazol (240 μL, 5 mmol) e uma solução de 2-((cloro(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)- isopropila (546 mg, 3 mmol) em THF anidro (5 mL) foram adicionados gota a gota a uma suspensão de (2R,3R,5S)-2-(6- amino-9H-purin-9-il)-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-ol (150 mg, 0,6 mmol) em THF anidro (3 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante um período de 16 horas. Purificação por meio de cromatografia em coluna (sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 0/100 a 6/94) e TLC preparativa (2000 μm, sistema de eluente de CH3OH/CH2Cl2 a 5/95) proporcionou o composto desejado como um sólido branco (40 mg, 13%).

[0389] MS (ES+) m/z: Encontrado: 521,2 (M + H+), 543,3 (M + Na+), 1063,4 (2M + Na+) C31H33N6O8P requerido: 520,18(M).

[0390] 31P RMN (202 MHz, CD3OD): δP 3,99 (s), 3,82 (s).

[0391] 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δH 8,16 (s, 0,5H, H8), 8,15 (s, 0,5H, H8), 8,11 (s, 1H, H-2) 7,23-7,20 (m, 2H, Ph), 7,11-7,03 (m, 3H, Ph), 5,91 (d J = 2,0Hz, 0,5H, H1’), 5,90 (d J = 2,0Hz, 0,5H, H1’), 4,85-4,79 (m, 1H, CH(CH3)2, 4,644,63 (m, 1H, H4’), 4,60-6,57 (m, 1H, H2'), 4,37-4,33 (m, 1H, H5'), 4,31-4,28 (m, 1H, H5'), 3,74-4,22-4,17 (m, 1H, H5'), 3,70 (m, 1H, CH ala), 2,02-1,97 (m, 1H, H3’), 2,04-2,01 (m, 1H, H3’), 1,18-1,14 (m, 3H, CH3), 1,24 (m,6H, CH(CH3)2).

[0392] HPLC: HPLC de fase reversa eluindo com H2O/CH3CN de 100/10 a 0/100 em 30 minutos, F =1 ml/min, À = 200 nm, mostrou dois picos dos diastereoisômeros com tR 11,58 min. e tR 11,92 min.

[0393] Solventes e reagentes. Os solventes anidros a seguir foram adquiridos a partir da Sigma-Aldrich: diclorometano (CH2Cl2), trimetilfosfato ((CH3O)3PO). Ésteres de aminoácidos comercialmente disponíveis foram adquiridos a partir da Sigma-Aldrich. Todos os reagentes comercialmente disponíveis foram usados sem purificação adicional.

[0394] Cromatografia em Camada Fina (TLC). Placas suportadas de alumínio pré-revestidas (60 F254, 0,2 mm de espessura, Merck) foram visualizadas sob luz ultravioleta tanto de onda curta quanto longa (254 e 366 nm) ou por queima usando os seguintes indicadores de TLC: (i) sulfato de amônio e molibdato de cério; (ii) uma solução de permanganato de potássio. As placas de TLC preparativa (20 cm x 20 cm, 5002000 μm) foram adquiridas a partir da Merck.

[0395] Cromatografia em Coluna. Cromatografia rápida em coluna foi realizada usando gel de sílica fornecido pela Fisher (60A, 35-70 μm). Colunas de vidro foram empacotadas em suspensão usando o eluente apropriado com a amostra sendo carregada como uma solução concentrada no mesmo eluente ou pré-adsorvida em gel de sílica. As frações contendo o produto foram identificadas por TLC e reunidas e o solvente foi removido in vacuo.

[0396] Cromatografia de Líquido de Alta Eficiência (HPLC). A pureza dos compostos finais foi verificada como sendo > 95% através de análise HPLC usando I) ThermoSCIENTIFIC, SPECTRA SYSTEM P4000, detector SPECTRA SYSTEM UV2000, Varian Pursuit XRs 5 C18, 150 x 4,6 mm (como uma coluna analítica) ou II) Varian Prostar (LC Workstation- Varian Prostar 335 LC Detector), Thermo SCIENTIFIC Hypersil Gold C18, 5μ, 150 x 4,6 mm (como uma coluna analítica). Para o método de eluição, vide a parte experimental.

[0397] Ressonância Magnética Nuclear (RMN). 1H RMN (500 MHz), 13C RMN (125 MHz), 31P RMN (202 MHz) e 19F RMN (470 MHz) foram registrados em um espectrômetro Bruker Avance 500 MHz, a 25°C. Os desvios químicos (δ) são cotados em partes por milhão (ppm) em relação padrão interno MeOH-d4 (δ 3,34 1H-RMN, δ 49,86 13C-RMN) e CHCl3-d4 (δ 7,26 1H-RMN, δ 77,36 13C RMN) ou externo H3PO4 a 85% (0,00 δ 31P RMN). As constantes de acoplamento (J) são medidas em Hertz. As abreviaturas a seguir são usadas na atribuição de sinais de RMN: s (singuete), d (duplete), t (triplete), q (quarteto), m (multipleto), bs (singuete largo), dd (dupla de dupletes), dt (dupla de tripletes), app (aparente). A atribuição dos sinais em 1H RMN e 13C RMN foi feita com base na análise das constantes de acoplamento e experimentos bidimensionais adicionais (COSY, HSQC, HMBC, PENDANT).

[0398] Espectrometria de Massa (MS). Os espectros de massa de baixa resolução foram realizados no Bruker Daltonics microTof-LC (ionização em pressão atmosférica, espectroscopia de massa por pulverização de elétrons) no modo positivo ou negativo.

[0399] Pureza dos compostos finais. A pureza > 95% de todos os compostos finais foi confirmada usando análise por HPLC.

Exemplo 2 - Citotoxicidade

[0400] Os compostos exemplificados que concretizam a presente invenção foram avaliados nos procedimentos a seguir quanto à sua potência anticâncer.

[0401] Ensaios de viabilidade in vitro foram realizados para avaliar os efeitos dos compostos sobre a viabilidade celular em 7 linhagens de células selecionadas ao longo de 72 h usando o ensaio CellTiterGlo (CTG, Promega- G7573). Os ensaios foram realizados em duplicata através de tratamento com compostos em 9 pontos, 3,16 vezes a titulação em placas com 96 cavidades ao longo de ~ 72 horas. As concentrações iniciais de composto foram de 198 mM. O ensaio de viabilidade celular usando CellTiterGlo em placa com 96 cavidade foi realizado. O tratamento com composto foi de 72 horas, sob condições de crescimento normais e em duplicata. Os compostos foram dissolvidos para 40 mM e descongelados a 100%. Os compostos foram diluídos em série para 3,16 vezes em DMSO descongelado e aquecidos para 37°C antes de serem dissolvidos em meio (2 μl + 200 μl). Após os compostos serem dissolvidos em meio (meio também foi aquecido a 37C), os meios contendo os compostos foram aquecidos a 37 C na incubadora e, então, os compostos em meio foram adicionados a placas com células (50 μl + 50 μl) em duplicata. As concentrações finais de compostos foram de 198 M a 19,9 nM. A solubilidade de todos os compostos foi verificada e registrada novamente, então, as placas foram transferidas para uma incubadora de cultura tecidual com CO2 imediatamente e incubadas durante 3 dias. A concentração final de DMSO é de 0,5%.

[0402] Os resultados da triagem inicial são apresentados na Tabela II. A representa a IC50 relativa a partir de 0,1 a 5 μM, B representa a IC50 relativa em mais do que 5 μM e até 15 μM, C representa a IC50 relativa em mais do que 15 μM e até 100 μM; e D representa a IC50 relativa em mais do que 100 μM. Tabela II. aMOLT-4: leucemia linfoblástica aguda; bKG-1: leucemia mielogênea aguda; cHL-60: leucemia promielocítica aguda; dCCRF-CEM: leucemia linfoblástica aguda; eK562: leucemia mielogênea crônica. fIC50 μM: IC50 relativa; gM.I.%: inibição percentual máxima de viabilidade celular. Tabela II (Cont.) hMCF-7: adenocarcinoma de mama; iHepG2: carcinoma hepatocelular

[0403] Um subgrupo de compostos da invenção foi, então, testado quanto à sua atividade citotóxica em uma faixa mais ampla de diferentes tumores sólidos e doenças malignas hematológicas, usando o ensaio a seguir.

Ensaio de Tumores Sólidos e Malignidade Hematológicas

[0404] O ensaio de viabilidade in vitro foi realizado para avaliar os efeitos dos compostos sobre a viabilidade celular em linhagens de células selecionadas ao longo de 72 h usando o ensaio CellTiterGlo (CTG, Promega-G7573). Os ensaios foram realizados em duplicata através de tratamento com compostos em 9 pontos, 3,16 vezes a titulação em placas com 96 cavidades ao longo de ~ 72 horas. As concentrações iniciais de composto foram de 198 mM. O ensaio de viabilidade celular foi realizado usando CellTiterGlo em uma placa com 96 cavidades. Tratamento com composto durante 72 horas, condições de crescimento convencionais, duplicatas. Os compostos foram dissolvidos para 40 mM com DMSO descongelado a 100%. Os compostos foram diluídos em série 3,16 vezes em DMSO descongelado e aquecidos a 37°C antes de serem dissolvidos em meio (2 μl + 200 μl). Após os compostos serem dissolvidos em meio, este foi aquecido para 37°C na incubadora e, então, os compostos em meio foram adicionados a placas com células (50 μl + 50 μl) em duplicata. As concentrações finais dos compostos foram de 198 M a 19,9 nM. A solubilidade de todos os compostos foi verificada e registrada novamente, em seguida, as placas foram transferidas para uma incubadora de cultura tecidual com CO2 imediatamente e incubadas durante 3 dias. A concentração final de DMSO é de 0,5%.

[0405] As linhagens de células a seguir foram testadas e são citadas na Tabela III abaixo: Tabela III.

[0406] Os resultados de triagem suplementar são apresentados nas Tabelas IV-VII. Para as Tabelas IV a VI: A representa um valor de IC50 absoluto a partir de 0,1 μM a 5 μM, B representa um valor de IC50 absoluto maior do que 5 μM e até 15 μM, C representa um valor de IC50 absoluto maior do que 15 μM e até 100 μM; e D representa um valor de IC50 absoluto maior do que 100 μM. Para a Tabela VII: A representa um valor de EC50 absoluto a partir de 0,1 μM a 5 μM, B representa um valor de EC50 absoluto maior do que 5 μM e até 15 μM, C representa um valor de EC50 absoluto maior do que 15 μM e até 100 μM; e D representa um valor de EC50 absoluto maior do que 100 μM. Tabela IV. Tabela IV (Cont.) Tabela IV (Cont.) Tabela IV (Cont.) Tabela IV (Cont.) Tabela V. Tabela V (Cont.) Tabela VI. Tabela VI (Cont.) Tabela VI (Cont.) Tabela VII. Tabela VII (Cont.)

[0407] Todos os compostos testados mostraram uma atividade citotóxica contra as linhagens de células testadas. Na maioria dos casos, os compostos da invenção foram mais potentes do que o nucleosídeo parental contra todas as linhagens de células.

Exemplo 3 - Avaliação de Citotoxicidade e Atividade Contra Células-Tronco Cancerosas

[0408] Uma outra análise comparativa da toxicidade de compostos na linhagem de células KG1a de leucemia mieloide aguda (AML) ao longo de um intervalo de doses estendido foi realizada e o efeito relativo dos compostos avaliado sobre o compartimento de células-tronco leucêmicas (LSC) dentro da linhagem de células KG1a, ao longo de toda a faixa de doses.

Materiais e métodos Condições de Cultura de Células KG1a

[0409] A linhagem de células KG1a foi mantida em meio RPMI (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) suplementado com 100 unidades/ml de penicilina, 100 μg/ml de estreptomicina e soro fetal de vitelo a 20%. As células foram subsequentemente divididas em alíquotas (105 células/100 μl) em placas com 96 cavidades e foram incubadas a 37oC em uma atmosfera de dióxido de carbono a 5% umidificada durante 72 h na presença de análogos de nucleosídeos e seus respectivos proTides em concentrações que foram determinadas experimentalmente para cada série de compostos. Além disso, culturas de controle foram realizadas às quais não se adicionou qualquer fármaco. As células foram subsequentemente coletadas por meio de centrifugação e foram analisadas por citometria de fluxo usando o ensaio de Anexina V.

Medição de Apoptose In Vitro

[0410] As células em cultura foram coletadas por meio de centrifugação e depois ressuspensas em 195 μl de tampão rico em cálcio. Subsequentemente, 5 μl de anexina V (Caltag Medsystems, Botolph Claydon, Reino Unido) foram adicionados à suspensão de células e as células foram incubadas no escuro durante 10 minutos antes de lavagem. As células foram finalmente ressuspensas em 190 μl de tampão rico em cálcio em conjunto com 10 μl de iodeto de propídio. A apoptose foi avaliada através de citometria de fluxo por imunofluorescência de duas cores conforme anteriormente descrito. Subsequentemente, os valores de DL50 (a dose necessária para matar 50% das células em cultura) foram calculados para cada análogo de nucleosídeo e proTide.

Identificação Imunofenotípica do Compartimento de Células-Tronco Leucêmicas

[0411] Células KG1a foram cultivadas durante 72h na presença de uma grande variedade de concentrações de cada composto ensaiado. As células foram, então, coletadas e marcadas com um coquetel de anticorpos anti-linhagem (PE- Cy7), anti-CD34 (FITC), anti-CD38 (PE) e anti-CD123 (PerCP Cy5). A subpopulação que expressa um fenótipo de LSC foi subsequentemente identificada e foi expressa como uma porcentagem de todas as células viáveis restantes na cultura. As porcentagens de células-tronco restantes foram, então, representadas em um gráfico de dose-resposta e os efeitos dos compostos foram comparados uns com os outros e com o nucleosídeo parental.

Análise Estatística

[0412] Os dados obtidos nestes experimentos foram avaliados usando ANOVA de uma via. Todos os dados foram confirmados como Gaussiana ou uma aproximação Gaussiana usando o ensaio Omnibus K2. Os valores de DL50 foram calculados a partir da regressão não linear e a linha de análise de melhor ajuste das curvas de dose-resposta sigmoidais. Todas as análises estatísticas foram realizadas usando o software Graphpad Prism 6.0 (Graphpad Software Inc., San Diego, CA).

Resultados

[0413] A sensibilidade a fármaco in vitro foi medida usando o ensaio de anexina V/iodeto de propídio. O composto A mostrou uma potência aumentada in vitro quando comparado com a Cordicepina (P < 0,0001). 2-F-Cordicepina foi significativamente mais potente do que a Cordicepina (P < 0,0001) e todos os proTides testados mostraram uma potência aumentada quando comparado com o nucleosídeo parental (Figura 1).

[0414] Estes experimentos confirmaram que o composto A mostrou evidência de potência aumentada no compartimento de células-tronco em concentrações acima de 1 mM. Conforme pode ser visto a partir da Figura 2, o composto A demonstrou uma capacidade não apenas de reduzir os números de células- tronco cancerosas em geral, mas também de reduzir o número de tais células como uma proporção do total de células cancerosas presentes em cultura. Isto indica a capacidade do composto A de atingir preferencialmente células-tronco cancerosas. Nas concentrações mais elevadas testadas (1 mM e acima), a capacidade do composto A de ter como alvo preferencialmente LSCs foi significativamente maior do que aquela do composto parental.

[0415] Os proTides de 2-F-Cordicepina, compostos P, Q e R, também mostraram ter como alvo preferencialmente LSCs, que foi significativamente aprimorado quando comparado com o nucleosídeo parental. Em contraste, enquanto que o composto O foi capaz de produzir uma redução na proporção de LSCs presentes nas populações de células tratadas (indicando uma capacidade de uso em terapia alvo de LSC), sua atividade não foi significativamente diferente da 2-F-Cordicepina em qualquer uma das concentrações testadas. A Figura 3 mostra a comparação entre 2-F-Cordicepina e todos os proTides testados, enquanto que as comparações individuais são apresentadas nos painéis da Figura 4.

Exemplo 4 - Estudos Adicionais para Avaliação de Citotoxicidade e Inibição

[0416] Determinados compostos da invenção foram submetidos a estudos adicionais para testar a atividade citotóxica de determinados compostos da invenção e também para medir sua atividade contra 4 linhagens de células de câncer hematológico: • TdT CEM positiva (ALL humana) • TdT K562 negativa (CML humana) • TdT negativo HL-60 (ANLL humana) • RL (CRL-2261) linfoma não-HD

[0417] As concentrações do metabólito ativo dATP (trifosfato de cordicepina) nestas linhagens de células também foi medida.

[0418] A atividade citotóxica e as concentrações intracelulares de 3'-dATP também foram estudadas na presença de inibidores farmacológicos de hENT1, adenosina quinase (AK) e adenosina desaminase em linhagens de células de câncer CEM e RL. Os ditos inibidores imitam mecanismos conhecidos de resistência em câncer.

Métodos Cultura de Células

[0419] As linhagens de células de leucemia HL-60 (ATCC® CCL-240™), K562 (ATCC® CCL-243™), CCRF-CEM (ATCC® CRM-CCL-119™) e RL (ATCC® CRL-2261™) foram obtidas a partir da American Type Culture Collection (ATCC), Middlesex. As linhagens de células HL-60 e K562 são negativas para desoxinucleotidil transferase (TdT-ve), enquanto que a linhagem de células CCRF-CEM é TdT+ve.

[0420] A linhagem de células HL-60 é de leucemia promielocítica aguda; K562 é uma linhagem de células de CML, a linhagem de células CCRF-CEM de leucemia linfoblástica aguda (ALL); e RL é a linhagem de células de linfoma não- Hodgkin.

Manutenção da Linhagens de Células

[0421] As linhagens de células HL-60, K562, CCRF-CEM e RL foram cultivadas em meio RPMI-1640 (Sigma Aldrich, Reino Unido), o qual foi suplementado com Soro Fetal Bovino (FBS) a 10% (PAA Laboratories), anfotericina B a 1% (5,5 ml) e penicilina/estreptomicina a 1% (5,5 ml) (PAA Laboratories) e cultivadas em frascos em uma incubadora a 37°C com 5% de CO2.

Ensaio de 5'-trifosfato de adenosina (ATP)

[0422] A quantidade de ATP foi usada como uma medida do número de células e viabilidade celular. O kit de ensaio ATP ViaLightTM plus (Lonza, EUA: Produto N° LT07-121) foi usado para detectar ATP em células tratadas em placas com 96 cavidades compatíveis com luminescência (concentração inicial de células era de 1x104 células/cavidade) com cordicepina e proTides em concentrações de: 0, 0,1, 0,5, 1, 5 e 10 μM, seguido por incubação durante 72 horas em uma incubadora a 37°C com 5% de CO2. Para os estudos de inibidor, NBTI a 10 μM ou EHNA a 1 μM ou A-134974 foi adicionado e deixado durante 5 minutos antes da adição dos fármacos (vide seção 5 para detalhes de inibidor).

[0423] Após incubação, 50 μl de reagente de lise celular foram adicionados às placas com 96 cavidades para liberar o ATP intracelular, seguido de 100 μl de reagente de monitoramento de ATP (AMR). Os valores luminescentes de cada cavidade foram determinados usando o leitor de microplacas Fluostar Optima (BMG Labtech), que converte ATP em luz usando a enzima luciferase. Portanto, a quantidade de luminescência produzida era diretamente proporcional à quantidade de ATP.

Tratamento de células e extração de amostras para análise de trifosfato intracelular

[0424] Foram usadas linhagens de células com 5x106 células/ml. As células foram tratadas com 1 μl de cada um de cordicepina a 50 μM e compostos A, B, D, E e F e incubadas durante 2 horas a 37°C com 5% de CO2. Após incubação, as células foram centrifugadas (ambiente, 1.200 rpm, 5 minutos), os sobrenadantes do meio de cultura foram removidos e os pellets celulares foram lavados com 1 ml de PBS e centrifugados (ambiente, 1.200 rpm, 5 minutos). Os sobrenadantes foram removidos; os pellets foram reconstituídos em 100 μl de PBS e 100 μl de ácido perclórico a 0,8 M e misturados por vórtice e mantidos em gelo durante 30 minutos. Em seguida, centrifugados (ambiente, 1.200 rpm,5 minutos) e 180 μl do sobrenadante foram transferidos para novos tubos e armazenados a -80°C até ao momento da análise.

[0425] Durante a análise, 90 μl do extrato foram transferidos para tubos frescos. 25 μl de acetato de amônio a 1 M foram adicionados ao extrato e, então, neutralizados mediante adição de 10 μl de amônia a 10% e 5 μl de água deionizada, então, transferidos para frascos de LC-MS e 10 μl foram injetados no sistema de UPLC-MS/MS.

Estudos de Inibidor

[0426] Foi adicionada uma série de inibidores às linhagens celulares que foram tratadas da mesma maneira conforme descrito acima, mas antes de tratamento com fármacos: 1. Nitrobenziltioinosina (NBTI) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, produto # N2255) bloqueia transportadores de nucleosídeos 2. Cloridrato de EHNA (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, produto # E114) bloqueia adenosina desaminase 3. Inibidor de adenosina quinase A-134974 dicloridrato hidratado (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, produto # A2846) bloqueia adenosina quinase

[0427] As células foram tratadas com NBTI a 10 μM ou EHNA ou A-134974 a 1 μM e deixadas durante 5 minutos antes da adição de fármaco. As células foram, então, incubadas durante 2 horas a 37°C com 5% de CO2.

Análise LC-MS/MS

[0428] Os analitos foram decompostos usando um sistema de cromatografia líquida de ultra-desempenho (Accela UPLC, Thermo Scientific, Reino Unido) equipado com uma coluna Biobasic A x 5 μm, 50 x 2,1 mm (Thermo Electron Corporation, Murrieta, CA, EUA) e a fase móvel que consiste em uma mistura de NH4Ac a 10 mM em ACN/H2O (30:70 v/v), pH de 6,0 (A) e NH4Ac a 1 mM em ACN/H2O (30:70 v/v), pH de 10,5 (B). O gradiente de fase móvel será empregado, o qual compreende: tampão A = 95% em 0-0,5 min, 95-0% durante 1,25 minutos, manter a 0% durante 1,75 minutos, 0-95% ao longo de 0,1 min, terminar com 95 % durante 2,9 minutos, todos em uma taxa de fluxo de 500 μl/min.

[0429] Compostos de eluição de interesse foram detectados usando um sistema de espectrometria de massa Vantage quadrupolo de estágio triplo (Thermo Scientific, Reino Unido) equipado com uma fonte iônica de eletropulverização. As amostras foram analisadas nos modos de íons negativo, Monitoramento de Múltiplas Reações, com uma tensão de pulverização de 3000V. Nitrogênio foi usado como gás auxiliar e de proteção em uma taxa de fluxo de 50 e 20 unidades arbitrárias, respectivamente. Argônio foi usado como gás de colisão com uma pressão de 1,5 mTorr. A massa iônica filha de transição ideal e energia de colisão de cada analito foi como segue: 3'ATP 490,1 ^ 392,1 (energia de colisão de 19V) e o padrão interno CloroATP 539,9 ^ 442,2 (energia de colisão de 24V).

Análise Estatística

[0430] As curvas de dose-resposta da citotoxicidade de fármaco foram determinadas usando análise de regressão não linear da porcentagem de viabilidade celular em função da concentração e os valores de EC50 foram obtidos. O ensaio intracelular foi realizado em cinco réplicas para cada condição. O ensaio intracelular foi determinado usando análise de t-teste emparelhado (duplamente configurado) da concentração de 3'ATP/ATP e os p valores foram obtidos. Para todas as análises, foi usado o programa Prism (GraphPad Software) e Microsoft Powerpoint® 2013 foi usado para representar os resultados. Resultados Tabela sumarizada de IC50 (μM) (FD) = vezes de diferença em comparação com Cordicepina = IC50 cordicepina/IC50 proTide Sumário dos níveis médios de 3'-dATP intracelular (μg/ml) (FD) = vezes de diferença em comparação com Cordicepina = TP intracelular de proTide/TP intracelular de Cordicepina

[0431] Os Compostos A e B obtiveram os melhores resultados, com IC50 entre 3 e 150 vezes melhor do que os compostos de cordicepina A e B, os quais produziram concentrações intracelulares de 3'-dATP 3 a 56 vezes melhor do que a cordicepina. Tabela sumarizada de IC50 (Todos em μM) (FD) = vezes de diferença em relação ao controle Sumário dos níveis médios de 3'-dATP intracelular (μg/ml) (FD) = vezes de diferença em relação ao controle

[0432] NBTI, AK e EHNA não afetaram o 3'-dATP intracelular gerado pelos três compostos da invenção testados, indicando que estes inibidores não interferem com o metabolismo pelo qual os compostos da invenção geram o agente ativo 3'-dATP dentro das linhagens de células de câncer hematológico usadas neste estudo. Uma vez que estes inibidores imitam os mecanismos de resistência conhecidos em câncer, estes resultados indicam que os compostos da invenção serão menos suscetíveis a mecanismos de resistência em câncer do que a cordicepina.

Claims (19)

1. Composto caracterizado por ter a fórmula (Ib): em que: W1 é -P(=O)(U)(V), em que U é -OAr e V é -NR4-CR1R2- C(=O)OR3; W2 é H; X é NH2; Z é H; Y é H; R1 e R2 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, -CH3 e -CH2CH(CH3)2; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6- 30arilC1-6alquila e C1-20alquila não substituída; R4 é H; e Ar é selecionado a partir do grupo que consiste em fenil e naftil, cada um dos quais sendo opcionalmente substituído, em que quando Ar é substituído, os substituintes são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em hidróxi, C1-6acila, C1-6acilóxi, nitro, amino, carboxila, C2-6éster, C1-6aldeído, ciano, C1-6alquilamino, diC1-6alquilamino, tiol, cloro, bromo, fluoro, iodo, C1- 6alquil, C2-6alquenil, C1-6alcóxiC1-6alquil, C1-6alcóxiC6-10aril, C5-7cicloalquil, C5-11cicloalquilC1-6alquil, C5-7cicloalquenil, C8-12cicloalquinil, C6-11arilC1-6alquil, C1-6alquilC6-11aril, C6- 11aril, C1-6fluoroalquil, C2-6fluoroalquenil, SO3H, SH e SR’, em que R’ é independentemente selecionado a partir de H, e o grupo consistindo em C1-20alquil, C6-30arilC1-6alquil, C2- 20alquenil, C1-20alcóxi, C1-20alcóxiC1-20alquil, C1-20alcóxiC6- 30aril, C2-20alquinil, C3-20cicloalquilC6-30aril, C6-30arilóxi e heterociclil de 5-20 membros, em que qualquer grupo heterociclil compreende pelo menos um heteroátomo selecionado a partir do grupo que consiste em N, O e S, ou um sal farmaceuticamente aceitável do composto de fórmula (Ib).

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto de fórmula (Ib) ser um composto de fórmula (II):

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por Ar ser isento de substituição.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por Ar ser substituído por um, dois, três, quatro ou cinco substituintes selecionados a partir de: halo, C1-C4-alquila, C1-C4-alcóxi, nitro e ciano.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por R2 ser metila.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por o átomo de C que traz R1 e R2 ter a mesma configuração absoluta que a L-alanina.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por R3 ser selecionado a partir do grupo que consiste em benzila e C1-20 alquila não substituída.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por R3 ser selecionado a partir do grupo que consiste em benzila, metila não substituída e n-pentila não substituída.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por R3 ser benzila.

10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto de fórmula (Ib) ser selecionado a partir de: 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi)fosforil) amino)propanoato de (2S)-benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) acetato de benzila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi)fosforil) amino)-4-metilpentanoato de (2S)-pentila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(naftalen-1-iloxi)fosforil) amino)-2-metilpropanoato de metila; 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(2-(3-etoxi-3-oxopropil) fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-benzila; 3’-Desoxiadenosino-5'-O-[fenil(benziloxi-L-alaninil)] fosfato; e 2-(((((2S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-hidroxi tetra-hidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-isopropila.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto de fórmula (Ib) ser 3’- Desoxiadenosino-5'-O-[fenil(benziloxi-L-alaninil)]fosfato.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto de fórmula (Ib) ser (Sp)-3’- Desoxiadenosino-5'-O-[fenil(benziloxi-L-alaninil)]fosfato.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto de fórmula (Ib) ser (Rp)-3’- Desoxiadenosino-5'-O-[fenil(benziloxi-L-alaninil)]fosfato.

14. Uso de um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13 caracterizado por ser para a fabricação de um medicamento para profilaxia ou tratamento de câncer.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado por o câncer ser selecionado a partir do grupo que consiste em: leucemia, linfoma, mieloma múltiplo, câncer de pulmão (incluindo câncer de pulmão de células não pequenas e câncer de pulmão de células pequenas), câncer de fígado, câncer de mama, câncer de bexiga, câncer de próstata, câncer de cabeça e pescoço, neuroblastoma, sarcoma (incluindo sarcoma de Ewing), carcinoma da tiroide, câncer de pele (incluindo melanoma), carcinoma de células escamosas oral, câncer de bexiga, tumor de células de Leydig, câncer das vias biliares, tais como colangiocarcinoma ou câncer do duto biliar, câncer de pâncreas, câncer de cólon, câncer colorretal e cânceres ginecológicos, incluindo câncer de ovário, câncer do endométrio.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado por o câncer ser leucemia ou linfoma.

17. Uso, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado por a leucemia ser selecionada a partir do grupo que compreende leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia promielocítica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mieloide crônica, leucemia linfocítica crônica, leucemia monoblástica, leucemia de células pilosas, linfoma de Hodgkin e linfoma não-Hodgkin.

18. Uso, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado por a leucemia ser leucemia linfoblástica aguda.

19. Composição farmacêutica caracterizada por compreender um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13 em combinação com um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.