BR112017007011B1

BR112017007011B1 - METHYL-PIPERIDINE COMPOUNDS, PHARMACEUTICALLY ACCEPTABLE COMPOSITION INCLUDING IT AND ITS USE

Info

Publication number: BR112017007011B1
Application number: BR112017007011-1A
Authority: BR
Inventors: Matthew Joseph Fisher; Steven Lee Kuklish; Peter Rudolph Manninen; Katherine Marie Partridge; Matthew Allen Schiffler; Alan M. Warshawsky; Jeremy Schulenburg York
Original assignee: Eli Lilly And Company
Priority date: 2014-10-29
Filing date: 2015-10-22
Publication date: 2023-05-23

Abstract

COMPOSTOS DE METIL-PIPERIDINA, COMPOSIÇÃO FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEL QUE O COMPREENDE E SEU USO. A presente invenção proporciona compostos de Fórmula (1), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, fórmula (1), em que R, R1 e G são conforme descritos neste documento; métodos de preparar os compostos; e uso dos compostos para tratar a dor e/ou a inflamação associadas com a artrite ou a osteoartrite.METHYL-PIPERIDINE COMPOUNDS, PHARMACEUTICALLY ACCEPTABLE COMPOSITION INCLUDING IT AND THEIR USE. The present invention provides compounds of Formula (1), or a pharmaceutically acceptable salt thereof, formula (1), wherein R, R1 and G are as described herein; methods of preparing the compounds; and use of the compounds to treat pain and/or inflammation associated with arthritis or osteoarthritis.

Description

[001] A presente invenção refere-se a novos compostos; a com posições farmacêuticas compreendendo os compostos; a métodos de utilizar os compostos para tratar a dor e/ou a inflamação associadas com a artrite; e a intermediários e processos úteis na síntese dos compostos.[001] The present invention relates to new compounds; pharmaceutical compositions comprising the compounds; to methods of using the compounds to treat pain and/or inflammation associated with arthritis; and to intermediates and processes useful in synthesizing the compounds.

[002] A artrite envolve a inflamação das articulações e está fre quentemente acompanhada por dor e rigidez. A osteoartrite, a forma mais comum de artrite, é uma doença degenerativa complexa das articulações, caracterizada por destruição progressiva de cartilagem articular; estruturas periarticulares que incluem os ossos, a sinóvia, e os tecidos das articulações fibrosos associados; e graus variados de inflamação. As terapias com fármacos existentes, que utilizam fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (NSAIDs) e inibidores da ciclo- oxigenase-2 (inibidores da COX-2), podem reduzir a dor associada com a osteoartrite, porém podem ser somente moderadamente efetivas ao longo do tempo e cada uma tem considerações de ris- co/benefício variáveis.[002] Arthritis involves inflammation of the joints and is often accompanied by pain and stiffness. Osteoarthritis, the most common form of arthritis, is a complex degenerative joint disease characterized by progressive destruction of joint cartilage; periarticular structures that include the bones, synovium, and associated fibrous joint tissues; and varying degrees of inflammation. Existing drug therapies, which use nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and cyclooxygenase-2 inhibitors (COX-2 inhibitors), may reduce the pain associated with osteoarthritis but may be only moderately effective over the long term. over time, and each has varying risk/benefit considerations.

[003] Os NSAIDs e os inibidores da COX-2 reduzem a inflamação e a dor através da inibição das enzimas COX-2. Em resposta aos estímulos pró-inflamatórios, as enzimas COX-2 metabolizam o ácido araquidônico até prostaglandina H2 (PGH2). A PGH2 é adicionalmente metabolizada por uma variedade de enzimas até outros eicosanoides, incluindo a prostaglandina E2 (PGE2), a prostaglandina I2 (PGI2), a prostaglandina F2α (PGF2α), a prostaglandina D2 (PGD2), e o trombo- xano A2 (TXA2). Sabe-se que estes metabólitos induzem efeitos fisiológicos e patofisiológicos. Acredita-se que um desequilíbrio da PGI2 e do TXA2 mediado por fármacos possa explicar por que os NSAIDs e os inibidores da COX-2 produzem efeitos colaterais gastrointestinais e cardiovasculares deletérios. Consequentemente, estas classes de fármacos podem ser contraindicadas para muitos pacientes devido a condições cardiovasculares e/ou gastrointestinais preexistentes ou emergentes. Adicionalmente, os pacientes podem se tornar refratários ao longo do tempo a tratamentos com fármacos específicos.[003] NSAIDs and COX-2 inhibitors reduce inflammation and pain by inhibiting COX-2 enzymes. In response to pro-inflammatory stimuli, COX-2 enzymes metabolize arachidonic acid to prostaglandin H2 (PGH2). PGH2 is further metabolized by a variety of enzymes to other eicosanoids, including prostaglandin E2 (PGE2), prostaglandin I2 (PGI2), prostaglandin F2α (PGF2α), prostaglandin D2 (PGD2), and thromboxane A2 ( TXA2). These metabolites are known to induce physiological and pathophysiological effects. It is thought that a drug-mediated imbalance of PGI2 and TXA2 may explain why NSAIDs and COX-2 inhibitors produce deleterious gastrointestinal and cardiovascular side effects. Consequently, these drug classes may be contraindicated for many patients due to pre-existing or emerging cardiovascular and/or gastrointestinal conditions. Additionally, patients may become refractory over time to specific drug treatments.

[004] Dos metabólitos de ácidos araquidônicos, a PGE2 foi identi ficada como um mediador importante de condições associadas com a osteoartrite; por exemplo, a febre, a dor e a inflamação. A prostaglan- dina E2 é especificamente produzida através do metabolismo da PGH2 pela prostaglandina E2 sintase-1 microssômica (mPGES-1). Acredita- se que inibir seletivamente a mPGES-1 possa proporcionar uma nova opção de tratamento para pacientes que sofram de artrite.[004] Of the arachidonic acid metabolites, PGE2 has been identified as an important mediator of conditions associated with osteoarthritis; for example, fever, pain, and inflammation. Prostaglandin E2 is specifically produced through the metabolism of PGH2 by microsomal prostaglandin E2 synthase-1 (mPGES-1). It is believed that selectively inhibiting mPGES-1 may provide a new treatment option for patients suffering from arthritis.

[005] A publicação WO 2013/146970 divulga compostos de qui- nolina trissubstituídos e sugere que os compostos divulgados possam ser úteis para o tratamento de doenças inflamatórias inter alia. Entretanto, esta publicação não divulga os compostos como reivindicados neste pedido.[005] Publication WO 2013/146970 discloses tri-substituted quinoline compounds and suggests that the disclosed compounds may be useful for the treatment of inter alia inflammatory diseases. However, this publication does not disclose the compounds as claimed in this application.

[006] Permanece uma necessidade por opções adicionais para tratar a inflamação e aliviar a dor associada com a artrite. A presente invenção proporciona novos compostos que inibem a mPGES-1 e que podem ser benéficos para o tratamento de pacientes sofrendo de artrite e osteoartrite.[006] There remains a need for additional options to treat the inflammation and alleviate the pain associated with arthritis. The present invention provides new compounds which inhibit mPGES-1 and which may be beneficial for the treatment of patients suffering from arthritis and osteoarthritis.

[007] A presente invenção proporciona compostos de acordo com a Fórmula 1, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis,

[007] The present invention provides compounds according to Formula 1, or pharmaceutically acceptable salts thereof,

[008] onde R1 é H ou -CH3; R é selecionado a partir de:

[008] where R1 is H or -CH3; R is selected from:

[009] G é selecionado a partir de:

[009] G is selected from:

[0010] A presente invenção proporciona compostos de acordo com a Fórmula 2, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis:

[0010] The present invention provides compounds according to Formula 2, or pharmaceutically acceptable salts thereof:

[0011] onde: R1 é H ou -CH3; R é selecionado a partir de:

[0011] where: R1 is H or -CH3; R is selected from:

[0012] G é selecionado a partir de:

[0012] G is selected from:

[0013] A presente invenção também proporciona compostos de acordo com a Fórmula 1 ou 2, ou seus sais farmaceuticamente aceitá- veis, onde R1 é -CH3.[0013] The present invention also provides compounds according to Formula 1 or 2, or pharmaceutically acceptable salts thereof, where R1 is -CH3.

[0014] Para os compostos preferidos de Fórmulas 1 ou 2, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, R é selecionado a partir de:

[0014] For preferred compounds of Formulas 1 or 2, or their pharmaceutically acceptable salts, R is selected from:

[0015] Para os compostos mais preferidos de Fórmulas 1 ou 2, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, R é selecionado a partir de:

[0015] For more preferred compounds of Formulas 1 or 2, or pharmaceutically acceptable salts thereof, R is selected from:

[0016] Para os compostos ainda mais preferidos de Fórmulas 1 ou 2, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, R é selecionado a partir de:

[0016] For even more preferred compounds of Formulas 1 or 2, or pharmaceutically acceptable salts thereof, R is selected from:

[0017] Para os compostos preferidos de Fórmulas 1 ou 2, ou os seus sais farmacêuticos, G é:

[0017] For preferred compounds of Formulas 1 or 2, or pharmaceutical salts thereof, G is:

[0018] A presente invenção também proporciona um composto de acordo com a Fórmula 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0018] The present invention also provides a compound according to Formula 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[0019] Em uma modalidade, os compostos de Fórmulas 1, 2, ou 3 são proporcionados como uma espécie neutra. Em outra modalidade, os compostos são proporcionados como sais farmaceuticamente aceitáveis. Em uma forma de sal preferida, o composto de Formula 3 é proporcionado como sal de cloridrato.[0019] In one embodiment, the compounds of Formulas 1, 2, or 3 are provided as a neutral species. In another embodiment, the compounds are provided as pharmaceutically acceptable salts. In a preferred salt form, the compound of Formula 3 is provided as the hydrochloride salt.

[0020] A presente invenção também proporciona uma composição farmaceuticamente aceitável que inclui um composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um de um veículo, diluente, ou excipiente far- maceuticamente aceitável.[0020] The present invention also provides a pharmaceutically acceptable composition that includes a compound according to Formulas 1, 2, or 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and at least one of a pharmaceutical carrier, diluent, or excipient. pharmaceutically acceptable.

[0021] A presente invenção também proporciona um método de tratar um paciente que necessita de tratamento para dor associada com a artrite ou a osteoartrite. O método compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de uma composição farmaceutica- mente aceitável que inclui um composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um de um veículo, diluente, ou excipiente farmaceuticamente aceitável.[0021] The present invention also provides a method of treating a patient in need of treatment for pain associated with arthritis or osteoarthritis. The method comprises administering to the patient an effective amount of a pharmaceutically acceptable composition comprising a compound according to Formulas 1, 2, or 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and at least one of a carrier, diluent, or pharmaceutically acceptable excipient.

[0022] A presente invenção também proporciona um método de tratar um paciente que necessita de tratamento para artrite ou osteoar- trite. Em uma forma, a presente invenção proporciona um método de tratar um paciente quanto aos sinais e/ou sintomas de osteoartrite. O método compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de um composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3, ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo.[0022] The present invention also provides a method of treating a patient in need of treatment for arthritis or osteoarthritis. In one form, the present invention provides a method of treating a patient for signs and/or symptoms of osteoarthritis. The method comprises administering to the patient an effective amount of a compound according to Formulas 1, 2, or 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[0023] A presente invenção também proporciona um método de tratar um paciente que necessita de tratamento para inflamação asso-ciada com a artrite ou a osteoartrite. O método compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de uma composição farmaceu- ticamente aceitável que inclui um composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um de um veículo, diluente, ou excipiente farmaceuticamente aceitável.[0023] The present invention also provides a method of treating a patient in need of treatment for inflammation associated with arthritis or osteoarthritis. The method comprises administering to the patient an effective amount of a pharmaceutically acceptable composition which includes a compound according to Formulas 1, 2, or 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and at least one of a carrier, diluent, or pharmaceutically acceptable excipient.

[0024] A presente invenção também proporciona um método de tratar um paciente que necessita de tratamento para dor associada com a artrite. O método compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de um composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. A presente invenção adicionalmente proporciona um método de tratar um paciente quanto à dor associada com a osteoartrite. O método compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de um composto em conformidade com o composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.[0024] The present invention also provides a method of treating a patient in need of treatment for pain associated with arthritis. The method comprises administering to the patient an effective amount of a compound according to Formulas 1, 2, or 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The present invention further provides a method of treating a patient for pain associated with osteoarthritis. The method comprises administering to the patient an effective amount of a compound according to the compound according to Formulas 1, 2, or 3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[0025] A presente invenção proporciona um composto de acordo com as Fórmulas 1, 2, ou 3 para uso como um medicamento. O medi-camento ou o composto pode ser usado para terapia. A terapia pode incluir o tratamento do paciente quanto à artrite ou à osteoartrite. Em uma modalidade, a terapia pode ser o tratamento de dor ou inflamação associada com a artrite ou a osteoartrite.[0025] The present invention provides a compound according to Formulas 1, 2, or 3 for use as a medicament. The medicament or compound can be used for therapy. Therapy may include treating the patient for arthritis or osteoarthritis. In one embodiment, the therapy can be the treatment of pain or inflammation associated with arthritis or osteoarthritis.

[0026] A presente invenção também proporciona o uso de um composto para a fabricação de um medicamento para tratar artrite ou osteoartrite. Em uma forma, o medicamento é usado para tratar a dor ou a inflamação associada com a artrite ou a osteoartrite.[0026] The present invention also provides the use of a compound for the manufacture of a medicament for treating arthritis or osteoarthritis. In one form, the drug is used to treat pain or inflammation associated with arthritis or osteoarthritis.

[0027] Conforme usados neste documento, os termos "tratando" ou "tratar" incluem interromper ou reduzir a gravidade de um sintoma ou distúrbio existente, em particular, a dor e a inflação, associado com a artrite ou a osteoartrite.[0027] As used herein, the terms "treating" or "treating" include interrupting or reducing the severity of an existing symptom or disorder, in particular, pain and swelling, associated with arthritis or osteoarthritis.

[0028] Conforme usado neste documento, o termo "paciente" refe re-se a um mamífero, tal como porquinhos-da-índia, ratos, cães, gatos, vacas, cavalos, ovelhas, cabras ou seres humanos; ou a aves domés-ticas, tais como galinhas ou patos. O paciente preferido é um mamífero, mais preferivelmente um ser humano.[0028] As used herein, the term "patient" refers to a mammal, such as guinea pigs, rats, dogs, cats, cows, horses, sheep, goats or humans; or domestic birds such as chickens or ducks. The preferred patient is a mammal, most preferably a human.

[0029] Os compostos exemplificados da presente invenção podem ser formulados em composições farmacêuticas em conformidade com as práticas aceitas. Os exemplos dos veículos, excipientes, e diluentes farmaceuticamente aceitáveis podem ser encontrados em Remington’s Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co. Easton Pa. 1990. Os exemplos não limitativos incluem os que seguem: amido, açúcares, manitol, e derivados de sílica; agentes de ligação, tais como carboximetil celulose e outros derivados de celulose, monoestearato de glicerol; veículos adsorvíveis, tais como caulim e bentonita; e lubri-ficantes, tais como talco, cálcio, e estearato de magnésio, e polietil gli- cóis sólidos. Em uma forma, a formulação farmacêutica inclui 20% de Captisol em tampão de fosfato a 25 mM pH 2.[0029] The exemplified compounds of the present invention may be formulated into pharmaceutical compositions in accordance with accepted practices. Examples of pharmaceutically acceptable carriers, excipients, and diluents can be found in Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co. Easton Pa. 1990. Non-limiting examples include the following: starch, sugars, mannitol, and silica derivatives; binding agents such as carboxymethyl cellulose and other cellulose derivatives, glycerol monostearate; adsorbable carriers such as kaolin and bentonite; and lubricants, such as talc, calcium, and magnesium stearate, and solid polyethyl glycols. In one form, the pharmaceutical formulation includes 20% Captisol in 25 mM phosphate buffer pH 2.

[0030] As composições farmacêuticas podem ser formuladas co mo um comprimido ou cápsula para a administração oral ou como uma solução injetável. O comprimido, a cápsula, ou a solução incluirá um composto da presente invenção em uma quantidade eficaz para tratar um paciente que necessita de tratamento.[0030] The pharmaceutical compositions may be formulated as a tablet or capsule for oral administration or as an injectable solution. The tablet, capsule, or solution will include a compound of the present invention in an amount effective to treat a patient in need of treatment.

[0031] Conforme usado neste documento, o termo "quantidade eficaz" refere-se à quantidade ou dose de um composto da invenção, ou de um sal farmaceuticamente aceitável dele, que, com uma admi-nistração única ou múltipla da dose ao paciente, proporciona o efeito desejado, tal como a redução ou a eliminação da dor e/ou da inflamação do paciente sob diagnose ou tratamento.[0031] As used herein, the term "effective amount" refers to the amount or dose of a compound of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, which, upon single or multiple administration of the dose to the patient, provides the desired effect, such as reduction or elimination of pain and/or inflammation in the patient under diagnosis or treatment.

[0032] Uma quantidade eficaz pode ser prontamente determinada pelo diagnosticador responsável usando técnicas conhecidas ou ob-servando os resultados obtidos sob circunstâncias análogas. Na de-terminação da quantidade eficaz para um paciente, diversos fatores podem ser considerados pelo diagnosticador responsável, incluindo, porém não limitados à: espécie de mamífero, seu tamanho, idade, e saúde geral; gravidade dos sintomas; resposta do paciente individual; modo de administração; características de biodisponibilidade do com-posto de Fórmula 1, 2, ou 3 ou da sua forma de sal farmaceuticamente aceitável, como um produto de fármaco formulado no regime de dose selecionado; uso de medicação simultânea; e outras circunstâncias relevantes.[0032] An effective amount can be readily determined by the responsible diagnostician using known techniques or by observing results obtained under similar circumstances. In determining the effective amount for a patient, several factors may be considered by the responsible diagnostician, including, but not limited to: species of mammal, its size, age, and general health; severity of symptoms; individual patient response; mode of administration; bioavailability characteristics of the compound of Formula 1, 2, or 3 or its pharmaceutically acceptable salt form, as a formulated drug product at the selected dose regimen; simultaneous medication use; and other relevant circumstances.

[0033] Em uma modalidade, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 0,0005 mg/kg de peso do corpo a cerca de 100 mg/kg. Mais prefe- rivelmente, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 0,001 mg/kg a cerca de 50 mg/kg. Ainda mais preferivelmente, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 0,001 mg/kg a cerca de 20 mg/kg.[0033] In one embodiment, the effective amount can be from about 0.0005 mg/kg of body weight to about 100 mg/kg. More preferably, the effective amount can be from about 0.001 mg/kg to about 50 mg/kg. Even more preferably, the effective amount can be from about 0.001 mg/kg to about 20 mg/kg.

[0034] Um composto da presente invenção pode ser combinado com outros métodos de tratamento e/ou agentes terapêuticos adicionais. De preferência, um composto da presente invenção pode ser combinado com outros agentes que também sejam efetivos para o tratamento de artrite ou osteoartrite. Os exemplos destes agentes terapêuticos adicionais incluem: NSAIDs ou inibidores da COX-2, tais como ibuprofeno, aspirina, acetaminofem, celecoxib, naproxem, e ceto- profeno; opioides, tais como oxicodona, e fentanil; e corticosteroides, tais como hidrocortisona, prednisolona, e prednisona.[0034] A compound of the present invention can be combined with other methods of treatment and/or additional therapeutic agents. Preferably, a compound of the present invention can be combined with other agents that are also effective for treating arthritis or osteoarthritis. Examples of these additional therapeutic agents include: NSAIDs or COX-2 inhibitors, such as ibuprofen, aspirin, acetaminophen, celecoxib, naproxem, and ketoprofen; opioids, such as oxycodone, and fentanyl; and corticosteroids, such as hydrocortisone, prednisolone, and prednisone.

[0035] O composto da invenção e o(s) agente(s) terapêutico(s) adicional(is) podem ser administrados juntos, através da mesma rota e dispositivo de distribuição, tal como uma pílula individual, comprimido em cápsula, ou solução; ou administrados separadamente, ao mesmo tempo em dispositivos de distribuição separados, ou administrados sequencialmente.[0035] The compound of the invention and the additional therapeutic agent(s) may be administered together, via the same route and delivery device, such as a single pill, capsule tablet, or solution ; either administered separately, at the same time in separate dispensing devices, or administered sequentially.

[0036] O composto da presente invenção pode ser proporcionado como um sal farmaceuticamente aceitável. O "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se aos sais do composto da invenção considerados ser aceitáveis para uso clínico e/ou veterinário. Os sais farmaceutica- mente aceitáveis e a metodologia comum para prepara-los são bastante conhecidos na técnica. Ver, p.ex., P. Stahl, e col., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, (VCHA/Wiley- VCH, 2002); S.M. Berge, e col., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, No. 1, janeiro de 1977.[0036] The compound of the present invention can be provided as a pharmaceutically acceptable salt. The "pharmaceutically acceptable salt" refers to those salts of the compound of the invention considered to be acceptable for clinical and/or veterinary use. Pharmaceutically acceptable salts and common methodology for preparing them are well known in the art. See, eg, P. Stahl, et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, (VCHA/Wiley-VCH, 2002); S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, No. 1, January 1977.

[0037] O composto da presente invenção, ou um sal dele, pode ser preparado por uma variedade de procedimentos conhecidos na técnica, alguns dos quais são ilustrados nos Esquemas, Preparações, e Exemplos abaixo. Alguém de habilidade comum na técnica reconhece que as etapas sintéticas específicas para cada uma das rotas descritas podem ser combinadas em diferentes modos, ou em combinação com etapas de diferentes esquemas, para preparar os compostos da invenção, ou os sais deles. Os produtos de cada etapa nos esquemas abaixo podem ser recuperados ou purificados por métodos con-vencionais, incluindo a extração, a evaporação, a precipitação, a cro- matografia, a cromatografia de fluido supercrítico, a filtração, a trituração, e a cristalização.[0037] The compound of the present invention, or a salt thereof, can be prepared by a variety of procedures known in the art, some of which are illustrated in the Schemes, Preparations, and Examples below. One of ordinary skill in the art recognizes that the specific synthetic steps for each of the described routes can be combined in different ways, or in combination with steps from different schemes, to prepare the compounds of the invention, or salts thereof. The products of each step in the schemes below can be recovered or purified by conventional methods, including extraction, evaporation, precipitation, chromatography, supercritical fluid chromatography, filtration, trituration, and crystallization.

[0038] Os isômeros, os enantiômeros, ou os diastereoisômeros individuais podem ser separados ou resolvidos por alguém de habilidade comum na técnica, em qualquer ponto conveniente na síntese dos compostos de Fórmula 1, por métodos tais como as técnicas de cristalização seletiva ou a cromatografia quiral (Ver, por exemplo, J. Jacques, e col., "Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley e Sons, Inc., 1981, e E.L. Eliel e S.H. Wilen," Stereochemistry of Organic compostos", Wiley-Interscience, 1994). Além disso, os intermediários descritos nas preparações a seguir contêm grupos protetores de nitrogênio e oxigênio. As condições de proteção e desproteção são bastante conhecidas para o técnico versado e são descritas na literatura (Ver, por exemplo, "Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis", Quarta Edição, de Peter G.M. Wuts e Theodora W. Greene, John Wiley e Sons, Inc. 2007).[0038] The individual isomers, enantiomers, or diastereoisomers can be separated or resolved by one of ordinary skill in the art, at any convenient point in the synthesis of the compounds of Formula 1, by methods such as selective crystallization techniques or chromatography chiral (See, for example, J. Jacques, et al., "Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981, and E.L. Eliel and S.H. Wilen, "Stereochemistry of Organic Compounds", Wiley- Interscience, 1994). In addition, the intermediates described in the preparations below contain nitrogen and oxygen protecting groups. Protective and deprotective conditions are well known to the skilled artisan and are described in the literature (See, for example, "Greene's Protective Groups in Organic Synthesis", Fourth Edition, by Peter G.M. Wuts and Theodora W. Greene, John Wiley and Sons , Inc. 2007).

[0039] Os reagentes e os materiais de partida estão, em geral, prontamente disponíveis para alguém de habilidade comum na técnica. Outros podem ser preparados por técnicas padrões de química orgânica e heterocíclica e pelos procedimentos descritos na Preparação e nos Exemplos abaixo.[0039] Reagents and starting materials are, in general, readily available to one of ordinary skill in the art. Others can be prepared by standard techniques of organic and heterocyclic chemistry and by the procedures described in the Preparation and Examples below.

[0040] A representação de uma ligação com uma linha através de la, conforme ilustrado abaixo, indica o ponto de união do substituinte ao restante da molécula.

[0040] The representation of a bond with a line through it, as illustrated below, indicates the point of attachment of the substituent to the rest of the molecule.

[0041] As abreviações usadas neste documento são definidas de acordo com Aldrichimica Acta, Vol. 17, No. 1, 1984. As outras abrevia-ções são definidas como se segue: "δ" refere-se à parte por milhão de força de campo decrescente a partir do tetrametilsilano; "ATCC" refere- se à Coleta de cultura do tipo americano; "BOP" refere-se ao hexafluo- rfosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)tris(dimetilamino)fosfônio; "BSA" refere- se à Soro Albumina Bovina; "CDI" refere-se ao 1,1’-carbonildi-imidazol; "DCC" refere-se à 1,3-diciclo-hexilcarbodi-imida; "DCM" refere-se ao diclorometano; "DIC" refere-se à 1,3-di-isopropilcarbodi-imida; "DMF" refere-se à dimetilformamida; "DMSO" refere-se ao sulfóxido de dimeti- la; "EDCI" refere-se ao cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3- etilcarbodi-imida; "EDTA" refere-se ao ácido etilenodiaminotetracético; "ee" refere-se ao excesso de enantiômero; "EIA" refere-se ao imuno- ensaio de enzima; "EIMS" refere-se à espectrometria de massa ionizada de elétrons; "ESMS" refere-se à espectrometria de massa de ele- tropulverização; "EtOAc" refere-se ao acetato de etila; "EtOH" refere- se ao etanol ou álcool etílico; "No. do Ex." refere-se ao Número do Exemplo; "HATU" refere-se ao 3-óxido hexafluorfosfato de (1- [bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio); "HBTU" refere-se ao hexafluorfosfato de (1H-benzotriazol-1- ilóxi)(dimetilamino)-N,N-dimetilmetanimínio; "HOAT" refere-se ao 1- hidróxi-7-azobenzotriazol; "HOBT" refere-se ao hidrato de 1- hidroxilbenzotriazol; "IC50" refere-se à concentração de um agente que produz 50% da resposta inibitória máxima possível para este agente; "i-PrOH" refere-se ao isopropanol ou álcool isopropílico; "LPS" refere-se ao lipopolissacarídeo; "MeOH" refere-se ao metanol; "min" refere-se a minutos; NSAIDs" refere-se aos fármacos anti-inflamatórios não es- teroidais; "PBS" refere-se à Solução Salina Tamponada com Fosfato; "PGE2" refere-se à prostaglandina E2; "PGH2" refere-se à prostaglan- dina H2; "PGI2" refere-se à prostaglandina I2; "PyBOP" refere-se ao (hexafluorfosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfônio); "PyBrOP" refere-se ao hexafluorfosfato de bromo(tri- pirrolidinil)fosfônio; "rhIL-1β" refere-se à interleucina humana recombi- nante 1β; "SCF" refere-se ao fluido supercrítico; "SFC" refere-se à cromatografia de fluido supercrítico; "TBME" refere-se ao éter t-butil éter metílico; "THF" refere-se ao tetraidrofurano; e "tR" refere-se ao tempo de retenção.[0041] The abbreviations used in this document are defined according to Aldrichimica Acta, Vol. 17, No. 1, 1984. Other abbreviations are defined as follows: "δ" refers to the part per million of decreasing field strength from tetramethylsilane; "ATCC" refers to the American Type Culture Collection; "BOP" refers to (benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate; "BSA" refers to Bovine Serum Albumin; "CDI" refers to 1,1'-carbonyldiimidazole; "DCC" refers to 1,3-dicyclohexylcarbodiimide; "DCM" refers to dichloromethane; "DIC" refers to 1,3-diisopropylcarbodiimide; "DMF" refers to dimethylformamide; "DMSO" refers to dimethyl sulfoxide; "EDCI" refers to 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride; "EDTA" refers to ethylenediaminetetraacetic acid; "ee" refers to the excess of enantiomer; "EIA" refers to enzyme immunoassay; "EIMS" refers to electron ion mass spectrometry; "ESMS" refers to Electrospray Mass Spectrometry; "EtOAc" refers to ethyl acetate; "EtOH" refers to ethanol or ethyl alcohol; "Ex's No." refers to the Example Number; "HATU" refers to (1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium)-3-oxide hexafluorophosphate; "HBTU" refers to (1H-benzotriazol-1-yloxy)(dimethylamino)-N,N-dimethylmethaniminium hexafluorophosphate; "HOAT" refers to 1-hydroxy-7-azobenzotriazole; "HOBT" refers to 1-hydroxylbenzotriazole hydrate; "IC50" refers to the concentration of an agent that produces 50% of the maximum possible inhibitory response for that agent; "i-PrOH" refers to isopropanol or isopropyl alcohol; "LPS" refers to lipopolysaccharide; "MeOH" refers to methanol; "min" refers to minutes; NSAIDs" refers to non-steroidal anti-inflammatory drugs; "PBS" refers to Phosphate Buffered Saline; "PGE2" refers to prostaglandin E2; "PGH2" refers to prostaglandin H2; "PGI2" refers to prostaglandin I2; "PyBOP" refers to (benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate); "PyBrOP" refers to bromo(tripyrrolidinyl)phosphonium hexafluorophosphate; "rhIL-1β " refers to recombinant human interleukin 1β; "SCF" refers to supercritical fluid; "SFC" refers to supercritical fluid chromatography; "TBME" refers to t-butyl ether methyl ether; "THF " refers to tetrahydrofuran; and "tR" refers to retention time.

[0042] Métodos Gerais de LCMS. Todas as análises são efetuadas usando um sistema de Cromatografia Líquida (LC) 1200 Infinity Series da Agilent, consistindo em um degaseificador 1260 HiP (G4225A), Bomba Binária 1260 (G1312B), autoamostrador 1290 (G4226A), compartimento de coluna com termostato 1290 (G1316C) e um Detector de Arranjo de Diodo 1260 (G4212B) acoplado a um detector de espec- trometria de massa (MS) quadripolar individual 6150 da Agilent. A MS é operada com uma fonte de ionização de eletropulverização (ESI) no modo de íons tanto positivos quanto negativos. A pressão do nebuli- zador é ajustada para 344,74 kPa (50 psi), a temperatura e o fluxo do gás de secagem para 350°C e 12,0 L/min, respectivamente. As tensões capilares usadas são 4000 V no modo positivo e 3500 V no modo negativo. A aquisição de dados é efetuada com o software Chemsta- tion da Agilent.[0042] General Methods of LCMS. All analyzes are performed using an Agilent 1200 Infinity Series Liquid Chromatography (LC) system, consisting of a 1260 HiP Degasser (G4225A), 1260 Binary Pump (G1312B), 1290 Autosampler (G4226A), 1290 Thermostat Column Compartment ( G1316C) and a 1260 Diode Array Detector (G4212B) coupled to an Agilent 6150 quadrupole single mass spectrometry (MS) detector. The MS is operated with an electrospray ionization (ESI) source in either positive or negative ion mode. Nebulizer pressure is set to 344.74 kPa (50 psi), temperature and drying gas flow to 350°C and 12.0 L/min, respectively. The capillary voltages used are 4000 V in positive mode and 3500 V in negative mode. Data acquisition is performed using Agilent's Chemstation software.

[0043] Método de HPLC 1. As análises são realizadas em uma co luna ChiralPak AD-3R da Daicel (comprimento de 100 mm, diâmetro interno de 4,6 mm, tamanho de partícula de 3 μm). A fase móvel usada é: A2 = Água com bicarbonato de amônio a 10 mM, ajustada para pH 9 com hidróxido de amônio; e B2 = acetonitrila. A corrida é efetuada em uma temperatura de 25 °C e uma vazão de 1,5 mL/min, com uma elui- ção de gradiente de 50 % a 95 % de (B2) durante 3,0 min, seguida por uma retenção de 3,0 min em 95 % de (B2). A aquisição de UV (DAD) é efetuada a 40 Hz, com uma faixa de varredura de 190-400 nm (por etapa de 5 nm). Uma separação de fluxo a 1:1 é usada antes do detector de MS. A faixa de aquisição de MS é ajustada para 100-800 m/z, com uma extensão de etapa de 0,2 m/z em ambos os modos de polaridade. A tensão do fragmentador é ajustada para 70 (ESI+) ou 120 (ESI-), o Ganho para 0,40 (ESI+) ou 1,00 (ESI-) e o limite de contagem de íons para 4000 (ESI+) ou 1000 (ESI-). O tempo de ciclo de MS total é 0,15 s/ciclo.[0043] HPLC method 1. Analyzes are carried out on a Daicel ChiralPak AD-3R column (length 100 mm, internal diameter 4.6 mm, particle size 3 μm). The mobile phase used is: A2 = Water with 10 mM ammonium bicarbonate, adjusted to pH 9 with ammonium hydroxide; and B2 = acetonitrile. The run is performed at a temperature of 25 °C and a flow rate of 1.5 mL/min, with a gradient elution of 50 % to 95 % (B2) for 3.0 min, followed by a retention of 3.0 min in 95% of (B2). UV acquisition (DAD) is performed at 40 Hz, with a scan range of 190-400 nm (per 5 nm step). A 1:1 flow split is used before the MS detector. The MS acquisition range is set to 100-800 m/z, with a step length of 0.2 m/z in both polarity modes. The shredder voltage is set to 70 (ESI+) or 120 (ESI-), the Gain to 0.40 (ESI+) or 1.00 (ESI-), and the ion count threshold to 4000 (ESI+) or 1000 ( ESI-). The total MS cycle time is 0.15 sec/cycle.

[0044] Método de SFC 1. As análises são realizadas em uma co luna ChiralPak OJ-H da Daicel (comprimento de 100 mm, diâmetro in-terno de 4,6 mm, tamanho de partícula de 5 μm). A fase móvel é: 8 % de (NH3 a 20 mM em i-PrOH) e 92 % de CO2(scf) em uma pressão de 10000 kPa (100 bar). A corrida é efetuada em uma temperatura de 35 °C e uma vazão de 3 mL/minuto. A aquisição de UV (DAD) é efetuada em um comprimento de ondas de 220 nm.[0044] SFC method 1. Analyzes are performed on a Daicel ChiralPak OJ-H column (length 100 mm, internal diameter 4.6 mm, particle size 5 μm). The mobile phase is: 8% (20 mM NH3 in i-PrOH) and 92% CO2(scf) at a pressure of 10000 kPa (100 bar). The run is carried out at a temperature of 35 °C and a flow rate of 3 mL/minute. UV acquisition (DAD) is performed at a wavelength of 220 nm.

[0045] Método de SFC 2. As análises são realizadas em uma co luna ChiralPak AS-H da Daicel (comprimento de 100 mm, diâmetro interno de 4,6 mm, tamanho de partícula de 5 μm). A fase móvel é: 20 % de (NH3 a 20 mM em i-PrOH) e 80 % de CO2(scf) em uma pressão de 10000 kPa (100 bar). A corrida é efetuada em uma temperatura de 35 °C e uma vazão de 5 mL/minuto. A aquisição de UV (DAD) é efetuada em um comprimento de ondas de 220 nm.[0045] SFC method 2. Analyzes are performed on a Daicel ChiralPak AS-H column (length 100 mm, internal diameter 4.6 mm, particle size 5 μm). The mobile phase is: 20% (20 mM NH3 in i-PrOH) and 80% CO2(scf) at a pressure of 10000 kPa (100 bar). The run is carried out at a temperature of 35 °C and a flow rate of 5 mL/minute. UV acquisition (DAD) is performed at a wavelength of 220 nm.

[0046] Os Esquemas que se seguem ilustram adicionalmente a invenção. Esquema 1

[0046] The following Schemes further illustrate the invention. scheme 1

[0047] No Esquema 1, Etapa 1, um grupo trifluormetil sulfonila é colocado sobre a piperidina para atuar como um grupo abandonador na reação subsequente da Etapa 2. O "PG" é um grupo protetor de-senvolvido para o grupo amino, tal como os carbamatos e as amidas. O produto da Etapa 1 é então submetido à carbonilação usando um catalisador de paládio para dar o produto de éster da Etapa 2. A ligação dupla na tetra-hidropiridina pode ser reduzida sob condições de hidrogenação. Na Etapa 3, subetapa 2, a amina da piperidina pode ser desprotegida sob condições ácidas. O produto de piperidina da Etapa 3 pode então ser reagido com um grupo G substituído com halogênio, sob condições adequadas para a substituição aromática nucleofílica dar o produto da Etapa 4. Por exemplo, uma base inorgânica, tal como o K2CO3, ou uma base orgânica, tal como a N,N-di-isopropiletilamina, a piridina ou a trietilamina, pode ser usada para dar o produto da Etapa 4, subetapa 1. Alternativamente, o produto de piperidina da etapa 3 pode ser reagido com um N-óxido de quinolona, usando um agente ativador, tal como PyProp, para dar o produto da Etapa 4. A desproteção do grupo carbóxi da piperidina pode ser realizada sob condições padrão com uma base inorgânica, tal como o hidróxido de sódio ou o hidróxido de lítio aquosos, para dar o produto da Etapa 4, subetapa 2, ou sob condições ácidas usando o HCl a 4 M ou o ácido sulfúrico aquoso.

Etapa 5[0047] In Scheme 1, Step 1, a trifluoromethyl sulfonyl group is placed on the piperidine to act as a leaving group in the subsequent reaction of Step 2. The "PG" is a protective group developed for the amino group, such as carbamates and amides. The product from Step 1 is then subjected to carbonylation using a palladium catalyst to give the ester product from Step 2. The double bond in tetrahydropyridine can be reduced under hydrogenation conditions. In Step 3, substep 2, the piperidine amine can be deprotected under acidic conditions. The piperidine product from Step 3 can then be reacted with a halogen-substituted G group under conditions suitable for nucleophilic aromatic substitution to give the product from Step 4. For example, an inorganic base, such as K2CO3, or an organic base , such as N,N-diisopropylethylamine, pyridine, or triethylamine, can be used to give the product from Step 4, substep 1. Alternatively, the piperidine product from step 3 can be reacted with an N-oxide of quinolone, using an activating agent, such as PyProp, to give the product of Step 4. Deprotection of the piperidine carboxy group can be carried out under standard conditions with an inorganic base, such as aqueous sodium hydroxide or lithium hydroxide, to give the product of Step 4, substep 2, or under acidic conditions using 4M HCl or aqueous sulfuric acid.

Step 5

[0048] No Esquema 2, o produto de ácido piperidina carboxílico da Etapa 4 pode ser unido com uma amina apropriada, R-NH2, sob condi-ções de amidação, usando uma base orgânica, tal como a trietilamina ou a di-isopropiletilamina, um reagente de ligação tal como o EDCI, e um aditivo de ligação, tal como o HOBT, para dar os compostos da Etapa 5, subetapa 1. Alguém versado na técnica reconhecerá que existem vários métodos e reagentes para a formação de amida resultante da reação de ácidos carboxílicos e aminas. Por exemplo, a reação do composto de amina com um ácido carboxílico apropriado, na presença de um reagente de ligação, com ou sem uma base orgânica, pode proporcionar um composto de Fórmula 1. Os reagentes de ligação incluem as carbodi-imidas, tais como DCC, DIC, EDCI, ou um car- bonildi-imidazol, tal como o CDI. Os aditivos de ligação de amida, tais como HOBT e HOAt, também podem ser usados para intensificar a reação. Adicionalmente, os sais de urônio ou fosfônio de ânions não nucleofílicos, tais como HBTU, HATU, BOP, PyBOP e PyBrOP, poderiam ser usados no lugar dos reagentes de ligação mais tradicionais. Um aditivo, tal como DMAP, pode ser usado para intensificar a reação. O produto da Etapa 5, subetapa 1, pode então ser desprotegido, se necessário, sob condições padrão, com uma base inorgânica, tal como o hidróxido de sódio ou o hidróxido de lítio aquosos, em um solvente, tal como o MeOH e o THF, para dar os compostos de Fórmula 1.[0048] In Scheme 2, the piperidine carboxylic acid product from Step 4 can be coupled with an appropriate amine, R-NH2, under amidation conditions, using an organic base, such as triethylamine or diisopropylethylamine, a coupling reagent such as EDCI, and a coupling additive such as HOBT to give the compounds of Step 5, substep 1. One skilled in the art will recognize that there are various methods and reagents for the amide formation resulting from the reaction of carboxylic acids and amines. For example, reaction of the amine compound with an appropriate carboxylic acid in the presence of a linking reagent, with or without an organic base, can provide a compound of Formula 1. Linking reagents include the carbodiimides such as DCC, DIC, EDCI, or a carbonyldiimidazole such as CDI. Amide binding additives such as HOBT and HOAt can also be used to enhance the reaction. Additionally, uronium or phosphonium salts of non-nucleophilic anions such as HBTU, HATU, BOP, PyBOP and PyBrOP could be used in place of more traditional binding reagents. An additive such as DMAP can be used to enhance the reaction. The product from Step 5, substep 1 can then be deprotected, if necessary, under standard conditions, with an inorganic base, such as aqueous sodium hydroxide or lithium hydroxide, in a solvent, such as MeOH and THF , to give the compounds of Formula 1.

[0049] Um sal farmaceuticamente aceitável dos compostos da in venção, tal como um sal de cloridrato, pode ser formado, por exemplo, através de reação de uma base livre apropriada de Fórmula 1 e um ácido farmaceuticamente aceitável apropriado, tal como o ácido clorídrico, em um solvente adequado, tal como o éter dietílico, sob condições padrão. Adicionalmente, a formação de tais sais pode ocorrer simultaneamente com a desproteção de um grupo protetor de nitrogênio. A formação de tais sais é bem conhecida e apreciada na técnica. Ver, por exemplo, Gould, P.L., "Salt selection for basic drugs," International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., e col. "Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities," Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); e Berge, S.M., e col., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).[0049] A pharmaceutically acceptable salt of the compounds of the invention, such as a hydrochloride salt, may be formed, for example, by reaction of an appropriate free base of Formula 1 and an appropriate pharmaceutically acceptable acid, such as hydrochloric acid , in a suitable solvent, such as diethyl ether, under standard conditions. Additionally, the formation of such salts can occur simultaneously with the deprotection of a nitrogen protecting group. The formation of such salts is well known and appreciated in the art. See, for example, Gould, P.L., "Salt selection for basic drugs," International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., et al. "Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities," Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).

[0050] As Preparações e os Exemplos que se seguem ilustram adicionalmente a invenção. Preparação 1 3,3-Dimetil-4-(((trifluormetil)sulfonil)óxi)-3,6-di-hidropiridina-1(2H)- carboxilato de terc-butila

[0050] The following Preparations and Examples further illustrate the invention. Preparation 1 tert-Butyl 3,3-dimethyl-4-(((trifluoromethyl)sulfonyl)oxy)-3,6-dihydropyridine-1(2H)carboxylate

[0051] Sob uma atmosfera de nitrogênio, resfriar uma solução de di-isopropilamina (260 mL, 1,85 mol) em THF (1,0 L) a -20°C, depois adicionar uma solução de n-butil-lítio (2,50 M em hexanos, 650 mL, 1,60 mol), gota a gota, durante 30 minutos. Deixar a mistura aquecer até -10°C e agitar por 1 hora. Resfriar a mistura até -74°C e adicionar uma solução de 3,3-dimetil-4-oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (260 g, 1,14 mol) em THF (1,0 L mL), gota a gota, durante 60 minutos. Agitar a mistura a -74°C por 2 horas, e então adicionar uma solução de N-fenilbis(trifluormetanossulfonimida) (430 g, 1,20 mol) em THF (1,0 L). Aquecer a mistura até 0°C e agitar por 2 horas. Deixar a mistura aquecer até a temperatura ambiente e agitar durante a noite. Terminar a reação com o NH4Cl aquoso saturado (1,0 L); diluir com água (2,0 L); separar as camadas; e extrair a camada aquosa com EtOAc (2 x 2 L). Combinar os extratos orgânicos; secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar o filtrado sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 15% de TBME em hexanos, para proporcionar o composto do título como um óleo laranja em pureza de cerca de 75% em massa, conforme estimado por RMN H1 (430 g, 78%). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,05 (s, 6H), 1,40 (s, 9H), 3,36 (s, 2H), 4,02 (d, J = 3,4 Hz, 2H), 5,82 (br s, 1H). Preparação 2 3,3-Dimetil-2,6-di-hidropiridina-1,4-dicarboxilato de O1 -terc-butil-O4- metila

[0051] Under a nitrogen atmosphere, cool a solution of diisopropylamine (260 mL, 1.85 mol) in THF (1.0 L) to -20°C, then add a solution of n-butyllithium ( 2.50 M in hexanes, 650 mL, 1.60 mol), dropwise, over 30 minutes. Allow the mixture to warm to -10°C and stir for 1 hour. Cool the mixture to -74 °C and add a solution of tert-butyl 3,3-dimethyl-4-oxopiperidine-1-carboxylate (260 g, 1.14 mol) in THF (1.0 L mL) dropwise drop for 60 minutes. Stir the mixture at -74°C for 2 hours, then add a solution of N-phenylbis(trifluoromethanesulfonimide) (430 g, 1.20 mol) in THF (1.0 L). Warm the mixture to 0°C and stir for 2 hours. Allow the mixture to warm to room temperature and stir overnight. Terminate the reaction with saturated aqueous NH4Cl (1.0 L); dilute with water (2.0 L); separate the layers; and extract the aqueous layer with EtOAc (2 x 2 L). Combine the organic extracts; dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrating the filtrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 15% TBME in hexanes, to provide the title compound as an orange oil in about 75% by mass purity, as estimated. by H1 NMR (430 g, 78%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.05 (s, 6H), 1.40 (s, 9H), 3.36 (s, 2H), 4.02 (d, J = 3.4 Hz , 2H), 5.82 (brs, 1H). Preparation 2 O1-tert-butyl-O4-methyl 3,3-dimethyl-2,6-dihydropyridine-1,4-dicarboxylate

[0052] Combinar o acetato de paládio(II) (4,40 g, 20,0 mmol), o 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (13,3 g, 22,8 mmol), o 3,3-dimetil-4- (((trifluormetil)sulfonil)óxi)-3,6-di-hidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc- butila (72,0 g, 150 mmol), a acetonitrila anidra (850 mL), o MeOH anidro (570 mL), e a trietilamina (36,0 mL, 245 mmol) em uma autoclave de 2 L PARR® adaptada com um agitador mecânico. Vedar a autoclave. Purgar e então pressurizar a autoclave com monóxido de carbono até 689 kPa. Aquecer a mistura até 65°C por 2,25 horas; resfriar a mis- tura até a temperatura ambiente; e ventilar cuidadosamente a autoclave. (Atenção! Gás venenoso!). Concentrar sob pressão reduzida para dar o material bruto. Combinar este material com cinco outras bateladas de material preparado por um procedimento análogo em escalas similares. Submeter o material combinado à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 20% de TBME em hexa- nos, para dar o composto do título como um óleo amarelo em pureza de cerca de 83% em massa (260 g, 88%). MS (m/z): 214 (M - t-Bu + 2H)+. Preparação 3 3,3-Dimetilpiperidina-1,4-dicarboxilato de (±)-O1-terc-butil-O4-metila

[0052] Combine palladium(II) acetate (4.40 g, 20.0 mmol), 1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene (13.3 g, 22.8 mmol), 3.3 tert-butyl-dimethyl-4-(((trifluoromethyl)sulfonyl)oxy)-3,6-dihydropyridine-1(2H)-carboxylate (72.0 g, 150 mmol), anhydrous acetonitrile (850 mL) , anhydrous MeOH (570 mL), and triethylamine (36.0 mL, 245 mmol) in a 2 L PARR® autoclave fitted with a mechanical stirrer. Seal the autoclave. Purge and then pressurize the autoclave with carbon monoxide to 689 kPa. Heat the mixture to 65°C for 2.25 hours; cool the mixture to room temperature; and carefully vent the autoclave. (Warning! Poisonous gas!). Concentrate under reduced pressure to give the raw material. Combine this material with five other batches of material prepared by an analogous procedure at similar scales. Subject the combined material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 20% TBME in hexanes, to give the title compound as a yellow oil in purity of about 83% by mass (260 g, 88%). MS (m/z): 214 (M - t-Bu + 2H)+. Preparation 3 (±)-O1-tert-butyl-O4-methyl 3,3-dimethylpiperidine-1,4-dicarboxylate

[0053] Suspender o paládio (10% em peso sobre carbono, 5,4 g, 5,1 mmol) em MeOH (700 mL), em seguida adicionar uma solução de 3,3-dimetil-2,6-di-hidropiridina-1,4-dicarboxilato de O1-terc-butil-O4- metila (130 g, 396 mmol) dissolvido em MeOH (700 mL) em um reator PARR® de 2,25 L. Vedar o reator e purgá-lo primeiro com gás nitrogênio, em seguida com gás hidrogênio. Pressurizar o reator até 414 kPa com hidrogênio e agitar a mistura na temperatura ambiente por 1,5 hora. Liberar a pressão e filtrar a mistura para remover o catalisador. Combinar o filtrado com o obtido a partir de outra reação essencialmente idêntica e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título como um óleo amarelo em pureza de cerca de 85% em massa (240 g, 95%). MS (m/z): 216 (M - t-Bu + 2H)+. Preparação 4 Cloridrato de 3,3-dimetilpiperidina-4-carboxilato de (±)-metila

[0053] Suspend palladium (10% by weight on carbon, 5.4 g, 5.1 mmol) in MeOH (700 mL), then add a solution of 3,3-dimethyl-2,6-dihydropyridine O1-tert-butyl-O4-methyl-1,4-dicarboxylate (130 g, 396 mmol) dissolved in MeOH (700 mL) in a 2.25 L PARR® reactor. Seal the reactor and purge it first with nitrogen gas, then with hydrogen gas. Pressurize the reactor to 414 kPa with hydrogen and stir the mixture at room temperature for 1.5 hours. Release the pressure and filter the mixture to remove the catalyst. Combine the filtrate with that obtained from another essentially identical reaction and concentrate under reduced pressure to give the title compound as a yellow oil in about 85 wt% purity (240 g, 95%). MS (m/z): 216 (M - t-Bu + 2H)+. Preparation 4 (±)-Methyl 3,3-Dimethylpiperidine-4-carboxylate Hydrochloride

[0054] Adicionar HCl (solução a 4,0 M em 1,4-dioxana, 2,0 L, 8,0 mol) a uma solução de 3,3-dimetilpiperidina-1,4-dicarboxilato de O1- terc-butil-O4-metila (240 g, 752 mmol) em 1,4-dioxana (500 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente durante a noite e concentrar sob pressão reduzida. Diluir o resíduo com TBME (500 mL) e coletar os sólidos resultantes por filtração. Enxaguar a torta de filtro com TBME (2 x 400 mL) e secar o sólido em um forno a vácuo a 35°C durante a noite para dar o composto do título como um sólido branco (144 g, 92%). MS (m/z): 172 (M + H)+. Preparação 5 (4S2z313zDimetil∑1∑(8zmetilz2zquinolil)piperidinaz4zcarboxilato de(z)z metila

[0054] Add HCl (4.0 M solution in 1,4-dioxane, 2.0 L, 8.0 mol) to a solution of O1-tert-butyl 3,3-dimethylpiperidine-1,4-dicarboxylate -O4-methyl (240 g, 752 mmol) in 1,4-dioxane (500 mL). Stir the resulting mixture at room temperature overnight and concentrate under reduced pressure. Dilute the residue with TBME (500 mL) and collect the resulting solids by filtration. Rinse the filter cake with TBME (2 x 400 mL) and dry the solid in a vacuum oven at 35 °C overnight to give the title compound as a white solid (144 g, 92%). MS (m/z): 172 (M + H)+. Preparation 5 (z)z methyl (4S2z313zDimethyl∑1∑(8zmethylz2zquinolyl)piperidinez4zcarboxylate

[0055] Adicionar o K2CO3 (210 g, 1,52 mol) a uma mistura de clori- drato de 3,3-dimetilpiperidina-4-carboxilato de metila (144 g, 693 mmol) e 2-cloro-8-metilquinolina (125 g, 704 mmol) em DMSO (1,4 L). Agitar a mistura resultante durante a noite a 131 ± 1°C. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente; filtrar para remover os sólidos; coletar o filtrado; diluir o filtrado com água (2 L); depois extrair com EtOAc (2 x 3 L). Lavar os extratos orgânicos combinados com água (3 x 1,5 L); secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar e concentrar o filtrado sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 25% a 30% (10% de TBME em DCM) em hexanos, para proporcionar o racemato do composto do título. Dissolver este material em MeOH (7,5 L) e filtrar. Submeter o material à SFC quiral (Chiralpak OJ-H, 50 mm x 250 mm x 5 μm) usando 15% (0,2% de dimetiletilamina em i-PrOH) em CO2(scf) como a fase móvel, a uma vazão de 400 g/min, pela injeção de 5 mL de solução a cada 95 segundos até todo o material ter sido submetido. Para cada injeção, coletar a primeira fração a eluir (tR = 2,57 min pelo Método de SFC 1). Combinar as frações coletadas com aquelas de uma reação anterior preparada de forma similar para proporcionar 98 g de cloridrato de 3,3-dimetilpiperidina-4-carboxilato de metila bruto. Concentrar a mistura sob pressão reduzida e recristalizar o material a partir de EtOH quente (1,38 L). Coletar os cristais e secar o material cristalino em um forno a vácuo a 40°C, durante a noite, para dar o composto do título como um sólido cristalino branco (156 g, 43% de rendimento em uma base proporcional à batelada). MS (m/z): 313 (M + H)+, [α]20D-45°(c 0,21, DCM). ee => 99%, conforme determinado pelo Método de SFC 1. Preparação 6 Ácido (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxílico

[0055] Add K2CO3 (210 g, 1.52 mol) to a mixture of methyl 3,3-dimethylpiperidine-4-carboxylate hydrochloride (144 g, 693 mmol) and 2-chloro-8-methylquinoline ( 125 g, 704 mmol) in DMSO (1.4 L). Stir the resulting mixture overnight at 131 ± 1°C. Cool the mixture to room temperature; filter to remove solids; collect the filtrate; dilute the filtrate with water (2 L); then extract with EtOAc (2 x 3 L). Wash the combined organic extracts with water (3 x 1.5 L); dry over Na2SO4; filter; collect and concentrate the filtrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to silica gel flash chromatography, eluting with a gradient of 25% to 30% (10% TBME in DCM) in hexanes, to provide the racemate of the title compound. Dissolve this material in MeOH (7.5 L) and filter. Submit the material to chiral SFC (Chiralpak OJ-H, 50 mm x 250 mm x 5 μm) using 15% (0.2% dimethylethylamine in i-PrOH) in CO2(scf) as the mobile phase, at a flow rate of 400 g/min, by injecting 5 mL of solution every 95 seconds until all material has been submitted. For each injection, collect the first fraction to elute (tR = 2.57 min by SFC Method 1). Combine the collected fractions with those from a similarly prepared previous reaction to provide 98 g of crude methyl 3,3-dimethylpiperidine-4-carboxylate hydrochloride. Concentrate the mixture under reduced pressure and recrystallize the material from hot EtOH (1.38 L). Collect the crystals and dry the crystalline material in a vacuum oven at 40°C overnight to give the title compound as a white crystalline solid (156 g, 43% yield on a batch proportional basis). MS (m/z): 313 (M + H)+, [α]20D-45°(c 0.21, DCM). ee => 99% as determined by SFC Method 1. Preparation 6 (-)-(4S)-3,3-Dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid

[0056] Tratar o (4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4- carboxilato de metila (154 g, 493 mmol) com ácido sulfúrico (10% v/v em água, 2,31 L, 2,75 mol) e refluxar a mistura durante a noite. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente e adicionar o NaOH (50% em peso em água) até que o pH atinja 13. Adicionar TBME (500 mL) para proporcionar uma mistura trifásica. Classificar as camadas de cima para baixo como: "Camada A", "Camada B" e "Camada C". Remover a Camada C (a camada do fundo). Adicionar água (600 mL) às Cama- das A e B e separar a camada aquosa das camadas orgânicas. Reservar as camadas orgânicas (A e B). Combinar a camada aquosa com a Camada C. Extrair as camadas aquosas combinadas com TBME (500 mL); separar as camadas; e reservar os extratos orgânicos. Adicionar HCl (5,0 M) à fase aquosa até o pH ser 6,5. Extrair a mistura aquosa resultante com TBME (2 x 400 mL). Combinar todos os extratos orgânicos (incluindo as Camadas A e B); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar e concentrar o filtrado sob pressão reduzida para dar o composto do título como um sólido branco em 96% de pureza (145 g, 95%). MS (m/z): 299 (M + H)+. [α]20D-59,6°(c 3,12, CH3OH). Preparação 7 (±)-2-((Benzilóxi)metil)-2,3-di-hidro-4H-piran-4-ona

[0056] Treat methyl (4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylate (154 g, 493 mmol) with sulfuric acid (10% v/v in water, 2.31 L, 2.75 mol) and reflux the mixture overnight. Cool the mixture to room temperature and add the NaOH (50% by weight in water) until the pH reaches 13. Add TBME (500 mL) to provide a three-phase mixture. Sort the layers from top to bottom as: "Layer A", "Layer B" and "Layer C". Remove Layer C (the background layer). Add water (600 mL) to Layers A and B and separate the aqueous layer from the organic layers. Reserve the organic layers (A and B). Combine the aqueous layer with Layer C. Extract the combined aqueous layers with TBME (500 mL); separate the layers; and reserve the organic extracts. Add HCl (5.0 M) to the aqueous phase until the pH is 6.5. Extract the resulting aqueous mixture with TBME (2 x 400 mL). Combine all organic extracts (including Layers A and B); dry over MgSO4; filter; collect and concentrate the filtrate under reduced pressure to give the title compound as a white solid in 96% purity (145 g, 95%). MS (m/z): 299 (M + H)+. [α]20D=59.6°(c 3.12, CH3OH). Preparation 7 (±)-2-((Benzyloxy)methyl)-2,3-dihydro-4H-pyran-4-one

[0057] Adicionar uma solução de ZnCl2 em THF (0,5 mmol M, 1,21 L, 607 mmol) a uma solução gelada (0°C) de (E)-1-metóxi-3- (trimetilsilil)óxi-1,3-butadieno (95% puro, 100 g, 551 mmol) e (benziló- xi)acetaldeído (97% puro, 80 mL, 551,370 mmol) em tolueno (551 mL), durante 90 minutos, enquanto mantem-se a temperatura interna da mistura de reação abaixo de 10°C. Deixar a mistura aquecer até a temperatura ambiente e agitar durante a noite. Dividir a mistura de reação em duas porções iguais; efetuar os procedimentos que se seguem sobre cada porção. Adicionar o ácido trifluoracético (35 mL, 457 mmol) em quatro porções. Após 20 minutos, concentrar a mistura resultante sob pressão reduzida; diluir com EtOAc; adicionar NaHCO3 saturado em excesso; filtrar para remover os sólidos; coletar o filtrado; separar e coletar a camada orgânica. Lavar a solução orgânica com NaCl aquoso saturado; isolar os extratos orgânicos; secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Combinar o material resultante de cada uma das porções previamente separadas. Submeter o material resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 20% a 50% de EtOAc em he- xanos, para dar o composto do título como um óleo laranja em uma pureza de 92% (96 g, 73%). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) δ 7,40-7,28 (m, 6H), 5,42 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,65-4,56 (m, 3H), 3,74-3,67 (m, 2H), 2,75 (dd, J = 16,8, 14,3 Hz, 1H), 2,42 (dd, J = 16,9, 3,2 Hz, 1H). Preparação 8 (±)-2-(Benziloximetil)tetra-hidropiran-4-ona

[0057] Add a solution of ZnCl2 in THF (0.5 mmol M, 1.21 L, 607 mmol) to an ice-cold (0°C) solution of (E)-1-methoxy-3-(trimethylsilyl)oxy- 1,3-butadiene (95% pure, 100 g, 551 mmol) and (benzyloxy)acetaldehyde (97% pure, 80 mL, 551.370 mmol) in toluene (551 mL) for 90 minutes while maintaining the internal temperature of the reaction mixture below 10°C. Allow the mixture to warm to room temperature and stir overnight. Divide the reaction mixture into two equal portions; carry out the following procedures on each portion. Add trifluoroacetic acid (35 mL, 457 mmol) in four portions. After 20 minutes, concentrate the resulting mixture under reduced pressure; dilute with EtOAc; add excess saturated NaHCO3; filter to remove solids; collect the filtrate; separate and collect the organic layer. Wash the organic solution with saturated aqueous NaCl; isolating the organic extracts; dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Combine the material resulting from each of the previously separated portions. Subject the resulting material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 20% to 50% EtOAc in hexanes, to give the title compound as an orange oil in 92% purity (96 g, 73 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.28 (m, 6H), 5.42 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.65-4.56 (m, 3H) , 3.74-3.67 (m, 2H), 2.75 (dd, J = 16.8, 14.3 Hz, 1H), 2.42 (dd, J = 16.9, 3.2 Hz , 1H). Preparation 8 (±)-2-(Benzyloxymethyl)tetrahydropyran-4-one

[0058] Agitar uma mistura de EtOAc (880 mL), (±)-2- ((benzilóxi)metil)-2,3-di-hidro-4H-piran-4-ona (96 g, 0,440 mol), trieti- lamina (123 mL, 0,882 mol), e paládio (10% sobre carbono, 4,68 g, 4,40 mmol), sob uma atmosfera de hidrogênio, na temperatura ambiente, por 73 horas. Filtrar a mistura através de terra diatomácea; enxaguar a torta de filtro com EtOAc (250 mL); e, sequencialmente, lavar o filtrado com HCl aquoso (0,1 M), NaHCO3 aquoso saturado, e NaCl aquoso saturado. Secar a camada orgânica sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título como um material amarelo claro (81,4 g, 84%). LC/MS (ESI+): 221 [M+H]+, 238 [M+NH4]+, 243 [M+Na]+. Preparação 9 (2 S ,4 R )-2-(Benziloximetil)tetra-hidropiran-4-ol

[0058] Stir a mixture of EtOAc (880 mL), (±)-2-((benzyloxy)methyl)-2,3-dihydro-4H-pyran-4-one (96 g, 0.440 mol), triethyl - lamin (123 mL, 0.882 mol), and palladium (10% on carbon, 4.68 g, 4.40 mmol), under an atmosphere of hydrogen, at room temperature, for 73 hours. Filter the mixture through diatomaceous earth; rinsing the filter cake with EtOAc (250 mL); and sequentially washing the filtrate with aqueous HCl (0.1 M), saturated aqueous NaHCO 3 , and saturated aqueous NaCl. Dry the organic layer over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure to give the title compound as a pale yellow material (81.4g, 84%). LC/MS (ESI+): 221 [M+H]+, 238 [M+NH4]+, 243 [M+Na]+. Preparation 9 (2S,4R)-2-(Benzyloxymethyl)tetrahydropyran-4-ol

[0059] Resfriar uma solução de (±)-2-(benziloximetil)tetra- hidropiran-4-ona (40,6 g, 184 mmol) em THF (1,08 L) até -78°C. Adici-onar uma solução de LiAlH4 (1,0 M em THF, 240 mL, 240 mmol), gota a gota, durante 15 minutos. Deixar a mistura aquecer até 0°C após a adição estar completa e adicionar lentamente água (8,4 mL), gota a gota. Após agitar a mistura por 5 minutos, adicionar uma solução de NaOH (15% em massa em água, 8,4 mL) e agitar por uns 5 minutos adicionais. Então, adicionar água (3 x 8,4 mL) e deixar a mistura aquecer até a temperatura ambiente. Após 30 minutos, filtrar a suspensão para remover os sólidos e concentrar o filtrado sob pressão reduzida para proporcionar o composto do título como um óleo incolor. Enxaguar os sólidos uma vez com THF; filtrar; e concentrar o filtrado sob pressão reduzida. Combinar este material com aqueles obtidos a partir de reações anteriormente realizadas essencialmente de acordo com o mesmo processo, começando com 40 g, 22 g e 45 g de (±)-2- (benziloximetil)tetra-hidropiran-4-ona. Dissolver o material combinado em i-PrOH (637 mL). Submeter o material à SFC quiral (Chiralpak ASH, 50 mm x 150 mm x 5 μm) usando 25% de i-PrOH em CO2(scf) como a fase móvel, a uma vazão de 300 g/minuto, pela injeção de 1,35 g de solução a cada 114 segundos, até que todo o material tenha sido injetado. Para cada injeção, coletar a primeira fração a eluir (isômero principal). Combinar todas as frações coletadas para dar o composto do título em > 99% de ee, conforme determinado pelo Método de SFC 2 (62,8 g, rendimento de 42%, em uma base proporcional à batelada). LC/MS (ESI): 223 [M+H]+, 240 [M+NH4]+, 245 [M+Na]+, 467 [2M+Na]+. Preparação 10 ((2 S ,4 R )-2-(Benziloximetil)tetra-hidropiran-4-il)metanossulfonato if^l θ o

[0059] Cool a solution of (±)-2-(benzyloxymethyl)tetrahydropyran-4-one (40.6 g, 184 mmol) in THF (1.08 L) to -78 °C. Add a solution of LiAlH4 (1.0 M in THF, 240 mL, 240 mmol) dropwise over 15 minutes. Allow the mixture to warm to 0°C after addition is complete and slowly add water (8.4 mL) dropwise. After stirring the mixture for 5 minutes, add a solution of NaOH (15% by mass in water, 8.4 mL) and stir for an additional 5 minutes. Then, add water (3 x 8.4 mL) and allow the mixture to warm to room temperature. After 30 minutes, filter the suspension to remove solids and concentrate the filtrate under reduced pressure to provide the title compound as a colorless oil. Rinse the solids once with THF; filter; and concentrating the filtrate under reduced pressure. Combine this material with those obtained from reactions previously carried out in essentially the same procedure, starting with 40 g, 22 g, and 45 g of (±)-2-(benzyloxymethyl)tetrahydropyran-4-one. Dissolve the combined material in i-PrOH (637 mL). Submit the material to chiral SFC (Chiralpak ASH, 50 mm x 150 mm x 5 μm) using 25% i-PrOH in CO2(scf) as the mobile phase, at a flow rate of 300 g/minute, by injecting 1, 35 g of solution every 114 seconds until all material has been injected. For each injection, collect the first fraction to elute (major isomer). Combine all collected fractions to give the title compound at >99% ee as determined by SFC Method 2 (62.8 g, 42% yield, on a batch proportional basis). LC/MS (ESI): 223 [M+H]+, 240 [M+NH4]+, 245 [M+Na]+, 467 [2M+Na]+. Preparation 10 ((2 S ,4 R )-2-(Benzyloxymethyl)tetrahydropyran-4-yl)methanesulfonate if^l θ o

[0060] Gota a gota, adicionar uma solução de cloreto de metanos- sulfonila (11,7 mL, 150,6 mmol) em DCM (70 mL) a uma mistura de (2S,4R)-2-(benziloximetil)tetra-hidropiran-4-ol (31 g, 139,5 mmol), DCM (1,40 L), e N,N-di-isopropiletilamina (73,0 mL, 418,4 mmol), a 0°C. Deixar a mistura aquecer até a temperatura ambiente e agita-la durante a noite. Em seguida adicionar uma solução de cloreto de me- tanossulfonila (0,537 mL, 6,98 mmol) em DCM (5 mL) e agitar a mistura por 5 minutos na temperatura ambiente. Resfriar a mistura até 0°C, vertê-la em água; separar; e coletar a camada orgânica. Lavar a camada orgânica com água (500 mL); combinar a camada orgânica com as camadas/os extratos orgânicos obtidos a partir de outras reações essencialmente idênticas. Secar as soluções orgânicas combinadas sobre MgSO4 ; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar o filtrado sob pres-são reduzida para dar o composto do título como um óleo laranja claro (84,7 g, 97% de rendimento, em uma base proporcional à batelada). RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ 7,36-7,24 (m, 5H), 4,86-4,77 (m, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,96 (dd, J = 7,6, 4,4 Hz, 1H), 3,60-3,54 (m, 1H), 3,483,36 (m, 3H), 3,18 (s, 3H), 2,05 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 1,98 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 1,58 (app qd, J = 12,0, 4,8 Hz, 1H), 1,40 (app q, J = 11,8 Hz, 1H). Preparação 11 Cloridrato de ((2 S ,4 S )-4-aminotetra-hidro-2H-piran-2-il)metanol

[0060] Dropwise add a solution of methanesulfonyl chloride (11.7 mL, 150.6 mmol) in DCM (70 mL) to a mixture of (2S,4R)-2-(benzyloxymethyl)tetra- hydropyran-4-ol (31 g, 139.5 mmol), DCM (1.40 L), and N,N-diisopropylethylamine (73.0 mL, 418.4 mmol), at 0 °C. Allow the mixture to warm to room temperature and stir overnight. Then add a solution of methanesulfonyl chloride (0.537 mL, 6.98 mmol) in DCM (5 mL) and stir the mixture for 5 minutes at room temperature. Cool the mixture to 0°C, pour it into water; to separate; and collect the organic layer. Wash the organic layer with water (500 mL); combining the organic layer with organic layers/extracts obtained from other essentially identical reactions. Dry the combined organic solutions over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrating the filtrate under reduced pressure to give the title compound as a light orange oil (84.7 g, 97% yield, on a batch proportional basis). 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 7.36-7.24 (m, 5H), 4.86-4.77 (m, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.96 ( dd, J = 7.6, 4.4 Hz, 1H), 3.60-3.54 (m, 1H), 3.483.36 (m, 3H), 3.18 (s, 3H), 2.05 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 1.98 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 1.58 (app qd, J = 12.0, 4.8 Hz, 1H), 1.40 (app q, J = 11.8 Hz, 1H). Preparation 11 ((2 S ,4 S )-4-Aminotetrahydro-2H-pyran-2-yl)methanol Hydrochloride

[0061] Adicionar a azida de sódio (12,85 g, 191,7 mmol) a uma solução de ((2S,4R)-2-(benziloximetil)tetra-hidropiran-4- il)metanossulfonato (32,0 g, 106,5 mmol) em DMF (304 mL). Aquecer a mistura resultante até 100°C e agitá-la por 4 horas. Resfriar a mistura de reação até a temperatura ambiente. Verter a mistura em água (400 mL) e então extrair com EtOAc (2 x 400 mL). Combinar os extratos orgânicos e lavar com NaCl aquoso saturado (3 x 200 mL). Secar os extratos orgânicos sobre MgSO4; filtrar; e coletar o filtrado. Concentrar o filtrado sob pressão reduzida até cerca de 100 mL de volume total. Dissolver a mistura resultante em EtOAc (700 mL) e adicioná-la a um vaso de PARR® contendo PtO2 (2,7 g, 12 mmol) e EtOAc (700 mL). Purgar o vaso com nitrogênio; em seguida, pressurizá-lo com hidrogê- nio até 414 kPa. Agitar a mistura por 4 horas na temperatura ambiente. Filtrar a mistura e concentrar o filtrado incolor sob pressão reduzida para proporcionar 23,2 g de um óleo incolor. Combinar com 36,2 g de material de uma reação anterior preparado essencialmente pelo mesmo procedimento. Dissolver o material combinado em EtOH (600 mL) e adicionar o HCl (37% em peso em H2O, 50 mL). Adicionar a mistura resultante a um vaso de PARR® que contém o Pd (10% sobre carbono, 10,0 g, 9,40 mmol) e EtOH (600 mL). Purgar o reator com nitrogênio e pressurizá-lo com hidrogênio até 414 kPa. Agitar a mistura na tempe-ratura ambiente por 1 hora. Filtrar a mistura; coletar o filtrado; e con-centrar o filtrado incolor sob pressão reduzida para dar o composto do título como um óleo escuro, espesso, em pureza de cerca de 72% (54,2 g, 85%). LC/MS (ESI): 132 [M+H] + . Preparação 12 3,3-Dimetil-1-[4-(trifluormetil)fenil]piperidina-4-carboxilato de (±)-metila

[0061] Add sodium azide (12.85 g, 191.7 mmol) to a solution of ((2S,4R)-2-(benzyloxymethyl)tetrahydropyran-4-yl)methanesulfonate (32.0 g, 106.5 mmol) in DMF (304 mL). Heat the resulting mixture to 100°C and stir it for 4 hours. Cool the reaction mixture to room temperature. Pour the mixture into water (400 mL) and then extract with EtOAc (2 x 400 mL). Combine the organic extracts and wash with saturated aqueous NaCl (3 x 200 mL). Dry the organic extracts over MgSO4; filter; and collect the filtrate. Concentrate the filtrate under reduced pressure to about 100 mL total volume. Dissolve the resulting mixture in EtOAc (700 mL) and add it to a PARR® vessel containing PtO 2 (2.7 g, 12 mmol) and EtOAc (700 mL). Purge the vessel with nitrogen; then pressurize it with hydrogen to 414 kPa. Stir the mixture for 4 hours at room temperature. Filter the mixture and concentrate the colorless filtrate under reduced pressure to provide 23.2 g of a colorless oil. Combine with 36.2 g of material from a previous reaction prepared by essentially the same procedure. Dissolve the combined material in EtOH (600 mL) and add the HCl (37 wt% in H 2 O, 50 mL). Add the resulting mixture to a PARR® vessel containing the Pd (10% on carbon, 10.0 g, 9.40 mmol) and EtOH (600 mL). Purge the reactor with nitrogen and pressurize it with hydrogen to 414 kPa. Stir the mixture at room temperature for 1 hour. Filter the mixture; collect the filtrate; and concentrating the colorless filtrate under reduced pressure to give the title compound as a dark, thick oil in about 72% purity (54.2 g, 85%). LC/MS (ESI): 132 [M+H] + . Preparation 12 (±)-Methyl 3,3-dimethyl-1-[4-(trifluoromethyl)phenyl]piperidine-4-carboxylate

[0062] Adicionar o K2CO3 (460 mg, 3,33 mmol) a uma mistura de cloridrato de 3,3-dimetilpiperidina-4-carboxilato de metila (300 mg, 1,44 mmol), 1-flúor-4-(trifluormetil)benzeno (475 mg, 2,89 mmol) e DMSO (2 mL). Agitar a mistura resultante a 130°C por 2 dias. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente e agitar por 3 dias. Submeter o material resultante à cromatografia flash de fase reversa sobre C18 sílica-gel, eluindo com um gradiente de 10% a 100% de acetonitrila (0,1% de ácido fórmico) em água (0,1% de ácido fórmico), para dar o composto do título como um óleo amarelo (113 mg, 25%). MS (m/z): 316 (M + H)+. Preparação 13 Ácido (±)-3,3-dimetil-1-[4-(trifluormetil)fenil]piperidina-4-carboxílico.

[0062] Add K2CO3 (460 mg, 3.33 mmol) to a mixture of methyl 3,3-dimethylpiperidine-4-carboxylate hydrochloride (300 mg, 1.44 mmol), 1-fluoro-4-(trifluoromethyl )benzene (475 mg, 2.89 mmol) and DMSO (2 mL). Stir the resulting mixture at 130°C for 2 days. Cool the mixture to room temperature and stir for 3 days. Subject the resulting material to reverse phase flash chromatography on C18 silica gel, eluting with a gradient of 10% to 100% acetonitrile (0.1% formic acid) in water (0.1% formic acid), to give the title compound as a yellow oil (113 mg, 25%). MS (m/z): 316 (M + H)+. Preparation 13 (±)-3,3-Dimethyl-1-[4-(trifluoromethyl)phenyl]piperidine-4-carboxylic acid.

[0063] Adicionar o NaOH aquoso a 2 M (1 mL, 2 mmol) a uma mis tura de (±)-3,3-dimetil-1-[4-(trifluormetil)fenil]piperidina-4-carboxilato de metila (113 mg, 0,36 mmol), o MeOH (1 mL), e o THF (5 mL). Agitar a mistura resultante a 50°C durante a noite. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente, e adicionar o HCl (33% em peso em água) até o pH da mistura ser 3. Concentrar a mistura sob pressão reduzida para dar o composto do título como um sólido amarelo em 88% de pureza (123 mg, rendimento de 99%). MS (m/z): 302 (M + H)+. Preparação 14 Ácido (±)-3,3-dimetil-1-[5-(trifluormetil)pirimidin-2-il]piperidina-4- carbo- xílico

[0063] Add 2M aqueous NaOH (1 mL, 2 mmol) to a mixture of methyl (±)-3,3-dimethyl-1-[4-(trifluoromethyl)phenyl]piperidine-4-carboxylate ( 113 mg, 0.36 mmol), MeOH (1 mL), and THF (5 mL). Stir the resulting mixture at 50°C overnight. Cool the mixture to room temperature, and add the HCl (33% by weight in water) until the pH of the mixture is 3. Concentrate the mixture under reduced pressure to give the title compound as a yellow solid in 88% purity ( 123 mg, 99% yield). MS (m/z): 302 (M + H)+. Preparation 14 (±)-3,3-Dimethyl-1-[5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]piperidine-4-carboxylic acid

[0064] Adicionar a trietilamina (7,65 mL, 54,9 mmol) a uma mistura de cloridrato de 3,3-dimetilpiperidina-4-carboxilato de (±)-metila (8,55 g, 41,2 mmol), 2-cloro-5-(trifluormetil)pirimidina (5,0 g, 27,4 mmol), e acetonitrila (67 mL). Aquecer a mistura em aparelho de micro-ondas até 180°C por 1 hora; em seguida, resfriar a mistura até a temperatura ambiente; e concentrar sob pressão reduzida. Adicionar o MeOH (40 mL), o THF (80 mL), e o NaOH aquoso a 2 M (40 mL, 80 mmol). Agitar a mistura resultante por 2 dias a 50°C. Adicionar o NaOH aquoso a 2 M (45 mL, 90 mmol) e agitar a mistura resultante por 4 horas a 50°C. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente e, em seguida, adicionar o HCl (33% em peso em água) até o pH atingir 3. Concentrar sob pressão reduzida. Diluir com HCl aquoso a 1 N (100 mL) e extrair com EtOAc (2 x 100 mL). Lavar os extratos orgânicos combinados com salmoura (100 mL); secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (7,60 g, 61%). MS (m/z): 302 (M + H)+. Preparação 15 5,8-Dimetilquinolina-1-óxido

[0064] Add triethylamine (7.65 mL, 54.9 mmol) to a mixture of (±)-methyl 3,3-dimethylpiperidine-4-carboxylate hydrochloride (8.55 g, 41.2 mmol), 2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidine (5.0 g, 27.4 mmol), and acetonitrile (67 mL). Heat the mixture in a microwave oven to 180°C for 1 hour; then cool the mixture to room temperature; and concentrate under reduced pressure. Add the MeOH (40 mL), THF (80 mL), and 2M aqueous NaOH (40 mL, 80 mmol). Stir the resulting mixture for 2 days at 50°C. Add 2M aqueous NaOH (45 mL, 90 mmol) and stir the resulting mixture for 4 hours at 50 °C. Cool the mixture to room temperature and then add the HCl (33% by weight in water) until the pH reaches 3. Concentrate under reduced pressure. Dilute with 1N aqueous HCl (100 mL) and extract with EtOAc (2 x 100 mL). Wash the combined organic extracts with brine (100 mL); dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure to give the title compound (7.60 g, 61%). MS (m/z): 302 (M + H)+. Preparation 15 5,8-Dimethylquinoline-1-oxide

[0065] Adicionar o ácido 3-cloroperoxibenzóico (5,96 g, 24,1 mmol) a uma mistura de 5,8-dimetilquinolina (2 g, 12,1 mmol) e DCM (80 mL) mantida a 0°C. Após 1 hora, adicionar o Na2SO4 (5 g) e filtrar a mistura. Coletar o filtrado. Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente durante a noite. Diluir com DCM (100 mL); lavar com NaOH aquoso a 1 N (3 x 50 mL); secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar até a secura sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash de fase inversa sobre C18 sílica- gel, eluindo com um gradiente de 15% a 70% de acetonitrila (bicarbonato de amônio a 10 mM) em água (bicarbonato de amônio a 10 mM) para dar o composto do título (372 mg; 18%).MS (m/z): 327 (M + H)+. Preparação 16 1 -(5,8-Dimetil-2-quinolil)-3,3-dimetil-piperidina-4-carboxilato de (±)- metila.

[0065] Add 3-chloroperoxybenzoic acid (5.96 g, 24.1 mmol) to a mixture of 5,8-dimethylquinoline (2 g, 12.1 mmol) and DCM (80 mL) maintained at 0 °C. After 1 hour, add the Na2SO4 (5 g) and filter the mixture. Collect the filtrate. Stir the resulting mixture at room temperature overnight. Dilute with DCM (100 mL); washing with 1N aqueous NaOH (3 x 50 mL); dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate to dryness under reduced pressure. Subject the resulting crude material to reverse phase flash chromatography over C18 silica gel, eluting with a gradient of 15% to 70% acetonitrile (10 mM ammonium bicarbonate) in water (10 mM ammonium bicarbonate) to give the title compound (372 mg; 18%).MS (m/z): 327 (M + H)+. Preparation 16 (±)-Methyl 1-(5,8-dimethyl-2-quinolyl)-3,3-dimethyl-piperidine-4-carboxylate.

[0066] Adicionar a N,N-di-isopropiletilamina (2,02 mL, 11,6 mmol) e o PyBroP (1,75 g, 3,75 mmol) a uma mistura de cloridrato de 3,3- dimetilpiperidina-4-carboxilato de (±)-metila (600 mg, 2,89 mmol), 5,8- dimetilquinolina-1-óxido (678 mg, 3,91 mmol), e DCM (15 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente por 3 dias. Submeter a reação bruta à cromatografia flash de fase inversa sobre C18 sílica-gel, eluindo com um gradiente de 10% a 100% de acetonitrila (0,1% de ácido fórmico) em água (0,1% de ácido fórmico). Combinar as frações contendo o produto desejado e concentrar sob vácuo até aproxima-damente 30 mL de volume. Ajustar o pH para 6 com a adição de uma solução de NaOH aquosa a 1 N. Extrair a solução aquosa com EtOAc (2 x 30 mL), lavar com uma solução tampão aquosa de pH 6 (4 x 30 mL), secar sobre MgSO4; filtrar; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (166 mg, 18%). MS (m/z): 327 (M + H)+. Preparação 17 Ácido (±)-1-(5,8-dimetil-2-quinolil)-3,3-dimetil-piperidina-4-carboxílico.

[0066] Add the N,N-diisopropylethylamine (2.02 mL, 11.6 mmol) and the PyBroP (1.75 g, 3.75 mmol) to a mixture of 3,3-dimethylpiperidine-4 hydrochloride (±)-methyl-carboxylate (600 mg, 2.89 mmol), 5,8-dimethylquinoline-1-oxide (678 mg, 3.91 mmol), and DCM (15 mL). Stir the resulting mixture at room temperature for 3 days. Subject the crude reaction to flash reverse phase chromatography over C18 silica gel, eluting with a gradient of 10% to 100% acetonitrile (0.1% formic acid) in water (0.1% formic acid). Combine fractions containing the desired product and concentrate under vacuum to approximately 30 mL volume. Adjust the pH to 6 with the addition of a 1 N aqueous NaOH solution. Extract the aqueous solution with EtOAc (2 x 30 mL), wash with a pH 6 aqueous buffer solution (4 x 30 mL), dry over MgSO4 ; filter; and concentrate under reduced pressure to give the title compound (166 mg, 18%). MS (m/z): 327 (M + H)+. Preparation 17 (±)-1-(5,8-Dimethyl-2-quinolyl)-3,3-dimethyl-piperidine-4-carboxylic acid.

[0067] Combinar uma mistura de (±)-1-(5,8-dimetil-2-quinolil)-3,3- dimetil-piperidina-4-carboxilato de metila (166 mg, 0,51 mmol), MeOH (0,1 mL), THF ( 0,5 mL), e NaOH aquoso a 1 M (2,5 mL, 2,5 mmol) em um vaso de micro-ondas. Aquecer a mistura resultante a 120°C por 2 horas em um reator de micro-ondas. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente e adicionar HCl aquoso a 1 N até o pH ser 6. Extrair com CHCl3 (2 x 25 mL); secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (135 mg, 85%). MS (m/z): 312 (M + H)+. Preparação 18 1 -(8-Cloro-2-quinolil)-3,3-dimetil-piperidina-4-carboxilato de (±)-metila.

[0067] Combine a mixture of methyl (±)-1-(5,8-dimethyl-2-quinolyl)-3,3-dimethyl-piperidine-4-carboxylate (166 mg, 0.51 mmol), MeOH ( 0.1 mL), THF (0.5 mL), and 1 M aqueous NaOH (2.5 mL, 2.5 mmol) in a microwave flask. Heat the resulting mixture at 120°C for 2 hours in a microwave reactor. Cool the mixture to room temperature and add 1N aqueous HCl until the pH is 6. Extract with CHCl3 (2 x 25 mL); dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure to give the title compound (135 mg, 85%). MS (m/z): 312 (M + H)+. Preparation 18 (±)-Methyl 1-(8-chloro-2-quinolyl)-3,3-dimethyl-piperidine-4-carboxylate.

[0068] Adicionar o K2CO3 (1,07 g, 7,75 mmol) a uma mistura de cloridrato de (±)-3,3-dimetilpiperidina-4-carboxilato de metila (700 mg, 3,37 mmol), 2,8-dicloroquinolina (876 mg, 4,38 mmol), e DMSO (4,5 mL). Agitar a mistura resultante a 130°C durante a noite. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente; filtrar para remover os sólidos; diluir com água (5 mL); e extrair com EtOAc (4 x 20 mL). Lavar os extratos orgânicos combinados com água (20 mL) e depois salmoura (20 mL). Secar os extratos orgânicos sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 40% de EtOAc em hexanos, para dar o composto do título (1,1 g, 98%). MS (m/z): 332 (M + H)+. Preparação 19 Ácido (±)-1-(8-cloro-2-quinolil)-3,3-dimetil-piperidina-4-carboxílico

[0068] Add K2CO3 (1.07 g, 7.75 mmol) to a mixture of methyl (±)-3,3-dimethylpiperidine-4-carboxylate hydrochloride (700 mg, 3.37 mmol), 2, 8-dichloroquinoline (876 mg, 4.38 mmol), and DMSO (4.5 mL). Stir the resulting mixture at 130°C overnight. Cool the mixture to room temperature; filter to remove solids; dilute with water (5 mL); and extract with EtOAc (4 x 20 mL). Wash the combined organic extracts with water (20 mL) and then brine (20 mL). Dry the organic extracts over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 40% EtOAc in hexanes, to give the title compound (1.1 g, 98%). MS (m/z): 332 (M + H)+. Preparation 19 (±)-1-(8-Chloro-2-quinolyl)-3,3-dimethyl-piperidine-4-carboxylic acid

[0069] Combinar uma mistura de 1-(8-cloro-2-quinolil)-3,3-dimetil- piperidina-4-carboxilato de (±)-metila (1,1 g, 3,3 mmol), MeOH (0,8 mL), THF (3,3 mL ), e NaOH aquoso a 1 M (3,3 mL, 17 mmol) em um vaso de micro-ondas. Aquecer a mistura resultante a 120°C por 2 horas em aparelho de micro-ondas. Resfriar a mistura até a temperatura ambiente e, em seguida, adicionar o HCl aquoso a 5 N até o pH ser 6. Extrair a mistura com EtOAc (3 x 10 mL). Combinar os extratos orgânicos; secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (815 mg, 77%). MS (m/z): 318 (M + H)+. Preparação 20 4-Anilino-2,5-di-hidrofuran-3-carboxilato de metila

[0069] Combine a mixture of (±)-methyl 1-(8-chloro-2-quinolyl)-3,3-dimethylpiperidine-4-carboxylate (1.1 g, 3.3 mmol), MeOH ( 0.8 mL), THF (3.3 mL), and 1 M aqueous NaOH (3.3 mL, 17 mmol) in a microwave flask. Heat the resulting mixture at 120°C for 2 hours in a microwave oven. Cool the mixture to room temperature and then add the 5N aqueous HCl until the pH is 6. Extract the mixture with EtOAc (3 x 10 mL). Combine the organic extracts; dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure to give the title compound (815 mg, 77%). MS (m/z): 318 (M + H)+. Preparation 20 Methyl 4-anilino-2,5-dihydrofuran-3-carboxylate

[0070] Adicionar o ácido p-toluenossulfônico (500 mg, 3,16 mmol) a uma mistura de 4-oxotetra-hidrofuran-3-carboxilato de (±)-metila (6,6 g, 45,8 mmol), anilina (4,3 mL, 47,2 mmol) e tolueno (70 mL). Adaptar o vaso de reação com um sifão Dean-Stark e aquecer até 140°C. Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente durante a noite. Aquecer a reação até 140°C e agitar por 2 horas. Resfriar a mistura e adicionar o éter dietílico (100 mL) e a água (100 mL). Extrair a mistura com éter dietílico (3 x 50 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 100% de EtOAc em heptano, para dar o composto do título (6,7 g, 67%). MS (m/z): 220 (M + H)+. Preparação 21 (±)-Metil-3-(iodometil)-4-fenilimino-tetra-hidrofuran-3-carboxilato

[0070] Add p-toluenesulfonic acid (500 mg, 3.16 mmol) to a mixture of (±)-methyl 4-oxotetrahydrofuran-3-carboxylate (6.6 g, 45.8 mmol), aniline (4.3 mL, 47.2 mmol) and toluene (70 mL). Fit the reaction vessel with a Dean-Stark trap and heat to 140°C. Stir the resulting mixture at room temperature overnight. Heat the reaction to 140°C and stir for 2 hours. Cool the mixture and add diethyl ether (100 mL) and water (100 mL). Extract the mixture with diethyl ether (3 x 50 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 100% EtOAc in heptane, to give the title compound (6.7 g, 67%). MS (m/z): 220 (M + H)+. Preparation 21 (±)-Methyl-3-(iodomethyl)-4-phenylimino-tetrahydrofuran-3-carboxylate

[0071] Adicionar uma solução de 4-anilino-2,5-di-hidrofuran-3- carboxilato de (±)-metila (3,6 g, 16,4 mmol) e 18-coroa-6 (4,8 g, 18 mmol), em tolueno (15 mL), a uma mistura de terc-butóxido de potássio (2,0 g, 17,8 mmol) e tolueno (15 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente por 30 minutos. Adicionar o di-iodometano (4 mL) e agitar a reação na temperatura ambiente durante a noite. Adicionar a água (50 mL) e extrair com éter dietílico (2 x 50 mL). Coletar os extratos orgânicos e lavar com salmoura (50 mL). Secar os extratos orgânicos sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatogra- fia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 60% de EtOAc em heptano, para dar o composto do título (1,0 g, 17%). MS (m/z): 359 (M + H)+. Preparação 22 5-Oxotetra-hidropiran-3-carboxilato de (±)-metila

[0071] Add a solution of (±)-methyl 4-anilino-2,5-dihydrofuran-3-carboxylate (3.6 g, 16.4 mmol) and 18-crown-6 (4.8 g , 18 mmol), in toluene (15 mL), to a mixture of potassium tert-butoxide (2.0 g, 17.8 mmol) and toluene (15 mL). Stir the resulting mixture at room temperature for 30 minutes. Add the diiodomethane (4 mL) and stir the reaction at room temperature overnight. Add to water (50 mL) and extract with diethyl ether (2 x 50 mL). Collect the organic extracts and wash with brine (50 mL). Dry the organic extracts over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 60% EtOAc in heptane, to give the title compound (1.0 g, 17%). MS (m/z): 359 (M + H)+. Preparation 22 (±)-methyl 5-oxotetrahydropyran-3-carboxylate

[0072] Aquecer uma mistura de hidreto de tri-n-butilestanho (1,12 mL, 4,18 mmol), 2,2'-azobis(2-metilpropionitrila) (35 mg, 0,21 mmol) e tolueno (10 mL) ao refluxo. Adicionar uma solução de (±)-metil-3- (iodometil)-4-fenilimino-tetra-hidrofuran-3-carboxilato (1,0 g, 2,78 mmol) em tolueno (50 mL), gota a gota, durante três horas. Agitar a mistura resultante ao refluxo por 3 horas. Concentrar a reação sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatogra- fia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 80% de EtOAc em heptano, para dar o composto do título (0,37 g, 84%). RMN 1H (400 MHz, CDCI3 ) δ 4,09-3,99 (m, 4H), 3,72 (s, 3H), 3,16 (m, 1H), 2,82 (dd, J = 7,2, 16,9 Hz, 1H), 2,66 (dd, J = 6,3, 16,9 Hz, 1H). Preparação 23 trans -5-(Benzilamino)tetra-hidropiran-3-carboxilato de (±)-metila

[0072] Heat a mixture of tri-n-butyltin hydride (1.12 mL, 4.18 mmol), 2,2'-azobis(2-methylpropionitrile) (35 mg, 0.21 mmol) and toluene (10 mL) at reflux. Add a solution of (±)-methyl-3-(iodomethyl)-4-phenylimino-tetrahydrofuran-3-carboxylate (1.0 g, 2.78 mmol) in toluene (50 mL) dropwise over three hours. Stir the resulting mixture at reflux for 3 hours. Concentrate the reaction under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 80% EtOAc in heptane, to give the title compound (0.37 g, 84%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.09-3.99 (m, 4H), 3.72 (s, 3H), 3.16 (m, 1H), 2.82 (dd, J = 7, 2, 16.9 Hz, 1H), 2.66 (dd, J = 6.3, 16.9 Hz, 1H). Preparation 23 trans (±)-methyl 5-(Benzylamino)tetrahydropyran-3-carboxylate

[0073] Adicionar o triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,96 g, 4,53 mmol) a uma mistura de 5-oxotetra-hidropiran-3-carboxilato de (±)- metila (0,33 g, 2,08 mmol), benzilamina (0,31 mL, 2,84 mmol) e 1,2- dicloroetano (5 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente por 2,5 horas. Adicionar uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 mL); extrair com DCM (3 x 10 mL); separar a ca- mada orgânica; lavar com salmoura (10 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 60% de EtOAc em heptano, para dar o composto do título (0,085 g, rendimento de 16%). MS (m/z): 250 (M + H)+. Preparação 24 trans -5-Aminotetra-hidropirano-3-carboxilato de (±)-metila

[0073] Add sodium triacetoxyborohydride (0.96 g, 4.53 mmol) to a mixture of (±)-methyl 5-oxotetrahydropyran-3-carboxylate (0.33 g, 2.08 mmol ), benzylamine (0.31 mL, 2.84 mmol) and 1,2-dichloroethane (5 mL). Stir the resulting mixture at room temperature for 2.5 hours. Add a saturated aqueous sodium bicarbonate solution (10 mL); extract with DCM (3 x 10 mL); separating the organic layer; wash with brine (10 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 60% EtOAc in heptane, to give the title compound (0.085 g, 16% yield). MS (m/z): 250 (M + H)+. Preparation 24 trans (±)-methyl 5-Aminotetrahydropyran-3-carboxylate

[0074] Adicionar o paládio a 10% sobre carbono (0,07 g, 0,66 mmol) a uma mistura de trans-5-(benzilamino)tetra-hidropiran-3- carboxilato de (±)-metila (0,085 g, 0,34 mmol) e etanol (8 mL). Purgar a mistura com hidrogênio e agitar a mistura resultante na temperatura ambiente sob hidrogênio [101,32 kPa (1 atm)], durante a noite. Filtrar a mistura e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (0,045 g, rendimento de 83%). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) δ 3,823,77 (m, 2H), 3,68 (m, 4H), 3,38-3,31 (m, 1H), 3,11-3,08 (m, 1H), 2,852,80 (m, 1H), 2,17-2,11 (m, 1H), 1,78-1,71 (m, 3H). Preparação 25 trans -5-[[(4 S )-3,3-Dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carbonil] amino]tetra-hidropirano-3-carboxilato de (±)-metila

[0074] Add 10% palladium on carbon (0.07 g, 0.66 mmol) to a mixture of (±)-methyl trans-5-(benzylamino)tetrahydropyran-3-carboxylate (0.085 g, 0.34 mmol) and ethanol (8 mL). Purge the mixture with hydrogen and stir the resulting mixture at room temperature under hydrogen [101.32 kPa (1 atm)] overnight. Filter the mixture and concentrate under reduced pressure to give the title compound (0.045 g, 83% yield). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.823.77 (m, 2H), 3.68 (m, 4H), 3.38-3.31 (m, 1H), 3.11-3.08 (m, 1H), 2.852.80 (m, 1H), 2.17-2.11 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 3H). Preparation 25 trans (±)-5-[[(4 S )-3,3-Dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carbonyl]amino]tetrahydropyran-3-carboxylate methyl

[0075] Adicionar o EDCI (0,087 g, 0,45 mmol) a uma mistura de ácido (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxílico (0,087 g, 0,29 mmol), (±)-metil-trans-5-aminotetra-hidropiran-3- carboxilato (0,045 g, 0,28 mmol), HOBT (9 mg, 0,06 mmol), trietilamina (0,15 mL, 1,08 mmol), em DCM (5 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente por 3 horas. Submeter a mistura resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 5% a 100% de EtOAc em heptano, para dar o composto do título (0,085 g, 66%). MS (m/z): 439 (M + H)+. Preparação 26 trans -3-(Dibenzilamino)ciclo-hexanocarboxilato de (±)-metila

[0075] Add the EDCI (0.087 g, 0.45 mmol) to a mixture of (-)-(4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid (0.087 g, 0.29 mmol), (±)-methyl-trans-5-aminotetrahydropyran-3-carboxylate (0.045 g, 0.28 mmol), HOBT (9 mg, 0.06 mmol), triethylamine ( 0.15 mL, 1.08 mmol), in DCM (5 mL). Stir the resulting mixture at room temperature for 3 hours. Subject the resulting mixture to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 5% to 100% EtOAc in heptane, to give the title compound (0.085 g, 66%). MS (m/z): 439 (M + H)+. Preparation 26 (±)-methyl trans -3-(Dibenzylamino)cyclohexanecarboxylate

[0076] Adicionar o carbonato de potássio (3,53 g, 25,6 mmol) e o brometo de benzila (1,9 mL, 15,9 mmol) a uma mistura de (±)-metil- trans-3-aminociclo-hexanocarboxilato (1,07 g, 6,8 mmol) em acetonitri- la (40 mL). Aquecer a mistura resultante até 80°C e agitar por 5 horas. Resfriar a mistura e adicionar a acetonitrila (40 mL). Filtrar através de terra diatomácea e concentrar o filtrado sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0% a 20% de EtOAc em hexanos, para dar o composto do título (1,6 g, 70%). MS (m/z): 338 (M + H)+. Preparação 27 (±)-2-[ trans -3-(Dibenzilamino)ciclo-hexil]propan-2-ol

[0076] Add potassium carbonate (3.53 g, 25.6 mmol) and benzyl bromide (1.9 mL, 15.9 mmol) to a mixture of (±)-methyl-trans-3-aminocycle -hexanecarboxylate (1.07 g, 6.8 mmol) in acetonitrile (40 mL). Heat the resulting mixture to 80°C and stir for 5 hours. Cool the mixture and add to acetonitrile (40 mL). Filter through diatomaceous earth and concentrate the filtrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0% to 20% EtOAc in hexanes, to give the title compound (1.6 g, 70%). MS (m/z): 338 (M + H)+. Preparation 27 (±)-2-[ trans -3-(Dibenzylamino)cyclohexyl]propan-2-ol

[0077] Adicionar o brometo de metilmagnésio (solução a 3,0 M em éter dietílico, 16 mL, 48 mmol) a uma mistura de (±)-metil-trans-3- (dibenzilamino)ciclo-hexanocarboxilato (1,6 g, 4,7 mmol) e THF (50 mL), mantida a 0°C. Deixar a reação aquecer até a temperatura ambiente e agitar durante a noite. Adicionar a água (25 mL) e filtrar através de terra diatomácea. Coletar o filtrado aquoso. Extrair o material aquoso resultante com EtOAc (50 mL). Coletar os extratos orgânicos; secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão redu-zida. Adicionar o EtOAc (50 mL); lavar com NH4Cl aquoso saturado (2 x 25 mL); secar sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (1,1 g, 69%). MS (m/z): 338 (M + H)+. Preparação 28 2-[(1 S ,3 S )-3-(Dibenzilamino)ciclo-hexil]propan-2-ol

[0077] Add methylmagnesium bromide (3.0 M solution in diethyl ether, 16 mL, 48 mmol) to a mixture of (±)-methyl-trans-3-(dibenzylamino)cyclohexanecarboxylate (1.6 g , 4.7 mmol) and THF (50 mL), kept at 0°C. Allow the reaction to warm to room temperature and stir overnight. Add to water (25 mL) and filter through diatomaceous earth. Collect the aqueous filtrate. Extract the resulting aqueous material with EtOAc (50 mL). Collect the organic extracts; dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Add the EtOAc (50 mL); washing with saturated aqueous NH 4 Cl (2 x 25 mL); dry over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure to give the title compound (1.1 g, 69%). MS (m/z): 338 (M + H)+. Preparation 28 2-[(1 S ,3 S )-3-(Dibenzylamino)cyclohexyl]propan-2-ol

[0078] Dissolver o (±)-2-[trans-3-(dibenzilamino)ciclo-hexil]propan- 2-ol (1,1 g, 3,26 mmol) em etanol (13 mg/mL). Submeter o material à SFC quiral (Chiralpak IA, 2 cm x 15 cm) usando 12% de (0,1% de di- metiletilamina em i-PrOH) em CO2(scf) como a fase móvel, a 220 nm, e uma vazão de 70 mL/minuto. Coletar e combinar a primeira fração a eluir e concentrar sob pressão reduzida, para proporcionar o composto do título (0,54 g, 49%), ee => 99%. MS (m/z): 338 (M + H)+. Método Analítico de SFC (Chiralpak IA, (15 cm x 0,46 cm) usando 10% de (0,1% de dimetiletilamina em i-PrOH) em CO2(scf) como a fase móvel, a 220 nm, e uma vazão de 3 mL/minuto). Preparação 29Cloridrato de 2-[(1 S ,3 S )-3-aminociclo-hexil]propan-2-ol

[0078] Dissolve (±)-2-[trans-3-(dibenzylamino)cyclohexyl]propan-2-ol (1.1 g, 3.26 mmol) in ethanol (13 mg/mL). Submit the material to chiral SFC (Chiralpak IA, 2 cm x 15 cm) using 12% (0.1% dimethylethylamine in i-PrOH) in CO2(scf) as the mobile phase, at 220 nm, and a flow rate of 70 mL/minute. Collect and combine the first fraction to elute and concentrate under reduced pressure to give the title compound (0.54 g, 49%), ee => 99%. MS (m/z): 338 (M + H)+. SFC Analytical Method (Chiralpak IA, (15 cm x 0.46 cm) using 10% (0.1% dimethylethylamine in i-PrOH) in CO2(scf) as the mobile phase, at 220 nm, and a flow 3 mL/minute). Preparation 29 2-[(1 S ,3 S )-3-Aminocyclohexyl]propan-2-ol Hydrochloride

[0079] Adicionar o hidróxido de paládio (20% sobre carbono, 0,51 g, 3,7 mmol) a uma mistura de 2-[(1S,3S)-3-(dibenzilamino)ciclo- hexil]propan-2-ol (0,54 g, 1,6 mmol) em MeOH (20 mL) em um vaso agitador Parr®. Purgar e pressurizar o vaso com hidrogênio até 414 kPa. Agitar a mistura por 4 dias na temperatura ambiente. Filtrar a mistura através de terra diatomácea e concentrar o filtrado sob pressão reduzida. Diluir a mistura em éter dietílico (25 mL) e DCM (25 mL). Adicionar o HCl (solução a 4,0 M em 1,4-dioxana, 0,8 mL) e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (0,24 g, 77%). MS (m/z): 158 (M + H)+. Preparação 30 N-[(1RS,2RS,4SR,6RS)-6-(hidroximetil)norboman-2-il]carbamato de terc-butila

[0079] Add palladium hydroxide (20% on carbon, 0.51 g, 3.7 mmol) to a mixture of 2-[(1S,3S)-3-(dibenzylamino)cyclohexyl]propan-2- mol (0.54 g, 1.6 mmol) in MeOH (20 mL) in a Parr® shaker vessel. Purge and pressurize the vessel with hydrogen to 414 kPa. Stir the mixture for 4 days at room temperature. Filter the mixture through diatomaceous earth and concentrate the filtrate under reduced pressure. Dilute the mixture with diethyl ether (25 mL) and DCM (25 mL). Add the HCl (4.0 M solution in 1,4-dioxane, 0.8 mL) and concentrate under reduced pressure to give the title compound (0.24 g, 77%). MS (m/z): 158 (M + H)+. Preparation 30 tert-Butyl N-[(1RS,2RS,4SR,6RS)-6-(hydroxymethyl)norboman-2-yl]carbamate

[0080] Combinar o (acetilacetonato)dicarbonilródio (10 mg, 0,03 mmol), o 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (27 mg, 0,05 mmol), o bici- clo[2.2.1]hept-2-eno-5-carboxilato de metila (2,5 g, 11,9 mmol) e o terc-butanol (25 mL) em uma autoclave PARR® com um agitador mecânico. Purgar e pressurizar o vaso com gás de síntese (mistura de monóxido de carbono e hidrogênio a 1:1, 310 kPa). Agitar durante a noite. Concentrar a mistura sob pressão reduzida. Diluir em DCM (29 mL) e MeOH (2,9 mL). Adicionar o boro-hidreto de sódio (0,26 g, 6,9 mmol) e agitar por 20 min na temperatura ambiente. Adicionar o DCM (60 mL) e lavar com carbonato de sódio aquoso saturado (2 x 25 mL) e salmoura (25 mL). Secar a camada orgânica sobre Na2SO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel eluindo com uma solução de 30% de DCM, 30% de éter terc-butil metílico e 40% de he- xanos, para dar o composto do título como uma mistura de diastereoi- sômeros (0,58 g, 21%). RMN 1H (400 MHz, CDCls ) δ 4,71-4,59 (m, 1H), 3,92-3,81 (m, 1H), 3,46-3,45 (m, 2H), 2,36 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 2,21-2,05 (m, 3H), 1,55 (br s, 1H), 1,49-1,25 (m, 12H), 1,16-1,09 (m, 1H), 0,68 (ddd, J = 12,9, 4,5, 2,4 Hz, 1H). Preparação 31 Cloridrato de [(1RS,2RS,4SR,6RS)-6-aminonorboman-2-il]metanol

[0080] Combine (acetylacetonate)dicarbonylrhodium (10 mg, 0.03 mmol), 1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene (27 mg, 0.05 mmol), bicyclo[2.2.1]hept Methyl-2-ene-5-carboxylate (2.5 g, 11.9 mmol) and tert-butanol (25 mL) in a PARR® autoclave with a mechanical stirrer. Purge and pressurize the vessel with synthesis gas (1:1 mixture of carbon monoxide and hydrogen, 310 kPa). Shake overnight. Concentrate the mixture under reduced pressure. Dilute in DCM (29 mL) and MeOH (2.9 mL). Add sodium borohydride (0.26 g, 6.9 mmol) and stir for 20 min at room temperature. Add the DCM (60 mL) and wash with saturated aqueous sodium carbonate (2 x 25 mL) and brine (25 mL). Dry the organic layer over Na2SO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel eluting with a solution of 30% DCM, 30% tert-butyl methyl ether and 40% hexanes, to give the title compound as a mixture of diastereomers. somers (0.58 g, 21%). 1H NMR (400 MHz, CDCls ) δ 4.71-4.59 (m, 1H), 3.92-3.81 (m, 1H), 3.46-3.45 (m, 2H), 2, 36 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 2.21-2.05 (m, 3H), 1.55 (br s, 1H), 1.49-1.25 (m, 12H), 1.16-1.09 (m, 1H), 0.68 (ddd, J = 12.9, 4.5, 2.4 Hz, 1H). Preparation 31 [(1RS,2RS,4SR,6RS)-6-Aminonorboman-2-yl]methanol Hydrochloride

[0081] Adicionar o HCl (solução a 4,0 M em 1,4-dioxana, 2,1 mL, 8,3 mmol) a uma mistura de N-[(1RS,2RS,4SR,6RS)-6- (hidroximetil)norbornan-2-il]carbamato de terc-butila (0,2 g, 0,83 mmol) em DCM (8 mL), mantida a 0°C. Deixar a mistura resultante aquecer até a temperatura ambiente e agitar por 3 horas. Concentrar a mistura sob pressão reduzida para dar o composto do título (0,15 g, 100%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,17-8,02 (m, 3H), 4,93-4,90 (br, 1H), 3,47-3,45 (m, 1H), 3,19-3,15 (m, 2H), 2,31 (m, 1H), 2,14-2,12 (m, 1H), 2,01-1,94 (m, 1H), 1,92-1,88 (m, 1H), 1,44-1,35 (m, 2H), 1,22 (m, 1H), 1,04-0,98 (m, 2H). Preparação 32 ((cis -4-(( terc-Butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)metil)(sulfamoil) carba- mato de terc-butila

[0081] Add the HCl (4.0 M solution in 1,4-dioxane, 2.1 mL, 8.3 mmol) to a mixture of N-[(1RS,2RS,4SR,6RS)-6- ( tert-butyl hydroxymethyl)norbornan-2-yl]carbamate (0.2 g, 0.83 mmol) in DCM (8 mL), kept at 0 °C. Allow the resulting mixture to warm to room temperature and stir for 3 hours. Concentrate the mixture under reduced pressure to give the title compound (0.15 g, 100%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17-8.02 (m, 3H), 4.93-4.90 (br, 1H), 3.47-3.45 (m, 1H), 3. 19-3.15 (m, 2H), 2.31 (m, 1H), 2.14-2.12 (m, 1H), 2.01-1.94 (m, 1H), 1.92- 1.88 (m, 1H), 1.44-1.35 (m, 2H), 1.22 (m, 1H), 1.04-0.98 (m, 2H). Preparation 32 tert-Butyl ((cis -4-((tert-Butoxycarbonyl)amino)cyclohexyl)methyl)(sulfamoyl)carbamate

[0082] Adicionar o azodicarboxilato de di-isopropila (1,6 mL, 7,8 mmol) a uma mistura de cis-4-(hidroximetil)ciclo-hexilcarbamato de terc-butila (1,5 g, 6,5 mmol), N-sulfamoilcarbamato de terc-butila (1,9 g, 9,8 mmol), trifenilfosfina (2,1 g, 7,8 mmol), e EtOAc (33 mL). Agitar durante a noite na temperatura ambiente. Adicionar água (50 mL); extrair com EtOAc (2 x 50 mL); coletar os extratos orgânicos. Lavar os extratos orgânicos com salmoura (25 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 10% a 80% de EtOAc em hexano, para dar o composto do título (1,78 g, 67%). MS (m/z): 430 (M + Na)+. Preparação 33 Cloridrato de cis -1-amino-4-[(sulfamoilamino)metil]ciclo-hexano

[0082] Add diisopropyl azodicarboxylate (1.6 mL, 7.8 mmol) to a mixture of tert-butyl cis-4-(hydroxymethyl)cyclohexylcarbamate (1.5 g, 6.5 mmol) , tert-butyl N-sulfamoylcarbamate (1.9 g, 9.8 mmol), triphenylphosphine (2.1 g, 7.8 mmol), and EtOAc (33 mL). Shake overnight at room temperature. Add water (50 mL); extract with EtOAc (2 x 50 mL); collect the organic extracts. Wash the organic extracts with brine (25 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 10% to 80% EtOAc in hexane, to give the title compound (1.78 g, 67%). MS (m/z): 430 (M + Na)+. Preparation 33 Cis -1-Amino-4-[(sulfamoylamino)methyl]cyclohexane hydrochloride

[0083] Adicionar o HCl (solução a 4,0 M em 1,4-dioxana, 15 mL, 60 mmol) ao ((cis-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo- hexil)metil)(sulfamoil)carbamato de terc-butila (1,78 g, 4,37 mmol). Agitar a mistura resultante durante a noite, na temperatura ambiente. Concentrar sob pressão reduzida. Diluir em MeOH (10 mL) e adicionar o éter dietílico, gota a gota (150 mL), enquanto se agita vigorosamen- te. Coletar o precipitado branco resultante por filtração a vácuo para dar o composto do título (0,68 g, 56%). MS (m/z): 208 (M + H)+. Preparação 34 (1 flS, 3flS)-3-((S)-3,3-Dimetil-1-(8-metilquinolin-2-il)piperidina-4- car- boxamido)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila

[0083] Add the HCl (4.0 M solution in 1,4-dioxane, 15 mL, 60 mmol) to the ((cis-4-((tert-butoxycarbonyl)amino)cyclohexyl)methyl)(sulfamoyl) tert-butyl carbamate (1.78 g, 4.37 mmol). Stir the resulting mixture overnight at room temperature. Concentrate under reduced pressure. Dilute in MeOH (10 mL) and add diethyl ether dropwise (150 mL) while stirring vigorously. Collect the resulting white precipitate by vacuum filtration to give the title compound (0.68 g, 56%). MS (m/z): 208 (M + H)+. Preparation 34 Methyl (1 fS, 3 f S)-3-(((S)-3,3-dimethyl-1-(8-methylquinolin-2-yl)piperidine-4-carboxamido)cyclohexane-1-carboxylate

[0084] Adicionar a trietilamina (0,9 mL, 7 mmol) a uma mistura de ácido (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxílico (0,8 g, 3 mmol), cloridrato de trans-3-aminociclo-hexanocarboxilato de (±)-metila (0,5 g, 3 mmol), BOP (2,0 g, 3 mmol) e DMF (5 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente, durante a noite. Adicionar uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 mL) e extrair com EtOAc (2 x 25 ml). Coletar os extratos orgânicos; lavar com salmoura (25 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e con-centrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatografia flash sobre sílica-gel, eluindo com um gradiente de 10% a 90% de EtOAc em hexanos, para dar o composto do título (1,00 g, 80%). MS (m/z): 438 (M + H)+. Exemplo 1 (S)-N-((2 S ,4 S )-2-(Hidroximetil)tetra-hidro-2H-piran-4-il)-3,3-dimetil-1- (8-metilquinolin-2-il)piperidina-4-carboxamida

[0084] Add triethylamine (0.9 mL, 7 mmol) to a mixture of (-)-(4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid (0.8 g, 3 mmol), (±)-methyl trans-3-aminocyclohexanecarboxylate hydrochloride (0.5 g, 3 mmol), BOP (2.0 g, 3 mmol) and DMF (5 mL ). Stir the resulting mixture at room temperature overnight. Add a saturated aqueous sodium bicarbonate solution (20 mL) and extract with EtOAc (2 x 25 mL). Collect the organic extracts; washing with brine (25 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting crude material to flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 10% to 90% EtOAc in hexanes, to give the title compound (1.00 g, 80%). MS (m/z): 438 (M + H)+. Example 1 (S)-N-((2 S ,4 S )-2-(Hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-3,3-dimethyl-1-(8-methylquinolin-2- yl)piperidine-4-carboxamide

[0085] Adicionar o hexafluorfosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidinofosfônio (153 g, 293 mmol)como uma pasta fluida em DMF (152 mL) a uma mistura gelada (10°C) de ácido (-)-(4S)-3,3- dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxílico (76,0 g, 245 mmol), cloridrato de ((2S,4S)-4-aminotetra-hidro-2H-piran-2-il)metanol (72 % puro, 57,37 g, 246 mmol), trietilamina (153 mL, 1,10 mol), e DMF (380 mL), enquanto se mantém a temperatura interna da reação abaixo de 20°C. Em seguida, deixar a mistura aquecer até a temperatura ambiente e agitá-la por 30 minutos. Verter a mistura em água gelada (1,5 L) enquanto a agita. Extrair a mistura com DCM (2 x 600 mL) e lavar os extratos orgânicos combinados com uma solução de NaCl aquosa se- missaturada (1,0 L). Secar a solução orgânica sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar o filtrado sob pressão reduzida para dar um sólido úmido. Triturar o sólido úmido com água e isolar o sólido por filtração. Triturar o sólido novamente com água (1,5 L) e isolar o sólido por filtração. Lavar o sólido com água (2 x 250 mL). Reservar esta pri-meira batelada de sólido isolado. Coletar as lavagens aquosas; extrair com DCM (2 x 800 mL); combinar os extratos de DCM. Adicionar a primeira batelada de sólidos isolados aos extratos de DCM combinados e lavar com HCl aquoso (2,5 M, 2 x 800 mL). Separar a camada aquosa e adicionar a solução aquosa de NaOH a 50% à camada aquosa até que o pH atinja 12 para induzir a precipitação. Filtrar a mistura para coletar o sólido resultante. Enxaguar o sólido com água (2 x 300 mL). Secar o sólido em um forno a vácuo a 50°C, por 3 horas. Dissolver o sólido em MeOH (1,2 L); adicionar a resina de sequestro de sílica mesoporosa de mercaptopropila (1,2 mmol/g, 715 m2/g, 54 μM de tamanho médio de partícula); e agitar a 50°C durante a noite. Filtrar para remover os sólidos coletando o filtrado. Enxaguar o sólido com CH2Cl2:MeOH a 1:1 (2 x 500 mL). Combinar os filtrados e concentrar sob pressão reduzida para dar um sólido branco. Triturar o sólido com TBME (1,5 L), e coletar os sólidos. Cristalizar o sólido a partir de EtOH quente (1,8 L). Secar o sólido em um forno a vácuo a 50°C, por 2,5 horas, para dar o composto do título como um sólido cristalino, branco (76,7 g, 76%). LC/MS (ESI): 412 [M + H] +.[0085] Add benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (153 g, 293 mmol) as a slurry in DMF (152 mL) to an ice-cold (10 °C) mixture of (-)-(4S)-acid 3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid (76.0 g, 245 mmol), ((2S,4S)-4-aminotetrahydro-2H-pyran hydrochloride -2-yl)methanol (72% pure, 57.37 g, 246 mmol), triethylamine (153 mL, 1.10 mol), and DMF (380 mL), while maintaining the internal reaction temperature below 20° W. Then allow the mixture to warm to room temperature and stir it for 30 minutes. Pour the mixture into ice water (1.5 L) while stirring. Extract the mixture with DCM (2 x 600 mL) and wash the combined organic extracts with half-saturated aqueous NaCl solution (1.0 L). Dry the organic solution over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrating the filtrate under reduced pressure to give a wet solid. Grind the wet solid with water and isolate the solid by filtration. Triturate the solid again with water (1.5 L) and isolate the solid by filtration. Wash the solid with water (2 x 250 mL). Reserve this first batch of isolated solids. Collect the aqueous washes; extract with DCM (2 x 800 mL); combine the DCM extracts. Add the first batch of isolated solids to the combined DCM extracts and wash with aqueous HCl (2.5M, 2 x 800 mL). Separate the aqueous layer and add 50% aqueous NaOH solution to the aqueous layer until the pH reaches 12 to induce precipitation. Filter the mixture to collect the resulting solid. Rinse the solid with water (2 x 300 mL). Dry the solid in a vacuum oven at 50°C for 3 hours. Dissolve the solid in MeOH (1.2 L); add mercaptopropyl mesoporous silica sequestering resin (1.2 mmol/g, 715 m2/g, 54 µM mean particle size); and stir at 50°C overnight. Filter to remove solids by collecting the filtrate. Rinse the solid with 1:1 CH 2 Cl 2 :MeOH (2 x 500 mL). Combine the filtrates and concentrate under reduced pressure to give a white solid. Grind the solid with TBME (1.5 L), and collect the solids. Crystallize the solid from hot EtOH (1.8 L). Dry the solid in a vacuum oven at 50°C for 2.5 hours to give the title compound as a white, crystalline solid (76.7 g, 76%). LC/MS (ESI): 412 [M + H] +.

[0086] Os Exemplos que seguem na Tabela 1 podem ser prepara dos essencialmente pelo procedimento da Preparação 34, usando a amina de partida apropriada no lugar do cloridrato de (±)-metil-trans-3- aminociclo-hexanocarboxilato e o ácido carboxílico de partida apropriado no lugar do ácido (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil) piperidi- na-4-carboxílico.

[0086] The Examples that follow in Table 1 can be prepared essentially by the procedure of Preparation 34, using the appropriate starting amine in place of (±)-methyl-trans-3-aminocyclohexanecarboxylate hydrochloride and the carboxylic acid of appropriate starting in place of (-)-(4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid.

[0087] Métodos de purificação (Mét. de Purif.): A = O produto bruto é purificado por cromatografia em coluna de fase normal em sílica-gel eluindo com gradiente de EtOAc em hexanos. B = O produto bruto é purificado por cromatografia em coluna de fase reversa em C18, eluin- do com um gradiente de acetonitrila e água. C = O produto bruto é purificado por cromatografia em coluna quiral com Chiralpak AS-H, 21 x 150 mm), usando 15% de IPA em CO2 como fase móvel, a uma vazão de 70 mL/min. Exemplo 13 (4 S )-N-[(1S,3S)-3-(1-Hidróxi-1-metil-etil)ciclo-hexil]-3,3-dimetil-1-(8- metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxamida

[0087] Purification Methods (Purif. Method): A = The crude product is purified by normal phase column chromatography on silica gel eluting with EtOAc in hexanes gradient. B = The crude product is purified by C18 reverse phase column chromatography, eluting with a gradient of acetonitrile and water. C = The crude product is purified by chiral column chromatography with Chiralpak AS-H, 21 x 150 mm), using 15% IPA in CO2 as mobile phase, at a flow rate of 70 mL/min. Example 13 (4S)-N-[(1S,3S)-3-(1-Hydroxy-1-methyl-ethyl)cyclohexyl]-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl) )piperidine-4-carboxamide

[0088] Adicionar a N,N-di-isopropiletilamina (0,7 mL, 4 mmol) e o HATU (0,31 g, 0,8 mmol) a uma mistura de ácido (-)-(4S)-3,3-dimetil-1- (8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxílico (0,2 g, 0,67 mmol), cloridrato de 2-[(1S,3S)-3-aminociclo-hexil]propan-2-ol (0,13 g, 0,67 mmol) e DMF (5 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente por 45 minutos. Submeter a mistura de reação resultante à cromatografia flash de fase reversa sobre C18, eluindo com um gradiente de 5% a 80% de ACN em água, para dar o composto do título (0,26 g, 88%). MS (m/z): 438 (M + H)+.[0088] Add the N,N-diisopropylethylamine (0.7 mL, 4 mmol) and the HATU (0.31 g, 0.8 mmol) to a mixture of acid (-)-(4S)-3, 3-Dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid (0.2 g, 0.67 mmol), 2-[(1S,3S)-3-aminocyclohexyl]propan hydrochloride -2-ol (0.13 g, 0.67 mmol) and DMF (5 mL). Stir the resulting mixture at room temperature for 45 minutes. Subject the resulting reaction mixture to flash reverse phase chromatography over C18, eluting with a gradient of 5% to 80% ACN in water, to give the title compound (0.26 g, 88%). MS (m/z): 438 (M + H)+.

[0089] Preparar os Exemplos que se seguem na Tabela 2 essen cialmente pelo procedimento para o Exemplo 13, usando o ácido car- boxílico de partida apropriado no lugar do ácido (-)-(4S)-3,3-dimetil-1- (8-metil-2-quinolil)piperidina-4-carboxílico.

[0089] Prepare the Examples that follow in Table 2 essentially by the procedure for Example 13, using the appropriate starting carboxylic acid in place of (-)-(4S)-3,3-dimethyl-1- (8-Methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid.

[0090] Preparar os exemplos que se seguem na Tabela 3 essenci almente pelo procedimento para a Preparação 25, usando a amina de partida apropriada no lugar do (±)-trans-5-aminotetra-hidropiran-3- carboxilato de metila e o ácido carboxílico de partida apropriado no lugar do (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4- carboxí- lico.

[0090] Prepare the examples that follow in Table 3 essentially by the procedure for Preparation 25, using the appropriate starting amine in place of methyl (±)-trans-5-aminotetrahydropyran-3-carboxylate and the acid appropriate starting carboxylic acid in place of the (-)-(4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carboxylic acid.

[0091] Métodos de purificação: A = O produto bruto é purificado por cromatografia em coluna de fase normal em sílica-gel, eluindo com um gradiente de EtOAc em hexanos. C = O produto bruto é purificado por cromatografia em coluna quiral usando SFC quiral (Chiralcel DE-A, 21 x 250 mm), usando 25% de EtOH (0,2% de IPAM) em CO2(scf) como fase móvel, a uma vazão de 70 mL/min. Exemplo 18 (S)-N-((3RS, 5SR)-5-(Hidroximetil)tetra-hidro-2H-piran-3-il)-3,3-dimetil- 1-(8-metilquinolin-2-il)piperidina-4-carboxamida

[0091] Purification methods: A = The crude product is purified by normal phase column chromatography on silica gel, eluting with a gradient of EtOAc in hexanes. C = The crude product is purified by chiral column chromatography using chiral SFC (Chiralcel DE-A, 21 x 250 mm), using 25% EtOH (0.2% IPAM) in CO2(scf) as mobile phase, the a flow rate of 70 mL/min. Example 18 (S)-N-((3RS, 5SR)-5-(Hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)-3,3-dimethyl-1-(8-methylquinolin-2-yl) piperidine-4-carboxamide

[0092] Adicionar uma solução de NaOH aquosa a 5 N (0,5 mL) a uma mistura de (3RS,5RS)-5-((4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2- quinolil)piperidina-4-carbonil]amino]tetra-hidropirano-3-carboxilato de metila (0,085 g, 0,19 mmol), MeOH (2 mL), e THF (2 mL). Agitar a mis- tura resultante na temperatura ambiente por 1 hora. Adicionar uma so-lução aquosa de HCl a 5 N (0,5 mL) e concentrar. Diluir a mistura bruta em THF (6 mL) e resfriar até 0°C. Adicionar uma solução a 2 M de complexo de borano-THF em THF (0,15 mL, 0,3 mmol), gota a gota. Aquecer lentamente a mistura até a temperatura ambiente e agitar na temperatura ambiente durante a noite. Adicionar uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 mL) e extrair a mistura com EtOAc (3 x 10 mL). Coletar os extratos orgânicos; lavar com salmoura (10 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material bruto resultante à cromatogra- fia flash sobre sílica-gel eluindo com 100% de EtOAc, para dar o composto do título (0,046 g, 59% de rendimento nas 2 etapas). MS (m/z): 411 (M + H)+. Exemplo 19 Ácido metil (1 RS,3RS)-3-((S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil) piperidi- na-4-carbonil]amino]ciclo-hexanocarboxílico

[0092] Add a 5 N aqueous NaOH solution (0.5 mL) to a mixture of (3RS,5RS)-5-((4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2- methyl quinolyl)piperidine-4-carbonyl]amino]tetrahydropyran-3-carboxylate (0.085 g, 0.19 mmol), MeOH (2 mL), and THF (2 mL). at room temperature for 1 hour. Add a 5N aqueous HCl solution (0.5 mL) and concentrate. Dilute the crude mixture in THF (6 mL) and cool to 0°C. Add a 2M solution of complex of borane-THF in THF (0.15 mL, 0.3 mmol) dropwise. Slowly warm the mixture to room temperature and stir at room temperature overnight. Add a saturated aqueous sodium bicarbonate solution (10 mL) and extract the mixture with EtOAc (3 x 10 mL). Collect the organic extracts; wash with brine (10 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Submit the resulting crude material to flash chromatography on silica gel eluting with 100% EtOAc to give the title compound (0.046 g, 59% yield over 2 steps). MS (m/z): 411 (M + H)+. Example 19 Methyl (1RS,3RS)-3-((S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl)piperidine-4-carbonyl]amino]cyclohexanecarboxylic acid

[0093] Adicionar uma solução aquosa de NaOH a 5 N (2,2 mL) a uma mistura de (±)-trans-[[(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2- quinolil)piperidina-4-carbonil]amino]ciclo-hexano-3-carboxilato de meti- la (1,0 g, 2,2 mmol), MeOH (2 mL), e THF (8 mL). Agitar a mistura re-sultante na temperatura ambiente, durante a noite. Adicionar uma solução aquosa de HCl a 5 N (2,2 mL) para ajustar o pH para 6,5. Extrair com EtOAc (2 x 25 ml) e coletar os extratos orgânicos. Lavar os extratos orgânicos com salmoura (25 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (0,935 g, 98%). MS (m/z): 424 (M + H)+.Exemplo 20 (S)-N-((1 RS ,3 RS )-3-(Etilcarbamoil)ciclo-hexil)-3,3-dimetil-1-(8-metil- quinolin-2-il)piperidina-4-carboxamida

[0093] Add a 5N aqueous NaOH solution (2.2 mL) to a mixture of (±)-trans-[[(4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl) methyl)piperidine-4-carbonyl]amino]cyclohexane-3-carboxylate (1.0 g, 2.2 mmol), MeOH (2 mL), and THF (8 mL). Stir the resulting mixture at room temperature overnight. Add a 5N aqueous HCl solution (2.2 mL) to adjust the pH to 6.5. Extract with EtOAc (2 x 25 ml) and collect the organic extracts. Wash the organic extracts with brine (25 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure to give the title compound (0.935 g, 98%). MS (m/z): 424 (M + H)+. Example 20 (S)-N-((1 RS ,3 RS )-3-(Ethylcarbamoyl)cyclohexyl)-3,3-dimethyl-1- (8-methylquinolin-2-yl)piperidine-4-carboxamide

[0094] Adicionar a trietilamina (0,7 mL, 5 mmol) a uma mistura de ácido (±)-trans-3-[[(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-quinolil)piperidina-4- carbonil]amino]ciclo-hexanocarboxílico (0,9 g, 2 mmol), etanamina (2 mL, 3 mmol), BOP (1,0 g, 3 mmol) e DMF (4 mL). Agitar a mistura resultante na temperatura ambiente por 3 horas. Adicionar uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 mL). Extrair a mistura resultante com EtOAc (2 x 50 mL). Coletar os extratos orgânicos; lavar com salmoura (3 x 25 mL); secar sobre MgSO4; filtrar; coletar o filtrado; e concentrar sob pressão reduzida. Submeter o material resultante à cromatografia flash de fase reversa sobre C18 sílica-gel, eluindo com um gradiente de 20% a 80% de acetonitrila (0,1% de ácido fórmico) em água (0,1% de ácido fórmico),para dar o composto do título (0,25 g, 30%). MS (m/z): 450 (M + H)+.[0094] Add triethylamine (0.7 mL, 5 mmol) to a mixture of (±)-trans-3-[[(4S)-3,3-dimethyl-1-(8-methyl-2-quinolyl) acid )piperidine-4-carbonyl]amino]cyclohexanecarboxylic acid (0.9 g, 2 mmol), ethanamine (2 mL, 3 mmol), BOP (1.0 g, 3 mmol) and DMF (4 mL). Stir the resulting mixture at room temperature for 3 hours. Add a saturated aqueous sodium bicarbonate solution (20 mL). Extract the resulting mixture with EtOAc (2 x 50 mL). Collect the organic extracts; wash with brine (3 x 25 mL); dry over MgSO4; filter; collect the filtrate; and concentrate under reduced pressure. Subject the resulting material to reverse phase flash chromatography on C18 silica gel, eluting with a gradient of 20% to 80% acetonitrile (0.1% formic acid) in water (0.1% formic acid), to give the title compound (0.25g, 30%). MS (m/z): 450 (M + H)+.

BIOLOGICAL TESTS Human mPGES-1 enzyme inhibition assay

[0095] A mPGES-1 humana (Invitrogen® (No. do Cat. 97002RG, clone ID 6374722)) é subclonada no pcDNA3.1 e expressa de forma transiente nas células 293E. Os microssomos são preparados a partir de pelotas celulares com base nos métodos publicados (Oullet e col., Purification and characterization of recombinant microsomal prosta-glandin E synthase-1, Protein Expression and Purification, 26 pág. 489-495 (2002); e Thoren e col., Human Microsomal Prostanglandin E Synthase-1, J. Biol Chem. 278(25) págs. 22199-22209 (2003)). Resu- midamente, as pelotas são produzidas em tampão de homogeneização (Tris-HCl a 15 mM, pH 8,0; sacarose a 0,25 M; EDTA a 0,1 mM; glutationa a 1 mM) e sonicadas 5 x 30 segundos sobre gelo. O homo-geneizado é centrifugado a 5000 x g por 10 minutos, a 4°C. A fração de sobrenadante é decantada e carregada nos tubos Quick-Seal® da Beckman e centrifugada a 150.000 x g por 90 minutos, a 4°C. A fração de sobrenadante é descartada por decantação e as pelotas são suspensas novamente em tampão de ensaio (fosfato de sódio a 10 mM, pH 7,0; glicerol a 10%; glutationa a ,5 mM; Coquetel de Inibidor de Protease Completo (Roche)). A concentração de proteína é determinada usando o reagente Coomassie Plus® da Pierce[0095] Human mPGES-1 (Invitrogen® (Cat. No. 97002RG, clone ID 6374722)) is subcloned into pcDNA3.1 and transiently expressed in 293E cells. Microsomes are prepared from cell pellets based on published methods (Oullet et al., Purification and characterization of recombinant microsomal prosta-glandin E synthase-1, Protein Expression and Purification, 26 pg. 489-495 (2002); and Thoren et al., Human Microsomal Prostanglandin E Synthase-1, J. Biol Chem. 278(25) pp. 22199-22209 (2003)). Briefly, the pellets are produced in homogenization buffer (15 mM Tris-HCl, pH 8.0; 0.25 M sucrose; 0.1 mM EDTA; 1 mM glutathione) and sonicated 5 x 30 seconds over ice. The homogenate is centrifuged at 5000 x g for 10 minutes at 4°C. The supernatant fraction is decanted and loaded into Beckman Quick-Seal® tubes and centrifuged at 150,000 x g for 90 minutes at 4°C. The supernatant fraction is discarded by decanting and the pellets are resuspended in assay buffer (10 mM sodium phosphate, pH 7.0; 10% glycerol; .5 mM glutathione; Complete Protease Inhibitor Cocktail (Roche )). Protein concentration is determined using Pierce's Coomassie Plus® reagent

[0096] Para o ensaio de enzima, os microssomos são diluídos no tampão de ensaio e 14 μL/poço da solução resultante são adicionados a placas de ensaio de 384 poços. As placas de diluição de compostos (No. do Cat. Nunc 249944) são geradas sobre um Tecan_MC384® e 4 μL/poço são adicionados às placas de ensaio. A prostaglandina H2 (PGH2) é diluída no tampão de ensaio imediatamente antes do uso e 14 μL/poço são adicionados às placas de ensaio. As concentrações finais são 6,55 μg/mL de microssomos e PGH2 a 1,67 μM. Após uma incubação de 1,5 minuto, na temperatura ambiente, 5 μL/poço de 1 mg/mL de SnCl2 em HCl a 0,5 N são adicionados para parar a reação. Cinco μL da reação interrompida são transferidos para uma placa de 384 poços contendo 45 μL de ácido fórmico a 0,1%, e as placas são armazenadas a -80°C. As placas são enviadas para a Agilent Technologies, anteriormente Biocius Lifesciences (Wakefield, MA 01880) para a análise por LC/MS padrão para a PGE2. Os dados são usados para calcular a IC50 (μM). Os compostos dos Exemplos inibem a mPGES-1 humana com um valor de IC50 em μM de menos do que 100 nM. O composto exemplificado do Exemplo 1 inibe a mPGES-1 humana com um valor de IC50 em μM de 0,00193, + 0,00064, n = 17. Este resultado demonstra que o composto exemplificado do Exemplo 1 é um potente inibidor da enzima mPGES-1 em uma preparação de enzima isolada.[0096] For the enzyme assay, microsomes are diluted in the assay buffer and 14 µL/well of the resulting solution is added to 384-well assay plates. Compound dilution plates (Nunc Cat. No. 249944) are generated over a Tecan_MC384® and 4 µL/well is added to the assay plates. Prostaglandin H2 (PGH2) is diluted in the assay buffer just before use and 14 µL/well is added to the assay plates. Final concentrations are 6.55 μg/mL of microsomes and 1.67 μM PGH2. After a 1.5 minute incubation at room temperature, 5 µL/well of 1 mg/mL SnCl2 in 0.5 N HCl is added to stop the reaction. Five µL of the stopped reaction is transferred to a 384-well plate containing 45 µL of 0.1% formic acid, and the plates are stored at -80°C. Plates are sent to Agilent Technologies, formerly Biocius Lifesciences (Wakefield, MA 01880) for standard LC/MS analysis for PGE2. The data is used to calculate the IC50 (μM). The compounds of the Examples inhibit human mPGES-1 with an IC50 value in µM of less than 100 nM. The exemplified compound of Example 1 inhibits human mPGES-1 with an IC50 value in µM of 0.00193, + 0.00064, n = 17. This result demonstrates that the exemplified compound of Example 1 is a potent inhibitor of the mPGES enzyme -1 in an isolated enzyme preparation.

Cell-Based Assay for the Measurement of Eicosanoid Selectivity

[0097] A linhagem celular de carcinoma de pulmão epitelial huma na A549 é obtida da ATCC (CCL-185) e mantida em meio de cultura de células F12 de Kaighn + soro bovino fetal (FBS) a 10% (meio de preparação em placas), sob atmosfera umidificada de CO2 a 5% padrão, a 37°C. As células são passadas a 1:3 duas vezes por semana.[0097] The A549 human epithelial lung carcinoma cell line is obtained from the ATCC (CCL-185) and maintained in Kaighn's F12 cell culture medium + 10% fetal bovine serum (FBS) (plate preparation medium ), under a humidified atmosphere of standard 5% CO2 at 37°C. Cells are passaged at 1:3 twice a week.

[0098] Para os ensaios, as células são liberadas de frascos por lavagem uma vez com PBS, depois uma vez com Tripsina/EDTA. Após 3-5 minutos a 37°C, as células são suspensas em meio de preparação em placas e centrifugadas a 2.000 rpm, 25°C, por 5 minutos. O sobrenadante é aspirado e a pelota celular é suspensa novamente em meio de preparação em placas F12K. O número de células é determinado por contagem de uma alíquota de células que tenha sido diluída em PBS e azul de Tripano sobre um hemocitômetro. As células são preparadas a 40.000/poço em placas Falcon de 96 poços, 24 horas antes do tratamento. Os compostos são diluídos em DMSO até 100 x da concentração final em tubos Screen Mates. O meio é removido das células e meio novo (90 μL/poço) é adicionado às células. Os compostos são adicionados a 1 μL / poço, n = 2, para dar sete concentrações cada. As células são pré-tratadas com os compostos por 30 minutos, a 37°C, CO2 a 5%. A produção de prostaglandina E2 é induzida pela adição de interleucina humana recombinante (rhIL-1β) diluída em meio de preparação em placas até 10 x final. Uma alíquota de 10 μL/poço é adicionada para dar uma concentração de rhIL-1β final de 0,1 ng/mL. O período de tratamento é aproximadamente 18 horas. O meio condicionado é removido para placas de polipropileno de fundo em v. O meio condicionado é testado quanto aos níveis de PGE2 e prostaglandina I2 (PGI2) por imunoensaios de enzimas específicos EIAs, de acordo com os protocolos do fabricante (Cayman). Resumidamente, o meio condicionado (1 μL) é adicionado a cada poço de uma placa de 96 poços revestida com um anticorpo de captura e contendo o tampão de EIA (49 μL) fornecido pelo fabricante. O traçador é diluído com o tampão de EIA (50 μL). O anticorpo de detecção é diluído com o tampão de EIA (50 μL). A placa é coberta com um filme de vedação adesivo e é incubada por 1 hora na temperatura ambiente em um agitador orbital a 100 rpm. O tampão de lavagem é diluído em água purificada da MILLIPORE, e a placa é lavada 5 x 350 μL/poço, usando um lavador de placas. O substrato (reagente de Ellman) é diluído com água purificada da MILLIPORE e, em seguida, adicionado à placa a 200 μL/poço. Após aproximadamente 90-120 minutos na temperatura ambiente, sobre um agitador orbital a 100 rpm, as placas são lidas a A412 sobre uma leitora de placas. Uma curva padrão de PGE2 é usada para calibrar as desconhecidas. O composto exemplificado do Exemplo 1 inibe a formação de PGE2 com uma IC50 de 0,00471 μM + 0,00301, n = 2.[0098] For assays, cells are released from flasks by washing once with PBS, then once with Trypsin/EDTA. After 3-5 minutes at 37°C, the cells are suspended in plated preparation medium and centrifuged at 2000 rpm, 25°C, for 5 minutes. The supernatant is aspirated and the cell pellet is resuspended in F12K plate preparation medium. Cell number is determined by counting an aliquot of cells that has been diluted in PBS and Trypan blue on a hemocytometer. Cells are primed at 40,000/well in Falcon 96-well plates 24 hours prior to treatment. Compounds are diluted in DMSO to 100x the final concentration in Screen Mates tubes. The medium is removed from the cells and fresh medium (90 µL/well) is added to the cells. Compounds are added at 1 µL/well, n = 2, to give seven concentrations each. Cells are pretreated with compounds for 30 minutes at 37°C, 5% CO 2 . Prostaglandin E2 production is induced by the addition of recombinant human interleukin (rhIL-1β) diluted in plate preparation medium up to 10x final. An aliquot of 10 µL/well is added to give a final rhIL-1β concentration of 0.1 ng/mL. The treatment period is approximately 18 hours. The conditioned medium is removed into v-bottomed polypropylene plates. The conditioned medium is tested for PGE2 and prostaglandin I2 (PGI2) levels by specific enzyme immunoassays EIAs according to the manufacturer's protocols (Cayman). Briefly, conditioned medium (1 µL) is added to each well of a 96-well plate coated with a capture antibody and containing the EIA buffer (49 µL) provided by the manufacturer. The tracer is diluted with the EIA buffer (50 µL). Detection antibody is diluted with EIA buffer (50 µL). The plate is covered with an adhesive sealing film and incubated for 1 hour at room temperature on an orbital shaker at 100 rpm. The wash buffer is diluted in MILLIPORE purified water, and the plate is washed 5 x 350 µL/well using a plate washer. The substrate (Ellman's reagent) is diluted with MILLIPORE purified water and then added to the plate at 200 µL/well. After approximately 90-120 minutes at room temperature, on an orbital shaker at 100 rpm, the plates are read at A412 on a plate reader. A PGE2 standard curve is used to calibrate the unknowns. The exemplified compound of Example 1 inhibits PGE2 formation with an IC50 of 0.00471 µM + 0.00301, n = 2.

Human Whole Blood Assay

[0099] O sangue é coletado de doadores voluntários normais em tubos VACUTAINER de heparina de sódio. Os doadores são selecio-nados, em parte, conforme sua confirmação que eles não tomaram NSAIDs, aspirina, Celebrex®, ou glicocorticoides dentro das duas se-manas da doação. Todos os tubos/doador são reunidos em tubos de centrífuga cônicos da Corning de 250 mL e 436,5 μL/poço são distribu-ídos para placas de polipropileno de poços profundos. Os compostos são diluídos em DMSO até 100 x final e 4,5 μL/poço em duplicata ou triplicata são adicionados para dar 7 curvas de ponto. O sangue é pré- tratado com os compostos a 37°C, CO2 a 5%, em uma atmosfera umi- dificada, coberto com uma tampa MicroClime Environmental Micropla- te, por 30 minutos, após o que 9 μL/poço de uma solução de 5 mg/mL de LPS (Sigma, serótipo 0111:B4) em 1 mg/mL de BSA/PBS são adi-cionados para dar uma concentração de LPS final de 100 μL/mL. As placas são incubadas por 20-24 horas, a 37°C, CO2 a 5%, em uma atmosfera umidificada. As placas são hermeticamente fechadas com as tampas de folha de alumínio e são resfriadas sobre gelo por apro-ximadamente 1 hora. Então as placas são centrifugadas a 1800 x g, 10 minutos, 4°C, em uma centrífuga Eppendorf 5810R. O plasma é removido da camada de células usando o Rainin L200 com pontas filtradas estéreis e transferido para placas de polipropileno de fundo em v. Cem microlitros são quantitativamente transferidos para blocos de tubos de aglomerados Costar e 400 μL/poço do reagente de interrupção de MeOH e padrões internos, d4-PGE2, d4-PGF2α, e d4-TXA2β, são adicionados. As amostras são redemoinhadas por 5 minutos e são colocadas a -20°C por pelo menos uma hora. As amostras são centrifugadas por 10 minutos a 4000 rpm em uma Eppendorf 5810R.[0099] Blood is collected from normal volunteer donors in sodium heparin VACUTAINER tubes. Donors are selected, in part, upon their confirmation that they have not taken NSAIDs, aspirin, Celebrex®, or glucocorticoids within two weeks of donating. All tubes/donor are pooled into Corning 250 mL conical centrifuge tubes and 436.5 µL/well are dispensed into polypropylene deep-well plates. Compounds are diluted in DMSO to 100x final and 4.5 µl/well in duplicate or triplicate are added to give 7 point curves. Blood is pretreated with the compounds at 37°C, 5% CO2, in a humidified atmosphere, covered with a MicroClime Environmental Microplate lid, for 30 minutes, after which 9 μL/well of a solution 5 mg/ml LPS (Sigma, serotype 0111:B4) in 1 mg/ml BSA/PBS are added to give a final LPS concentration of 100 µL/ml. Plates are incubated for 20-24 hours at 37°C, 5% CO 2 , in a humidified atmosphere. Plates are tightly closed with aluminum foil lids and chilled on ice for approximately 1 hour. Then the plates are centrifuged at 1800 x g, 10 minutes, 4°C in an Eppendorf 5810R centrifuge. Plasma is removed from the cell layer using the Rainin L200 with sterile filtered tips and transferred to v-bottomed polypropylene plates. One hundred microliters are quantitatively transferred into blocks of Costar cluster tubes and 400 µL/well of the MeOH Stop Reagent and internal standards, d4-PGE2, d4-PGF2α, and d4-TXA2β, are added. Samples are vortexed for 5 minutes and placed at -20°C for at least one hour. Samples are centrifuged for 10 minutes at 4000 rpm in an Eppendorf 5810R.

[00100] A extração da fase sólida é realizada usando placas de 96 poços da Waters em 30 mg/leito de HLB sobre um distribuidor à vácuo: Etapa 1, a matriz é lavada com MeOH (1 mL), seguido por ácido fórmico a 0,1% em água (1 mL); Etapa 2, 400 μL de amostra são aplicados juntamente com o ácido fórmico a 0,1% em água (900 μL) e deixados ligar por 5 minutos; Etapa 3, a matriz é lavada com ácido fórmico a 0,1% em água (600 μL), seguido por água/MeOH a 80/20 (600 μL); Etapa 4, os produtos são eluídos com volumes de 2-500 μL de EtOAc; Etapa 5, as amostras são secadas sob nitrogênio e reconstituídas em água/acetonitrila a 75/25 com ácido fórmico a 0,1% (50 μL). Os produtos são analisados por LC/MS/MS. O Exemplo 1 inibe a formação de PGE2 neste ensaio, com uma IC50 de 0,00205 ± 0,00082, n = 11. Este resultado sustenta que o Exemplo 1 inibe a síntese de PGE2 no sangue integral humano.[00100] Solid phase extraction is performed using Waters 96-well plates in 30 mg/bed of HLB on a vacuum manifold: Step 1, the matrix is washed with MeOH (1 mL), followed by formic acid at 0 .1% in water (1 mL); Step 2, 400 μL of sample is applied along with 0.1% formic acid in water (900 μL) and allowed to bind for 5 minutes; Step 3, the matrix is washed with 0.1% formic acid in water (600 µL), followed by 80/20 water/MeOH (600 µL); Step 4, products are eluted with 2-500 µL volumes of EtOAc; Step 5, samples are dried under nitrogen and reconstituted in 75/25 water/acetonitrile with 0.1% formic acid (50 µL). Products are analyzed by LC/MS/MS. Example 1 inhibits PGE2 formation in this assay, with an IC50 of 0.00205 ± 0.00082, n = 11. This result supports that Example 1 inhibits PGE2 synthesis in human whole blood.

Claims

1. Compound, characterized by the fact that it features Formula 1:

in which: R1 is H or -CH3; R is selected from:

G is selected from:

or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

2. Compound, according to claim 1, characterized by the fact that it has Formula 2:

in which: R1 is H or -CH3; R is selected from:

G is selected from:

or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

3. Compound, according to claim 1 or 2, characterized by the fact that R is selected from:

or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

4. Compound, according to any one of claims 1 to 3, characterized in that G is:

or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

5. Compound, characterized by the fact that it is:

or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

6. Compound according to any one of claims 1 to 5, characterized in that the pharmaceutically acceptable salt is a hydrochloride salt.

7. Pharmaceutically acceptable composition, characterized in that it comprises a compound, as defined in any one of claims 1 to 6, and at least one of a pharmaceutically acceptable vehicle, diluent, or excipient.

8. Compound according to any one of claims 1 to 6, characterized in that it is for use in therapy.

9. Compound according to any one of claims 1 to 6, characterized in that it is for use in the treatment of arthritis or osteoarthritis.

10. Compound according to any one of claims 1 to 6, characterized in that it is for use in the treatment of pain or inflammation associated with arthritis or osteoarthritis.

11. Use of a compound as defined in any one of claims 1 to 6, characterized in that it is for the manufacture of a drug for the treatment of arthritis or osteoarthritis.